Made available in DSpace on 2014-08-20T14:30:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Fernanda_Valentini.pdf: 1829911 bytes, checksum: bf5dba534848b7d5aa2d2b2c757989ff (MD5) Previous issue date: 2012-05-04 / Opportunistic fungi are responsible for infectious diseases in oral cavity that rose in prevalence in the last years, especially in complete denture wearers. Thus, colonization and growth of Candida species and other microorganisms are of clinical importance. The aims of this study were (i) systematically review the literature to determine if there is a protocol of prevention or treatment of Candida colonization in denture liners and (ii) clinically assess how biofilm composition is affected by different materials, time and the presence of candidiasis in denture wearers. In vitro and in vivo studies were evaluated with regard to treatment and/or prevention of Candida colonization and biofilm formation in denture liners. Six databases were searched (Lilacs, Scopus, Pubmed / Medline, Scielo and Cochrane Database of Systematic Reviews) from 1950 to 2012 using the keywords denture liner , Candida , tissue conditioner , denture stomatitis and antifungal agents . For the in situ study, twenty-eight volunteers, half with candidiasis, half healthy but Candida carriers wearing complete dentures were selected to participate in this study. Biofilm formed on acrylic resin and temporary denture liners (silicone based and acrylic resin based) specimens mounted in the internal surface of the volunteers upper dentures were collected in two phases of 21 days. Specimens were randomly removed on days 7, 14 and 21. Representative samples of the specimens were analyzed by SEM in the various periods under evaluation. Colony forming units/mm2 of biofilm of mutans streptococci, lactobacilli, total microorganisms and Candida species were determined. Through the systematic review it was possible to observe that the incorporation of nystatin to prevent the disease and the immersion in sodium hypoclorite to disinfect denture liners was the most frequently found treatment. However, as the data was in general derived from in vitro studies, there is a high risk of bias. For the in situ study, non-albicans Candida species showed higher counts in the silicone-based denture liner in diseased patients (p=0,01). Patients with candidiasis showed higher counts of mutans streptococci after 7 days (p=0.0041), but this difference disappeared after 14-21 days of biofilm formation. Thus, silicone-based denture liners should be avoided in diseased patients, as they have shown 12 higher nonn-albicans Candida species, which are known to be more virulent and resistant to conventional therapies. / Os fungos oportunistas são responsáveis por doenças infecciosas na cavidade bucal que aumentaram em prevalência nos últimos anos, especialmente em usuários de prótese total. Assim, a colonização e o crescimento de espécies de Candida e outros microrganismos em próteses tem fundamental importância clínica. Este estudo teve por objetivo (i) fazer uma revisão sistemática para determinar se existe um protocolo de prevenção ou tratamento da colonização por Candida em reembasadores de prótese e (ii) avaliar clinicamente como a composição do biofilme é afetada por diferentes materiais, tempo e a presença ou não de candidíase, em usuários de prótese total. Estudos clínicos e in vitro foram avaliados quanto ao tratamento e / ou prevenção da colonização por Candida e formação de biofilme em reembasadores de prótese. Seis bases de dados eletrônicas foram pesquisadas (Lilacs, Scopus, Pubmed / Medline, Scielo e Cochrane Database of Systematic Reviews) de 1950 a 2012 usando as palavras-chaves denture liner , Candida , tissue conditioner , denture stomatitis e antifungal agents . Para o estudo in situ vinte e oito voluntários usuários de prótese total, quinze portadores de estomatite por dentadura, e doze pacientes com alguma espécie de Candida avaliados por screening inicial foram selecionados. Foi quantificada a formação de biofilme sobre espécimes de resina acrílica e reembasadores temporários (a base de resina acrílica ou silicone) inseridos na parte interna da prótese total superior em duas fases de 21 dias. Os espécimes foram removidos aleatoriamente no 7°, 14° e 21° dia. Amostras representativas foram analisadas em MEV nos diferentes períodos de avaliação. Unidades formadoras de colônia/mm2 de biofilme de estreptococos do grupo mutans, lactobacilos, microrganismos totais e espécies de Candida foram determinados. Através da revisão sistemática foi possível observar que a incorporação de nistatina para prevenir o aparecimento da doença e a imersão em hipoclorito de sódio para desinfectar reembasadores de tecidos são o tratamento mais frequentemente encontrado. No entanto, os dados encontrados foram quase que exclusivamente baseados em estudos in vitro, o que gera alto risco de viés. Para o estudo in situ, a contagem de Candida não-albicans para reembasadores a base de silicone foi maior 10 em pacientes com candidíase (p=0,01). Pacientes com candidíase apresentaram maiores contagens de estreptococos do grupo mutans após 7 dias (p=0,0041), mas essa diferença desapareceu após 14-21 dias de formação de biofilme. Com isso, reembasadores a base de silicone devem ser evitados em pacientes com candidíase já que estes materiais apresentaram aumento da contagem de espécies de Candida não-albicans, as quais são mais virulentas e resisitentes às terapias convencionais.

Resultados de pesquisas prévias tem encontrado potencial aumentado para a consolidação de enxertos ósseos mediante desmineralização do material enxertado e/ou das superfícies de consolidação. Entretanto há carência de embasamento apoiado em evidências biológicas do benefício de tal procedimento. Para testar esta hipótese, o tecido ósseo da calvária de cobaias (Cavia porcellus) foi exposto ao condicionamento por ácido cítrico durante 15, 30, 90 e 180 segundos (grupos teste). Quarenta e cinco discos ósseos de três milímetros de diâmetro foram removidos dos animais, dos quais 36 foram condicionados com ácido cítrico pH 1 a 50% e nove não receberam condicionamento (grupo controle). Sobre nove discos de cada grupo foram cultivados pré-osteoblastos MC3T3-E1 durante 24, 48 e 72 horas (três discos de cada grupo em cada tempo). Análises da morfologia celular, do número de células aderidas sobre as superfícies e da área de cobertura destas superfícies por préosteoblastos foram realizadas à microscopia eletrônica de varredura. Observou-se aumento do número de células aderidas às superfícies com o tempo, independentemente de haver condicionamento ou de seu tempo de aplicação. Entretanto, essa diferença só foi estatisticamente significante intragrupos (p<0,05) e quando comparados os períodos de 24 e 72 horas de incubação. A área de cobertura das superfícies por células aumentou significantemente com o tempo somente nos grupos teste, também entre os períodos de incubação de 24 e 72 horas (p<0,01). O grupo controle apresentou-se com 50% ou menos de área de cobertura superficial em relação aos demais. A duração de aplicação do ácido não interferiu significantemente nesse parâmetro de avaliação, mas nos grupos 15 e 30, a área de recobrimento ósseo mais do que triplicou às 72 horas em relação às 24 horas (p<0,01), com cerca de 70% das superfícies cobertas por células, contra 30% no grupo controle. Conclui-se que a desmineralização óssea nos tempos de condicionamento estudados propicia um substrato sobre o qual as células pré-osteoblásticas adquirem morfologia compatível com estágio de diferenciação mais avançado, promovendo maior cobertura de área, o que aumenta o potencial para deposição de novo osso sobre essas superfícies em comparação ao tecido não condicionado. / Results of previous research has found increased potential for the consolidation of bone grafts by demineralization of the graft material and / or areas of consolidation. However there is a lack of foundation supported by biological evidence of benefits from such procedures. To test this hypothesis, the bone tissue of the calvaria of guinea pigs (Cavia porcellus) were exposed to conditioning by citric acid for 15, 30, 90 and 180 seconds (test group). Forty-five bone disks measuring three millimeters in diameter were removed from the animals, of which 36 were conditioned with citric acid pH 1 to 50% and nine did not receive conditioning (control group). About nine disks in each group were pre-cultured with MC3T3- E1 osteoblasts for 24, 48 and 72 hours (three discs of each group at each time point). Analysis of cell morphology, number of cells attached on the surface and the coverage area of these surfaces by pre-osteoblasts were performed on scanning electron microscopy. There was na increase in the number of cells attached to surfaces over time, regardless of conditioning or application time. However, this difference was not statistically significant intra-group (p <0.05) when comparing the periods of 24 and 72 hours of incubation. The coverage area of the surfaces of cells increased significantly with time only in the test groups, also among the incubation periods of 24 and 72 hours (p <0.01). The control group presented with 50% or less of surface area coverage compared to the other. The duration of application of the acid did not affect significantly this parameter of evaluation, but in groups 15 and 30, the bonearea covered more than tripled from 24 to 72 hours (p <0.01), with about 70 % of the area covered by cells, versus 30% in the control group. It was concluded that bone demineralization in the studied conditioning times provides a substrate on which cells acquire pre-osteoblastic morphology compatible with more advanced stage of differentiation, promoting greater coverage area, which increases the potential for deposition of new bone on these surfaces compared to the tissue-air basis.

Resultados de pesquisas prévias tem encontrado potencial aumentado para a consolidação de enxertos ósseos mediante desmineralização do material enxertado e/ou das superfícies de consolidação. Entretanto há carência de embasamento apoiado em evidências biológicas do benefício de tal procedimento. Para testar esta hipótese, o tecido ósseo da calvária de cobaias (Cavia porcellus) foi exposto ao condicionamento por ácido cítrico durante 15, 30, 90 e 180 segundos (grupos teste). Quarenta e cinco discos ósseos de três milímetros de diâmetro foram removidos dos animais, dos quais 36 foram condicionados com ácido cítrico pH 1 a 50% e nove não receberam condicionamento (grupo controle). Sobre nove discos de cada grupo foram cultivados pré-osteoblastos MC3T3-E1 durante 24, 48 e 72 horas (três discos de cada grupo em cada tempo). Análises da morfologia celular, do número de células aderidas sobre as superfícies e da área de cobertura destas superfícies por préosteoblastos foram realizadas à microscopia eletrônica de varredura. Observou-se aumento do número de células aderidas às superfícies com o tempo, independentemente de haver condicionamento ou de seu tempo de aplicação. Entretanto, essa diferença só foi estatisticamente significante intragrupos (p<0,05) e quando comparados os períodos de 24 e 72 horas de incubação. A área de cobertura das superfícies por células aumentou significantemente com o tempo somente nos grupos teste, também entre os períodos de incubação de 24 e 72 horas (p<0,01). O grupo controle apresentou-se com 50% ou menos de área de cobertura superficial em relação aos demais. A duração de aplicação do ácido não interferiu significantemente nesse parâmetro de avaliação, mas nos grupos 15 e 30, a área de recobrimento ósseo mais do que triplicou às 72 horas em relação às 24 horas (p<0,01), com cerca de 70% das superfícies cobertas por células, contra 30% no grupo controle. Conclui-se que a desmineralização óssea nos tempos de condicionamento estudados propicia um substrato sobre o qual as células pré-osteoblásticas adquirem morfologia compatível com estágio de diferenciação mais avançado, promovendo maior cobertura de área, o que aumenta o potencial para deposição de novo osso sobre essas superfícies em comparação ao tecido não condicionado. / Results of previous research has found increased potential for the consolidation of bone grafts by demineralization of the graft material and / or areas of consolidation. However there is a lack of foundation supported by biological evidence of benefits from such procedures. To test this hypothesis, the bone tissue of the calvaria of guinea pigs (Cavia porcellus) were exposed to conditioning by citric acid for 15, 30, 90 and 180 seconds (test group). Forty-five bone disks measuring three millimeters in diameter were removed from the animals, of which 36 were conditioned with citric acid pH 1 to 50% and nine did not receive conditioning (control group). About nine disks in each group were pre-cultured with MC3T3- E1 osteoblasts for 24, 48 and 72 hours (three discs of each group at each time point). Analysis of cell morphology, number of cells attached on the surface and the coverage area of these surfaces by pre-osteoblasts were performed on scanning electron microscopy. There was na increase in the number of cells attached to surfaces over time, regardless of conditioning or application time. However, this difference was not statistically significant intra-group (p <0.05) when comparing the periods of 24 and 72 hours of incubation. The coverage area of the surfaces of cells increased significantly with time only in the test groups, also among the incubation periods of 24 and 72 hours (p <0.01). The control group presented with 50% or less of surface area coverage compared to the other. The duration of application of the acid did not affect significantly this parameter of evaluation, but in groups 15 and 30, the bonearea covered more than tripled from 24 to 72 hours (p <0.01), with about 70 % of the area covered by cells, versus 30% in the control group. It was concluded that bone demineralization in the studied conditioning times provides a substrate on which cells acquire pre-osteoblastic morphology compatible with more advanced stage of differentiation, promoting greater coverage area, which increases the potential for deposition of new bone on these surfaces compared to the tissue-air basis.