Orientador: Cleide Enoir Petean Trindade / Banca: Clovis Duarte Costa / Banca: Maria Fernanda Branco de Almeida / Banca: Francisco Eulógio Martinez / Banca: Lígia Maria Suppo de Souza Rugolo / Resumo: A frutose é um açúcar derivado da glicose pela via do sorbitol presente em placentas de animais ungulados. Em humanos existem poucos relatos sobre a produção de frutose e de polióis pela unidade feto-placentária. Determinar a relação entre os níveis sangüíneos de frutose, sorbitol e glicose em mães, em veia de cordão umbilical e em recém-nascidos de termo em aleitamento materno exclusivo. As concentrações de frutose mais elevadas no cordão umbilical e no recém-nascido em relação às maternas sugerem que a produção de frutose à partir da glicose esteja presente na unidade feto-placentária e no recém-nascido. As concentrações de sorbitol mais elevadas no cordão em relação à mãe e no recém-nascido sugerem que as vias de produção de sorbitol estejam ativas na unidade feto-placentária. / Abstract: Placenta from ungulates produce fructose from glucose by the sorbitol pathway using glucose as a substrate. In humans there are only few reports about the production of fructose and polyols by the fetal-placental unity. To determine the relationship between fructose, sorbitol and glucose blood levels from mothers, cord vein and breast-fed full-term newborns at 48 hours after delivery. Fructose concentrations in cord blood and newborn blood higher than maternal levels suggest that fructose production from glucose is active in fetal-placental unity and in the newborn. Sorbitol concentrations in cord blood higher than in mother and newborn blood suggest that the sorbitol pathway is active in fetal-placental unity. / Doutor

Orientador: Flávio Henrique Caetano / Banca: Ana Maria Costa Leonardo / Banca: Maeli Dal Pai Silva / Banca: Maria Tercilia Vilela de Azeredo Oliveira / Banca: Carmem Silvia Fontanetti Christofoletti / Resumo: O presente estudo teve como objetivo analisar os leucócitos circulantes em microscopia de luz e eletrônica e sua distribuição sazonal, além de procurar estabelecer o período de renovação celular desses leucócitos, e principalmente de caracterizar os fagócitos mononucleares do sangue de tartaruga, e sua capacidade de fagocitose frente a material inerte. Neste trabalho utilizou-se seis tartarugas Phrynops hilarii, originárias de ilhas do estuário do rio Guaíba Porto Alegre (RS), que estavam ambientadas em nosso biotério. A coleta de sangue foi realizada em todos os períodos sazonais, por punção de vasos laterais do pescoço e coletados em tubos de ensaio heparinizados. Foram realizados esfregaços sanguíneos, corados com Leishmann e Giemsa, contando-se quinhentas células de cada animal e após a obtenção dos dados, foi aplicado o teste estatístico de Bonferroni. Para a análise autorradiográfica foi injetado 1000μCi / kg de thymidine-H A. Para microscopia eletrônica processamos a nata leucocitária obtida por meio de centrifugação do sangue, para a analise citoquímica incubamos com citidina-5'-monofosfato, betaglicerofosfato de sódio, Trimetafosfatase, para averiguar a resposta fagocitária utilizamos 0,01% de carvão coloidal.Os resultados mostram que os leucócitos de Phrynops hilarii tem descrição de leucócitos semelhantes às outras espécies, somente os basófilos e linfócitos não sofreram alterações em sua distribuição sazonal. Todos os leucócitos com exceção dos basófilos apresentaram renovação celular após sete dias. Caracterizamos monoblasto, promonócito, monócitos e macrófago no sangue circulante bem como a capacidade dos fagócitos mononucleares de fagocitar células mortas e materiais inerte. / Abstract: The aim of this study was to analyze the leukocytes in the blood using electronic and light microscopy and their seasonal distribution, also to characterize the leukocyte cells replacement and mainly to characterize the mononuclear phagocytes in the blood and their phagocytic capacity. In this study, it was used six turtles (Phrynops hilarii), caught at the Guaíba river estuary, Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil and lodged for 1 week at the Central Animal House, University of São Paulo, Ribeirão Preto, São Paulo, Brazil. Blood was obtained during the seasonal periods by puncturing the lateral vessels of the neck. The blood samples were stained by Leishmann and Giemsa, counting five hundred cells in each animal. After the obtained data, it was applied the Bonferroni test as statistical method. For the autoradiographic analysis, it was injected in the circulating blood 1000 μCi/kg of 3Hthymidine. For electronic microscopy, it was processed the leukocyte substrate by circulating blood centrifugation. For cytochemical analyses, blood smears were air dried, post-fixed in 4% formalin and submitted to the determination of the following enzyme activities: acid phosphatases (β-g1ycerophosphatase and citidine-5′-sodium monophosphatase), and trimetaphosphatase. The results showed that the leukocytes of Phrynops hilarii have the leukocytes description similar to the other species, only the basophiles and lymphocytes did not suffer alterations in their seasonal distribution. All the leukocytes, in exception of the basophiles showed cells replacement after seven days. It was characterized the monocytes and macrophages in the circulating blood as well as the phagocytes capacity. / Doutor

