MARINHO, Erasmo Bernardo. "Avaliação da qualidade de vida de pacientes pós-irradiados com diagnóstico de carcinoma espinocelular de cavidade oral". 2016. 76 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-02-26T13:17:01Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_ebmarinho.pdf: 1256750 bytes, checksum: babb27849e38dda2b9f61c18d1ea2352 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2016-02-26T13:48:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_ebmarinho.pdf: 1256750 bytes, checksum: babb27849e38dda2b9f61c18d1ea2352 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-26T13:48:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_ebmarinho.pdf: 1256750 bytes, checksum: babb27849e38dda2b9f61c18d1ea2352 (MD5) Previous issue date: 2016 / Radiotherapy is an effective therapeutic modality employed in the management of malignant tumors in the oral cavity. Its use in head and neck results in adverse effects. The measurement of quality of life allows to gather the most common problems in oral cancer patients in a structured way, ranking its intensity and enabling a more accurate clinical control. This study aimed to evaluate the quality of life of post- irradiated diagnosed with squamous cell carcinoma of the oral cavity. Eleven patients over six months of completion of therapy treated at the Hospital Haroldo Juaçaba – Instituto do Câncer do Ceará were included in the study. University of Washington quality of life questionnaire, specific to head and neck cancer, was applied. Data related to socio-demographic, clinical, pathological and therapeutic profile were collected. Unstimulated salivary flow was measured by spitting method. Categorical data were exposed in the form of absolute and percentage frequency, and quantitative data as mean ± standard deviation, followed by their minimum and maximum. Statistical analysis of quantitative data was performed by nonlinear Spearman correlation, considering a 95% confidence. Most patients were elderly (72.72%), male (81.81%), with lower education (90.9%), away from their work activities since the completion of cancer treatment (90.9%), with a history of smoking (90.9%), alcohol abuse (90.9%) and exposure to sunlight before the onset of the disease (90.9%), with lesions in the mouth floor (45.45%) moderately differentiated type (100%), stage IV (54,54%), subjected to other treatment modalities in addition to radiation therapy (100%). Among the domains assessed, chewing, saliva and speech presented the lowest mean scores (31.8, 42.3 and 60.6, respectively). All participants presented moderate to severe hyposalivation. Statistically significant correlation was found between age and speech (p = 0.043); time of completion of radiation therapy and recreation (p = 0.027); swallowing and pain (p = 0.039); activity and recreation (p = 0.030); swallowing and chewing (p = 0.007); chewing and speaking (p = 0.048); and shoulder and mood (p = 0.004). We conclude that the post- irradiated patients diagnosed with squamous cell carcinoma of the oral cavity tend to consider their quality of life ranging from fair to outstanding and that chewing, saliva and speech domains are those with greater commitment. / A radioterapia é uma modalidade terapêutica eficaz utilizada no tratamento de tumores malignos da cavidade oral. Sua utilização em região de cabeça e pescoço leva ao surgimento de efeitos adversos. A mensuração da qualidade de vida permite reunir os problemas mais comuns aos pacientes com câncer oral de forma estruturada, classificando sua intensidade, tornando-se possível um controle clínico mais apurado. O presente estudo teve como objetivo avaliar a qualidade de vida de pós-irradiados com diagnóstico de carcinoma espinocelular de cavidade oral. Onze pacientes com mais de seis meses de conclusão do tratamento, atendidos no Hospital Haroldo Juaçaba – Instituto do Câncer do Ceará, foram incluídos no estudo. Foi aplicado o questionário de qualidade de vida da Universidade de Washington, específico para o câncer de cabeça e pescoço. Foram coletados dados relacionados ao perfil sociodemográfico, clínico-patológico e terapêutico. Realizou-se a mensuração do fluxo salivar não estimulado através do método de spitting. Dados categóricos foram expostos em forma de frequência absoluta e percentual e os dados quantitativos em forma de média ± desvio-padrão, seguido de sua mínima e máxima. A análise estatística dos dados quantitativos foi realizada através da correlação não linear de Spearman, considerando uma confiança de 95%. Predominaram pacientes idosos (72,72%), do sexo masculino (81,81%), de baixa escolaridade (90,9%), afastados de suas atividades laborais desde a conclusão do tratamento oncológico (90,9%), com histórico de tabagismo (90,9%), abuso de álcool (90,9%) e exposição à luz solar anterior ao surgimento da doença (90,9%), com lesões localizadas em soalho de boca (45,45%) do tipo moderadamente diferenciado (100%), estadiamento IV (54,54%), submetidas a outras modalidades de tratamento além da radioterapia (100%). Dentre os domínios avaliados, mastigação, saliva e fala apresentaram as menores médias de escores (31,8; 42,3 e 60,6, respectivamente). Todos os participantes apresentaram hipossalivação de moderada à severa. Constatou-se correlação estatisticamente significante entre: idade e fala (p=0,043); tempo de conclusão da radioterapia e recreação (p=0,027); dor e deglutição (p=0,039); atividade e recreação (p=0,030); deglutição e mastigação (p=0,007); mastigação e fala (p=0,048); e ombro e humor (p=0,004). Conclui-se que os pacientes pós-irradiados com diagnóstico de carcinoma espinocelular de cavidade oral tendem a considerar de média a excelente sua qualidade de vida e que os domínios de mastigação, saliva e fala são os que apresentam maior comprometimento.

