L’asthme est une maladie inflammatoire chronique des voies aériennes dont un pourcentage important s’explique par des facteurs génétiques. Les études en transcriptomique de l’asthme ont permis à ce jour d’identifier plusieurs gènes de susceptibilité. Notre revue de littérature a exposé la disparité de telles études. Néanmoins, ces études ont identifié des cibles thérapeutiques intéressantes qui permettront prochainement de mieux classifier et traiter les patients asthmatiques. Notre deuxième étude visait à identifier les loci associés à l’asthme à l’aide d’un criblage génomique par association en utilisant des pools d’ADN chez des femmes adultes canadiennes-françaises. Des criblages semblables ont déjà été effectués par le passé et nos résultats confirment l’implication des gènes PTGDR et C3AR1 dans l’asthme. En étudiant un sous-groupe plus homogène de patients asthmatiques, de nouvelles variations génétiques ont été associées à l’asthme. Des analyses in silico et fonctionnelles, sur l’expression des gènes dans les poumons, ont complémenté l’étude. / Asthma is a chronic inflammatory disease of the airways which is largely explained by genetic factors. So far, transcriptomic studies of asthma have identified several susceptibility genes. Our review of the literature in this field has highlighted the disparity of such studies. However, those studies identified new therapeutic targets and biomarkers that are likely to improve asthma classification and treatments in a near future. Our second study aimed to identify loci associated with asthma using a pooling-based genome-wide association study in French Canadian adult women. Similar screens have been conducted in the past and our results confirmed the implication of C3AR1 and PTGDR in asthma. Using a more homogeneous subgroup of asthma patients, the study also revealed new genetic variants associated with asthma susceptibility. New findings were extended to gene expression in the lung and in silico analyzes.

Reproduction de : Thèse d'exercice : Médecine : Nancy 1 : 2005. / Titre provenant de l'écran-titre.

Reproduction de : Thèse d'exercice : Médecine : Nancy 1 : 2005. / Titre provenant de l'écran-titre.

Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2004. / Bibliogr.: f. 66-78. Publié aussi en version électronique.

Ce mémoire décrit la première phase d’un projet de transfert de connaissances visant à développer des outils d’aide à la décision afin de favoriser la prise de décision de patients asthmatiques. Elle porte sur la mesure du conflit décisionnel lié aux décisions sur les recommandations visant à maîtriser l’asthme. Les 50 patients recrutés ont rempli une échelle de conflit décisionnel (de 0% à 100%), un questionnaire de connaissances et une grille d’évaluation de la maîtrise de l’asthme. Le score médian de conflit décisionnel était de 33% (24, 44 ) et 36 % des patients présentaient un score cliniquement significatif (> 37,5%). Le manque de connaissances était significativement associé à un score de conflit décisionnel élevé. La création d’outils d’aide à la décision semble une avenue intéressante pour améliorer le niveau de connaissances sur l’asthme et réduire le conflit décisionnel des patients asthmatiques. / This thesis describes the first step of a knowledge transfer project aiming to develop decision aids used for shared decision making among asthma patients. It assesses the decisional conflict score related to decisions on recommendations for the management of asthma symptoms. The 50 patients that were recruited patients completed a decisional conflict scale (potential range from 0% to 100%), an asthma knowledge questionnaire and an assessment of asthma control. The median score of decisional conflict was 33 % (24, 44 ) and 36 % of patients had a clinically-significant score (> 37.5%). Lack of knowledge was significantly associated with greater decisional conflict score. The development of decision-making aids may be a promising avenue to improve the level of asthma knowledge and to minimize decisional conflict about optimization of symptom management in asthma patients.