Orientador: Luiz Cláudio Nogueira Mendes / Banca: Alexandre Secorun Borges / Banca: Guilherme de Paula Nogueira / Resumo: O objetivo deste trabalho foi comparar o nível de estresse em cordeiros submetidos a quatro métodos de caudectomia. Para avaliação do estresse observou-se alterações do comportamento e postura adotada pelos animais, concentrações séricas de cortisol, glicemia, frequências cardíaca e respiratória e temperatura retal. Foram utilizados 50 cordeiros machos, não castrados da raça texel, divididos aleatoriamente em cinco grupos: Grupo A; caudectomia por anel de borracha, Grupo B; caudectomia por anel de borracha com aplicação de anestésico local, Grupo C; caudectomia por ferro quente, Grupo D; caudectomia por ferro quente com aplicação de anestésico local e o grupo controle (E), sem caudectomia. Os animais foram caudectomizados no sétimo dia de vida. Os resultados obtidos mostraram que as concentrações séricas de cortisol não sofreram alterações significativas (P<0,05), enquanto que, o nível glicêmico e a freqüência respiratória apresentaram aumento nos animais dos grupos A, C e D em relação ao grupo controle (E) (P< 0,05). A frequência respiratória e temperatura retal elevaram-se nos animais do grupo A e D. Alterações comportamentais foram apresentadas por todos os animais do grupo A, e por alguns dos animais do grupo C. Concluise que os métodos de caudectomia utilizados provocaram alterações comportamentais, com aumento dos valores dos níveis glicêmicos, das frequências cardíaca, respiratória e da temperatura retal. Estas alterações foram mais evidentes nos animais do Grupo A, mais discretas nos animais do Grupo C, portanto o uso do anestésico local é a forma menos estressante para se realizar a caudectomia / Abstract: The objective of the present study was to compare the level of stress on lamb wich underwent four different methods of tail docking. The evaluation was done by observation of behavioural changes and posture adopted by the animal serum levels of cortisol, glucemia, heart and respiratory rates and rectal temperatures. Fifth male lambs were used of the breed Texel none castrated divided at random in five groups: Group A: tail docking by rubber ring; Group B: docked by rubber ring puls local anesthetic; Group C: docked by hot iron; Group D: docked by hot iron plus local anesthetic; and the Control group (E), without tail docking. The obtained results show that the serum levels of cortisol did not have significant changes (P,0,05), while the glucemic level presented a significant increase in the animals of groups A, C and D in relation to the control group (E) (P,0,05). The heart rate increased significantly in the animals of group A, C and D (P,0,05) and respiratory rate and temperature increased in a significant way in the animals of group A and D. Behavioural changes were shown in all animals of group A and C (P,0,05). Therefore concluding that the tail docking methods used caused behavioural changes, with an increase of the values of glucemic levels, heart and respiratory rates and rectal temperature. The changes were more evident in the animals of group A, more discreet in just some animals of group C, therefore the use of local anesthetic is the less painful way to carry out this procedure for handling / Mestre

Orientador: Iracema M. P. Calderon / Orientador: Jon Oyvind Odland / Banca: Rosiane Mattar / Banca: Adriano Dias / Banca: Halina Barbara Rollin / Resumo: OBJETIVO: Determinar substâncias tóxicas persistentes (PTS) no sangue de 160 parturientes em áreas do Estado de São Paulo-Brasil. SUJEITOS E MÉTODOS: Foram analisados os PCBs (99, 101, 118, 138, 153, 156, 163, 170, 180, 183, 187, 194) e pesticidas organoclorados ( -HCH, -HCH, -HCH, HCB, p,p'-DDE, p,p'-DDT, t-chlordane, cchlordane, oxy-chlordane, t-nonachlor and c-nonachlor) em sete áreas; duas rurais (Botucatu e Ribeirão Preto), uma industrial (Campinas), uma litorânea (Santos) e três urbanas em São Paulo (UNIFESP, Vila Nova Cachoeirinha e Leonor Mendes de Barros). Valores