Homocystein (Hcy) är en aminosyra som är starkt bunden till kroppens metabolism av metionin. När hcy tillbakabildas till metionin krävs närvaro av vitamin B12 och folat. Analys av hcy i plasma (P-hcy) används vid misstanke om brist av någon av dessa vitaminer. Analysen kan utföras med ett antal olika metoder. I denna studie analyseras P-hcy immunologiskt med analysinstrumentet Immulite 2000 XPi (Siemens Healthcare Diagnostics Inc, Erlangen, Germany) och enzymatiskt med analysinstrumentet Cobas 6000 (Roche Diagnostics Scandinavia AB, Bromma, Sweden) med syfte att jämföra analysresultaten från de båda metoderna. Immulite 2000 XPi användes som referensmetod då denna validerats för klinisk analys av P-hcy. Studien genomfördes på 51 st slumpvis utvalda plasmaprover (24 kvinnor och 27 män) mellan 25 och 95 år.Utöver metodjämförelse genomfördes precisionsstudie med Cobas 6000 (20 replikat i två nivåer). Den enzymatiska metoden visade en hög precision. Vid låg nivå beräknades variationskoefficienten (CV) till 1,71 % (medelvärde: 8,32 ❍mol/L) och vid hög nivå till 2,54 % (medelvärde: 29,45 ❍mol/L). Korrelationen mellan de båda metoderna var r = 0,994, (y=0,977x + 1,4 och R2 = 0,989). Ingen statistisk signifikant skillnad påvisades. Resultaten av P-hcy vid analys med Cobas 6000 låg dock 0,9 ❍mol/L (medelvärde) högre än resultat från Immulite 2000 XPi. Denna systematiska avvikelse bör inte vara av klinisk betydelse vid analys av P-hcy för utredning av eventuell sjukdom. Skillnaden kan dock vara relevant om analysen används för uppföljning av tidigare analysresultat. Resultat visar att båda metoderna kan användas för analys av P-hcy och att de kan användas som ett tillfredsställande diagnostiskt verktyg.

Today, some kind of laboratory results is required for around 70% of the diagnostics and follow-ups for diseases. In many of the cases the time from sampling to a result is very critical. Therefore the discussion of how to improve this situation has begun. For many analyses serum has been the routine choice for a long time but now it is disputed. After blood collection in a serum tube it is essential to wait 30-60 minutes before centrifugation and analysis of the sample, a long time for someone in an acute state. Other problems like post centrifugation clots of fibrin causing false results or time-consuming reruns of the sample have also been reported. These problems have initiated the laboratory in Hudiksvall’s hospital to find out an alternative to the common serum sampling.In this report, the differences between serum and lithium heparin plasma for 31 analyses has been evaluated. Paired blood samples, one serum and one plasma, were collected for routine, hormonal and for tumor markers analyses and analyzed in a Cobas c501, e411 or e601 (ROCHE). The results of the analyzed samples were compared to each other by statistical analysis.The results prove that serum and lithium heparin plasma is equal for ALT, GGT, NT-proBNP, FT3, FT4, cobalamin, LH, prolactin, TSH, CA19-9, CEA and PSA. The results also prove that serum and lithium heparin plasma is not equal for 19 other analyses. Therefore, a shift between different types of sampling is not to be recommended without further evaluations.

