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Avaliação da taxa de prenhez em novilhas tratadas com protocolo GnRH-PGF2'alfa' -Benzoato de Estradiol (GPE) e em vacas submetidas a tratamentos hormonais com progesterona associados ou não a remoção temporária de bezerros /

Ereno, Ronaldo Luiz. January 2003 (has links)
Orientador : Ciro Moraes Barros / Resumo: A curta duração do estro na raça Nelore (Bos indicus), dificulta a detecção do estro nos programas convencionais de inseminação artificial. A fim de contornar este problema, foram testados tratamentos hormonais para sincronizar a ovulação e permitir a IA com tempo fixo (IATF). No experimento (Exp.) I, novilhas Nelore (n=222), foram distribuídas aleatoriamente em 3 grupos: Grupo GP (n=71), GPE (n=71) e PP-GPE (n=80). Os animais do Grupo GP foram tratados com um análogo do GnRH (50 μg de acetato de gonadorelina, via IM, Dia 0), seguido 7 dias mais tarde por PGF2α (150 μg de d-cloprostenol, Prolise, via IM, Dia 7). Após a injeção de PGF2α, as novilhas do foram observados duas vezes ao dia para a detecção do cio e a IA foi realizada 12 horas mais tarde. No Grupo GPE as novilhas receberam uma injeção adicional de benzoato de estradiol (BE, 1,0 mg, Estrogin, via IM) 24 h após a administração de PGF2α e foram inseminadas entre 30 e 36 h após a injeção de BE. Os animais do Grupo PP-GPE ), foram pré sincronizados com 2 aplicações de PGF2α, com intervalo de 11 dias entre as mesmas. Onze dias após a segunda aplicação de PGF2α, as novilhas foram tratadas e IA de acordo com o protocolo GPE. No Exp.II, Vacas Nelore (60 a 90 dias pós parto) foram distribuídas aleatoriamente em 4 grupos: Grupo Controle (n=82), Grupo CIDR/IATF (n=80), Grupo P4100mg (n=72) e Grupo P450/50mg (n=76). Os animais do Grupo Controle receberam um dispositivo intravaginal contendo progesterona (CIDR, 1,9 g de progesterona) e uma injeção de BE (2,5 mg, via IM, Dia 0). Nove dias mais removeu-se o CIDR e administrou-se PGF2α (150 μg, via IM, Dia 9). Após a injeção de PGF2α os animais foram observados duas vezes ao dia para detecção de cio e a IA foi realizada 12 horas mais tarde. Grupo CIDR/IATF (n=80), este tratamento foi similar... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The short duration of estrous behavior makes it difficult to detect estrus in Nelore (Bos indicus) females. In order to overcome this problem, hormonal treatments that synchronize ovulation and allow fixed-time artificial insemination (FTAI) were tested. In Experiment (Exp.) I, Nelore heifers (n=222), were randomly allocated to 3 groups: Group GP (n=71), GPE (n=71) and PP-GPE (n=80). The heifers from Group GP were administered a GnRH agonist (50 μg gonadorelin acetate, im, Day 0) followed 7 days later by PGF2α (150 μg dl-cloprostenol, im, Day 7). After PGF2α injection, heifers were observed twice a day to detect estrus. All animals from this Group were and AI was performed 12 afterwards. In GPE group the heifers were treated as in Group GP and received an injections of estradiol benzoate (EB, 1.0 mg, im, Day 8) 24 h after PGF2α administration. All heifers from this group were FTAI 30 to 36 h after EB injection (Day 9). The animals from group PP-GPE were pre-synchronized with two injections of PGF2α, administered 11 days apart. Eleven days after the last PGF2α administration the heifers were treated and FTAI as in GPE protocol. In Exp. II, Nelore cows (60 to 90 days postpartum) were randomly allocated into 4 groups: Group Control (n=82), Group CIDR/FTAI (n=80), Group P4100mg (n=72) and Group P450/50mg (n=76). The animals from Group Control received a progesterone intravaginal device (CIDR, 1.9 g progesterone) and an injection of EB (2.5 mg, im, Day 0). Nine days later the CIDR was removed and PGF2α (150 μg, im) was administered (Day 9). After PGF2α injection, heifers were observed twice a day to detect estrus and AI was performed 12 afterwards. Group CIDR/FTAI, this treatment was similar to Group Control, except that 24 h after CIDR removal and PGF2α administration, the animals received EB (1.0 mg, im). Thirty to 36 h after the last EB... (Complete abstract, click electronic address below). / Mestre
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Avaliação da biometria testicular, concentração plasmática de hormônios e minerais em bovinos Nelore variedade Mocha dos 12 aos 24 meses de idade /

Lezier, Dorça Helena. January 2003 (has links)
Orientador : Eunice Oba / Resumo: No presente trabalho foram utilizados 55 bovinos Nelore variedade Mocha, criados sob condições extensivas, visando avaliar a biometria testicular, as concentrações plasmáticas de hormônio luteinizante, testosterona, triiodotironina, tiroxina e os teores de cobre e zinco, e o efeito da época do ano (seca e chuva) sobre estas características, dos 12 aos 24 meses de idade. Para as medidas testiculares foi utilizada fita métrica e a colheita de sangue foi realizada por venopunção, em tubos de vacutainer heparinizados. Após a centrifugação, o plasma foi armazenado a -20ºC para posterior análise hormonal e mineral. Os valores médios do perímetro escrotal, altura, largura dos testículos direito e esquerdo e o peso dos animais foram de: 24,91 ± 2,81 cm, 8,74 ± 1,04 cm; 4,68 ± 0,61 cm; 8,75 ± 1,10 cm, 4,66 ± 0,62 cm e 304,35 ± 1,30 Kg, respectivamente. As concentrações médias plasmáticas dos hormônios luteinizante, testosterona, triiodotironina e tiroxina foram de√0,25 ± 0,08 ng/dL ou 0,07 ± 0,08 ng/mL, 168,04 ± 95,70 ng/mL, 1,31 ± 0,12 ng/dL e 0,25 ± 0,07 μg/dL, respectivamente. Os teores médios de cobre e zinco foram de 0,29 ± 0,01 mg/L e 0,27 ± 0,01 mg/L respectivamente. O perímetro escrotal, altura e largura dos testículos direito e esquerdo, os hormônios luteinizante , testosterona, triiodotironina e tiroxina e os minerais cobre e zinco mostraram efeito significativo, p<0,01, para idade dos 12 aos 24 meses. O zinco apresentou diferença significativa, p<0,01, para época do ano (inverno e verão /seca e chuva). / Abstract: In the present work 55 polled Nelore bovines were used, raised under extensive conditions, aiming to evaluate testicular biometry, plasmatic concentrations of luteinizant hormone, testosterone, triiodothyronine, thyroxine and copper and zinc concentration and the effect of season (draught and rain) over these characteristics, from 12 to 24 months old.It was used scrotal tape for the testicle measurement and the blood samples were obtained by jugular venopunction in heparinized vacun tubes. After the centrifugation, the plasma was storaged at -20ºC until hormonal and mineral assays. The average values of scrotal perimeter, height, right and left testicles width and weight of animals were: 24.91 cm, 8.74 cm, 4.68 cm, 8.75 cm, 4.66cm and 304.35 kg, respectively. Average plasmatic concentrations of square root hormones of luteinizant hormone, testosterone, triiodothyronine and thyroxine were 0.25 ± 0.08 ng/dL, 168.04 ± 95.70 ng.mL, 1.31 ± 0.12 ng/dL and 0.25 ± 0.07 μg/dL, respectively. Average concentration of copper and zinc were 0.29 ± 0.01 mg/L and 0.27 ± 0.01 mg/L, respectively. Scrotal perimeter, right and left testicles height and width, luteinizant hormones, testosterone, triiodothyronine and thyroxine and the minerals copper and zinc showed significant effect, p<0.01, for age from 12 to 24 months old. Zinc presented significant difference, p<0.01, for season (draught and rain). / Doutor
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Predição da precocidade sexual na pré e puberdade, através de escores visuais de conformação, precocidade e musculosidade em fêmeas da raça Nelore /

Souza, Juliano Franco de. January 2003 (has links)
Orientador : Antônio Emídio Dias Feliciano Silva / Resumo: RESUMO O objetivo deste trabalho foi avaliar a campo a eficiência dos escores visuais de conformação de carcaça, precocidade de terminação e musculosidade (C.P.M.) na predição da precocidade da atividade sexual, em novilhas Nelores. O trabalho foi realizado na Fazenda Santa Rosa, município de Xinguara, sudeste do estado do Pará, latitude 7,10o ao W, longitude 49o ao S. O clima da região é o equatorial superúmido, tipo amazônico com temperaturas médias anuais de 26 o C, umidade relativa do ar = 78% e pluviosidade de 2000 mm/ano. Os animais foram manejados em pastagens de Brachiaria brizantha, em sistema rotacionado, recebendo sal mineralizado ad libitum. Foram utilizadas 283 novilhas, as quais foram avaliadas na desmama (oito meses de idade), quanto ao peso corporal (PESO8), escores visuais de conformação de carcaça (C8), de precocidade de terminação (P8) e de musculosidade (M8). Aos 15 meses de idade, ou seja, no início da estação de monta, as novilhas foram reavaliadas quanto ao peso corporal (PESO15), escores visuais de conformação de carcaça (C15), de precocidade de terminação (P15) e de musculosidade (M15). Ainda, foram realizadas avaliações dos escores reprodutivos: ovário (OVÁRIO), útero (ÚTERO), tamanho (VULVA) e cor da vulva (COR), além de tamanho do corpo: comprimento (COMP), altura (ALTURA) e comprimento do UMBIGO. Foram avaliados ainda o peso (P_MÃE) e ano de nascimento da mãe (ANO), idade à prenhez (IDA_PREN) e parição (IDA_PAR) das novilhas. Houve correlação, de magnitude intermediária (r = 0,27 a 0,40), entre os escores de avaliações visuais de conformação de carcaça, precocidade de terminação e musculosidade aos oito e 15 meses de idade, indicando que estas avaliações... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The objective of this work was to evaluate in Nellore heifers raised on pasture the efficiency of visual scores of carcass conformation, the carcass termination and muscular precocity (C.P.M.) to predict the precocious onset of sexual activity. The work was conducted at Santa Rosa farm, Xinguara community, localized on southeast Para state at 7.10o W latitude and 49o S longitude. The climate are Amazonian - equatorial, characterized by median temperature of 26º C, relative humidity = 78% and high rain incidence (2000mm/year). The animals were raised using rotating system and receiving mineral salt ad libitum. The 283 heifers used in this work were evaluated at weaning (eight month of age) for body weight (PESO8), visual scores of carcass conformation (C8), and terminal carcass (P8) and musculature (M8) precocity. At 15 month of age, matting beginning, the heifers were reevaluated for body weight (PESO15), visual score of carcass conformation (C15), and terminal carcass (P15) and musculature (M15) precocity. It was still realized reproductive scores of ovary (OVARIO), uterus (UTERO), the size (VULVA) and color (COR) of external genitalia, beside of body sizes: length (COMP), height (ALTURA) and umbilical length (UMBIGO). It was still considerate the weight (P_MAE) and year of dam birth (ANO), and pregnancy (IDA_PREN) and parturition (IDA_PAR) of the heifers. The statistics showed a median intensity correlation (r = 0.27 to 0.40) between visual scores of carcass conformation, carcass termination and muscular precocity at eight and 15 month of age. These indicate that the two evaluations may be done together or separately, once the measures at eight-month point to those of 15 month of age. However, for a security selection of the animals, it is recommended to use the both evaluations. Considering the reproductive characteristics, only the OVARIO showed a... (Complete abstract, click electronic address below). / Mestre
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Produção de 13, 14-diidro 15-ceto prostaglandina F2'alfa'(PGFM) em resposta à ocitocina no período pós-parto em vacas da raça Nelore /

Satrapa, Rafael Augusto. January 2007 (has links)
Orientador: Ciro Moraes de Barros / Banca: Mário Binelli / Banca: João Carlos Pinheiro Ferreira / Resumo: Objetivou-se com o presente estudo avaliar, em vacas Nelore no período pós-parto inicial, se o aumento farmacológico nas concentrações plasmáticas de estradiol no período pré-ovulatório e/ou "priming" de progesterona (P4) precedendo a ovulação, induzida por tratamentos hormonais, seriam capazes de diminuir a liberação de PGF2 induzida pela administração de ocitocina e, conseqüentemente, evitar a lise prematura do corpo lúteo formado após a primeira ovulação. Vacas Nelore lactantes (n = 30) foram divididas aleatoriamente em 3 Grupos: RTB/GPE (n = 10), RTB/GPE/eCG (n = 10) e RTB/GPG/eCG (n = 10). Em estágio aleatório (D-8, 40 a 70 dias pós-parto), os animais do grupo RTB (remoção temporária do bezerro, 48 h antes do início dos tratamentos)/GPE (GnRH - Prostaglandina - Benzoato de Estradiol) receberam 50 g de um análogo do GnRH (lecirelina, IM, Gestran plus ). Sete dias mais tarde (D-1) os animais receberam injeção de um agente luteolítico (250 g de d-cloprostenol, IM, Prolise ) e no dia 0 (D0) foi administrado 1,0 mg de benzoato de estradiol (BE, IM, Estrogin ). No grupo RTB/GPE/eCG os animais, além de serem tratados com o protocolo GPE, receberam 400 UI de eCG (IM, Novormon ), logo após a administração do agente luteolítico (D-1). No grupo RTB/GPG/eCG, os animais foram tratados de acordo com o protocolo RTB/GPE/eCG, exceto que no lugar do BE foi administrada uma segunda dose de GnRH (50 g de lecirelina, IM) no D0. Em todos os animais foram realizados exames ultra-sonográficos dos ovários (Aloka SSD-500, probe de 7,5 MHZ) e coletas sanguíneas nos dias das aplicações hormonais, com a finalidade de classificar os grupos de acordo com a presença ou ausência de altas concentrações de P4 ("priming" de P4) antes da ovulação do folículo dominante. O desafio com ocitocina (OT, 50 UI, IV, Univet )... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The purpose of the present study was to evaluate, in early postpartum anestrus of Nelore cows, if the increase of estradiol plasma concentrations in pre-ovulatory period and/or high concentrations of progesterone (P4) preceding ovulation (P4 priming), induced by hormonal treatment, reduces endogenous releasing of PGF2 and, consequently, prevents premature lysis of corpus luteum formed after ovulation. Nelore lactating cows (40 to 70 d postpartum, n = 30), were randomly divided into 3 Groups: GPE (n = 10), GPE/eCG (n = 10) and GPG/eCG (n = 10). At random stage of the estrous cycle (D-8), the animals of GPE group (GnRH - Prostaglandin - Estradiol Benzoate) were treated with a GnRH agonist (50 g lecirelin, IM, Gestran Plus ). Seven days later (D-1) the cows received a luteolytic dose of PGF2a (250 g d-cloprostenol, IM, Prolise ), and on day 0 (D0) 1.0 mg of estradiol benzoate (EB, IM, Estrogin ). Cows from GPE/eCG group received the GPE treatment associated with 400 IU of eCG (IM, Novormon ) on D-1, right after PGF2a administration. The GPG/eCG group was similar to GPE/eCG, except that EB was replaced with a second dose of GnRH (50 g lecirelin, IM). Ovarian ultrasonography were performed (Aloka 500 SSD with a 7.5 MHZ transducer) and blood samples were collected at the days of hormones administration, in order to classify the groups based upon the presence or absence of progesterone (P4 priming), before ovulation. All animals were challenged with oxitocin (OT, 50 IU, IV, Univet ) 6, 9, 12, 15 and 18 days after BE (RTB/GPE and RTB/GPE/eCG groups) or GnRH (RTB/GPG/eCG group) administration and blood samples were collected before and 30 minutes after oxitocin challenge. Moreover, the calves were removed from the cows, during 48 h before the beginning of the treatments. ANOVA was used to estimate the effect of treatment, P4 priming and interactions in the discrete (Complete abstract, click electronic address below) / Mestre
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Regulação da expressão dos receptores de fatores de crescimento fibroblásticos 3c e 4 (FGFR-3c e FGFR-4) em folículos antrais bovinos /

Teixeira, Andrey Borges. January 2004 (has links)
Orientador: José Buratini Júnior / Resumo: Estudos recentes indicam o envolvimento do FGF-8 no controle do desenvolvimento folicular. O FGF-8 ativa preferencialmente o FGFR-3c e o FGFR-4, cuja expressão em folículos antrais ainda não foi determinada. No presente estudo, avaliou-se a expressão do FGFR-3c e -4 em células da teca e da granulosa de folículos antrais bovinos. e testou-se a hipótese de que a expressão destes genes é regulada durante o desenvolvimento fo!icular antral bovino. Ovários bovinos foram obtidos em matadouro local, folículos maiores que 5mm foram dissecados e medidos, células da teca e da granulosa foram separadas e o RNA total extraído. As concentrações de estradiol e de progesterona do fluido folicular foram determinadas por radioimunoensaio. Folículos com progesterona acima de 100ng/mL foram considerados atrésicos e excluídos da análise. Os folícu!.os restantes foram agrupados de acordo com a concentração de estradiol como se segue: (a) <5; (b) 5-20; (c) >20100; e (d) >100ng/mL. Além disso, os folículos foram divididos em três grupos de acordo com o tamanho: (a) 5-7; (b) 8-10 e (c) >10mm. Folículos inteiros entre 2 e 4mm de diâmetro foram incluídos na análise da expressão do FGFR-4. A expressão do FGFR-3c e FGFR-4 foi examinada por RT-PCR semiquantitativo com iniciadores espécie-específicos. O RT-PCR semiquantitativo foi validado pela escolha de números de ciclos de PCR e quantidade de RNA dentro da fase linear da curva de amplificação. A intensidade das bandas foi analisada por densitometria computadorizada. Em células da granulosa, houve correlação positiva entre a expressão do FGFR-3c e a concentração de estradiol no fluido folicular, em sintonia com níveis mais altos de RNAm em grupos com maiores concentrações de estradiol, e também aumentou com o diâmetro folicular. Em células da teca, a expressão do FGFR-3c também foi detectada,...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Recent studies indicate the involvement of FGF-8 in the control of follicular development. FGF-8 preferentially activates FGFR-3c and FGFR-4, although the expression of these receptors has not been investigated in bovine antral follicles yet. In the present work, FGFR-3c and -4 gene expression was assessed in theca and granulosa cells from bovine antral follicles and the hypothesis that FGFR-3c and -4 gene expression is regulated during antral follicle development in cattle was tested. Bovine ovaries were obtained at a local abattoir, follicles greater than 5mm in diameter were dissected and measured, granulosa and theca cells were separated, and total RNA extracted. Estradiol and progesterone concentrations were measured in the follicular fluid by RIA. Follicles with progesterone levels above 100ng/mL were considered atretic and excluded from the analysis. Remaining follicles were grouped according to estradiol concentration as follows: (a) <5; (b) 5-20; (c) >20-100; and (d) >100ng/mL. In addition, follicles were divided into three groups according to size: (a) 57; (b) 8-10 and (c) >10mm. Whole follicles at 2-4mm in diameter were included in the analysis of FGFR-4 gene expression. FGFR-3c and FGFR-4 gene expression was examined by semi-quantitative RT-PCR using bovine specific primers. Semiquantitative RT-PCR was validated by choosing number of PCR cycles and amount of RNA within the linear range of the amplification curve. Band intensities were analyzed by computerized densitometry. In granulosa cells, FGFR-3c expression was positively correlated with estradiol concentration in the follicular fluid in agreement with higher mRNA levels in groups with higher estradiol concentrations, and also increased with follicle size. In theca cells, FGFR-3c gene expression was also detected but did not change with follicle size or estradiol concentration. For FGFR-4, gene expression was restrict...(Complete abstract click eletronic access below) / Doutor
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Expressão dos transcritos do receptor de LH em células da granulosa de fêmeas nelore submetidas ou não à superestimulação ovariana /

Fernandes, Paulo. January 2008 (has links)
Orientador: Ciro Moraes Barros / Banca: José Buratini Junior / Banca: Marcelo Fabio Gouveia Nogueira / Banca: Andrey Borges Teixeira / Banca: Maura Elena Ortiz D'Ávila Assumpção / Resumo: Objetivou-se com o presente trabalho avaliar a expressão das isoformas (M1 a M4) do receptor de LH (LHR) em células da granulosa de folículos 8,5 mm de diâmetro obtidos de novilhas cíclicas (grupo NC) ou de vacas superestimuladas (grupo VSE), na raça Nelore. As novilhas cíclicas (n=4) foram submetidas à sincronização da ovulação e em seguida monitoradas por ultra-sonografia transretal, até serem abatidas no terceiro ou quinto dia após a ovulação. As vacas do grupo VSE (n=5) foram submetidas à superestimulação ovariana (protocolo P-36 modificado) e ovariectomizadas 36 horas após a remoção da fonte de progesterona. A expressão das isoformas do LHR (M1 a M4) foram calculadas como valores relativos à expressão do GAPDH. Verificou-se menor expressão do gene do LHR no grupo VSE quando comparado ao grupo NC (6,5±0,35 e 28,96±0,4, respectivamente; Bonferroni, p<0,02). Quando os dados dos grupos NC e VSE foram analisados conjuntamente, obteve-se maior expressão das isoformas M1 (27,22±0,19) e M3 (28,37±0,22) quando comparadas com as isoformas M2 (6,46± 0,38) e M4 (5,05±0,43, Bonferroni, p<0,02). No grupo NC, a expressão do LHR foi mais intensa nos folículos coletados no quinto dia (12 mm de diâmetro, 38,1±0,03) quando comparados aos obtidos no terceiro dia (8,75 mm, 22,6±0,03, Bonferroni, p<0,01) após a ovulação. Estes resultados são indicativos de que o tratamento superestimulatório com Folltropin® em vacas Nelore diminuiu a expressão do LHR nas células da granulosa, aumentou as concentrações intrafoliculares de progesterona, reduziu a razão E2/P4, e que a expressão das isoformas M1 e M3 foi mais abundante do que as M2 e M4 tanto nas novilhas cíclicas quanto nas vacas superestimuladas. / Abstract: The aim of the present work was to evaluate in the Nelore breed the gene expression of LH receptor isoforms (M1 to M4) in granulosa cells of follicles 8.5 mm diameter from cycling heifers (CH) and superestimulated cows (SC). The cycling heifers (n=4) were submitted to synchronization of ovulation and afterwards evaluated by transrectal ultrasonography until the third and fifth days after ovulation, when the animals were slaughtered to obtain the ovaries and follicles. The SC group (n=5) were submitted to ovarian superstimulation (modified Protocol P-36) and ovariectomized 36 hours after removal of progesterone source. The results of the isoforms expression (M1 to M4) were calculated as GAPDH expression. There was a lower expression of LH receptor gene in SC group as compared to CH group (6.50±0.35 and 28.96±0.40, respectively, Bonferroni, p<0.02). When data of both groups were analyzed together, there was a higher expression of M1 (27.22±0.19) and M3 (28.37±0.22) isoforms when compared to M2 (6.46± 0.38) and M4 (5.05±0.43, Bonferroni, p<0.02). In CH group, LHR expression was more intense in follicles obtained in the fifth day (12 mm diameter, 38.1±0.03) when compared to those obtained on third day (8.75 mm, 22.6±0.03, Bonferroni, p<0.01) after ovulation. The results indicated that superstimulatory treatment with FSH in Nelore cows decreased LH receptor expression in granulosa cells, it increased the concentrations progesterone intrafolliculares, it reduced the reason E2/P4, and that M1 and M3 isoforms expression were more abundant than M2 and M4 in both cycling and superstimulated animals. / Doutor
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Regulação da expressão dos receptores de fatores de crescimento fibroblásticos 3c e 4 (FGFR-3c e FGFR-4) em folículos antrais bovinos

Teixeira, Andrey Borges [UNESP] January 2004 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T20:06:45Z : No. of bitstreams: 1 teixeira_ab_dr_botfmvz.pdf: 451690 bytes, checksum: 43a263398a04004fc36761e1858abd63 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Estudos recentes indicam o envolvimento do FGF-8 no controle do desenvolvimento folicular. O FGF-8 ativa preferencialmente o FGFR-3c e o FGFR-4, cuja expressão em folículos antrais ainda não foi determinada. No presente estudo, avaliou-se a expressão do FGFR-3c e -4 em células da teca e da granulosa de folículos antrais bovinos. e testou-se a hipótese de que a expressão destes genes é regulada durante o desenvolvimento fo!icular antral bovino. Ovários bovinos foram obtidos em matadouro local, folículos maiores que 5mm foram dissecados e medidos, células da teca e da granulosa foram separadas e o RNA total extraído. As concentrações de estradiol e de progesterona do fluido folicular foram determinadas por radioimunoensaio. Folículos com progesterona acima de 100ng/mL foram considerados atrésicos e excluídos da análise. Os folícu!.os restantes foram agrupados de acordo com a concentração de estradiol como se segue: (a) <5; (b) 5-20; (c) >20100; e (d) >100ng/mL. Além disso, os folículos foram divididos em três grupos de acordo com o tamanho: (a) 5-7; (b) 8-10 e (c) >10mm. Folículos inteiros entre 2 e 4mm de diâmetro foram incluídos na análise da expressão do FGFR-4. A expressão do FGFR-3c e FGFR-4 foi examinada por RT-PCR semiquantitativo com iniciadores espécie-específicos. O RT-PCR semiquantitativo foi validado pela escolha de números de ciclos de PCR e quantidade de RNA dentro da fase linear da curva de amplificação. A intensidade das bandas foi analisada por densitometria computadorizada. Em células da granulosa, houve correlação positiva entre a expressão do FGFR-3c e a concentração de estradiol no fluido folicular, em sintonia com níveis mais altos de RNAm em grupos com maiores concentrações de estradiol, e também aumentou com o diâmetro folicular. Em células da teca, a expressão do FGFR-3c também foi detectada,... / Recent studies indicate the involvement of FGF-8 in the control of follicular development. FGF-8 preferentially activates FGFR-3c and FGFR-4, although the expression of these receptors has not been investigated in bovine antral follicles yet. In the present work, FGFR-3c and -4 gene expression was assessed in theca and granulosa cells from bovine antral follicles and the hypothesis that FGFR-3c and -4 gene expression is regulated during antral follicle development in cattle was tested. Bovine ovaries were obtained at a local abattoir, follicles greater than 5mm in diameter were dissected and measured, granulosa and theca cells were separated, and total RNA extracted. Estradiol and progesterone concentrations were measured in the follicular fluid by RIA. Follicles with progesterone levels above 100ng/mL were considered atretic and excluded from the analysis. Remaining follicles were grouped according to estradiol concentration as follows: (a) <5; (b) 5-20; (c) >20-100; and (d) >100ng/mL. In addition, follicles were divided into three groups according to size: (a) 57; (b) 8-10 and (c) >10mm. Whole follicles at 2-4mm in diameter were included in the analysis of FGFR-4 gene expression. FGFR-3c and FGFR-4 gene expression was examined by semi-quantitative RT-PCR using bovine specific primers. Semiquantitative RT-PCR was validated by choosing number of PCR cycles and amount of RNA within the linear range of the amplification curve. Band intensities were analyzed by computerized densitometry. In granulosa cells, FGFR-3c expression was positively correlated with estradiol concentration in the follicular fluid in agreement with higher mRNA levels in groups with higher estradiol concentrations, and also increased with follicle size. In theca cells, FGFR-3c gene expression was also detected but did not change with follicle size or estradiol concentration. For FGFR-4, gene expression was restrict...(Complete abstract click eletronic access below)
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Produção in vitro de embriões derivados de oócitos obtidos em diferentes fases da onda folicular de vacas Nelore(Bos taurus indicus)

Melo, Danilas Salinet de [UNESP] 17 December 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-12-17Bitstream added on 2014-06-13T20:06:46Z : No. of bitstreams: 1 melo_ds_dr_botfmvz.pdf: 214896 bytes, checksum: fd202efac4cfc861e2f0e8d9a33f3ced (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo foi avaliar, em vacas Nelore, a influência da fase da onda folicular na qualidade e quantidade dos oócitos recuperados, através da OPU (ovum pick-up), assim como a produção de blastocistos. Todos os animais (n=10) receberam em dia aleatório do ciclo estral um implante auricular de progestágeno (Crestar) e uma aplicação de 2 mg de Benzoato de Estradiol (Estrogin) com o objetivo de sincronizar a onda folicular. Após sete dias o implante foi retirado e foi aplicada uma dose de 2ml de um análogo da PGF2 (Preloban®). Após de 24 hs as doadoras foram submetidas à aspiração do folículo dominante (AFD) sendo então este momento considerado dia 0. Após a AFD, as doadoras foram submetidos a OPU nos dias 3, 5, 7, e 9 (Grupo D3, D5, D7 e D9) da nova onda folicular. Foram realizadas quatro fases (Fase 1, 2, 3 e 4) onde os animais foram trocados de grupo a cada fase, de forma que cada animal foi submetido aos quatro tratamentos. A cada fase o protocolo era iniciado com dois dias de intervalo entre um grupo e outro, iniciando pelo grupo D9 e na seqüência os grupos D7, D5, D3, desta forma todas as doadoras foram aspiradas no mesmo dia, porém com a onda folicular em dias diferentes. O objetivo deste delineamento foi para que as aspirações fossem efetuadas no mesmo dia, de forma que os oócitos recuperados fossem maturados, fertilizados e cultivados in vitro numa mesma sessão de PIV. Duas hipóteses foram testadas: 1- O número de oócitos viáveis recuperados seria maior na fase inicial da onda folicular (dia 3) ou logo após a divergência folicular (dia 5) do que obtidos em períodos mais tardios da fase de dominância (dias 7 e 9). 2- Os oócitos aspirados no início da onda folicular (dia 3 ou 5) teriam melhor competência e produziriam maior número de blastocistos do que oócitos obtidos no final da onda (dias 7 e 9), pois estes estariam num grau de atresia avançado. Não houve diferença no número... / The objective of this experiment was to evaluate in Nelore cows the influence of the moment of the follicular wave in the quality and amount of the recovered oocytes, through the OPU, (ovum pick-up), as well as the production of blastocysts. All the animals (n=10) received in random day of the estrous cycle an auricular progestogen implant (Crestar) and was administered of 2mg of estradiol benzoate (Estrogin) with the objective of synchronizing the follicular wave. After seven days the implant was removed and a dose of 2ml of an analogous of PGF2 was administrated (Preloban®). After 24 hours the donors were submitted later of the dominant follicle aspiration (DFA) being then this moment considered day 0. After DFA the donors were submitted to OPU after on the 3, 5, 7, and 9 days (Groups D3, D5, D7 and D9) of the new follicular wave. Four sessions were accomplished (sessions 1, 2, 3 and 4) where the animals were changed from group to each phase, so that each animal it was submitted to the four treatments. To each phase the protocol was begun with two days of interval among a group and other, beginning for the group D9 and in the sequence the groups D7, D5, D3, this way all of the donors were aspirated in the same day, however with the follicular wave in different days. The objective of this outline was so that the aspirations were made in the same day, so that the recovered oocytes they went maturated, fertilized and development in vitro in a same session of IVP. Two hypotheses were tested: 1 - the number of recovered viable oocytes would be larger numerical in the initial phase of the wave follicular (day 3) or soon after the follicular divergence (day 5) of those obtained in later periods of the dominancy phase (days 7 and 9). 2 - The oocytes aspirated in the beginning of the follicular wave (day 3 or 5) they would be better competent and they would produce larger number of blastocysts than oocytes obtained in the end of the wave ...
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Expressão dos transcritos do receptor de LH em células da granulosa de fêmeas nelore submetidas ou não à superestimulação ovariana

Fernandes, Paulo [UNESP] 07 August 2008 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-08-07Bitstream added on 2014-06-13T21:07:31Z : No. of bitstreams: 1 fernandes_p_dr_botfmvz.pdf: 525710 bytes, checksum: d101803790fb9aa88818f17ca9c56bde (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Objetivou-se com o presente trabalho avaliar a expressão das isoformas (M1 a M4) do receptor de LH (LHR) em células da granulosa de folículos 8,5 mm de diâmetro obtidos de novilhas cíclicas (grupo NC) ou de vacas superestimuladas (grupo VSE), na raça Nelore. As novilhas cíclicas (n=4) foram submetidas à sincronização da ovulação e em seguida monitoradas por ultra-sonografia transretal, até serem abatidas no terceiro ou quinto dia após a ovulação. As vacas do grupo VSE (n=5) foram submetidas à superestimulação ovariana (protocolo P-36 modificado) e ovariectomizadas 36 horas após a remoção da fonte de progesterona. A expressão das isoformas do LHR (M1 a M4) foram calculadas como valores relativos à expressão do GAPDH. Verificou-se menor expressão do gene do LHR no grupo VSE quando comparado ao grupo NC (6,5±0,35 e 28,96±0,4, respectivamente; Bonferroni, p<0,02). Quando os dados dos grupos NC e VSE foram analisados conjuntamente, obteve-se maior expressão das isoformas M1 (27,22±0,19) e M3 (28,37±0,22) quando comparadas com as isoformas M2 (6,46± 0,38) e M4 (5,05±0,43, Bonferroni, p<0,02). No grupo NC, a expressão do LHR foi mais intensa nos folículos coletados no quinto dia (12 mm de diâmetro, 38,1±0,03) quando comparados aos obtidos no terceiro dia (8,75 mm, 22,6±0,03, Bonferroni, p<0,01) após a ovulação. Estes resultados são indicativos de que o tratamento superestimulatório com Folltropin® em vacas Nelore diminuiu a expressão do LHR nas células da granulosa, aumentou as concentrações intrafoliculares de progesterona, reduziu a razão E2/P4, e que a expressão das isoformas M1 e M3 foi mais abundante do que as M2 e M4 tanto nas novilhas cíclicas quanto nas vacas superestimuladas. / The aim of the present work was to evaluate in the Nelore breed the gene expression of LH receptor isoforms (M1 to M4) in granulosa cells of follicles 8.5 mm diameter from cycling heifers (CH) and superestimulated cows (SC). The cycling heifers (n=4) were submitted to synchronization of ovulation and afterwards evaluated by transrectal ultrasonography until the third and fifth days after ovulation, when the animals were slaughtered to obtain the ovaries and follicles. The SC group (n=5) were submitted to ovarian superstimulation (modified Protocol P-36) and ovariectomized 36 hours after removal of progesterone source. The results of the isoforms expression (M1 to M4) were calculated as GAPDH expression. There was a lower expression of LH receptor gene in SC group as compared to CH group (6.50±0.35 and 28.96±0.40, respectively, Bonferroni, p<0.02). When data of both groups were analyzed together, there was a higher expression of M1 (27.22±0.19) and M3 (28.37±0.22) isoforms when compared to M2 (6.46± 0.38) and M4 (5.05±0.43, Bonferroni, p<0.02). In CH group, LHR expression was more intense in follicles obtained in the fifth day (12 mm diameter, 38.1±0.03) when compared to those obtained on third day (8.75 mm, 22.6±0.03, Bonferroni, p<0.01) after ovulation. The results indicated that superstimulatory treatment with FSH in Nelore cows decreased LH receptor expression in granulosa cells, it increased the concentrations progesterone intrafolliculares, it reduced the reason E2/P4, and that M1 and M3 isoforms expression were more abundant than M2 and M4 in both cycling and superstimulated animals.
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Avaliação da biometria testicular, concentração plasmática de hormônios e minerais em bovinos Nelore variedade Mocha dos 12 aos 24 meses de idade

Lezier, Dorça Helena [UNESP] January 2003 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003Bitstream added on 2014-06-13T18:46:36Z : No. of bitstreams: 1 lezier_dh_dr_botfmvz.pdf: 1066792 bytes, checksum: 3af5f3b732eb7f5741a6be203c09c6a6 (MD5) / No presente trabalho foram utilizados 55 bovinos Nelore variedade Mocha, criados sob condições extensivas, visando avaliar a biometria testicular, as concentrações plasmáticas de hormônio luteinizante, testosterona, triiodotironina, tiroxina e os teores de cobre e zinco, e o efeito da época do ano (seca e chuva) sobre estas características, dos 12 aos 24 meses de idade. Para as medidas testiculares foi utilizada fita métrica e a colheita de sangue foi realizada por venopunção, em tubos de vacutainer heparinizados. Após a centrifugação, o plasma foi armazenado a –20ºC para posterior análise hormonal e mineral. Os valores médios do perímetro escrotal, altura, largura dos testículos direito e esquerdo e o peso dos animais foram de: 24,91 ± 2,81 cm, 8,74 ± 1,04 cm; 4,68 ± 0,61 cm; 8,75 ± 1,10 cm, 4,66 ± 0,62 cm e 304,35 ± 1,30 Kg, respectivamente. As concentrações médias plasmáticas dos hormônios luteinizante, testosterona, triiodotironina e tiroxina foram de√0,25 ± 0,08 ng/dL ou 0,07 ± 0,08 ng/mL, 168,04 ± 95,70 ng/mL, 1,31 ± 0,12 ng/dL e 0,25 ± 0,07 μg/dL, respectivamente. Os teores médios de cobre e zinco foram de 0,29 ± 0,01 mg/L e 0,27 ± 0,01 mg/L respectivamente. O perímetro escrotal, altura e largura dos testículos direito e esquerdo, os hormônios luteinizante , testosterona, triiodotironina e tiroxina e os minerais cobre e zinco mostraram efeito significativo, p<0,01, para idade dos 12 aos 24 meses. O zinco apresentou diferença significativa, p<0,01, para época do ano (inverno e verão /seca e chuva). / In the present work 55 polled Nelore bovines were used, raised under extensive conditions, aiming to evaluate testicular biometry, plasmatic concentrations of luteinizant hormone, testosterone, triiodothyronine, thyroxine and copper and zinc concentration and the effect of season (draught and rain) over these characteristics, from 12 to 24 months old.It was used scrotal tape for the testicle measurement and the blood samples were obtained by jugular venopunction in heparinized vacun tubes. After the centrifugation, the plasma was storaged at –20ºC until hormonal and mineral assays. The average values of scrotal perimeter, height, right and left testicles width and weight of animals were: 24.91 cm, 8.74 cm, 4.68 cm, 8.75 cm, 4.66cm and 304.35 kg, respectively. Average plasmatic concentrations of square root hormones of luteinizant hormone, testosterone, triiodothyronine and thyroxine were 0.25 ± 0.08 ng/dL, 168.04 ± 95.70 ng.mL, 1.31 ± 0.12 ng/dL and 0.25 ± 0.07 μg/dL, respectively. Average concentration of copper and zinc were 0.29 ± 0.01 mg/L and 0.27 ± 0.01 mg/L, respectively. Scrotal perimeter, right and left testicles height and width, luteinizant hormones, testosterone, triiodothyronine and thyroxine and the minerals copper and zinc showed significant effect, p<0.01, for age from 12 to 24 months old. Zinc presented significant difference, p<0.01, for season (draught and rain).

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