abaixo do limite de detecção (LOD) foram substituídos por 0.5XLOD. Teste de Kruskall Wallis e Dumm compararam as áreas com níveis de PTS acima do LOD. O projeto foi aprovado pelo CEP da FMB. RESULTADOS: Os valores das PTS (ng/g lipideo) foram baixos. PCBs 118, 138, 153, p-p'-DDE e pesticidas -HCH, - CH, HCB, oxy-chlordane e t-nonachlor tiveram níveis acima do LOD em mais de 70% das amostras. PCB 118 foi significativamente diferente nas áreas, com concentração maior na industrial (Campinas; 4.64). O organoclorado p-p'-DDE na zona rural de Ribeirão Preto; (123.05) foi maior que na urbana de Vila Nova Cachoeirinha. A mediana do ß-HCH para as áreas foi 6.31, significativamente maior na zona rural de Botucatu (18.20). A maior concentração de oxy-chlordane (3.59) e de t-nanochlor (1.17) foi na zona rural de Ribeirão Preto (p<0.05), diferentes também da área urbana (Leonor Mendes de Barros; p<0.05). CONCLUSAO: As concentrações das PTS foram baixas com diferenças entre as áreas; os maiores valores estavam nas parturientes da zona rural. / Abstract: Persistent organic pollutants (POPs) present in the living environment are thought to have detrimental health effects on the population, with pregnant women and the developing foetus being at highest risk. We report on the levels of selected POPs in maternal blood of 160 delivering women residing in different regions within the São Paulo State, Brazil. Overall levels of measured compounds were found to be low with only PCBs 118, 138, 153 congeners, p-p'-DDE metabolite, -HCH, -HCH, HCB, oxy-chlordane and t-nonachlor pesticides having levels above LOD in more than 70% of the samples, thus comparisons between sites were performed for those compounds only. Statistical differences between sites were only observed for PCB 118 congener, with the highest concentration measured in the industrial site - Campinas (4.7 ng/g lipids). The p,p'-DDE metabolite was detected in all participants, with the median for all sites being 58.2 ng/g lipids, and large regional differences were evident. The highest levels of p,p'-DDE were measured in the rural 2 site - Ribeirão Preto with a median of 123 ng/g lipids that was significantly higher if compared with the urban 2 site (São Paulo City). The median concentration of ß-HCH for all sites was 6.31 ng/g lipids with the significantly highest concentration found in the rural 1 site - Botucatu (18.20 ng/g lipids). Oxy-chlordane was detected in all samples, with the highest concentration measured in the rural 2 site - Ribeirão Preto (3.6 ng/g lipids)¸which was found to be significantly higher than in all other sites The t-nonachlor compound was detected in 99% of samples with the highest concentration being 1.17 ng/g lipids, also in the rural 2 site- Ribeirão Preto. The level found in the rural 2 site was significantly higher than the level measured in the urban 3 site (São Paulo City)... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Aureo Evangelista Santana / Banca: Ana Paula Massae Nakage Canesin / Banca: Maria Angélica Dias / Banca: Márcia Rita Fernandes Canola / Banca: Julio Carlos Canola / Resumo: Apesar da importância do sangue do cordão umbilical (SCU) como fonte de células tronco e do advento da imunofenotipagem de linfócitos, não existem estudos sobre a imunofenotipagem de linfócitos do sangue do cordão umbilical eqüino. Este estudo visou determinar os valores eritroleucométricos e quantificar as subpopulações de linfócitos-T no SCU e no sangue obtido por venipunção da jugular de eqüinos neonatos da raça Brasileiro de Hipismo. Para tanto, foram realizadas as colheitas de SCU e da jugular de 20 potros ao nascimento. As amostras foram submetidas às determinações dos valores eritroleucométricos e à quantificação de subpopulações de linfócitos-T, pela técnica citofluorométrica. Não foram verificadas diferenças significativas (p>0,05) entre os valores médios obtidos para tais parâmetros quando comparados o sangue central e o SCU de neonatos eqüinos. Os valores eritrométricos encontrados no SCU e da jugular de neonatos equinos, exceto o VCM, se situaram na faixa de normalidade para animais adultos e foram inferiores aos valores reportados para eqüinos neonatos. O valor absoluto para neutrófilos segmentados, no SCU e no sangue da jugular dos neonatos, foi inferior ao reportado para eqüinos ao nascimento. As contagens de linfócitos CD5+ e CD4+ no SCU e jugular de neonatos eqüinos foram inferiores àquelas reportadas para o sangue periférico de eqüinos adultos, indicando um componente imunológico imaturo. No entanto, a contagem de linfócitos CD8+ foi semelhante à reportada para o sangue periférico de eqüinos adultos. A proporção CD4:CD8 obtida neste ensaio, tanto para