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A??o de Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae sobre popula??es de Rhipicephalus (Boophilus) microplus de diferentes localidades. 2010. / Action of Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae against Rhipicephalus (Boophilus) microplus populations of differents locations.Perinotto, Wendell Marcelo de Souza 05 February 2010 (has links)
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Wendell Marcelo de Souza Perinotto.pdf: 801461 bytes, checksum: 1968d4da38ce1a3b31453946416d435c (MD5)
Previous issue date: 2010-02-05 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Recent studies have indicated the possibility of difference in susceptibility between different populations of ticks, while undergoing treatment with entomopathogenic fungi. To assess whether this difference actually occurs, this study intents to verify the in vitro effect of fungi Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana on two distinct populations of Rhipicephalus (B.) microplus collected from different properties. Experiments were conducted on engorged females, eggs and larvae. To evaluate the effect of fungi female reproductive parameters were observed. In eggs, the hatch percentage was evaluated, and in larvae, the mortality rate was analyzed. Five groups were formed (108, 107 con?dia/ml of M. anisopliae; 108, 107 con?dia/ml of B. bassiana and control group) with 10 repetitions each. The specimens were immersed in one ml of the suspension for three minutes and the control group was exposed only to diluent. The results showed that the fungi were efficient, influencing all females s reproductive parameters of both properties. To verify the susceptibility of different populations statistical analysis were carried out comparing the treatments on females of different origins. The following parameters presented significant difference: periods of the pre oviposition, larvae hatch and egg production index. Furthermore, B. bassiana was more effective than M. anisopliae on engorged female. In the bioassay with eggs the hatch percentage ranged between 3.1 and 49.5% in one property and from 3.4 to 42.7% in another, but there was no significant difference between the two populations at this stage of R. (B.) microplus. At the bioassay with larvae the mortality percentage of larvae ranged from 91.8 to 98.7% in one and 71.0 to 94,0% in another property. Moreover, the average lethal time (LT 90) ranged from 19.52 to 27.51 days in one of the properties and 22.89 to 37.31 days in the other. Through these results, it can be concluded the entomopathogenic fungi used in this study are effective in controlling this tick species. However, different populations have variation in their susceptibility to B. bassiana and M.anisopliae. / Estudos recentes indicaram a possibilidade de diferen?a na susceptibilidade entre popula??es distintas de carrapatos, quando submetidos ao tratamento com fungos entomopatog?nicos. Para avaliar se ocorre realmente essa diferen?a, foi avaliada a a??o in vitro dos fungos M. anisopliae e B. bassiana sobre duas popula??es distintas de R. (B.) microplus, oriundas de diferentes propriedades. Foram realizados bioensaios sobre f?meas ingurgitadas, ovos e larvas. Para avaliar o efeito dos fungos sobre as f?meas observaram-se os par?metros reprodutivos. Para ovos analisou-se o percentual de eclos?o das larvas e sobre larvas analisaram-se o percentual de mortalidade e tempo m?dio letal. Foram formados cinco grupos por propriedade (108, 107 con?dios/ml de M. anisopliae; 108, 107 con?dios/ml de B. bassiana e controle) com 10 repeti??es cada. No tratamento, as esp?cimes foram imersas em um ml da suspens?o testada durante tr?s minutos e o grupo controle foi exposto apenas ao diluente. Os resultados obtidos demonstraram que os fungos influenciaram na maioria dos par?metros reprodutivos das f?meas de ambas as propriedades. Para verificar a susceptibilidade das popula??es distintas, foram realizadas an?lises estat?sticas comparando os tratamentos sobre as f?meas de diferentes origens. Pode-se observar que houve diferen?a significativa nos seguintes par?metros: per?odos de pr?-postura, per?odo de eclos?o das larvas e ?ndice de produ??o de ovos. Al?m disso, pode-se observar que o isolado Bb 986 de B. bassiana foi mais patog?nico do que o isolado Ma 959 de M. anisopliae sobre f?meas ingurgitadas, promovendo um percentual de controle de 49%. No bioensaio com ovos, a redu??o do percentual de eclos?o das larvas variou entre 3,1 a 49,5% em uma propriedade e 3,4 a 42,7% em outra, por?m n?o houve diferen?a significativa entre as duas popula??es nesta fase do R. (B.) microplus. No bioensaio com larvas o percentual de mortalidade das larvas variou de 91,8 a 98,7% em uma e 71,0 a 94,0% em outra propriedade. Al?m disso, o tempo m?dio letal (LT 90) foi de 19,52 a 27,51 dias em uma das propriedades e de 22, 89 a 37,31 dias na outra. Atrav?s destes resultados, pode-se concluir que os fungos entomopatog?nicos utilizados neste estudo s?o capazes de agir sobre esta esp?cie de carrapato. No entanto, popula??es distintas apresentam varia??o na sua susceptibilidade ? B. bassiana e M. anisopliae.