Njurens funktion är bl a att reglera vätskebalansen i kroppen och elektrolytkoncentrationen. Njuren består av livsviktiga enheter så kallade nefroner. Nefronerna kan skadas och orsaka proteinläckage ut i urinen, främst albumin. Detta är vanligt vid diabetes mellitus, högt blodtryck och åderförkalkning. Kreatin bildas i njurar, lever och pankreas och transporteras med blodet till andra organ t ex muskler och hjärnan. Delar av kreatinet i musklerna omvandlas till kreatinin. Albumin i urin påverkas av patientens grundsjukdom och urinproduktion, därför används kvoten mellan kreatinin i urin (U-kreatinin) och albumin i urin (U-albumin) som en kontroll av njurens funktion. Kvoten används främst för att upptäcka mikroalbuminuri dvs ett litet läckage av albumin i urin som är ett tidigt tecken på njurskada. Syftet med arbetet var att jämföra två metoders resultat mellan instrumenten Vitros 5,1 FSoch Cobas c 702 vid analys av U-kreatinin. För tillfället analyseras U-kreatinin på Vitros 5,1 FS och U-albumin på Cobas c 702 för uträkning av U-albumin/U-kreatinin kvot. Det skulle underlätta arbetet och minska risken för t ex kontaminationer, om båda analyserna kan utföras på Cobas c 702. Analysen utfördes på 40 urinprover från patienter i olika åldrar och kön, alla prover var stickprov (morgonurin). Resultatet visade på en mycket god korrelation mellan metoderna. U-kreatinin på Cobas c 702 ger ett genomsnittligt 6 % högre värden än på Vitros 5,1 FS, vilket innebär att U-albumin/U-kreatinin kvoten minskar med 12 %. Precision var hög hos båda instrumenten. Slutsatsen är att det är möjligt att analysera U-kreatinin på Cobas c 702 istället för Vitros 5,1 FS.

NT-proBNP is a biproduct derived from the synthesis of BNP, a synthesis stimulated when cardiomyocytes are stretched such as in heart failure. Heart failure is defined as the hearts inability to supply the blood volume the body acquires. It is advantageous to monitor changes for adequate treatment. NT-proBNP has proven to be an excellent marker for this purpose. The purpose of the study was to compare the two immunochemical methods for measuring NT-proBNP: Roche Elecsys proBNP II analyzed with Cobas e601 and Siemens IMMULITE 2000 NT-proBNP analyzed with IMMULITE 2000 XPi. For this comparison 60 lithium heparin plasma samples from 36 men (60 – 90 years old) and 24 women (65 – 94 years old) was used. IMMULITE 2000 XPi served as the reference method. Results from the assays were compared in a correlation diagram, which indicated good correlation (R: 0.98). Cobas e601 yielded results on average 17.4 % lower than the reference method. A paired t test was used to prove significant diference at 95 % confidence level between the methods on a 95 % confidence level. Precision regarding Roche Elecsys proBNP II, based on measurings of plasma with low and high analyte concentration, 25 replicates one day and 5 replicates 4 days gave imprecisions <3 % (CV%). Reference method imprecision (CV%) <5 % was calculated from control analysis. Good correlation between the two methods and lower imprecision when using proBNP II indicate that Cobas e601 can be used. / NT-proBNP är en restprodukt vid syntes av brain natriuretic peptide (BNP), vars syntes stimuleras av att hjärtats myocyter töjs ut såsom vid hjärtsvikt. Hjärtsvikt innebär att hjärtat inte orkar pumpa den volym blod som motsvarar systemkretsloppets behov. Det är fördelaktigt att kunna följa förändringar i hjärtmuskelns funktion för adekvat behandling. NT-proBNP har visat sig vara en bra markör i detta syfte. Studiens syfte var att jämföra två immunokemiska metoder: Roches Elecsys proBNP II i analysinstrumentet Cobas e601 med Siemens IMMULITE 2000 NT-proBNP i analysinstrumentet IMMULITE 2000 XPi. Studiematerialet kom att bestå av 60 patientprover av litiumheparinplasma från 36 män (60 – 90 år) samt 24 kvinnor (65 - 94 år). IMMULITE 2000 Xpi fungerade som referensmetod. Resultat av kalibrering överensstämde med erhållna masterkurvor och analys av kontroller gav resultat inom 1 SD. Analysresultaten från de båda metoderna jämfördes i ett korrelationsdiagram. Spridningsdiagrammen indikerade en korrelation om R: 0,98. Jämförd metod gav dock i genomsnitt 17,8 % lägre resultat. Signifikant skillnad metoderna emellan vid 95 % konfidensnivå påvisades genom ett parat t-test. Precision avseende Roches Elecsys proBNP II undersöktes genom analys av plasma med hög respektive låg analytkoncentration (25 replikat samma dag och 5 replikat om dagen i ytterligare 4 dagar) vilket totalt gav en imprecision om <3 % uttryckt i CV. Referensmetodens imprecision beräknades utifrån analyserade kontroller och gav en CV <5 %. God korrelation mellan de båda metoderna samt lägre imprecision vid användning av Elecys proBNP II talar för att den jämförda metoden kan tas i bruk.

