Resumo: A brucelose bovina é uma zoonose de ampla distribuição, responsável por consideráveis perdas econômicas, além de se constituir em um sério problema de saúde pública. Este trabalho teve por objetivo avaliar a prova do Teste do Anel (TAL) para diagnóstico da Brucelose bovina em amostras de leite, visando o diagnóstico individual e de rebanho. Foram avaliadas 464 amostras individuais de leite de fêmeas bovinas em diferentes períodos de lactação e 54 amostras de leite dos latões constituídos por leite dos respectivos animais. Os resultados obtidos foram avaliados frente aos resultados sorológicos das provas do Antígeno Tamponado Acidificado (ATA) e Soroaglutinação Lenta em Tubos (SAL)/2-Mercaptoetanol (2-ME). Das 464 amostras individuais de leite analisadas frente ao TAL, 123 (26,50%) apresentaram resultados positivos. Dentre estas, 31 (25,20%) resultaram positivas ao ATA, 28 (22,76%) ao ATA/SAL/2-ME e 18 (14,63%) à SAL. Das 341 amostras negativas ao TAL pertenciam a animais sorologicamente positivos ao 2-ME, caracterizando 77,23% das reações falso-positivas e 1,2% de reações falso-negativas no TAL individual. Das 54 amostras de leite de latões analisadas pelo TAL, 16 (29,63%) resultaram positivas ao TAL. Entretanto, possuíam leite de animais sorologicamente positivos pelo 2-ME; 1 (1,85%) resultou positivo ao TAL, entretanto, todos os animais que o compunham resultaram negativos ao 2-ME, caracterizando falso-positivo; 3 (5,56%) latões foram classificados como TAL negativos, porém, possuíam leite de animais positivos ao 2-ME caracterizando falso-negativos. O TAL individual demonstrou elevado percentual de resultados falso-positivos, enquanto que o TAL em latões detectou 84,2% dos latões contaminados e 75% das propriedades infectadas, demonstrando ser uma ferramenta útil na vigilância epidemiológica da Brucelose bovina. / Abstract: Bovine brucellosis is a zoonosis of wide distribution, responsible of great economical loses, even being a serious public health problem. The subject of this work is was to evaluate the Ring Test (RT) for bovine brucellosis in milk samples, looking for an individual and a herd diagnostic test. Individual samples of milk from 464 bovine females were evaluated as well 54 samples of bulk's milk with milk production of respective animals. The results were evaluated comparatively to individual serological results to Rose Bengal (RBT), Tube Agglutination (TAT) and 2-Mercaptoethanol (2-ME) tests. From the 464 individual samples the individual RT, shows 123 (26,50%) positive results, in that 31 (25,20%) resulted positive for the RBT and 28 (22,76%) for RBT/TAT/2-ME and 18 (14,63%) TAT. From 341 negative samples to RT were from TAT/2-ME positive serological animals showing 77,23% of positive false reaction and 1,2% of negative false reaction for the individual RT. From 54 samples of bulk's milk 16 (29,63%) RT positive results have milk from positive serological animals for TAT/2-ME, 1 (1,85%) positive to RT, although, all of the animals were serologically negative to TAT/2-ME, characterizing false positive reaction and 3 (5,56%) bulk's were classified as negative to RT, although have milk from positive animals to TAT/2-ME characterizing false negative result. The individual RT showed high percentage of false positive results, while RT in the bulk presented low percentage of false positive reactions, detecting 84,2% of contaminated bulk's and 75% of infected properties, demonstrating to be a important tool for bovine brucellosis epidemiological vigilance. / Orientador: Jane Megid / Coorientador: José Paes de Almeida Nogueira Pinto / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003Bitstream added on 2014-06-13T21:00:28Z : No. of bitstreams: 1 silvajunior_ff_me_botfmvz.pdf: 