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Influência do pH do diluidor, na ação de caldas ixodicidas (amitraz, clorpirifós e cipermetrina), contra Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) (acarina: ixodidae) //Fernandes Garcia, Néio Lúcio. January 2007 (has links)
Orientador: Adjair Antonio do Nascimento / Banca: Gilson Pereira de Oliveira / Banca: Júlio Mendes / Resumo: O presente trabalho procurou verificar a possível interferência do pH do diluidor na eficiência de ixodicidas comerciais. Para tanto, utilizou-se amitraz, clorpirifós, cipermetrina, mais um grupo controle, para verificar os possíveis efeitos de soluções tampão com pH 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 e 11, como diluidores dos ixodicidas, sobre as variáveis: peso médio da oviposição (PMO), relação PMOxPT (peso das teleóginas), porcentagem de eclosão (PE), eficiência reprodutiva (ER) e eficácia da calda (EC). Teleóginas de R. (B.) microplus, obtidas de bovinos infestados com cepa de campo, foram submetidas à biocarrapaticidogramas, uma hora e 24 horas após preparo (HAP) das caldas. O pH do diluente pouco influenciou na eficácia do amitraz nos parâmetros avaliados, embora as linhas de tendência dos resultados para ER e EC tenham mostrado menor ação do ixodicida, à medida que o pH do diluidor aumentava, tanto para uma HAP como para 24 HAP. Para o clorpirifós, os resultados obtidos mostraram diferenças significativas no PMO, PMOxPT e PE nos resultados de uma hora. A ER (uma HAP) e EC (24 HAP) foram influenciadas negativamente pelo pH quando este se elevava. As linhas de tendência dos resultados para ER e EC mostraram diminuição da ação à medida que o pH do diluidor aumentava, tanto para uma hora como para 24 horas. A cipermetrina sofreu pouca influência do pH. Entretanto, a linha de tendência dos resultados para EC foi influenciada pela elevação do pH, quando usada 24 HAP. / Abstract: The objective of the present research is to check, with commercial ixodicides, the possible interference of the pH of the thinner. For this amitraz, chlorpyrifos, cypermethrin, plus a control group, was used to verify the possible effects of buffer solutions with pH 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 and 11, as thinners of the ixodicides, on the following: medium weight of egg mass (PMO), relationship PMOxPT (weight of the teleogines), percentage of larvae hatch (PE), estimated reproduction (ER) and % control (EC). Teleogines of R. (B.) microplus, obtained from cattle infested with field's strains have been submitted to the in vitro immersion tests, one hour and 24 hours after the solution has been prepared (HAP). The pH of the thinners made little difference on the amitraz on the parameters assessed and, statistically, did not show any significant differences, although the tendency of the results for ER and EC showed less action of ixodicide, as the pH of the thinner increased, as much for one HAP as for 24 HAP. As for chlorpyrifos, the results obtained, statistically showed significant differences on the PMO, PMOxPT and PE in the results of one hour. The ER (one HAP) and EC (24 HAP), were negatively affected by pH when this was augmented. The tendency of the results for ER and EC showed a diminution from the action, as the pH from the thinner augmented, as much for one HAP as for 24 HAP. The cypermetrin suffered less influence from pH. However, the tendency of the results for EC were affected by the elevation of pH, when used 24 HAP. / Mestre
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Influência do pH do diluidor, na ação de caldas ixodicidas (amitraz, clorpirifós e cipermetrina), contra Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) (acarina: ixodidae)Fernandes Garcia, Néio Lúcio [UNESP] 26 July 2007 (has links) (PDF)
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Previous issue date: 2007-07-26Bitstream added on 2014-06-13T20:35:32Z : No. of bitstreams: 1
fernandesgarcia_nl_me_jabo.pdf: 541165 bytes, checksum: c8e23f4d551cb84693238f6efb27a6b3 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente trabalho procurou verificar a possível interferência do pH do diluidor na eficiência de ixodicidas comerciais. Para tanto, utilizou-se amitraz, clorpirifós, cipermetrina, mais um grupo controle, para verificar os possíveis efeitos de soluções tampão com pH 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 e 11, como diluidores dos ixodicidas, sobre as variáveis: peso médio da oviposição (PMO), relação PMOxPT (peso das teleóginas), porcentagem de eclosão (PE), eficiência reprodutiva (ER) e eficácia da calda (EC). Teleóginas de R. (B.) microplus, obtidas de bovinos infestados com cepa de campo, foram submetidas à biocarrapaticidogramas, uma hora e 24 horas após preparo (HAP) das caldas. O pH do diluente pouco influenciou na eficácia do amitraz nos parâmetros avaliados, embora as linhas de tendência dos resultados para ER e EC tenham mostrado menor ação do ixodicida, à medida que o pH do diluidor aumentava, tanto para uma HAP como para 24 HAP. Para o clorpirifós, os resultados obtidos mostraram diferenças significativas no PMO, PMOxPT e PE nos resultados de uma hora. A ER (uma HAP) e EC (24 HAP) foram influenciadas negativamente pelo pH quando este se elevava. As linhas de tendência dos resultados para ER e EC mostraram diminuição da ação à medida que o pH do diluidor aumentava, tanto para uma hora como para 24 horas. A cipermetrina sofreu pouca influência do pH. Entretanto, a linha de tendência dos resultados para EC foi influenciada pela elevação do pH, quando usada 24 HAP. / The objective of the present research is to check, with commercial ixodicides, the possible interference of the pH of the thinner. For this amitraz, chlorpyrifos, cypermethrin, plus a control group, was used to verify the possible effects of buffer solutions with pH 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 and 11, as thinners of the ixodicides, on the following: medium weight of egg mass (PMO), relationship PMOxPT (weight of the teleogines), percentage of larvae hatch (PE), estimated reproduction (ER) and % control (EC). Teleogines of R. (B.) microplus, obtained from cattle infested with field's strains have been submitted to the in vitro immersion tests, one hour and 24 hours after the solution has been prepared (HAP). The pH of the thinners made little difference on the amitraz on the parameters assessed and, statistically, did not show any significant differences, although the tendency of the results for ER and EC showed less action of ixodicide, as the pH of the thinner increased, as much for one HAP as for 24 HAP. As for chlorpyrifos, the results obtained, statistically showed significant differences on the PMO, PMOxPT and PE in the results of one hour. The ER (one HAP) and EC (24 HAP), were negatively affected by pH when this was augmented. The tendency of the results for ER and EC showed a diminution from the action, as the pH from the thinner augmented, as much for one HAP as for 24 HAP. The cypermetrin suffered less influence from pH. However, the tendency of the results for EC were affected by the elevation of pH, when used 24 HAP.
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Avaliação da resposta imune humoral em camundongos para a proteína glutationa s-transferase de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (GST-Bm), e de haemaphysalis longicornis (GST-HI).Utiumi, Kiyoko Uemura January 2008 (has links)
O carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus é um ectoparasito hematófago que infesta os rebanhos bovinos de regiões tropicais e subtropicais, e é um dos principais causadores de prejuízos econômicos à pecuária. O principal método de controle baseia-se no uso de acaricidas. No entanto, devido à crescente preocupação com os problemas criados pela poluição química do meio ambiente, ao alto custo e toxicidade das drogas e ao aparecimento de carrapatos resistentes aos acaricidas, métodos alternativos para o controle do R. microplus devem ser encontrados. Um dos métodos alternativos estudados é o uso de vacinas. As glutationa S-transferases (GST) são enzimas que estão presentes em organismos animais e vegetais e entre suas funções podem-se destacar transporte intracelular, participação em processos digestivos, síntese de prostaglandinas, e detoxificação de substâncias tóxicas e proteção contra estresse oxidativo. Neste estudo foi analisada a resposta imunológica comparativa de camundongos para a GST de R. microplus (GST-Bm) e para a GST de Haemaphysalis longicornis (GST-Hl). Ambas as proteínas foram expressas em Escherichia coli linhagem AD494, e purificadas por cromatografia de afinidade por glutationa utilizando a coluna GSTrap FF. Para verificar a imunogenicidade das proteínas, foram utilizados 25 camundongos Balb/c divididos em 12 grupos. As condições testadas foram as inoculações das proteínas GST-Bm e GST-Hl com os adjuvantes Montanide, saponina ou sem adjuvantes. Camundongos controle foram inoculados com extrato de E. coli ou somente com os adjuvantes. Foi coletado sangue de todos os animais com intervalos de sete dias durante 70 dias. Os soros foram analisados por ELISA para acompanhar a cinética da produção de anticorpos de todos os animais imunizados. Os camundongos inoculados com GST-Hl emulsificada com Montanide mostraram aumento dos níveis de anticorpos a partir do dia 21. O nível máximo de anticorpos foi detectado no dia 42, e diminuiu após o dia 56. Todos os outros animais não apresentaram aumento nos níveis de anticorpos. / Rhipicephalus (Boophilus) microplus tick is a hematophagous ectoparasite that infests cattle in tropical and subtropical regions and is one of the principal causes of economic losses in the cattle farm. The principal method of control is the use of acaricides. However, due to increased worry about environmental chemical pollution, high costs and drugs toxicity and the selection of ticks resistant to acaricides, alternative methods for R. microplus control should be developed. One of these methods is vaccination. Glutathione S-transferases (GSTs) enzymes are present in animal and vegetal organisms and the functions are intracellular transport, participation in digestive process, synthesis of prostaglandins and detoxification of toxic substances and protection against oxidative stress. In this study the immunological response of mice inoculated with R. microplus GST (GST-Bm) and with Haemaphysalis longicornis GST (GST-Hl) was analysed. Both proteins were expressed in Escherichia coli strain AD494 and were purified by affinity chromatography using GSTrap FF columm. To verify the protein immunogenicity, 25 Balb/c mice divided into 12 groups were used. The tested conditions were inoculation of GST-Bm, GST-Hl proteins with Montanide and saponin adjuvants or without adjuvant. Control mice were inoculated with E. coli extract or the adjuvant alone. Blood from all animals were collected with intervals of seven days during seventy days, the sera were analyzed by ELISA to verify the kinetic of antibodies production of all immunized animals. Mice inoculated with GST-Hl emulsified with Montanide showed an increase in the antibodies levels from day 21. The maximum level of antibodies was detected on day 42 and decreased after day 56. The other animals did not show an increase in antibodies levels.