Som svar på bakteriellt orsakade systemiskainfektioner och sepsis frisätts prohormonet prokalcitonin (PCT) till blodbanan.Analys av plasma-PCT (P-PCT) kan utföras med reagenset Elecsys BRAHMS PCT ianalysmodulerna cobas® e602 och e411från Roche Diagnostics.Analysprincipen är electrochemiluminiscence som bygger på immunanalys avsandwichprincip. Syftet med föreliggande studie var att verifiera metoden föranalys av P-PCT på Roche cobas® e602 och e411 med Elecsys BRAHMS PCT(ThermoFischer) samt att göra en hållbarhetsstudie av analyten ioriginalprovröret. Verifieringen gjordes genom mätning av repeterbarhet ochprecision, samt jämförelse av analysresultat från patientprover mot ett annatlaboratorium som använder samma analysmetod. Hållbarhetsstudien gjordes genomanalys av fem patientprover under olika tidsintervall 0-24 timmar efterprovtagning. Resultaten av repeterbarhetsstudien gavvariationskoefficientvärdet (CV) 3,5 % på Roche cobas® e602 medkontrollmaterial nivå 1 (åsatt värde 0,53 µg/L) och CV 1,3 % för kontrollmaterialnivå 3 (åsatt värde 24,5 µg/L). På Roche cobas e411 blev CV 2,2 % för nivå 1och 1,6 % för nivå 3. Precisionsstudien gav mellanliggande imprecisions CV-värdenmellan 1,2–1,9 % (Kontrollmaterial nivå 1 och 3). Patientjämförelserna visadeett linjärt samband (r>0,99). Bias tenderade att vara högre vidanalysresultat >20 µg/L. Hållbarhetsstudien resulterade i en obetydlig minskningav PCT koncentrationen från omedelbar analys (0,73; 57,7; 2,4; 0,94; 0,27 µg/L)och efter 24 timmar (0,70; 53,69; 2,21; 0,73; 0,24 µg/L). Repeterbarheten ochprecisionen för samtliga instrument bedömdes vara god. Patientjämförelsernavisade på ett tydligt linjärt samband med låg spridning, både vid analys iKalmar och i Linköping. Hållbarhetsstudien visade acceptabel hållbarhet avanalyten i originalprovröret. Metoden anses kunna införas på kliniskt kemiskalaboratorier vid Klinisk kemi och transfusionsmedicin, Landstinget i Kalmar län. / In response to bacterial systemic infections and sepsis, the prohormone procalcitonin (PCT) is released to the bloodstream. PCT levels in plasma can be measured using Elecsys BRAHMS PCT reagent with cobas® immunoanalyzer modules e602 and e411 from Roche Diagnostics. The test principle is electrochemiluminiscence immunoassay. The aim of this study was to verify the method for measuring plasma levels of PCT with Roche cobas® e602 and e411 using Elecsys BRAHMS PCT as well as to do a sustainability study of the analyte in the original sample tube. The verification was done by measurements of repeatability and precision, and a comparison of assay results from patient samples against another laboratory using the same method. The sustainability study was done by analyzing five patient samples during different time intervals 0-24 hours after sampling. The repeatability study gave coefficient of variations (CV %) values 3.5 % and 2.2 % with Roche cobas® e602 and 1.3 % and 1.6 % with Roche cobas® e411 using quality control level 1 (affixed value 0,53 µg/L) and level 3 (affixed value 24,5 µg/L) respectively. The precision study gave CV% values between 1.2-1.9 % (quality control level 1 and 3). The patient comparison study showed linear regression (r>0,99). Bias tended to be higher on assay results >20 µg/L. The sustainability study resulted in a slight decrease of the plasma PCT level from immediate analysis (0.73; 57.78; 2.41; 0.94; 0.27 µg/L) to analysis after 24 hours (0.70; 53.69; 2.21; 0.73; 0.24 µg/L). The repeatability and precision was considered to be good. Patient comparisons showed a clear linear relationship with little distribution between the values, both in Kalmar and in Linköping. The sustainability study showed an acceptable sustainability of the analyte in the original sample tube. This method is considered accurate and will be introduced to the laboratories of Clinical Chemistry and Transfusion Medicine at county council of Kalmar.

