O tema da dissertação é a gestão da tecnologia nas indústrias de primeira e segunda geração do Pólo Petroquímico do Sul. Foram analisadas sete empresas, relatando-se o processo de aprendizagem tecnológica, a estrutura de PO e a vinculação entre P&D e estratégia. A aprendizagem tecnológica resultou no domínio da tecnologia de produção. Ao longo das etapas de projeto, montagem e operação, as empresas procuraram dominar o processo, diminuir os custos e aumentar a produtividade. Como resultado dessa preocupação com a absorção de conhecimentos e com a introdução de inovaçoes, cada empresa estruturou um setor de P&D que coordena, de forma sistemática, o processo de inovação e de formação de uma crescente capacitação técnica. À tecnologia, apesar de ser considerada um recurso estratégico, não possui um papel pró-ativo na formulação do planejamento global. As estratégias tecnológicas adotadas pelas empresas colocam-nas como seguidoras das grandes empresas transnacionais. Ao mesmo tempo, aumentando a flexibilidade de produção, as empresas procuram novas oportunidades de negócios pela ocupação de nichos específicos de mercado e pelo lançamento de novos produtos. O reforço das atividades de P&D para o domínio do know-why, numa estratégia tecnológica ofensiva, poderá trazer, no futuro, vantagens competitivas às empresas do Pólo Petroquímico do Sul. / The subject of this dissertation is the management of technology in the firms located in the Petrochemical Complex of Southern Brazil. Seven firms were analysed. The process of technological learning, the R&D structure and the links between technology and strategy were described. The technological learning resulted in the control of the production technology. During the phases of project, construction and operation of the plants, the firms tried to control the process, reduce costs and increase productivity. As a result of this concern with the acquisition of technology, each fira created a R&D department that coordinates, in a systematic way, the innovation process and the formation of a growing technical capability. In spite of being considered a strategic resource, technology does not have a pro-active role in the overall business strategy. The technological strategies adopted by the firms place them as followers of the international firas. At the same time, with the increase of flexibility, the firms try to search for new business opportunities through the occupation of market niches. The strengthening of the R&D activities in order to dominate the knowwhy, in an offensive technological strategy, might bring, in the future, competitive advantages to the firms of the Petrochemical Complex of Southern Brazil.

A Fundação Estadual de Amparo à Pesquisa do Rio Grande do Sul (FAPERGS) é o órgão do governo responsável pelo financiamento de projetos de pesquisa científica e tecnológica e está buscando justificar perante a sociedade estes investimentos, apresentando seus resultados e obtendo informações para auxiliar na orientação de políticas públicas de Ciência e Tecnologia (C&T). A presente dissertação visa a propor um grupo de indicadores que permita identificar os resultados de pesquisas e que auxilie às Fundações de Amparo à Pesquisa, em especial à FAPERGS, na composição de seu sistema de avaliação institucional. Para tanto, foram estudados sete projetos cujos resultados visam à melhoria e preservação do meio ambiente e verificados os resultados das pesquisas e seus impactos de inovação, sociais e de meio ambiente. O quadro de indicadores proposto, foi testado nos projetos e julgado por juízes, segundo critérios de validade, confiança, viabilidade, mensurabilidade, abrangência e relevância. Como conclusão, mostrou-se adequado para a avaliação dos casos considerados e suscetível de aprimoramento, a partir do estudo de um número maior e de diferentes tipos de projetos financiados por instituições de fomento à pesquisa.

Made available in DSpace on 2009-11-18T19:01:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ACF2E.pdf: 2045098 bytes, checksum: a1e368a6b5649db9d994df61ada06d85 (MD5) Previous issue date: 2007 / This dissertation aims at examining empirical evidences obtained in the light of taxonomies and strategies for measuring firms technological capabilities and innovation in the context of developing countries, motivated by the fact that debates and studies directed to innovation has been intensified, for the last thirty years, by the recognition of its vital and growing importance to the technological, economic, competitive and industrial development of firms and countries. Two main tendencies can be identified on this debate. At one side, it¿s the literature related to the developed countries logic, whose companies are, in majority, positioned at the technological frontier, characterized by the domain of innovative advanced capabilities, directed to its sustaining, deepening and renewal. At the other side, there are the perspectives directed to the developing countries reality, where there is a prevalence of companies with deficiency of resources, still in process of accumulating basic and intermediate technological capabilities, with characteristics and technological development trajectories distinct or even reverse from those of developing countries. From this last tradition of studies, the measuring approaches based in C&T indicators and in types and levels of technological capabilities stand out. The first offers a macro level, aggregated perspective, through the analysis of a representative sample of firms, seeking to the generation of internationally comparable data, without addressing the intraorganizational specificities and nuances of the paths of technological accumulation developed by the firms, using, mostly, R&D statistics, patents, individual qualifications, indicators that carry their own limitations. On the other hand, studies that examine types and levels of technological capabilities are scarce, usually directed to a small sample of firms and/or industrial sectors. Therefore, in the light of the focus and potentialities of each of the perspectives, this scenario exposes a lack of studies that examine, in a parallel and complementary way, both types of strategies, seeking to offer more realistic, consistent and concrete information about the technological reality of developing countries. In order to close this gap, this dissertation examines (i) strategies of innovation measurement in the contexts of developing countries based on traditional approaches and C&T indicators, represented by four innovation surveys - ECIB, PINTEC, PAEP and EAI, and, (ii) from the perspective of technological capabilities as an intrinsic resource of the firm, the development of which occurs in a cumulative way and based on learning, presents and extracts generalizations of empirical applications of a metric that identifies types and levels of technological capabilities, through a dynamic and intra-firm perspective. The exam of the empirical evidences of the two approaches showed what each one of the metrics are capable to offer and the way they can contribute to the generation of information that reflect the technological development of specific industrial sectors in developing countries. In spite of the fact that the focus, objective, perspective, inclusion, scope and lens used are substantially distinct, generating, on a side, an aggregated view, and of other, an intra-sector, intra-organizational and specific view, the results suggest that the use of one doesn't implicate discarding or abdicating the other. On the contrary, using both in a complementary way means the generation of more complete, rich and relevant evidences and analysis that offer a realistic notion of the industrial development and contribute in a more direct way to the design of corporate strategies and government policies, including those directed to the macro level aspects just as those more specific and focused, designed to increment and foment firms in-house innovative efforts. / Esta dissertação tem como objetivo principal examinar evidências empíricas obtidas à luz de taxonomias e estratégias de mensuração de capacidades tecnológicas e inovação em empresas no contexto de países em desenvolvimento, motivada pelo fato de que vêm se intensificando, ao longo dos últimos trinta anos, debates e estudos voltados para a questão da inovação, tendo em vista o reconhecimento de sua importância vital e crescente para os desempenhos tecnológico, econômico, competitivo e industrial de empresas e países. Duas tendências principais podem ser identificadas neste debate. De um lado, está a literatura relacionada à lógica de países desenvolvidos, cujas empresas encontram-se, em sua maioria, posicionadas na fronteira tecnológica, com o domínio de capacidades inovativas avançadas, voltadas para seu sustento, aprofundamento e renovação. De outro lado, estão as perspectivas voltadas para a realidade de países em desenvolvimento, onde predominam empresas com deficiência de recursos, ainda preocupadas com o acúmulo de capacidades tecnológicas básicas e intermediárias, com características e trajetórias de desenvolvimento tecnológico distintas e até inversas daquelas de países desenvolvidos. Desta última tradição de estudos, destacam-se as abordagens de mensuração à base de indicadores de C&T e de tipos e níveis de capacidades tecnológicas. A primeira fornece uma perspectiva de nível macro, agregada, pela análise de uma amostra representativa de empresas, visando à geração de dados comparáveis internacionalmente, sem, contudo, adentrar nas especificidades intra-organizacionais e nas nuances das trajetórias de acumulação tecnológica traçadas pelas empresas, utilizando, muitas vezes, estatísticas de P&D, patentes, qualificações individuais, indicadores estes que carregam suas limitações. Por outro lado, estudos que examinam os tipos e níveis de capacidades tecnológicas são escassos, normalmente voltados para uma pequena amostra de empresas e/ou setores. Portanto, diante do foco e das potencialidades de cada uma das perspectivas, este cenário expõe uma carência de estudos que examinem, de forma paralela e complementar, ambos tipos de estratégias, visando o fornecimento de informações mais realistas, coerentes e concretas sobre a realidade tecnológica de países em desenvolvimento. A fim de cobrir esta lacuna, esta dissertação examina (i) estratégias de mensuração da inovação em contextos de países em desenvolvimento à base de abordagens tradicionais e indicadores de C&T, representados por quatro levantamentos de inovação ¿ ECIB, PINTEC, PAEP e EAI, e, (ii) a partir da perspectiva de capacidade tecnológica como um recurso intrínseco à empresa, cujo desenvolvimento se dá de maneira cumulativa e baseada em aprendizagem, apresenta e extrai generalizações de seis aplicações empíricas de uma métrica que identifica tipos e níveis de capacidades tecnológicas, por meio de uma perspectiva dinâmica de nível intra empresarial. O exame de aplicações empíricas das duas abordagens expôs o que cada uma das métricas é capaz de oferecer e até onde podem contribuir para a geração de informações que reflitam o desenvolvimento tecnológico em setores industriais específicos em países em desenvolvimento. Não obstante o foco, objetivo, perspectiva, abrangência, escopo e lente empregada sejam substancialmente distintos, gerando, de um lado, uma visão agregada, e de outro, uma visão intra-setorial, intra-empresarial e específica, os resultados sugerem que a utilização de uma não implica prescindir ou abdicar da outra. Pelo contrário, o uso de ambas de forma complementar significa a geração de evidências e análises mais completas, ricas e relevantes que forneçam uma noção realista do desenvolvimento industrial e contribuam mais diretamente para a elaboração de estratégias empresariais e políticas governamentais, tanto as de nível macro quanto as mais específicas e focadas, voltadas para o fomento e incremento dos esforços inovadores internos das empresas.

Made available in DSpace on 2009-11-18T18:56:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1997 / Este trabalho tem por objetivo examinar o sistema gerencial empregado na Missão Espacial Completa Brasileira-MECB e se, de alguma maneira, contribuiu para a consecução de seus objetivos. É feito um levantamento da política espacial brasileira e estabelecida a posição da Missão nesse contexto. São apresentados modelos gerenciais utilizados em outros países e comparados com o caso brasileiro. O trabalho conclui que existem sistemas gerenciais implantados nas organizações que desenvolvem os projetos do programa, entretanto, inexiste um sistema efetivo de gerenciamento do programa. / This work has the main purpose to examine in what extent the management model used for the Brazilian Space Mission actually contibuted for the achievement of the Mission itself. A survey about the Brazilian Space Policy was carried out, and from its results, it was possible to frame the Mission within this 'scenario'. Management models used in other countries are presented and compared to the Brazilian one. The work concludes that, although the agencies (Research Centers) engaged in the program have their own management models, the Mission itself has no effective management.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-03-27T12:43:27Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1600870 bytes, checksum: d1d085af0c399f1631c6ef709f67801a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-27T12:43:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1600870 bytes, checksum: d1d085af0c399f1631c6ef709f67801a (MD5) Previous issue date: 2016-11-22 / O presente trabalho teve por objetivo desenvolver métodos para a aplicação do controle estatístico de processos na indústria de alimentos. Considerou-se a necessidade de se desenvolver uma abordagem fundamentada na análise de risco, para que esses sistemas de controle possam atender aos critérios de segurança frequentemente impostos às variáveis de processo dessas indústrias. Procedimentos inovadores para o controle estatístico de processos em batelada, que considera um tempo de segurança na avaliação do risco de falha do processo, e para o controle de processos contínuos, que considera o controle em dois estágios, foram desenvolvidos e avaliados por meio de simulações de Monte Carlo. Os resultados sugerem que os procedimentos propostos podem ser aplicados no controle estatístico de processos da indústria de alimentos, e associados ao sistema de gerenciamento de riscos ao permitirem a comunicação efetiva dos riscos de falha associados ao sistema de controle. Os procedimentos de simulação foram adaptados para o desenvolvimento de um método de ensino do controle estatístico de processos assistido por um laboratório virtual. O método de ensino resultou em uma melhoria significativa na aprendizagem e na relação afetiva dos estudantes com o processo de ensino e aprendizagem. / The aim of this study was to develop methods to integrate statistical process control into risk management practices in food industries. In order to comply with safety criteria regularly imposed to food industries process control, a risk based approach was used to develop procedures for the design of statistical controls charts. Innovative procedures are proposed for the control of batch- wise and continuous processes, and its effectiveness was evaluated by Monte Carlo Simulations. The simulation results suggest that the methods proposed are adequate to food processes conditions and to be associated with food safety management systems on providing effective fail risk estimations of the control system. These procedures were adapted to develop a teaching method, assisted by a set of computer simulation activities. This method was evaluated and resulted in a significant improvement on learning and student affective perception of the teaching-learning process.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-03-28T13:58:36Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1220110 bytes, checksum: 803118ec7eccfad2cba1645f25679903 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-28T13:58:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1220110 bytes, checksum: 803118ec7eccfad2cba1645f25679903 (MD5) Previous issue date: 2016-12-19 / A carne de frango consiste em uma matriz ideal para a multiplicação de micro- organismos, e, portanto, é associada a numerosas infecções em humanos. Entre as bactérias que mais geram infecções intestinais, a partir do consumo de produtos avícolas, encontra-se a espécie Campylobacter jejuni. O uso indiscriminado de antibióticos na produção animal, pode contribuir na seleção de bactérias resistentes, que podem ser disseminadas durante a produção ou processamento dos alimentos. Desta forma, são necessárias novas alternativas para o controle desse patógeno, como a utilização de bacteriófagos. O objetivo deste trabalho foi isolar, caracterizar e avaliar o efeito de um coquetel de bacteriófagos de forma individual ou associado ao antibiótico enrofloxacina, no controle de C. jejuni, em frangos de corte. Foram isolados seis bacteriófagos (BC2, BC7, BC10, BC14, BC18 e BC19) a partir de fezes de frango coletadas em duas granjas avícolas na região de Viçosa, no Estado de Minas Gerais. Os bacteriófagos foram avaliados quanto à especificidade frente a diferentes cepas bacterianas. Cinco bacteriófagos foram específicos para C. jejuni, e um (bacteriófago BC14) além de apresentar ação lítico nas cepas de C. jejuni, apresentou atividade lítica frente a Salmonella Typhimuium (ATCC 14028) e Escherichia coli (CDC0111ab). A caracterização morfológica de dois bacteriófagos (BC7 e BC14) por meio de Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET), evidenciou que os bacteriófagos apresentam cabeça icosáedrica e cauda de tamanho médio, indicando que provavelmente eles são vírus da ordem Caudovirales, família Myoviridae, e subfamília Eucampyvirinae. O coquetel de bacteriófagos foi afetado maiormente quando exposto a pH 2,5 (redução de 6,90) ciclos logarítmicos, e aos sais biliares nas concentrações de (0,3 e 1,0) %, com redução de (0,37 e 0,51) ciclos logarítmicos, respectivamente. Portanto, os animais devem ser previamente tratados com um antiácido como CaCO 3 , a fim de manter a viabilidade dos bacteriófagos no trato gastrointestinal das aves. A sinergia entre os bacteriófagos e a enrofloxacina, levou a redução de 1,08 ciclos logarítmicos de C. jejuni (B12313), e 1,48 ciclos logarítmicos de C. jejuni (IOC/ATCC 33560) nas fezes dos frangos após cinco dias de tratamento. No conteúdo cecal, a redução de C. jejuni (B12313) com tratamento de coquetel de bacteriófagos foi de 2,58 ciclos logarítmicos, e o tratamento com o antibiótico foi de 1,67 ciclos logarítmicos. Nos frangos infectados com C. jejuni (IOC/ATCC 33560), a redução foi de 2,42 ciclos logarítmicos com o uso de coquetel de bacteriófagos, e de 2,51 ciclos logarítmicos com o antibiótico enrofloxacina. Os bacteriófagos são apresentados como uma ferramenta útil na redução do patógeno C. jejuni, antes e após o abate. Mais investigações devem ser feitas com outros antibióticos, com o objetivo de aumentar o conhecimento de sinergia entre bacteriófagos e antibióticos como terapêutico dentro da granja. Em conteúdo cecal, as análises indicaram atuação mais eficiente do coquetel de bacteriófagos isoladamente. Isso indica que o tratamento com fagos seria eficiente no controle da contaminação da carne durante o abate. / Poultry meat, consist of an ideal matrix for the multiplication of microorganisms and thus is a source of numerous infections in humans. Among the bacteria, which generates more intestinal infection from the consumption of poultry products, is the species Campylobacter jejuni. The indiscriminate use of antibiotics in animal production may contribute to the selection of resistant bacteria, which may be disseminated during food production or processing. Therefore, new alternatives are needed to control this pathogen, such as the use of bacteriophages. The objective of this study was to isolate, characterize and evaluate the effect of a cocktail of bacteriophages individually or associated with the antibiotic enrofloxacin, in the control of C. jejuni, in broilers. Six bacteriophages were isolated (BC2, BC7, BC10, BC14, BC18 and BC19) from chicken feces collected from two poultry farms in the region of Viçosa, in the State of Minas Gerais. The bacteriophages were evaluated for specificity against different bacterial strains. The bacteriophage BC14 besides presenting lytic power over the strains of C. jejuni presented lithic activity against Salmonella Typhimuium (ATCC 14028) and Escherichia coli (CDC0111ab). The morphological characterization of two bacteriophages (BC7 e BC14) by transmission electron microscopy (TEM) showed that bacteriophages had icosahedral head and medium-sized tail indicating that they are probably viruses of the order Caudovirales order and Myoviridae family. The bacteriophage cocktail was mostly affected when exposed to pH 2.5 (reduction of 6.90) log 10 units and bile salt in the concentrations of (0.3 and 1.0) %, with a reduction of (0.37 and 0.51) log 10 units respectively. Therefore, animals should be pretreated with an antacid such as CaCO 3 , in order to maintain the viability of bacteriophages in the gastrointestinal tract of birds. A synergy was observed between bacteriophage and enrofloxacin with a reduction of 1,08 log 10 units of C. jejuni (B12313) and 1.48 log 10 units of C. jejuni (IOC/ATCC 33560) in the feces of the chickens after five days of treatment. In the cecal content, the reduction of C. jejuni (B12313) with treatment of bacteriophage cocktail was 2.58 log 10 units, and treatment with the antibiotic was 1.67 log 10 units. In chickens infected with C. jejuni (IOC / ATCC 33560), the reduction was 2.42 log 10 units with the use of bacteriophage cocktail, and 2.51 log 10 units with the antibiotic enrofloxacin. Bacteriophages are presented as a useful tool in the reduction of the C. jejuni pathogen, before and after slaughter. Further investigations should be made with other antibiotics, with the aim of increasing the knowledge of synergy between bacteriophages and antibiotics as a therapeutic process within the farm. In cecal content, the analyzes indicated a more efficient performance of the bacteriophage cocktail alone. This indicates that phage treatment would be effective in controlling meat contamination during slaughter.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-03-31T16:23:50Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1093826 bytes, checksum: e4d82c39648cf8e6fb2d08b321516454 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-31T16:23:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1093826 bytes, checksum: e4d82c39648cf8e6fb2d08b321516454 (MD5) Previous issue date: 2017-02-17 / As bactérias psicrotróficas contaminantes do leite produzem proteases termo- resistentes que hidrolisam as caseínas do leite, resultando em perda de qualidade de leite e rendimento de produtos lácteos. Estudos envolvendo a caracterização dessas enzimas e o conhecimento das condições que influenciam sua produção e atividade são essenciais para a prevenção destes problemas. Neste trabalho, uma protease extracelular produzida pela cepa Pseudomonas fluorescens 07A foi purificada para estudos visando o entendimento de sua atividade e produção em diferentes condições. A enzima é uma metaloprotease inibida por Cu 2+ , Ni 2+ , Zn 2+ , Hg 2+ , Fe 2+ e Mg 2+ , mas induzida por Mn 2+ e possui massa molar de 49.486 kDa. O seqüenciamento da enzima por espectrometria de massa permitiu identificar o gene que codifica esta protease extracelular no genoma da cepa P. fluorescens 07A. A enzima possui 477 aminoácidos e domínios altamente conservados de ligação a Ca 2+ e Zn 2+ , indicando que Ca 2+ , o principal íon no leite, é também um co-fator dessa enzima. Sua atividade é máxima a 37 oC e pH 7,5, mas ela mantém mais de 40% de atividade quando submetida a 100 oC por 5 minutos em meio ideal e apenas de 14 a 30% quando submetida a tratamentos térmicos mais brandos, podendo causar problemas significativos nas condições normalmente utilizadas para o processamento e armazenamento de leite e produtos lácteos. Foi observada baixa expressão relativa da protease após 12 h de incubação a 25 oC, quando a bactéria encontra-se na fase logarítmica de crescimento, comparado com as temperaturas de refrigeração de 4 e 10 oC, quando a bactéria está ainda em fase lag. A produção da protease aumentou significativamente (P <0.05) em 24 h a 25 oC e permaneceu constante por até 48 h, intervalo em que a bactéria permaneceu em fase estacionária, indicando que a enzima pode ser produzida como uma estratégia adaptativa da bactéria. As frações de caseína de leite desnatado reconstituído foram completamente degradadas pela P. fluorescens 07A, pela protease purificada e pelo extrato da bactéria em até sete dias de incubação a 25 oC, e em menor extensão a 10 °C para a amostra incubada com a bactéria. O tratamento térmico de 90 oC por 5 minutos inativou a enzima purificada e inibiu sua atividade no extrato da bactéria. Este trabalho permitiu compreender as características bioquímicas e biológicas de uma protease extracelular da cepa P. fluorescens 07A, bem como as condições que influenciam a produção de proteases por esta bactéria em leite e sua atividade. Esses resultados podem auxiliar as indústrias de lácteos na busca por alternativas durante o processamento de produtos lácteos visando o controle de sua produção e atividade. / The milk contaminating psychrotrophic bacteria produce thermo resistant proteases that hydrolyze milk caseins, resulting in loss of milk quality and yield of dairy products. Studies involving the characterization of these enzymes and the knowledge about the conditions that influence their production and activity are essential for preventing these problems. This work aimed to understand the activity and production of the extracellular protease produced by Pseudomonas fluorescens 07A strain. This enzyme showed to be a metalloprotease inhibited by Cu 2+ , Ni 2+ , Zn 2+ , Hg 2+ , Fe 2+ and Mg 2+ , but induced by Mn 2+ and has a molar mass of 49,486 kDa. Partial sequencing of the proteic structure of this enzyme by mass spectrometry allowed the identification of the gene that encodes this protein in the genome of P. fluorescens 07A. The enzyme has 477 amino acids and highly conserved Ca 2+ and Zn 2+ -binding domains, indicating that Ca 2+ , the main ion in milk, is also a cofactor of this enzyme. The enzyme activity is maximum at 37 °C and pH 7.5, b ut it maintains more than 40% activity when subjected to 100 °C for 5 min in ideal medi um and only 14 to 30% in milder heat treatments, which may cause significant problems in the conditions normally used for the processing and storage of milk and dairy products. Low relative expression of protease was observed after 12 h of incubation at 25 °C, when the bacteria is in logarithmic growth phase, compared to its expression in refrigeration temperatures of 4 and 10 °C, when the bacteria is still in lag p hase. Protease production significantly increased (P <0.05) after 24 h at 25 °C and remained constant up to 48 h, when the bacteria remained at stationary phase, indicating that this enzyme could be produced as an adaptive strategy of the bacteria. The casein fractions of reconstituted skim milk were completely degraded as by P. fluorescens 07A, the purified protease or the bacterial extract within seven days of incubation at 25 °C, and to a lesser extent at 10 °C for milk ino culated with the bacteria. Heat treatment at 90 °C for 5 min inactivated the purified enzym e and inhibited its activity in the bacterial extract. This work allowed understanding the biochemical and biological characteristics of the extracellular protease produced of P. fluorescens 07A strain, as well as the conditions that influence its production and activity in milk. These results can help the dairy industry in the search for alternatives for the processing of dairy products to control production and activity of these proteases in milk.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-05-25T15:33:13Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1927044 bytes, checksum: 3a5d284047c496c1cb8d2477a22f00fe (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-25T15:33:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1927044 bytes, checksum: 3a5d284047c496c1cb8d2477a22f00fe (MD5) Previous issue date: 2017-03-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Micelas de caseína (MCs) são estruturas supramoleculares naturais presentes no leite. Seu diâmetro hidrodinâmico médio é de 200 nm e apresenta um núcleo hidrofóbico e uma membrana hidrofílica. MCs podem ser usadas como nanocarreadores naturais para liberar várias moléculas de interesse. Apesar das MCs serem bastante estáveis ao calor, sua estrutura é altamente sensível a mudanças iônicas especialmente em pH ácido. Um interessante método para estabilizar a estrutura da caseína consiste na sua reticulação pela união de moléculas de caseínas por meio de ligações covalentes. Neste contexto, o objetivo desse presente trabalho é investigar a estabilidade de MCs reticuladas sob diferentes pHs, agentes dissociadores, temperatura e condições alcóolicas. Assim, verificar o seu potencial como nanocarreador para aprisionar cianidina-3-O- glicosídeo (C3G), um antocianina presente em várias frutas brasileiras que apresenta diversificada propriedade bioativa em condições ácidas. Dois agentes reticuladores foram avaliados: genipina (GP) e transglutaminase (Tgase). Nós apresentamos um estudo comparativo da estabilidade entre MCs nativas e MCs reticuladas com GP ou Tgase em função do pH. A estabilidade em diferentes temperaturas e concentrações de etanol foram investigadas em uma faixa de pH entre 2,0 - 7,0 e os resultados apresentaram que a reação de reticulação estabilizou as MCs sob as condições testadas. No entanto, GP não é reconhecida como GRAS (segura para aplicação em alimentos) a pesquisas adicionais sobre sua toxicidade devem ser requeridas para implementar o seu uso como reticulador em alimentos. Por essa razão, na segunda parte do nosso trabalho, nós restringimos somente nas MCs reticuladas com Tgase com a perspectiva do seu uso em aplicações alimentícias. Primeiramente nós investigamos sobre a possibilidade de interação entre as moléculas de caseína e C3G em condições ácida (pH 2,0) e neutra (pH 7,0). Desta forma, o uso de MCs reticuladas por Tgase como nanocarreadores de C3Ga pH 2,0 e a pH 7,0 foram exploradas. A constante de ligação tão bem quanto as forças dirigentes a diferentes valores de pH foram determinadas por meio de análises termodinâmicas a diferentes temperaturas. A pH 2,0, a associação hidrofóbica dirigiu as interações entre a caseína e C3G, enquanto a pH 7,0, as interações eletrostáticas são as forças dirigentes dominantes. MCs reticulada com Tgase não afeta as interações entre C3G e as caseínas significando que elas podem ser usadas como eficientes nanocarreadores para antocianinas como a C3G em condições ácidas. / Casein micelles (CMs) are natural supramolecular assemblies present in milk. Their average hydrodynamic diameter is about 200nm and they present a hydrophobic core and a hydrophilic shell. CMscan be used as natural nanocarriers to deliver various moleculesof interest. Although CMs are quite stable against heat, their structure is highly sensitive to ionic changes, especially at acid pH. An interesting method to stabilize casein structure consists on itscross-linking, by joining casein molecules through covalent bonds.In this context, the objective of the present work is first to investigate the stability of cross-linked CMs under different pH, dissociating agents, temperature, and ethanol conditions. Then, verify their potential use as nanocarrier for entrapped cyanidine-3-O-glucoside (C3G), an anthocyanin present in several Brazilian’s fruits, that shows diverse bioactive properties in acid conditions. Two cross-linking agents were evaluated: genipin (GP) and transglutaminase (Tgase). We present a comparative study of the stability between native CMs and CMs cross-linked with GP or Tgase as a function of pH. Stabilities at different temperatures and ethanol concentrations were investigated in a pH range between 7.0 – 2.0 and results showed that the cross-linkingreaction stabilized CMs under the conditions tested.However, GP is not recognized as GRAS (safe for food applications) and further researches on toxicity would be required to implement their use as a food-grade cross-linker. For this reason, in the second part of our work, we focalize only on Tgase cross-linked CMswith perspectives of using it for food applications.Firstly we investigated on the possible interaction between casein molecules and C3G under acidic (pH 2.0) and neutral (pH 7.0) conditions. Then, the use of Tgasecross-linked CMs as nanocarrier for C3G at pH 2.0 and at pH 7.0 was explored. Binding constant as well as driving forces at different pH values were determined by thermodynamic analysis at different temperatures. At pH 2.0, hydrophobic association drive the interactions between caseins and C3G, whereas at pH 7.0, electrostatic interactions are the dominant binding forces. CMs Cross-linking by Tgase don’t affect the interactions between C3G and caseins meaning it can be used as efficient nanocarriers for anthocyanins such as C3G under acid conditions.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-19T18:53:01Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 654222 bytes, checksum: f55a0d2c139c61eb5e651483661a7bb4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-19T18:53:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 654222 bytes, checksum: f55a0d2c139c61eb5e651483661a7bb4 (MD5) Previous issue date: 2000-12-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A adesão de células de Staphylococcus aureus ATCC 25923 e Escherichia coli K12 foi avaliada em embalagens de polietileno de baixa densidade (PEBD), empregando-se as seguintes condições: área interna da embalagem de 630 cm 2 , temperaturas de adesão de 8 e 18oC, concentrações iniciais das suspensões bacterianas na ordem de 10 5 , 10 6 e 10 7 UFC/mL e tempo de incubação de 12 horas. Constataram-se diferenças significativas (p<0,05) na temperatura de adesão e também nas interações entre microrganismos e as contagens iniciais na suspensão bacteriana. A adesão na temperatura de 18oC foi superior àquela encontrada a 8oC. Também, houve tendência de maior adesão com aumento do número inicial de células na suspensão bacteriana. A eficiência bactericida da radiação ultravioleta (UV) na redução do número de E. coli e S. aureus aderidas ao PEBD foi avaliada a partir de concentrações iniciais na ordem de 10 5 a 10 7 , temperatura de adesão de 18oC por 12 horas e exposição entre 216 e 175 μWcm -2 . Constatou-se que a E. coli é mais resistente à exposição à radiação UV , apresentando valores D de 4,35 e 1,84 segundos, quando os logaritmos dos números iniciais de células são iguais a 5 e 6,8, respectivamente; para S. aureus, os valores de D obtidos foram de 1,96 e 1,18, respectivamente. No estudo da redução da intensidade versus eficiência bactericida da radiação UV, observou-se redução na intensidade de 288 para 78 μWcm -2 após 1.500 horas de uso, sendo esse declínio mais acentuado nas 100 horas iniciais. A eficiência da radiação UV sobre E. coli decresceu de 0,94 RD, após 70 h de uso da lâmpada, para 0,36 RD, após 1500 horas. Para S. aureus, esses valores variaram de 1,04 a 0,58 RD. Foram avaliadas amostras de PEBD de três bobinas, antes e após irradiação, com 137 μWcm -2. por dois segundos. Constatou-se contaminação inicial nas embalagens de 0,16 NMP/cm 2 de mesófilos aeróbios, que, após exposição à radiação, diminuiu para 0,014 NMP/cm 2 , sendo este valor abaixo da recomendação de 0,1 UFC/cm 2 . Por meio de microscopia de força atômica (MFA), observou-se a existência de irregularidades na superfície do PEBD, como fendas e elevações. Essas imperfeições podem alojar bactérias, facilitando o processo de adesão, além de reduzirem a eficiência da radiação UV, devido à presença de regiões que protegem as células do contato com a radiação. Os resultados mostram que a radiação UV apresenta ação sobre bactérias aderidas à superfície de PEBD, sendo uma técnica útil na redução da microbiota presente nessa embalagem. / The cell adhesion of Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Escherichia coli K12 was evaluated on polyethylene packages of low density (LDPE) with the following conditions: package internal area of 630 cm 2 , adhesion temperatures of 8 and 18oC, bacteria suspension initial concentration of 10 5 , 10 6 and 10 7 UFC/mL and incubation period of 12 hours. One has verified significant difference (p<0.05) on adhesion temperature, microorganisms interactions as wellas on initial counts in the bacteria suspension. The adhesion at 18oC was higher than the one found at 8oC. There was, also, a tendency to higher adhesion related to the increase on initial cell number of bacteria suspension. Ultraviolet radiation bactericide efficiency (UV) on reduction of E. coli and S. aureus number adhered to LDPE, was evaluated from initial concentrations of 10 5 to10 7 , adhesion temperature of 18oC for 12 hours and exposition between 216 and 175 μWcm -2 . It was verified that E. coli was more resistant to UV radiation exposition, showing D values of 4.35 and 1.84 seconds, when the initial logarithmic numbers of cells were 5.0 and 6.8, respectively. For S. aureus, the obtained D values were respectively 1.96 and 1.18. In the study of intensity reduction versus UV radiation bactericide efficiency, a reduction in intensity from 288 to 78 μWcm -2 was observed after 1500h of use, being this decrease higher in the 100 first hours. The UV radiation efficiency on E. coli decrease from 0.94 RD, after 70h of lamp use, to 0.36 RD after 1500h. For S. aureus these values varied from 1.04 to 0.58 RD. Samples of LDPE from three bobbins, before and after radiation, with 137 μWcm -2 in 2 seconds. The films were initially contamined wiht 0.16 NMP/cm 2 by aerobic mesophyles, which was reduced to 0.014 NMP/cm 2 after exposition to radiation, being this value below the recommended value of 0.1 UFC/cm 2 . The existence of irregularities on the LDPE surface, like slits and elevations, was observed by atomic power microscopy. These imperfections may lodge bacteria, turning to an easy process adhesion, further on to reduce the UV radiation efficiency due to the presence of regions that protect cells from radiation. The results showed that UV radiation presents efficiency against bacteria adhered to PELD surface, being a useful auxiliary technique on microbiologic control of these packages. / Dissertação importada do Alexandria

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-07T17:48:43Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 587612 bytes, checksum: 559af73c6466c747ea1f836f3b491147 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-07T17:48:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 587612 bytes, checksum: 559af73c6466c747ea1f836f3b491147 (MD5) Previous issue date: 2001-03-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Probióticos, na forma de produtos lácteos fermentados ou não, são conhecidos como alimentos funcionais e têm sido recomendados como adjunto dietético para indivíduos com hipercolesterolemia. Com o objetivo de avaliar seu efeito na modulação dos níveis de colesterol sérico e na taxa de translocação de Lactobacillus spp. para o baço, fígado, coração e rins, foi conduzido uma experimentação com duração de 56 dias, utilizando-se 170 ratos machos Wistar, com peso médio inicial de 250±32g, distribuídos em quatro tratamentos e alojados individualmente. Os grupos experimentais foram: Padrão; Controle; LDR e P. O grupo Padrão recebeu a dieta AIN-93G durante todo o período experimental. Os demais grupos receberam por 56 dias a mesma dieta acrescida de 1% de colesterol e 0,1% de ácido cólico. Do 15° ao 28° dia (após um período inicial de 14 dias de indução de hipercolesterolemia) o grupo LDR recebeu suplementação de 0,1 mL/dia/animal de leite desnatado reconstituído a 10% de sólidos não gordurosos e o grupo P recebeu 0,1 mL/dia/animal de probiótico na 10 forma de um concentrado de células contendo 10 UFC/mL de Lactobacillus acidophilus NCFM. Avaliou-se o colesterol total, LDL- colesterol e HDL-colesterol nos 28°, 42° e 56° dias de experimento (0, 14 e 28 dias após o término da administração do probiótico, respectivamente). Determinou-se também a taxa de translocação de Lactobacillus spp., nos mesmos tempos, no baço, fígado, coração e rins dos animais. O ganho de peso e a ingestão alimentar dos animais foram monitorados semanalmente, calculando -se assim, o coeficiente de eficiência alimentar (CEA). Não foi observada diferença significativa (P>0,05) entre os grupos, quanto ao consumo alimentar, ganho de peso e CEA aos 56 dias. O acréscimo dietético de 1% de colesterol cristalino e 0,1% de ácido cólico não promoveu hipercolesterolemia nos animais, evidenciado pela diferença não significativa (P>0,05) entre os grupos Padrão e Controle em relação aos níveis de colesterol total, LDL- colesterol e HDL-colesterol após 14 dias de dieta hipercolesterolêmica. No entanto, provocou aumento significativo do peso e alteração da coloração normal do fígado (de vermelho intenso para vermelho amarelado) devido ao acúmulo de gordura neste órgão, nos animais que receberam dieta rica em colesterol comparado ao grupo Padrão. O consumo de L. acidophilus pelos animais, nas concentrações indicadas, não alterou seus níveis séricos de colesterol e frações (P>0,05), pois estes se mantiveram normocolesterolêmicos. Constatou-se translocação de Lactobacillus spp. para o baço, fígado, coração e rins dos animais que receberam suplementação com L. acidophilus (grupo P). Nos órgãos dos animais dos grupos Padrão, Controle e LDR não foi observado crescimento nos tempos avaliados. Constatou-se diferença significativa (P<0,05) na contagem de células microbianas translocadas para o baço em comparação aos demais órgãos analisados. Entre o fígado e o coração não foi observada diferença significativa (P>0,05), mas ambos diferiram estatisticamente dos rins (P<0,05). As contagens, 2 2 em UFC/órgão, foram; 8,6 x 10 ; 4,8 x 10 ; 4,7 x 10 e 1,3 x 10 para o baço, fígado, coração e rins, respectivamente. Observou-se eliminação constante das células translocadas, após o término da administração do probiótico. Vinte e oito dias após o consumo do probiótico, de acordo com o modelo de regressão ajustado, a contagem de células viáveis indicou maior eliminação dos microrganismos translocados do baço (69,8%), seguido do coração (61,7%), fígado (57,0%) e rins (37,8%). O tempo para completa eliminação dos microrganismos translocados, de acordo com o modelo de regressão ajustado, permanecendo a tendência verificada no intervalo de tempo estudado (28 dias), corresponderia a 40, 45, 49 e 74 dias, para o baço, coração, fígado e rins, respectivamente. Sugere-se que, ao se desenvolver um probiótico, além da estirpe do microrganismo, do número de células e da freqüência de dosagem, devem ser definidas as taxas de translocação e de eliminação (“clearing”) destes microrganismos em modelos animais, uma vez que se desconhece como este processo poderá afetar o hospedeiro. / Probiotics, as milk fermented products or not, are known as functional foods and have been recommended as dietary adjunct for individuals with high serum cholesterol levels. To evaluate probiotics effects on the modulation of serum cholesterol and on translocation rate of Lactobacillus spp. for the spleen, liver, heart and kidneys, an experiment was carried out during 56 days, using 170 Wistar male rats, distributed in four treatments and individually housed, with initial average weight of 250±32g. The experimental groups were: Standard; Control; LDR and P. The Standard group received the AIN- 93G diet during the whole experimental period. The other groups received for 56 days the AIN -93G diet added of 1% of cholesterol and th th 0,1% of cholic acid. Of the 15th to the 28th day (after an initial period of 14 days of hipercolesterolemia induction) the LDR group received the supplement of 0,1 mL/day/animal of reconstituted skimmed milk at 10% of non fat solids and, the group P received 0,1 mL/day/animal of a 10 probiotic in the form of a concentrate of cells contends 10 UFC/mL of Lactobacillus acidophilus NCFM. Total cholesterol, high density lipoprotein (HDL) and low density lipoprotein (LDL) were evaluated th th th at 28th, 42th and 56th days of experiment (0, 14 and 28 days after the end of probiotic administration respectively). Translocation rate of Lactobacillus spp. was monitored at the same times, in spleen, liver, heart and kidney of all animals. The weight gain and alimentary ingestion were weekly verified, in order to calculate the coefficient of alimentary conversion (CEA). No significant differences (P>0,05) ware observed between groups, relative to alimentary consume, weight th increase and CEA at the 56th day. The dietary increment of 1% of crystalline cholesterol and 0,1% of cholic acid did not promote hipercholesterolemia in the animals, evidenced by the non significant difference (P>0,05), among the groups Standart and Control, of levels of total cholesterol, LDL-cholesterol and HDL-cholesterol levels after 14 days receiving hipercholesterolemic diet. However it provoked significant increase of the weight and alteration of normal coloration of liver (of red intense for red yellowish) due to fat accumulation in this organ, in the animals that received rich diet in cholesterol compared to the Standart group. Consumption of L. acidophilus, in the suitable concentrations, did not altered serum cholesterol levels and its fractions (P>0,05) of the animals, once they stayed normocholesterolemic. Translocation of Lactobacillus spp was verified at the spleen, liver, heart and kidneys of animals supplemented with L. acidophilus (group P). The evaluation of the organs from the Standard, Control and LDR groups did not indicate the presence of Lactobacillus. Significant difference was verified (P<0,05) in the translocated microbial cells count for the spleen in comparison to the other analyzed organs. Significant difference (P>0,05) was not observed between the liver and the heart translocated microbial cells count, but both differed statisticaly of the kidneys (P<0,05). The average translocation, expressed as CFU/organ, were 8,6 x 10 ; 4,8 x 10 2 ; 4,7 x 10 2 and 1,3 x 10 2 for spleen, liver, heart and kidney, respectively. A constant elimination of the translocated cells was observed after the end of the probiotic administration. The eliminated translocated cell numbers were constantly during the evaluation period. Twenty-eight days after probiotics consumption, according to the adjusted regression model, the viable cells count indicated larger elimination of translocated microrganismis from spleen (69,8%), heart (61,7%), liver (57,0%) and kidneys (37,8%). The time required for the complete elimination of translocated Lactobacillus spp., according to the adjusted regression model and supposing that the elimination of translocated cells by the organism stays constant, correspond to 40; 45; 49 and 74 days, respectively for spleen, heart, liver and kidneys. Translocation and elimination rate (“clearing”) of microrganisms in animal models are suggested as important parameters on the development of probiotic products. The dose frequency, number of viable cells and microorganism lineage must be analyzed and selection of strains that do not present translocation must be considered, since the implication of this process in the host is not known.