Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Zoologia, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2014-12-08T11:52:10Z No. of bitstreams: 1 2014_PedroHenriqueCavendishSchimmelpfeng.pdf: 2772767 bytes, checksum: 07d02f03c622ec396c89636f97c2f5e7 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2014-12-30T18:56:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_PedroHenriqueCavendishSchimmelpfeng.pdf: 2772767 bytes, checksum: 07d02f03c622ec396c89636f97c2f5e7 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-30T18:56:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_PedroHenriqueCavendishSchimmelpfeng.pdf: 2772767 bytes, checksum: 07d02f03c622ec396c89636f97c2f5e7 (MD5) / A utilização de microhimenópteros parasitoides para controlar insetos-praga dentro do Manejo Integrado de Pragas (MIP) é uma alternativa para reduzir o uso de fitossanitários na lavoura e as consequências negativas em decorrência de seu uso. Os parasitoides de ovos Telenomus podisi e Trissolcus basalis têm se destacado como agentes de controle de pentatomídeos praga-da-soja, como Euschistus heros, Piezodorus guildinii e Nezara viridula. Para localização de seus hospedeiros estes parasitoides utilizam sinais e pistas predominantemente químicas originadas das plantas ou de seus hospedeiros (feromônios de alarme e sexual, por exemplo) que são interceptadas por proteínas olfativas denominadas OBPs (do inglês, Odorant Binding Proteins). O presente trabalho teve como objetivo (1) avaliar a resposta de T. podisi e Tr. basalis aos feromônios sexuais isolados dos hospedeiros (E. heros – Eher1, Eher2 e Eher3, P. guildinii - Pgui e N. viridula - Nvir) em bioensaios de olfatometria em diferentes concentrações (1,0 mg/mL, 0,1 mg/mL e 0,01 mg/mL) e (2) identificar potenciais OBPs mediante transcriptômica de insetos adultos de ambos os sexos por RNA-Seq/Illumina e analisar a influência da exposição aos feromônios sexuais dos hospedeiros na expressão dos mesmos em T. podisi. Ambos os parasitoides estudados mostraram resposta seletiva em relação aos compostos avaliados e suas respectivas concentrações (T. podisi - Eher3 (0,01 mg/mL), Pgui (0,01 mg/mL) e Nvir (0,1 mg/mL); Tr. basalis - Eher1 (1,0 mg/mL e 0,1 mg/mL), Eher3 (1,0 mg/mL) e Pgui (1,0 mg/mL). No entanto, a resposta observada diferiu da hipótese inicial de que a resposta dos parasitoides aos compostos sintéticos está relacionada com a sua preferência pelos hospedeiros descritos na literatura. Foram encontrados em T. podisi sete transcritos de OBPs, sendo três contendo a região codificante completa, designadas de TpodOBP1, TpodOBP2 e TpodOBP3. As sequências deduzidas de aminoácidos de TpodOBP1 e TpodOBP2 apresentaram alta similaridade com OBPs do percevejo E. heros (TpodOBP1 x EherOBP2: 88,5% e TpodOBP2 x EherOBP1: 82,4%), sugerindo que tais potenciais OBPs estariam relacionadas à olfação de pistas feromonais do hospedeiro ou à olfação dos mesmos estímulos. No entanto, fêmeas de T. podisi estimuladas com compostos feromonais dos hospedeiros não tiveram a expressão das potenciais TpodOBPs alteradas. ___________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The use of microhimenopteran parasitoids has been studied within Integrated Pest Management (IPM) in order to control insects that causes economic damage to agriculture and reduce the emission of agrotoxics. The egg parasitoids Telenomus podisi and Trissolcus basalis have received significant atention as control agents of the pentatomid stinkbugs-soycomplex, such as Euschistus heros, Piezodorus guildinii and Nezara viridula. To locate it hosts these parasitoids uses manly chemical signals and cues originated by plants or by the host itself (e.g. alarm and sexual pheromones) that are intercepted by olfactory proteins called Odorant Binding Proteins (OBPs). The present work had as objective (1) to evaluate the response of T. podisi and Tr. basalis towards the isolated sexual pheromones of its main hosts (E. heros, P. guildinii, and N. viridula) in diferent concentrations (1,0 mg/mL, 0,1 mg/mL e 0,01 mg/mL) through dual-choice olfactometry bioassays and (2) identify possible OBPs, through transcriptome analysis of adult insects of both sexes with RNA-Seq/Illumina, and analyse the influence of the exposition of sexual pheromones into the profile expression in T. podisi OBPs. Both the parasitoids showed a selective response towards the treatments and its respective concentrations (T. podisi - Eher3 (0,01 mg/mL), Pgui (0,01 mg/mL) e Nvir (0,1 mg/mL; Tr. basalis - Eher1 (1,0 mg/mL e 0,1 mg/mL) Eher3 (1,0 mg/mL) e Pgui (1,0 mg/mL). However, the response observed diferred from initial hypothesis that the parasitoid response to the synthetical pheromones would be related to its preference as described on the literature. The transcriptome analysis of T. podisi retrieved seven protein transcripts potentially related to semiochemical binding (OBPs), being that three of those were full-length (i.e.: TpodOBP1, TpodOBP2 e TpodOBP3). The translated aminoacid sequence of TpodOBP1 e TpodOBP2 showed high similarity with EherOBP1 and EherOBP2 (TpodOBP1 x EherOBP2: 88.5% e TpodOBP2 x EherOBP1: 82.4%) suggesting that those putative TpodOBPs might be related to olfaction cues from its host or a shared and related stimuli. However, females of T. podisi stimulated with the pheromonal compounds of its hosts did not have any change on its expression profile.