Neuronspecifikt enolas (NSE) är en viktig biomarkör för att diagnostisera t.ex. neuroendokrina tumörer, särskilt småcellig lungcancer (SCLC) och neuroblastom. NSE används även som en del i utredning av hjärnskada vid hjärtstopp. Eftersom NSE finns i höga koncentrationer i erytrocyter, kan hemolys i blodprovet orsaka falskt förhöjda NSE-nivåer i serum utan hjärnskada. Syftet med studien var att utvärdera hur hemolys påverkar NSE-analysen på Cobas, ett helautomatiserat analysinstrument. Mätning av NSE-koncentration utfördes på Cobas 8000 från Roche Elecsys, baserad på immunokemisk sandwich-metod med ElectroChemi-LuminiscenceImmunoassay (ECLI) detektionsteknik. För att studera hemolysens inverkan, tillverkades hemolysat från 20 patientprover. Dessa hemolysat tillsattes till poolat serum, med NSE-nivåer inom referensintervallet (< 17 µg/L). Även graden av hemolys bestämdes på Cobas 8000. Resultatet visade ett linjärt samband mellan de uppmäta hemolysindex (HI) värden och S-NSE värden. Variationen i NSE-tillskott på individnivå undersöktes och resulterade i slutsatsen att varje hemolysenhet motsvarar ett NSE-tillskott på 0,33 ± 0,07 µg/L som frigörs från erytrocyter. Ett förslag för att lösa problemet med hemolys vid analys av S-NSE är att använda en kompenserande faktor för att korrigera NSE-koncentrationen. Kompensering kan utföras med hjälp av det erhållna sambandet i studien (1 HI = 0,33 ± 0,07 µg/L NSE-tillskott) genom att subtrahera tillskottet från den uppmätta NSE-koncentrationen. / Neuron Specific Enolase (NSE) is an important biomarker for diagnosing e.g. neuroendocrine tumors, especially small cell lung cancer (SCLC) and neuroblastoma. NSE is also used as a part of the investigation of brain damage in cardiac arrest. Because NSE is present in high concentrations in erythrocytes, hemolysis in the blood sample can cause falsely elevated NSE levels in serum without brain damage. The purpose of this study was to evaluate how hemolysis affects NSE analysis on Cobas, a fully automated analytical instrument. Measurement of NSE concentration was performed on Cobas 8000 from Roche Elecsys, based on immunochemical sandwich method with ElectroChemi-Luminescence Immunoassay (ECLI) detection technique. To study the effect of hemolysis, hemolysates were prepared from 20 patient samples. These hemolysates were added to pooled serum, with NSE levels within the reference range (<17 μg/L). The degree of hemolysis was also determined on Cobas 8000. The result showed a linear relationship between the measured hemolysis index (HI) values and S-NSE values. The variation in NSE contribution at the individual level was examined with the result that each hemolysis unit corresponds to an NSE contribution of 0.33 ± 0.07 µg/L, which is released from erythrocytes. A suggestion to solve the problem of hemolysis relating to NSE analysis is to use a compensatory factor to correct the NSE concentration. Compensation can be performed by using the relationship obtained in the study (1 HI = 0.33 ± 0.07 µg/L NSE contribution) and subtracting the contribution from the measured NSE concentration.

