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Atividades biológicas dos alcaloides de Annona crassiflora Mart. / Biological activities of alkaloids of Annona crassiflora Mart.

Edgar Miguel Peña Hidalgo 27 October 2017 (has links)
Annona crassiflora é uma espécie nativa do cerrado brasileiro, conhecida pelo uso popular como alimento e na etnofarmacologia para o tratamento de parasitas do couro cabeludo e de transtornos menstruais. Quimicamente, Annonaceae é conhecida pela produção de acetogeninas e alcaloides benzilisoquinolínicos, dentro dos quais o gênero Annona apresenta a maior diversidade de compostos aporfínicos. O objetivo central deste trabalho foi avaliar potenciais atividades biológicas para Annona crassiflora, relacionadas a sua composição alcaloídica. A análise do extrato foliar de A. crassiflora através de técnicas cromatográficas, espectrométricas e por ressonância magnética nuclear levou a detecção de oito compostos nitrogenados, sendo sete deles identificados: anonaina, annoretina, estefalagina e xilopina, já previamente descritos na espécie, litseglutina B e tetrahidropalmatrubina, identificados pela primeira vez no gênero, e um alcaloide aporfínico inédito proposto como crassiflorina, em homenagem a espécie. A partir das amostras obtidas, foram desenvolvidos diversos ensaios de atividades biológicas, sendo testado o potencial fitotóxico, a atividade antimicrobiana frente as bactérias (Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa e Bacillus subtilis), a inibição de atividade enzimática (acetilcolinesterase e transcriptase-reversa do HIV1) e a atividade antiparasitária (amastigotas e tripomastigotas de Trypanosoma cruzi). Somente dois dos alcaloides identificados, estefalagina e xilopina, foram isolados em quantidades suficientes para alguns bioensaios. De maneira geral, a estefalagina apresentou maior efeito inibitório no alongamento dos coleóptilos de trigo, além de melhores resultados nos ensaios de inibição de atividade enzimática (acetilcolinesterase e HIV1-RT). A xilopina foi mais eficiente nos ensaios fitotóxicos com braquiária (Urochloa decumbens) e com o parasita causador da doença de Chagas (Trypanossoma cruzi). Resultados interessantes com a fração enriquecida em alcaloides também foram obtidos para os ensaios fitotóxicos com espécies-alvo (Lactuca sativa e Lycopersicon esculentum) e antimicrobianos. Estes resultados reforçam o grande potencial biológico dos alcaloides produzidos por Annona crassiflora, sendo, a maioria das atividades descritas neste trabalho, inéditas para estas subtâncias / Annona crassiflora is a native species of Brazilian cerrado, used as food for local people and for treatment of scalp parasites and menstrual disorders in folk medicine. Chemically, Annonaceae is known for the production of acetogenins and benzylisoquinoline alkaloids, within which the Annona genus presents the greatest diversity of aporphine compounds. The aim of this work was to evaluate potential biological activities for Annona crassiflora, related to its alkaloid composition. The analysis of the foliar extract of A. crassiflora by chromatographic, spectrometric and nuclear magnetic resonance techniques led to the detection of eight nitrogen compounds. Seven of which were identified: anonaine, annoretine, stephalagine and xylopine, previously described in the species, litseglutine B and tetrahydropalmatrubine, as first report for the genus, and an unpublished aporphic alkaloid proposed as crassiflorine, in honor of the species. From the obtained samples, several biological assays were developed, being tested the phytotoxic potential, the antimicrobial activity against three bacteria (Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa and Bacillus subtilis), the inhibition of enzymatic activity (acetylcholinesterase and transcriptase-reverse of HIV1) and the antiparasitic activity (amastigotes and trypomastigotes of Trypanosoma cruzi). Only two of the identified alkaloids, stephalagine and xylopine, were isolated in sufficient amounts for some bioassays. In general, stephalagine had significant inhibitory effect on wheat coleoptile elongation, as well as strong results in inhibition of enzymatic activity (acetylcholinesterase and HIV1-RT). Xylopine was more efficient in phytotoxic trials with Urochloa decumbens, and with the parasite that causes Chagas disease (Trypanosoma cruzi). Interesting results with an alkaloid enriched fraction were also obtained for the phytotoxic assays with target species (Lactuca sativa and Lycopersicon esculentum) and antimicrobials. These results reinforce the great biological potential of the alkaloids produced by Annona crassiflora. As the best of our knowledge, most of the activities described in this work are unpublished for these compounds
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Perfil químico e atividades biológicas de Croton echinocarpus Baill. e Croton vulnerarius Müll.Arg / Chemical profile and biological activities of Croton echinocarpus Baill. and Croton vulnerarius Müll.Arg

Natália Ravanelli Athayde 19 November 2013 (has links)
O gênero Croton abriga aproximadamente 1300 espécies, muitas delas reconhecidas pela sua utilização terapêutica, que se deve a presença de grande diversidade de metabólitos secundários. Tais propriedades foram ponto de partida para investigações sobre as propriedades fitoquímicas do gênero. C. vulnerarius e C. echinocarpus são espécies endêmicas do Brasil pertencentes à seção Cyclostigma e até então pouco estudadas. Neste projeto foram extraídos, identificados e isolados componentes químicos destas espécies e analisadas as suas propriedades bioativas (antioxidante, antimicrobiana e anti-HIV). Foi verificado que, diferentemente de outras espécies da mesma seção, C. echinocarpus e C. vulnerarius não apresentam diterpenos em sua composição. No entanto, C. echinocarpus possui entre seus principais componentes um alcaloide, identificado por espectrometria de massas como coridina. Em relação às substâncias fenólicas, observamos que as espécies possuem perfis semelhantes, com alguns flavonoides em comum, sendo que o principal componente de C. echinocarpus é a apigenina vitexina e de C. vulnerarius , o derivado de campferol tilirosídeo. Em relação às atividades biológicas, foi verificado que ambas as espécies possuem potencial antioxidante e antimicrobiano contra espécies de bactérias Gram negativas, especialmente nos extratos mais ricos em compostos fenólicos. Quanto à ação anti-HIV, foi observado que a fração contendo o alcaloide coridina isolado apresentou um grande potencial de atividade anti transcriptase reversa, atingindo valores acima de 90% de atividade, mesmo para a menor concentração testada / Croton comprises approximately 1,300 species, many of them known for their therapeutic uses, which is due to the presence of a large diversity of secondary metabolites. Those properties were the starting point for research on the phytochemical characteristics of the genus. C. vulnerarius e C. echinocarpus are Brazilian endemic species belonging to section Cyclostigma. This project aimed the extraction, identification and isolation of chemical constituents from both species and the analyze of the bioactive properties of such constituents (antioxidant, antimicrobial and anti-HIV). It was found that, unlike other species of the same section, C. echinocarpus and C. vulnerarius does not present diterpenes in their composition. However, C. echinocarpus showed alkaloids among its main constituents, one of them identified by mass spectrometry as coridine. Regarding the phenolic substances, we observed that the two species have similar profiles, with some flavonoids in common. C. echinocarpus presents the flavone C-glycosylated vitexin as its main flavonoid constituent, while C. vulnerarius has the acylated derivative of kaempferol, tiliroside. Regarding the biological activities, both species showed antioxidant potential; antimicrobial effects against Gram-negative bacteria, especially the extracts richer in vitexin; and anti-HIV activity, where the fraction containing the alkaloid coridine showed great potential, reaching values above 90% of the anti-HIV activity, even when the lowest concentration was tested (100 mg.mL-1)