o SCU (2,64l0,91) quanto para o sangue obtido por venipunção jugular (2,41l0,81), em eqüinos neonatos demonstrou dominância das células T CD4+ sobre os linfócitos T CD8+. / Abstract: Although the importance of umbilical cord blood as source of stem cells and the advent of Iymphocytes immunophenotyping, no studies have been performed on the immunophenotyping of equine UCB Iymphocytes. The objective of the present work was to determine erythrometric and leukometric values and quantify subpopulations of Iymphocytes in UCB and jugular blood of neonatal horses. UCB and jugular blood were collected from 20 foals of the Brasilian of Hipism breed at birth and processed for determination of erythrometric and leukometric values and quantification of subpopulations of T Iymphocytes by cytofluorometry. No significant difterences (p<0.05) were observed between average values in jugular blood of neonates and UCB of horses. Erythrometric values, except for mean corpuscular volume (MCV), were within the normal range seen in adult animais and below those reported for foal's circulating blood. Total values observed for segmented neutrophils in UCB and jugular blood of neonates were below those reported for horses at birth. CD5+ and CD4+ Iymphocytes were in lower frequencies in UCB and jugular blood of neonates than in peripheral blood of adult horses, indicating an immature immunological component. The frequency of CD8+ Iymphocytes, however, was similar to that described for the peripheral blood of adult horses. The CD4:CD8 proportion observed in the present study, for UCB (2.64:1:0.91) as well as for neonatal jugular blood (2.41:1:0.81), showed predominance of CD4+ T cells over CD8+ T Iymphocytes. / Doutor

Orientador: José Eduardo Cezar Sampaio / Banca: Rosemary Adriana Chiérici Marcantonio / Banca: Álvaro Francisco Bosco / Banca: Denise Maria Zezel / Banca: Antônio Wilson Sallum / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar in vitro, a adesão de elementos sanguíneos sobre superfícies radiculares irradiadas com laser de Er:YAG e de Diodo, e a ação destes sobre as superfícies radiculares. Foram obtidas 120 amostras de dentes humanos extraídos por doença periodontal, que foram previamente raspados e aplainados com instrumentos manuais, sendo a seguir divididas aleatoriamente em 6 grupos com 20 amostras cada. O G1 (controle)- não recebeu nenhum tratamento; o G2- recebeu aplicação tópica de EDTA 24%; G3- foi irradiado com laser de Er:YAG com 7,6 J/cm2; o G4- irradiado com laser de Er:YAG com 12,9 J/cm 2; o G5 -irradiado com laser de Diodo com 90 J/cm2 e o G6 - foi irradiado com laser de Diodo com 108 J/cm2. Após a realização dos tratamentos, em 10 amostras de cada grupo foi depositado imediatamente a sua punção, tecido sanguíneo originado da vascularização periférica de humano, sendo que 10 amostras não receberam tal tratamento. Após processamento laboratorial as amostras foram analisadas através de microscopia eletrônica de varredura. As fotomicrografias obtidas foram avaliadas através de dois índices: adesão de elementos sanguineos e de morfologia da superfície radicular e estatisticamente analisadas (Kruskall Wallis e Mann-Whitney). Os resultados demonstraram que em relação a adesão de elementos sanguíneos não houve diferenças estatisticamente significante entre o grupo controle e os tratados com o laser de Er:YAG (p=0,7733 e 0,7831) ; O G5 mostrou-se menos efetivo que o controle na adesão de elementos sanguíneos ( p=0,0305 ) e o G2 foi o menos efetivo de todos na adesão. Com relação a morfologia da superfície radicular houve diferenças significantes entre o controle e os grupos do laser de Er:YAG (p= 0,0001) e entre o G5 do Diodo (0,0259); entre o EDTA e os grupos do laser de Er:YAG (p=0,0150 ) e entre o... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The aim of this study was to evaluate in vitro the adhesion of blood components on root surfaces irradiated with Er:YAG and Diode lasers and these lasers effects on root surfaces. It was obtained 120 samples of human teeth extracted by periodontal disease. They were planed and scaled previously with manual instruments and randomly divided into 06 groups of 20 samples each. The groups were treated according to the following procedures: G1 (Control Group) -received no treatment; G2- had a topical application of EDTA 24%; G3- was irradiated with Er:YAG laser (7,6 J/cmø); G4 - was irradiated with Er:YAG laser (12,9 J/cmø); G5 - was irradiated with Diode laser (90 J/cmø) and G6 was irradiated with Diode laser (108 J/cmø). After these treatments were conducted, 10 samples of each group received a stippler, a blood tissue originated from peripheral vascularization, and the reminiscent