Orientador: Marta Helena Krieger / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T14:03:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_Leandrodos_M.pdf: 960822 bytes, checksum: 9255ee8c26bde6d271eafcb384a31cef (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Objetivos: Várias vias inflamatórias têm participação no processo aterosclerótico. Diferentes marcadores do processo inflamatório e da disfunção endotelial têm sido utilizados para predizer o risco de futuro desenvolvimento ou complicação das doenças cardiovasculares. Atualmente, marcadores como o CD40L tem se mostrado importante no prognóstico de risco clínico. Os efeitos antiinflamatórios do nitrosotiol, doador de ¿NO, S-nitroso-N-acetilcisteína (SNAC) foram verificados em camundongos LDLr-/-, com objetivo de testá-lo na prevenção precoce do desenvolvimento da placa aterosclerótica, bem como nas mudanças de pressão arterial e de expressão das ¿NO sintases. Métodos e Resultados: Camundongos LDLr-/- alimentados com dieta enriquecida com 0,5% de ácido cólico e 1,25% de colesterol apresentaram aumento na expressão aórtica de CD40L, tanto nas fases iniciais (HC15d) quanto nas fases mais avançadas da aterosclerose (HC60d) e em uma relação inversa com a expressão de a-actina. Camundongos LDLr-/- alimentados com dieta comercial (CT) apresentaram aumento na expressão de eNOS e nNOS em relação aos camundongos selvagens (C57BL6). Foi também verificado aumento na expressão das 3 isoformas de NOS nos camundongos alimentados com dieta hipercolesterolêmica em relação ao CT. Pressão arterial aumentada foi determinada em camundongos LDLr-/- em relação aos selvagens. A administração de SNAC (0,51 mmol/Kg/dia i.p. por 15 dias) promoveu uma redução de 49% na área de lesão aterosclerótica, associada a uma diminuição na expressão aórtica das NOS e de CD40L, mas sem alteração no aumento pressórico. Conclusão: Concluímos que a deleção gênica do receptor de LDL nos camundongos produziu alteração nos marcadores propostos para inflamação e disfunção endotelial, mostrando-se responsável pela hipertensão, sendo que ambas foram caracterizadas neste modelo animal. O tratamento com SNAC mostrou-se eficaz na prevenção do estabelecimento do ateroma, por meio de processo antiinflamatório. Entretanto, a administração de SNAC não foi capaz de promover alterações no aumento pressórico verificado nos camundongos LDLr-/- / Abstract: Background: Several inflammatory pathways have been shown to participate in the atherosclerotic process. Different markers for inflammation and endothelial dysfunction have been found to predict the future risk for developing cardiovascular disease. Newer markers such as CD40 ligand appear to provide important information regarding clinical risk. In hypercholesterolemic LDLr-/- mice, we addressed anti-inflammatory effects of the nitrosothiol ¿NO donor S-nitroso-N-acetylcysteine (SNAC) in the early prevention of plaque development as well as changes in blood pressure and ¿NO synthase expression. Methods and Results: LDLr-/- mice fed with 0.5 % colic acid and 1.25 % cholesterol-enriched diet showed increased aortic expression of CD40L that was related to initial (HC 15d) and advanced (HC 60d) phases and inversely related with a-actin expression. Expression of eNOS and nNOS was higher in the LDLr-/- than Wild Type (C57BL6) mice, as well as, there was a larger expression of three isoforms of NOS in LDLr-/- mice fed with HC diet. Increase in the blood pressure was present in LDLr-/- in relation to Wild Type mice. SNAC administration (0.51 mmol/Kg/day i.p. for 15 days) promoted 49% of reduction in atherosclerotic lesion area associated with the prevention of this increased NOS and CD40L expression but without alterations in the increased blood pressure. Conclusion: We concluded that the genetic deletion of LDL receptor in mice produced alterations on the markers proposed to the inflammation and endothelial dysfunction, and showed to be responsible for hypertension, both characterized in this animal model. The SNAC treatment showed efficacy in the prevention of atheroma establishment by anti-inflammatory process. Nevertheless, the SNAC treatment was not capable to promote alterations in the increased blood pressure, which was verified in these ko mice / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Marta Helena Krieger / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-07T20:20:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Wanschel_AmarylisClaudineBonitoAzeredo_M.pdf: 1512032 bytes, checksum: 92d5d4fda32e196e08b7ee261c365152 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A incidência de riscos de doença aterosclerótica cardiovascular é maior em homens do que em mulheres na fase reprodutiva, essa diferença diminui quando diminui a produção de estrógenos após a menopausa. Uma série de estudos sugere que essa diferença em ambos os sexos pode ser causada em parte, pela ação pró-aterogênica dos andrógenos. O objetivo deste estudo foi verificar a participação do dimorfismo sexual em camundongos adultos LDLr-/- no efeito vasculoprotetor promovido pelo tratamento com a S-nitrosotiol-N-acetilcisteína (SNAC) na fase inicial da aterogênese por meio dos seguintes avaliações : a) expressão fenotípica da hipertensão; b) desenvolvimento de ateroma; c) perfil lipídico; d) imunorreatividade das isoformas das