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Estudo de antioxidantes, potencial bioativo e composição química de Chnoospora minima, Dictyopteris plagiogramma, Padina gymnospora, Sargassum cymosum (Ochrophyta) e Codium isthmocladum (Chlorophyta) / Study of antioxidants, bioactive potential and chemical composition of Chnoospora minima, Dictyopteris plagiogramma, Padina gymnospora, Sargassum cymosum (Ochrophyta) and Codium isthmocladum (Chlorophyta)

Amorim, Ana Maria Pereira Barreto 12 November 2018 (has links)
As macroalgas marinhas constituem uma importante fonte de produtos naturais, devido à sua composição química, rica em substâncias fenólicas, terpenos e polissacarídeos sulfatados, apresentando potencial biotecnológico como fonte de substâncias com atividade antioxidante, antiviral, antitumoral e antibacteriana. Nesse sentido, o objetivo do presente estudo foi avaliar o potencial de prospecção de macroalgas do litoral do Espírito Santo (ES), mediante estudos dos potenciais antioxidante e bioativo de extratos brutos de quatro espécies de algas pardas (Chnoospora minima, Dictyopteris plagiogramma, Padina gymnospora e Sargassum cymosum) e de uma espécie de alga verde (Codium isthmocladum). A caracterização inicial dos extratos acetato de etila e metanólico das algas pardas, demonstrou a presença de constituintes com características distintas, indicando que pertencem à diferentes classes fenólicas. Os extratos metanólicos e aquosos das cinco espécies apresentaram os maiores rendimentos, sendo utilizados para análise do potencial antioxidante e bioativo. O extrato metanólico de P. gymnospora apresentou o maior potencial antioxidante e o maior teor de substâncias fenólicas totais pelo ensaio Folin-Ciocalteu, indicando o potencial dessa espécie como ingrediente funcional e na busca de substâncias antioxidantes naturais. As espécies analisadas apresentaram potencial bioativo (antiviral e antitumoral), sendo que os extratos aquosos foram mais ativos, quando comparados aos metanólicos. O maior potencial antiviral foi encontrado nos extratos aquosos de P. gymnospora, S. cymosum e C. isthmocladum, e o maior potencial antitumoral nos extratos aquosos de D. plagiogramma e C. isthmocladum. Tanto o potencial antiviral, como antitumoral podem estar relacionados à presença de substâncias fenólicas e polissacarídeos sulfatados nos extratos. Os resultados obtidos demonstram que as espécies estudadas, principalmente D. plagiogramma, P. gymnospora, S. cymosum e C. isthmocladum, apresentam potencial para prospecção de produtos naturais / Marine macroalgae are an important source of natural products, due to their chemical composition, rich in phenolic substances, terpenes and sulphated polysaccharides, presenting biotechnological potential as a source of substances with antioxidant, antiviral, antitumor and antibacterial activity. In this sense, the objective of the present study was to evaluate the potential of macroalgae prospecting on the coast of Espírito Santo (ES), through studies of the antioxidant and bioactive potentials of crude extracts of four species of brown seaweeds (Chnoospora minima, Dictyopteris plagiogramma, Padina gymnospora and Sargassum cymosum) and a species of green seaweed (Codium isthmocladum). The initial characterization of the ethyl acetate and methanolic extracts of the brown seaweeds, showed the presence of constituents with distinct characteristics, indicating that they belong to the different phenolic classes. The methanolic and aqueous extracts of the five species presented the highest yields, being used for analysis of the antioxidant and bioactive potential. The methanolic extract of P. gymnospora presented the highest antioxidant potential and the highest content of total phenolic substances by the Folin-Ciocalteu assay, indicating the potential of this species as a functional ingredient and the search for natural antioxidant substances. The analyzed species presented bioactive potential (antiviral and antitumor), and the aqueous extracts were more active when compared to methanolic. The highest antiviral potential was found in aqueous extracts of P. gymnospora, S. cymosum and C. isthmocladum, and the highest antitumor potential in aqueous extracts of D. plagiogramma and C. isthmocladum. Both antiviral and antitumoral potential may be related to the presence of phenolic substances and sulfated polysaccharides in the extracts. The results showed that the studied species, especially D. plagiogramma, P. gymnospora, S. cymosum and C. isthmocladum, present potential for the prospection of natural products
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Alcaloides guanidínicos da esponja marinha Monanchora arbuscula: isolamento, identificação e atividades biológicas / Guanidinic alkaloids from marine sponge Monanchora arbuscula: Isolation, identification and biological activities

Santos, Mario Ferreira Conceição 10 March 2015 (has links)
Este trabalho descreve o isolamento e a determinação estrutural de doze alcaloides guanidínicos, bem como a avaliação das atividades biológicas dos alcaloides majoritários. Os alcaloides descritos foram isolados a partir do extrato bruto de esponja marinha Monanchora arbuscula, coletada em Cabo Frio, no litoral do Rio de Janeiro. A amostra de esponja foi seca em liofilizador e extraída com MeOH. O extrato MeOH foi particionado com hexano, obtendo-se um extrato MeOH rico em alcaloides. Esse extrato foi sucessivamente fracionado obtendo-se os compostos arbusculidinina (1) (inédita na literatura), fromiamicalina (2), crambescidina 800 (3), arbusculidina (4)(inédita na literatura), batzelladinas L (6), F (7), D (12), norbatzelladina L (5), batzellamida A (8) (inédita na literatura), hemibatzelladina J (9) (inédita na literatura), Δ19-hemibatzelladeno J (10) (inédito na literatura), Δ20-hemibatzelladeno J (11) (inédito na literatura). As estruturas foram determinadas por análise detalhada dos seus espectros de RMN e espectrometria de massas. As batzelladinas majoritárias isoladas neste trabalho foram avaliadas em diferentes testes biológicos de atividade antiviral, antifúgica, antiparasitária e de atividade ATPásica apresentando resultados promissores. A batzelladina L (6) apresentou pontente atividade leishmanicida e antifúngica, enquanto que a norbatzelladina L (5) apresentou pontente atividade tripanossomicida e antiviral. / This work describes the isolation of twelve guanidine alkaloids and the biological activities of the major alkaloids. The alkaloids were isolated from the marine sponge Monanchora arbuscula, collected in Cabo Frio, Rio de Janeiro. The sponge sample freeze-dried, and extracted with MeOH. The MeOH extract was deffated with exane, providing al alkaloids-rich extract. The extract was exhaustively fractionated to yield arbusculidinine (1), fromiamycalin (2) crambescidin 800 (3), arbusculidine (4), batzelladines L (6) F (7), D (12), norbatzelladine L (5) batzellamide A (8), J hemibatzelladine (9), Δ19-hemibatzelladene J (10), Δ20-hemibatzelladene J (11). Their structures were established by analysis of NMR and MS data.The major compounds isolated were submitted to several biological assays as antiviral, antifungic, antiparasitic and inhibition ATPase activity. Batzelladine L (6) showed potent leishmanicidal and antifungal activity, while norbatzelladine L (5) showed powerful antiviral and antitripanosomal activity.