Carcinoma espinocelular de cabeca e pescoco (CECP) é uma das malignidades mais prevalentes e mortais mundialmente. Até o momento não existem biomarcadores confiáveis para prognóstico e decisão de terapia na oncologia de CECP. Ganhos cromossômicos do fator de transcrição SOX2 foram demonstrados em CECP; entretanto, o impacto da expressão de SOX2 em processos relevantes tumorais e evolução clínica permanecem incompreendidos. Expressão de SOX2 foi analisada em 22 linhagens celulares de CECP, com e sem ganho em 3q. O nível médio de expressão de SOX2 foi significativamente maior nas linhagens com ganho em 3q quando comparada às linhagens sem ganho em 3q (p = 0,0012). Neste trabalho, realizamos o perfil global de expressão genica das linhagens de CECP controle e após silenciamento de SOX2, especificamente carcinoma espinocelular de língua com amplificação de SOX2. Os resultados mostraram 749 genes afetados por SOX2 “knock down”, considerando o valor ajustado de p ≤ 0,05. 456 genes forma encontrados negativamente regulados enquanto que 293 genes foram positivamente regulados após o “knock down” de SOX2. O principal gene positivamente regulado foi vimentin e sua expressão inversa com SOX2 foi confirmado usando “quantitative real time polymerase chain reaction”. De fato, a imunofluorescência indicou expressão inversa de SOX2 e vimentin. A análise da “transcriptome data” usando o software “Ingenuity pathway analysis” revelou genes diferentemente expressos envolvidos nas funções de mobilidade celular e movimento celular. Alinhados com esses achados, as células silenciadas para SOX2 apresentaram maior migração quando comparadas aos controles em duas linhagens independentes de CECP, uma de língua e outra de hipofaringe, sugerindo um maior risco para recidiva e metástase de tumores com baixa ou nenhuma expressão de SOX2. Complementando esses resultados, as células negativas para SOX2 localizaram-se preferencialmente no “fronte de invasão”, enquanto que as células positivas para SOX2 estavam no centro das colônias celulares, sugerindo que o silenciamenteo de SOX2 pode ser necessário para o início da migração em células de CECP. Por outro lado, também encontramos uma diminuição na viabilidade celular após o “knock down” de SOX2, coerente com o papel de SOX2 como oncogene. De acordo, após indução de apoptose com doxorubicina, células de CECP silenciadas para SOX2 mostraram significativamente mais apoptose que as controles. Interessantemente, a via de apresentação de antígeno foi a mais afetada após o “knock down” de SOX2. Os genes envolvidos nessa via e afetados nos nossos resultados, principalmente genes HLA classe I, estava afetados negativamente, mostrando correlação positiva com expressão de SOX2. Estes achados sugerem um papel de SOX2 na resposta imunológica de CECP e podem indicar um enfoque promissor para o desenvolvimento de novas terapias para tumors de CECP com expressão de SOX2. Além do potencial de SOX2 como biomarcador para prognóstico de CECP, uma maior compreensão dos mecanismo moleculares subjacentes pode ajudar no estabelecimento de novas estratégias de terapia direcionada. / Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is one of the most prevalent and lethal human malignancies worldwide. To date there are no reliable biomarkers for prognosis or therapy decision making in HNSCC oncology. Recurrent copy number gain and overexpression of the transcription factor SOX2 has been shown in HNSCC; however, the impact of SOX2 expression on tumor relevant processes and clinical outcome remains largely elusive. Expression of SOX2 was assessed in 22 HNSCC cell lines with and without 3q gain. Mean expression level was significantly higher in cell lines with 3q gain as compared to cell lines without 3q gain (p = 0,0012). We performed global gene expression profiling of control and SOX2 silenced HNSCC cell lines, specifically tongue squamous cell carcinoma, with SOX2 gene amplification. Results showed 749 affected after SOX2 knock down, considering the adjusted p value ≤ 0,05. 456 genes were found to be down-regulated and 293 genes to be up-regulated after SOX2 knock down. The top up-regulated gene was vimentin and its inverse expression with SOX2 was confirmed by quantitative real time polymerase chain reaction. Indeed, immunofluorescence showed inverse expression of SOX2 and vimentin. Ingenuity pathway analysis of transcriptome data revealed an enrichment of differentially expressed genes with a functional annotation in cell mobility and cellular movement. In line with these findings, SOX2 silenced cells showed increased migration as compared to controls in two independent HNSCC cell lines, from tongue and hypopharynx, suggesting a higher risk for local recurrence and metastasis of tumors with low or no SOX2 expression. In addition, SOX2 negative cells were preferentially localized in the “invasion front” whereas SOX2 positive cells were seen in the center of the cell colonies, suggesting that silencing SOX2 could be a necessary step to initiate migration in HNSCC cells. On the other hand we also found that cell survival decreased after SOX2 knock down coherently with SOX2 role as an oncogene. Also, after apoptosis induction with doxorubicin, HNSCC SOX2 silenced cells had significantly more apoptosis than control. Interestingly, Antigen Presentation Pathway was the main affected pathway after the knock down of SOX2. The genes involved in this pathway that were found affected in our trancriptome data were mainly HLA class I, and they were all down-regulated after SOX2 knock down, showing a positive correlation with SOX2. This finding suggests a role of the transcription factor SOX2 in the underlying immune response of HNSCC and could indicate a promising approach for new therapies development for SOX2 expressing tumors. In addition to the potential of SOX2 as prognostic biomarker, a better understanding of the underlying molecular mechanisms could help to establish new strategies for targeted therapy.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós Graduação em Saúde Animal, 2017. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2017-04-05T16:09:00Z No. of bitstreams: 1 2017_LorenaFerreiraSilva.pdf: 3166343 bytes, checksum: 713dbf0603885c3cfc6fcd5fa15d4504 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2017-04-18T14:54:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_LorenaFerreiraSilva.pdf: 3166343 bytes, checksum: 713dbf0603885c3cfc6fcd5fa15d4504 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-18T14:54:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_LorenaFerreiraSilva.pdf: 3166343 bytes, checksum: 713dbf0603885c3cfc6fcd5fa15d4504 (MD5) / As mãos e os pés são alvos frequentes de lesões em cães, incluindo lesões neoplásicas e não neoplásicas. Embora alguns estudos detalhem a prevalência e a caracterização clínico-patológica de alterações digitais em cães em alguns países, trabalhos similares não tem sido realizado no Brasil. O objetivo do presente trabalho foi realizar estudo retrospectivo para caracterizar as alterações tumoriformes que afetam as mãos e os pés de cães. Foram analisados 105 alterações tumoriformes desta região em cães no período de 2003 a 2016. As lesões mais comuns foram neoplasmas (62,9%), seguidos de processos inflamatórios (19%) e de outras alterações (18,1%). Dentre os neoplasmas, 40,9% eram mesenquimais, 39,4% eram epiteliais e 19,7% de células redondas. Todos os neoplasmas de células redondas e a maioria dos neoplasmas epiteliais e mesenquimais foram malignos. Fêmeas e machos foram acometidos similarmente. As raças mais afetadas foram Labrador Retriever, Schnauzer, Teckel, sem raça definida, Pastor Alemão, Rottweiler e Pit Bull. Fila, Pit Bull e Schnauzer foram as raças mais afetadas por neoplasmas mesenquimais, epiteliais e de células redondas, respectivamente. Labrador Retriever foi a raça mais diagnosticada com inflamações e Teckel, Labrador Retriever e SRD os que mais tiveram outras alterações. A idade e o peso médio foram de 8,4 anos e 28,5 kg, respectivamente. O diâmetro médio das tumorações foi de 2,5 cm, e os neoplasmas apresentavam as maiores médias. A pelagem com o maior número de alterações foi a amarela. A maioria das biópsias eram incisionais e a maior parte das amostras provenientes de amputação era neoplásica. O membro torácico direito foi o mais afetado, enquanto que o dígito foi a principal estrutura anatômica lesada. Os neoplasmas mais comuns foram o carcinoma de células escamosas, seguido do mastocitoma, melanoma e sarcoma indiferenciado. Dos casos de inflamação, metade afetava o folículo piloso e adjacências e o infiltrado era predominantemente piogranulomatoso ou linfoplasmocítico. Cisto folicular, calcinose circunscrita, acrocordoma e hiperqueratose foram as principais alterações não neoplásicas e não inflamatórias diagnosticadas. / Despite the fact that neoplastic and non-neoplastic lesions commonly affect hands and feet of dogs, there are few studies regarding these lesions in Brazil. The objective of this manuscript was to do a retrospective study to characterize the tumoriform changes that affect these areas in dogs. One-hundred-five cases of dogs, from 2003 to 2016, with tumoriform lesions in hands and feet were analyzed on histopathology. The lesions frequently found were neoplasms (62.9%), followed by inflammation (19%) and other changes (no inflammatory and no neoplastic) (18.1%). The neoplactic changes were 40.9% mesenchymal, 39.4% epithelial, and 19.7% round cells. All round cells neoplasia and the most of the epithelial and mesenchymal tumors were malignant. Female and male dogs were similarly affected. Labrador Retriever (11.9%), Schnauzer (9.9%), Teckel (8.9%), mongrel (8.9%), German Shepherd (8.9%), Rottweiler (8.9%), and Pit Bull (8.9%) were more frequently affected. Fila Brasileiro (aka Brazilian mastiff), Pit Bull and Schnauzer were the main breeds injured by mesenchymal, epithelial, and round cells neoplasms, respectively. Labrador Retriever was more frequently diagnosed with inflammation. Other no inflammatory and no neoplastic changes were observed more commonly in Teckel, Labrador Retriever, and mongrel dogs. Medium age and weight were 8.4 years and 28.5 kg, respectively. Medium diameter of the tumoriform lesions was 2.5 cm and neoplasms represented higher averages. Lesions were noted mainly in dogs with yellow coat (24%). Most biopsies samples (56.4%) were incisional, and amputations (85.3%) were mostly from cases with neoplastic changes. Right forelimb was the most affected limb, and digits were the main injured anatomic structures. Squamous cell carcinoma was the most (14.2%) commonly diagnosed neoplasm, followed by mastocytoma (7.6%), melanoma (7.6%), and undifferentiated sarcoma (7.6%). In half of the inflammatory cases, the lesion was centered in hair follicle and surrounding dermis. The inflammatory infiltrate was predominantly piogranulomatous or lymphoplasmacytic. Follicular cyst, calcinosis circumscripta, acrochordons and hyperkeratosis were the main non neoplastic and non-inflammatory changes.

Resumo não disponível.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: El Receptor del Factor de Crecimiento Epidérmico (EGFR) es una proteína citoplasmática transmembrana, estudios indican que contribuye en el desarrollo y progresión de lesiones potencialmente malignas a carcinoma oral de células escamosas (COCE). Analizar estos marcadores permitiría identificar lesiones de alto riesgo de malignización y seleccionar candidatos a tratamientos personalizados con inhibidores de EFGR. Objetivo: Determinar y caracterizar la expresión de EGFR en muestras de pacientes con diagnósticos de mucosa normal, displasia y carcinoma de células escamosas de la cavidad oral. Materiales y Métodos: Se Seleccionaron 54 muestras con diagnóstico histopatológico de displasia epitelial, 35 de bajo grado (DBG) y 19 de alto grado (DAG) y además se utilizó una matriz de tejidos, con 60 muestras de COCE y 9 de mucosa oral normal. La detección de EGFR se realizó mediante técnica Inmunohistoquímica con el anticuerpo Anti-Rabbit EGFR clon D38B1. En las microfotografías se determinó la expresión proteica (EP) en -, 1+, 2+ y 3+. Se utilizó test de Chi cuadrado y test de Fisher para el análisis estadístico (P<0.05). Resultados: En las DBG el 54,3% fueron mujeres mientras en las DAG y COCE fueron el 47,4% y 31,8%, respectivamente. El 88,6% de las DBG, 78,5% de las DAG y 80% de los COCE tuvieron una EP positiva para EGFR, siendo esta diferencia estadísticamente significativa (P<0.05). Sin embargo, en las mucosas normales el 100% no expresó EGFR. El 65,7% de las DBG, 68,4% de las DAG y 51% de los COCE tuvieron una alta expresión de EGFR (EP=2+y/o 3+). Discusión: En las DBG la mayoría eran mujeres a diferencia de las DAG donde eran hombres, esto podría deberse a que las mujeres tienden a consultar antes por problemas de salud. Encontramos una tendencia en las DBG, DAG y COCE a la sobre-expresión de EGFR y es propio de estas patologías debido a que la mucosa oral normales no evidencia expresión de esta proteína. Conclusión: Hay sobre-expresión de EGFR en displasias epiteliales y COCE, por otro lado, no se observó expresión en mucosa oral normal, por lo que se podría considerar como un marcador temprano de estas patologías. / Financiamiento: Proyecto Fondecyt No 11400281.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: El Receptor del Factor de Crecimiento Epidérmico (EGFR) es una proteína citoplasmática transmembrana de la familia de receptores tirosina- quinasa HER (ErbB). La sobreexpresión de estas moléculas se ha correlacionado con estadios tumorales avanzados y metástasis de neoplasias malignas, incluyendo carcinomas de mama, pulmón, colorrectal y de cabeza y cuello. Si bien, el Ameloblastoma (AM) posee un comportamiento benigno, su agresividad y elevada tasa de recurrencia determinan en la actualidad una resolución netamente quirúrgica. Estudios han evidenciado expresión de EGFR en AM, por lo que caracterizar estos marcadores en pacientes con AM permitiría seleccionar candidatos para la aplicación futura de un tratamiento farmacológico coadyuvante al quirúrgico, mediante inhibidores de EFGR. Objetivo: Caracterizar la expresión inmunohistoquímica de EGFR en muestras con diagnóstico histopatológico de ameloblastoma. Materiales y Métodos: Se seleccionaron 52 muestras con diagnóstico histopatológico de AM, 40 (77%) fueron Ameloblastoma Multiquístico(AMM) y 12 (23%) fueron Ameloblastoma Uniquístico(AMU). Se utilizó como control positivo de la técnica una muestra de placenta y negativo una muestra de fibroma irritativo. La detección de EGFR se realizó mediante técnica Inmunohistoquímica con el anticuerpo Anti-Rabbit EGFR clon D38B1. En las microfotografías se determinó la expresión proteica (EP) de acuerdo a la siguiente escala de cuantificación 0 , 1+, 2+ y 3+, que representaban el índice de marcación inmunohistoquímica de EGFR asociado al nivel de EP (ausente, leve, alta o muy alta) respectivamente. Para el análisis estadístico se utilizó test de Chi cuadrado y test de Fisher para (P<0.05). Resultados: : La distribución según género de los AMs en su totalidad fue superior para el género femenino con un 56% de las muestras, mientras que para los AMM y AMU fueron el 52,5% y 67% respectivamente. El 85% de los AMM y 83% de los AMU tuvieron una EP positiva para EGFR, siendo esta diferencia no estadísticamente significativa (P=0.69). El 70% de los AMM, 67% de los AMU y 69% de los AM en su totalidad tuvieron una alta expresión de EGFR (EP=2+y/o 3+). Por otro lado, se obtuvo que tanto en AM maxilares y mandibulares existe alta expresión de EGFR (EP=2+y/o 3+) con un 80% y 67% respectivamente, estableciéndose diferencia significativa (p<0,05). Discusión: Tanto para el AMM como AMU existió un porcentaje más elevado de mujeres, sin embargo, sólo hubo una diferencia significativa para AMU, donde el 67% de los pacientes fueron mujeres. Se encontró una tendencia tanto de AMM y AMU a sobre expresar EGFR, lo que clásicamente es propio de neoplasias de comportamiento maligno, debido a que tejidos normales no evidencian expresión de esta proteína. Conclusión: Existe una tendencia en muestras de AM a sobre expresar EGFR, independiente de su tipificación (AMM o AMU), por lo que se sugiere considerar como posible blanco terapéutico de inmunomoduladores y/o inhibidores tirosina quinasa contra EGFR complementario al tratamiento quirúrgico, mejorando así, el pronóstico terapéutico del paciente. / Adscrita a Proyecto Fondecyt No 11400281

Orientador: Luiz Antonio Guimarães Cabral / Banca: Luiz Antonio Guimarães Cabral / Banca: Artur Aburad de Carvalhosa / Banca: Janete Dias Almeida / Resumo: Neste trabalho foram estudados, comparativamente, os aspectos clínicos, histológicos e das regiões organizadoras nucleolares pela impregnação por prata (AgNOR) na carcinogênese quimicamente induzida pelo 9,10-dimetil-1,2-benzantraceno (DMBA) a 0,5% diluído em acetona em bordo lingual de hamsteres sírios dourados (Mesocricetus auratus). Oitenta e oito hamsteres foram divididos em dois grupos: 55 no grupo estudo, pincelados três vezes por semana com a solução de DMBA e 33 no grupo controle, pincelados três vezes por semana apenas com acetona. Os resultados permitiram as seguintes conclusões: os aspectos clínicos da evolução do carcinoma epidermóide (CE) quimicamente induzido pelo DMBA em bordo lingual de hamsteres, guardam semelhança com aqueles contidos na literatura sobre o desenvolvimento do CE em humanos; existe sintonia dos aspectos clínicos com os aspectos histológicos quando comparados à carcinogênese em humanos; a AgNOR mostrou sincronismo com as alterações histológicas de malignidade, mostrando-se um marcador de proliferação celular e, finalmente, o posicionamento do molar inferior do hamster pode ser considerado como coadjuvante da carcinogênese quimicamente induzida em bordo lingual. / Abstract: In this work were studied, comparatively, the clinical, histological and nuclear argyrophilic nuclear organizer region impregnated by silver (AgNOR) aspects in the carcinogenesis on the tongue of golden syrian hamster (Mesocricetus Auratus), induced chemically by 0,5% 9,10-dimetil-1,2-benzantraceno (DMBA) in acetone. Eighty eight hamsters were divided into two groups: 55 in the study group, were painted three times a week on left side of the tongue with DMBA solution and 33 in the control group were painted only with acetone, with the same frequency. The results consent the followed conclusions: the clinical aspects of the evolution of epidermoid carcinoma (EC) in carcinogenesis induced chemically by DMBA on the tongue hamster were similar with that in the literature about the development of the EC in humans; there is connection between the clinical and histological aspects when compared with the humans carcinogenesis; the AgNOR show compatibility with malignant histological changes, validating in being proliferation marker and, finally, the position of hamster molar tooth can be considerate an adjuvant in the carcinogenesis induced chemically on the hamster tongue. / Mestre

Banca: Ana Sueli Rodrigues Cavalcante / Banca: Fábio de Abreu Alves / Banca: Luciane Dias de Oliveira / Banca: Luiz Paulo Kowalski / Banca: Márcio Ajudarte Lopes / Resumo: O objetivo desta tese foi reunir os resultados de estudos clínicos, imunohistoquímicos e moleculares que investigaram o perfil demográfico e a etiopatogenia do carcinoma de células escamosas primário (CEC) de boca em pacientes jovens (com idade ≤40 anos). Além disso, a data do tratamento primário foram próximas. Inicialmente, foi realizado um levantamento epidemiológico através dos prontuários dos pacientes atendidos no ambulatório de Cirurgia de Cabeça e Pescoço do AC Camargo Cancer Center. Foram encontrados 125 pacientes jovens (grupo teste) que foram pareados com 250 pacientes com idade ≥50 anos (grupo controle) que apresentaram tumores em topografia, estadiamento clínico e época de tratamento similares. Em ambos os grupos, a o sexo masculino foi o mais afetado, sendo a língua seguida do soalho bucal os locais acometidos. Tumores em estadios clínicos avançados e bem difernciados foram características mais frequente. Interessantemente, o grupo jovem foi menos exposto ao tabaco (p=0.04). Este grupo apresentou mais recorrências (p=0.02), embora não se tenha observado diferenças nas curvas de sobrevidas global (SG) (p=0.86) e livre de doença (SLD) entre os grupos avaliados. Linfonodos comprometidos, tumores avançados, pobremente diferenciados e a radioterapia como tratamento primário exclusivo diminuíram a SLD. A SG foi melhor nas mulheres, não usuárias de tabaco, lesões localizados em gengiva/palato duro e em estadios clínicos precoce. À partir deste levantamento, foi possível realizar os trabalhos subsequentes. No capítulo 3.2, foi realizado investigação da amplificação do CCND1 e expressão protéica da ciclina D1 em CEC de jovens e resultados encontrados foram comparados ao grupo controle. A superexpressão protéica foi observada em 47.7% vs 32.8% (p=0.03) e amplificação foi encontrada em 46.2% vs 18.6% (p<0.01). No grupo jovem, a superexpressão foi correlacionada com diminuição da SG, embora a... / Abstract: The objective of this thesis was to compile results of clinical, immunohistochemical and molecular studies on the demographics and etiopathogeny of primary oral squamous cell carcinoma (SCC) in young people (aged 40 years or younger). Initially, we carried out an epidemiological survey using medical records from patients treated at the ambulatory care unit of the Head and Neck Surgery Department of AC Camargo Cancer Center. We found 125 young patients (test group), who were then matched to 250 patients aged 50 years or older (control group), having tumors of similar topographies, clinical stages, and dates of treatment. Men were the most affected in both groups, being the tongue and the floor of the mouth the most affected regions. Tumors in advanced clinical stages and well differentiated were the most frequent types. Interestingly, the young group was less exposed to tobacco (p=0.04). Although this group showed higher relapse rates (p=0.02), no differences were found between the groups studied in terms of their Overall Survival (OS) (p=0.86) and Disease-Free Survival (DFS) curves. Involvement of lymph nodes, poorly differentiated tumors, tumors in advanced clinical stages, and radiotherapy as the sole primary treatment all brought down DFS rates. OS was higher in non-smoker women, in gingivae and soft palate lesions, and in early clinical stages. From the findings of this survey, we were able to carry out all subsequent research work. In Chapter 3.2, we carried out investigation on CCND1 amplification and cyclin D1 expression in SCC of young people, and compared the findings against the control group. Protein overexpression was found in 47.7% against 32.8% (p=0.03), and amplification was found in 46.2% against 18.6% (p<0.01). In the young group, overexpression was correlated with OS decrease; however, this difference was not statistically significant (p=0.06). Amplification was not correlated with OS in either of the groups. DFS was lower...

Carcinoma espinocelular de cabeca e pescoco (CECP) é uma das malignidades mais prevalentes e mortais mundialmente. Até o momento não existem biomarcadores confiáveis para prognóstico e decisão de terapia na oncologia de CECP. Ganhos cromossômicos do fator de transcrição SOX2 foram demonstrados em CECP; entretanto, o impacto da expressão de SOX2 em processos relevantes tumorais e evolução clínica permanecem incompreendidos. Expressão de SOX2 foi analisada em 22 linhagens celulares de CECP, com e sem ganho em 3q. O nível médio de expressão de SOX2 foi significativamente maior nas linhagens com ganho em 3q quando comparada às linhagens sem ganho em 3q (p = 0,0012). Neste trabalho, realizamos o perfil global de expressão genica das linhagens de CECP controle e após silenciamento de SOX2, especificamente carcinoma espinocelular de língua com amplificação de SOX2. Os resultados mostraram 749 genes afetados por SOX2 “knock down”, considerando o valor ajustado de p ≤ 0,05. 456 genes forma encontrados negativamente regulados enquanto que 293 genes foram positivamente regulados após o “knock down” de SOX2. O principal gene positivamente regulado foi vimentin e sua expressão inversa com SOX2 foi confirmado usando “quantitative real time polymerase chain reaction”. De fato, a imunofluorescência indicou expressão inversa de SOX2 e vimentin. A análise da “transcriptome data” usando o software “Ingenuity pathway analysis” revelou genes diferentemente expressos envolvidos nas funções de mobilidade celular e movimento celular. Alinhados com esses achados, as células silenciadas para SOX2 apresentaram maior migração quando comparadas aos controles em duas linhagens independentes de CECP, uma de língua e outra de hipofaringe, sugerindo um maior risco para recidiva e metástase de tumores com baixa ou nenhuma expressão de SOX2. Complementando esses resultados, as células negativas para SOX2 localizaram-se preferencialmente no “fronte de invasão”, enquanto que as células positivas para SOX2 estavam no centro das colônias celulares, sugerindo que o silenciamenteo de SOX2 pode ser necessário para o início da migração em células de CECP. Por outro lado, também encontramos uma diminuição na viabilidade celular após o “knock down” de SOX2, coerente com o papel de SOX2 como oncogene. De acordo, após indução de apoptose com doxorubicina, células de CECP silenciadas para SOX2 mostraram significativamente mais apoptose que as controles. Interessantemente, a via de apresentação de antígeno foi a mais afetada após o “knock down” de SOX2. Os genes envolvidos nessa via e afetados nos nossos resultados, principalmente genes HLA classe I, estava afetados negativamente, mostrando correlação positiva com expressão de SOX2. Estes achados sugerem um papel de SOX2 na resposta imunológica de CECP e podem indicar um enfoque promissor para o desenvolvimento de novas terapias para tumors de CECP com expressão de SOX2. Além do potencial de SOX2 como biomarcador para prognóstico de CECP, uma maior compreensão dos mecanismo moleculares subjacentes pode ajudar no estabelecimento de novas estratégias de terapia direcionada. / Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is one of the most prevalent and lethal human malignancies worldwide. To date there are no reliable biomarkers for prognosis or therapy decision making in HNSCC oncology. Recurrent copy number gain and overexpression of the transcription factor SOX2 has been shown in HNSCC; however, the impact of SOX2 expression on tumor relevant processes and clinical outcome remains largely elusive. Expression of SOX2 was assessed in 22 HNSCC cell lines with and without 3q gain. Mean expression level was significantly higher in cell lines with 3q gain as compared to cell lines without 3q gain (p = 0,0012). We performed global gene expression profiling of control and SOX2 silenced HNSCC cell lines, specifically tongue squamous cell carcinoma, with SOX2 gene amplification. Results showed 749 affected after SOX2 knock down, considering the adjusted p value ≤ 0,05. 456 genes were found to be down-regulated and 293 genes to be up-regulated after SOX2 knock down. The top up-regulated gene was vimentin and its inverse expression with SOX2 was confirmed by quantitative real time polymerase chain reaction. Indeed, immunofluorescence showed inverse expression of SOX2 and vimentin. Ingenuity pathway analysis of transcriptome data revealed an enrichment of differentially expressed genes with a functional annotation in cell mobility and cellular movement. In line with these findings, SOX2 silenced cells showed increased migration as compared to controls in two independent HNSCC cell lines, from tongue and hypopharynx, suggesting a higher risk for local recurrence and metastasis of tumors with low or no SOX2 expression. In addition, SOX2 negative cells were preferentially localized in the “invasion front” whereas SOX2 positive cells were seen in the center of the cell colonies, suggesting that silencing SOX2 could be a necessary step to initiate migration in HNSCC cells. On the other hand we also found that cell survival decreased after SOX2 knock down coherently with SOX2 role as an oncogene. Also, after apoptosis induction with doxorubicin, HNSCC SOX2 silenced cells had significantly more apoptosis than control. Interestingly, Antigen Presentation Pathway was the main affected pathway after the knock down of SOX2. The genes involved in this pathway that were found affected in our trancriptome data were mainly HLA class I, and they were all down-regulated after SOX2 knock down, showing a positive correlation with SOX2. This finding suggests a role of the transcription factor SOX2 in the underlying immune response of HNSCC and could indicate a promising approach for new therapies development for SOX2 expressing tumors. In addition to the potential of SOX2 as prognostic biomarker, a better understanding of the underlying molecular mechanisms could help to establish new strategies for targeted therapy.

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