L’adhésion à la médication préventive est sous-optimale pour plusieurs enfants asthmatiques bien que cette médication soit associée dans certaines études au contrôle de la maladie et de ses symptômes à long terme. Les objectifs de cette étude sont : 1) d’évaluer l’ampleur de la non-adhésion au traitement préventif de l’asthme chez des enfants asthmatiques de la région Casablanca-Settat (Maroc) et 2) d’identifier les facteurs associés. Cette étude a été menée auprès d’adultes impliqués dans les soins de santé d’un enfant asthmatique membre de leur famille et âgé de 2 à 12 ans. L’adhésion de l’enfant a été rapportée par le membre de la famille à l’aide du Medication Adherence Scale Rating for Asthma (MARS-A). Le score du MARS-A a été dichotomisé afin d’identifier les enfants ayant une faible adhésion (< 45/50). Les facteurs potentiellement associés à une faible adhésion (caractéristiques individuelles, croyances et comportements, scolarité et connaissances sur l’asthme et son traitement, caractéristiques du traitement et des services de santé, environnement économique et social) ont également été mesurés par questionnaire et leur association avec l’adhésion a été évaluée à l’aide de régressions log-binomiales univariées et multivariées. Au total, 103 membres de la famille ont répondu au questionnaire concernant l’enfant auquel ils prodiguaient des soins. Parmi ces enfants, 49 (48%) avaient une faible adhésion (< 45). Parmi les nombreuses variables incluses dans cette étude, seules de faibles connaissances sur l’asthme (RP=2,93; IC 95%: 1,14-7,52) étaient associées à la non-adhésion. En conclusion, le niveau de connaissances des membres de la famille d’enfants asthmatiques semble être un facteur important pour l’adhésion au traitement préventif dans cette population. Ces résultats pourront être utilisés afin d’orienter le développement d’interventions visant à favoriser l’adhésion. / Adherence to controller treatment is suboptimal for a high proportion of asthmatic children despite the fact that adherence to this treatment contributes to effective long-term control of the disease and its symptoms in some studies. This study aimed to assess the extent of nonadherence to the controller treatment of asthma among asthmatic children of the Casablanca-Settat region (Morocco) and to identify associated factors. This study was conducted among caregivers who were family members of asthmatic children aged 2 to 12 years old. We assessed self-reported adherence using the Medication Adherence Scale Rating for Asthma (MARS-A). Low adherence was defined as having a MARS-A score < 45/50. Factors potentially associated with low adherence were also measured by questionnaire (personal characteristics, beliefs and behaviors, schooling and knowledge about asthma and its treatment, characteristics of the treatment and of healthcare services, economic and social environment) and were identified using univariate and multivariate log-binomial regressions. In total, 103 caregivers answered the questionnaire about the child they were caring for. Among these children, 49 (48 %) reported a low adherence level to the controller treatment (< 45). Among all the variables included in the multivariate analysis, only a low level of knowledge about asthma (PR=2.93; 95 % CI: 1.14-7.52) was associated with nonadherence. In conclusion, the level of knowledge of the caregivers appears to be an important factor of adherence to the controller treatment in this population. These results could be used to guide the design of interventions aiming to encourage adherence.

L'altération des fonctions des cellules épithéliales dans l'asthme a été démontrée par plusieurs études. Afin de mieux comprendre l'implication des cellules épithéliales dans la cascade asthmatique, des cellules épithéliales bronchiques ont été isolées de rats Brown Norway (un modèle murin d'asthme) naïfs (NBE), sensibilisés (SBE) et sensibilisés/challenges avec l'allergène (ABE). Différentes fonctions des cellules épithéliales ont ensuite été analysées pour les différentes lignées. L'expression des protéines des jonctions cellulaires a été mesurée par immunobuvardage, la sécrétion de cytokines par ELISA et l'expression d'une molécule de surface immunomodulatrice, CD200, par cytométrie en flux. Les cellules épithéliales NBE, SBE et ABE présentent des phénotypes distincts et ces phénotypes sont maintenus en culture sur une longue période. De plus, les ABE ont un phénotype semblable à ce qui a été observé chez les sujets asthmatiques. Il semble donc que ce modèle d'étude soit un bon outil afin de mieux comprendre le rôle des cellules épithéliales dans l'asthme.