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Análise química e atividades biológicas de Guatteria elliptica R. E. Fries (Annonaceae) / Chemical analysis and biological activities of Guatteria elliptica R. E. Fries (Annonaceae).

Ferreira, Agnieszka Katarzyna Rajca 15 April 2016 (has links)
A espécie endêmica G. elliptica R. E. Fries não apresentava estudos fitoquímicos e biológicos detalhados na literatura. Assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar a composição química e as propriedades biológicas dos óleos essenciais, extratos brutos, alcaloides totais, tortas, frações das tortas, amostras isoladas dessa espécie. O material vegetal foi coletado em Paranapiacaba (Santo André, SP, Brasil). O óleo essencial extraído das folhas por destilação à vapor apresentou um rendimento de 0,2%. A análise histológica das folhas encontrou óleo em células oleíferas localizadas no parênquima esponjoso. A composição do óleo (CG-EM) indicou espatulenol e óxido de cariofileno como compostos majoritários. Os alcaloides totais foram obtidos dos extratos brutos das folhas e dos galhos e analisados por CG-EM, identificando quatro aporfinas (nornuciferina, estefarina, corituberina e asimilobina) e duas protoberberinas (discretamina e caseadina). Os alcaloides totais foram fracionados em coluna cromatográfica ou por Extração em Fase Sólida e purificados por cromatografia em camada preparativa, originando duas amostras (Amostra 9 e 10). Na Amostra 9, foram identificados dois alcaloides aporfinicos nornuciferina e asimilobina (CG-EM e RMN-1H). Na Amostra 10, foram identificados (LC-EM/EM) cinco alcaloides aporfínicos (desidronantenina, glaunidina, liriodenina, N-óxido de oliverina e telikovina) e um alcaloide protoberberínico (caseadina). Caseadina, glaunidina, N-óxido de oliverina e telikovina não foram previamente identificados em Guatteria. Os resíduos dos extratos brutos livres de alcaloides foram fracionados pelo método de partição com solventes de polaridade crescente. Os extratos brutos e as frações acetato de etila e butanólicas de folhas e galhos apresentaram flavonoides (NP-PEG). Nos ensaios biológicos, a melhor atividade antioxidante (sequestro do radical DPPH) foi encontrada para a fração clorofórmica dos galhos (EC50=24,25±1,14 &#181;g/mL) e a torta dos galhos (EC50=26,23±4,20 &#181;g/mL). No ensaio antimicrobiano pelo método turbidimétrico a atividade mais importante foi obtida contra Staphylococcus aureus (ATCC 6538) para os alcaloides totais dos galhos (CIM/CBM=0,12±0,01/0,26 mg/mL) e das folhas (CIM/CBM=0,21±0,01/0,28 mg/mL), e fração hexânica das folhas (CIM/CBM=0,24±0,02/>1 mg/mL). Uma alta atividade antitumoral foi observada frente a células humanas de mama (MCF-7) para Amostra 10 (IC50=2,28±0,18 &#181;g/mL), fração de acetato de etila das folhas (IC50=4,47±0,40 &#181;g/mL), óleo essencial (IC50=7,01±0,23 &#181;g/mL) e os alcaloides totais das folhas (IC50=9,32±0,36 &#181;g/mL). Para as células de próstata (PC-3), foi encontrada atividade para a Amostra 10 (IC50=1,37±0,36 &#181;g/mL) e o óleo essencial (IC50=5,32±0,35 &#181;g/mL). A futura aplicação dos extratos e frações de G. elliptica como um agente antitumoral parece ser segura, pois mantiveram uma viabilidade celular maior do que 90% no ensaio de citotoxicidade com culturas de fibroblasto murino (BALB/c 3T3, ATCC CCL-163) nas concentrações onde a atividade antitumoral foi promissora (<30 &#181;g/mL) contra MCF-7 e/ou PC-3. / The endemic species G. elliptica R. E. Fries had not yet been thouroughly investigated phytochemically and biologically. Therefore, the objective of this work was to evaluated the chemical and biological properties of the G. elliptica essential oils, crude extracts, alcaloid-free extracts, total alcaloids, fractions and isolated samples. The plant material was collected in Paranapiacaba (Santo Andre, SP, Brazil). The leaves essential oil, was obtained by hydrodestillation with a yield of 0.2%. In the leaves, the oil was found in secretory cells, located in the spongy parenchyma. The oil analysis (GC-MS) identified spathulenol and caryophyllene oxide as major compounds. The total alkaloids were extracted from the leaves and branches crude extracts and analysed by GC-MS, identifying four aporphines (nornuciferine, stepharine, corytuberine, assimilobine) and two protoberberines (discretamine and caseadine). Total alkaloids were fractionated by column chromatography or solid phase extraction and purified by preparative thin layer chromatography affording two samples (Sample 9 and 10). In Sample 9, two aporphin alkaloids were found and identified (GC-MS and 1H-NMR) as nornurciferine and assimilobine. In Sample 10, were identified (LC-MS/MS) five aporphin alkaloids (dehydronantenine, glaunidine, liriodenine, N-oliverine oxide and telikovine) and one protoberberine alkaloid (caseadine). Caseadine, glaunidine, oliverine N-oxide and telkovine were not previously reported for Guatteria. The alkaloids-free extracts were fractionated using the increasing polarity solvents. Concerning the biological activities, the highest antioxidant activity (DPPH scavenging) was reported for the branches chloroform fraction (EC50=24.25±1.14 &#181;g/mL) and (EC50=26.23±4.20 &#181;g/mL) alkaloid-free extract. In the turbimetric antimicrobial assay against, the most important activity was found against Staphylococcus aureus (ATCC 6538) for the total alkaloids from branches (MIC/MBC=0.12±0.01/0.26 mg/mL) and leaves (MIC/MBC=0.21±0.01/0.28 mg/mL) and for the leaves hexane fraction (MIC/MBC=0.24±0.02/>1 mg/mL). The highest antitumor activity against human breast cancer cell line (MCF-7) was observed for Sample 10 (IC50=2.28±0.18 &#181;g/mL), leaves ethyl acetate fraction (IC50=4.47±0.40 &#181;g/mL), essential oil (IC50=7.01±0.23 &#181;g/mL) and leaves total alkaloids (IC50=9.32±0.36 &#181;g/mL). For the prostate cancer cell line (PC-3), the most active samples were Sample 10 (IC50=1.37±0.36 &#181;g/mL) and the essential oil (IC50=5.32±0.35 &#181;g/mL). The future application of G. elliptica extracts and fractions as an antitumor agent appears to be safe, because cell viability remained higher than 90% in the cytotoxicity assay with murine fibroblast cultures (BALB/c 3T3, ATCC CCL-163), in the concentration range where the best antitumor activity (<30 &#181;g/mL) against MCF-7 and PC-3 was found.