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Avaliação da resposta imune humoral em camundongos para a proteína glutationa s-transferase de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (GST-Bm), e de haemaphysalis longicornis (GST-HI).Utiumi, Kiyoko Uemura January 2008 (has links)
O carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus é um ectoparasito hematófago que infesta os rebanhos bovinos de regiões tropicais e subtropicais, e é um dos principais causadores de prejuízos econômicos à pecuária. O principal método de controle baseia-se no uso de acaricidas. No entanto, devido à crescente preocupação com os problemas criados pela poluição química do meio ambiente, ao alto custo e toxicidade das drogas e ao aparecimento de carrapatos resistentes aos acaricidas, métodos alternativos para o controle do R. microplus devem ser encontrados. Um dos métodos alternativos estudados é o uso de vacinas. As glutationa S-transferases (GST) são enzimas que estão presentes em organismos animais e vegetais e entre suas funções podem-se destacar transporte intracelular, participação em processos digestivos, síntese de prostaglandinas, e detoxificação de substâncias tóxicas e proteção contra estresse oxidativo. Neste estudo foi analisada a resposta imunológica comparativa de camundongos para a GST de R. microplus (GST-Bm) e para a GST de Haemaphysalis longicornis (GST-Hl). Ambas as proteínas foram expressas em Escherichia coli linhagem AD494, e purificadas por cromatografia de afinidade por glutationa utilizando a coluna GSTrap FF. Para verificar a imunogenicidade das proteínas, foram utilizados 25 camundongos Balb/c divididos em 12 grupos. As condições testadas foram as inoculações das proteínas GST-Bm e GST-Hl com os adjuvantes Montanide, saponina ou sem adjuvantes. Camundongos controle foram inoculados com extrato de E. coli ou somente com os adjuvantes. Foi coletado sangue de todos os animais com intervalos de sete dias durante 70 dias. Os soros foram analisados por ELISA para acompanhar a cinética da produção de anticorpos de todos os animais imunizados. Os camundongos inoculados com GST-Hl emulsificada com Montanide mostraram aumento dos níveis de anticorpos a partir do dia 21. O nível máximo de anticorpos foi detectado no dia 42, e diminuiu após o dia 56. Todos os outros animais não apresentaram aumento nos níveis de anticorpos. / Rhipicephalus (Boophilus) microplus tick is a hematophagous ectoparasite that infests cattle in tropical and subtropical regions and is one of the principal causes of economic losses in the cattle farm. The principal method of control is the use of acaricides. However, due to increased worry about environmental chemical pollution, high costs and drugs toxicity and the selection of ticks resistant to acaricides, alternative methods for R. microplus control should be developed. One of these methods is vaccination. Glutathione S-transferases (GSTs) enzymes are present in animal and vegetal organisms and the functions are intracellular transport, participation in digestive process, synthesis of prostaglandins and detoxification of toxic substances and protection against oxidative stress. In this study the immunological response of mice inoculated with R. microplus GST (GST-Bm) and with Haemaphysalis longicornis GST (GST-Hl) was analysed. Both proteins were expressed in Escherichia coli strain AD494 and were purified by affinity chromatography using GSTrap FF columm. To verify the protein immunogenicity, 25 Balb/c mice divided into 12 groups were used. The tested conditions were inoculation of GST-Bm, GST-Hl proteins with Montanide and saponin adjuvants or without adjuvant. Control mice were inoculated with E. coli extract or the adjuvant alone. Blood from all animals were collected with intervals of seven days during seventy days, the sera were analyzed by ELISA to verify the kinetic of antibodies production of all immunized animals. Mice inoculated with GST-Hl emulsified with Montanide showed an increase in the antibodies levels from day 21. The maximum level of antibodies was detected on day 42 and decreased after day 56. The other animals did not show an increase in antibodies levels.
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Avaliação da resposta imune humoral em camundongos para a proteína glutationa s-transferase de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (GST-Bm), e de haemaphysalis longicornis (GST-HI).Utiumi, Kiyoko Uemura January 2008 (has links)
O carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus é um ectoparasito hematófago que infesta os rebanhos bovinos de regiões tropicais e subtropicais, e é um dos principais causadores de prejuízos econômicos à pecuária. O principal método de controle baseia-se no uso de acaricidas. No entanto, devido à crescente preocupação com os problemas criados pela poluição química do meio ambiente, ao alto custo e toxicidade das drogas e ao aparecimento de carrapatos resistentes aos acaricidas, métodos alternativos para o controle do R. microplus devem ser encontrados. Um dos métodos alternativos estudados é o uso de vacinas. As glutationa S-transferases (GST) são enzimas que estão presentes em organismos animais e vegetais e entre suas funções podem-se destacar transporte intracelular, participação em processos digestivos, síntese de prostaglandinas, e detoxificação de substâncias tóxicas e proteção contra estresse oxidativo. Neste estudo foi analisada a resposta imunológica comparativa de camundongos para a GST de R. microplus (GST-Bm) e para a GST de Haemaphysalis longicornis (GST-Hl). Ambas as proteínas foram expressas em Escherichia coli linhagem AD494, e purificadas por cromatografia de afinidade por glutationa utilizando a coluna GSTrap FF. Para verificar a imunogenicidade das proteínas, foram utilizados 25 camundongos Balb/c divididos em 12 grupos. As condições testadas foram as inoculações das proteínas GST-Bm e GST-Hl com os adjuvantes Montanide, saponina ou sem adjuvantes. Camundongos controle foram inoculados com extrato de E. coli ou somente com os adjuvantes. Foi coletado sangue de todos os animais com intervalos de sete dias durante 70 dias. Os soros foram analisados por ELISA para acompanhar a cinética da produção de anticorpos de todos os animais imunizados. Os camundongos inoculados com GST-Hl emulsificada com Montanide mostraram aumento dos níveis de anticorpos a partir do dia 21. O nível máximo de anticorpos foi detectado no dia 42, e diminuiu após o dia 56. Todos os outros animais não apresentaram aumento nos níveis de anticorpos. / Rhipicephalus (Boophilus) microplus tick is a hematophagous ectoparasite that infests cattle in tropical and subtropical regions and is one of the principal causes of economic losses in the cattle farm. The principal method of control is the use of acaricides. However, due to increased worry about environmental chemical pollution, high costs and drugs toxicity and the selection of ticks resistant to acaricides, alternative methods for R. microplus control should be developed. One of these methods is vaccination. Glutathione S-transferases (GSTs) enzymes are present in animal and vegetal organisms and the functions are intracellular transport, participation in digestive process, synthesis of prostaglandins and detoxification of toxic substances and protection against oxidative stress. In this study the immunological response of mice inoculated with R. microplus GST (GST-Bm) and with Haemaphysalis longicornis GST (GST-Hl) was analysed. Both proteins were expressed in Escherichia coli strain AD494 and were purified by affinity chromatography using GSTrap FF columm. To verify the protein immunogenicity, 25 Balb/c mice divided into 12 groups were used. The tested conditions were inoculation of GST-Bm, GST-Hl proteins with Montanide and saponin adjuvants or without adjuvant. Control mice were inoculated with E. coli extract or the adjuvant alone. Blood from all animals were collected with intervals of seven days during seventy days, the sera were analyzed by ELISA to verify the kinetic of antibodies production of all immunized animals. Mice inoculated with GST-Hl emulsified with Montanide showed an increase in the antibodies levels from day 21. The maximum level of antibodies was detected on day 42 and decreased after day 56. The other animals did not show an increase in antibodies levels.
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Produção de óxido nítrico e interferon – gama por células mononucleares do sangue periférico de bovinos infestados por Boophilus microplusPardini, Marina Marques 05 June 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008-06-05 / As infestações por carrapatos em bovinos reduzem a produtividade do gado de corte e leiteiro causando grandes perdas econômicas à pecuária. Os prejuízos acarretam desde debilidade física e transmissão de doenças ao rebanho, como anaplasmose e babesiose, até a morte dos indivíduos mais vulneráveis. Os carrapatos permanecem por longos períodos fixados em seus hospedeiros sendo expostos ao sistema de defesa do bovino, o que provoca inflamação e ativa elementos da resposta imune humoral e celular do hospedeiro. Em contrapartida, componentes imunogênicos da glândula salivar do carrapato modulam a resposta bovina para perfis de citocinas favoráveis à hematofagia. Existem poucos estudos sobre mecanismos imunes que guiam a interação parasito-hospedeiro e determinam o sucesso ou não do parasitismo. Trabalhos recentes apontam para importância de fatores genéticos relacionados à resistência ao carrapato em determinadas raças bovinas, além de estudos que mostram o papel crítico das citocinas na prevenção e progressão de quadros patológicos. O objetivo desse trabalho foi avaliar a resposta imunológica de bovinos infestados artificialmente pelo carrapato Boophilus microplus através de ensaios de proliferação celular e detecção de óxido nítrico (NO) e interferon-gama (IFN-) em células mononucleares do sangue periférico a fim de verificar diferentes níveis de resistência bovina. Seis bovinos mais resistentes e seis mais susceptíveis de uma população F2 de 332 animais, originária do cruzamento de F1 (½ Holandês : ½ Gir), foram selecionados com base na contagem de carrapatos e valor genético. Amostras de sangue foram coletadas nos pontos 0, 5º e 12º dias pós-infestação para cultura de células e estimulação in vitro com antígenos do B. microplus. A proliferação celular e os níveis de NO e IFN- foram avaliados respectivamente pelos métodos de MTT, Griess e ELISA. As células dos animais resistentes (R) tenderam ao aumento de proliferação no 5º dia quando estimuladas com antígenos do carrapato retornando aos níveis iniciais no 12° dia. Já nos animais susceptíveis (S), a estimulação pareceu inibir a proliferação das células no dia 0 e não alterou os índices do 5° e 12° dia. Apesar disso, não houve diferença significativa na proliferação celular entre os grupos R e S. Quando as células obtidas no dia 0 foram cultivadas na ausência de estímulo, os níveis de NO dos animais R tenderam a ser mais altos que dos animais S. A estimulação com antígenos de carrapato pareceu inibir a produção de NO no 5º dia por células de animais R. Também não houve diferença significativa nas produções de NO e de IFN- entre os grupos R e S. Os resultados sugerem que o NO possa ter um papel no início da resposta imune que delineia o mecanismo de resistência ao carrapato, uma vez que as alterações mais importantes foram detectadas até o 5º dia após a infestação. É possível que o mecanismo de resistência esteja associado à regulação negativa da resposta imune a fim de não incitar a modulação desta pelo carrapato, porém sendo eficaz o suficiente para eliminá-lo. A avaliação da resposta imunológica nos primeiros momentos após a fixação do carrapato no couro bovino, bem como um acompanhamento mais detalhado dos pontos temporais da infestação poderia fornecer dados mais conclusivos. / Tick infestations in cattle reduce its beef and dairy productivity causing great economic losses to livestock. The potential damages are physical weakness, transmission of diseases to the herd, as anaplasmosis and babesiosis, and even vulnerable animals deaths. Thus, the tick control has been considered priority in tropical regions worldwide. The ticks remain fixed to their hosts for long periods being exposed to the cattle defense system; it causes inflammation and activates the host’s humoral and cellular immune response. Nevertheless, immunogenic components of the salivary gland of cattle tick modulate the response to profiles of cytokines that promote the blood-feeding. There are few studies approaching immune mechanisms that lead to host-parasite interaction and determine the success or unsuccessful of parasitism. Recent works suggest the importance of genetic factors related to the resistance to ticks in Bos taurus and Bos indicus breeds. In addition, studies show the critical role of cytokines in the prevention and progression of diseases. The aimed of this work was to evaluate the immune response in cattle artificially infested by Boophilus microplus through cell proliferation assays and detection of nitric oxide (NO) and interferon-gamma (IFN-) in peripheral blood mononuclear cells, in order to establish different resistance levels in Girolando breed. Six tick-resistant and six tick-susceptible animals from a F2 population of 332 animals originated from crossing cattle F1 (½ Holstein : ½ Gir) were selected based on the ticks counting and breeding value. Blood samples were collected for cell culture and stimulation in vitro with antigens of B. microplus in the points 0, 5 and 12 days after infestation. The cell proliferation and the NO and IFN- levels were evaluated by MTT, Griess and ELISA, respectively. There was a tendency of increasing proliferation of resistant animals (R) cells in the 5th day when they were stimulated with the tick antigens, returning to initial levels at 12th day. In the other hand, for the susceptible animals (S) the stimulation seemed to inhibit proliferation of cells in day 0, and did not altered the rates of 5th and 12th day. There was no significant difference between the cell proliferation of the groups R and S. When the cells obtained in the day 0 were cultured in the absence of stimulation, the levels of NO of animals R tended to be higher than that of the animals S. The stimulation with tick antigens inhibited the NO production by cells of animals R in the 5th day. In addition, there was no significant difference in NO and IFN- production between the groups R and S. The results suggest that NO may play a role in the early immune response that outlines the mechanism of resistance to ticks, since the most important changes were detected until the 5th day after the infestation. It is possible that the resistance mechanism is associated to the downregulation of immune response in order not to encourage the modulation by the ticks, although being effective enough to eliminate it. An evaluation of the immune response in the first moments after the tick fixation to cattle leather, as well as a more detailed monitoring of the temporal points of the infestation, could provide more conclusive data.
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