Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-03-23T16:00:00Z No. of bitstreams: 1 Waleria Guerreiro Lima.pdf: 1037853 bytes, checksum: 76b8dc4974744a728c0fae8cae99709c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-23T16:00:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Waleria Guerreiro Lima.pdf: 1037853 bytes, checksum: 76b8dc4974744a728c0fae8cae99709c (MD5) Previous issue date: 2007-02-27 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Colletotrichum gossypii South. var. cephalosporioides Costa is the causal agent of one of the most important cotton diseases, the ramulosis. The disease is characterized by necrotic lesions on leaves and petioles mainly on young leaves. As the disease progresses, shortening of the internódios, apical death and overbudding are also observed. The main way of fungal dissemination is through the seeds, but also able to be externally propagated, in the form of conidia, or internally, by dormant mycelia. The pathogen control has been achieved through the use of healthy seeds, use of resistant cultivars and chemical control. However, some of these control practices not only of limited efficiency, but also cause unwanted side in natural environments. The use of the biological activity of secondary compounds obtained from plant crude extracts and their essential oils can be an effective way to control plant diseases. Preliminary tests toevaluate the fungistatic and fungicidal effect of these products are essential for revealing new alternatives of control. The effect of different oil dosages (0, 500, 1000, 1500, 2000 and 2500 ppm) prepared from leaves of Hibiscus cannabinus, Cymbopogus nardus, Eucalptus citriodora, Pipper marginatum, Malpighia glabra, and Lippia gracillis were evaluated in the inhibition of C. gossypii var. cephalosporioides mycelia growth, conidia germination, and apressorium formation. The oils of Pipper marginatum, Lippia gracillis and Cymbopogus nardus presented the greatest mycelia growth inhibition effects. The oils of citronela, lípia, and eucalipto showed significant control when conidial germination and apressorium formation were analyzed. When the mycelia growth inhibition was evaluated, piper oil presented lower DL50, followed by the lípia oil. The best results in the inhibition of apressorium formation were presented bycitronela and eucalipto with lower DL50 in relation to other oils. The kenaf oil did notpresent any effect on the micelial growth, conidial germination and apressorium formation. In a second experiment it was evaluated the curative and preventive effect of citronela oil on the control of the cotton ramulosis based on epidemiological components. The Area Below the Curve of Disease Progress and Rate of Disease Progress, showed significant differences when compared with the control treatment. However, the parameter Index of Disease Final in the curative treatment did not differ significantly from control treatment. When the variables Area Below the Curve of Disease Progress, Index of Disease Final, and Rate of Disease Progress were analyzed, it was observed that the preventive treatments that used citronela oil and fungicide differed significantly from the control, showing that citronela oil had an excellent preventive effect on the cotton ramulosis under greenhouse conditions. / Colletotrichum gossypii South. var. cephalosporioides Costa é o agente causal de uma das mais importantes doenças do algodoeiro. Caracteriza-se pelo surgimento de manchas necróticas nas folhas e pecíolos, com predominância nas folhas mais jovens. Ao longo do tempo, também são observados encurtamento dos internódios, morte do broto apical e superbrotamento. A principal via de disseminação do fungo é a semente, podendo ser veiculado externamente, na forma de conídios, ou internamente, na forma de micélio dormente. O controle do patógeno tem sido feito através do uso de sementes sadias, cultivares resistentes e controle químico. Entretanto, em função da ineficácia desses métodos de controle e dos malefícios provocados pelo uso dos pesticidas na natureza, a exploração da atividade biológica de compostos secundários, presentes no extrato bruto ou óleos essenciais de plantas, pode constituir uma forma efetiva de controle de doenças em plantas cultivadas. Testes preliminares para avaliar o efeitofungistático e fungicida desses produtos são imprescindíveis para descobertas de novas alternativas de controle. Foram avaliados os efeitos de diferentes dosagens (0, 500, 1000, 1500, 2000 e 2500 ppm) dos óleos essenciais extraídos de folhas de kenaf (Hibiscus cannabinus), citronela (Cymbopogus nardus), eucalipto (Eucalptus citriodora), Pipper marginatum, acerola (Malpighia glabra), e lípia (Lippia gracillis) na inibição do crescimento micelial, germinação dos conídios e formação do apressório de C. gossypii var. cephalosporioides. Os óleos de piper, lípia e citronela foram os que apresentaram maior efeito na inibição do crescimento do fungo que o de acerola. Os óleos de eucalipto e acerola tiveram comportamento intermediário e semelhantes de inibição de crescimento, apesar do óleo de eucalipto ter apresentado um melhor controle do fungo. Em relação à germinação dos conídios e formação de apressórios, os óleos de citronela, lípia e eucalipto ocasionaram um significativo controle do fungo. Verificou-seque, para a inibição do crescimento micelial, o óleo de piper foi o que apresentou a menor DL50, seguido pelo óleo de lípia. Para a formação de apressórios, verificou-se que os valores das DL50 dos óleos de citronela, eucalipto foram os menores em relação aos outros óleos. O óleo de kenaf não apresentou nenhum efeito no crescimento micelial, germinação dos conídios e formação de apressórios. Em um segundo experimento, objetivou-se avaliar o efeito curativo e preventivo do óleo de citronela para controle da ramulose do algodoeiro com base em componentes epidemiológicos, contribuindo assim para redução dos níveis de poluição ambiental decorrentes do uso de agrotóxicos. No que diz respeito à Área Abaixo da Curva de Progresso das Doença (AACPD) e Taxa de Progresso da Doença (TPD), houve diferença significativa quando comparada ao tratamento testemunha. Entretanto, ao avaliar os parâmetros índice de Doença Final (IDF) sob o efeito do tratamento curativo, observa-se que o mesmo não diferiu significativamente da testemunha. Ao analisar as variáveis AACPD, IDF, PI e TPD, observou-se que os tratamentos preventivo do óleo de citronela e fungicida diferiram significativamente da testemunha, verificando assim, que o óleo de citronela apresentou um ótimo efeito preventivo da ramulose do algodoeiro sob condições de casa de vegetação.

Submitted by (ana.araujo@ufrpe.br) on 2017-02-07T18:23:56Z No. of bitstreams: 1 Fabiana Aparecida Cavalcante Silva.pdf: 934712 bytes, checksum: d4f03c8904e031e8ea5d8cd19ffcfece (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-07T18:23:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fabiana Aparecida Cavalcante Silva.pdf: 934712 bytes, checksum: d4f03c8904e031e8ea5d8cd19ffcfece (MD5) Previous issue date: 2008-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Cotton is a crop of considerable importance worldwide, the production of which is affected by diverse biotic and abiotic factors. Stress caused by insect attacks and phytopathogens stand out among the biotic factors, the control of which is significantly hindered due the variability of these organisms and their consequent capacity for adaptation. Fungi are the phytopathogens that most cause damage to cotton plants, especially Colletotrichum gossypii South var. cephalosporioides A.S. Costa, a ramulosis-causing disease characterized by dwarfism and an over-budding of the branches, affecting the development of the buds and number of bolls. The main form of dissemination is through contaminated seeds and the most effect method of control is by means of chemical fungicides or resistant varieties which are obtained after exhaustive tests conducted in fieldwork and greenhouses. The use of biochemical and molecular tools that assist in the identification of resistant genotypes in improvement programs is of considerable importance, as they offer reliability and reduce selection costs in the development process of new varieties. In the present study, a biochemical/molecular study was carried out on cotton varieties submitted toinfection with the ramulosis fungus with the aim of identifying markers associated to the resistance process. In the first assay, biochemical descriptors were assessed in four infected cotton varieties. The plants were inoculated 20 days after cultivation, receiving a fungal concentration of 1 x 106 conidias/mL. Evaluations occurred at 3, 15 and 30 days following inoculation. Proline, peroxidase and catalase levels were quite expressive in the resistant BRS Antares cultivar, exhibiting a rapid response at 3 days after inoculation. Proline and catalase levels are indicated as useful tools for the identification of ramulosis-resistant varieties in cotton crop selection studies. The second assay sought to identify differentially expressed transcripts in cotton plants submitted to infection with the ramulosis fungus. Two varieties with opposing traits regarding resistance to this disease were used: BRS Antares and CNPA Precoce I, respectively resistant and susceptible. Ten RAPD oligonucleotides were used in the RT-PCR reactions at an annealing temperature of 35 ºC. Following an analysis of the band patterns in the control and inoculated plants, 12 down-regulated transcripts, 13 overregulated transcripts and ten activated transcripts were identified. A band ofapproximately 200 bp, obtained with the V10 oligonucleotide, was sequenced and exhibited 86% homology with the GmChl 3 gene, which codifies for thechlorophyllase III enzyme in soybean. This enzyme has considerable importance for vegetal cells submitted to oxidative damage, as it reduces this damage and modulates different defense pathways. The data obtained in the present study are applicable to studies on cotton plant responses to pathogen attacks and offers relevant information for crop improvement programs. / O algodão é uma cultura de grande importância mundial cuja produção é afetada por diversos fatores bióticos e abióticos. Dentre os bióticos destacam-se os estresses provocados pelo ataque de insetos e fitopatógenos, cujo controle é bastante difícil devido à variabilidade destes organismos e,conseqüente, a capacidade adaptativa. Entre os fitopatógenos, os fungos são os que causam mais danos ao algodoeiro,destacando-se o Colletotrichum gossypii South var. cephalosporioides A.S. Costa, causador da ramulose, doença caracterizada pelo nanismo e super-brotamento dos ramos, que afeta o desenvolvimento das maçãs e o número de capulhos. A principal forma de disseminação é via sementes contaminadas e o modo de controle mais efetivo é por meio de fungicidas químicos ou de cultivares resistentes que são obtidas por meio de exaustivos testes conduzidos em campo e casa de vegetação. A utilização de ferramentas bioquímicas e moleculares que auxiliem na identificação de genótipos resistentes nos programas de melhoramento são de grande relevância uma vez que, além da confiabilidade, reduz os custos de seleção nos processos de desenvolvimento de novas cultivares. No presente trabalho procedeu-se a um estudo bioquímico e molecular em cultivares de algodão submetido à infecção com o fungo da ramulose, visando identificar marcadores associados ao processo de resistência. No primeiro ensaio, avaliaram-se descritores bioquímicos em quatro cultivares de algodão infectado com o fungo causador da ramulose. As plantas foram inoculadas aos 20 dias após o cultivo, recebendo uma concentração fúngica de 1 x 106 conídios/mL. As avaliações ocorreram aos 3, 15 e 30 dias após a inoculação. Observou-se que os teores de prolina, peroxidase e catalase foram bastante expressivos na cultivar resistente BRS Antares apresentando resposta rápida logo aos 3 dias após a inoculação. Os teores de prolina e catalase foram indicados como ferramentas úteis para identificação de cultivares resistentes a ramulose nos trabalhos de seleção na cultura do algodão. No segundo ensaio buscou-se identificar transcritos diferencialmente expressos em plantas de algodão submetidas a infecção com o fungo da ramulose. Duas cultivares antagônicas em relação à resistência a esta doença foram utilizadas, BRS Antares e CNPA Precoce I, respectivamente, resistente e susceptível. Dez oligonucleotídeos RAPD foram utilizados nas reações de RT-PCR a uma temperatura de anelamento de 35 ºC. Após análise dos padrões de banda nas plantas controle e inoculada foram identificados doze transcritos sub-regulados, treze super-regulados e dez ativados. Uma banda de aproximadamente 200 pb obtida com o oligonucleotídeo V10 na cultivar resistente foi sequenciada e a apresentou homologia de 86 % com o gene GmChl 3 que codifica para enzima clorofilase III em soja. Esta enzima apresenta grande importância para as células vegetais submetidas a danos oxidativos uma vez que reduz estes estragos além de modular diferentes vias de defesa. Os dados obtidos no presente trabalho são de grande aplicabilidade em estudos de resposta do algodão ao ataque de patógenos além de oferecer informações relevantes para os programas de melhoramento da cultura.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-03-14T13:55:45Z No. of bitstreams: 1 Kaliny Veiga Pessoa da Silva.pdf: 1645641 bytes, checksum: 7d934fe1a156047987054c35f1981b65 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-14T13:55:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kaliny Veiga Pessoa da Silva.pdf: 1645641 bytes, checksum: 7d934fe1a156047987054c35f1981b65 (MD5) Previous issue date: 2016-08-22 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Cotton stands out as a high value textile plant in the world market due to the quality of its fibers and the commercial derivatives that the plant produces. Ramulose is a disease that causes great damage to this crop, caused by the fungus Colletotrichum gossypii South var. cephalosporioides Costa, mainly affects young leaves, the most common symptoms being the darkening and necrosis of leaves and branches, which may compromise the whole development of the plant. Extracts and vegetable oils have been studied as an alternative to control pests and diseases such as ramulose in crops. These have as main constituents the secondary compounds, chemicals known as phytochemicals, terpenoids, alkaloids and glycosides. Among these the geraniol, monoterpene that stands out for its fungicidal property. Kenaf (Hibiscus cannabinus) belongs to the family Malvaceae and is rich in compounds known as polyphenols, alkaloids, tannins and essential oils, also being a promising source of fungicidal oil. This work aimed to analyze the effect of oils and extracts on the development of the fungus C. gossypii, which causes ramulose, by means of two researches: In the first one, we sought to prospect Geraniol synthase, the precursor enzyme of geraniol, in aromatic species, for means of molecular analyzes via PCR and qPCR, besides phytopathological tests, in order to evaluate the geraniol expression and the effectiveness of its extracts and vegetable oils in the prevention and control of ramulose; The second study evaluated the effect of Kenaf oil on the development of fungus C. gossypii under laboratory conditions. In order to carry out the first research eleven aromatic species were evaluated, among them M. pulegium, O. basilicum, O. majorana and R. officinalise, which presented satisfactory levels of expression of this enzyme in the molecular assays, being selected for bioassays in vivo against C. gossypii. O. basilicum, M. pulegium and O. majorana oils, at 2000 ppm concentration, were tested in vivo and their preventive and curative actions compared to commercial fungicide. There was effective control of the oils O. basilicum and M. pulegium under ambient conditions, and M. Polegium was distinguished with D.S.I. around 30%, lower value than that presented by the commercial fungicide (40%). These results indicate that the use of aromatic species can be an effective alternative for the treatment of ramulose, with the advantages of being a low cost method and not presenting risks of environmental contamination. In addition, the genetic characterization of aromatic species is an important source of information to expand the use of natural resources, allowing new materials that hold genes of interest to be found and serve as environmental conservation strategies. In the second study, phytopathological tests were performed on isolate 287 of C. gossypii on the effect of Kenaf oil at concentrations of 25, 50 and 75 μl / 1 ml. It was verified by regression analysis that there was no reduction in the mycelial growth of C. gossypii in the oil concentrations adopted in this work. The data presented by fungus growth, fungistatic effect and spore production did not reveal a statistical difference between the treatment with oil and control. Based on the composition of kenaf oil, rich in fungicidal ingredients, even this oil lacking control over C. gossypii in the present study, it is believed that in higher concentrations this oil may exert an effect on this pathogen. / O algodoeiro destaca-se como uma planta têxtil de alto valor no mercado mundial devido à qualidade de suas fibras e aos derivados comerciais que a planta produz. A ramulose é uma doença que causa grandes danos a esta cultura, causada pelo fungo Colletotrichum gossypii South var. cephalosporioides Costa, afeta principalmente folhas jovens, sendo os sintomas mais comuns o escurecimento e necrose das folhas e ramos, podendo comprometer todo o desenvolvimento da planta. Extratos e óleos vegetais vêm sendo estudados como alternativa para controle de pragas e doenças como a ramulose em lavouras. Estes têm como principais constituintes os compostos secundários, substâncias químicas conhecidas como fitoquímicos, terpenóides, alcalóides e glicosídeos. Dentre estes o geraniol, monoterpeno que destaca-se por sua propriedade fungicida. Já o Kenaf (Hibiscus cannabinus) pertence à família Malvaceae e é rica em compostos conhecidos como polifenóis, alcalóides, taninos e óleos essenciais, também sendo uma promissora fonte de óleo fungicida. Este trabalho buscou analisar o efeito de óleos e extratos sobre o desenvolvimento do fungo C. gossypii, causador da ramulose, por meio de duas pesquisas: Na primeira, buscou-se prospectar a Geraniol synthase, enzima precursora do geraniol, em espécies aromáticas, por meio de análises moleculares via PCR e qPCR, além de testes fitopatológicos, a fim de avaliar a expressão do geraniol e a eficácia de seus extratos e óleos vegetais na prevenção e no controle da ramulose; Na segunda pesquisa avaliou-se o efeito do óleo de Kenaf sobre o desenvolvimento do fungo C. gossypii em condições de laboratório. Para realização da primeira pesquisa onze espécies aromáticas foram avaliadas, entre elas M. pulegium, O. basilicum, O. majorana e R. officinalise, as quais apresentaram níveis satisfatório de expressão desta enzima nos ensaios moleculares, sendo selecionadas para bioensaios em in vivo contra C. gossypii. Os óleos de O. basilicum, M. pulegium e O. majorana, na concentração de 2000 ppm, foram testados in vivo e suas ações preventivas e curativas comparadas com fungicida comercial. Houve controle efetivo dos óleos O. basilicum e M. pulegium em condições ambiente, sendo que M. Polegium destacou-se com D.S.I. em torno de 30%, valor menor do que o apresentado pelo fungicida comercial (40%). Esses resultados denotam que o uso de espécies aromáticas pode se constituir numa alternativa eficaz para o tratamento da ramulose, com as vantagens de ser um método de baixo custo e de não fornecer riscos de contaminação ambiental. Além disso, a caracterização genética de espécies aromáticas é uma importante fonte de informações para ampliar a utilização dos recursos naturais possibilitando que novos materiais detentores de genes de interesse sejam encontrados e sirvam como estratégias de conservação ambiental. Na segunda pesquisa, testes fitopatológicos foram realizados no isolado 287, de C. gossypii, sobre o efeito do óleo de Kenaf em concentrações de 25, 50 e 75 μl/1ml. Verificou-se por análise de regressão que não houve redução no crescimento micelial de C. gossypii nas concentrações de óleo adotadas neste trabalho. Os dados apresentados pelo crescimento de fungos, efeito fungistático e produção de esporos não revelaram diferença estatística entre o tratamento com óleo e controle. Com base na composição do óleo de kenaf, rica em ingredientes fungicida, mesmo este óleo não apresentando controle sobre C. gossypii no presente estudo, acredita-se que em concentrações mais elevadas este óleo possa exercer efeito sobre este patógeno.