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Alcaloides guanidínicos da esponja marinha Monanchora arbuscula: isolamento, identificação e atividades biológicas / Guanidinic alkaloids from marine sponge Monanchora arbuscula: Isolation, identification and biological activities

Mario Ferreira Conceição Santos 10 March 2015 (has links)
Este trabalho descreve o isolamento e a determinação estrutural de doze alcaloides guanidínicos, bem como a avaliação das atividades biológicas dos alcaloides majoritários. Os alcaloides descritos foram isolados a partir do extrato bruto de esponja marinha Monanchora arbuscula, coletada em Cabo Frio, no litoral do Rio de Janeiro. A amostra de esponja foi seca em liofilizador e extraída com MeOH. O extrato MeOH foi particionado com hexano, obtendo-se um extrato MeOH rico em alcaloides. Esse extrato foi sucessivamente fracionado obtendo-se os compostos arbusculidinina (1) (inédita na literatura), fromiamicalina (2), crambescidina 800 (3), arbusculidina (4)(inédita na literatura), batzelladinas L (6), F (7), D (12), norbatzelladina L (5), batzellamida A (8) (inédita na literatura), hemibatzelladina J (9) (inédita na literatura), &Delta;19-hemibatzelladeno J (10) (inédito na literatura), &Delta;20-hemibatzelladeno J (11) (inédito na literatura). As estruturas foram determinadas por análise detalhada dos seus espectros de RMN e espectrometria de massas. As batzelladinas majoritárias isoladas neste trabalho foram avaliadas em diferentes testes biológicos de atividade antiviral, antifúgica, antiparasitária e de atividade ATPásica apresentando resultados promissores. A batzelladina L (6) apresentou pontente atividade leishmanicida e antifúngica, enquanto que a norbatzelladina L (5) apresentou pontente atividade tripanossomicida e antiviral. / This work describes the isolation of twelve guanidine alkaloids and the biological activities of the major alkaloids. The alkaloids were isolated from the marine sponge Monanchora arbuscula, collected in Cabo Frio, Rio de Janeiro. The sponge sample freeze-dried, and extracted with MeOH. The MeOH extract was deffated with exane, providing al alkaloids-rich extract. The extract was exhaustively fractionated to yield arbusculidinine (1), fromiamycalin (2) crambescidin 800 (3), arbusculidine (4), batzelladines L (6) F (7), D (12), norbatzelladine L (5) batzellamide A (8), J hemibatzelladine (9), &Delta;19-hemibatzelladene J (10), &Delta;20-hemibatzelladene J (11). Their structures were established by analysis of NMR and MS data.The major compounds isolated were submitted to several biological assays as antiviral, antifungic, antiparasitic and inhibition ATPase activity. Batzelladine L (6) showed potent leishmanicidal and antifungal activity, while norbatzelladine L (5) showed powerful antiviral and antitripanosomal activity.
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Atividades biológicas de extratos de Solanum paludosum Moric. obtidos por maceração e extração supercrítica / Biological activities of extracts of Solanum paludosum Moric obtained by maceration and supercritical fluid extraction

Siqueira, Silvia de 26 October 2010 (has links)
Solanum paludosum Moric. popularmente conhecida como jurubeba roxa, é uma espécie arbustiva encontrada no Brasil, utilizada na medicina popular principalmente para tratar distúrbios do fígado. Embora alguns trabalhos tenham descrito o perfil fitoquímico de S. paludosum, não existem estudos, até o presente, avaliando as propriedades biológicas desta planta. Assim, dois procedimentos de extração, maceração e extração supercrítica foram utilizados para obter diferentes extratos desta planta. Estes extratos foram comparados no que diz respeito ao perfil cromatográfico dos seus compostos fenólicos e avaliados quanto a citotoxicidade contra duas linhagens de células de mamíferos e quanto a atividade antioxidante in vitro utilizando três sistemas: o método de DPPH, o sistema xantina/xantina oxidase/luminol e a atividade inibidora da peroxidação lipídica. Além disso, a possibilidade de utilizar extratos de S. paludosum como uma nova fonte de inibidores de bombas de efluxo contra cepas de Staphylococcus aureus foi investigada. A maceração e a SFE levaram a obtenção de três extratos com diferentes perfis cromatográficos: SP-EtOHB, com uma composição química complexa, SP-SFECO2, enriquecido com flavonóides metoxilados, e SP-EtOHM, contendo principalmente polifenóis polares. No que diz respeito à atividade citotóxica, SP-EtOHB e SP-EtOHM mostraram similar baixa toxicidade contra as células de fibroblasto, enquanto o SP-SFECO2 foi mais citotóxico. A SP-EtOHB apresentou o melhor efeito citotóxico contra células de melanoma. SP-SFECO2 não demonstrou capacidade de reduzir o radical DPPH enquanto que os extratos SP-EtOHB e SP-EtOHM foram altamente antioxidantes (CI50 19,3 µg/mL). Todos os extratos apresentaram atividade inibitória do sistema xantina/XOD/luminol de maneira dependente de concentração (28 % a 97% em 4,7 a 298,5 µg/mL). A inibição da peroxidação lipídica aumentou com o aumento das concentrações dos extratos sem diferença entre SP-SFECO2 e SP-EtOHM (CI50 56,76 µg/mL). Curiosamente, a maior potência anti lipoperoxidativa foi com relação ao extrato SP-EtOHB (CI50 3,23 µg/mL), o que pode indicar um efeito sinérgico de compostos com mecanismos diferentes de ação antioxidante. Nenhum dos extratos testados apresentaram atividade antibacteriana. Por outro lado, todos os extratos apresentaram acentuada atividade moduladora nas cepas estudadas, principalmente a SP-SFECO2, que reduziu a CIM dos antibióticos em até oito vezes. Esta atividade pode estar relacionada com a elevada lipofilicidade de flavonóides polimetoxilados em SP-SFECO2, visto que a lipofilicidade é uma característica comum de diversos inibidores da bomba de efluxo. Em conclusão, os dois métodos de extração foram adequados para obter extratos com diferentes atividades biológicas de acordo com seu padrão de compostos fenólicos, o que contribue para aumentar o valor agregado de Solanum paludosum Moric. / Solanum paludosum Moric., popularly known as purple jurubeba, is a srhub found in Brazil, used in folk medicine mainly to treat liver disorders. Although some works have described the phytochemical profile of S. paludosum, there are no studies, until now, evaluating the biological properties of this plant. Thus, two procedures of extraction, maceration and supercritical fluid extraction, were used to obtain different extracts of this plant. These extracts were compared as regard the chromatographic profile of its phenolic compounds and evaluated for citotoxicity against two mammalian cell lines and for in vitro antioxidant activity using three systems: the DPPH method, the xanthine/xanthine oxidase/luminol assay and the lipid peroxidation inhibitory activity. Also, the possibility of using S. paludosum extracts as a new source of inhibitors of efflux pumps against Staphylococcus aureus strains has been investigated. The maceration and SFE led the obtaining of three extracts with distinct chromatographic profiles: SP-EtOHCRUDE, with a complex chemical composition, SP-SFECO2, enriched with methoxylated flavonoids, and SP-EtOHMARC, containing mainly polar polyphenols. As regard the cytotoxic activity, extracts SP-EtOHCRUDE and SP-EtOHMARC showed a similar low toxicity against fibroblast cells while the SP-SFECO2 was more cytotoxic. The SP-EtOHCRUDE presented the best cytotoxic effect against melanoma cells. SP-SFECO2 showed no capacity to reduce the radical DPPH while SP-EtOHCRUDE and SP-EtOHMARC were highly antioxidants (IC50 19,3 g/mL). All extracts exhibited inhibitory activity of the xanthine/XOD/luminol system in a dose-dependent manner (28 % to 97 % at 4.7298.5 g/ml). The inhibition of lipid peroxidation increased with increasing concentrations of extracts, with no difference between SP-SFECO2 and SP-EtOHMARC (IC50 56.76 g/ml). Interestingly, the highest anti-lipoperoxidative potency was with regard to SP-EtOHCRUDE (IC50 3.23 g/ml), which may indicate a synergistic effect of compounds with different mechanisms of antioxidant action. None of the extracts tested showed significant antibacterial activity. On the other hand, all extracts showed marked modulator activity in the studied strains, mainly the SP-SFECO2 which reduced the MIC of antibiotics up to eight fold. This activity may be related to the high lipophilicity of polymethoxylated flavonoids in SP-SFECO2, since lipophilicity is a common feature of several efflux pump inhibitors. In conclusion, both methods of extraction were adequate for obtain extracts with different biological activities according to its pattern of phenolic compounds, contributing to increase the aggregate value of Solanum paludosum Moric.
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Análise química e atividades biológicas de Guatteria elliptica R. E. Fries (Annonaceae) / Chemical analysis and biological activities of Guatteria elliptica R. E. Fries (Annonaceae).

Agnieszka Katarzyna Rajca Ferreira 15 April 2016 (has links)
A espécie endêmica G. elliptica R. E. Fries não apresentava estudos fitoquímicos e biológicos detalhados na literatura. Assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar a composição química e as propriedades biológicas dos óleos essenciais, extratos brutos, alcaloides totais, tortas, frações das tortas, amostras isoladas dessa espécie. O material vegetal foi coletado em Paranapiacaba (Santo André, SP, Brasil). O óleo essencial extraído das folhas por destilação à vapor apresentou um rendimento de 0,2%. A análise histológica das folhas encontrou óleo em células oleíferas localizadas no parênquima esponjoso. A composição do óleo (CG-EM) indicou espatulenol e óxido de cariofileno como compostos majoritários. Os alcaloides totais foram obtidos dos extratos brutos das folhas e dos galhos e analisados por CG-EM, identificando quatro aporfinas (nornuciferina, estefarina, corituberina e asimilobina) e duas protoberberinas (discretamina e caseadina). Os alcaloides totais foram fracionados em coluna cromatográfica ou por Extração em Fase Sólida e purificados por cromatografia em camada preparativa, originando duas amostras (Amostra 9 e 10). Na Amostra 9, foram identificados dois alcaloides aporfinicos nornuciferina e asimilobina (CG-EM e RMN-1H). Na Amostra 10, foram identificados (LC-EM/EM) cinco alcaloides aporfínicos (desidronantenina, glaunidina, liriodenina, N-óxido de oliverina e telikovina) e um alcaloide protoberberínico (caseadina). Caseadina, glaunidina, N-óxido de oliverina e telikovina não foram previamente identificados em Guatteria. Os resíduos dos extratos brutos livres de alcaloides foram fracionados pelo método de partição com solventes de polaridade crescente. Os extratos brutos e as frações acetato de etila e butanólicas de folhas e galhos apresentaram flavonoides (NP-PEG). Nos ensaios biológicos, a melhor atividade antioxidante (sequestro do radical DPPH) foi encontrada para a fração clorofórmica dos galhos (EC50=24,25±1,14 &#181;g/mL) e a torta dos galhos (EC50=26,23±4,20 &#181;g/mL). No ensaio antimicrobiano pelo método turbidimétrico a atividade mais importante foi obtida contra Staphylococcus aureus (ATCC 6538) para os alcaloides totais dos galhos (CIM/CBM=0,12±0,01/0,26 mg/mL) e das folhas (CIM/CBM=0,21±0,01/0,28 mg/mL), e fração hexânica das folhas (CIM/CBM=0,24±0,02/>1 mg/mL). Uma alta atividade antitumoral foi observada frente a células humanas de mama (MCF-7) para Amostra 10 (IC50=2,28±0,18 &#181;g/mL), fração de acetato de etila das folhas (IC50=4,47±0,40 &#181;g/mL), óleo essencial (IC50=7,01±0,23 &#181;g/mL) e os alcaloides totais das folhas (IC50=9,32±0,36 &#181;g/mL). Para as células de próstata (PC-3), foi encontrada atividade para a Amostra 10 (IC50=1,37±0,36 &#181;g/mL) e o óleo essencial (IC50=5,32±0,35 &#181;g/mL). A futura aplicação