516758 bytes, checksum: 28bab79cc201d2b692c1fc20feffa500 (MD5) / A brucelose bovina é uma zoonose de ampla distribuição, responsável por consideráveis perdas econômicas, além de se constituir em um sério problema de saúde pública. Este trabalho teve por objetivo avaliar a prova do Teste do Anel (TAL) para diagnóstico da Brucelose bovina em amostras de leite, visando o diagnóstico individual e de rebanho. Foram avaliadas 464 amostras individuais de leite de fêmeas bovinas em diferentes períodos de lactação e 54 amostras de leite dos latões constituídos por leite dos respectivos animais. Os resultados obtidos foram avaliados frente aos resultados sorológicos das provas do Antígeno Tamponado Acidificado (ATA) e Soroaglutinação Lenta em Tubos (SAL)/2-Mercaptoetanol (2-ME). Das 464 amostras individuais de leite analisadas frente ao TAL, 123 (26,50%) apresentaram resultados positivos. Dentre estas, 31 (25,20%) resultaram positivas ao ATA, 28 (22,76%) ao ATA/SAL/2-ME e 18 (14,63%) à SAL. Das 341 amostras negativas ao TAL pertenciam a animais sorologicamente positivos ao 2-ME, caracterizando 77,23% das reações falso-positivas e 1,2% de reações falso-negativas no TAL individual. Das 54 amostras de leite de latões analisadas pelo TAL, 16 (29,63%) resultaram positivas ao TAL. Entretanto, possuíam leite de animais sorologicamente positivos pelo 2-ME; 1 (1,85%) resultou positivo ao TAL, entretanto, todos os animais que o compunham resultaram negativos ao 2-ME, caracterizando falso-positivo; 3 (5,56%) latões foram classificados como TAL negativos, porém, possuíam leite de animais positivos ao 2-ME caracterizando falso-negativos. O TAL individual demonstrou elevado percentual de resultados falso-positivos, enquanto que o TAL em latões detectou 84,2% dos latões contaminados e 75% das propriedades infectadas, demonstrando ser uma ferramenta útil na vigilância epidemiológica da Brucelose bovina. / Bovine brucellosis is a zoonosis of wide distribution, responsible of great economical loses, even being a serious public health problem. The subject of this work is was to evaluate the Ring Test (RT) for bovine brucellosis in milk samples, looking for an individual and a herd diagnostic test. Individual samples of milk from 464 bovine females were evaluated as well 54 samples of bulk's milk with milk production of respective animals. The results were evaluated comparatively to individual serological results to Rose Bengal (RBT), Tube Agglutination (TAT) and 2-Mercaptoethanol (2-ME) tests. From the 464 individual samples the individual RT, shows 123 (26,50%) positive results, in that 31 (25,20%) resulted positive for the RBT and 28 (22,76%) for RBT/TAT/2-ME and 18 (14,63%) TAT. From 341 negative samples to RT were from TAT/2-ME positive serological animals showing 77,23% of positive false reaction and 1,2% of negative false reaction for the individual RT. From 54 samples of bulk's milk 16 (29,63%) RT positive results have milk from positive serological animals for TAT/2-ME, 1 (1,85%) positive to RT, although, all of the animals were serologically negative to TAT/2-ME, characterizing false positive reaction and 3 (5,56%) bulk's were classified as negative to RT, although have milk from positive animals to TAT/2-ME characterizing false negative result. The individual RT showed high percentage of false positive results, while RT in the bulk presented low percentage of false positive reactions, detecting 84,2% of contaminated bulk's and 75% of infected properties, demonstrating to be a important tool for bovine brucellosis epidemiological vigilance.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003Bitstream added on 2014-06-13T19:10:02Z : No. of bitstreams: 1 jardim_gc_me_botfmvzdg.pdf: 660863 bytes, checksum: 781806b45c64e16af76389c093cf2e18 (MD5) / O presente trabalho avaliou o desempenho das técnicas de ELISA indireto, de antígeno acidificado tamponado (AAT) e de 2-mercaptoetanol (2-ME) com soroaglutinação lenta (SAL), comparando-as com a de fixação de complemento (FC), para o diagnóstico sorológico da brucelose em bovinos adultos de diferentes condições sanitárias: r1- rebanho não vacinado; r2- rebanho vacinado com dose padrão da vacina produzida com a amostra 19 de Brucella abortus; r3- rebanho vacinado com dose reduzida da mesma vacina. A prova que apresentou sensibilidade e especificidade mais próximas às da FC, considerada como padrão nesse estudo, foi a de AAT com especificidade relativa (ER) = 95,5% em r1 e ER = 98,9% em r2, seguida da 2-ME com SAL com ER = 94% em r1 e ER = 94,7% em r2, seguida do ELISA com ER = 81% em r1 e ER = 16,8% em r2. Todas as técnicas alcançaram sensibilidade relativa igual a 100% em r1 e r2; nenhuma, incluindo a FC, apresentou especificidade adequada para o diagnóstico em r3. A vacinação de bovinos adultos influenciou no diagnóstico sorológico. O ELISA indireto não apresentou nenhuma vantagens sobre o AAT para uso como teste de triagem. Seu uso como técnica de diagnóstico confirmatório requer mais estudos. / This study evaluated the performance of the indirect ELISA, the rose bengal (RB) and the mercaptoethanol (ME) with standard aglutination test (SAT) techniques, comparing them to the complement fixation (CF), for the brucellosis serological diagnosis in adult bovines with different sanitary terms: h1- not vaccinated herd; h2- herd vaccinated with standard dose of the vaccine produced with the strain 19 of Brucella abortus; h3- herd vaccinated with reduced dose of the same vaccine. The test which presented closer sensitivity and specificity to the ones of the CF, considered as standard in this research, was the RB with relative specificity (SR) = 95,5% in h1 and SR = 98,9% in h2, followed by ME with SAT with SR = 94% in h1 and SR = 94,7% in h2, followed by ELISA with SR = 81% in h1 and SR = 16,8% in h2. All techniques reached relative sensitivity equal to 100% in h1 and h2; none, including the CF, presented suitable specificity for diagnosis in h3. Adult animals vaccination influenced the serological diagnosis. The indirect ELISA didn’t show any advantage on RB for use as screening test. Its use as a final diagnosis technique requires more study.

Orientador : Márcio Rubens Graf Kuchembuck / Resumo: O presente trabalho avaliou o desempenho das técnicas de ELISA indireto, de antígeno acidificado tamponado (AAT) e de 2-mercaptoetanol (2-ME) com soroaglutinação lenta (SAL), comparando-as com a de fixação de complemento (FC), para o diagnóstico sorológico da brucelose em bovinos adultos de diferentes condições sanitárias: r1- rebanho não vacinado; r2- rebanho vacinado com dose padrão da vacina produzida com a amostra 19 de Brucella abortus; r3- rebanho vacinado com dose reduzida da mesma vacina. A prova que apresentou sensibilidade e especificidade mais próximas às da FC, considerada como padrão nesse estudo, foi a de AAT com especificidade relativa (ER) = 95,5% em r1 e ER = 98,9% em r2, seguida da 2-ME com SAL com ER = 94% em r1 e ER = 94,7% em r2, seguida do ELISA com ER = 81% em r1 e ER = 16,8% em r2. Todas as técnicas alcançaram sensibilidade relativa igual a 100% em r1 e r2; nenhuma, incluindo a FC, apresentou especificidade adequada para o diagnóstico em r3. A vacinação de bovinos adultos influenciou no diagnóstico sorológico. O ELISA indireto não apresentou nenhuma vantagens sobre o AAT para uso como teste de triagem. Seu uso como técnica de diagnóstico confirmatório requer mais estudos. / Abstract: This study evaluated the performance of the indirect ELISA, the rose bengal (RB) and the mercaptoethanol (ME) with standard aglutination test (SAT) techniques, comparing them to the complement fixation (CF), for the brucellosis serological diagnosis in adult bovines with different sanitary terms: h1- not vaccinated herd; h2- herd vaccinated with standard dose of the vaccine produced with the strain 19 of Brucella abortus; h3- herd vaccinated with reduced dose of the same vaccine. The test which presented closer sensitivity and specificity to the ones of the CF, considered as standard in this research, was the RB with relative specificity (SR) = 95,5% in h1 and SR = 98,9% in h2, followed by ME with SAT with SR = 94% in h1 and SR = 94,7% in h2, followed by ELISA with SR = 81% in h1 and SR = 16,8% in h2. All techniques reached relative sensitivity equal to 100% in h1 and h2; none, including the CF, presented suitable specificity for diagnosis in h3. Adult animals vaccination influenced the serological diagnosis. The indirect ELISA didn't show any advantage on RB for use as screening test. Its use as a final diagnosis technique requires more study. / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003-02-17Bitstream added on 2014-06-13T19:43:40Z : No. of bitstreams: 1 murakami_to_dr_jabo.pdf: 283308 bytes, checksum: 16722a01d68e7e065fd2b025df90dded (MD5) / Os objetivos deste trabalho foram: estimar a prevalência da brucelose bovina nos municípios de Altinópolis e Santo Antonio da Alegria, SP; avaliar fatores de risco associados à taxa de prevalência; comparar as provas do antígeno acidificado tamponado (PAAT) e de soroaglutinação em placa (SAP) como testes de triagem no diagnóstico da brucelose bovina; e comparar as provas de fixação de complemento (FC) e 2-mercaptoetanol (ME) como testes confirmatórios. Foi obtida, aleatoriamente, uma amostra de 1.459 soros sangüíneos de bovinos de 132 rebanhos, que foram examinados pela PAAT e pela SAP. Os soros com reação nesses testes foram examinados também pelas provas de FC e ME. Foram também obtidas, por meio de um questionário, informações sobre características dos animais e dos rebanhos estudados. Constatou-se que 3,43% dos animais foram reagentes pela FC, e 16,67% dos rebanhos tinham pelo menos um animal reagente. Os fatores mais associados à prevalência foram sexo e idade dos animais e a introdução de animais no rebanho sem a exigência de exame de brucelose negativo. A PAAT apresentou melhor desempenho que a SAP como teste de triagem, e a FC apresentou melhor desempenho que a ME como teste confirmatório. / The purposes of this investigation were: to estimate de prevalence of bovine brucellosis in Altinópolis and Santo Antonio da Alegria, State of São Paulo, Brazil; to evaluate risk factors associated to the prevalence rate; to compare the rose Bengal and the plate agglutination serum tests for screening; and to compare the complement fixation and the mercaptoetanol as confirmatory tests. A sample of 1,459 sera from 132 herds were obtained at random and tested by the rose Bengal and the plate agglutination tests. Sera reacting at any of these tests were also tested by the complement fixation and by de mercaptoethanol test. Informations about the animais and the herds studied were also obtained. The results showed that 3.43% of the animals reacted to the complement fixation test, and 16.67% of the herds had at least one reacting animal. The factors more associated to the prevalence rate were sex and age of the animals and the introduction of animals in the herd without a negative test for brucellosis. The rose Bengal plate test peformed better than the plate agglutination test for screening, and the complement fixation test performed better than the mercaptoethanol test for the confirmatory diagnosis.

Orientador: Luís Antonio Mathias / Banca: Raul José Silva Girio / Banca: Sonia Regina Pinheiro / Banca: Paulo Francisco Domingues / Banca: Samir Issa Samara / Resumo: Os objetivos deste trabalho foram: estimar a prevalência da brucelose bovina nos municípios de Altinópolis e Santo Antonio da Alegria, SP; avaliar fatores de risco associados à taxa de prevalência; comparar as provas do antígeno acidificado tamponado (PAAT) e de soroaglutinação em placa (SAP) como testes de triagem no diagnóstico da brucelose bovina; e comparar as provas de fixação de complemento (FC) e 2-mercaptoetanol (ME) como testes confirmatórios. Foi obtida, aleatoriamente, uma amostra de 1.459 soros sangüíneos de bovinos de 132 rebanhos, que foram examinados pela PAAT e pela SAP. Os soros com reação nesses testes foram examinados também pelas provas de FC e ME. Foram também obtidas, por meio de um questionário, informações sobre características dos animais e dos rebanhos estudados. Constatou-se que 3,43% dos animais foram reagentes pela FC, e 16,67% dos rebanhos tinham pelo menos um animal reagente. Os fatores mais associados à prevalência foram sexo e idade dos animais e a introdução de animais no rebanho sem a exigência de exame de brucelose negativo. A PAAT apresentou melhor desempenho que a SAP como teste de triagem, e a FC apresentou melhor desempenho que a ME como teste confirmatório. / Abstract: The purposes of this investigation were: to estimate de prevalence of bovine brucellosis in Altinópolis and Santo Antonio da Alegria, State of São Paulo, Brazil; to evaluate risk factors associated to the prevalence rate; to compare the rose Bengal and the plate agglutination serum tests for screening; and to compare the complement fixation and the mercaptoetanol as confirmatory tests. A sample of 1,459 sera from 132 herds were obtained at random and tested by the rose Bengal and the plate agglutination tests. Sera reacting at any of these tests were also tested by the complement fixation and by de mercaptoethanol test. Informations about the animais and the herds studied were also obtained. The results showed that 3.43% of the animals reacted to the complement fixation test, and 16.67% of the herds had at least one reacting animal. The factors more associated to the prevalence rate were sex and age of the animals and the introduction of animals in the herd without a negative test for brucellosis. The rose Bengal plate test peformed better than the plate agglutination test for screening, and the complement fixation test performed better than the mercaptoethanol test for the confirmatory diagnosis. / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-15Bitstream added on 2014-06-13T20:56:04Z : No. of bitstreams: 1 meirelles_rb_me_jabo.pdf: 431142 bytes, checksum: 402455070a5e87681746e4ec463e7683 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O trabalho teve por objetivo avaliar a prova do antígeno acidificado tamponado após tratamento dos soros com rivanol (AAT-RIV), como teste confirmatório no diagnóstico sorológico da brucelose bovina. Foram selecionadas 1.061 amostras de soros bovinos, previamente analisadas pelos testes preconizados pelo Programa Nacional de Controle e Erradicação de Brucelose Tuberculose (PNCEBT): como teste de triagem, a prova do antígeno acidificado tamponado (AAT), e como testes confirmatórios, a combinação das provas de soroaglutinação lenta e 2-mercaptoetanol (SAL+2-Me), e a reação de fixação de complemento (RFC). O AAT-RIV foi realizado com o antígeno nas concentrações de 8% e 4% de volume celular, não tendo sido encontrada diferença nos resultados. Os dados foram analisados pelo indicador kappa e pelo χ2 de McNemar, adotando-se com ponto-de-corte o título 25 no 2-Me e 4 na RFC. O AAT-RIV apresentou concordância regular (kappa = 0,53) com o AAT e boa com os testes confirmatórios (kappa: 2-Me = 0,67; SAL+2-Me = 0,66; RFC = 0,76). O χ2 de McNemar apontou diferenças significativas entre os testes. A comparação entre os resultados do AAT-RIV e a condição verdadeira do animal, estabelecida pela combinação dos resultados das provas AAT, SAL+2-Me e RFC, resultou em uma sensibilidade relativa de 76,5%, com intervalo de confiança (95%) de 72,7% a 80,3%, e especificidade relativa de 100%. Conclui-se que o AAT-RIV poderia ser utilizado como teste confirmatório no diagnóstico sorológico da brucelose bovina, sendo os animais com resultado positivo considerados infectados e aqueles com resultado negativo submetidos a um dos dois testes confirmatórios adotados pelo PNCEBT. / The purpose of the investigation was to evaluate the rose Bengal plate test in bovine serum after treatment with rivanol (RBPT-RIV) as a confirmatory test for brucellosis diagnosis. Serum samples from 1,061 bovine were analyzed by serological diagnostic techniques adopted by the Brazilian Program for Animal Brucellosis and Tuberculosis Control and Eradication: as screening test, the rose Bengal plate test (RBPT), and as confirmatory tests, the 2- mercaptoethanol plus standard tube agglutination test (STAT+2-Me), and the complement fixation test (CFT). RBPT-RIV was performed with 8% and 4% cellular concentration antigen, and there was no difference between the results. Data were analyzed by kappa statistic and McNemar χ2 (2-Me cut-off = titer 25, and CFT cutoff = titer 4). RBPT-RIV showed a moderate agreement (kappa = 0,53) with RBPT, and substantial agreement with the confirmatory tests (kappa: 2-Me = 0,67; STAT+2-Me = 0,66; CFT = 0,76). The McNemar χ2 showed significant difference among the tests. Comparing the RBPT-RIV results with the true condition of the animals, stablished by combining the results of RBPT, STAT+2-Me and CFT, the relative sensitivity was 76.5%, with a 95% confidence interval from 72,7% to 80.3%, and relative specificity of 100%. The results suggested that the RPBT-RIV is suitable to be used as a confirmatory test for brucellosis serological diagnosis; in this case, an animal testing positive should be classified as infected, and an animal testing negative should be tested by CFT or STAT+2-Me.

Orientador: Luís Antonio Mathias / Banca: Samir Issa Samara / Banca: Jane Megid / Resumo: O trabalho teve por objetivo avaliar a prova do antígeno acidificado tamponado após tratamento dos soros com rivanol (AAT-RIV), como teste confirmatório no diagnóstico sorológico da brucelose bovina. Foram selecionadas 1.061 amostras de soros bovinos, previamente analisadas pelos testes preconizados pelo Programa Nacional de Controle e Erradicação de Brucelose Tuberculose (PNCEBT): como teste de triagem, a prova do antígeno acidificado tamponado (AAT), e como testes confirmatórios, a combinação das provas de soroaglutinação lenta e 2-mercaptoetanol (SAL+2-Me), e a reação de fixação de complemento (RFC). O AAT-RIV foi realizado com o antígeno nas concentrações de 8% e 4% de volume celular, não tendo sido encontrada diferença nos resultados. Os dados foram analisados pelo indicador kappa e pelo χ2 de McNemar, adotando-se com ponto-de-corte o título 25 no 2-Me e 4 na RFC. O AAT-RIV apresentou concordância regular (kappa = 0,53) com o AAT e boa com os testes confirmatórios (kappa: 2-Me = 0,67; SAL+2-Me = 0,66; RFC = 0,76). O χ2 de McNemar apontou diferenças significativas entre os testes. A comparação entre os resultados do AAT-RIV e a condição verdadeira do animal, estabelecida pela combinação dos resultados das provas AAT, SAL+2-Me e RFC, resultou em uma sensibilidade relativa de 76,5%, com intervalo de confiança (95%) de 72,7% a 80,3%, e especificidade relativa de 100%. Conclui-se que o AAT-RIV poderia ser utilizado como teste confirmatório no diagnóstico sorológico da brucelose bovina, sendo os animais com resultado positivo considerados infectados e aqueles com resultado negativo submetidos a um dos dois testes confirmatórios adotados pelo PNCEBT. / Abstract: The purpose of the investigation was to evaluate the rose Bengal plate test in bovine serum after treatment with rivanol (RBPT-RIV) as a confirmatory test for brucellosis diagnosis. Serum samples from 1,061 bovine were analyzed by serological diagnostic techniques adopted by the Brazilian Program for Animal Brucellosis and Tuberculosis Control and Eradication: as screening test, the rose Bengal plate test (RBPT), and as confirmatory tests, the 2- mercaptoethanol plus standard tube agglutination test (STAT+2-Me), and the complement fixation test (CFT). RBPT-RIV was performed with 8% and 4% cellular concentration antigen, and there was no difference between the results. Data were analyzed by kappa statistic and McNemar χ2 (2-Me cut-off = titer 25, and CFT cutoff = titer 4). RBPT-RIV showed a moderate agreement (kappa = 0,53) with RBPT, and substantial agreement with the confirmatory tests (kappa: 2-Me = 0,67; STAT+2-Me = 0,66; CFT = 0,76). The McNemar χ2 showed significant difference among the tests. Comparing the RBPT-RIV results with the true condition of the animals, stablished by combining the results of RBPT, STAT+2-Me and CFT, the relative sensitivity was 76.5%, with a 95% confidence interval from 72,7% to 80.3%, and relative specificity of 100%. The results suggested that the RPBT-RIV is suitable to be used as a confirmatory test for brucellosis serological diagnosis; in this case, an animal testing positive should be classified as infected, and an animal testing negative should be tested by CFT or STAT+2-Me. / Mestre

Orientador: Luzia Helena Queiroz / Banca: Ana Júlia Silva e Alves / Banca: Vera Cláudia Lorenzetti Magalhães Curci / Resumo:A Brucelose e a Tuberculose bovina são zoonoses de distribuição mundial, relevantes à economia e a saúde pública. Com o objetivo de avaliar a ocorrência dessas enfermidades em uma amostra de rebanho bovino leiteiro do município de Paranaíba, MS, e a percepção dos produtores de leite sobre o risco destas enfermidades para o rebanho e à saúde pública, foram visitadas 42 propriedades e aplicado um questionário para detectar as falhas no manejo sanitário que poderiam estar associados à ocorrência dessas enfermidades. Foram colhidas amostras de sangue de 20% (378) das vacas em lactação, de um total de 1.889, as quais foram submetidas ao teste de triagem com Antígeno Acidificado Tamponado e os reagentes confirmados pelo teste 2- Mercaptoetanol para brucelose. Para tuberculose utilizou-se o Teste Cervical Simples para triagem e o Teste Cervical Comparativo como confirmatório dos inconclusivos. A ocorrência tanto da brucelose quanto da tuberculose nas propriedades foi de 2,4% (1/42). Das propriedades avaliadas, 26,2% (11/42) destinam o leite à venda informal; 7,1% (03/42) dos proprietários reconhece o leite como alimento passível de transmissão de zoonoses, porém 83,3% (35/42) desconhecem o Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose e nunca realizaram exames nos animais e 81% (34/42) não possui piquete de quarentena na propriedade. Os dados mostraram carência na percepção de riscos. Integrar a educação sanitária ao controle da brucelose e tuberculose contribuirá para que os produtores de leite adotem as medidas que permitirão mitigar os riscos à saúde animal e humana / Abstract:Brucellosis and Bovine Tuberculosis are zoonoses worldwide distribution, relevant to the economy and public health. In order to evaluate the occurrence of these diseases in a sample of dairy cattle herd in the municipality of Paranaiba, MS, Brazil, as well as the perception of dairy farmers on the risk of these diseases to livestock and public health, 42 properties were visited and applied a questionnaire to detect failures in health management that could be associated with the occurrence of these diseases. It was collected blood samples of 20% (378) lactating cows from a total of 1.889, which were subjected to screening, with Rose-Bengal Test (RBT) and positives confirmed by the reactants test 2-Mercaptoethanol (2-ME) for brucellosis. Tuberculosis was tested by the Cervical Test Simple (CTS) for screening and Comparative Cervical Test (CCT) as confirmatory results were inconclusive. The occurrence of both brucellosis and tuberculosis on the properties was 2.4% (1/42). Of the properties, 26.2 % (11/42) milk intended for informal sale, only 7.1% (03/42) of owners recognized milk as food capable of transmitting zoonosis; 83.3% (35/42) are unaware of the National Program for Control and Eradication of Brucellosis and Tuberculosis and never underwent tests in animals and 81% (34/42) does not have a quarantine paddock on the property. The data showed deficiency in risk perception. Integrate health education in the control of brucellosis and tuberculosis contribute to the milk producers to adopt measures that will mitigate the risks to animal and human health / Mestre

Orientador: Karina Paes Bürger / Banca: Luis Antonio Mathias / Banca: Anna Monteiro Correia Lima / Resumo: Este trabalho teve como objetivo padronizar e avaliar a técnica "dot blotting" para o diagnóstico sorológico da brucelose bovina, comparar os resultados com os encontrados nos testes de antígeno acidificado tamponado (AAT), 2-mercaptoetanol (2-ME) e fixação de complemento (RFC), além de estimar a sensibilidade e a especificidade relativa do "dot blotting" em comparação com os testes de diagnóstico oficiais. Para tanto, utilizaram-se 50 amostras de soro sanguíneo bovino para padronização do teste, e foram avaliados dois antígenos: Brucella abortus B19 obtida a partir da vacina ANABORTINA® B19 - Merial, após processo de ruptura do microrganismo, e extrato polissacarídico obtido de amostra de Brucella abortus S99 pelo método água quente - fenol quente. Ao final da padronização foi estabelecida como ideal para a técnica a utilização de membrana de nitrocelulose no formato de círculo, o antígeno obtido da Brucella abortus após passar por um processo de ruptura do microrganismo, como suporte a placa de cultivo celular de 24 poços e fundo chato, a diluição do soro de 1:100 e do conjugado de 1:30.000, além de 3 lavagens por etapa. A avaliação e a comparação da sensibilidade e especificidade relativa aos testes de AAT, 2-ME e RFC foram feitas utilizando 1.315 amostras, sendo estes resultados comparados por meio do indicador Kappa. A comparação dos resultados do "dot blotting" com o AAT mostrou índice Kappa de 0,9081 (IC95%: 0,8542 - 0,9621), sensibilidade 88% (IC95%: 83,75% - 92,25%) e especificidade 99,45% (IC95%: 98,8% - 99,75%); com o 2-ME, índice Kappa de 0,9939 (IC95%: 0,939 - 1,0484), sensibilidade 99,48% (IC95%: 97,11% - 99,91%) e especificidade 99,91% (IC95%: 99,49% - 99,989%); com a RFC, índice Kappa de 0,8226 (IC95%: 0,7690 - 0,8761), sensibilidade 100% (IC95%: 97,42% - 100,0%) e especificidade 95,40% (IC95%: 94,03% - 96,47%). Usando a combinação dos resultados do 2-ME e da RFC para ... / Abstract: This study aimed to standardize and evaluate the dot blotting technique for the serologic diagnosis of bovine brucellosis, compare the results with those found in the Bengal test (AAT), 2-mercaptoethanol (2-ME) and complement fixation (CF) and also estimate the relative sensitivity and specificity of dot blotting in comparison with the official diagnostic tests. In order to do this, 50 samples of bovine blood serum were used for test standardization, and two antigens were evaluated: Brucella abortus B19 bacteria obtained from ANABORTINA® B19 vaccine - Merial, after the rupture process of the microorganism, and a polysaccharide extract obtained from a sample of Brucella abortus S99 by the hot water method - hot phenol. At the end of standardization, the use of nitrocellulose membrane in a circle format was established as ideal for the technique, the antigen obtained from B. abortus bacteria after going through the rupture process of the microorganism, as a support a cell culture plate with 24 flat bottom wells was used, a dilution serum of 1:100 and the conjugate of 1:30,000, and washing 3 times per step. The evaluation and comparison of relative sensitivity and specificity with the AAT, 2-ME and CF tests was done using 1,315 samples, and these results were compared using the Kappa indicator. The comparison between the results of dot blotting and the AAT showed a Kappa index of 0.9081 (IC95%: 0.8542 - 0.9621), sensitivity of 88% (IC95%: 83.75% - 92.25%) and specificity of 99.45% (IC95%: 98.8% - 99.75%); 2-ME test, Kappa index of 0.9939 (IC95%: 0.939 - 1.0484), sensitivity of 99.48% (IC95%: 97.11% - 99.91%) and specificity of 99.91% (IC95%: 99.49% - 99.989%); complement fixation test, Kappa index of 0.8226 (IC95%: 0.7690 - 0.8761), sensitivity of 100% (IC95%: 97.42% - 100%) and specificity of 95.40% (IC95%: 94.03% - 96.47%). Using the combination of the results of 2-ME and RFC to establish the true condition of the animal, the ... / Mestre