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Atividade antibacteriana e citotoxicidade do agregado de trióxido mineral associado a diferentes concentrações de clorexidina

Nogueira, Indri [UNESP] 30 July 2008 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-07-30Bitstream added on 2014-06-13T18:56:31Z : No. of bitstreams: 1 nogueira_i_me_arafo.pdf: 11483795 bytes, checksum: 402542caa90307df2108ed60597e1ee5 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Para que um material seja indicado como retrobturador, é desejável que apresente várias propriedades, entre elas, intensa atividade antibacteriana e aceitável biocompatibilidade. O presente trabalho teve como objetivo avaliar, in vitro, o efeito antibacteriano e citotóxico do Agregado de Trióxido Mineral (MTA-Branco, Angelus® Indústria de Produtos Odontológicos Ltda., Londrina, PR, Brasil), associado à solução de clorexidina (CHX) em diferentes concentrações. Para a análise da atividade antibacteriana foi empregado o método de difusão em ágar Müller-Hinton e foram utilizados os microrganismos Staphylococcus aureus (ATCC - 25923), Pseudomonas aeruginosa (ATCC - 27853), Escherichia coli (ATCC - 25922) e Enterococcus faecalis (ATCC - 29262). Em placas de Petri contendo a suspensão bacteriana com meio de cultura, foram preparados poços com 4 mm de diâmetro e 5 mm de profundidade, os quais foram preenchidos com o cimento MTA preparado com água destilada estéril (G1-controle) ou com solução de CHX nas concentrações de 0,06% (G2), 0,12% (G3), 0,2% (G4) e 1% (G5). As placas foram incubadas em condições de aerobiose a 37ºC por 24 horas e os halos de inibição do crescimento bacteriano foram medidos em milímetros. Para avaliar a citotoxicidade do MTA associado às diferentes concentrações de CHX, o metabolismo e a morfologia celular foram avaliados por meio do teste do MTT e da análise da microscopia eletrônica de varredura, respectivamente. Corpos de prova de 4 mm de diâmetro e 2 mm de espessura foram preparados com as associações de materiais e imersos em 1,1 mL de meio de cultura (DMEM) por 24 horas ou por 7 dias para obtenção dos extratos. DMEM completo (grupo controle - G6) e os extratos de cada grupo foram aplicados sobre cultura de fibroblastos do ligamento periodontal de camundongos, os quais foram incubados... / An ideal root-end filling material should present several properties, including antibacterial activity and biocompatibility. The aim of this in vitro study was to investigate the antibacterial and cytotoxic effects of Mineral Trioxide Aggregate (MTA-White, Angelus® Indústria de Produtos Odontológicos Ltda., Londrina, PR, Brasil) mixed with different concentrations of chlorhexidine (CHX). For antibacterial activity analysis diffusion method on Müller-Hinton agar was employed. The bacterial strains used were Staphylococcus aureus (ATCC - 25923), Pseudomonas aeruginosa (ATCC - 27853), Escherichia coli (ATCC - 25922) e Enterococcus faecalis (ATCC - 29262). In Petri plates containing culture medium with bacterial suspension, wells were made measuring 4 mm in diameter and 5 mm in depth. The wells were completely filled with MTA mixed with sterile distilled water (G1) or with different concentrations of CHX: 0.06 % (G2), 0.12% (G3), 0.2% (G4) and 1% (G5). The plates were incubated in aerobic conditions at 37ºC for 24 hours, and then the diameters of the zones of bacterial inhibition were measured. To evaluate the cytotoxicity of the MTA mixed with different concentrations of CHX, the cell metabolism and cells morphology were evaluated by the MTT assay and scanning electron microscopy, respectively. Round-shaped samples measuring 4 mm in diameter and 2 mm in thickness were prepared with the association of materials and immersed in 1.1 mL of culture medium (DMEM) and incubated for 24 hours or 7 days. The extracts from every sample and pure DMEM (control group - G6) were applied on mouse periodontal ligament fibroblast cells culture and incubated at 37ºC with 5% CO2 and 95% air for 24 hours. The addition of CHX 1% to MTA increased the antibacterial activity of the cement against S. aureus (p <0.05). There was no statistically significant difference... (Complete abstract click electronic access below)
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Desenvolvimento e aplicação de biomateriais à base de quitosana para reconstrução óssea: avaliação radiográfica e histológica

Spin Neto, Rubens [UNESP] 17 March 2008 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-03-17Bitstream added on 2014-06-13T20:17:44Z : No. of bitstreams: 1 spinneto_r_me_arafo.pdf: 3200212 bytes, checksum: 01502221a7f7a936fbd0977a5291115e (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo desta pesquisa foi desenvolver biomateriais à base de quitosana e de cloridrato de quitosana (géis), e avaliar radiográfica e histológicamente seu uso na correção de defeitos ósseos críticos na calvária de ratos. Para tal, defeitos de 8mm de diâmetro foram criados cirurgicamente na calvária de 50 ratos Holtzman (Rattus norvegicus) e preenchidos com coágulo sanguíneo (controle), quitosana com baixo peso molecular, quitosana com alto peso molecular, cloridrato de quitosana com baixo peso molecular e cloridrato de quitosana com alto peso molecular, totalizando 10 animais, divididos em dois períodos experimentais (15 e 60 dias), para cada biomaterial. Na avaliação radiográfica foram utilizadas duas radiografias digitais dos crânios dos