dos extratos e frações de G. elliptica como um agente antitumoral parece ser segura, pois mantiveram uma viabilidade celular maior do que 90% no ensaio de citotoxicidade com culturas de fibroblasto murino (BALB/c 3T3, ATCC CCL-163) nas concentrações onde a atividade antitumoral foi promissora (<30 &#181;g/mL) contra MCF-7 e/ou PC-3. / The endemic species G. elliptica R. E. Fries had not yet been thouroughly investigated phytochemically and biologically. Therefore, the objective of this work was to evaluated the chemical and biological properties of the G. elliptica essential oils, crude extracts, alcaloid-free extracts, total alcaloids, fractions and isolated samples. The plant material was collected in Paranapiacaba (Santo Andre, SP, Brazil). The leaves essential oil, was obtained by hydrodestillation with a yield of 0.2%. In the leaves, the oil was found in secretory cells, located in the spongy parenchyma. The oil analysis (GC-MS) identified spathulenol and caryophyllene oxide as major compounds. The total alkaloids were extracted from the leaves and branches crude extracts and analysed by GC-MS, identifying four aporphines (nornuciferine, stepharine, corytuberine, assimilobine) and two protoberberines (discretamine and caseadine). Total alkaloids were fractionated by column chromatography or solid phase extraction and purified by preparative thin layer chromatography affording two samples (Sample 9 and 10). In Sample 9, two aporphin alkaloids were found and identified (GC-MS and 1H-NMR) as nornurciferine and assimilobine. In Sample 10, were identified (LC-MS/MS) five aporphin alkaloids (dehydronantenine, glaunidine, liriodenine, N-oliverine oxide and telikovine) and one protoberberine alkaloid (caseadine). Caseadine, glaunidine, oliverine N-oxide and telkovine were not previously reported for Guatteria. The alkaloids-free extracts were fractionated using the increasing polarity solvents. Concerning the biological activities, the highest antioxidant activity (DPPH scavenging) was reported for the branches chloroform fraction (EC50=24.25±1.14 &#181;g/mL) and (EC50=26.23±4.20 &#181;g/mL) alkaloid-free extract. In the turbimetric antimicrobial assay against, the most important activity was found against Staphylococcus aureus (ATCC 6538) for the total alkaloids from branches (MIC/MBC=0.12±0.01/0.26 mg/mL) and leaves (MIC/MBC=0.21±0.01/0.28 mg/mL) and for the leaves hexane fraction (MIC/MBC=0.24±0.02/>1 mg/mL). The highest antitumor activity against human breast cancer cell line (MCF-7) was observed for Sample 10 (IC50=2.28±0.18 &#181;g/mL), leaves ethyl acetate fraction (IC50=4.47±0.40 &#181;g/mL), essential oil (IC50=7.01±0.23 &#181;g/mL) and leaves total alkaloids (IC50=9.32±0.36 &#181;g/mL). For the prostate cancer cell line (PC-3), the most active samples were Sample 10 (IC50=1.37±0.36 &#181;g/mL) and the essential oil (IC50=5.32±0.35 &#181;g/mL). The future application of G. elliptica extracts and fractions as an antitumor agent appears to be safe, because cell viability remained higher than 90% in the cytotoxicity assay with murine fibroblast cultures (BALB/c 3T3, ATCC CCL-163), in the concentration range where the best antitumor activity (<30 &#181;g/mL) against MCF-7 and PC-3 was found.
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Prospecção de plantas aromáticas na região do médio e baixo Solimões.

Leal, Roosevelt Hada 28 September 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-22T22:02:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Roosevelt Hada Leal.pdf: 4496107 bytes, checksum: d2713e4802bdeba7ef52dc602cfd4acb (MD5) Previous issue date: 2010-09-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The vast Amazon region is composed by various ecosystems resulting in a great diversity of species. Its dimensions impose restrictions on the access to many of its resources, keeping them unknown as sources of a great potential for discovery and production of natural products, and sources of raw materials for various industry sectors which can generate resources for local traditional populations in a sustainable way. This paper was made under the auspices of the PIATAM project, which studied species occurring in the region of middle and lower Solimões River, found in lowland, flooded, lake and land ecosystems. Focusing on the objective of phytochemical studies guided by the pursuit of essential oils (EOs), antileishmanial, antitumoral, antioxidant substances and inhibitors of acetylcholinesterase, samples were taken from specimens, looking for aromatic plants and in some cases plants for medicinal purposes. Over 88 species were collected; the samples produced more than 300 fractionated samples from the 78 botanically identified species, which are distributed in 32 families and 57 genera, mainly concentrated in the Lauraceae (15 species), Annonaceae (7), Fabaceae (7), Piperaceae (6), Lamiaceae (5) and Verbenaceae (4) families. A total seventyone EOs were extracted from: branches (19), leaves (37), bark (6), wood (2) and other plant parts (7); forty-eight ethanolic extracts were also obtained from: branches (16), leaves (17), roots (2), bark (10) and other parts (3). The EOs were extracted by hydrodistillation and seventy-eight of them were analyzed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-FID, GC-MS) for the determination of their chemical compositions. Twenty-five of the analyzed EOs were chemically identified and are presented here. Among the identified substances, a large percentage (44.09%) corresponded to sesquiterpene hydrocarbons; the oxygenated monoterpenes represented 24.12%, oxygenated sesquiterpenes 16.56%, monoterpene hydrocarbons 7.87%, and other classes of substances 7.35%. The substance most frequently observed was β-pinene. The best EO yields were observed in the species Piper tuberculatum (2.44%) and Calyptranthes spruceana (2.31%); the leaves were the plant parts that showed better EO