L'asthme est une maladie inflammatoire des voies respiratoires caractérisée par une contraction réversible des voies aériennes, une hyperactivité bronchique, ainsi qu'une inflammation. L'asthme allergique est le phénotype le plus répandu et se distingue par une réponse de type Th2. Plusieurs cellules immunitaires, dont les cellules dendritiques et les lymphocytes B, jouent un rôle important dans la réponse inflammatoire. De plus, la pathogenèse de l'asthme comprend aussi une dérégulation des voies anti-inflammatoires, telles que la voie du CD200/CD200R. Le but de ce mémoire était de vérifier si l'apport exogène de CD200Fc, un agoniste du CD200R, pouvait altérer la progression de l'asthme chronique. En utilisant un modèle murin d'asthme expérimental, nous avons démontré que l'exposition chronique à du HDM (House Dust mite) a altéré l'expression du CD200 et du CD200R sur les populations de cellules immunitaires pulmonaires. Le CD200Fc n'a pas modifié la réponse Th2, mais il a diminué l'activation des lymphocytes B et des cellules dendritiques conventionnelles (cDC). Nous avons confirmé que le CD200Fc peut moduler l'activation des cDC in vitro en utilisant des cellules dendritiques dérivées de la moelle osseuse. Ces résultats ont permis d'évaluer les effets bénéfiques de l'administration de CD200Fc et suggèrent son utilité comme complément thérapeutique potentielle chez les asthmatiques. / Asthma is an inflammatory disease of the airways characterized by reversible contraction of the airways, airway hyperreactivity, and inflammation. Allergic asthma is the most common phenotype and is characterized by a Th2 response. Several immune cells, including dendritic cells and B cells, play an important role in the inflammatory response. In addition, the pathogenesis of asthma also includes dysregulation of anti-inflammatory pathways, such as the CD200/CD200R pathway. The aim of this master's thesis was to verify whether a CD200R agonist, CD200Fc, could alter the progression of chronic asthma. Using an experimental model of asthma, we demonstrated that chronic exposure to HDM (House Dust mite) altered the expression of CD200 and CD200R on lung immune cell populations. CD200Fc did not modify the Th2 response, but it decreased the activation of B cells and conventional dendritic cells (cDC). We confirmed that CD200Fc can modulate cDC activation in vitro using bone marrow derived dendritic cells. These results demonstrate the beneficial impact of CD200Fc and suggest its potential add-on therapeutic effect in the context of asthma.