Orientador: Mohamed E. M. Habib / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-18T20:42:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mendeleck_Elaine_M.pdf: 7569768 bytes, checksum: 0e9dabbef3e4522a4d36863691c74e32 (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: Isolada por Krieg e colaboradores em 1982 na Alemanha, a bactéria entomopatogênica Bacillus thuringiensis var Tenebrionis, tem sido considerada um agente para o controle de coleópteros prejudiciais. O presente trabalho teve como objetivo estudar as alterações histológicas, bem como a sintomatologia externa causada pela variedade Tenebrionis em cinco espécies de coleópteros pragas de cereais armazenados. As espécies estudadas foram: Carpophilus sp (Nitidulidae), Chriptollestes ferrugineus (Cucujidae), Lasioderma serriorne (Anobiidae), Tenebrio molitor e Iribolium sp (Tenebrionidae). Para as espécies L. serricorne e Carpophilus sp larvas de terceiro estágio foram utilizadas nas investigações. Para as espécies C. ferrugineus e Tribolium sp, os estudos foram realizados com o estágio adulto. Para I. molitor, as investigações incluíram tanto larvas como adultos. Esses coleópteros foram mantidos em criação de laboratórios sob condições de temperatura, umidade relativa e fotoperíodo em suas dietas específicas ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Isolated by Krieg et al., in 1982 in Germany, the entomopathogenic bacterium Bacillus thuringiensis var Tenebrionis (H: 8a ¿ 8b), has been considered as promising agent for the control of harmful beetles. The present work was undertaken to study some histological damages as well as sintomatology caused by var Tebrionis in some coleopterou species considered harmful for store products. The following species were studied in the present work Carpophilus sp (Nitidulidae), Chryptolestes ferrugineus (Cucujidae), Lasioderma serriorne (Anobiidae), Tenebrio molitor e Iribolium sp (Tenebrionidae). These insect species were maintened under controlled laboratory conditions ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Parasitologia / Mestre em Ciências Biológicas

Made available in DSpace on 2015-11-11T12:13:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 thiago_belinato_ioc_dout_2012.pdf: 3612135 bytes, checksum: 690556f02680b7036308993d110f343d (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-05-21 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Ainda hoje o uso de inseticidas é um componente importante das estratégias de controle de vetores. O organofosforado temephos, por exemplo, é utilizado para controle de populações de Aedes aegypti no Brasil desde 1967. Um dos problemas relacionados ao uso intenso de inseticidas por um longo período de tempo é a seleção de indivíduos resistentes. A resistência a inseticidas está, em grande parte, relacionada com o aumento da expansão de A. aegypti ao longo das últimas décadas e é desafio atual dos programas de controle do vetor. Outros compostos, com diferentes mecanismos de ação, têm sido empregados nos locais onde as populações encontram-se resistentes aos inseticidas tradicionais. Uma vez que poucos produtos estão disponíveis para controle de A. aegypti, entender os mecanismos de resistência relacionados aos principais inseticidas atualmente empregados pode ser fundamental para compreender a evolução da resistência em campo. No presente trabalho, foi avaliada, usando a linhagem Rockefeller e populações de campo de A. aegypti, a atividade de enzimas detoxificantes, em resposta a doses parcialmente letais de representantes das principais classes de inseticidas empregados no país: os larvicidas temephos e o inibidor de síntese de quitina (ISQ) diflubenzuron, além do piretróide permetrina Também foi realizada seleção com diflubenzuron em duas populações de campo, com diferentes níveis de resistência ao OP temephos. Foram investigados, nessas populações, diversos parâmetros do fitness, antes e depois da seleção com o ISQ. Verificamos que todas as populações estudadas apresentaram altos níveis de resistência aos inseticidas químicos tradicionais, mas não ao diflubenzuron. Quando aplicado em larvas, temephos provocou diminuição progressiva da atividade de acetilcolinesterase e de esterases, confirmando reação, com OP, dos substratos utilizados nas avaliações do monitoramento dos mecanismos de resistência. Diflubenzuron provocou mudanças no perfil da atividade de GST e MFO em Rockefeller e em uma população de campo. Além disso, populações selecionadas com o ISQ apresentaram aumento da atividade destas duas classes de enzimas. Esses dados apontam para a potencial participação de GST e MFO na metabolização de diflubenzuron. Também verificamos que a resistência a temephos está associada a comprometimento de diversos parâmetros da biologia dos mosquitos. Reversão da resistência em populações mantidas na ausência do inseticida, aliada à recuperação de diversos aspectos do fitness, reforça essa hipótese. Do mesmo modo que temephos, a resistência a diflubenzuron também acarreta problemas no fitness. De modo geral, houve redução na taxa de aceitação do repasto sanguíneo, quantidade de sangue ingerido, número de ovos e quantidade de fêmeas inseminadas. Esperamos que os resultados aqui apresentados possam contribuir para a melhor compreensão dos mecanismos de resistência a inseticidas em populações de campo de A. aegypti e para promover o desenho de estratégias de controle diferenciadas e racionais do vetor / Insecticides still play an important role in vector control strateg ies. For instance, i n Brazil , the organophosphate (OP) temephos has been employed since 1967 against A edes aegypti . One ma jor consequence related to the intense use of insecticides for long period s is selection of resistance . Insecticide resistance is associated to A. aegypti expansion over the past decades and is a current challenge for vector control programs . Compounds with different mechanisms of action are presently being employed in localities whe re vector populations are resistant to traditional insecticides . Since there are few products available for A. aegypti control, knowledge of the mechanisms of resistance to insecticides currently in use could be essential to understanding the evolution of resistance in the field . In this study, the activity of detoxifying enzymes of A. aegypti Rockefeller strain and field populations was evaluated after expos ure to partially lethal doses of th ree insecticides , representative of the main classes employed in the country: t he OP temephos, the chitin synthesis inhibitor (CSI) diflubenzuron and the pyrethroid (PI) permethrin . S election with diflubenzuron of two field populations, with distinct temephos resistance levels w as also performed. Several fitness paramet ers were i nvestigate d in these populations, before and after selection with the ISQ . We previously identified, in both populations , high resistance levels to the conventional chemical insecticides, but not to diflubenzuron . When applied to larvae, temephos caused progressive decrease in the activity of a cetylcholinesterase and e sterases, confirming that substrates used in routine monitoring of resistance mechanisms indeed reacts with OP. Diflubenzuron caused changes in the activity profile of MFO and GST in both Rockefeller strain and in a field population . In addition, populations selected with the ISQ showed increased activity of these two enzyme classes . These data point to the potential participation of MFO and GST in diflubenzuron metabolism . We also fo und that temephos resistance is associated with the impairment of several parameters of mosquitoes ’ biology . Reversion of resistan ce in populations maintained in absence of insecticides, coupled with the recovery of various fitness aspects, support s this h ypothesis . As with temephos, diflubenzuron resistance causes fitness problems. Overall, there was a reduction in b lood meal acceptance, amount of ingested blood, number of eggs and frequency of inseminated females . Our results may contribute to a better kn owledge of insecticide resistance mechanisms in A. aegypti field populations and to the developm ent of novel and rational control strategies.

Made available in DSpace on 2015-11-18T13:19:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 andre_torres_ioc_mest_2013.pdf: 11168991 bytes, checksum: 984ba1b1e1795ccd8eafa58fcf567780 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-04-14 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A família gênica das carboxilesterases (CCEs) é muito diversa e, em insetos, está dividida em três principais classes. Duas classes, Detoxificantes e Processamento de hormônios e feromônios, contêm genes majoritariamente catalíticos envolvidos com o metabolismo de xenobióticos e degradação de moléculas de hormônios que sinalizam processos importantes como a ecdise. No entanto, alguns destes genes já foram implicados na resistência a organofosforados (OP) e carbamatos (CX) em diversas espécies artrópodes. A classe Desenvolvimento neuronal contém genes não catalíticos, com exceção do codificante para a enzima acetilcolinesterase que é alvo de OP e CX. Este gene também já foi implicado na resistência a inseticidas por insensibilidade do sítio alvo. Isso faz com que essa família seja importante no monitoramento e controle de insetos vetores e pragas agrícolas. Todos os membros possuem o domínio COesterase que é caracterizado pela dobra alfa/beta hidrolase que posiciona os três resíduos da tríade catalítica (Ser-Glu-His ou Ser-Asp-His) no fundo da cavidade de ligação com o substrato. Estes genes evoluíram por duplicação, em sua maioria por recombinação desigual, e por isso as cópias tendem a ficar dispostas em clusters no genoma. Nesse trabalho foram identificados 1299 CCEs homólogas em 36 espécies (33 de insetos) e foi observada uma média de 36 sequências por espécie. Ixodes scapularis (71) e P. humanus (17) possuem o maior e o menor número de CCEs, respectivamente. Outros vetores, como Cu. quinquefasciatus e Ae. aegypti, também apresentaram número acima da média. Os himenópteros possuem um um número menor de sequências em relação à média, exceto N. vitripennis. Sessenta e um por cento das sequências possuem os três resíduos catalíticos, 56% são secretadas, 34% intracelulares e 10% mitocondriais Regiões transmembranares foram encontradas em 27% das sequências. No total foram identificados 39 clados e, como esperado, em alguns casos, com o aumento da amostragem não houve suporte estatístico corroborando a classificação proposta por Oakeshott e colaboradores em 2010. A maior diferença em relação à classificação anterior foi observada para a classe Detoxificante. Esta possui clados contendo proteínas de espécies de uma mesma ordem taxonômica e não relacionadas funcionalmente, indicando que as duplicações ocorreram dentro das diferentes linhagens. Nessa classe, a maioria dos genes possui a tríade Ser-Glu-His e é endereçado para as três localizações celulares. Na classe Processadoras de hormônios e feromônios, as JHE também parecem ter evoluído independetemente em cada linhagem de inseto pois em lepidóteros, dípteros e hemípteros estes genes ficam em clados distintos. Na classe Desenvolvimento neuronal, diferente das outras duas, um número menor de duplicações gênicas para cada espécie é encontrado. Nesta classe, a presença de regiões associadas com o ancoramento na membrana em alguns membros sugere que houve fusão entre domínios transmembranares e o domínio COesterase ao longo da história evolutiva. Os resultados mostram que a classificação funcional é aplicável apenas para a classe Desenvolvimento neuronal. Para as outras duas classes os genes dentro das diferentes linhagens taxonômicas são mais próximos filogeneticamente indicando que a evolução da funcionalidade ocorreu separadamente em cada linhagem / The carboxylesterase (CCE) gene family is very diverse and is divided into three main classes in insects. Two classes, Dietary/detoxification and Hormone/semiochemical processing are catalytic and contain genes mainly involved with xenobiotic metabolism and degradation of hormone molecules. However, some of these genes have been implicated in the resistance to organophosphorus (OP) and carbamates (CX) insecticides in several arthropod species. The Neurodevelopmental class contains non-catalytic genes, with the exception of the gene encoding the enzyme acetylcholinesterase that is the target of OP and CX. This gene has also been implicated in insecticide resistance due to mutations that affect insecticide binding. This fact makes CCE an important family in insecticide resistance monitoring and control of agricultural pests and insect vectors. All CCE members have a COesterase domain, characterized by an alpha/beta hydrolase fold that is responsible for correctly positioning the catalytic triad (Ser-Glu-His or Ser-Asp-His). The genes in this family evolved by duplication, usually by unequal crossing-over, so the copies tend to be arranged in clusters in the genome. In this work 1299 CCEs were identified in 36 species (33 insects) and an average of 36 sequences per species was observed. Ixodes scapularis (71) and P. humanus (17) have the highest and lowest number of CCEs, respectively. Other insect vectors such as Cu. quinquefasciatus and Ae. aegypti, also showed an increased CCE number. Hymenoptera have a deficit in the number of sequences except N. vitripennis. Sixty one percent of the sequences have catalytic residues, 56% are secreted, 34% are intracellular and 10% are mitochondrial. Transmembrane regions were found in 27% of the sequences. In total, 39 clades were identified and, as expected, in some cases, inconsistencies when compared to Oakeshott et al classification in 2010 were found. In the dietary/detoxification class a taxonomic instead of functional classification seems to fit better the evolution of the genes found. In this class, most of the genes have the Ser-Glu-His triad and didn‘t show a specific celular localization. In the hormone/semiochemical processing class, the JHE also appear to have evolved independently on each insect lineage, lepidoteran, dipteran and hemipteran species are grouped in different clades. The Neurodevelopmental class, contrasting with the other two classes, showed a smaller number of genomic duplications for each species and functional relationship among its genes. In this class, the presence of membrane anchoring regions for some members suggests that transmembrane and COesterase domains were fused during the evolutionary history. The results show that the functional classification works only for the Neurodevelopmental class. However, for the other two classes the taxonomic group appears to be more important than the function of these genes for their classification.

Submitted by THIAGO TREVISOLI AGOSTINI null (ttrevisoli@gmail.com) on 2017-08-03T21:35:36Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Thiago Trevisoli Agostini.doc: 4358656 bytes, checksum: e54359117ba09655fd5253a011dacfcb (MD5) / Rejected by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: O arquivo submetido não contém o certificado de aprovação. A versão submetida por você é considerada a versão final da dissertação/tese, portanto não poderá ocorrer qualquer alteração em seu conteúdo após a aprovação. A versão final da dissertação/tese deve ser submetida no formato PDF (Portable Document Format). O arquivo PDF não deve estar protegido e a dissertação/tese deve estar em um único arquivo, inclusive os apêndices e anexos, se houver. Por favor, corrija estas informações e realize uma nova submissão. Agradecemos a compreensão. on 2017-08-04T17:14:48Z (GMT) / Submitted by THIAGO TREVISOLI AGOSTINI null (ttrevisoli@gmail.com) on 2017-08-04T17:30:14Z No. of bitstreams: 1 Versão Definitiva.pdf: 738534 bytes, checksum: 55f3aca1bc91c3ffe18c2eb2056d21ea (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-08-07T19:30:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 agostini_tt_me_jabo.pdf: 738534 bytes, checksum: 55f3aca1bc91c3ffe18c2eb2056d21ea (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-07T19:30:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 agostini_tt_me_jabo.pdf: 738534 bytes, checksum: 55f3aca1bc91c3ffe18c2eb2056d21ea (MD5) Previous issue date: 2017-07-04 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A exigência da sociedade por alimentos produzidos com baixos riscos de contaminação aos consumidores e ao meio ambiente tem aumentado constantemente. Nesse cenário, a identificação de novas formas eficazes e seguras para o controle de insetos-praga se mostra como uma tarefa contínua e as quitinases aparecem como uma interessante ferramenta. As quitinases são enzimas com ação de hidrólise sobre quitina e podem interferir no desenvolvimento de pragas visto que esse polímero constitui estruturas como a cutícula e a membrana peritrófica dos insetos. No presente trabalho, foi realizada a produção de um extrato quitinolítico a partir do cultivo da actinobactéria Streptomyces sp. ENT-21 em meio contendo quitina e avaliaram-se os efeitos desse extrato sobre o desenvolvimento de lagartas de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae), importante praga da cultura do milho. O extrato quitinolítico produzido resultou na interferência do desenvolvimento larval de S. frugiperda, no aumento da mortalidade e na redução do ganho de peso das lagartas em relação a lagartas mantidas como controle. Após fervura, o extrato produzido teve sua atividade quitinolítica inativada e não exerceu influência sobre a mortalidade larval de S. frugiperda em relação ao controle na concentração avaliada. Os resultados indicam que o extrato quitinolítico produzido pelo cultivo de Streptomyces sp. ENT-21 possui atividade inseticida sobre lagartas de S. frugiperda e que a atividade quitinolítica é um fator importante para a atividade inseticida do extrato. / Society's demand for food production at low contamination risks to consumers and to the environment is in constant increase. In this scenario, the identification of new effective and safe forms for the control of insect pests come into sight as a continuous task and chitinases are considered an interesting promisse. Chitinases are enzymes that hydrolyze chitin and can disrupt the development of insect pests since this polymer constitutes vital structures such as the cuticle and peritrophic membrane of insects. In the present work, we produced a chitinolytic extract using the actinobacterium Streptomyces sp. ENT-21 and evaluated the effects of this extract on larval development of an important pest of maize, Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae) larvae. The chitinolytic extract interfered in the larval development of S. frugiperda affecting parameters such as larval mortality and larval weight gain. After boiling, no chitinolytic activity was detected in the extract and no influence of boiled extract was observed over S. frugiperda larval development at the evaluated concentration. The results suggest that the evaluated chitinolitic extract has insecticidal activity against S. frugiperda larvae and indicate the chitinolytic activity as an important component of the insecticidal activity of the extract. / CNPq: 132363/2015-1

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-07T17:29:02Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 320964 bytes, checksum: f760228c0f584e3938e90c19170cd0bf (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-07T17:29:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 320964 bytes, checksum: f760228c0f584e3938e90c19170cd0bf (MD5) Previous issue date: 2001-03-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O componente principal do feromônio sexual de Leucoptera coffeella, 5,9-dimetilpentadecano, possui quatro formas enantioméricas e estudos com outros insetos têm demonstrado que a quiralidade pode ser responsável, em grande parte, pela determinação da resposta comportamental de atração a uma mistura particular de um atraente sexual. Objetiv ou-se neste trabalho determinar a importância relativa de cada isômero desta molécula. Avaliou-se os isômeros puros com eletroantenografia, túnel-de-vento e em armadilhas no campo. Os testes realizados com eletreoantenografia e túnel-de-vento indicaram uma pequena resposta do isômero 5S,9S-dimetilpentadecano (SS). No entanto nenhum dos estereoisômeros puros do 5,9 -dimetilpentadecano foi capaz de atrair um número significante de machos para armadilhas no campo quando comparados com a mistura racêmica. Por serem muito pequenos, a observação direta do comportamento de chamamento em fêmeas se torna muito difícil e imprecisa. Foi feito um estudo determinar o padrão de produção do feromônio sexual em fêmeas virgens como uma medida indireta do comportamento de chamamento. O componente principal, biologicamente ativo, (5,9 - dimetilpentadecano) foi extraído para ser usado em dois experimentos. O primeiro investigou a produção de feromônio ao longo do tempo (horas) em fêmeas virgens. Para isto, extratos de 10 fêmeas de dois dias de idade foram extraídos de fêmeas a cada 2 h durante o período de 24 h (12:12 D:L). O outro experimento avaliou o efeito da idade das fêmeas na produção de feromônio. Com as idades variando de 1 a 5 dias, 10 fêmeas de cada idade foram usadas. Os extratos foram feitos e analisados em um cromatógrafo a gas. As fêmeas produziram as maiores quantidades de feromônio nas quatro últimas horas da escotofase e nas duas primeiras horas da fotofase seguinte. As quantidades de feromônio foram baixas em todos os outros períodos avaliados. Fêmeas de um dia de idade tiveram as maiores quantidades de feromônio na glândula. Após o segundo dia de emergência, os títulos de feromônio diminuíram significativamente e permaneceram baixos e nos mesmos níveis até os 5 dias de idade. Foram conduzidos experimentos de campo para determinar a eficiência de armadilhas de feromônio considerando a dose aplicada no liberador, a vida útil do liberador e a altura da armadilha para captura de machos. Diferentes modelos de armadilhas foram preparadas com 300μg de feromônio sexual e colocadas em plantações de café. Todos os experimentos foram feitos em Minas Gerais, MG. No primeiro estudo a dose de 300μg e 3000μg coletaram mais mariposas que em doses inferiores. Entretanto, quando se levou em consideração a vida útil do liberador a dose de 300μg foi inficiente para coletar machos depois de 15 dias e a dose de 3000μg repeliu os machos das armadilhas nos primeiros 15 dias. Em outro estudo concluiu -se que a melhor dose a ser aplicada nas armadilhas foi a de 900μg. No estudo com os diferentes modelos comparou-se armadilhas Delta® nas cores branca e verde, Tubular com cartão de cola no interior e a armadilha Cica®. Os resultados mostraram não haver diferenças entre as armadilhas Delta® e Cica. No entanto, a armadilha cilíndrica coletou significativamente menos insetos que as demais testadas. Por razões de economia e praticidade recomenda-se a Delta® para o monitoramento deste inseto. A avaliação da altura da armadilha determina que estas sejam colocadas no solo entre as linhas de plantio. / The main compound of Leucoptera coffeella sex pheromone, 5,9 -dimethylpentadecane, has four possible pure stereoisomers and studies with other insects have been demonstrated that this optical isomer may carries biological activitiy. The objective of the present work was to study whether only one or more of the pure stereoisomers were needed for biological activity. The evaluatio n of the pure stereoisomers was made using electroantennography, wind tunnel and pheromone trap in the field. The eletroantenography and wind tunnel experiments indicated a small response from the 5S,9S-dimethylpentadecane (SS) isomer. However no stereoiso mer alone was able to trap significant number of moths when compared to the racemic mixture of 5,9 -dimethylpentadecane. Due to the small size direct observation of the calling behavior in females is very difficult and inaccurate. A study was undertaken to access the pattern of sex pheromone production in glands of virgin females as an indirect measure of the calling behavior. The major compound, biologically active, (5,9-dimethylpentadecane) was extracted to be used in two experiments. The first one investigated the effect of the pheromone production time by females. Extracts of 10 females with age of two days were carried out at 2-hour intervals during 24 hours (12:12 D:L). The other experiment evaluated the effect of female age on pheromone production. Age ranged from 1 to 5 days after emergence and 10 females of each age class were used. Extracts were analyzed by GC. Females had the highest amount of pheromone at the last four hours in the dark and the two first hours in the light period. Amounts of pheromone were lower in all other periods. One-day old females produced the highest amount of pheromone in the glands. After two days of emergence the titers of pheromone dropped significantly and remained low until females were 5 days old. Field experiments were conducted to determine the effectiveness of doses, the lifetime of the releaser, and the height of pheromone-baited traps to capture of coffee leafminer, L. coffeella, males. Also traps of different design were baited with 300μg of sex pheromone and were placed in coffee field. All experiments were done at Minas Gerais State - Brasil. In one study, the dose of 300μg and 3000μg in Delta traps collected more moths than the inferior doses. However, the considering the lifetime of the releaser the dose of 300μg was ineficiente to trap moths more than 15 days and the 3000μg dose was a repelent in the first 15 days. In another study was concluded that the best dose to be applied in the traps 900μg. In the study of trap design the capture was compared among white delta, green delta, a tubular glued cardboard and the Cica® trap. Results showed that there were no differences in capture among traps with different colors. However, a circular glued cardboard trap traped a significant less males than any other trap tested. For economic reasons the best option for monitoring purposes is recommended the Delta trap. The height of trap study determines that the trap shoud be posicionated on the soil between the row of plants.

Made available in DSpace on 2015-10-21T12:19:25Z (GMT). No. of bitstreams: 2 gabriela_garcia_ioc_mest_2012.pdf: 5953983 bytes, checksum: 9330fc410b9489226898cb3a6791b904 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-05-21 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A utilização de inseticidas neurotóxicos contra insetos vetores ainda tem um papel crucial nos programas de controle de doenças. No Brasil é uma estratégia importante no controle do vetor da dengue, o Aedes aegypti. O principal larvicida utilizado para este fim em ca mpo tem sido o organofosforado (OP) temephos, desde 1967, com utilização intensificada a partir da epidemia de 1986. Em função do diagnóstico de resistência em diversas populações brasileiras a este OP, atualmente se encontra em andamento a substituição pelo inibidor de síntese de quitina (ISQ) diflubenzuron. Para o controle da fase adulta dos mosquitos, os inseticidas mais utilizados atualmente pertencem à classe dos piretróides (PI). Contamos no país com a Rede Nacional de Monitoramento da Resistência de Aedes aegypti a Inseticidas (MoReNAa), com metodologias consolidadas para a avaliação da resistência e de seus mecanismos em populações do vetor de dengue. No presente estudo, essas metodologias foram empregadas para avaliar ao longo de um ano, em quatro localidades do Brasil, de quatro regiões distintas, a resistência aos inseticidas citados anteriormente. Identificamos alterações de susceptibilidade ao larvicida temephos em todas as populações participantes do estudo; entretanto, observamos, em todos os casos, tendência de queda da razão de resistência ao longo do estudo, que atribuímos à interrupção do uso deste composto em campo Em relação ao outro larvicida investigado, o diflubenzuron, foram constatadas razões de resistência baixas para todas as populações, em todos os momentos, provavelmente em função da sua recente incorporação no âmbito do controle químico no país. Ressaltamos no entanto a importância de avaliações deste ISQ mediante simulados de campo para uma melhor compreensão sobre o significado funcional das razões de resistência encontradas neste estudo, e seu impacto no controle efetuado em campo no país. Já para o adulticida investigado, a deltametrina (PI), observamos uma resistência disseminada no país, sendo extremamente elevada em três das quatro populações estudadas. Os resultados indicam uso público indiscriminado de inseticidas em uma das localidades e sugerem correlação entre a resistência a PI e a utilização doméstica deste inseticida, o que chama atenção para a necessidade de adoção de medidas de conscientização do uso deste tipo de ferramenta pela sociedade. Após a quantificação da resistência a estes três inseticidas, partimos para a investigação dos mecanismos responsáveis, analisando a resistência metabólica \2013 derivada de alterações nas atividades de enzimas que detoxificam estes compostos \2013 por meio de ensaios bioquímicos e a resistência por alteração no sítio alvo \2013 derivada de modificações estruturais nas moléculas alvo dos inseticidas - por meio de ensaios bioquímicos e moleculares Foram diagnosticadas principalmente alterações na atividade de duas enzimas na fase adulta das quatro populações, GST e PNPA. Estas enzimas já haviam sido relacionadas à resistência a PI anteriormente. Na fase de larvas, não foi possível estabelecer qualquer correlação diagnóstica com a resistência a temephos ou diflubenzuron: alterações na atividade das enzimas variaram entre as populações estudadas. De maneira geral, verificamos tendência de queda na atividade de PNPA em Duque de Caxias, de MFO em Parnamirim e das Esterases ALFA e BETA em Campo Grande . Em relação aos ensaios moleculares, diagnosticamos três diferentes mutações no canal de sódio das populações avaliadas (nas posições 1011, 1016, 1534). Destas, duas mutações (1016 e 1534) foram correlacionadas com a elevada resistência a PIs neste estudo. Este trabalho possibilitou uma melhor compreensão sobre a dinâmica da resistência a inseticidas no país. Esperamos, desta forma, contribuir para o manejo do controle químico de Ae. aegypti, auxiliando a recomendação de inseticidas, tanto para larvas quanto para adultos, de uma forma eficiente e racional / The utilization of neurotoxic insecticides against insect vectors has a crucial role in disease control programs. In Bra zil it is an important strategy against the dengue vector, Aedes aegypti . Since 1967 the main larvicide used in the field has been the organophosphate (OP) temephos, with a strong utilization after the dengue epidemy in 1986. Due to OP resistance of seve ral Brazilian vector populations, nowadays it’s substitution by the chitin synthesis inhibitor (CSI) diflubenzuron is in progress. Pyrethroids (PI) are the most widely used insecticides in the control of adult mosquitoes. In Brazil the National Network f or Aedes aegypti Insecticide Resistance Monitoring (MoReNAa) relies on consolidated methodologies for assessing resistance and the underlying its mechanisms in populations of the dengue vector. In the present study, we employed these methodologies to eval uate resistance to the above mentioned insecticides of four municipalities, belonging to four Brazilian regions , during one year. We identified changes in the susceptibility levels to the larvicide temephos in all populations considered in the study. How ever , there was a tendency of temephos resistance ratio decrease throughout the period of evaluation, probably due to the interruption of the use of this compound in the field. Diflubenzuron, the other larvicide investigated, elicited low resistance ratio s in all populations considered, and this was attributed to its recent incorporation as a chemical control tool in the country. However, we emphasize the importance of field simulated assays with this CSI in order to better understand the significance of the resistance values found and their impact on vector control. For the adulticide investigated, deltamethrin (PI), we observed widespread resistance all over the country . Resistance levels were particularly high in three out of the four investigated pop ulations. Our results point to an indiscriminate public use of PI in one municipality and suggest correlation between PI resistance and the intense domestic use of this class of insecticides. This calls attention to the need of adopting measures to raise society awareness to the limitations of this kind of tools. After resistance quantification to these three insecticides, we investigated the mechanisms potentially involved by analyzing both metabolic resistance - derived from changes in the activity of detoxifying enzymes - and resistance by altered target site - derived from structural modifications in the insecticide target molecules. Biochemical and molecular assays were employed. GST and PNPA were the main enzymes altered, and this was observed in adult specimens of all populations. These enzymes have been previously associated with PI resistance. In the larval stage, no diagnostic correlation between enzymes activity and temephos or diflubenzuron resistance could be established , enzymatic alterat ions varying among the evaluated populations . In general, we detected tendency of decrease in the PNPA activity at Duque de Caixas, MFO at Parnamirin and ALFA and BETA Esterases at Campo Grande. Regarding the molecular assays, it was possible to identify three different mutations in the sodium channel, the PI target site (at positions 1011, 1016 and 1534). Of these, two mutations (1016 and 1534) were correlated to high resistance levels to PIs. This study contributed to a better understanding of the dyn amics of insecticide resistance in Brazil. We expect to have been contributed to the management of Ae. aegypti chemical control, support ing the recommendation of efficient and rational usage of insecticides for both larvae and adults

Submitted by Stephany Silva (stephany.silva@cpqam.fiocruz.br) on 2016-09-16T13:46:13Z No. of bitstreams: 1 2015lima-kfa.pdf: 3114947 bytes, checksum: 0d9150a2df9afa75d5a290834a43483a (MD5) / Approved for entry into archive by Adagilson Silva (adagilson@cpqam.fiocruz.br) on 2016-09-16T19:22:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015lima-kfa.pdf: 3114947 bytes, checksum: 0d9150a2df9afa75d5a290834a43483a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-16T19:22:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015lima-kfa.pdf: 3114947 bytes, checksum: 0d9150a2df9afa75d5a290834a43483a (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / Este estudo avaliou o desempenho biológico e reprodutivo de machos de Aedes aegypti esterilizados por radiação gama e seu potencial para uso no controle da espécie, através da técnica do inseto estéril (TIE). A eficácia de esterilização de diferentes doses de radiação gama, 30, 40 e 50 Gy, foi avaliada em machos irradiados (MI) na fase de pupa. O seu efeito sobre a longevidade e competitividade de acasalamento dos MI, sobre a fecundidade e fertilidade das fêmeas acasaladas com estes machos, bem como de fêmeas também irradiadas (FI), foram parâmetros analisados. Os testes de competitividade foram conduzidos em gaiolas teladas (2 X 2 m) em condições simuladas de campo, onde foram liberados machos irradiados e machos não irradiados (MNI), nas seguintes proporções: 5:1, 10:1 e 15:1. Os resultados revelaram que o fitness biológico e reprodutivo dos mosquitos são afetados pela radiação, de modo que os efeitos são diretamente proporcionais a dose de radiação utilizada. O parâmetro de longevidade apresentou diferenças significativas, tanto quando os MI foram analisados de forma individual quanto em grupo. Para a maior dose, MI e FI viveram em média 19,6 ± 2,2 dias e 25,8 ± 2,2 dias, respectivamente, enquanto que no grupo controle, estes valores foram de 24,9 ± 2,5 dias e 30,4 ± 2,5 dias. Foi observado também um efeito da radiação na fecundidade das fêmeas irradiadas (FI), visto que 100 por cento delas não realizaram postura e na fertilidade de machos irradiados (MI), expostos às doses de 40 e 50 Gy, cujo cruzamento com fêmeas não irradiadas promoveu cerca de 80 por cento e 100 por cento de inviabilidade dos embriões. Nos experimentos de competitividade, na menor proporção (5:1) apenas 24,5 por cento dos ovos estavam inviáveis, enquanto que nas proporções maiores (10:1 e 15:1) este percentual aumentou para cerca de 80 por cento. Estes resultados sugerem que para a supressão de A. aegypti pela TIE, em campo, será necessária uma quantidade de machos estéreis, pelo menos, 10 vezes maior do que a de machos selvagens. Em conclusão, machos esterilizados por radiação gama parecem ser competitivos e com potencial para uso nas condições locais de campo, como um método espécie-específico de controle para A. aegypti (AU)

Diante da busca por abordagens mais sustentáveis para o controle de insetos, os inibidores de peptidases de plantas surgem como uma ferramenta promissora para a proteção de culturas via obtenção de plantas transgênicas. Efeitos nocivos da ingestão de inibidores de peptidases de soja (IPS) sobre o desenvolvimento de Diatraea saccharalis já foram reportados em trabalhos anteriores, entretanto, esses efeitos não foram estudados em nível molecular para essa espécie. Esse trabalho teve como objetivos identificar e analisar a expressão gênica e a atividade de serino peptidases intestinais de D. saccharalis em resposta à ingestão de um concentrado ativo de inibidores de peptidases de soja, relacionando essas informações com a presença ou não de algum mecanismo adaptativo desse inseto em resposta à ingestão desses inibidores. Para isso, foi obtido o transcriptoma intestinal de lagartas de D. saccharalis no quinto ínstar do desenvolvimento, submetidas à ingestão crônica de IPS. Em seguida foram identificadas as sequências correspondentes a serino peptidases do tipo tripsinas e quimotripsinas nesse transcriptoma, as quais foram utilizadas para o estudo da expressão gênica relativa por RT-PCR quantitativo, em resposta à ingestão aguda (por 24 e 48 horas) e crônica e de 0,5% (m/v) de um concentrado ativo de IPS por lagartas de D. saccharalis no terceiro e no quinto ínstares do desenvolvimento larval. As mesmas sequências foram utilizadas para a proposição de filogenias, sendo comparadas inclusive com sequências de serino peptidases de Spodoptera frugiperda identificadas em outro estudo paralelo. Ensaios de atividade tríptica e quimotríptica foram realizados utilizando substratos específicos (BApNA e SApNA) para determinar o efeito da ingestão de IPS sobre a atividade enzimática e finalmente, a integridade e a atividade inibitória do IPS foram analisadas após sua passagem pelo trato digestório das lagartas. Os resultados obtidos permitiram concluir que, nas condições experimentais empregadas nesse estudo, as lagartas de D. saccharalis não foram capazes de modular a expressão gênica das serino peptidases em resposta à ingestão crônica ou aguda de IPS. Os resultados de atividade tríptica e quimotríptica em função da ingestão de IPS podem sugerir um sinergismo na ação dessas enzimas em lagartas do quinto instar. Não foram detectadas diferenças na atividade de tripsinas e quimotripsinas em lagartas do terceiro ínstar em função da ingestão de IPS. A separação eletroforética das proteínas das fezes de lagartas permitiu a visualização de uma banda com massa molecular em torno de 20 kDa possivelmente correspondente ao inibidor do tipo Kunitz presente em soja que, juntamente com os dados de atividade antitríptica das fezes, indicam que D. saccharalis não é capaz de hidrolisar esse inibidor como um mecanismo de adaptação à sua presença na dieta. / Given the importance of search for more sustainable approaches for pest control, plant peptidases inhibitors emerge as a promising tool for the protection of crops by obtaining transgenic plants. Harmful effects of soybean peptidases inhibitors (SPI) intake by Diatraea saccharalis on its development were already reported in previous studies, however, these effects have not been studied at the molecular level for this specie. This study aimed to identify and analyze the gene expression and the gut serine peptidases activity of D. saccharalis in response to the intake of an active extract of soybean peptidases inhibitors. These informations were related to the presence or absence of some adaptive mechanism of this insect in response to these inhibitors. The gut transcriptome of larvae of D. saccharalis in the fifth developmental instar was obtained, undergoing chronic intake of IPS. Then, sequences of serino peptidases like trypsin and chymotrypsin were identified and used for gene expression studies on a real-time PCR in response to acute (for 24 and 48 hours) and chronic intake of 0.5 % (w/v) of SPI active extract by larvae of D. saccharalis in the third and fifth instars of larval development. The same sequences were used to propose phylogenies, including comparisons with sequences of Spodoptera frugiperda serine peptidases identified in another parallel study. Tryptic and chymotryptic activity assays were performed using specific substrates (BApNA and SApNA) to determine the effect of the SPI intake on enzyme activity and finally, the integrity and the inhibitory activity of the SPI were analyzed after passing through the digestive tract of caterpillars. The results showed that under the experimental conditions employed in this study, the larvae of D. saccharalis were not able to modulate the gene expression of serine peptidases in response to acute or chronic SPI intake. The results of tryptic and chymotryptic activity due to the SPI intake can suggest a synergism in the action of these enzymes in larvae of the fifth developmental instar. SPI intake did not cause differences in enzymatic activity of third instar larvae. Electrophoretic separation of proteins from the feces of caterpillars enabled visualization of a band with a molecular mass around 20 kDa possibly corresponding to the Kunitz inhibitor present in soybean. The antitryptic activity of the feces indicates that D. saccharalis is not able to hydrolyze soybean peptidases inhibitor as a mechanism of adaptation to their presence in the diet.

Diante da busca por abordagens mais sustentáveis para o controle de insetos, os inibidores de peptidases de plantas surgem como uma ferramenta promissora para a proteção de culturas via obtenção de plantas transgênicas. Efeitos nocivos da ingestão de inibidores de peptidases de soja (IPS) sobre o desenvolvimento de Diatraea saccharalis já foram reportados em trabalhos anteriores, entretanto, esses efeitos não foram estudados em nível molecular para essa espécie. Esse trabalho teve como objetivos identificar e analisar a expressão gênica e a atividade de serino peptidases intestinais de D. saccharalis em resposta à ingestão de um concentrado ativo de inibidores de peptidases de soja, relacionando essas informações com a presença ou não de algum mecanismo adaptativo desse inseto em resposta à ingestão desses inibidores. Para isso, foi obtido o transcriptoma intestinal de lagartas de D. saccharalis no quinto ínstar do desenvolvimento, submetidas à ingestão crônica de IPS. Em seguida foram identificadas as sequências correspondentes a serino peptidases do tipo tripsinas e quimotripsinas nesse transcriptoma, as quais foram utilizadas para o estudo da expressão gênica relativa por RT-PCR quantitativo, em resposta à ingestão aguda (por 24 e 48 horas) e crônica e de 0,5% (m/v) de um concentrado ativo de IPS por lagartas de D. saccharalis no terceiro e no quinto ínstares do desenvolvimento larval. As mesmas sequências foram utilizadas para a proposição de filogenias, sendo comparadas inclusive com sequências de serino peptidases de Spodoptera frugiperda identificadas em outro estudo paralelo. Ensaios de atividade tríptica e quimotríptica foram realizados utilizando substratos específicos (BApNA e SApNA) para determinar o efeito da ingestão de IPS sobre a atividade enzimática e finalmente, a integridade e a atividade inibitória do IPS foram analisadas após sua passagem pelo trato digestório das lagartas. Os resultados obtidos permitiram concluir que, nas condições experimentais empregadas nesse estudo, as lagartas de D. saccharalis não foram capazes de modular a expressão gênica das serino peptidases em resposta à ingestão crônica ou aguda de IPS. Os resultados de atividade tríptica e quimotríptica em função da ingestão de IPS podem sugerir um sinergismo na ação dessas enzimas em lagartas do quinto instar. Não foram detectadas diferenças na atividade de tripsinas e quimotripsinas em lagartas do terceiro ínstar em função da ingestão de IPS. A separação eletroforética das proteínas das fezes de lagartas permitiu a visualização de uma banda com massa molecular em torno de 20 kDa possivelmente correspondente ao inibidor do tipo Kunitz presente em soja que, juntamente com os dados de atividade antitríptica das fezes, indicam que D. saccharalis não é capaz de hidrolisar esse inibidor como um mecanismo de adaptação à sua presença na dieta. / Given the importance of search for more sustainable approaches for pest control, plant peptidases inhibitors emerge as a promising tool for the protection of crops by obtaining transgenic plants. Harmful effects of soybean peptidases inhibitors (SPI) intake by Diatraea saccharalis on its development were already reported in previous studies, however, these effects have not been studied at the molecular level for this specie. This study aimed to identify and analyze the gene expression and the gut serine peptidases activity of D. saccharalis in response to the intake of an active extract of soybean peptidases inhibitors. These informations were related to the presence or absence of some adaptive mechanism of this insect in response to these inhibitors. The gut transcriptome of larvae of D. saccharalis in the fifth developmental instar was obtained, undergoing chronic intake of IPS. Then, sequences of serino peptidases like trypsin and chymotrypsin were identified and used for gene expression studies on a real-time PCR in response to acute (for 24 and 48 hours) and chronic intake of 0.5 % (w/v) of SPI active extract by larvae of D. saccharalis in the third and fifth instars of larval development. The same sequences were used to propose phylogenies, including comparisons with sequences of Spodoptera frugiperda serine peptidases identified in another parallel study. Tryptic and chymotryptic activity assays were performed using specific substrates (BApNA and SApNA) to determine the effect of the SPI intake on enzyme activity and finally, the integrity and the inhibitory activity of the SPI were analyzed after passing through the digestive tract of caterpillars. The results showed that under the experimental conditions employed in this study, the larvae of D. saccharalis were not able to modulate the gene expression of serine peptidases in response to acute or chronic SPI intake. The results of tryptic and chymotryptic activity due to the SPI intake can suggest a synergism in the action of these enzymes in larvae of the fifth developmental instar. SPI intake did not cause differences in enzymatic activity of third instar larvae. Electrophoretic separation of proteins from the feces of caterpillars enabled visualization of a band with a molecular mass around 20 kDa possibly corresponding to the Kunitz inhibitor present in soybean. The antitryptic activity of the feces indicates that D. saccharalis is not able to hydrolyze soybean peptidases inhibitor as a mechanism of adaptation to their presence in the diet.