Orientador: Andre Rodrigues / Resumo: Estima-se que há cerca de 2,2 a 3,8 milhões de espécies de fungos no planeta, entretanto, apenas 130.000 foram descritas, dentre essas, estão as espécies do gênero Trichoderma. Tais fungos são cosmopolitas, também encontrados nas côlonias de formigas atíneas. Esses insetos forrageiam diferentes substratos para cultivar um fungo, o qual é utilizado como alimento pelas formigas. Pelo fato de Trichoderma estar associado aos substratos coletados pelas atíneas, esse fungo é constantemente introduzido nas colônias. Embora espécies de Trichoderma foram descritas nesses ambientes, a ocorrência desses fungos nas colônias das atíneas ainda foi pouco explorada. Para ampliar esse conhecimento, 83 fungos do gênero Trichoderma foram obtidos das seguintes formigas: Acromyrmex sp., Apterostigma sp., Mycocepurus goeldii, Mycetophylax sp., Trachymyrmex tucumanus e Trachymyrmex sp. Os isolados foram sequenciados para três marcadores moleculares (tef1, ITS e rpb2). As análises filogenéticas mostraram que tais fungos pertencem a 14 espécies de Trichoderma, distribuídas nos clados: Brevicompactum, Hamatum/Asperellum, Harzianum, Helicum, Koningii, Longibrachiatum, Lutea, Spirale, Virens e Viride. Duas novas espécies filogenéticas foram descritas no presente estudo: Trichodema sp. nov. 1 (Lutea) e Trichoderma sp. nov. 2 (Helicum). Os resultados também apontaram que não há uma associação entre espécies de Trichoderma e gêneros das formigas examinadas, o que sugere a falta de especificidade entre ambo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: There are about 2.2 to 3.8 million fungal species on the planet, but only 130.000 were described, including several species in the genus Trichoderma. These fungi are cosmopolitan and also found in colonies of attine ants. These insects forage on different substrates to grow a fungus, which is later used as food source. Because Trichoderma is associated with the substrate collected by attine ants, they are constantly introduced into the colonies of these insects. Although Trichoderma species were reported from attine colonies, their occurrence in the ant environment is still poorly addressed. To increase our knowledge on this matter, 83 fungi in the genus Trichoderma were obtained from the following attine ants: Acromyrmex sp., Apterostigma sp., Mycocepurus goeldii, Mycetophylax sp., Trachymyrmex tucumanus and Trachymyrmex sp. The isolates were sequenced for three molecular markers (tef1, ITS and rpb2). Phylogenetic analyses showed these fungi belong to 14 Trichoderma species distributed in the clades: Brevicompactum, Hamatum/Asperellum, Harzianum, Helicum, Koningii, Longibrachiatum, Lutea, Spirale, Virens and Viride. Two new phylogenetic species were described in this study: Trichodema sp. nov. 1 (Lutea) and Trichoderma sp. nov. 2 (Helicum). The results indicated no association between Trichoderma species and ant genera, suggesting a lack of specificity between the two organisms. Considering the ubiquitous nature of Trichoderma and the collecting behavior of attine ants, our ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Microrganismos formam associações com a maioria das espécies animais e um exemplo fascinante são as múltiplas interações nas colônias de formigas-cortadeiras. Os efeitos dessas interações (positivos e negativos) se manifestam na sanidade e desenvolvimento das colônias. Sendo assim, a compreensão das interações que ocorrem entre os microrganismos das colônias de formigas-cortadeiras A. sexdens é importante para fundamentar o controle biológico desta praga. Esse presente trabalho foi dividido em três capítulos. O primeiro capítulo objetivou comparar o desenvolvimento de colônias de Atta sexdens (Linnaeus) em contato com dois solos: (i) de área com ninhos e (ii) de área sem ninhos de formigas-cortadeiras. Foram conduzidos dois experimentos em laboratório. No experimento I, fêmeas recémfecundadas fundaram a colônia em pote com gesso e, após 106 dias, entraram em contato com solo. No experimento II, as fêmeas recém-fecundadas fundaram suas colônias diretamente no solo. A taxa de mortalidade de colônias, após 106 dias da revoada e se desenvolvendo em pote com gesso, foi de 28,6%. Quando se desenvolveram desde o início em contato com o solo, a taxa de mortalidade elevouse a 67,2 %. Os resultados confirmam que as colônias incipientes de A. sexdens sofrem forte pressão seletiva de microrganismos do solo no momento da fundação. No entanto, após o surgimento da força operária, mecanismos de defesa imune social, provavelmente, garantem o desenvolvimento da colônia a despeito da presença de microrganismos patogênicos no solo dos ninhos. O segundo capítulo objetivou isolar e identificar actinobactérias de solos de câmaras de jardim de fungos de A. sexdens e avaliar o efeito inibitório desses isolados sobre fungos associados às colônias de formigas-cortadeiras. Foram sequenciados o gene 16S rRNA de nove actinobactérias, sendo seis do gênero Streptomyces, duas do gênero Nocardia e uma do gênero Kitasatospora. Foi verificado que dois isolados de Streptomyces e um de Kitasatospora inibiram não só o fungo Escovopsis sp., como também o fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae e o fungo antagonista do cultivar simbionte de cortadeiras Trichoderma aff. strigosellum. Uma vez que não existem evidências de cultivo de actinobactérias na cutícula de operárias do gênero Atta, é possível hipotetizar que essas operárias estabeleçam simbiose temporária adaptativa com microrganismos do solo produtores de substâncias antifúngicas e antibióticas e que vivem em alguma parte de seu ninho ou mesmo no interior do seu corpo. Além disso, 10 os fungos patogênicos para colônias de formigas-cortadeiras presentes no solo adjacente ao ninho, apesar de constituírem um risco, podem ser controlados pelas secreções produzidas pelas operárias, bem como pelos metabólitos de algumas actinobactérias. O terceiro capítulo teve como objetivo verificar a aceitação e incorporação de iscas contendo micélio de Escovopsis sp. em colônias jovens de Atta sexdens. Verificou-se o transporte de iscas em todas as colônias do teste. Houve redução no peso do jardim de fungos das colônias que receberam iscas com Escovopsis sp., e aumento no peso do jardim de fungos de colônias que receberam tratamento controle. Conclui-se que a utilização de iscas com micélio de Escovopsis sp. foi satisfatória para introduzir o fungo parasita no jardim de fungos de colônias de Atta sexdens. / Microorganisms form associations with most animal species, and a fascinating example is the multiple interactions in the colonies of leaf-cutting ants. The effects of these interactions (positive and negative) are exhibited in the health and development of the colonies. Therefore, the understanding of the interactions that occur among the microorganisms into leaf-cutting ants colonies is important to support of biological control of this pest. This work was divided into three chapters. The first chapter aimed to compare the development of colonies of Atta sexdens (Linnaeus) in contact with two types of soil: (i) from an area used for nesting and (ii) from an area not used for nesting of leaf-cutting ants. Two experiments were conducted in the laboratory. In experiment I, newly fertilized females founded the colony in a plastic pot with gypsum and, after 106 days were transferred to a plastic pot with soil. In experiment II, newly fertilized females founded their colonies directly on the soil. Colony mortality rate 106 days after nuptial flight and founding in a plastic pot with gypsum was 28.6%. When they developed directly in contact with the soil, mortality rate increased to 67.2%. The results support that incipient colonies of A. sexdens undergo strong selective pressure from soil microorganisms at the time of foundation. However, after the emergence of the worker force, social immune defense mechanisms likely guarantee the development of the colony, despite the presence of pathogenic microorganisms in the soil of the nests. The second chapter aimed to isolate and identify actinobacteria from soils of fungi garden chambers of A. sexdens and to evaluate the inhibitory effect of these isolates on fungi associated with leaf-cutting colonies. To identify the isolates, the 16S rRNA gene was sequenced from nine actinobacteria: six of Streptomyces genus, two of Nocardia genus and one of Kitasatospora genus. Two Streptomyces and one Kitasatospora isolates inhibited not only the fungus Escovopsis sp., but also the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae and the antagonistic fungus of the cultivar symbiont of leaf-cutting ant Trichoderma aff. strigosellum. Since there is no evidence of cultivation of actinobacteria on the Atta worker cuticle, it is possible that these workers establish temporary adaptive symbiosis with soil microorganisms producing antifungal and antibiotic substances and living in some part of their nest or even in the interior of their body. It can be hypothesized that pathogenic fungi present in the soil adjacent to the leaf-cutting ant nest, despite the risk they represent, are controlled by the secretions produced by the workers, as well as by the metabolites of some actinobacteria. The third chapter had the objective of verifying the acceptance and incorporation of baits containing mycelium of Escovopsis sp. by young colonies of A. sexdens. We verified the transport of baits in all tested colonies. There was a reduction in the weight of the fungus garden of the colonies that received baits with Escovopsis sp., and an increase in the weight of the fungus garden of colonies that received control treatment. It is concluded that the use of baits with mycelium of Escovopsis sp. was satisfactory to introduce the fungus parasite in the fungus garden of A. sexdens colonies.