and ethanolic extract yields. Some EOs were evaluated for antiparasitic activity against Leishmania amazonensis; a higher activity was observed in EOs consisting predominantly of sesquiterpenes, especially the EOs obtained from the leaves of louro mamuí (IC50 = 28.6 μg / mL). Against Trypanosoma cruzi, Alpinia speciosa had the best LC50 (4.5 μg / mL) followed by Epaltes sp. (5.5 μg / mL). Two major constituents of these two species: terpinen-4-ol (Alpinia speciosa, 29%) and α-gurjunene (Epaltes sp., 12.3%) can be contributors to the significant trypanosomicide activities observed. To evaluate the antioxidant potential of extracts and EOs, assays were performed using DPPH; extracts showed better inhibitory concentrations (IC50) than EOs, the better IC50 being found in the extracts from C. spruceana and Ouratea discophora (5.85 and 7.01 μg / mL, respectively), highlighting also: Nectandra cuspidata (bark: 8.64 μg / mL), Pleurotherium parviflorum (bark: 9.84 μg / mL), Lauracea spp. (bark: 10.72 μg / mL) and Ocotea cernua (bark: 11.81 μg / mL). The antioxidant activity was higher in extracts of bark, followed by extracts of branches, with a lower expression in extracts of leaves. The acetylcholinesterase inhibitory activity was observed in several of the tests performed, highlighting the EO obtained from branches of Nectandra amazonum and the extract of C. spruceana. Several plant extracts used in folk medicine were tested in a single dose of 50 μg / mL regarding the inhibition of tumor cell growth: SF-295 (human glioblastoma), HCT-8 (human colon) and MDAMB-435 (human breast); the bark extract from Himatanthus sucuuba presented some of the best inhibition percentages, respectively: 43.07, 65.87 and 63.25%. / A vasta região Amazônica compõe-se de vários ecossistemas que se traduzem em grande diversidade de espécies. Suas dimensões impõem restrições de acesso a muitos de seus recursos, mantendo-os desconhecidos na forma de um grande potencial de produção e descoberta de produtos naturais, fontes de matérias primas para diversos setores da indústria que podem gerar de forma sustentável recursos para as populações tradicionais amazônicas. O presente trabalho inserido no âmbito do projeto PIATAM, estudou espécies de ocorrência na região do médio e baixo rio Solimões, encontradas em ecossistemas de várzea, igapó, lacustre e terra firme. Objetivando-se estudos fitoquímicos orientados pela busca de óleos essenciais (OEs) e substâncias leishmanicidas, antitumorais, antioxidantes e inibidoras de acetilcolinesterase; foram realizadas coletas de amostras, buscando-se plantas aromáticas e em alguns casos plantas com uso medicinal. Foram coletadas mais de 88 espécies; as coletas geraram mais de 300 amostras fracionadas das 78 espécies identificadas botanicamente, as quais estão distribuídas em 32 famílias e 57 gêneros, concentradas principalmente nas famílias Lauraceae (15 espécies), Annonaceae (7), Fabaceae (7), Piperaceae (6), Lamiaceae (5) e Verbenaceae (4). Um total de setenta e hum OEs foram extraídos a partir de: galhos (19), folhas (37), cascas (6), madeira (2) e outras partes das plantas (7); foram obtidos também quarenta e oito extratos etanólicos a partir de: galhos (16), folhas (17), raízes (2), cascas (10) e outras partes (3). Os OEs foram extraídos através de hidrodestilação e setenta e oito deles foram analisados por cromatografia em fase gasosa acoplada a espectrometria de massas (CGDIC, CG-EM) para a determinação de suas composições químicas. Vinte e cinco dos OEs analisados foram identificados quimicamente e são apresentados neste trabalho. Entre as substâncias identificadas, um grande percentual (44,09 %) correspondeu a hidrocarbonetos sesquiterpênicos, os monoterpenos oxigenados representaram 24,12%, os sesquiterpenos oxigenados 16,56%, os hidrocarbonetos monoterpênicos 7,87% e outras classes de substâncias 7,35%. A substância observada com maior freqüência foi o β-pineno. Os melhores rendimentos de OE foram observados nas espécies Piper tuberculatum (2,44%) e Calyptranthes spruceana (2,31%), as folhas foram a parte da planta que mostram um melhor rendimento de OE e extrato etanólico. Alguns OEs foram avaliados quanto à atividade antiparasitária frente à Leishmania amazonensis, observando-se uma maior atividade nos OEs constituídos predominantemente por hidrocarbonetos sesquiterpênicos, destacando-se o OE obtido das folhas do louro mamuí (IC50 = 28,6 μg/mL). Frente a Tripanossoma cruzi, Alpinia speciosa apresentou o melhor CL50 (4,5 μg/mL) seguida de Epaltes sp. (5,5 μg/mL). Dois constituintes majoritários destas duas espécies: o terpinen-4-ol (Alpinia speciosa, 29 %) e α- gurjuneno (Epaltes sp., 12,3%) podem ser contribuintes para as expressivas atividades tripanossomicidas observadas. Para avaliação do potencial antioxidante dos extratos e OEs, efetuou-se ensaios utilizando DPPH; os extratos apresentaram melhores concentrações inibitórias (CI50) que os OEs avaliados, mostrando melhores CI50 os extratos obtidos de C. spruceana e Ouratea discophora (5,85 e 7,01 μg/mL, respectivamente), destacando-se ainda: Nectandra cuspidata (casca: 8,64 μg/mL), Pleurotherium parviflorum (casca: 9,84 μg/mL), Lauracea spp. (casca: 10,72 μg/mL) e Ocotea cernua (casca: 11,81 μg/mL). A atividade antioxidante foi maior nos extratos obtidos de cascas, seguido por galhos, havendo uma menor expressão nos extratos obtidos de folhas. A atividade inibidora de acetilcolinesterase foi observada em vários dos testes realizados, destacando-se o OE obtido dos galhos de Nectandra amazonum e o extrato de C. spruceana. Vários extratos de plantas usadas na medicina popular foram testados em dose única de 50 μg/mL quanto à inibição do crescimento das células tumorais: SF-295 (glioblastoma humano), HCT-8 (cólon humano) e MDAMB-435 (mama humana); o extrato da casca de Himatanthus sucuuba apresentou alguns dos melhores percentuais de inibição, respectivamente: 43,07; 65,87 e 63,25%.