animais, feitas logo após a criação do defeito ósseo e no momento do sacrifício, que forneceram a densidade óssea radiográfica na área do defeito. A avaliação histológica pautou-se na descrição da morfologia dos tecidos neoformados na região do defeito. Os resultados radiográficos e histológicos indicaram que, em todos os grupos, a neoformação óssea ocorreu apenas nas bordas do defeito, e que, exceto no grupo controle, graus variados de inflamação foram observados. Conclui-se que, dentro das condições experimentais deste estudo, os biomateriais de quitosana e de cloridrato de quitosana não foram capazes de promover neoformação óssea nos defeitos ósseos críticos criados em calvária de ratos. / The purpose of this study was to develop chitosan and chitosan chloride biomaterials (gels), and to make a histological and radiographic evaluation of their use in the correction of critical size bone defects made in rat’s calvaria. Bone defects of 8mm in diameter were surgically created in the calvaria of 50 Holtzman (Rattus norvegicus) rats and filled with blood clot (control), low molecular weight chitosan, high molecular weight chitosan, low molecular weight chitosan chloride and high molecular weight chitosan chloride, numbering 10 animals, divide into two experimental periods (15 and 60 days), for each biomaterial. For the radiographic evaluation, it were made two digital radiographs of animal’s skulls, right after the creation of the bone defect and at the moment of the sacrifice, providing the radiographic bone density in defect’s area. Histological evaluation was made based on the morphology of the new formed tissues in defect’s region. Radiographic and histological results indicated that, in all groups, new bone formation occurred only near to the defect’s border, and, except in control groups, assorted degrees of inflammation could be seen. We conclude that chitosan and chitosan chloride biomaterials were not able to promote new bone formation incritical size defects made in rat’s calvaria.
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Síntese, caracterização e avaliação do potencial em drug delivery de BioMOFs (Biocompatible Metal-Organic Frameworks) de Zn (II) / Synthesis, characterization and evaluation of the potential for drug delivery of BioMOFs (Biocompatible Metal-Organic Frameworks) of Zn (II)

Lucena, Guilherme Nunes [UNESP] 29 July 2016 (has links)
Submitted by GUILHERME NUNES LUCENA null (guilherme_nunes7@hotmail.com) on 2016-08-17T13:42:12Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Final-CD.pdf: 3721142 bytes, checksum: e52f98f99b251e2672bb3539739035b1 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-08-18T14:13:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 lucena_gn_me_araiq.pdf: 3721142 bytes, checksum: e52f98f99b251e2672bb3539739035b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-18T14:13:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lucena_gn_me_araiq.pdf: 3721142 bytes, checksum: e52f98f99b251e2672bb3539739035b1 (MD5) Previous issue date: 2016-07-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Metal-Organic Frameworks (MOFs) são polímeros ou redes de coordenação que possuem estrutura aberta contendo poros potencialmente disponíveis. Por serem cristalinos, porosos, leves e possuírem valores elevados de área específica e considerável estabilidade térmica, essa nova classe de compostos vem sendo estudada em diversas áreas como armazenamento e separação de gases, catálise heterogênea, drug delivery, sensores químicos, entre outras. A possibilidade de construção desses materiais porosos usando bioelementos e ligantes orgânicos biocompatíveis ou com atividade biológica deu origem aos BioMOFs (Biocompatible Metal-Organic Frameworks). Esses compostos, além das características já descritas anteriormente, possuem baixa ou nenhuma citotoxicidade frente a células humanas, sendo adequados então para serem investigadas em drug delivery. Desta forma, objetiva-se neste trabalho realizar a síntese, caracterização e avaliação do potencial em drug delivery de BioMOFs baseados no ligante adenina e íons zinco (II). Na primeira etapa do trabalho foi investigado o efeito de alterações nas condições de síntese de um sistema já estudado na literatura (BioMOF-1 e BioMOF-100), incluindo pH e razão CTAB:Zn. Medidas de difração de raios-X do pó e ressonância magnética nuclear no estado sólido mostraram que, de uma maneira geral, as mudanças nesses parâmetros levaram à formação de um mesmo produto, o BioMOF-1. No entanto, medidas de fisissorção de N2 e fotoluminescência evidenciaram um material com porosidade e luminescência, respectivamente, distintas das observadas em seus análogos. Incrementos no pH da síntese diminuíram nucleação dos cristais do BioMOF-Zn levando a obtenção de cristais de até 31,11 µm em pH 6,75. A presença do surfactante CTAB também influenciou a nucleação dos cristais de BioMOF-Zn, sendo possível obter partículas de até 46,73 µm com o uso da razão CTAB:Zn igual a 1. Experimentos de fisissorção de N2 revelaram a natureza micro e mesoporosa do BioMOF-Zn, com diâmetros de porode 5,70 nm e área específica de 350,71 m2 g-1. Esse composto também apresenta forte emissão no visível em 465 nm quando excitado com radiação UV (λex = 365 nm). Ensaios de drug delivery mostraram que o BioMOF-Zn tem alta capacidade de adsorção de diclofenaco de sódio (1,78 g do fármaco por grama de material em 7 dias de encapsulamento). Aliado a isto, o perfil de liberação do diclofenaco em tampão PBS pH 7,4 (56% após 48 horas) revela que este material pode ser considerado um promissor candidato a carregador de fármacos aniônicos em sistemas de drug delivery. / Metal-Organic Frameworks (MOFs) are coordination polymers that have an open structure, containing potentially void porous. Being crystalline, porous, light and have high values of specific area and a considerable thermal stability, this new class of compounds has been studied in various fields such as storage and separation gas, heterogeneous catalysis, drug delivery, chemical sensors, among others. The possibility of construction of porous materials using bioelements and biocompatible organic ligands with biological activity provided the called BioMOFs (Biocompatible Metal-Organic Frameworks). Moreover, these class of materials has a low or none citotoxicity against human cells, being suitable to be investigated in drug delivery systems. Thus aim of this study is synthesis, characterization and evaluation potential of drug delivery of BioMOFs based on adenine linker and zinc (II). In the first stage of the work was investigated the effect of changes in conditions of synthesis of a system have reported, the BioMOF-1 and BioMOF-100, including pH and CTAB:Zn ratio. Powder x-ray diffraction and nuclear magnetic resonance measurements showed that in general, changes in these parameters led to the formation of a single product, the BioMOF-1.However, nitrogen adsorption and photoluminescence measurements showed a material with porosity and luminescence, respectively, different of the analogues it. Increase in pH of the synthesis decreased nucleation of BioMOF-Zn crystals, leading to obtaining crystals of up 31,11 µm at pH 6,75. The presence of CTAB surfactant also influenced BioMOF-Zn crystals nucleation, it is possible to obtain particles of up to 46,73 µm using the CTAB:Zn ratio equal to 1. Nitrogen adsorption studies showed a micro and mesoporous nature of BioMOF-Zn, with average pore size of 5.70 nm and BET surface area of 350 m2 g -1. These material also shows stronger emission in visible at 465 nm upon excited with UV ligth (λex = 365 nm). Drug delivery experiments showed that BioMOF-Zn has a high capacity for adsorption of diclofenac (1,78 drug per gram of material). Allied to this, the release profile of diclofenac in PBS buffer pH 7,4 (56% after 48 hours)reveals that this material it is a promising candidate for anionic molecules carrier in drug delivery systems. / CNPq: 830856/1999-4
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Resposta tecidual ao cimento endodôntico resinoso endorez e um cimento experimental derivado do polímero de mamona comparados ao Endofill e Sealapex : estudo morfológico /

Perassi, Fábio Tobias. January 2004 (has links)
Orientador: Idomeo Bonetti Filho / Banca: Renato de Toledo Leonardo / Banca: Lizeti Toledo de Oliveira Ramalho / Banca: Celso Kenji Nishiyama / Banca: Ivaldo Gomes de Moraes / Resumo: Seguindo critérios da ISO/FDI e ADA/ANSI, avaliou-se a resposta tecidual ao cimento EndoREZ®, um cimento experimental derivado do polímero de mamona (Poliquil®), Endofill® e Sealapex®. Tubos de polietileno contendo os cimentos e o grupo controle, foram implantados em duas lojas cirúrgicas preparadas no tecido subcutâneo dorsal de 26 camundongos Mus muscullus albinus machos. Após 7 e 50 dias os animais foram mortos e removidos cirurgicamente os fragmentos teciduais, os quais foram fixados por 96 horas em solução de formol tamponado e processado através das técnicas histológicas de rotina. Seções de 6mm de espessura foram coradas com Hematoxilina e Eosina e Tricrômico de Mallory, e avaliadas com o emprego de microscópio óptico comum (Carl Zeiss - Jenaval). As análises mostraram, discreto ou moderado infiltrado inflamatório dos materiais testados durante os dois períodos, com exceção do cimento experimental derivado do polímero de mamona, o qual apresentou ótimo comportamento biológico mostrando seu potencial para o desenvolvimento de um novo material obturador de canais radiculares. / Abstract: According to ISO/FDI and ADA/ANSI criteria, it was evaluated tissue responses of EndoREZ, Castor Oil Polymer Sealer, Endofill and Sealapex. Polyethylene tubes containing the cements and control group, were implanted into two surgical pockets prepared in the dorsal subcutaneous tissue of 26 rats. After 7 and 50 days, the implants were surgically removed, fixed for 96 hours in buffered formalin and processed using routine histological techniques. Sections of 6 mm were stained with Hematoxylin and Eosin and evaluated under light microscopy. Analysis revealed mild and moderate inflammatory infiltrate for all materials in both periods, exception to Castor Oil Polymer Sealer that presented better biological behavior. / Doutor
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Desenvolvimento e aplicação de biomateriais à base de quitosana para reconstrução óssea : avaliação radiográfica e histológica /

Spin Neto, Rubens. January 2008 (has links)
Orientador: Elcio Marcantonio Junior / Banca: Lizeti Toledo de Oliveira Ramalho / Banca: Luís Antônio Violin Dias Pereira / Resumo: O objetivo desta pesquisa foi desenvolver biomateriais à base de quitosana e de cloridrato de quitosana (géis), e avaliar radiográfica e histológicamente seu uso na correção de defeitos ósseos críticos na calvária de ratos. Para tal, defeitos de 8mm de diâmetro foram criados cirurgicamente na calvária de 50 ratos Holtzman (Rattus norvegicus) e preenchidos com coágulo sanguíneo (controle), quitosana com baixo peso molecular, quitosana com alto peso molecular, cloridrato de quitosana com baixo peso molecular e cloridrato de quitosana com alto peso molecular, totalizando 10 animais, divididos em dois períodos experimentais (15 e 60 dias), para cada biomaterial. Na avaliação radiográfica foram utilizadas duas radiografias digitais dos crânios dos animais, feitas logo após a criação do defeito ósseo e no momento do sacrifício, que forneceram a densidade óssea radiográfica na área do defeito. A avaliação histológica pautou-se na descrição da morfologia dos tecidos neoformados na região do defeito. Os resultados radiográficos e histológicos indicaram que, em todos os grupos, a neoformação óssea ocorreu apenas nas bordas do defeito, e que, exceto no grupo controle, graus variados de inflamação foram observados. Conclui-se que, dentro das condições experimentais deste estudo, os biomateriais de quitosana e de cloridrato de quitosana não foram capazes de promover neoformação óssea nos defeitos ósseos críticos criados em calvária de ratos. / Abstract: The purpose of this study was to develop chitosan and chitosan chloride biomaterials (gels), and to make a histological and radiographic evaluation of their use in the correction of critical size bone defects made in rat's calvaria. Bone defects of 8mm in diameter were surgically created in the calvaria of 50 Holtzman (Rattus norvegicus) rats and filled with blood clot (control), low molecular weight chitosan, high molecular weight chitosan, low molecular weight chitosan chloride and high molecular weight chitosan chloride, numbering 10 animals, divide into two experimental periods (15 and 60 days), for each biomaterial. For the radiographic evaluation, it were made two digital radiographs of animal's skulls, right after the creation of the bone defect and at the moment of the sacrifice, providing the radiographic bone density in defect's area. Histological evaluation was made based on the morphology of the new formed tissues in defect's region. Radiographic and histological results indicated that, in all groups, new bone formation occurred only near to the defect's border, and, except in control groups, assorted degrees of inflammation could be seen. We conclude that chitosan and chitosan chloride biomaterials were not able to promote new bone formation incritical size defects made in rat's calvaria. / Mestre
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Atividade antibacteriana e citotoxicidade do agregado de trióxido mineral associado a diferentes concentrações de clorexidina /

Nogueira, Indri. January 2008 (has links)
Orientador: Elisa Maria Aparecida Giro / Banca: Carlos Alberto de Souza Costa / Banca: João Eduardo Gomes Filho / Resumo: Para que um material seja indicado como retrobturador, é desejável que apresente várias propriedades, entre elas, intensa atividade antibacteriana e aceitável biocompatibilidade. O presente trabalho teve como objetivo avaliar, in vitro, o efeito antibacteriano e citotóxico do Agregado de Trióxido Mineral (MTA-Branco, Angelus® Indústria de Produtos Odontológicos Ltda., Londrina, PR, Brasil), associado à solução de clorexidina (CHX) em diferentes concentrações. Para a análise da atividade antibacteriana foi empregado o método de difusão em ágar Müller-Hinton e foram utilizados os microrganismos Staphylococcus aureus (ATCC - 25923), Pseudomonas aeruginosa (ATCC - 27853), Escherichia coli (ATCC - 25922) e Enterococcus faecalis (ATCC - 29262). Em placas de Petri contendo a suspensão bacteriana com meio de cultura, foram preparados poços com 4 mm de diâmetro e 5 mm de profundidade, os quais foram preenchidos com o cimento MTA preparado com água destilada estéril (G1-controle) ou com solução de CHX nas concentrações de 0,06% (G2), 0,12% (G3), 0,2% (G4) e 1% (G5). As placas foram incubadas em condições de aerobiose a 37ºC por 24 horas e os halos de inibição do crescimento bacteriano foram medidos em milímetros. Para avaliar a citotoxicidade do MTA associado às diferentes concentrações de CHX, o metabolismo e a morfologia celular foram avaliados por meio do teste do MTT e da análise da microscopia eletrônica de varredura, respectivamente. Corpos de prova de 4 mm de diâmetro e 2 mm de espessura foram preparados com as associações de materiais e imersos em 1,1 mL de meio de cultura (DMEM) por 24 horas ou por 7 dias para obtenção dos extratos. DMEM completo (grupo controle - G6) e os extratos de cada grupo foram aplicados sobre cultura de fibroblastos do ligamento periodontal de camundongos, os quais foram incubados... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: An ideal root-end filling material should present several properties, including antibacterial activity and biocompatibility. The aim of this in vitro study was to investigate the antibacterial and cytotoxic effects of Mineral Trioxide Aggregate (MTA-White, Angelus® Indústria de Produtos Odontológicos Ltda., Londrina, PR, Brasil) mixed with different concentrations of chlorhexidine (CHX). For antibacterial activity analysis diffusion method on Müller-Hinton agar was employed. The bacterial strains used were Staphylococcus aureus (ATCC - 25923), Pseudomonas aeruginosa (ATCC - 27853), Escherichia coli (ATCC - 25922) e Enterococcus faecalis (ATCC - 29262). In Petri plates containing culture medium with bacterial suspension, wells were made measuring 4 mm in diameter and 5 mm in depth. The wells were completely filled with MTA mixed with sterile distilled water (G1) or with different concentrations of CHX: 0.06 % (G2), 0.12% (G3), 0.2% (G4) and 1% (G5). The plates were incubated in aerobic conditions at 37ºC for 24 hours, and then the diameters of the zones of bacterial inhibition were measured. To evaluate the cytotoxicity of the MTA mixed with different concentrations of CHX, the cell metabolism and cells morphology were evaluated by the MTT assay and scanning electron microscopy, respectively. Round-shaped samples measuring 4 mm in diameter and 2 mm in thickness were prepared with the association of materials and immersed in 1.1 mL of culture medium (DMEM) and incubated for 24 hours or 7 days. The extracts from every sample and pure DMEM (control group - G6) were applied on mouse periodontal ligament fibroblast cells culture and incubated at 37ºC with 5% CO2 and 95% air for 24 hours. The addition of CHX 1% to MTA increased the antibacterial activity of the cement against S. aureus (p <0.05). There was no statistically significant difference... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Avaliação histomorfométrica comparativa do processo de reparo de defeitos ósseos perenes em calvária de ratos tratados com -fosfato tricálcio, hidroxiapatita sintética, hidroxiapatita sintética + -fosfato tricálcio e osso autógeno / Histomorphometric comparative evaluation of the repair of perennial bone defects in rats skulls treated with -tricalcium phosphate, synthetic hydroxyapatite, synthetic hydroxyapatite + -tricalcium phosphate and autogenous graft

Angélica Cristina de Oliveira Martins 26 April 2010 (has links)
Os objetivos do trabalho foram caracterizar as biocerâmicas a base de hidroxiapatita (HA), -fosfato tricálcio (TCP) e o compósito HA/TCP na proporção 60:40 pela análise microestrutural e por Espectrometria de Energia Dispersiva de Raios-X (EDS) ao microscópio eletrônico de varredura, e comparar histomorfometricamente o processo de reparo ósseo de defeitos cranianos perenes tratados com essas três diferentes cerâmicas e o enxerto autógeno nos períodos de 0, 30, 90 e 180 dias pós-operatório. Microestruturalmente, a HA apresentou superfície irregular com concavidades, fendas e grande quantidade de microporos; o TCP exibiu superfície irregular e baixa resistência mecânica; a HA/TCP apresentou superfície lisa com raras concavidades e ausência de porosidades. As cerâmicas estavam constituídas pelos elementos O, P e Ca, sendo que a relação Ca/P seguiu a ordem: HA/TCP > HA > TCP. Morfometricamente, o volume inicial enxertado foi aproximadamente de 60 mm3 para todos os tratamentos. Entre 30 e 180 dias, o volume total da região do enxerto (Vtre) e do material enxertado (VM) manteve-se constante nos defeitos tratados com osso autógeno (Vtre = 53,61 mm³, VM =20,11 mm³), HA (Vtre = 60,13mm³, VM = 32,72 mm³), HA/TCP (Vtre = 57,60mm³, VM = 31,61 mm³), TCP (Vtre = 38,27mm3, VM = 10,07 mm³). Aos 30 dias, o volume de tecido ósseo no grupo autógeno foi de 22,06 mm³, ocupando quase a totalidade dos espaços entre as partículas, enquanto que, nos grupos HA e HA/TCP foi de apenas 7,62 mm³, sendo parte dos espaços (19,10 mm3), constituído por tecido conjuntivo fibroso. Entre 30 e 180 dias, o volume de tecido ósseo não apresentou diferenças estatísticas significantes (p>0,05). O número absoluto de osteoblastos e osteócitos no grupo autógeno foi, respectivamente, de 118,57 x102 e 178,57 x102 células, aos 30 dias, diminuindo 40,16% e 29,09% aos 90 dias, decorrente do processo de remodelação óssea. Nos grupos HA e HA/TCP, o número absoluto de osteoblastos e osteócitos foram similares e permaneceram constantes dos 30 aos 180 dias, com uma média de 39,13 x102 e 132,20 x102 células, respectivamente. Com relação ao grupo TCP, o volume de tecido ósseo foi de 4,16mm3 aos 30 dias e aumentou 70,27% aos 90 dias, passando a ocupar 13,93 mm³ do Vtre. Concomitantemente, o número absoluto de osteoblastos e osteócitos passaram, respectivamente, de 5,64 x102 e 37,01 x102 células, aos 30 dias, para 67,46 x102 e 166,13 x102 células, aos 90 dias. Baseados nos resultados aqui obtidos, concluímos que, no modelo experimental de defeitos cranianos em ratos, o enxerto autógeno é ainda, o padrão ouro para reconstrução óssea, enquanto que, dentre as cerâmicas analisadas, o TCP é o melhor biomaterial ósseo-substituto. / The aim of the work was to characterize the ceramics: hydroxyapatite (HA), -tricalcium phosphate (TCP) and the composite HA/TCP (60:40) through scaning electron microscope - energy dispersive system (SEM-EDS) analysis and to compare histomorphometrically the repair of perennial skull defects treated with these three different ceramics and autogenous graft at 0, 30, 90 and 180 days post-operatively. Microstructurally, HA showed irregular surface with concavities, cracks and several pores. TCP also presented irregular surface and low mechanical strength. HA/TCP showed smooth surface with rare concavities and pores. The ceramics were constituted by the elements O, P and Ca, and the relation Ca/P follow the order: HA/TCP > HA > TCP. Morphometrically, the initial graft volume was approximately 60 mm3 for all treatments. Between 30 and 180 days, the total volume of the grafted area (Vtga) and of the implanted material (Vim) were constant in the following groups: autogenous (Vtga = 53,61 mm³; Vim = 20,11 mm3), HA (Vtga = 60,13mm³; Vim = 32,72 mm3), HA/TCP (Vtga = 57,60mm³; Vim = 31,61 mm3) and TCP (Vtga = 38,27mm³; Vim = 10,07 mm3). At 30 days, the bone tissue volume was of 22,06 mm3 in the autogenous group, occupying totally the space among the particles, while in the HA and HA/TCP groups was only 7,62 mm3. At 30 and 180 days, the bone tissue volume did not show statistical differences (p>0.05). The total number of osteoblasts and osteocytes in the autogenous group was respectively, 118, 57 x 102 and 178,57 x 102 cells, at 30 days, reducing 40,16% e 29,09%, at 90 days, due to bone remodeling. In the HA and HA/TCP groups, a similar and stable number of osteoblasts and osteocytes were observed during all periods, with mean of 39,13 x 102 and 132,20 x 102 cells, respectively. In the TCP group, the bony tissue volume was of 4,16 mm3, at 30 days, increasing 70,27% at 90 days. Concomitantly, the total number of osteoblasts and osteocytes was respectively, 5,64 x 102 and 37,01 x 102 cells, at 30 days, achieving 67,46 x 102 and 166,13 x 102 cells, at 90 days. Based in the results obtained here, we concluded that in the rat skull defect model the autogenous bone is yet the good standard graft material for bone reconstruction and that among the tested ceramics, the TCP is the best bone graft substitute.
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Resposta in vitro de células pré-osteoblásticas em cerâmica de hidroxiapatita

Luara Aline Pires 08 April 2015 (has links)
Com a evolução do Biomateriais houve melhorias nas opções de tratamentos e atualmente são utilizados em substituição de partes do corpo que foram perdidas e promovem a recuperação de funções biológicas. Dentre eles existem as chamadas Biocerâmicas, que incluem alumina, zircônia e derivadas de fosfato de cálcio. A hidroxiapatita possui composição e estrutura minerais semelhantes à fase mineral óssea e apresenta como propriedades a biocompatibilidade, osteocondutividade e bioatividade. O trabalho avaliou a viabilidade celular em cerâmica de hidroxiapatita experimental de origem bovina em comparação com dois tipos de zircônia comerciais e liga de titânio comercialmente puro, para que futuramente possa ser utilizada como material base para implantes dentários. A avaliação in vitro foi realizada por meio de testes nos quais células pré-osteoblásticas cultivadas de linhagem murina MC3T3-E1 foram colocadas em contato indireto e direto com estes materiais. Para viabilidade celular (n=8) foram feitos testes de ensaio MTT e Cristal Violeta em duplicata e após 24, 48 e 72 horas os níveis de absorbâncias foram analisados por meio de espectrofotometria no leitor de Elisa. Para as analises por microscopia eletrônica de varredura (n=6) as células foram plaqueadas diretamente sobre as superfícies dos discos, fixadas em vapor de tetróxido de ósmio 2% após 24 e 48 horas, seguido da metalização após 48 horas da fixação das células para análise em Microscópio Eletrônico de Varredura. Os resultados para viabilidade indireta foram submetidos ao teste paramétrico ANOVA, seguido de teste de Tukey (p<0,05). Tanto no teste de MTT quanto no Cristal Violeta, de acordo com o grupo controle positivo, todos os grupos apresentaram resultados satisfatórios. A cerâmica de hidroxiapatita não apresentou diferença estatística significante, demonstrando não ser um material citotóxico. Pelas imagens geradas no MEV do teste de viabilidade direta, verificou-se que houve adesão e proliferação das células nos dois períodos sobre as superfícies dos materiais. Portanto, pode-se afirmar que a cerâmica de hidroxiapatita apresentou-se como um material biocompatível. / With the evolution biomaterials there were improvements in treatment options, and are currently used in replacement body parts that were lost and promote the recovery of biological functions. Among them are the bioceramic which include alumina, zirconia and calcium phosphate derivative. Hydroxyapatite has mineral composition and structure similar to bone mineral phase and can be used as a biomaterial having biocompatibility, osteoconductivity and bioactivity. The study evaluated the cell viability in experimental hydroxyapatite ceramic bovine compared the two types of commercial zirconia and titanium alloy commercially pure, so that in future it can be used as base material for dental implants. In vitro evaluation was carried by means of tests in which the pre-osteoblastic cells MC3T3-E1 murine lineage cultured were placed in indirect and direct contact with these materials. For cell viability (n=8) were carried MTT assay and Crystal Violet tests in duplicate and after 24, 48 and 72 hours the absorbance levels were analyzed by spectrophotometry Elisa reader. For analysis by Scanning Electron Microscope variable pressure (n = 6) cells were plated directly on the discs surfaces, fixed in osmium tetroxide steam 2% after 24 and 48 hours, followed by metallization after 48 of cells fixation. The results for the cell viability were submitted to parametric test ANOVA, followed by Tukey test (p<0.05). Both in the MTT assay as Crystal Violet all groups exhibited satisfactory results absent cytotoxicity. By means of the SEM images produced, it was found that there was adhesion and proliferation of cells on the materials surfaces in the two periods. Therefore, it can be stated that the hydroxyapatite ceramic was presented as a biocompatible material.
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Avaliação da resistência a tração de diferentes enxertos em calvária de ratos / Evaluation of the tensile strength of different grafts in rat calvaria

Jefferson Tomio Sanada 15 December 2010 (has links)
A perda do osso alveolar como resultado de doença periodontal ou secundariamente à cirurgia são fontes de inúmeras complicações para os cirurgiões dentistas, e a solução para tal problema se baseiam em procedimentos regenerativos, que é realizada através de enxertos ósseos que estabelecem um arcabouço para a reparação tecidual, aumentando os tecidos ósseos nos defeitos resultantes de trauma ou cirurgias, preenchendo os alvéolos após extração para preservar a altura e espessura do rebordo alveolar e aumentando e/ou reconstruindo o rebordo alveolar. Este projeto tem como objetivo determinar a resistência à tração do osso neoformado com a utilização de diferentes biomateriais. Foram utilizados 60 animais divididos em 3 grupos. O grupo 1A (n=10): GenO; Grupo 1B (n=10): GenMix; Grupo1C (n=10): Bio-Oss; Grupo 2a (n=10): PerioGlas; Grupo 2b (n=10): Polímero de mamona e Grupo 3 (n=10): coágulo. Após 3 meses de nascimento os animais foram submetidos a anestesia intraperitonial e confecção de defeito não critico (3mm de diâmetro) na calvária dos animais, que foram preenchidos com os biomateriais correspondentes a cada grupo. Após 6 meses da cirurgia foi realizada a morte dos animais, os espécimes foram coletados e submetidos ao teste em uma máquina de teste universal. Observa-se que o grupo que obteve maior média de resistência à tração foi o grupo de polímero de mamona (10,932±4,529MPa). Consequentemente, obteve-se uma comparação descrescente na seguinte ordem: Coágulo (9,563±3,74MPa), Bio-Oss (8,706±4,087MPa), GenMix (8,587±3,602MPa), GenOx (7,709±2,416MPa), PerioGlas (7,185±6,837MPa), não notando-se diferença estatisticamente significante entre os grupos. Nas microscopias eletrônicas de varredura na maioria dos grupos observou-se presença de fibras colágenas ao redor do tecido ósseo neoformado e dos remanescentes de enxerto. Conclui-se que o material foi indiferente para o resultado final da resistência à tração, demonstrando uma boa qualidade dos materiais utilizados, tanto quando comparamos os produtos quanto a sua origem (xenogênica, polimérica ou coágulo), ou a sua procedência de fabricação (nacional ou importado). / The loss of alveolar bone as a result of periodontal disease or secondary to surgery are numerous sources of complications for the dentists, and the solution to this problem are based on regenerative procedures, which is conducted through bone grafts that provide a scaffold for tissue repair by increasing the bone tissues in the defects resulting from trauma or surgery, filling the alveoli after extraction to preserve the height and thickness and increasing the alveolar ridge and/or reconstructing the alveolar ridge. This project aims to determine the tensile strength of newly formed bone with the use of different biomaterials. We used 60 animals divided into three groups. Group 1A (n = 10): GenOx; Group 1B (n = 10): GenMix; Group 1C (n = 10): Bio-Oss; Groups 2a (n = 10): PerioGlas; Group 2b (n = 10): castor bean polymer; Group 3 (n = 10): clot. After 3 months of birth the animals were anesthetized intraperitoneally and making non critical defect (3mm diameter) in the calvaria of the animals, which were filled with biomaterials for each group. After 6 months of surgery was performed the animals\' death, the specimens were collected and tested in a universal testing machine. It is observed that the group had a higher average tensile strength was the castor oil polymer group (10.932 ± 4.529 MPa). Consequently, we obtained a comparison descended in the following order: Clot (9.563 ± 3.74 MPa), Bio-Oss (8.706 ± 4.087 MPa), GenMix (8.587 ± 3.602 MPa), GenOx (7.709 ± 2.416 MPa), PerioGlas (7.185 ± 6.837 MPa), not noticing a significant difference between the groups. In scanning electron microscopies in most groups there was presence of collagen fibers around the newly formed bone and remaining graft. It is concluded that the material was irrelevant to the final result of the tensile strength, showing a good quality of materials used, both when comparing products as their source (xenogenic, polymeric or clot), or its origin of manufacture (national or imported).
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Avaliação da resistência e módulo de elasticidade de osso mineralizado e desmineralizado pelos testes de microtração / Evaluation of the resistance and modulus of elasticity of bone mineralized and desmineralized for the tests of microtensile

Jefferson Tomio Sanada 28 March 2007 (has links)
A perda do osso alveolar como resultado de doença periodontal ou secundariamente à cirurgia são fontes de inúmeras complicações para os cirurgiões dentistas, e a solução para tal problema se baseiam em procedimentos regenerativos. A regeneração é feita através de enxertos ósseos que estabelecem um arcabouço para a reparação tecidual, aumentando os tecidos ósseos nos defeitos resultantes de trauma ou cirurgias, preenchendo os alvéolos após extração para preservar a altura e espessura do rebordo alveolar e aumentando e/ou reconstruindo o rebordo alveolar. Estes procedimentos são realizados através da utilização de enxertos autógenos, alógenos, aloplásticos ou xenogênicos, tendo cada um suas características e indicações. Com o desenvolvimento dos implantes osseointegrados, viu-se a necessidade de manter uma boa quantidade e qualidade óssea. Este projeto tem como objetivo avaliar a resistência a tração e módulo de elasticidade do osso mineralizado e desmineralizado de calvária de ratos, a fim de determinar padrões iniciais (máximos e mínimos) para comparações com possíveis biomateriais de preenchimento de osteoindução e osteocondução. Foram utilizados 24 animais divididos em 2 grupos. O grupo 1 (n=12): módulo de elasticidade sendo que utilizaremos as duas parietais do animal, possibilitando 24 espécimes, subdividido em mineralizado (n=12) e desmineralizado (n=12). O grupo 2 (n=12): microtração, sendo que 12 hemicalvária foram utilizado para o sub-grupo desmineralizado e as outras 12 hemicalvária para o sub-grupo mineralizado. Após a morte dos animais, os espécimes serão coletados e tratados de acordo com o subgrupo (mineralizado e desmineralizado). Os testes foram realizados numa máquina de teste universal (Vitrodyme, V1000). As médias de resistência a tração do mineralizado foi 129,814 ± 34,921 MPa e o desmineralizado foi 18,547 ± 3,682 MPa. Para o módulo de elasticidade obtivemos os valores de 1377,792 ± 208,331 MPa para o grupo mineralizado e 49,669 ± 11,204 MPa para o grupo desmineralizado, ao compararmos o módulo de elasticidade e resistência a tração entre os subgrupo desmineralizado e mineralizado observa-se uma diferença estatisticamente significante para o grupo mineralizado (p<0,001). Conclui-se que o teste de microtração pode ser utilizado para avaliar as propriedades mecânicas nesse modelo experimental biológico. / The loss of the alveolar bone as resulted of periodontal illness or second to the surgery is sources of innumerable complications for the surgeons dentists, and the solution for such problem if it bases on regenerative procedures. Regeneration is made through bone grafts that establish one scaffold for the tecidual repairing, increasing bone fabrics in the resultant defects of trauma or surgeries, filling the alveolous after extraction to preserve the height and thickness of the alveolar rigde and being increased and/or reconstructing the alveolar rigde. These procedures are carried through the use of autogenous, alografts, aloplastic or xenogenics grafts, having each one its characteristics and indications. With the development of the osseointegrated implants, it was seen necessity to keep a good amount and bone quality. This project has as objective to evaluate the resistance the traction and modulus of elasticity of the mineralized bone and desmineralized.of calvarium of rats, similar to determine initial standards (maximum and minimum) for comparisons with possible biomateriais of fulfilling of osteoinduction and osteoconduction. 24 animals divided in 2 groups had been used. Group 1 (n=12): modulus of elasticity being that we will use the two parietals of the animal, having made possible 24 specimens, subdivided in mineralized (n=12) and desmineralized (n=12). Group 2 (n=12): microtraction, being that 12 hemi-calvarium had been used for 12 the desmineralized sub-group and the others hemi-calvarium for the mineralized sub-group. After the death of the animals, the specimens will be collected and treated in accordance with the sub-group (mineralized and desmineralized). The tests had been carried through in a machine of universal test (Vitrodyme, V1000). The resistance averages the traction of the mineralized one was mineralized 129,814 ± 34.921 MPa and the desmineralized one was 18,547 ± 3,682 MPa. For the modulus of elasticity we got values of 1377,792 ± 208.331 MPa for the mineralized group and 49,669 ± 11,204 MPa for the desmineralized group, when comparing the resistance and modulus of elasticity the traction between the desmineralized and mineralized sub-group observes a estatistical significant difference for the mineralized group (p<0,001). Concluded that the microtraction test can be used to evaluate the mechanical properties in this biological experimental model.

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