samples did not receive such treatment. After laboratorial analysis the samples were analyzed through a scanning electronic microscopy. The photomicrographs obtained were evaluated according to adhesion of blood components and morphology of root surface; and statistically analyzed (Kruskall Wallis and Mann-Whitney). With relation to the adhesion of blood components, the results have shown that there were no significant differences between the Control Group and the groups treated with Er:YAG laser (p=0,7733 and 0,7831); G5 was less effective than the Control Group in adhesion of blood components (p=0,0305) and G2 was the least effective of all groups in this case. With relation to the morphology of root surface there were significant differences among the Control Group, the Er:YAG laser groups (p=0,0001) and the Diode laser G5 (p=0,0259); between the EDTA and the Er:YAG laser groups (p=0,0150) and also between the Diode laser G6 and the Er:YAG laser groups (p=0,0032)... (Complete abstract, click electronic address below). / Doutor

Orientador: Dimas Tadeu Covas / Banca: Dimas Tadeu Covas / Banca: Rodrigo Alexandre Panepucci / Banca: Haroldo Wilson Moreira / Resumo: A maior expressão de alvos transcricionais e componentes da via NFkB é uma característica distintiva das células-tronco hematopoéticas (CTH) CD34+ de sangue de cordão umbilical (SCU) comparadas às CTH CD34+ de medula óssea (MO) e pode estar relacionada com o estado mais primitivo das CTH dos neonatos. No entanto, as células CD34+ são um grupo heterogêneo de célulastronco (CT) e progenitoras em diferentes estágios de maturação e diferenças na composição celular entre MO e SCU poderiam contribuir para os resultados mencionados. Estudos recentes têm identificado o marcador de superfície CD133, como um marcador de CT mais primitivas, expresso em uma subpopulação de células CD34bright, com um sugestivo potencial de hemangioblasto. Com o objetivo de caracterizar a composição celular de MO e SCU e identificar mecanismos moleculares envolvidos com a maior primitividade das células CD133+, propusemos avaliar o perfis imunofenotípico (quanto à expressão de CD34 e CD133) por citometria de fluxo e de expressão gênica de células CD34+ e células CD133+ selecionadas imunomagneticamente, de ambas as fontes, pelas técnicas de microarray e PCR em tempo real. Nossos resultados revelaram que enquanto a maioria das células CD133+ são CD34+, independente da fonte, as células CD34+ de SCU possuem uma porcentagem significativamente maior de células CD133+ do que às células CD34+ de MO. A análise de clusterização revelou que as células CD133+ de MO se agrupam com as células de SCU (CD34+ e CD133+), enquanto as CD34+ de MO aparecem como um grupo distinto. A comparação dos perfis de expressão gênica entre as células CD133+ e as células CD34+, revelou a hiper-expressão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: A higher expression of transcription targets and components of the NF-kB pathway is a distinctive feature of umbilical cord blood (UCB) CD34+ hematopoietic stem cells (HSC) when compared to bone marrow (BM) CD34+ HSC and this could be related to the more primitive state of the newborn's HSC. However, CD34+ cells represent a heterogeneous group of cells composed by stem and progenitors cells in different developmental stages, and differences in cellular composition between both sources could contribute for these finding. The surface marker CD133 has been identified as a very primitive marker, expressed in a subpopulation of CD34bright, with a proposal hemangioblast potential. Thus, in attempt to better characterize the cellular composition of UCB and BM and to identify molecular mechanisms related to the more primitive characteristics of CD133+ cells, we proposed to evaluate the immunophenotypic profile (expression of CD34 and CD133) by flow-cytometry and the gene expression profiles of immunomagnetically selected CD34+ and CD133+ cells, from both sources, by microarray and Real time PCR. Our results highlighted that, while almost all CD133+ cells are CD34+ independently of the evaluated source, the UCB CD34+ cells showed a significantly higher proportion of CD133 expression, compared to BM CD34+ cells. After obtaining the expression profiles from distinct HSC pooled samples generated by microarrays, cluster analysis showed that BM CD133+ cells preferentially grouped with UCB cells (CD34+ and CD133+) instead of BM CD34+ cells, which appeared as a very distinct profile The comparison between CD133+ and CD34+ samples revealed the over-expression of 47 transcriptional factors (TF) in CD133+ cells, many of them well-known and related... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre