PACHECO, Isabela Alves. Avaliação clinicopatológica de pacientes portadores de tumores malígnos de origem não epitelial em região de cabeça e pescoço no município de Fortaleza- Ce. 2010. 76 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-Ce, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-08T16:10:52Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_iapacheco.pdf: 505123 bytes, checksum: 1efe750481410012869a3b0a9642ecd9 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-01T14:06:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_iapacheco.pdf: 505123 bytes, checksum: 1efe750481410012869a3b0a9642ecd9 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-01T14:06:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_iapacheco.pdf: 505123 bytes, checksum: 1efe750481410012869a3b0a9642ecd9 (MD5) Previous issue date: 2010 / Malignant tumors of non-epithelial origin are considered rare in the head and neck region and they can show great morbidity and mortality. The aim of this study was to investigate the cases of sarcomas and melanomas in the head and neck region over the period from 1999 to 2008, in specialized centers located in the Municipality of Fortaleza. The data were collected from the register books of surgery of the head and neck and patient reports at the evaluated centers. Fifty-four cases were observed, being 36 sarcomas and 18 melanomas. As per the evaluation of the sarcomas, we have observed that the most assailed individuals were men with brown skin, ranging from 20 to 59 years old, with median age of 39.7. The relation man/woman was 1.7:1. The most prevailing histological type was the rhabdomyosarcoma, and the most attacked areas were the face and the cervical region. And as per the melanomas, adult men were also prevailing, ranging from 20 to 59 years old, with median age of 54.6. It has also been verified equal assailment in the brown and white races, with 33.3% in each one. The relation man/woman was 1.25:1. The most prevailing histological type was the superficial spreading melanoma, and the face skin was the most frequent location. In the evaluation of the origin, there was similarity in both diseases, being approximately half the patients in the capital city, and half in the state´s hinterland. As concerning the monitoring, the greatest part of the sample came from patients alive without evidence of the disease from the last consultation, corresponding to 41.6% in sarcomas and 44.5% in melanomas. The variation of therapy has also been observed in both groups, being the most common types of treatments, the association of surgery, radiotherapy and chemotherapy and surgery and radiotherapy for sarcomas and surgery, followed by surgery and radiotherapy for melanomas. Although malignant tumors of non-epithelial origin are rare in the head and neck region, they can show great morbidity and mortality and it is necessary the better understanding of their clinicalpatological aspects, in order to establish better treatment and life quality to these patients. / Tumores malignos de origem não epitelial são considerados raros na região de cabeça e pescoço e podem apresentar grande morbidade e mortalidade. Este estudo teve o objetivo de fazer um levantamento dos casos de sarcomas e melanomas em região de cabeça e pescoço no período de 1999 a 2008, em três centros especializados no Município de Fortaleza, Ceará. A coleta de dados foi feita com base nos livros de registros das cirurgias de cabeça e pescoço e dos prontuários dos centros avaliados. Foram observados 54 casos, sendo 36 sarcomas e 18 melanomas. Quanto à avaliação dos sarcomas, observamos que os indivíduos mais acometidos foram homens adultos, da raça parda, na faixa etária de 20 a 59 anos, com idade média de 39,7. A relação homem/mulher foi de 1,76:1. O tipo histológico mais prevalente foi o rabdomiossarcoma, e as localizações mais acometidas foram face e região cervical. Em relação aos melanomas, homens adultos também foram predominantes, na faixa etária de 20 a 59 anos, com idade média de 54,6. Verificou-se igual acometimento nas raças parda e branca, com 33,3%, cada uma. A relação homem/mulher foi de 1,25:1. O tipo histológico mais prevalente foi o melanoma de disseminação superficial, e a pele da face foi a localização mais frequente. Na avaliação da procedência, houve semelhança em ambas as doenças, sendo aproximadamente metade dos pacientes da capital e metade do interior do estado. Quanto ao acompanhamento, a maior parte da amostra foi de pacientes vivos sem evidência de doença na última consulta, correspondendo a 41,6% nos sarcomas e 44,5% entre os melanomas. A variação de terapia também foi observada em ambos os grupos, sendo os tipos mais comuns de tratamento a associação de cirurgia, radioterapia e quimioterapia e cirurgia e radioterapia para sarcomas, e cirurgia, seguida da associação de cirurgia e radioterapia para melanomas. Apesar de os tumores malignos de origem não epitelial em cabeça e pescoço serem lesões raras, eles apresentam grande morbidade e mortalidade e dessa forma, necessita-se de que seus aspectos clinicopatológicos sejam estudados e conhecidos, sempre com o objetivo de melhorar as formas de tratamento dessas lesões, garantindo assim maiores chances de cura e melhor qualidade de vida para os pacientes acometidos.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:06:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo534_1.pdf: 1768233 bytes, checksum: c3bc7c38070e35ddf182d668d24306ce (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Fungos podem infectar secundariamente carcinoma de cabeça e pescoço, diante da imunossupressão local e de tratamentos imunossupressores, tornando-se importante o diagnóstico micológico precoce. Este estudo objetivou detectar fungos em tumor de cabeça e pescoço. Foram submetidos à biópsia 83 pacientes, obtendo-se 88 amostras teciduais, as quais foram segmentadas para exame histopatológico e micológico. Para o exame direto fragmentos de tecido foram clarificados com solução aquosa de hidróxido de potássio a 20%, e para cultura fragmentos inoculados nos meios ágar infusão de cérebro e coração e ágar Sabouraud, adicionados de cloranfenicol e mantidos em duplicata a 30°C e 37°C respectivamente. Foram detectadas estruturas fúngicas ao exame direto em 14% (12) das amostras e isolados Candida albicans (quatro), C. tropicalis (uma), C. parapsilosis (quatro), C. guillermondii (duas) acometendo áreas de laringe, cavidade bucal, lábio e pele na região da cabeça e pescoço. Em paciente com tumor de lábio foi diagnosticado feohifomicose sendo observado ao exame direto micélio e esporos demáceos. No diagnóstico histológico foi confirmado que 67% dos pacientes apresentavam carcinoma de células escamosas. Na classificação dos tumores malignos 50% ocorreram no estádio I seguido de estádio II e IV. Em apenas um caso foi verificado tumor de língua benígno. Fungos ocorrem em tumores de cabeça e pescoço e devido à gravidade de seus danos torna-se indispensável o diagnóstico preciso e precoce

Made available in DSpace on 2018-08-01T23:26:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_9286_Dissertação Helenita Mameri.pdf: 1826115 bytes, checksum: 66558042e19caabceb00824ac84ab813 (MD5) Previous issue date: 2015-10-09 / A prevalência do câncer de cabeça e pescoço (cavidade bucal, faringe e laringe) tem aumentado no Brasil na última década, sendo o carcinoma de células escamosas o mais comum. Seu tratamento pode causar severas sequelas funcionais e estéticas, com um impacto significante na qualidade de vida e saúde psicológica desses pacientes. Objetivo: este trabalho buscou relacionar o estilo de vida de indivíduos com o desenvolvimento do carcinoma espinocelular (CEC) de cabeça e pescoço (cavidade bucal, faringe e laringe). Metodologia: um estudo retrospectivo com pacientes portadores do câncer. A pesquisa foi realizada em dois hospitais públicos de referência na cidade de Vitória, Espírito Santo, Brasil, no período de novembro de 2011 a novembro de 2013. Foram incluídos no estudo 97 pacientes portadores de CEC de cabeça e pescoço, e a amostragem foi selecionada por conveniência (51 em cavidade bucal e lábio, 24 em orofaringe, 3 em hipofaringe, 16 em laringe e 2 nasais). Os pacientes foram entrevistados quanto a dados sociodemográficos; hábitos de tabagismo e etilismo (no momento do diagnóstico e após seis meses); hábitos de higiene bucal e tratamento principal. A análise estatística foi descritiva, teste de Qui-quadrado e Exato de Fischer. Resultados: o desenvolvimento das neoplasias está associado a fatores de risco ambientais e de estilo de vida. Houve associação significativa entre o hábito de fumar e o estadiamento dos tumores (0,039) e com o tratamento principal (0,036). De um total de 97 pacientes, 34 vieram a óbito como causa o CEC de cabeça e pescoço (35,1%). Conclusão: Confirmando o tabagismo e o etilismo como fatores de risco para o CEC de cabeça e pescoço, compreendeu-se que quanto maior o tempo de exposição a esses riscos e sua quantidade habitual, há maior propensão ao desenvolvimento do carcinoma de cabeça e pescoço. Isso é importante também na medida em que os gastos com a saúde e no setor público tornam-se elevados. Então, mudanças de hábitos de vida como abstinência do fumo e do álcool são os melhores métodos de prevenção da doença, já que são os principais fatores de risco

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-01-25 / Objetivos: Classificar o grau de mucosite oral de acordo com os parâmetros internacionais do CTC em pacientes portadores de tumor de cabeça e pescoço submetidos a radioterapia e quimioterapia concomitantes, e caracterizar um perfil dos pacientes em nosso meio, verificando os hábitos dos indivíduos, características do tumor, protocolo de tratamento e a intensidade desta reação aguda. Métodos: Neste estudo foram avaliados 50 pacientes; sendo 45 do sexo masculino e 5 do sexo feminino; 39 da raça branca e 11 da raça negra; com a idade entre 43 e 72 anos. Em relação ao sítio primário, avaliou-se 32 pacientes com tumor em orofaringe, 10 em cavidade oral, 3 em laringe, 4 em hipofaringe e 1 em seio maxilar. Os pacientes foram submetidos a radioterapia em megavoltagem com doses entre 66 a 70Gy e quimioterapia com cisplatina concomitante. Do total, 26 pacientes foram submetidos previamente à cirurgia. Todos foram entrevistados pela enfermeira sobre dados pessoais e hábitos de vida antes do início da radioterapia e quimioterapia; a partir de então, uma vez por semana, foi avaliado o grau de mucosite até completar o tratamento.Resultados: Em relação ao grau de mucosite, 16% dos pacientes apresentaram grau III, 38% grau II, 30% grau I e 16% não apresentam alterações na mucosa. Quando relacionado o grau de mucosite com as características clínicas individuais dos pacientes, da doença e do tratamento, observou-se que 100% dos pacientes diabéticos tiveram o tratamento interrompido por causa da mucosite, o que permitiu verificar significância estatística.Conclusões: As características individuais dos pacientes, idade, sexo, raça, hipertensão e hábito de fumar e as características clínicas associadas à doença como sítio primário e estádio da doença não influenciaram na gravidade da mucosite. Os resultados mostraram que a presença de diabete foi fator significante para a gravidade da mucosite nos pacientes submetidos à radioterapia e quimioterapia concomitante. / Objectives: Classify the level of oral mucositis according to the international CTC parameters in head and neck tumor patients undergoing simultaneous radio and chemotherapy, and verify in our population whether or not the individual’s habits, tumor characteristics and treatment protocol have a role in the mucositis’ intensity. Methods: Fifty patients were enrolled, 45 male and 5 female; 39 white and 11afro-brazilians; 43 to 72 years old. Concerning to the primary tumor location, 32 patients were diagnosed with oropharynx tumor, 10 with oral cavity tumor, 3 with larynx tumor, 4 presented hipopharynx tumor and 1 with maxilla sinus tumor. Patients undergone megavoltage radiotherapy with doses in a range of 66 to 70Gy and an association of cisplatin and carboplatin chemotherapy concomitantly. Twenty six patients were submitted to previous surgery. All patients were interviewed by a nurse and asked about personal information and habits prior treatment. The level of mucositis was evaluated once a week until the end of the treatment. Results: 16% of patients presented mucositis grade III; 38% grade II; 30% grade I and 16% did not present any mucosa alteration. It was observed that 100% of the diabetic patients presented mucositis grade III. Conclusions: Patient’s characteristics such as age, gender, race, smoking habit and high blood pressure, and clinical characteristics such as primary tumor location and stage of disease did not influence the severity of mucositis. Data showed that diabetes influences significantly the severity of mucositis in head and neck tumor patients undergoing chemo and radiotherapy concomitant. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

SANTANA, Hildegardo Antônio Landim. Efeito de duas formulações de pilocarpina, solução para bochecho e sublingual, no tratamento da xerostomia induzida por radiação. 2009. 79 f. Dissertação (Mestrado em farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-04-04T12:29:50Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_halsantana.pdf: 1166961 bytes, checksum: b633e3d827fb187e11967b7bf3c0226a (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-04-04T12:38:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_halsantana.pdf: 1166961 bytes, checksum: b633e3d827fb187e11967b7bf3c0226a (MD5) / Made available in DSpace on 2012-04-04T12:38:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_halsantana.pdf: 1166961 bytes, checksum: b633e3d827fb187e11967b7bf3c0226a (MD5) Previous issue date: 2009 / A prospective and double-blind study was conducted to verify the effects of the use of pilocarpine in the treatment of xerostomy induced by irradiation in oncologic patients, testing two administration routes: sublingual and mouthful. The volunteers were randomly allocated in two groups: a group for use of mouthfuls and a group for use of sublingual solutions. Each group was subdivided, totaling four samples of results: two for sublingual solutions (placebo and pilocarpine) and two for mouthfuls (placebo and pilocarpine). The solutions were formulated in the same pilocarpine concentration to 4% and administered in the total dose of 15 mg a day, for three weeks. The total group was formed by forty (40) volunteers, of both sex, treated with head and neck radiation in CRIO (Oncologic Integrated Regional Center) .The final distribuition was ten (10) patients in each subgroup. There was not restriction to age or etnic group.The volunteers who had the salivary flow less or equal to 1mL/min were selected to the study. The sialometry was measured weekly and whrote down in an appropriated formulary (CRF). The was not quantitative increase of the salivary flow or significant statistic difference between the two tested solutions. Therefore the pilocarpine solution 4% administrated sublingual or mouthful, did not increase the salivary flow in patients with xerostomy induced by radiation. / Um estudo prospectivo e duplo-cego foi conduzido para verificar os efeitos do uso da pilocarpina no tratamento da xerostomia induzida por radiação em pacientes oncológicos, testando duas via de administração: sublingual e bochechos. Os voluntários foram randomicamente alocados em dois grupos: grupo para uso da solução sublingual e grupo para uso de bochechos. Cada grupo foi subdividido, totalizando quatro amostras de resultados: duas para solução sublingual (placebo e pilocarpina) e duas para bochechos (placebo e pilocarpina). As soluções foram formuladas na mesma concentração de pilocarpina a 4% e administradas na dose total de 15 mg por dia, durante três semanas. A amostra compreendeu quarenta voluntários, de ambos os sexos, que foram submetidos à radiação de cabeça e ou pescoço no serviço do CRIO (Centro Regional Integrado de Oncologia). Assim a distribuição foi de dez pacientes em cada grupo. Não houve restrições quanto à idade nem ao grupo étnico. Uma sialometria antes do estudo foi realizada em cada voluntário, sendo selecionados os pacientes com fluxo salivar menor ou igual a 1 mL/min. Os resultados da sialometria após uso das formulações foram realizados semanalmente e anotados no formulário de relato de caso (CRF). Não houve aumento quantitativo do fluxo salivar e nem diferença estatisticamente significante entre as formulações testadas. Portanto a solução de pilocarpina a 4%, administrada na forma de bochechos ou pela via sublingual, não aumentou o fluxo salivar nos pacientes com xerostomia induzida por radiação.

Carcinoma espinocelular de cabeca e pescoco (CECP) é uma das malignidades mais prevalentes e mortais mundialmente. Até o momento não existem biomarcadores confiáveis para prognóstico e decisão de terapia na oncologia de CECP. Ganhos cromossômicos do fator de transcrição SOX2 foram demonstrados em CECP; entretanto, o impacto da expressão de SOX2 em processos relevantes tumorais e evolução clínica permanecem incompreendidos. Expressão de SOX2 foi analisada em 22 linhagens celulares de CECP, com e sem ganho em 3q. O nível médio de expressão de SOX2 foi significativamente maior nas linhagens com ganho em 3q quando comparada às linhagens sem ganho em 3q (p = 0,0012). Neste trabalho, realizamos o perfil global de expressão genica das linhagens de CECP controle e após silenciamento de SOX2, especificamente carcinoma espinocelular de língua com amplificação de SOX2. Os resultados mostraram 749 genes afetados por SOX2 “knock down”, considerando o valor ajustado de p ≤ 0,05. 456 genes forma encontrados negativamente regulados enquanto que 293 genes foram positivamente regulados após o “knock down” de SOX2. O principal gene positivamente regulado foi vimentin e sua expressão inversa com SOX2 foi confirmado usando “quantitative real time polymerase chain reaction”. De fato, a imunofluorescência indicou expressão inversa de SOX2 e vimentin. A análise da “transcriptome data” usando o software “Ingenuity pathway analysis” revelou genes diferentemente expressos envolvidos nas funções de mobilidade celular e movimento celular. Alinhados com esses achados, as células silenciadas para SOX2 apresentaram maior migração quando comparadas aos controles em duas linhagens independentes de CECP, uma de língua e outra de hipofaringe, sugerindo um maior risco para recidiva e metástase de tumores com baixa ou nenhuma expressão de SOX2. Complementando esses resultados, as células negativas para SOX2 localizaram-se preferencialmente no “fronte de invasão”, enquanto que as células positivas para SOX2 estavam no centro das colônias celulares, sugerindo que o silenciamenteo de SOX2 pode ser necessário para o início da migração em células de CECP. Por outro lado, também encontramos uma diminuição na viabilidade celular após o “knock down” de SOX2, coerente com o papel de SOX2 como oncogene. De acordo, após indução de apoptose com doxorubicina, células de CECP silenciadas para SOX2 mostraram significativamente mais apoptose que as controles. Interessantemente, a via de apresentação de antígeno foi a mais afetada após o “knock down” de SOX2. Os genes envolvidos nessa via e afetados nos nossos resultados, principalmente genes HLA classe I, estava afetados negativamente, mostrando correlação positiva com expressão de SOX2. Estes achados sugerem um papel de SOX2 na resposta imunológica de CECP e podem indicar um enfoque promissor para o desenvolvimento de novas terapias para tumors de CECP com expressão de SOX2. Além do potencial de SOX2 como biomarcador para prognóstico de CECP, uma maior compreensão dos mecanismo moleculares subjacentes pode ajudar no estabelecimento de novas estratégias de terapia direcionada. / Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is one of the most prevalent and lethal human malignancies worldwide. To date there are no reliable biomarkers for prognosis or therapy decision making in HNSCC oncology. Recurrent copy number gain and overexpression of the transcription factor SOX2 has been shown in HNSCC; however, the impact of SOX2 expression on tumor relevant processes and clinical outcome remains largely elusive. Expression of SOX2 was assessed in 22 HNSCC cell lines with and without 3q gain. Mean expression level was significantly higher in cell lines with 3q gain as compared to cell lines without 3q gain (p = 0,0012). We performed global gene expression profiling of control and SOX2 silenced HNSCC cell lines, specifically tongue squamous cell carcinoma, with SOX2 gene amplification. Results showed 749 affected after SOX2 knock down, considering the adjusted p value ≤ 0,05. 456 genes were found to be down-regulated and 293 genes to be up-regulated after SOX2 knock down. The top up-regulated gene was vimentin and its inverse expression with SOX2 was confirmed by quantitative real time polymerase chain reaction. Indeed, immunofluorescence showed inverse expression of SOX2 and vimentin. Ingenuity pathway analysis of transcriptome data revealed an enrichment of differentially expressed genes with a functional annotation in cell mobility and cellular movement. In line with these findings, SOX2 silenced cells showed increased migration as compared to controls in two independent HNSCC cell lines, from tongue and hypopharynx, suggesting a higher risk for local recurrence and metastasis of tumors with low or no SOX2 expression. In addition, SOX2 negative cells were preferentially localized in the “invasion front” whereas SOX2 positive cells were seen in the center of the cell colonies, suggesting that silencing SOX2 could be a necessary step to initiate migration in HNSCC cells. On the other hand we also found that cell survival decreased after SOX2 knock down coherently with SOX2 role as an oncogene. Also, after apoptosis induction with doxorubicin, HNSCC SOX2 silenced cells had significantly more apoptosis than control. Interestingly, Antigen Presentation Pathway was the main affected pathway after the knock down of SOX2. The genes involved in this pathway that were found affected in our trancriptome data were mainly HLA class I, and they were all down-regulated after SOX2 knock down, showing a positive correlation with SOX2. This finding suggests a role of the transcription factor SOX2 in the underlying immune response of HNSCC and could indicate a promising approach for new therapies development for SOX2 expressing tumors. In addition to the potential of SOX2 as prognostic biomarker, a better understanding of the underlying molecular mechanisms could help to establish new strategies for targeted therapy.

Submitted by Maykon Nascimento (maykon.albani@hotmail.com) on 2016-04-11T20:28:41Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao Final Quezia Anders.pdf: 644683 bytes, checksum: 1bfa19d42dd062b28b6e8bd77174f34f (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barros (patricia.barros@ufes.br) on 2016-05-17T15:56:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao Final Quezia Anders.pdf: 644683 bytes, checksum: 1bfa19d42dd062b28b6e8bd77174f34f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-17T15:56:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao Final Quezia Anders.pdf: 644683 bytes, checksum: 1bfa19d42dd062b28b6e8bd77174f34f (MD5) / CAPES / A enzima Metiltetrahidrofolato redutase (MTHFR), responsável pela liberação da forma ativa de folato no organismo, pode ter sua eficiência reduzida mediante a presença dos polimorfismos MTHFR C677T e A1298C. Considerando que o folato participa de vias metabólicas como a síntese de nucleotídeos e metilação de biomoléculas, o estudo desses polimorfismos torna-se relevante na associação de dados prognósticos em pacientes com carcinoma epidermoide oral, de orofaringe e de laringe tratados ou não com radioterapia. Objetivou-se estudar os polimorfismos C677T (rs1801133) e A1298C (rs1801131) do gene MTHFR como possíveis marcadores de radiossensibilidade tumoral em pacientes com carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço. A casuística foi composta por 306 pacientes avaliados segundo aos dados clinicopatológicos, recidiva local, óbito, sobrevida doença específica, de acordo com a modalidade terapêutica utilizada para cada um desses casos. Para análise dos polimorfismos utilizou-se a técnica PCR-RFLP. As curvas de sobrevidas foram avaliadas segundo o modelo Kaplan-Meier, e sua significância confirmada pelo valor de p de Wilcoxcon, sendo a margem de erro estipulado menor que 5%. Dentre as características prognósticas, as associações de recidiva local, óbito e sobrevida livre de doença local não apresentaram resultados estatisticamente significativos para ambos polimorfismos em nenhum sítio anatômico analisado. Entretanto, os pacientes com carcinoma epidermoide de laringe tratados com radioterapia, apresentaram dados significantes quando associados ao polimorfismo MTHFR C677T. Esta associação demonstrou que a presença de pelo menos um alelo T, ou seja, a troca de um aminoácido alanina por uma valina na enzima MTHFR, diminui em até três vezes a chance de o paciente vir a óbito precocemente. Conclui-se assim, que o polimorfismo MTHFR C677T pode ser um importante biomarcador para avaliação prognóstica de pacientes com carcinoma epidermoide de laringe tratados com radioterapia. / The enzyme methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR), responsible for the biological release of folate’s active form, may have reduced activity when polymorphic variants C677T and A1298C are present. Considering that folate participates in metabolic pathways that lead to nucleotide synthesis and methylation, these polymorphisms are relevant for the prognostic association with oral, oropharynx and larynx squamous cell carcinoma treated with radiotherapy or not. This study analysed polymorphisms C677T (rs1801133) and A1298C (rs1801131) as putative markers of tumor radiosensitivity. Our sample was made of 306 patients evaluated according to clinicopathological data, local disease relapse, death, disease specific survival, in relation to therapeutic option used in each case. Polymorphism were detected by PCR-RFLP. Survival curves were analysed according to the Kaplan-Meier model and its significance confirmed by the p of Wilcoxcon, being the error margin set to less than 5%. Associations between polymorphisms and local disease relapse, death and disease-free survival were not statistically significant. In contrast, MTHFR C677T patients with larynx SCC treated with radiotherapy showed that when at least T allele is present, there is a 3x decrease in the chance of early death. Therefore, this polymorphism may be an important biomarker for the prognostic evalution of larynx SCC patients treated with radiotherapy.

Carcinoma espinocelular de cabeca e pescoco (CECP) é uma das malignidades mais prevalentes e mortais mundialmente. Até o momento não existem biomarcadores confiáveis para prognóstico e decisão de terapia na oncologia de CECP. Ganhos cromossômicos do fator de transcrição SOX2 foram demonstrados em CECP; entretanto, o impacto da expressão de SOX2 em processos relevantes tumorais e evolução clínica permanecem incompreendidos. Expressão de SOX2 foi analisada em 22 linhagens celulares de CECP, com e sem ganho em 3q. O nível médio de expressão de SOX2 foi significativamente maior nas linhagens com ganho em 3q quando comparada às linhagens sem ganho em 3q (p = 0,0012). Neste trabalho, realizamos o perfil global de expressão genica das linhagens de CECP controle e após silenciamento de SOX2, especificamente carcinoma espinocelular de língua com amplificação de SOX2. Os resultados mostraram 749 genes afetados por SOX2 “knock down”, considerando o valor ajustado de p ≤ 0,05. 456 genes forma encontrados negativamente regulados enquanto que 293 genes foram positivamente regulados após o “knock down” de SOX2. O principal gene positivamente regulado foi vimentin e sua expressão inversa com SOX2 foi confirmado usando “quantitative real time polymerase chain reaction”. De fato, a imunofluorescência indicou expressão inversa de SOX2 e vimentin. A análise da “transcriptome data” usando o software “Ingenuity pathway analysis” revelou genes diferentemente expressos envolvidos nas funções de mobilidade celular e movimento celular. Alinhados com esses achados, as células silenciadas para SOX2 apresentaram maior migração quando comparadas aos controles em duas linhagens independentes de CECP, uma de língua e outra de hipofaringe, sugerindo um maior risco para recidiva e metástase de tumores com baixa ou nenhuma expressão de SOX2. Complementando esses resultados, as células negativas para SOX2 localizaram-se preferencialmente no “fronte de invasão”, enquanto que as células positivas para SOX2 estavam no centro das colônias celulares, sugerindo que o silenciamenteo de SOX2 pode ser necessário para o início da migração em células de CECP. Por outro lado, também encontramos uma diminuição na viabilidade celular após o “knock down” de SOX2, coerente com o papel de SOX2 como oncogene. De acordo, após indução de apoptose com doxorubicina, células de CECP silenciadas para SOX2 mostraram significativamente mais apoptose que as controles. Interessantemente, a via de apresentação de antígeno foi a mais afetada após o “knock down” de SOX2. Os genes envolvidos nessa via e afetados nos nossos resultados, principalmente genes HLA classe I, estava afetados negativamente, mostrando correlação positiva com expressão de SOX2. Estes achados sugerem um papel de SOX2 na resposta imunológica de CECP e podem indicar um enfoque promissor para o desenvolvimento de novas terapias para tumors de CECP com expressão de SOX2. Além do potencial de SOX2 como biomarcador para prognóstico de CECP, uma maior compreensão dos mecanismo moleculares subjacentes pode ajudar no estabelecimento de novas estratégias de terapia direcionada. / Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is one of the most prevalent and lethal human malignancies worldwide. To date there are no reliable biomarkers for prognosis or therapy decision making in HNSCC oncology. Recurrent copy number gain and overexpression of the transcription factor SOX2 has been shown in HNSCC; however, the impact of SOX2 expression on tumor relevant processes and clinical outcome remains largely elusive. Expression of SOX2 was assessed in 22 HNSCC cell lines with and without 3q gain. Mean expression level was significantly higher in cell lines with 3q gain as compared to cell lines without 3q gain (p = 0,0012). We performed global gene expression profiling of control and SOX2 silenced HNSCC cell lines, specifically tongue squamous cell carcinoma, with SOX2 gene amplification. Results showed 749 affected after SOX2 knock down, considering the adjusted p value ≤ 0,05. 456 genes were found to be down-regulated and 293 genes to be up-regulated after SOX2 knock down. The top up-regulated gene was vimentin and its inverse expression with SOX2 was confirmed by quantitative real time polymerase chain reaction. Indeed, immunofluorescence showed inverse expression of SOX2 and vimentin. Ingenuity pathway analysis of transcriptome data revealed an enrichment of differentially expressed genes with a functional annotation in cell mobility and cellular movement. In line with these findings, SOX2 silenced cells showed increased migration as compared to controls in two independent HNSCC cell lines, from tongue and hypopharynx, suggesting a higher risk for local recurrence and metastasis of tumors with low or no SOX2 expression. In addition, SOX2 negative cells were preferentially localized in the “invasion front” whereas SOX2 positive cells were seen in the center of the cell colonies, suggesting that silencing SOX2 could be a necessary step to initiate migration in HNSCC cells. On the other hand we also found that cell survival decreased after SOX2 knock down coherently with SOX2 role as an oncogene. Also, after apoptosis induction with doxorubicin, HNSCC SOX2 silenced cells had significantly more apoptosis than control. Interestingly, Antigen Presentation Pathway was the main affected pathway after the knock down of SOX2. The genes involved in this pathway that were found affected in our trancriptome data were mainly HLA class I, and they were all down-regulated after SOX2 knock down, showing a positive correlation with SOX2. This finding suggests a role of the transcription factor SOX2 in the underlying immune response of HNSCC and could indicate a promising approach for new therapies development for SOX2 expressing tumors. In addition to the potential of SOX2 as prognostic biomarker, a better understanding of the underlying molecular mechanisms could help to establish new strategies for targeted therapy.

Carcinoma espinocelular de cabeca e pescoco (CECP) é uma das malignidades mais prevalentes e mortais mundialmente. Até o momento não existem biomarcadores confiáveis para prognóstico e decisão de terapia na oncologia de CECP. Ganhos cromossômicos do fator de transcrição SOX2 foram demonstrados em CECP; entretanto, o impacto da expressão de SOX2 em processos relevantes tumorais e evolução clínica permanecem incompreendidos. Expressão de SOX2 foi analisada em 22 linhagens celulares de CECP, com e sem ganho em 3q. O nível médio de expressão de SOX2 foi significativamente maior nas linhagens com ganho em 3q quando comparada às linhagens sem ganho em 3q (p = 0,0012). Neste trabalho, realizamos o perfil global de expressão genica das linhagens de CECP controle e após silenciamento de SOX2, especificamente carcinoma espinocelular de língua com amplificação de SOX2. Os resultados mostraram 749 genes afetados por SOX2 “knock down”, considerando o valor ajustado de p ≤ 0,05. 456 genes forma encontrados negativamente regulados enquanto que 293 genes foram positivamente regulados após o “knock down” de SOX2. O principal gene positivamente regulado foi vimentin e sua expressão inversa com SOX2 foi confirmado usando “quantitative real time polymerase chain reaction”. De fato, a imunofluorescência indicou expressão inversa de SOX2 e vimentin. A análise da “transcriptome data” usando o software “Ingenuity pathway analysis” revelou genes diferentemente expressos envolvidos nas funções de mobilidade celular e movimento celular. Alinhados com esses achados, as células silenciadas para SOX2 apresentaram maior migração quando comparadas aos controles em duas linhagens independentes de CECP, uma de língua e outra de hipofaringe, sugerindo um maior risco para recidiva e metástase de tumores com baixa ou nenhuma expressão de SOX2. Complementando esses resultados, as células negativas para SOX2 localizaram-se preferencialmente no “fronte de invasão”, enquanto que as células positivas para SOX2 estavam no centro das colônias celulares, sugerindo que o silenciamenteo de SOX2 pode ser necessário para o início da migração em células de CECP. Por outro lado, também encontramos uma diminuição na viabilidade celular após o “knock down” de SOX2, coerente com o papel de SOX2 como oncogene. De acordo, após indução de apoptose com doxorubicina, células de CECP silenciadas para SOX2 mostraram significativamente mais apoptose que as controles. Interessantemente, a via de apresentação de antígeno foi a mais afetada após o “knock down” de SOX2. Os genes envolvidos nessa via e afetados nos nossos resultados, principalmente genes HLA classe I, estava afetados negativamente, mostrando correlação positiva com expressão de SOX2. Estes achados sugerem um papel de SOX2 na resposta imunológica de CECP e podem indicar um enfoque promissor para o desenvolvimento de novas terapias para tumors de CECP com expressão de SOX2. Além do potencial de SOX2 como biomarcador para prognóstico de CECP, uma maior compreensão dos mecanismo moleculares subjacentes pode ajudar no estabelecimento de novas estratégias de terapia direcionada. / Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is one of the most prevalent and lethal human malignancies worldwide. To date there are no reliable biomarkers for prognosis or therapy decision making in HNSCC oncology. Recurrent copy number gain and overexpression of the transcription factor SOX2 has been shown in HNSCC; however, the impact of SOX2 expression on tumor relevant processes and clinical outcome remains largely elusive. Expression of SOX2 was assessed in 22 HNSCC cell lines with and without 3q gain. Mean expression level was significantly higher in cell lines with 3q gain as compared to cell lines without 3q gain (p = 0,0012). We performed global gene expression profiling of control and SOX2 silenced HNSCC cell lines, specifically tongue squamous cell carcinoma, with SOX2 gene amplification. Results showed 749 affected after SOX2 knock down, considering the adjusted p value ≤ 0,05. 456 genes were found to be down-regulated and 293 genes to be up-regulated after SOX2 knock down. The top up-regulated gene was vimentin and its inverse expression with SOX2 was confirmed by quantitative real time polymerase chain reaction. Indeed, immunofluorescence showed inverse expression of SOX2 and vimentin. Ingenuity pathway analysis of transcriptome data revealed an enrichment of differentially expressed genes with a functional annotation in cell mobility and cellular movement. In line with these findings, SOX2 silenced cells showed increased migration as compared to controls in two independent HNSCC cell lines, from tongue and hypopharynx, suggesting a higher risk for local recurrence and metastasis of tumors with low or no SOX2 expression. In addition, SOX2 negative cells were preferentially localized in the “invasion front” whereas SOX2 positive cells were seen in the center of the cell colonies, suggesting that silencing SOX2 could be a necessary step to initiate migration in HNSCC cells. On the other hand we also found that cell survival decreased after SOX2 knock down coherently with SOX2 role as an oncogene. Also, after apoptosis induction with doxorubicin, HNSCC SOX2 silenced cells had significantly more apoptosis than control. Interestingly, Antigen Presentation Pathway was the main affected pathway after the knock down of SOX2. The genes involved in this pathway that were found affected in our trancriptome data were mainly HLA class I, and they were all down-regulated after SOX2 knock down, showing a positive correlation with SOX2. This finding suggests a role of the transcription factor SOX2 in the underlying immune response of HNSCC and could indicate a promising approach for new therapies development for SOX2 expressing tumors. In addition to the potential of SOX2 as prognostic biomarker, a better understanding of the underlying molecular mechanisms could help to establish new strategies for targeted therapy.

Made available in DSpace on 2018-08-01T20:28:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_10964_Dissertação_AllinyBastos.pdf: 1478449 bytes, checksum: c80553159f9c8d359035662e8cb6ce77 (MD5) Previous issue date: 2017-02-23 / O carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço (CECP) apresenta alta taxa de mortalidade e morbidade de indivíduos em todo o mundo. Apesar de diversos estudos apresentarem possíveis biomarcadores (BM) para o CECP, não há um BM específico estabelecido para esta doença. O objetivo deste trabalho foi avaliar o papel do VEGF- C, COX-2 e IL-17A como possíveis BM do CECP, uma vez que sua sobrexpressão tem sido relacionada com o pior prognóstico da doença. Foi realizado um estudo clínico transversal aprovado pelo Comitê de Ética CEP/UFES n° 99.242/2012. Dados clínicos-patológicos e amostras biológicas de 124 pacientes com CECP e 29 indivíduos saudáveis foram coletados. A detecção da expressão do mRNA de VEGF-C e COX-2 foi realizada por ensaio de qPCR em amostras de tumor e tecido normal. A avaliação da expressão proteica de VEGF-C e COX-2 foi realizada em soro de pacientes com CECP e controles por western blotting. O nível de IL-17A (pg/ml) foi mensurado por citometria de fluxo. A análise estatística dos dados mostrou aumento da expressão relativa do mRNA de VEGF-C em tecido tumoral foi observada em pacientes com metástase em linfonodos (p= 0,027), em relação ao grupo sem envolvimento linfonodal (0,043) e as amostras de tecido normal (0,031); Alteração da expressão proteica de VEGF-C em soro de pacientes com CECP em estágio avançado da doença (III/IV) (p=0,01) foi observado em comparação com grupo em estadiamento inicial (I/II) (p= 0,03) e controle (p= 0,003). COX-2 não apresentou diferença significante em nenhum dos parâmetros e tipos de amostras biológicas analisadas. O nível de IL-17A mostrou-se elevado nas amostras de soro de pacientes com CECP (p=0,04), no estadiamento incial da doença (I/II) (p= 0,03), em tabagistas (p= 0,04) e nos indivíduos sem metástase em linfonodos regionais quando comparados ao grupo controle (p= 0,04). VEGF-C e IL-17A se mostraram como potenciais BM do CECP em amostras de soro, sendo uma forma menos invasiva e mais viável para avaliação do estado do paciente, enquanto que para COX-2 são necessárias novas abordagens para avaliar seu papel no CECP. Palavras-chave: Carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço; biomarcadores; VEGF- C; COX-2; IL-17A.