Research objective. Investigation of consistent patterns of the induction of flax morphogenesis process, assessment of genetic and physiological aspects of this process and optimization methodologies. Proposition: 1. MOrphogenesis capacity of flax isolated explants depends on a genotype only, but on a composition of a medium and the cultivar type (fibre flax or linseed)also. 2. Cells of different organs of the same genotype have different morphogenic capacity. 3. Combining hormonal ratio with the affect on explats by exogenic factors enables targeted control of the morphogenesis process in vitro. / Darbo tikslas - ištirti linų morfogenezės proceso indukcijos dėsningumus, įvertinti šio proceso genetinius ir fiziologinius aspektus bei optimizuoti regeneravimo metodikas. Ginamieji disertacijos teiginiai: 1. Linų izoliuotų eksplantų morfogeninė galia priklauso ne tik nuo genotipo, maitinamosios terpės sudėties, bet ir nuo veislės tipo (pluoštiniai ar sėmeniniai). 2.To paties genotipo skirtingų organų ląstelės turi skirtingą morfogeninę galią. 3.Derinant hormoninį balansą su eksplantų paveikimu egzogeniniais veiksniais galima kryptingai valdyti morfogenezės procesą in vitro.

Magistrantūros studijų baigiamajame darbe pateikiami lelijos (Lilium L.) morfogenezės indukcijos in vitro tyrimų duomenys. Darbo objektas: lelijų (Lilium L.) veislės ˈRed Beautyˈ, ˈWiener Blutˈ, ˈSėkmėˈ, ˈNoLimitˈ. Darbo metodai: lelijų (Lilium L.) izoliuoti eksplantai – svogūnėlių žvyneliai – auginti modifikuotoje MS maitinamojoje terpėje, kurios makro druskų koncentracija sumažinta iki 0,5 pradinio koncentracijos lygio, su skirtingais augimo reguliatorių deriniais. Vertintas mikrosvogūnėlių ir šaknų susiformavimo dažnis (%) bei mikrosvogūnėlių kiekis iš eksplanto (vnt.). Darbo rezultatai. Lelijų mikrosvogūnėlių formavimosi dažnį in vitro lemia augimo reguliatorių ir genotipo sąveika. Tos pačios lelijų veislės pasižymi skirtinga regeneracine galia, priklausomai nuo maitinamosios terpės sudėties. Iš tirtų veislių didžiausia regeneracine galia pasižymėjo veislės ˈRed Beautyˈizoliuoti eksplantai. Veislių ˈWiener Blutˈ ir ˈNo Limitˈ mikrosvogūnėlių regeneracijai in vitro maitinamąją terpę tikslinga papildyti 1,0 mg l-1 BAP + 0,3 mg l-1 2,4-D deriniu. Augimo reguliatorių derinys 2,0 mg l-1 BAP + 0,3 mg l-1 2,4-D labiausiai skatino veislės ˈRed Beautyˈ mikrosvogūnėlių susiformavimą. Veislės ˈSėkmėˈ izoliuoti eksplantai mikrosvogūnėlius formavo intensyviau augimo reguliatorių derinio 3,0 mg l-1 BAP + 0,3 mg l-1 2,4-D poveikyje. Intensyviausiai šaknis in vitro formavo veislių ˈRed Beautyˈ ir ˈWiener Blutˈ mikrosvogūnėliai. / The master work presents the results of increasing of lilies induction of morphogenesis in vitro studies. Object of the work: lilies (Lilium L.) cultivars of ˈRed Beautyˈ, ˈWiener Blutˈ, ˈSėkmėˈ, ˈNo Limitˈ. Methods of the work: Explants were cultured on the MS regeneration medium supplemented with macro salt concentration which is reduced to 0.5 of the initial concentration level, with different combinations of growth regulators. Evaluated for micro bulbs and root formation rate (%) and micro bulbs quantity of explant (units). The results of work. Lilies microbulbs formation in vitro is determined by the frequency of growth regulators and genotype interactions. The same varieties of lilies are characterized by different regenerative capacity, depending on the composition of the nutrient medium. Among investigated cultivars the highest morphogenic potention distinguished isolated explants of ˈRed Beautyˈ. For micropropagation of cultivars ˈWiener Blutˈ and ˈNo Limitˈ most suitable is medium supplement by 1,0 mg l-1 BAP + 0,3 mg l-1 2,4-D combination. Growth regulators combination 2,0 mg l-1 BAP + 0,3 mg l-1 2,4-D influenced cultivar ˈRed Beautyˈ. All isolated explants of cultivar ˈSėkmėˈ formed microbulbs on medium with 3,0 mg l-1 BAP + 0,3 mg l-1 2,4-D. The most intensive roots in vitro formed microbulbs varieties of ˈRed Beautyˈ and ˈWiener Blutˈ.

Magistrantūros studijų baigiamajame darbe pateikiama 2011–2012 metais Aleksandro Stulginskio universiteto Agronomijos fakulteto Agrobiotechnologijos laboratorijoje tirtų veiksnių, lemiančių sėjamosios kanapės dediferenciacijos indukciją hipokotilių ir skilčialapių kultūroje, tyrimų rezultatai. Darbo objektas – 10 dienų eksplantai auginti MS terpėje su skirtingais augimo reguliatorių kiekiais. Darbo metodai: Sėjamosios kanapės sėklos plautos po tekančiu vandeniu 1 val., 15 min. sterilintos 0,2 % kalio permanganato tirpale, 2 min. laikytos 70 % etanolio vandeniniame tirpale, 9 min. 10 % natrio hipochlorite ir 3 kartus po 5 min. mirkytos distiliuotame vandenyje. Sterilios sėklos daigintos ant MS maitinamosios terpės be augimo reguliatorių, papildytoje 10 g l-1 sacharozės ir 8 g l-1 Difco-Bacto agaru. MS terpėje su skirtingais augimo reguliatorių kiekiais auginta po 60 eksplantų. Kas keturias savaites eksplantai perkelti į šviežią tos pačios sudėties maitinamąją terpę. Vertintas kaliaus susidarymo dažnis (%), šaknų formavimosi dažnis (%), šaknų kiekis iš eksplanto (vnt.) bei ūglių formavimosi dažnis (%). Darbo rezultatai. Įvertinus sėjamosios kanapės kaliaus indukcijos tyrimų rezultatus nustatyta, kad sėjamosios kanapės izoliuoti hipokotilio audiniai nedideliu dažniu geba formuoti kalių ir terpėje be augimo reguliatorių. Naudojant vienos grupės (auksiną arba citokininą) augimo reguliatorių didžiausias kaliaus formavimosi dažnis gautas terpėje, papildytoje 0,5 mg l-¹ α... [toliau žr. visą tekstą] / The master work presents the results of factors affecting Cannabis sativa L. dedifferentiation process in vitro. Research was investigated at the Laboratory of Agrobiotechnology, Faculty of Agronomy of Aleksandras Stulginskis University in 2011 - 2012. Investigation in vitro was carried out with Cannabis sativa L. hypocotyls and cotyledons explants. Object of the work – 10 days explants grown in MS medium with different growth regulators concentrations. Method of the work – Cannabis sativa L. seeds were washed under running water for 1 h and surface sterilized with 0.2 % potassium permanganate for 15 min. sterilized and for 2 min. in 70 % ethanol, then sterilized in 10 % sodium hypochlorite for 9 min. and rinsed 3 times for 5 min. with sterile distilled water. Sterile seeds sprouted on MS nutrient medium without growth regulators, supplemented with 10 g l-1 sucrose and 8 g l-1 Difco Bacto-agar. MS medium with different growth regulators concentrations were grown 60 explants. Every four weeks, explants were transferred to the same composition fresh medium. The callus formation frequency (%), root formation frequency (%), root number of the explant (units) and the frequency of shoot formation (%) were evaluated. The results of the work – Cannabis sativa L. hypocotyls tissues with low frequency can form callus and without growth regulators in the medium. Using a single group of growth regulators (auxin or cytokinin) highest callus formation frequency obtained in the medium... [to full text]

Magistrantūros studijų baigiamajame darbe pateikiami veiksnių, lemiančių pluoštinių linų morfogenezę in vitro, tyrimų duomenys. Darbo objektas – keturios pluoštinių linų veislės 'Dangiai', 'Sartai', 'Snaigiai' ir 'Vaižgantas'. Darbo metodai. Pluoštinių linų morfogenezei somatinių audinių kultūroje tirti naudoti hipokotilio eksplantai. Eksplantai auginti MS terpėje su skirtingais augimo reguliatorių kiekiais auginimo kambaryje. Vertintas pridėtinių pumpurų formavimosi dažnis (%) ir pridėtinių ūglių kiekis iš eksplanto (vnt.). Darbo rezultatai. Egzogeninių augimo reguliatorių priedas indukcijos terpėje daugeliu atvejų skatino tirtų pluoštinių linų veislių ūglių regeneraciją, tačiau optimali šio junginio koncentracija priklausė nuo genotipo. Iš tirtų pluoštinių linų veislių didžiausia morfogenine galia pasižymėjo veislės 'Vaižgantas' izoliuoti hipokotiliai. Priklausomai nuo genotipo ir maitinamosios terpės sudėties pluoštinių linų pridėtinių pumpurų formavimosi procesas hipokotilių kultūroje vyko 2,87-94,50 % dažniu regeneruojant 1,67-6,00 ūglius iš eksplanto. Efektyviam veislės 'Dangiai' ūglių regeneravimui maitinamąją terpę tikslinga papildyti 2,0 mg l-1 BAP + 0,1 mg l-1 NAR bei eksplantus paveikti 4 °C temperatūra 24 valandas. Veislės 'Sartai' izoliuotų hipokotilių audinių antrinę diferenciaciją skatino 72 valandų 7 °C temperatūros poveikis bei citokinino 1,0 mg l-1 2iP priedas maitinamojoje terpėje. Intensyviausiai veislės 'Snaigiai' eksplantai pumpurus formavo maitinamojoje... [toliau žr. visą tekstą] / The master work presents the results of fibre flax morphogenesis in vitro affecting factors. Object of the research − four fibre flax cultivars 'Dangiai', 'Sartai', 'Snaigiai' and 'Vaižgantas'. Research methods. To study fiber flax morphogenesis of somatic tissues hypocotyls were used as explant. Explants were placed on MS medium supplemented with different combinations of growth regulators and cultivated in growth chamber. The percentage of bud regeneration and the number of shoots per explant were evaluated. Research results. Exogenous growth regulators concentration in induction media increased fiber flax shoots regeneration, and therefore specific combination of growth regulators must be designed for each genotype. Among investigated genotypes, the hypocotyls of cultivars 'Vaižgantas' manifested the best morphogenic capability. Depending on genotype and medium composition fiber flax adventitious buds regeneration frequency varied from 2.87-94.50% and the number of shoots per explant reached 1.67-6.0, respectively. Hypocotyls of cultivar 'Dangiai' showed the best response on medium supplemented by 2.0 mg l-1 BAP with 0.1 mg l-1 NAA and pretreated by 4 °C temperature 24 hours. In the presence of only cytokinins, the highest mean value of regenerated shoots was observed on medium supplemented with 1.0 mg l-1 2iP and 72 hours 7 °C temperature pretreatment for hypocotyls of 'Sartai'. Growth regulators combination 2.0 mg l-1 2iP with 0.1 mg l-1 NAA and treatment by 4 °C... [to full text]

Magistrantūros studijų baigiamajame darbe pateikiami sėjamosios kanapės eksplanto tipo ir maitinamosios terpės sudėties poveikio mofogenezei in vitro tyrimų rezultatai. Darbo objektas – sėjamosios kanapės stiebo ir lapkočio segmentai. Darbo metodai: Sėjamosios kanapės eksplantai auginti MS, B5 ir White maitinamosiose terpėse, papildytose įvairiais augimo reguliatorių deriniais. Vertintas kaliaus susiformavimo dažnis (%), ūglių susiformavimo dažnis (%) ir šaknų susiformavimo dažnis (%). Darbo rezultatai. Sėjamosios kanapės morfogenezės procesas didžiąja dalimi priklauso nuo bazinės maitinamosios terpės sudėties. Izoliuoti stiebo segmentai intensyviausiai kalių indukavo bazinėje B5 maitinamojoje terpėje, o lapkočio segmentai − B5 maitinamojoje terpėje, papildytoje 1,0 mg l-1 TDZ + 0,5 mg l-1 NAR arba 1,0 mg l-1 KIN + 0,5 mg l-1 NAR. Pridėtinių ūglių formavimasis intensyviausiai vyko bazinėje B5 maitinamojoje terpėje, papildytoje 1,0 mg l-1 TDZ + 0,5 mg l-1 NAR (iš stiebo segmento audinių) ir 1,0 mg l-1 KIN + 0,5 mg l-1 NAR (iš lapkočio audinių). Izoliuoti stiebo segmentai didžiausiu dažniu šaknis formavo B5 maitinamojoje terpėje, papildytoje 1,0 mg l-1 KIN + 0,5 mg l-1 NAR, o lapkočio segmentai − 1,0 mg l-1 TDZ + 0,5 mg l-1 NAR. Tirti stiebo segmentai pasižymėjo didesne geba formuoti kalių, pridėtinius ūglius ir šaknis nei izoliuoti lapkočio segmentai. / The master work presents the effect of explants type and medium composition on morphogenesis in vitro of hemp. Object of the research – stem segments and leafstalk of hemp. Research methods. To study hemp morphogenesis in vitro hypocotyls and leafstalk were used as explants. Explants were placed on MS, B5 and White media supplemented with different combinations of growth regulators. The percentage of callus formation, shoot induction and root formation were evaluated. Research results. The current study indicates that there is strong medium composition effect on morphogenesis in vitro of hemp. From tested media most intensive callus genesis was observed on B5 medium, but from leafstalk – on B5 medium with 1.0 mg l-1 TDZ + 0.5 mg l-1 NAA or 1.0 mg l-1 KIN + 0.5 mg l-1 NAA. The growth regulators combination 1.0 mg l-1 TDZ + 0.5 mg l-1 NAA on B5 media was the most suitable for stem segments shoots induction while growth regulators combination 1.0 mg l-1 KIN + 0.5 mg l-1 NAA promoted the highest frequency of shoots induction from leafstalk segments. The highest root formation frequency was observed on the same basal medium supplemented with 1.0 mg l-1 KIN + 0.5 mg l-1 NAA from stem segments, but from leafstalk – on B5 medium with 1.0 mg l-1 TDZ + 0.5 mg l-1 NAA. Generally, the stem segments exhibited a higher morphogenic response than leafstalk of hemp.

Magistrantūros studijų baigiamajame darbe pateikiama šilokų pridėtinių ūglių regeneracija lapų segmentų kultūroje, priklausomai nuo genotipo ir augimo reguliatorių maitinamojoje terpėje. Darbo objektas – Sedum rupestre ‛Angeline’, Sedum reflexum ‛Cristatum’, Sedum fosterianum ‛Elegans’, Sedum maximum ‛Autumn Joy’ lapų audiniai. Darbo metodai: izoliuoti eksplantai auginti Murashige ir Skoog (MS) maitinamojoje terpėje su skirtingais augimo reguliatorių kiekiais. Susiformavę pridėtiniai ūgliai įšaknydinti MS maitinamojoje terpėje su skirtingais augimo reguliatorių kiekiais. Vertintas ūglių susiformavimo dažnis (%), ūglių kiekis iš eksplanto (vnt.) ir įsišaknijimo dažnis (%). Darbo rezultatai. Veislių ‛Elegans’ ir ‛Cristatum’ ūglių susiformavimo dažnį labiausiai skatino 0,75 mg l-1 BAP. Veislės ‛Angeline’ didžiausias ūglių susiformavimo dažnis nustatytas terpėje, papildytoje 3,0 mg l-1 BAP. Veislės ‛Autum joy’ izoliuoti lapo segmentai 100 % dažniu ūglius formavo terpėse su 3,0 mg l-1 BAP + 0,5 mg l-1 NAR ir 4,0 mg l-1 BAP + 0,5 mg l-1 NAR. Veislės ‛Elegans’ didžiausias ūglių kiekis eksplantui gautas terpėje papildytoje 0,75 mg l-1 BAP. Veislės ‛Angeline’ daugiausia ūglių iš eksplanto susiformavo terpėse su 0,75 mg l-1 BAP ir 3,0 mg l-1 BAP. Terpėje, papildytoje 3,0 mg l-1 BAP gautas didžiausias veislės ‛Cristatum’ ūglių kiekis vienam eksplantui. Veislės ‛Autum joy’ eksplantai daugiausia ūglių suformavo terpėse, papildytose 3,0 mg l-1 BAP + 0,5 mg l-1 NAR ir 4,0 mg l-1 BAP + 0,5... [toliau žr. visą tekstą] / The master work presents orpine adventitious shoots regeneration in leaves segments cultures, depending on genotype and growth regulators in the culture medium. Object of the work – Sedum rupestre ‛Angeline’, Sedum reflexum ‛Cristatum’, Sedum fosterianum ‛Elegans’, Sedum maximum ‛Autumn Joy’ leaves tissues. Method of the work – isolated explants were growing on Murashige ir Skoog (MS) nutrition medium with different content of growth regulators. Adventitious shoots were transferred to MS culture medium for rhizogenesis induction. Shoots formation frequency, number of shoots per explant and rooting frequency were evaluated. The results of work. The highest shoots formation frequency of orpine varieties ‛Elegans’ and ‛Cristatum’ has been obtained under influence of 0.75 mg l-1 BAP. The 3.0 mg l-1 BAP concentration in culture medium resulted in highest shoots regeneration frequency of variety ‛Angeline’. All isolated explants of ‛Autum joy’ formed adventitious shoots in the medium supplemented with 3.0 mg l-1 BAP + 0.5 mg l-1 NAA and 4.0 mg l-1 BAP + 0.5 mg l-1 NAA. While 0.75 mg l-1 BAP in culture medium stimulated shoots formation frequency of variety ‛Elegans’. The highest shoots number per explant of variety ‛Angeline’ has been establishing in medium with 0.75 mg l-1 BAP and 3.0 mg l-1 BAP. Medium supplemented with 3.0 mg l-1 BAP resulted in highest shoots number per explant of ‛Cristatum’. Explants of variety ‛Autum joy’ highest shoots number per explant formed in medium... [to full text]

Siekiant nustatyti genetinius, fiziologinius ir fizinius veiksnius, darančius įtaką dygliuotojo šaltalankio (Hippophae rhamnoides L.) auginių rizogenezei, tirti trijų veislių žalieji auginiai, paimti iš ūglių lignifikacijos pradžioje. Nustatyta, kad ISR 40 ir 50 mg/l koncentracijos tirpalas, palyginus su kontroliniu variantu, nežymiai, bet patikimai spartina rizogenezės procesą. Net mažiausios NAR koncentracijos mažina auginių su šaknimis išeigą. IAR rizogenezės spartos nedidina, bet 40–50 mg/l koncentracijų tirpalai didina įsišaknijusių auginių procentą. ISR ir NAR poveikyje nežymiai didėja vidutinis pagrindinių šaknų skaičius ant šaknies regeneruojančio auginio. Intensyviausiai šaknis regeneruoja iš ūglio viršūnės paimti auginiai, kuriems būdingas mažiausias sumedėjimo lygis. Auginiai nuo juvenaliniame tarpsnyje esančių medžių pagal rizogenezės spartą atsilieka nuo auginių, paimtų nuo derančių medžių. Esminę įtaką dygliuotojo šaltalankio žaliųjų auginių rizogenezei daro auginio ilgis. Parodyta, kad egzistuoja minimalūs auginio, turinčio potencijų rizogenezei, parametrai. Tik pavieniai penkių centimetrų ilgio auginiai regeneruoja šaknis. Didėjant auginio ilgiui rizogenezės dažnumas didėja. / In order to evaluate genetic, physiologic and physical factors influencing rhizogenesis of green cuttings of sea buckthorn, cuttings from three cultivars were taken at the beginning of lignification. It was estimated, that 40 and 50 mg/L IBA solutions narrowly but reliably quicken rhizogenesis compared to control. Solution with even the lowest NAA concentration reduces output of cuttings with roots. IAA doesn’t accelerate process of rhizogenesis, but 40 and 50 mg/L IAA solutions increase percentage of rooted cuttings. Average main root quantity on the rooted cutting increases under the influence of IBA and NAA. Cuttings with the lowest lignification level, which were taken from terminal shoot part, regenerated roots more intensively. Cuttings taken from juvenile plants lag behind the cuttings from bearings plants according to rhizogenesis speed. The length of cutting is crucial for the rhizogenesis of sea buckthorn cuttings. Minimal cutting parameters for potential rhizogenesis are shown. Only several 5 cm length cuttings regenerate roots, rate of rhizogenesis increases in longer cuttings.

Aktinidijos (Actinidia kolomikta Maxim.) ūgliai 2013 m. buvo paimti iš Aleksandro Stulginskio Universiteto Pomologiniame sode augančių motininių augalų. Tirtos trys veislės ‘Paukštės Šakarva’, ‘Lankė’ ir ‘Landė’. Siekiant nustatyti genetinius, fiziologinius ir fizinius veiksnius, darančius įtaką margalapės aktinidijos auginių rizogenezei, tirti trijų veislių žalieji auginiai, paimti iš ūglių lignifikacijos pradžioje. Nustatyta, kad ISR augimo reguliatorius didina įsišaknijusių auginių kiekį. IAR augimo reguliatoriaus poveikis žaliesiems auginiams labai panašus kaip ir ISR. Intensyviausiai šaknis regeneravo iš ūglio viršūnės paimti auginiai, kuriems būdingas mažiausias sumedėjimo lygis. Esminę įtaką margalapės aktinidijos žaliųjų auginių rizogenezei darė auginio ilgis. Įrodyta, kad egzistuoja minimalūs auginio, turinčio potencijų rizogenezei, parametrai. Didėjant auginio ilgiui rizogenezės dažnumas didėja. / Actinidia (Actinidia kolomikta Maxim.) shoots in 2013 was cuting Aleksandras Stulginskis University Pomology garden. Were tested three varieties ‘Paukštės Šakarva’, ‘Lankė’ ir ‘Landė’. In order to evaluate genetic, physiologic and physical factors influencing rhizogenesis of soft cuttings of actinidia, cuttings from three cultivars were taken at the beginning of lignification. It was estimated, that the IBA solution, compared with the control slightly increases the yield of cuttings with roots. IAA efficiency is not significantly different from the IBA. Cuttings with the lowest lignification level, wich were taken from terminal shoot part, regenerated roots more intensively. The length of cutting is crucial from the rhizogenesis of actinidia cuttings. Minimal cutting parameters for potential rhizogenesis are shown. Rate of rhizogenesis increase in longer cuttings.

Study aim is to study endogenic and exogenic factors preconditioning morphogenesis of linseed flax in vitro. Linseed flax studies in vitro were carried out at the Laboratory of Genetic – Biotechnological of Lithuanian University of Agriculture in 2004-2006. Factors which influence morphogenetic capability of linseed flax cultivars ‘Lirina’, ‘Barbara’ and ‘Szaphir’ in tissue culture were investigated. Two different types of explants – stem segments and hypocotyls – of the three genotypes were cultivated in nutrient media differing in their macro and micro salts concentration, vitamins and different levels of growth regulators. Our results showed that intensity of morphogenesis was affected not only by exogenous growth regulators, but also by the type of explant and genotype. Hypocotyls-derived callus gave the better results than that stem-segment-derived callus on all tested media. Four-weeks-old callus showed the maximum shoot regeneration frequency. The best morphogenetic capabilities were demonstrated for cultivar ‘Szaphir’. The largest number of shoots was produced by all the cultivars on MSB5 nutrient medium supplemented with cytokinin 2iP (2.0 mg 1-1). The master’s final work comprises 50 pages, including 3 tables, 10 figures and 66 literature references.