Paratyroideahormon (PTH) och kortisol är två analyter som i dagsläget analyseras i serum med elektrokemilumenicense på instrumentet Cobas 8000® på Klinisk Kemi på Länssjukhuset i Kalmar. I framtiden är det planerat att övergå till att analysera dem i plasma. Syftet med projektet var att jämföra värden som erhållits för serum samt plasma för de båda analyterna och undersöka korrelationen mellan dem. Samtidigt utvärderades metodernas repeterbarhet samt eventuellt inflytande av oförutsebara faktorer på mätresultaten med en totalimprecisionsstudie.  PTH är ett peptidhormon som reglerar kalciumhomeostasen i kroppen. Dysfunktion i produktionen av PTH kan leda till osteoporos, hjärtarytmier, muskelkramper samt mentala störningar. Kortisol är ett livsnödvändigt steroidhormon som påverkar ämnesomsättningen och säkerställande det centrala nervsystemets energibehov i situationer med hög stress. Båda analyserna utförs rutinmässigt samt akut och en övergång till plasma skulle framför allt vara tidsbesparande och generera kortare svarstider. Jämförelsen av serum och plasma gjordes med 15 prover från patienter där ett serumrör samt ett plasmarör hade tagits vid samma provtillfälle. Detta resulterade i en determinationskoefficient (r2) som var för PTH 0,9988 och för kortisol 0,9993.  Totalimprecisionen uppskattades genom att analysera två serumkontroller för PTH och kortisol med sex replikat under fem dagar. Variationskoefficienten (CV) för de två PTH-serumkontrollerna var 3,9% för IM2 respektive 3,1% för IM3. För kortisol-serumkontrollerna var CV 2,1% för IM1 respektive 1,3% för IM2. För metoderna eftersträvades ett CV under 5%. Slutsatsen var att korrelationen mellan serum och plasma var mycket god samt att metoderna hade en bra stabilitet och repeterbarhet. / Parathyroid hormone (PTH) and cortisol are hormones involved in regulation of important mechanisms in the human body. PTH regulates the homeostasis of calcium and dysfunction in PTH production and release could lead to osteoporosis and arrythmia. Cortisol is involved in the metabolism and assures energy to the central nervous system in times of physiological stress. The concentration of these analytes is clinically determined by electrochemical luminescence on the immunochemical assay platform Cobas 8000®. In the laboratory of clinical chemistry in Kalmar the assays are performed on samples obtained from serum but changing to plasma assays would be more efficient and less time consuming. The aim of this project was to compare measured concentrations for PTH and cortisol using samples obtained from serum and plasma, respectively and to determine the correlation between the obtained results. The analytical precision was also evaluated to appreciate the influence of unpredictable events on the results.  The comparison between the results obtained from serum and plasma was performed by analysing 15 patient samples. Each serum and plasma sample were taken at the same time and from the same patient. The coefficient of determination for PTH was calculated to 0,9988 and for cortisol 0,9993 in serum and plasma, respectively. For the evaluation of the analytical precision, six replicates of two different serum controls for each analyte was assayed during six replicates for five days. In total of 30 replicates for each control. The coefficient of variation (CV) for PTH controls was 3,9% for IM2 and 3,1% for IM3. CV for cortisol was 2,1% for IM1 and 1,3% for IM2. The conclusion from this project was that there was a strong correlation between serum and plasma and both assays had good precision and repeatability.

Klinisk kemiska analyser har hög klinisk relevans. I serum/plasma kan olika parametrar kvantifieras. Dessa parametrar kan vara proteiner, enzymer, joner, metaller, lipider och kolhydrater. Med hjälp av referensintervall kan veterinärer ställa diagnos, följa behandling och sjukdomsförlopp. Parametrar detekteras med olika analysprinciper/metoder; kolorimetri, immunturbidimetri, enzymatisk metod och potentiometri. Djursjukhuset, AniCura, i Hässleholm mottagas både hundar och katter. Cirka 120 kemianalyser analyseras varje dag. AniCura har köpt in ett nytt våtkemiiinstrument, Indiko Plus, som ska ersätta Cobas C111. Med Indiko Plus tillkommer fler provpositioner, 8 nya analyser, ökad kapaciteten och underlättad användning.  Syftet med denna studie var att jämföra instrumenten och ta fram eget referensintervall som jämfördes med referensintervall framtaget av Thermo Fisher. Verifiering av det nya instrumentet genomfördes med precisionsstudie och linjäritetsstudie. Provtagning på hundar och katter utfördes av personal på AniCura. Jämförelsen gjordes med patientprover och referensintervall togs fram med hjälp av prover från friska hundar och katter. Jämförelsen visade att 9 av 13 analyser hade statistisk signifikant skillnad. Orsaken till det beror troligen på skillnaden av reagens, instrumentens ålder och tid mellan mätningar. Ett nytt referensintervall utarbetades och skiljde sig inte mycket från Thermo Fishers intervall. Vidare validering på grund av liten population rekommenderades. Precisionen för Indiko Plus blev godkänd. Linjäriteten blev icke linjär och berodde troligen på en dålig pipett och bör göras om. / Clinical chemical analyzes has high clinical relevance. In serum/plasma, different parameters can be quantified. Parameters can be proteins, enzymes, ions, metals, lipids, and carbohydrates. With reference intervals, veterinarians can set diagnosis, follow treatment and development of the disease. Parameters are detected with different analysis principles/methods; colorimetry, immunoturbidimetry, enzymatic method and potentiometry. The animal hospital, AniCura, in Hässleholm accept dogs and cats. About 120 chemical analyzes are analyzed every day. AniCura purchased a new instrument, Indiko Plus, which will replace Cobas C111. Indiko Plus provide, more sample positions, 8 new analyzes, increased capacity, and facilitated use. The purpose of this study was to compare the instruments and produce a new reference interval which was compared to the reference interval provided by Thermo Fisher. To verify Indiko Plus, a precision and linearity study were conducted. Blood sampling of dogs and cats was performed by staff at AniCura. The comparison was made with patient samples and the reference intervals were obtained using samples from healthy animals. The comparison showed 9 of 13 analyzes had a statistically significant difference. The reason for this is probably due to the difference in reagents, the age of the instruments and the time between measurements. A new reference interval was developed and did not differ much from the Thermo Fisher interval. Further validation due to low population was recommended. The precision for Indiko Plus was approved. The linearity study shows not linear trend but was likely due to a bad pipette and should be redone.

No description available.

Ensuring correct analytical responses is of the utmost importance in laboratory workand interferences with analyses can give incorrect results. Work to improve the precision of the analyses is an ongoing process. An interference in the analysis of Interleukin-6 (IL-6), a cytokine that reflects inflammatory processes in the body, is biotin. Biotin interferes with EnzymeLinkedImmunoSorbentAssay (ELISA) analysis by binding in to streptavidin thereby causing falsely low analytical responses. An attempt to reduce that interference is to raise the threshold for biotin by introducing a new reagent. The aim of this project was to introduce a new reagent with elevated biotin interference threshold and carry out a precision measurement as well as a patient comparison. In addition, a sustainability study was carried out to investigate possible changes in IL-6 concentration when samples are stored in room temperature with open or closed vessels. Control material was analysed during three consecutive days. The patient comparison was performed by analysing 20 patient samples with both the older reagent and the new one. The sustainability study was preformed last and here were 7 patient samples used to perform this part of the study. The control material was analysed with good results, a total coefficient of variation (CV%) was calculated at 1.6% for the lower control and 3.0% for the higher one. The comparison showed good correlation with only a minor negative bias for the new reagent. The sustainability study showed, in line with what the supplier has indicated, a sample shelf life of 6 h at room temperature without sealing. Interesting to mention is that samples over 50 pg/mL showed a shelf life more than 24 h at room temperature without sealing. The decision was made by the medically responsible doctor that the reagent was approved for use in the laboratory.