Les cysteinyl-leucotriènes (cysLTs) ont des rôles majeurs dans la pathophysiologie de l'asthme et sont impliqués dans le remodelage des voies respiratoires, un processus caractérisé par plusieurs changements structuraux incluant entre autre [i.e. autres] la fibrogenèse et l'hyperplasie des cellules musculaires lisses. Dans cette étude, nous avons investigué le rôle potentiel des cysLTs dans la modulation du « vascular endothelial growth factor » (VEGF), un facteur de croissance connu pour être important dans une autre facette du remodelage, c'est-à-dire l'angiogenèse. Nous avons montré que le LTD[indice inférieur 4] induit l'expression du VEGF chez les monocytes humains et les cellules musculaires lisses bronchiques humaines avec une inhibition complète par un antagoniste spécifique du récepteur CysLT1. De plus, des cellules de reins embryonnaires humaines (HEK-293) transfectées d'une façon stable avec CysLT1 ont été utilisées pour étudier la régulation transcriptionnelle du promoteur du VEGF. La stimulation de ces cellules avec des cysLTs mène à l'activation du promoteur du VEGF d'une façon dépendante de la concentration et résistante à la Bordetella pertussis toxin (PTX). Aussi, il en résulte une augmentation de l'expression de l'ARNm et de la protéine du VEGF d'une façon dépendante du temps de stimulation. L'utilisation de mutants tronqués en 5' de la construction du promoteur du VEGF de type sauvage démontre que la région en amont de -90 Pb n'est pas requise pour sa régulation transcriptionnelle par les cysLTs. De plus, un prétraitement avec des inhibiteurs pharmacologiques des MAPKs suggère l'implication de JNK et ERK, mais pas de p38 dans l'activation du promoteur du VEGF par LTD[indice inférieur 4]. Également, l'inhibition partielle de l'activation du promoteur du VEGF via la surexpression des formes dominantes négatives des protéines JunD, FosB et Ras suggère un rôle actif pour le complexe AP-1. Cependant, puisqu'un mutant du promoteur avec des substitutions dans le site de liaison d'AP-1 maintient toujours sa transactivation par LTD[indice inférieur 4], le complexe AP-1 semble agir d'une façon indirecte. En fait, l'inhibition complète de l'activation du promoteur du VEGF et de l'augmentation subséquente de son ARNm par un prétraitement avec la mithramycine, un inhibiteur de la transcription Sp1-dépendante, suggère que AP-1 pourrait agir indirectement sur Sp1 pour la modulation du VEGF par les cysLTs. Par surcroît, des expériences utilisant un promoteur du VEGF (-123 +50 pb) avec tous ses sites Sp1 mutés (4) ont montré que ces régions étaient nécessaires à la transactivation du VEGF par LTD[indice inférieur 4]. Bref, nos résultats indiquent pour la première fois que les cysLTs peuvent activer transcriptionnellement la production du VEGF via le récepteur CysLT1, avec l'implication de JNK, ERK, AP-1 et Sp1. Ces résultats proposent que les cysLTs pourraient être importants dans le processus d'angiogenèse associé au remodelage des voies respiratoires et indiquent un possible bénéfice jusqu'à maintenant insoupçonné dans l'utilisation des antagonistes des récepteurs CysLT1 dans la prévention ou le traitement du remodelage dans l'asthme.

Les granulocytes, neutrophiles et éosinophiles, sont des cellules effectrices de l'immunité innée. La régulation de la vie des granulocytes par le mécanisme de mort programmée cellulaire quest lapoptose procure un équilibre judicieux entre leur fonction de cellules effectrices dans la défense de lorganisme et le renouvellement sécurisé de ces cellules potentiellement dangereuses. Lapoptose spontanée constitue un processus nécessaire pour le maintien de lhoméostasie des cellules immunes, telles que les granulocytes. Mon travail de doctorat a permis didentifier de nouveaux mécanismes régulateurs de l'apoptose des granulocytes. La première étude démontre le rôle important des céramides de type C16 et C24 en tant que messagers secondaires dans la transmission du signal de mort dans les neutrophiles vieillissants. En effet, nous montrons que ces céramides, générées par la voie de synthèse de novo, s'accumulent spontanément dans les neutrophiles et précèdent l'apparition des signes de l'apoptose précoce ainsi que l'activation des caspases-8, -9 et -3. L'inhibition ou l'accélération pharmacologiques de cette accumulation ralenti ou accélère l'apoptose des neutrophiles, respectivement. Laccumulation des céramides C16 et C24 est également inhibée par le traitement des neutrophiles avec du GM-CSF, une cytokine proinflammatoire et anti-apoptotique. Par contre, nos résultats montrent que la mort induite par l'activation du récepteur Fas ne dépend pas de la synthèse de céramides par la voie de novo. Au cours de la seconde étude, nous avons identifié un mécanisme spécifique dans la régulation de l'apoptose des éosinophiles. Nous montrons que les éosinophiles expriment spontanément CD40 à leur surface et que lengagement de CD40 s'oppose à la mort des éosinophiles via l'induction de la protéine inhibitrice de l'apoptose cytoplasmique-2 (c-IAP2). En outre, nous apportons les évidences de l'existence d'un mécanisme similaire in vivo, en particulier dans l'inflammation allergique des voies respiratoires.