Borrelia burgdorferi sensu lato (s.l.) and tick-borne encephalitis (TBE) are two of the most common tick-borne diseases in Sweden. Varicella-zoster-virus (VZV) is a contagious, airborne herpesvirus with nearly 100% prevalence in individuals over 30 years old. At the Laboratorymedicine, County Hospital Ryhov, Jönköping, IgG-antibody analysis against B. burgdorferi s.l., TBE and VZV is performed on serum. The aim of the study was to compare ethylenediaminetetraacetic-acid-plasma and lithium-heparin-plasma with serum for thesea nalyses. The goal was to investigate whether it was possible to switch the sample material from serum to plasma for these analyses. Samples from 500 blood donors were collected for analysis in serum, ethylenediaminetetraacetic-acid-plasma and lithium-heparin-plasma. The qualitative data from the study indicated that there was no statistically significant difference in the interpretations (positive and negative) between the sample materials. The quantitative analysis of antibody levels showed a statistically significant difference between the sample materials. Due to the study´s limited sample size, no general conclusions could be drawn about whether plasma could replace serum. Further studies on the subject could provide increased understanding of the relationship between serum and plasma for analysis of Borrelia, TBE and VZV and how results are affected in the different sample materials. / Borrelia burgdorferi sensu lato (s.l.) och tick-borne encefalit (TBE) är två av de vanligaste fästingöverförda sjukdomarna i Sverige. Varicella-zoster-virus (VZV) är ett smittsamt, luftburet herpesvirus med nära 100% prevalens hos personer över 30 år. På Laboratoriemedicin, Länssjukhuset Ryhov, Jönköping utförs analys av IgG-antikroppar mot B. burgdorferi s.l. TBE och VZV på serum. Syftet med studien var att jämföra etylendiamintetraättiksyra-plasma och litiumheparinplasma mot serum för dessa analyser. Målet var att undersöka om det var möjligt att byta provmaterial från serum till plasma för nämnda analyser. Prover från 500 blodgivare samlades in för analys i serum, etylendiamintetraättiksyra- och litiumheparin-plasma. Resultatet från studiens kvalitativa data indikerade att ingen statistisk signifikant skillnad förelåg vad det gäller tolkningarna (positiv och negativ) mellan provmaterialen. Kvantitativa analysen av antikroppsnivåerna visade en statistisk signifikant skillnad mellan provmaterialen. På grund av studiens begränsadeprovstorlek kunde inga generella slutsatser dras kring huruvida plasma kunde ersätta serum. Vidare studier kring ämnet kan ge ökad förståelse kring sambandet mellan serum och plasma för analys av Borrelia, TBE och VZV samt hur resultaten påverkas i de olika provmaterialen.

Thyronamine (TAM) sind eine neue Molekülklasse, die endokrinologische und metabolische Prozesse miteinander vereinen. Der biologisch aktive Metabolit 3-Iod-L-Thyronamin (3-T1AM) wird durch eine kombinierte Deiodierung und Decarboxylierung von Schilddrüsenhormonen (TH) gebildet. Existierende Methoden zum Nachweis und zur Quantifizierung von 3-T1AM im menschlichen Serum sind immer noch umstritten. Auch die an der Biosynthese vermutlich beteiligte TH-Decarboxylase konnte noch nicht identifiziert werden. Für die Identifizierung und Quantifizierung von TH und TAM Profilen wurde die Flüssigchromatographie-Tandem-Massenspektrometrie (LC-MS/MS) verwendet. In der bisherigen präanalytischen Aufarbeitung liefern weder Flüssig-Flüssig- noch Festphasenextraktionen reproduzierbare Ergebnisse des 3-T1AM-Gehalts im Serum. Mit der Entwicklung eines spezifischen Extraktionsverfahrens und nachfolgender Detektion mittels LC-MS/MS gelang der gleichzeitige Nachweis der häufigsten TH im humanen Serum. Parallel dazu wurden monoklonale Antikörper gegen 3-T1AM entwickelt, auf deren Basis ein quantitativer 3-T1AM Chemilumineszenz-Immunoassay entstand. Ergebnisse aus klinischen Kollektiven zeigen, dass 3-T1AM im Serum im nM Konzentrationsbereich vorkommt und dass 3-T1AM bei Patienten außerhalb der Schilddrüse produziert wird. Viele Forscher gehen davon aus, dass die aromatische L-Aminosäure Decarboxylase (AADC) die Synthese von TAM über Decarboxylierung von TH katalysiert. Diese Hypothese wurde durch Inkubation von rekombinanter humaner AADC mit TH getestet. In keinem der Experimente konnte AADC die Decarboxylierung von TH katalysieren. Zusammenfassend ist die Bestimmung von 3-T1AM im Serum mittels LC-MS/MS aufgrund der nicht reproduzierbaren präanalytischen Probenaufbereitung problematisch. In dieser Arbeit wird der erste MAb-basierte 3-T1AM assay vorgestellt, der 3-T1AM zuverlässig in humanem Serum quantifiziert. Die AADC ist wahrscheinlich nicht an der Biosynthese von TAM beteiligt. / Thyronamines (TAM) are a new class of molecules linking endocrinology and metabolism. Combined deiodination and decarboxylation of thyroid hormones (TH) generates a biologically active ‘cooling’ metabolite, 3-iodo-L-thyronamine (3-T1AM).. It remains controversial, which methods are able or not to reliably detect 3-T1AM in human serum, and the presumed TH decarboxylase is still elusive. Liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) was used for the simultane-ous identification and quantification of TH and TAM profiles in biological samples. Several preanalytical methods were tested for complete extraction of 3-T1AM in human serum. Thus far, neither liquid-liquid nor solid-phase extraction methods allowed reproducible extraction of 3-T1AM from human serum samples in the preanalytical sample workup. Nevertheless, a rapid and sensitive extraction procedure was developed for detection of the major TH by LC-MS/MS in a single human serum sample. In parallel, monoclonal antibodies (MAb) targeting 3-T1AM were developed and characterized, and a highly specific quantitative 3-T1AM MAb-based chemiluminescence immunoassay was developed. Studies in clinical cohorts provide evidence that 3-T1AM is present in human serum in the nM concentration range and that 3-T1AM is produced extrathyroidally. Many researchers have reasoned that the aromatic L-amino acid decarboxylase (AADC) mediates TAM synthesis via decarboxylation of TH. This hypothesis was tested by incubating recombinant human AADC with several TH. In all tested conditions, AADC failed to catalyze the decarboxylation of TH. These in vitro observations are supported by the finding that 3-T1AM is also present in plasma samples of patients with AADC deficiency. In summary, 3-T1AM detection in serum using LC-MS/MS encounters preanalytical problems. The first MAb-based 3-T1AM CLIA is presented, which reliably quantifies 3-T1AM in human serum. AADC is likely not involved in TAM biosynthesis.