NOS vasculares. Camundongos machos e fêmeas com 3 meses de idade foram avaliados nos seguintes grupos experimentais: selvagens C57BL/6 (WT) sob dieta comercial; LDLr-/- sob dieta comercial com os controles (CT);LDLr-/-sob dieta hipercolesterolêmica (HC); LDLr-/- sob diet hiperlipidêmica associado ao tratamento com SNAC 0,51µm ip/dia ( HC+SNAC). Após 2 semanas de tratamento com administração de dieta hipercolesterolêmica, verificou-se que as fêmeas desenvolveram lesões ateroscleróticas na aorta proximal ascendente 50% menores em relação aos machos. Tais evidências sugerem o papel protetor do estrógeno presente nas fêmeas adultas no estágio inicial da aterosclerose. O tratamento com SNAC promoveu a redução em 50% na instalação do ateroma em ambos sexos, evidenciando não haver relação com o dimorfismo sexual. Contudo, o perfil lipídico das fêmeas mostrou valores mais elevados que os encontrados em machos, tanto de colesterol (COL), como de triglicérides (TG) plasmáticos nos camundongos sob dieta hipercolesterolêmica. Assim, o tratamento com SNAC não impediu o aumento dos teores lipidêmicos induzidos pela dieta hipercolesterolêmica em fêmeas, inferindo que a condição não está correlacionada ao tamanho da área de lesão desenvolvida. Camundongos fêmeas LDLr-/- sob dieta aterogênica evidenciaram aumento de cerca de 10% na pressão arterial, quando comparados aos respectivos camundongos selvagens (WT). O tratamento com SNAC preveniu totalmente a hipertensão induzida pela dieta hipercolesterolêmica. Contudo, nos machos tal hipertensão foi verificada ocorrer em camundongos LDLr-/- sem dieta hipercolesterolêmica, e o tratamento com SNAC não produziu efeito preventivo na hipertensão. Tais resultados indicam que a gênese da hipertensão é diferente nos dois sexos, sugerindo a participação das vias androgênicas. As fêmeas não apresentaram hipertrofia ventricular esquerda ou redução na frequência cardíaca associada à hipertensão, a qual foi evidenciada nos machos sob as mesmas condições. Assim o conjunto de alterações hemodinâmicas indica que as fêmeas sofreram um menor impacto do que camundongos machos nas alterações cardiovasculares estudadas. A expressão de NOS foi evidenciada na aorta das fêmeas LDLr-/- sob dieta comercial (CT), contudo ausente nas WT e, sob dieta hipercolesterolêmica (HC) a sua imunorreatividade foi menor que no animal controle porém expressiva e difusa , as expressões tanto no controle como no animal HC foram reduzidas pelo tratamento com a SNAC. Estas alterações indicaram a sua participação na disfunção endotelial presente neste modelo e o fato de que o efeito protetor promovido pela SNAC está associado às vias NO/NOS / Abstract: The incidence of risk of coronary artery disease (CAD) is greater in men than in woman during the reproducible years, and this gender difference diminishes after cessation of estrogen production after menopause (Kannel et al, 1976). Many studies have ben suggested also that this gender difference may be caused in part by proaterogenic actions of androgens. The aim this study was verify the role of the sexual dimorphism in LDLr-/- mice in the vasculoprotector effect treatment promoted by S-nitroso-N-acetilcisteína (SNAC) in the initial phase of atherogenesis valuation following:1- phenotypic expression of the hypertension; 2- lesion area development; 3- plasma lipid levels; 4- localization of NOS using immunohistochemistry; Male and female mice 3 months old were evaluated in experimental groups following: C57Bl/6 wild type (WT) chow diet; LDLr-/- control group (CT) chow diet; LDLr-/- hypercholesterolemic diet(HC); LDLr-/- hypercholesterolemic diet plus SNAC 0.51 µmol/Kg ip/daily (SNAC). After treatment for 2 weeks the female developed a 50% decrease lesion area in the proximal aortic as compared to males. This evidence indicated the protector role of the estrogen in female in the initial stage of atherosclerosis. The treatment with SNAC promoted a 50% reduction in installation of atherosclerosis in both sexes with no sexual dimorphism. In female the lesion area was not correlated with the average plasma cholesterol levels. Female mice LDLr-/- under a hypercholesterolemic diet showed an increase of 10% in blood pressure compared whith the background (WT). The treatment with SNAC prevented the hypertension induced by the hypercholesterolemic diet. Nevertheless male hypertension is associated with mice LDLr-/- and chow diet treatment does not prevent hypertension. These results showed that hypertension genesis is different in both sexes suggesting the participation of androgenic pathways. The males showed left ventricular hypertrophy and decreased heart rate associated with hypertension, but the female in the same conditions did not show. Thus is hemodynamic alteration set indicate that female have a less impact than male mice in the studied cardiovascular alterations. The expression of the three types of NOS was evident in aorta of the female LDLr-/- chow diet, although absent in WT. In female LDLr-/- hypercholesterolemic diet there was enhanced immunoreactivity. This overexpression was decreased by treatment with the SNAC. These alterations participated in endothelial dysfunction present in this model and the protector effect promoved by SNAC is associated with the NO/NOS pathways / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular