Orientador: Odair Aparecido Fernandes / Banca: Edison Ryoti Sujii / Banca: Rita de Cassia Bianchi / Resumo: Este trabalho teve como objetivo comparar a artropodofauna edáfica e os fatores naturais de mortalidade dos ovos da broca-da-cana Diatraea saccharalis em dois sistemas de colheita de cana-de-açúcar: convencional e orgânica. Dessa forma, avaliou-se a hipótese que a mudança do sistema de colheita em cana-de-açúcar altera a comunidade de artrópodes de solo e consequentemente o controle natural dos ovos de D. saccharalis. O estudo foi conduzido em um talhão de cana-de-açúcar cultivado em sistema convencional e o outro em sistema orgânico, sendo ambos da variedade RB5536, de sétimo corte e quarto mês de desenvolvimento, em Jaboticabal, SP. Os resultados mostraram que os índices de diversidade e ecológicos tiveram valores semelhantes; entretanto, a riqueza de espécies de predadores e onívoros foi maior no sistema orgânico do que no sistema convencional. Quando se avaliou a contribuição dos agentes de mortalidade nos dois sistemas, notou-se que no sistema convencional, de forma geral, houve maior mortalidade dos ovos. Isso pode estar ligado à menor complexidade deste agroecossistema que pode levar ao aumento do forrageamento por recurso alimentar / Abstract: This study aimed to compare the edaphic fauna of arthropods and the natural mortality factors of the sugarcane borer, Diatraea saccharalis, eggs in conventional and organic sugarcane systems. Thus, the hypothesis that changing of sugarcane harvest system alters the edaphic arthropods community and consequently the natural control of eggs of D. saccharalis was evaluated. The study was conducted in conventional and organic sugarcane systems, variety RB5536, seventh ratton and fourth month of development in Jaboticabal municipality, SP, Brazil. The results showed that the diversity and ecological indices were similar; however, the species richness of predator and omnivores was higher in the organic than in the conventional system. When assessing the contribution of mortality agents in both systems, it was observed that in the conventional sugarcane, generally, there was higher egg mortality. This may be related to the the lower complexity of this agroecosystem which leads to the increase of foraging for food resources / Mestre

Orientador: Elisa Aparecida Gregório / Banca: Daniela Carvalho dos Santos / Banca: Hélio Conte / Banca: Fernando L. Cônsoli / Banca: Reinaldo J. Silva / Resumo: A Diatraea saccharalis (broca da cana) afeta a cultura da cana-de-açúcar e tem sido controlada pelo endoparasitóide Cotesia flavipes; pouco se sabe sobre a morfologia do intestino médio-IM da broca da cana, bem como sobre o efeito do endoparasitismo nesse órgão. O objetivo deste trabalho é, primeiramente, caracterizar morfológica e morfometricamente as células epiteliais ao longo do IM de D. saccharalis, além de verificar o efeito do endoparasitismo pelos mesmos parâmetros. Objetivamos, ainda, estudar a matriz peritrófica, a atividade específica de amilase, o processo de morte celular e o teor de óxido nítrico ao longo do IM, visando determinar o efeito do endoparasitismo nas diferentes regiões do IM. Fragmentos do IM de larvas de D. saccharalis não-parasitadas e parasitadas, subdividido em regiões, foram processados segundo técnica específica para cada tipo das seguintes análises: ao nível de microscopia de luz (histoquímica, morfometria, determinação de atividade enzimática de SDH e NADH-TR e técnica do TUNEL), de microscopia de fluorescência, de microscopia eletrônica (transmissão e varredura), além de determinação bioquímica de atividade específica de amilase e de teor de óxido nítrico em extratos do IM. Nossos resultados mostraram que a morfologia geral das células epiteliais ao longo do IM de larvas de D. saccharalis não parasitadas é semelhante à de outras larvas de Lepidoptera e que existem diferenças morfológicas e morfométricas nas células epiteliais apontando a existência de duas regiões morfo-funcionais distintas no IM, anterior e posterior, com área de transição. O desenvolvimento do endoparasita dentro da hemocele da broca da cana altera as células epiteliais do inseto hospedeiro. O estudo morfométrico mostrou que houve aumento citoplasmático e nuclear das células colunares da região posterior, e das células... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Diatraea saccharalis (sugarcane borer) affect the sugarcane crop and has been widely controlled by the endoparasitoid Cotesia flavipes; however, very little is known about the midgut morphology of the sugarcane borer, as well as the effect of the endoparasitism in this organ. This work aims to characterize morphological and morphometrically the epithelial cells along the midgut of D. saccharalis, and verify the effect of the endoparasitism by the same parameters. Besides, we intend to study the peritrophic matrix, the specific amylase activity, the cell death process and the nitric oxide level along the midgut, to determine the effect of the endoparasitism in the different midgut regions. Fragments of the D. saccharalis midgut regions from nonparasitized and parasitized larvae were processed according by specific techniques for each analysis: light microscopy (histochemistry, morphometry, enzymatic activity of SDH and NADH-TR and TUNEL technique), fluorescence microscopy, electron microscopy (transmission and scanning), as well as the biochemical analyses of specific amylase activity and nitric oxide level in midgut extracts. Our results showed that the general morphology of the epithelial cells along the midgut of non-parasitized larvae is similar to the others Lepidoptera larvae, and that there are morphological and morphometric differences in the epithelial cells suggesting the existence of two distinct morpho-functional regions in the midgut, anterior and posterior, with transitional region. The endoparasite development into the sugarcane borer hemocoel affect the epithelial cells of the insect host. The morphometric study showed the cytoplasmic and nuclear increase in both the columnar cells at the posterior midgut region and goblet cells along the midgut length. The numerous mitochondria of the epithelial cells showed matrix... (Complete abstact click electronic access below) / Doutor

Orientador: Elisa Aparecida Gregório / Banca: Hélio Conte / Banca: Ângela Maria Ferreiro Falleiros / Banca: Maria Teresinha Siqueira Bombonato / Banca: Daniela Carvalho dos Santos / Resumo: No presente trabalho, analisamos os níveis de ativação de proPO e produção de NO em hemolinfa de larvas de Diatraea saccharalis não parasitadas e parasitadas pela vespa Cotesia flavipes e/ou inoculadas com agente abiótico, em diferentes tempos de parasitismo/inoculação, e em função da idade larval; propusemo-nos ainda a observar a ultra-estrutura da cápsula formada ao redor do agente abiótico (esfera de Sephadex), na vigência do parasitismo. Larvas de D. saccharalis com 20 dias de desenvolvimento (5o instar) foram naturalmente parasitadas pela C. flavipes. Após diferentes tempos de parasitismo e/ou inoculação com agente abiótico (2 h, 6 h, 3 e 6 dias), a hemolinfa da broca da cana-de-açúcar foi coletada e congelada a -20°C para posterior análise dos níveis de ativação in vitro do sistema de proPO e da produção de NO. Para observar a reação de encapsulação do agente abiótico, as esferas de Sephadex foram recuperadas e preparadas para análise ultra-estrutural, por meio de técnica convencional. Existiu redução significativa dos níveis de ativação do sistema de proPO e da produção de NO nas larvas de D. saccharalis não parasitadas/inoculadas, em função do desenvolvimento larval, entre 20 e 26 dias. O parasitismo por C. flavipes inibiu a ativação do sistema de proPO em todos os tempos experimentais; quanto aos níveis de produção de NO, houve inibição apenas nos tempos de parasitismo inicial (2 h) e recente (6 h). A inoculação de Sephadex em larvas não parasitadas aumentou os níveis de ativação do sistema de proPO em todos os tempos experimentais, mas não aumentou os níveis de produção de NO destas larvas. O parasitismo de larvas de D. saccharalis pela C. flavipes concomitante à inoculação de esferas de Sephadex, inibiu significativamente a ativação do sistema de proPO, mas não afetou os níveis... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This work aimed to analyze the proPO activation and the NO production in the hemolymph of Diatraea saccharalis larvae non parasitized and parasitized by the wasp Cotesia flavipes and/or inoculated with abiotic agent (Sephadex beads), along the parasitism/inoculation, and related with larval age; the ultrastructural observation of the capsule formed around the abiotic agent during the parasitism was also performed. D. saccharalis larvae with 20 days of development (5o larval instar) were parasitized by C. flavipes. After different times of parasitism and/or inoculation of the abiotic agent (2 h, 6 h, 3 e 6 days), the sugarcane borer hemolymph was collected and freezed at -20°C for posterior analyses of the in vitro proPO system activation and NO production. To observe the encapsulation response to the abiotic agent implant, the Sephadex beads were recovered and conventionally prepared for ultrastructural analyses. There was a significant reduction in both the activation of the proPO system and in the NO production of D. saccharalis non parasitized/inoculated larvae related with the larval development, from 20 to 26 days old. The parasitism by C. flavipes inhibit the proPO system activation in all the experimental time; the level of NO production was inhibited only at the initial (2 h) e recent (6 h) parasitism. The inoculation of Sephadex beads in non parasitized larvae increased the level of the proPO system activation, in all the experimental times, but it didn't increase the NO production of these larvae. The parasitism of D. saccharalis larvae by C. flavipes concomitant with the inoculation of Sephadex beads significantly inhibited the activation of the proPO system, but it didn't affect the production levels of NO, in all the analyzed times. The D. saccharalis larvae parasitized by C. flavipes were able to identify and encapsulate... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by MARIA LAURA VIOLA AUGUSTO (marialauraa@gmail.com) on 2018-06-15T17:16:40Z No. of bitstreams: 1 augusto_mlv_dr_jabo.pdf: 1777889 bytes, checksum: 32d8b34f05ca40dec4ae93cca2a67527 (MD5) / Approved for entry into archive by Neli Silvia Pereira null (nelisps@fcav.unesp.br) on 2018-06-15T18:34:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 augusto_mlv_dr_jabo.pdf: 1777889 bytes, checksum: 32d8b34f05ca40dec4ae93cca2a67527 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-15T18:34:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 augusto_mlv_dr_jabo.pdf: 1777889 bytes, checksum: 32d8b34f05ca40dec4ae93cca2a67527 (MD5) Previous issue date: 2018-05-14 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O controle da broca da cana, Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae), pode ser feito pela aplicação de inseticidas químicos, mas o uso dessa tática de manejo pode resultar em danos ambientais e ao homem. De forma alternativa e com efeitos negativos reduzidos, o manejo de D. saccharalis e outros insetos-praga pode ser feito pela utilização do entomopatógeno Bacillus thuringiensis. Além do uso de formulações de B. thuringiensis para o controle de pragas, um ou mais genes que codificam proteínas inseticidas Cry e Vip de B. thuringiensis estão presentes nas plantas transgênicas com resistência a insetos comercialmente disponíveis no Brasil. Apesar de alta adoção, efeitos colaterais reduzidos e eficiência das plantas Bt, o uso desta tecnologia pode resultar na seleção de populações de insetos resistentes às plantas transgênicas. Por isso, a busca por novas proteínas e combinações de proteínas com diferentes modos de ação para retardar a evolução da resistência deve ser constante. Nesse cenário, uma quitinase de B. thuringiensis apresenta potencial para ser incorporada em uma nova geração de plantas transgênicas. Quitinases são enzimas que apresentam domínios catalíticos para hidrólise de quitina e domínios ligantes em quitina (CBD) que podem estar envolvidos com a atividade inseticida. A atividade inseticida das quitinases é relacionada com a desestruturação da membrana peritrófica dos insetos e consequente perda de suas propriedades e funções. Além da descoberta de proteínas inseticidas com diferentes modos de ação, é de interesse que essas apresentem interações positivas com outras proteínas inseticidas. No presente trabalho, duas formas de uma quitinase de B. thuringiensis - ChiΔSP (sem o peptídio sinal) e ChiΔSP.CBD (sem o peptídio sinal e sem o domínio ligante em quitina) - foram produzidas de forma heteróloga em Escherichia coli para avaliações bioquímicas e biológicas sobre D. saccharalis. Ensaios bioquímicos das enzimas ChiΔSP e ChiΔSP.CBD indicam que a atividade quitinolítica sobre quitina coloidal de ChiΔSP (3,07±0,15 U/nmol) foi maior que de ChiΔSP.CBD (1,83±0,06 U/nmol), a ligação de ChiΔSP à quitina coloidal também foi superior à ligação de ChiΔSP.CBD e as maiores atividades (60-100% da atividade total) de ChiΔSP e ChiΔSP.CBD foram detectadas a 30 e 40°C em uma ampla faixa de pH (4,0-9,0). Após estimar a CL50 da proteína Vip3Aa42 sobre lagartas neonatas de D. saccharalis em 352,132 ng/cm2 de dieta, foram avaliadas interações entre Vip3Aa42 e ChiΔSP ou ChiΔSP.CBD. Os resultados indicam que a adição isolada de 2,41 nmol/cm2 de ChiΔSP ou ChiΔSP.CBD não resultou na mortalidade de lagartas de D. saccharalis. A combinação da CL50 de Vip3Aa42 com 2,41 nmol/cm2 de ChiΔSP apresentou efeito sinérgico para mortalidade das lagartas (mortalidade de 90%), mas nenhum efeito (aditivo, sinérgico ou antagônico) foi observado para a combinação da CL50 de Vip3Aa42 com 2,41 nmol/cm2 de ChiΔSP.CBD. A ausência do CBD em ChiΔSP.CBD e consequentes alterações bioquímicas impediu sinergismo de ChiΔSP.CBD com Vip3Aa42 sobre lagartas de D. saccharalis. / Chemical control is applied to manage the sugarcane borer, Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae). However, this control tactic may result in great damages to the environment and non-target species, including men. Alternativelly, the use of the entomopathogen Bacillus thuringiensis can be made to manage D. saccharalis and other insect pests with reduced undisarable side effects. Beyond the use of formulations of B. thuringiensis for pest control, one or more genes of insecticidal proteins from B. thuringiensis such as Cry and Vip are incorporated into commercially available transgenic plants with insect resistance in Brazil. Despite of the high adoption rate, reduced side effects, and high efficency, the intensive use of this technology may result in the selection of insect-resistant populations to transgenic plants. For this reason, the search for new genes with different modes of action to delay the evolution of resistance must be constant. In this scenario, a chitinase from B. thuringiensis has potential to be incorporated into a new generation of transgenic plants. Chitinases are enzymes of the family of glycosyl hydrolases which catalyze the hydrolysis of chitin. Chitinases present catalytic domains responsible for the hydrolysis of chitin and chitin-binding domains (CBD), both associated to insecticidal activity. Insecticidal activity of chitinases is related to the disruption of the peritrophic membrane of insects, which results in the loss of properties and functions of this structure. In addition to the discovery of insecticidal proteins with different modes of action, positive interactions with other insecticidal proteins is desirable for pest management. In the present work, two forms of a chitinase of B. thuringiensis - ChiΔSP (without signal peptide) and ChiΔSP.CBD (without signal peptide and without the chitin-binding domain) - were produced by heterologous expression in Escherichia coli for biochemical and biological analyses. Chitinolytic activity of ChiΔSP (3.07 ± 0.15 U/nmol) was higher than that observed for ChiΔSP.CBD (1.83 ± 0.06 U/nmol) towards colloidal chitin. The binding of ChiΔSP to colloidal chitin was also higher than that observed for ChiΔSP.CBD, and the ChiΔSP or ChiΔSP.CBD chitinolytic activity (60-100% of total chitinolytic activity) was detected at 30 and 40°C in a broad pH range (4.0-9.0). After estimating the LC50 of the Vip3Aa42 protein at 352,132 ng/cm2 of diet, interactions between combinations of Vip3Aa42 and ChiΔSP or ChiΔSP.CBD were evaluated. Results indicate that the adition of 2,41 nmol/cm2 of ChiΔSP or ChiΔSP.CBD do not result in larval mortality of D. saccharalis. The combination of the LC50 of Vip3Aa42 with 2,41 nmol/cm2 nmol of ChiΔSP resulted in a synergic effect (mortality of 90%), but no effect (aditive, sinergic or antagonic) was observed when the LC50 of Vip3Aa42 was combined to 2,41 nmol/cm2 nmol of ChiΔSP.CBD. Lack of CBD in ChiΔSP.CBD resulted in biochemical changes in this form of B. thuringiensis chitinase which impacted on the sinergic effect of this protein with Vip3Aa42 against D. saccharalis. / CNPq: 140093/2015-0

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-11-25Bitstream added on 2014-06-13T18:34:40Z : No. of bitstreams: 1 000747866.pdf: 1106621 bytes, checksum: adc7fd707f23cc36ee6c3565f69a29d2 (MD5) / A infestação de dezesseis genótipos de cana-de-açúcar à broca-da-cana Diatraea saccharalis foi estudada em experimento em campo, utilizando delineamento em blocos casualizados com cinco repetições e tratamentos em esquema fatorial 2 x 16. O primeiro fator foi constituído por dois níveis de infestação de broca, infestado e com controle químico, e o segundo fator, pelos dezesseis genótipos de cana-de-açúcar em estudo, ou seja, IACSP97-2098, IACSP97-7543, IACSP97-7018, IACSP97-2053, IACSP97-2023, IACSP97-2020, IACSP97-6682 IACSP96-2000, IACSP96-7586, IACSP96-7569, IACSP96-3056, IACSP96-2019, IACSP95-5094, IACSP95-1218, IACSP95-3028 e SP89-1115, sendo este último utilizado como padrão de suscetibilidade. As plantas infestadas estiveram submetidas à infestação natural, além de receberem ovos de D. saccharalis obtidos em laboratório. Nas plantas com controle químico foram feitas aplicações de inseticida para que as populações naturais se mantivessem baixas. O ensaio foi conduzido por dois ciclos da cultura, durante os quais estimaram-se a intensidade de infestação e os efeitos da praga sobre os parâmetros tecnológicos e a produtividade. Os genótipos IACSP96-7569 e IACSP97-7018 foram os mais infestados, sem diferir do genótipo SP89-1115, padrão de suscetibilidade, enquanto o genótipo IACSP97-2020 e IACSP96-2000 foram os menos infestados. Na média dos dois ciclos da cultura, as infestações de broca contribuíram para elevar o teor de Fibra (% cana) / The infestation of sexteen sugarcane genotypes to sugarcane borer Diatraea saccharalis was evaluated in experiment conducted in field, using a randomized block design, with treatments in factorial 2 x 16 with five replications. The first factor was represented by two levels of infestation by borer (infested and treated with insecticides) and the second one, by the sexteen sugarcane varieties (IACSP97-2098, IACSP97-7543, IACSP97-7018, IACSP97-2053, IACSP97-2023, IACSP97-2020, IACSP97-6682, IACSP96-2000, IACSP96-7586, IACSP96-7569, IACSP96-3056, IACSP96-2019, IACSP95-5094, IACSP95-1218, IACSP95-3028 and SP89-1115). The infested plots were subjected to natural infestation, in addition to receiving eggs of D. saccharalis obtained in the laboratory. In the plots treated with insecticides, insecticides applications were made to keep low population. The experiment was evaluated in two crop cycles: plant crop and first ratoon, during which intensity of infestation index and the effects of the pest on the technological parameters and productivity were estimated. The genotypes IACSP96-7569 and IACSP97-7018 were the most attacked by the insect, do not differing from SP89-1115, the susceptible standard, while IACSP97-2020 and IACSP96-2000 were the less infested. On average, sugarcane borer infestation contributed to increase the Fiber content on stalks

Orientador: Sergio Antonio De Bortoli / Coorientador: Alessandra Marieli Vacari / Banca: Ricardo Antonio Polanczyk / Banca: Alexandre de Sene Pinto / Resumo: No Brasil, Cotesia flavipes (Cameron, 1891) (Hymenoptera: Braconidae) é utilizada como agente de controle biológico da broca da cana-de-açúcar, Diatraea saccharalis (Fabricus, 1794) (Lepidoptera: Crambidae), desde 1976. A proposta do presente trabalho foi desenvolver uma caixa de papel, como uma nova embalagem para comercialização, transporte e liberação de C. flavipes. Depois de se obter a nova embalagem (caixa rectangular com 10,0 × 4,5 × 4,5 cm), avaliou-se a influência da nova embalagem e das tradicionais nos parâmetros biológicos de C. flavipes, comparou-se a influência das embalagens no parasitoide C. flavipes transportado por diferentes meios, além de comparar a influência das embalagens no parasitismo em campo. Também foram realizados testes de degradação das embalagens e a estimativa do custo de produção do parasitoide nas embalagens. O número de descendentes fêmeas de C. flavipes foi maior nas embalagens biodegradáveis (490,1 fêmeas) na geração F4; para as outras gerações o tipo de embalagem não influenciou o número de descentes fêmeas obtidos por massa. Quando avaliada a liberação em campo do parasitoide acondicionado nas diferentes embalagens, observou-se parasitismo relativamente baixo. As amostras do material biodegradável mostraram rápido processo de degradação, desaparecendo totalmente em 90 dias. O custo das embalagens influência o custo final de cada massa do parasitoide, sendo R$ 0,0698 para insetos produzidos em copos plásticos, R$ 0,0730 em copos biodegradáveis e R$ 0,0712 nas caixas biodegradáveis. Os resultados obtidos nesta pesquisa abrem a possibilidade da utilização da embalagem desenvolvida, que é totalmente biodegradável e de custo compatível com a criação massal em laboratório, para o transporte e a liberação de adultos do parasitoide C. flavipes em campo / Abstract: In Brazil, Cotesia flavipes (Cameron, 1891) (Hymenoptera: Braconidae) is used as biological control agent for sugarcane borer, Diatraea saccharalis (Fabricus, 1794) (Lepidoptera: Crambidae) since 1976. The purpose of this study was to develop a biodegradable paper box, as a new packaging for marketing, transportation and release of C. flavipes in sugarcane crops. After obtaining the new package (rectangular box with 10.0 × 4.5 × 4.5 cm), we evaluated the influence of the new package and traditional in biological parameters of C. flavipes. We compared the influence of packaging in C. flavipes transported by different ways and the influence in the field parasitism. Also degradation tests of packages were made and the estimated production parasitoid cost using the different packages were performed. The number of C. flavipes female descendants was higher in biodegradable packaging (490.1 females) in the F4 generation; to other generations the kind of package did not influence the number of female descendants obtained by pupae mass. When we evaluated the parasitoid release in the field packed in different packages, we observed low parasitism. Samples of biodegradable material showed rapid degradation process, disappearing completely within 90 days. The cost of packages influences the final cost of the parasitoid mass being R$ 0.0698 to insects produced in plastic cups, R$ 0.0730 in biodegradable cups and R$ 0.0712 in biodegradable boxes. The results obtained in this study open the possibility of using the developed package that is completely biodegradable and compatible with the cost of mass production in laboratory, transport and release of C. flavipes in the field / Mestre

Orientador: Sérgio Antonio de Bortoli / Coorientador: Nelson Wanderley Perioto / Banca: Enrico de Beni Arrigoni / Banca: Rogéria Inês Rosa Lara / Banca: Luis Garrigos Leite / Banca: Ricardo Antonio Polanczyk / Resumo: Visando melhorias qualitativas na criação de Cotesia flavipes Cameron, 1891, realizaram-se testes com alimentação de adultos antes do parasitismo em Diatraea saccharalis Fabricius,1794, com 14 dietas: (2,5%; 5% e 10% sacarose; 2,5%; 5% e 10% sacarose + 2,5% lêvedo de cerveja; 2,5%; 5% e 10% mel; 2,5%; 5% e 10% mel + 2,5% lêvedo de cerveja; 2,5% lêvedo de cerveja; água) e testemunha. Avaliaramse: adultos emergidos, razão sexual, porcentagem de emergência, peso das massas de pupas e a longevidade nas gerações F1 e F2. O delineamento foi o inteiramente casualizado com 15 tratamentos e cinco repetições. As dietas a base de 5% de sacarose, 5 e 10% de mel aos adultos de C. flavipes podem proporcionar acréscimo considerável na longevidade dos parasitoides. O consumo de dietas artificiais por C. flavipes antes do parasitismo em D. saccharalis proporcionou melhorias qualitativas. O estudo visou ainda testar um protocolo de qualidade de C. flavipes, quanto à eficiência na busca pelo hospedeiro D. saccharalis. Foi usada uma arena de testes (copo plástico translúcido de 700 mL, com tampa). Lagartas de D. saccharalis foram colocadas em tolete de cana-de-açúcar de 13 cm, perfurado transversalmente e oferecidas ao parasitoide. Os tratamentos foram: (0, 6, 12, 18 e 24 horas de fotofase - L), (6, 12, 18 e 24 horas de disponibilidade do hospedeiro - H), (1, 2, 3, 4 e 5 lagartas por arena - T) e o orifício de entrada da lagarta na cana-de-açúcar (aberto - A ou fechado - F). Foram realizados os testes de Kolmogorov e a homogeneidade da variância foi analisada pelo teste de Bartlett, além das análises de agrupamento e de componentes principais. Foi criado um Índice de performance da qualidade (IPQ), que foi determinante na escolha do melhor tratamento. Foi proposto, o uso do tratamento: 6 horas de disponibilidade... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Aiming at qualitative improvements in the rearing of Cotesia flavipes, tests were carried out with adults feed before parasitism in Diatraea saccharalis, with 14 diets (2.5%, 5% and 10% sucrose, 2.5%, 5% and 10% sucrose + 2.5% brewer's yeast, 2.5%, 5% and 10% honey, 2.5%, 5% and 10% honey + 2.5% yeast, 2.5% yeast, water) and control. Were evaluated: emerging adults, sex ratio, percentage of emergency, mass weight of pupae, and longevity in F1 and F2 generations. The design was completely randomized with 15 treatments and five repetitions. The diets based on 5% sucrose, 5 and 10% honey to adults of C. flavipes, may provide considerable increase in longevity. Consumption of artificial diets by C. flavipes before parasitism in D. saccharalis provides quality improvements. The study also aimed to test a protocol for quality of C. flavipes, for efficiency in the search for host D. saccharalis. We used a testing arena (700 mL plastic cup with lid). Larvae of D. saccharalis were placed in 13 cm cutting canes, drilled across, and offered to the parasitoid. The treatments were: (0, 6, 12, 18 and 24 hours of photophase - L) (6, 12, 18 and 24 hours of availability of the host - H) (1, 2, 3, 4 and 5 larvae per arena - T) and the entrance hole of the larvae in sugar cane (open - A or closed - F). We performed the Kolmogorov's test and the homogeneity of variance was analyzed by Bartlett's test. Were also carried out cluster analysis and principal components. It created an index of performance quality (IPQ). It is proposed the use of treatment 6 hours of availability, 0 hours of light, one larvae per arena, using the cutting cane with the hole closed, as quality protocol C. flavipes / Doutor

Orientador: Sergio Antonio De Bortoli / Coorientador: Alessandra Marieli Vacari / Banca: Adriana Coletto Morales Corrêa e Castro / Banca: Ana Eugênia de Carvalho Campos / Resumo: Embora no decorrer dos anos o parasitoide Cotesia flavipes tenha se mostrado eficiente no controle das populações da broca da cana, Diatraea saccharalis, atualmente existe a preocupação quanto ao controle de qualidade dos indivíduos produzidos massalmente. Um dos principais problemas das criações massais de insetos se refere aos cruzamentos consanguíneos, que resultam na perda da variabilidade genética, influenciando o tamanho, viabilidade e fertilidade da prole, mortalidade juvenil e adulta, bem como a morfologia dos indivíduos, fatores que podem comprometer a efetividade do inimigo natural. Nesse contexto, avaliou-se os parâmetros biológicos e a capacidade de voo de C. flavipes buscando evidencias do efeito da endogamia na qualidade do parasitoide. Foram comparados dois grupos durante dez gerações, um oriund de uma biofábrica, com outro endogâmico, criado em laboratório e iniciado a partir do primeiro. Para garantir a endogamia, fêmeas recémemergidas foram forçadas a copular com apenas um irmão, sendo os casais individualizados e as fêmeas utilizadas para o parasitismo de lagartas de D. saccharalis. As avaliações foram efetuadas em cada uma das gerações do parasitoide até a décima geração, sendo registrado: a razão sexual, porcentagem de emergência, número de descendentes/fêmea, longevidade de machos e de fêmeas, a capacidade de voo e análise morfométrica dos adultos. Na décima primeira geração foi estudada a capacidade de parasitismo, além da construção de tabelas de vida de fertilidade. Os resultados das características biológicas, da capacidade de voo, da análise de caracteres morfométricos e capacidade de parasitismo mostraram diferenças significativas aleatórias entre os grupos, ora melhores resultados foram verificados para o grupo da biofábrica e ora para o grupo endogâmica. Também não se observou diferenças significativas ao longo de gerações para um mesmo grupo. Assim, a ... / Abstract: Although over the years the parasitoid Cotesia flavipes has proved to be effective in controlling populations of the sugarcane borer, Diatraea saccharalis, currently there is concern about the quality control of individuals produced in large scale. One of the main problems of the massal rearing insects refers to inbreeding, resulting in the loss of genetic variability influencing the size, viability and fertility of the offspring, juvenile and adult mortality as well as the morphology of individuals, factors that can compromise the effectiveness of the natural enemy. In this context, we evaluated the biological parameters and flight ability of C. flavipes seeking evidence of the inbreeding effect on the parasitoid quality. Two groups, one from a bio-factory and another inbred laboratory rearing, started from the first, were compared for ten generations. To assure inbreeding, newly emerged females were forced to mate with a brother, being individualized couples and females were used for the parasitism of larvae of D. saccharalis. The evaluations were performed in each of the generations of the parasitoid up to the tenth generation, and recorded the sex ratio, emergence percentage , number of offspring / female, longevity of males and females , the ability of flight and morphometric analysis of adults. At the eleventh generation was studied the parasitism capacity, besides the construction of life tables. The results of the biological characteristics, the ability of flight, morphometric analysis and parasitism capacity showed random significant differences between groups, at times best results were obtained for the biofabric group and sometimes for the inbred group. Also no significant differences across generations for the same group were observed. Thus, the rearing of C. flavipes subjected to inbreeding for ten generations was not sufficient to show deleterious effects of this event on individuals / Mestre

Orientador: Sergio Antonio De Bortoli / Coorientador: Antonio Sergio Ferraudo / Banca: Ricardo Antonio Polanczyk / Banca: Alessandra Marieli Vacari / Banca: Enrico De Beni Arrigoni / Banca: Adeney de Freitas Bueno / Resumo: Métodos adequados para avaliar o parasitismo de um agente de controle biológico auxiliam na determinação de sua capacidade de busca e no desenvolvimento de técnica de liberação. O estudo da área de cobertura do parasitismo natural e após liberações inundativas auxiliam na determinação de técnica de liberação de um agente de controle biológico. O objetivo desta pesquisa foi estudar três métodos de infestação do hospedeiro para a adoção do mais viável na avaliação do parasitismo por Cotesia flavipes (Cameron, 1891) (Hymenoptera: Braconidae) com liberação de 6000 parasitoides em quatro pontos por hectare, além de avaliar a influência do controle biológico natural e métodos liberação de C. flavipes para o controle de Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae). Foram testadas infestação artificial com lagartas "sentinelas" em colmos de cana, posturas fixadas na planta e infestação natural de D. saccharalis. Para cada método, as áreas foram amostradas antes e após a liberação de C. flavipes, com três repetições para cada método de infestação e 100 pontos amostrados por área. O melhor método de infestação foi usado para estudar liberações de 8 e 12 pontos por hectare, com densidade fixa de 6000 parasitoides por hectare. Contabilizou-se o número de lagartas recuperadas e parasitadas por ponto amostral para cálculo da porcentagem de parasitismo, índices de dispersão, distribuição de frequências e construção de gráficos geoestatísticos bidimensionais. Para o método usando infestação artificial com posturas de D. saccharalis ocorreu baixa recuperação de lagartas e não permitiu a amostragem da área para obter informações a respeito da presença ou ausência de parasitismo. A infestação com lagartas "sentinelas" e natural quantificam o parasitismo e permite coleta do hospedeiro na maioria dos pontos amostrais, o que viabiliza estudos relacionados ... / Abstract: Suitable methods to assess the parasitism of a biological control agent assist in the determination of its search capacity and to develop release methods. The study of the cover area of the natural parasitism and after massive releases is helpful to determine an eficient release method of a natural enemy. The aim of the research was to study three methods to infest the host to adopt the the more suitable to evaluate the parasitism by Cotesia flavipes (Cameron, 1891) (Hymenoptera: Braconidae) after releasing 6,000 parasitioids arranged in 4 release points per hectare as well as evaluating the influence of the natural biological control to control Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae). Methods using sentinel larvae, egg masses fixed on sugarcane plants and natural infestation of D. saccharalis were tested. For each method, areas were sampled before and after releases of C. flavipes, with three replications for each method of host infestation and 100 points were sampled by area. The best method was used to study releases in 8 and 12 points per hectare, keeping the density of 6,000 released parasitoids per hectare. The number of recovered and parasititized larva were counted to calculate dispersion indices, distribution of frequencies and to generate bidimensional maps. For the method using egg masses was found a low recovery of hosts and did not allow collecting information about the presence or absence of parasitism. Infestation with sentinel larva and the use of natural infestation allow recovering the host and to quantify the parasitistim to the majoritory sample points. The use of sentinel hosts allows studies during seasons with low density of hosts, however this method interfere on the environment. The natural infestation excludes questions about previous manipulation of the environment that can influence on the dispersal of the parastoid and it is recommended when the density of the host is sufficient ... / Doutor

Orientador: Odair Aparecido Fernandes / Coorientador: Leon George Higley / Coorientador: Márcia Justino Rossini Mutton / Banca: Crébio José Ávila / Banca: Alexandre Moraes Cardoso / Banca: Miguel Ângelo Mutton / Banca: Antônio Carlos Busoli / Resumo: A broca-da-cana, Diatraea saccharalis (Fabr.) e a cigarrinha-das-raízes Mahanarva fimbriolata (Stal) são pragas-chave na cultura da cana-de-açúcar. A tomada de decisão para o manejo de cada um destes estressores bióticos está elucidada. Todavia, estas duas pragas podem ocorrer de forma combinada no campo e, nesta situação, não há nenhuma informação sobre possível ajuste na tomada de decisão para o controle de ambas. Portanto, o objetivo deste estudo foi o de avaliar a resposta da cana-de-açúcar ao ataque conjunto da broca-da-cana e da cigarrinha-das-raízes na produtividade de colmos, qualidade da matéria-prima, produção de açúcar e etanol. Dois experimentos de campo foram conduzidos nos anos de 2010 e 2011, cujas parcelas foram compostas por linha de 2 m de plantas de cana-de-açúcar protegidas por tela anti-afídeo, e quatro tratamentos: plantas infestadas pela broca-da-cana, plantas infestadas pela cigarrinha-das-raízes, plantas infestadas por cigarrinha-das-raízes + broca-da-cana, e plantas sem infestação das pragas. Houve redução na produtividade de colmos e rendimento de sacarose em decorrência da infestação da cigarrinha-das-raízes (individual ou combinada com a broca-da-cana). A infestação da broca-da-cana aumentou o teor de fibra da cana. O ataque conjunto das pragas também afetou negativamente o teor de cinzas e cor do caldo extraído, assim como a turbidez, brix, teor de cinzas, amido e a cor do caldo clarificado, o processo fermentativo (viabilidade celular da levedura) e teor de glicerol do vinho delevurado. A perda de produtividade de sacarose por unidade de injúria para a broca-da-cana e para cigarrinha-das-raízes foi, respectivamente, de 0,72 e 6,15%. Não há efeito sinérgico das pragas combinadas na redução da produtividade de sacarose / Abstract: The sugarcane borer, Diatraea saccharalis (Fabr.) and the spittlebug Mahanarva fimbriolata (Stål) are key pests of sugarcane. The decision-making for management of each individual pest already elucidated. However, both pests can occur simultaneously. On this situation there is no information on possible decision-making adjustments to control these pests. Therefore, the aim of this study was to evaluate the sugarcane response by the combined attack of borer and spittlebug on yield, raw material quality, sugar, and ethanol production. Two field experiments were carried out in 2010 e 2011 growing seasons, whose plots were 2-m long row of sugarcane plants protected by an anti-aphid screen, and four treatments: plants infested by sugarcane borer, plants infested by spittlebug, plants infested by sugarcane borer + spittlebug, and no infested plants. Stalk and sucrose yield were affected by spittlebug infestation (alone or combined with sugarcane borer). The sugarcane borer increased the fiber content. The combined attack of both pests affected negatively the ashes and color of extracted juice, as well as the turbidity, brix, ashes content, starch and color of clarified juice, the fermentative process (cell viability of yeast) and glycerol of wine. Yield sugar losses per unit injury by each pest are 0.72 and 6.15%, for sugarcane borer and spittlebug, respectively. There is no synergistic effect of combined pests on sugar losses / Doutor