Made available in DSpace on 2016-08-10T10:38:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GABRIELA MOURA DE PAULA.pdf: 7198154 bytes, checksum: f6f3fcaaba289c4b737ab5cfc3d5363a (MD5) Previous issue date: 2014-08-29 / Breast cancer is the second most common cancer in the world. It is a complex and heterogeneous disease with diverse clinical features, cellular origin, histological types, mutations, prognosis and therapeutic possibilities. A subpopulation of cells with the ability of self-renewing, increased proliferation and resistance to chemotherapy has been described in breast cancer, named tumor-initiating cells (TICs). The aim of this study was to review and integrate, through meta-analysis, the studies that have investigated the possible associations between tumor-initiating cells, defined by CD44+ CD24- low phenotype and ALDH expression, by using immunohistochemistry, and prognostic aspects of breast cancer. Twenty studies met the inclusion criteria for this meta-analysis, 13 evaluated the CD44+ CD24- low phenotype, 11 evaluated the expression of ALDH and four studies evaluated both markers. The results of the metaanalysis demonstrated statistically significant associations between the triple negative phenotype and the CITs, including both the expression of CD44+ CD24- low phenotype (p < 0.0001), as the expression of ALDH (p = 0.0004). Associations investigated for HER2 overexpression presented conflicting results, whereas CD44+ CD24- low phenotype was not significantly associated with this parameter (p = 0.1989), ALDH expression was significantly associated with HER2 (p < 0.0001). An inverse association, however, statistically significant, was observed between the presence of lymph node metastases and CD44+ CD24- low phenotype (p = 0.0047), while the expression of ALDH was not significantly associated with this parameter (p = 2019). Based on the analyses carried out, it can be concluded that the markers, CD44+ CD24- low and ALDH, represent an important tool in identifying tumor initiating cells in breast carcinomas and that statistical associations observed in this study raise important perspectives for developing molecular therapies based on presence of the CD44+ CD24- low phenotype and ALDH expression in the treatment of triple-negative breast carcinomas. / O câncer de mama é o segundo câncer mais comum do mundo. É uma doença complexa e heterogênea com diversas características clínicas, histológicas, origem celular, mutações, prognóstico e possibilidades terapêuticas. Uma subpopulação de células com a capacidade de auto-renovação, proliferação celular e maior resistência à quimioterápicos tem sido descrita no câncer de mama, sendo estas denominadas célulasiniciadoras tumorais (CITs). O objetivo deste trabalho consistiu em revisar e integrar , por meio de meta-análise, os estudos que investigaram as possíveis associações entre células iniciadoras tumorais, definidas pelo fenótipo CD44+ CD24- low e expressão de ALDH, por método de imuno-histoquímica, e aspectos prognósticos do câncer de mama. Vinte estudos preencheram os critérios de inclusão para esta meta-análise, 13 avaliaram o fenótipo CD44+ CD24- low, 11 avaliaram a expressão de ALDH e quatro estudos avaliaram ambos marcadores. Os resultados da meta-análise demonstram associações estatisticamente significativas entre o fenótipo triplo negativo e as CITs, incluindo tanto a expressão do fenótipo CD44+ CD24- low (p < 0,0001), como a expressão de ALDH (p = 0,0004). Associações investigadas para a hiperexpressão de HER2 apresentaram resultados conflitantes, sendo que fenótipo CD44+ CD24- low não foi associado de forma significativa à este parâmetro (p = 0,1989), enquanto a expressão de ALDH esteve significativamente associada ao HER2 (p < 0,0001). Uma associação inversa, porém, estatisticamente significativa, foi observada entre a presença de metástases linfonodais e o fenótipo CD44+ CD24- low (p = 0,0047), enquanto a expressão de ALDH não esteve significativamente associada a este parâmetro (p = 2019). Com base nas análises realizadas, é possível concluir que os marcadores CD44+ CD24- low e ALDH representam uma importante ferramenta na identificação de células tumorais nos carcinomas mamários e que as associações estatísticas observadas criam perspectivas importantes para o desenvolvimento de terapias moleculares baseadas na presença de CD44+ CD24- low e de ALDH no tratamento dos carcinomas triplo negativos.

Submitted by Fabrizio Grandi (fgrandivet@gmail.com) on 2016-03-10T14:56:58Z No. of bitstreams: 1 Doutorado.pdf: 5138229 bytes, checksum: cf3859209f1985d48832ef7e89af5b94 (MD5) / Approved for entry into archive by Sandra Manzano de Almeida (smanzano@marilia.unesp.br) on 2016-03-10T17:08:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 grandi_f_dr_bot.pdf: 5138229 bytes, checksum: cf3859209f1985d48832ef7e89af5b94 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-10T17:08:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 grandi_f_dr_bot.pdf: 5138229 bytes, checksum: cf3859209f1985d48832ef7e89af5b94 (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O tumor venéreo transmissível (TVT) canino é uma neoplasia transplantável, considerada um alo-enxerto. Entretanto, pouco se sabe a respeito da origem e processo de cacinogênese. Atualmente, postula-se que alguns tumores originem-se de células iniciadoras tumorais, classicamente descritas nas leucemias mielóide humanas. As características intrínsecas do TVT fornecem indícios de uma possível participação de células iniciadores tumorais no processo de carcinogênese nesse tumor. Foi realizado estudo de fenotipagem do TVT canino para avaliar a marcação das proteínas CD44, CD133, CD90 e CD34, comumente associadas ao potencial iniciador tumoral. Para tanto utilizou-se a citometria de fluxo, imuno-histoquímica e RTq-PCR. Foram analisados também as frações de crescimento pelo Ki-67) e o número de células em apoptose pela caspase-3 clivada. Trinta e oito amostras de TVT foram obtidas de pacientes sem tratamento quimioterápico prévio. As amostras foram classificadas em plasmocitóide ou mistas, de acordo com o subtipo citológico; as células positivas na citometria de fluxo foram representadas em termos percentuais para os marcadores CD44, CD34, CD90 e CD133; a fração de crescimento foi representada pela técnica do H-Score; a quantidade de células apoptóticas foi representada pelo somatório de células positivas para a caspase-3 clivada; as imuno-marcações das proteínas CD44 e CD34 foram representadas por escores semi-quantitativos baseados na intensidade e percentual de células positivas; as expressões de RNAm foram calculadas em termos relativos; ainda, os pacientes foram divididos em grupos resistente e não resistente e comparados quanto a expressão dos marcadores de células iniciadoras supracitados. Não foram observadas diferenças significativas entre os marcadores e os grupos citológicos plasmocitóide e misto; o percentual de células CD44+ comumente foi superior a 90%, enquanto que o percentual de células CD34+, menor que 0,5%; o percentual de células CD90+ e CD133+ variou amplamente; houve uma tendência em termos de diferença estatística entre os grupos quimiorresistente e não resistente; houve correlação forte entre o percentual de células CD133+ e CD90+ na citometria de fluxo. O estudo permitiu verificar diferentes níveis de expressão protéica e gênica nas amostras de TVT canino; ainda, os grupos citológicos aparentam não possuir diferenças com relação a expressão dos marcadores CD44, CD90, CD133 e CD34; os grupos quimiorresistentes e não-resistentes parecem diferir com relação a expressão dos marcadores de células iniciadoras tumorais. / The canine transmissible venereal tumor (CTVT) is a transplantable neoplasia considered an allograft. Information about the origin and carcinogenesis process is scarcely known. Currently, some neoplasms are believed to arise from a tumor-initiating cell (TIC´s) classically described in human myeloid leukemia. TVT intrinsic characteristics provide evidence of a possible TIC´s participation in carcinogenesis process of this malignancy. Thus, a phenotyping study of CTVT was conducted to assess the immunophenotyping properties of the proteins CD44, CD133, CD90 and CD34, already known to be associated to tumor initiator potential. The use of flow cytometry and immunohistochemistry contributed to this purpose. In addition, growth fractions and cells undergoing apoptosis were examined by Ki-67 and caspase-3 cleaved, respectively. Thirty-eight samples were chosen from patients having no previous chemotherapy and cytological diagnosis of CTVT. Samples were classified into plasmacytoid or mixed according to cytological subtype. Positive cells in the flow cytometry were expressed in percentage for the markers CD44, CD34, CD90 and CD133. H-score technique helped to represent growth fractions. Apoptotic cell quantity was calculated by summing positive cells. Immunohistochemical marking of CD44 and CD34 proteins were determined by semiquantitative scores based on the intensity and percentage of positive cells. Moreover, specimens were divided into resistant and non-resistant groups and compared according cell marker expressions cited before. No significant differences appeared between the markers, and cytological plasmacytoid and mixed groups. The CD44 + cells and CD34 + percentages showed up high and low values, respectively. CD90 + and CD133 + cell percentages presented variable values. Amplitudes of the gene expression values among markers were similar to those observed in flow cytometry with a low expression of CD34, and a high expression of CD44. There was a positive statistical tendence between chemo-resistant and non-resistant groups, as well as a strong correlation between the percentage of CD133 + and CD90 + in flow cytometry. Besides, cytological groups apparently have no differences with the marker expression of CD44, CD90, CD133 and CD34. Resistant and non-resistant groups to chemotherapy seems to differ with respect to the marker expression of TIC´s.