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Estudo fitoquimico e atividades biológicas de extratos de Goupia glabra aublet (Cupiúba)

Oliveira, Priscilla de Azevedo 02 August 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-22T22:02:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PRISCILLA OLIVEIRA.pdf: 2800114 bytes, checksum: 0b6a9ea35227863ff51f73dff0623486 (MD5) Previous issue date: 2010-08-02 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The species Goupia glabra Aublet (Goupiaceae), popularly known as cupiúba is used in popular medicine against several diseases. Their barks are used as dental analgesic, as a vermifuge, to treat malaria, chickenpox and eczema. The leaves are used against syphilis, ocular disorders, migraine, smallpox and as healing. This study aimed to quantify the phenolic compounds and evaluate the antioxidant, inhibiting acetylcholinesterase, brine shrimp toxicity, antitumor and antimicrobial activities of extracts of leaves, thin and thick branches of cupiúba. The dry material was crushed and subjected to Soxhlet extraction using solvents in increasing order of polarity (hexane, ethyl acetate and methanol). The phytochemical screening was performed for different classes of metabolites, observed positive results for sterols in all extracts and terpenoids and some classes of flavonoids in the extracts obtained in ethyl acetate and methanol. The fractionation of the hexane extract of leaves (EHF) resulted in the isolation of a mixture composed by β-sitosterol and stigmasterol. From ethyl acetate extract of leaves (EAF) was isolated catechol, a simple phenol with restricted distribution in nature. The total phenolic content of extracts was determined using the Folin-Ciocalteau and the result was expressed as gallic acid equivalents (GAE). The antioxidant activity was assessed by the ability of capturing the stable radical 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH ), using quercetin as external standard, expressed as value of the effective concentration (EC50). We observed a positive correlation between total phenolics and EC50, ie as greater the amount of phenolics smaller is the EC50. The ethyl acetate extract of the leaves (EAF) presented the highest antioxidant potential [EC50 = 9.76 ± 0.42 μg/mL (quartz cuvette) and EC50 = 19.87 ± 0.31 μg/mL (microplate)]. The toxicity of the extracts was verified by bioassays with microcrustacea A. salina and expressed in percentual mortality of nauplius. Qualitative analysis of anticholinesterase activity was performed according to the method of Ellman (modified), presenting negative results. The antitumor activity was evaluated against four cell lines (leukemia, breast, colon and glioblastoma) using colorimetric analysis method based on conversion of salt 3-(4,5-dimethyl-2-thiazole)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazonium bromide (MTT) into blue formazam by the method of Mossman. The best results were observed for the ethyl acetate extracts, especially for cells HCT-8 (colon) that ranged from 58.35 to 77.12%. The ethyl acetate extract obtained from thick branches (EAGg) showed values of IC50 = 13.73 μg/mL for strain HL-60 (leukemia). This extract was fractionated and the fraction EAGg5 showed the percentage of cell growth inhibition of 85.37 and 101.37% for the lines SF-295 (glioblastoma) and MDAMB-435 (breast), respectively. The antimicrobial activity was conducted using the minimum inhibitory concentration (MIC) that was determined by microdilution in Mueller-Hinton broth for bacteria (Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa) and in liquid Sabouraud for fungi (Candida albicans, C. tropicalis and C. parapsilosis). All extracts showed some degree of bacterial and fungicidal activity, especially the ethyl acetate extracts which showed moderate inhibition of microbial growth. The effect of extracts on growth of protozoa in vitro study was evaluated with promastigotes of Leishmania amazonensis and epimastigotes of Trypanosoma cruzi. EAGg extract showed antiproliferative activity against both L. amazonensis and T. cruzi, with IC50 values of 86 and 40 μg/mL, respectively. The significant antioxidant, antitumor and antimicrobial activities observed in the extracts of cupiuba detaches its high potential for obtaining of biotechnological products. / A espécie Goupia glabra Aublet (Goupiaceae), denominada popularmente como cupiúba, é utilizada na medicina popular contra diversas doenças. Suas cascas são utilizadas como analgésico dentário, como vermífugo, no tratamento de malária, catapora e eczema. As folhas são utilizadas contra sífilis, doenças oculares, enxaqueca, varíola e como cicatrizante. O presente trabalho teve como objetivo quantificar compostos fenólicos e avaliar as atividades antioxidante, inibidora de acetilcolinesterase, toxicidade em Artemia salina, antitumoral e antimicrobiana de extratos de folhas, galhos finos e galhos grossos de cupiúba. O material seco foi triturado e submetido à extração em aparelho de Soxhlet com solventes de polaridade crescente (Hexano, AcOEt e MeOH). A prospecção fitoquímica foi realizada para diferentes classes de metabólitos, sendo observados resultados positivos para esteróis em todos os extratos, triterpenóides e algumas classes de flavonóides nos extratos obtidos em acetato de etila e metanol. O fracionamento do extrato em hexano de folhas (EHF) resultou no isolamento de uma mistura de β-sitosterol e estigmasterol. Do extrato em AcOEt de folhas (EAF) foi isolado o catecol, um fenol simples de distribuição restrita na natureza. O conteúdo de fenólicos totais dos extratos foi determinado utilizando o reagente de Folin-Ciocalteau e o resultado foi expresso em equivalentes de ácido gálico (EAG). A atividade antioxidante foi avaliada através da capacidade seqüestrante do radical estável 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH ), utilizando quercetina como padrão externo, expressos como valores de Concentração eficiente (CE50). Foi observada uma correlação positiva entre os fenólicos totais e a CE50, ou seja, quanto maior a quantidade de fenólicos, menor a CE50. O extrato em AcOEt das folhas (EAF) foi o que apresentou maior potencial antioxidante [CE50=9,76 ± 0,42 μg/mL (cubeta) e CE50= 19,87 ± 0,31 μg/mL (microplaca)]. A toxicidade dos extratos foi verificada através de bioensaios com microcrustáceo A. salina e expressa em % de mortalidade das larvas. A análise qualitativa da atividade anticolinesterase foi realizada de acordo com o método de Ellman (modificado), com resultados negativos para inibição da enzima acetilcolinesterase. A atividade antitumoral foi avaliada contra quatro linhagens de células (leucemia, mama, cólon e glioblastoma) utilizando método de análise colorimétrica baseada na conversão do sal 3-(4,5-dimetil-2-tiazol)-2,5-difenil-2-H-brometo de tetrazonium (MTT) em azul de formazam segundo o método de Mossman. Os melhores resultados foram observados para os extratos obtidos em AcOEt, principalmente para células HCT-8 (cólon) que variaram de 58,35 a 77,12%. O extrato obtido em AcOEt dos galhos grossos (EAGg) apresentou valor de CI50 = 13,73 μg/mL para a linhagem HL-60 (leucemia). Esse extrato foi fracionado e a fração EAGg5 apresentou percentual de inibição de crescimento celular de 85,37 e 101,37% para as linhagens SF-295 (glioblastoma) e MDAMB-435 (mama), respectivamente. A avaliação da atividade antimicrobiana foi realizada pelo método da concentração inibitória mínima (MIC) que foi determinada pela técnica da microdiluição em caldo Müeller-Hinton para bactérias (Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa) e em meio líquido Sabouraud para fungos (Candida albicans, C. tropicalis e C. parapsilosis). Todos os extratos demonstraram algum grau de atividade bacteriana e fungicida, com destaque para os extratos obtidos em AcOEt que apresentaram inibição moderada de crescimento microbiano. Para avaliar o efeito dos extratos no crescimento dos protozoários foi realizado estudo in vitro com formas promastigotas de Leishmania amazonensis e epimastigotas de Trypanosoma cruzi. O extrato EAGg mostrou atividade antiproliferativa, tanto contra L. amazonensis quanto para T. cruzi, com valores de IC50 de 86 e 40 μg/mL, respectivamente. A significativa atividade antioxidante, antitumoral e antimicrobiana observada nos extratos de cupiúba destaca seu elevado potencial para a obtenção de produtos biotecnológicos.

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