A espécie Copaifera langsdorffii pertence à família Leguminosae Juss., sub-família Caesalpinioideae Kunth. No Brasil, espécies de copaifera são amplamente distribuídas nos estados do Amazonas, Pará e Ceará e são mundialmente conhecidas pelo oleorresina que pode ser extraído de forma sustentável do tronco de suas e árvores. Este oleorresina e suas frações voláteis são amplamente estudados. No entanto, poucos estudos se relacionam com a composição química e biológica de outras partes da planta. A atividade antilitiásica do extrato hidroalcoólico das folhas dessa espécie, evidenciada em estudos preliminares pelo grupo de pesquisa e já com pedido de depósito de patente, abriu perspectivas para investigação fitoquímica deste extrato e produção de comprimidos fitoterápicos. Assim, objetivou-se nesse estudo conhecer o perfil químico do extrato, isolar e identificar metabólitos secundários que possam ser utilizados como marcadores da espécie e/ou como padrões cromatográficos, utilizando diferentes modalidades cromatográficas. E ainda, realizar estudos de extração, secagem e de pré-formulação para produção de comprimidos de qualidade contendo teor de extrato em dose adequada à utilização em ensaios clínicos futuros. O perfil químico do extrato e frações obtidas após partição com solventes de polaridade crescente demonstra constituição majoritária de compostos polares. A fracão em AcOEt foi submetida às técnicas de cromatografia em coluna clássica e cromatografia contracorrente (HSCCC) propiciando o isolamento dos compostos 1 (quercetina-3-O--L-raminopiranosídeo) e 2 canferol-3-O--L raminopiranosídeo), após purificação em CLAE preparativa. A fração aquosa foi submetida às técnicas de cromatografia em coluna utilizando gel de sephadex LH-20 e cromatografia contracorrente, propiciando o isolamento dos compostos de 3-10, após purificação em CLAE preparativa. Os compostos 4, 6, 9 e 10 tiveram suas estruturas elucidadas e pertencem à classe dos ácidos galoilquínicos, identificados como ácido 6,4-dimetóxi-3,4-di-O-galoilquínico; ácido 6-metóxi-3,4,5-tri-O-galoilquínico; ácido 4,4-dimetoxi-3,4,5-tri-O-galoilquínico; e ácido 4-metóxil-3-O-galoilquínico, respectivamente. Os estudos de extração levaram à obtenção de três extratos com maior rendimento, sendo o processo de extração simples utilizando-se etanol:água 7:3 (45 mL) com 3 g de droga vegetal, o qual foi de escolha para produção do extrato avaliado no estudo de secagem por spray drying. Os resultados do estudo de secagem não revelaram diferenças significativas entre os experimentos avaliados e as partículas dos extratos secos obtidos não apresentaram boas características de fluxo para compressão direta. A granulação por via úmida do extrato seco contendo 73% de extrato, 25% dos adjuvantes Maltodextrina:Aerosil (1:1) e 2% de polivinil pirolidona, produziu partículas com características e propriedades de fluxo excelentes para a compressão. A compressão dos granulados sem adição de outros excipientes proporcionou comprimidos com dureza elevada e longos tempos de desintegração. No entanto, comprimidos produzidos por mistura prévia com granulado de amido+lactose, apresentaram melhores características físicas, sendo os valores de dureza e friabilidade aceitáveis e tempos de desintegração menores e próximos aos valores recomendados. / Copaifera langsdorffii belongs to Leguminosae Juss. family, sub-family Caesalpinioideae Kunth. In Brazil, Copaifera species are widely spread in Amazonas, Pará and Ceará states and are worldwide known by the oil-resin that can be extracted from its trunk. This oleoresin and its volatile fractions have been studied by many research groups. However, few studies are related to the chemical and biological composition of other plant parts, such as leaves. We have been investigating the antilitiasic activity of the hydroalcoholic extract from C. langsdorffii, and it have risen the in both the phytochemical investigation of the aerial parts and the production of tablets with the obtained extract. Thus, the aim of this study was to evaluate the leaf extract chemical profile, to isolate and identify the secondary metabolites to be used as chromatographic standards, using different chromatographic methods, for the analysis of plant materials, its extracts and products, as well as, to carry out studies of extraction, drying and preformulation to produce tablets containing a suitable dose of the extract for using in future clinical trials. Chemical profile of the extract and its fractions obtained after partition with solvents with increasing polarity revealed that the extract is majorly composed by polar compounds. The ethyl acetate fraction was submitted to classical column chromatography and high speed countercurrent chromatography (HSCCC) techniques, resulting in isolation of compounds 1 (quercetin-3-O--L-rhaminopiranoside) and 2 (kaempferol-3-O--L-rhaminopiranoside, after preparative HPLC purification. The aqueous fraction was submitted to column chromatography techniques using gel filtration (sephadex LH-20) and HSCCC yielding compounds 3 to10, after preparative HPLC purification. Compounds 4, 6, 9 and 10 were identified as galloylquinic acid derivatives 6\',4\'\'-dimethoxy-3,4-di-O-galloylquinic acid; 6\'\'\'-methoxy-3,4,5-tri-O-galloilquinic acid; 4\',4\'\'\'-dimethoxy-3,4,5-tri-O-galloylquinic acid; and 4- methoxy-3-O- galloylquinic acid, respectively. Studies of extraction process furnished three extracts with higher yielding, using a simple extraction process with ethanol: water 7:3 (45 mL) with 3g of plant biomass, which was chosen to obtain the extract for drying studies. Drying results showed no significant differences between the undertaken experiments, and the dried extracts particles did not have good flow properties for direct compression. Wet granulation of dried extract containing 73% of plant extract, 25% of excipients Maltodextrin: Aerosil (1:1) and 2% of polyvinyl pyrrolidone produced particles with excellent flow properties for compression. Granulate compression without adding other excipients furnished tablets with high hardness and long disintegration times. However, granulates prior mixed with amide-lactose produced tablets with better physical properties, such as hardness and friability with acceptable values and adequate disintegration times.

A espécie Copaifera langsdorffii pertence à família Leguminosae Juss., sub-família Caesalpinioideae Kunth. No Brasil, espécies de copaifera são amplamente distribuídas nos estados do Amazonas, Pará e Ceará e são mundialmente conhecidas pelo oleorresina que pode ser extraído de forma sustentável do tronco de suas e árvores. Este oleorresina e suas frações voláteis são amplamente estudados. No entanto, poucos estudos se relacionam com a composição química e biológica de outras partes da planta. A atividade antilitiásica do extrato hidroalcoólico das folhas dessa espécie, evidenciada em estudos preliminares pelo grupo de pesquisa e já com pedido de depósito de patente, abriu perspectivas para investigação fitoquímica deste extrato e produção de comprimidos fitoterápicos. Assim, objetivou-se nesse estudo conhecer o perfil químico do extrato, isolar e identificar metabólitos secundários que possam ser utilizados como marcadores da espécie e/ou como padrões cromatográficos, utilizando diferentes modalidades cromatográficas. E ainda, realizar estudos de extração, secagem e de pré-formulação para produção de comprimidos de qualidade contendo teor de extrato em dose adequada à utilização em ensaios clínicos futuros. O perfil químico do extrato e frações obtidas após partição com solventes de polaridade crescente demonstra constituição majoritária de compostos polares. A fracão em AcOEt foi submetida às técnicas de cromatografia em coluna clássica e cromatografia contracorrente (HSCCC) propiciando o isolamento dos compostos 1 (quercetina-3-O--L-raminopiranosídeo) e 2 canferol-3-O--L raminopiranosídeo), após purificação em CLAE preparativa. A fração aquosa foi submetida às técnicas de cromatografia em coluna utilizando gel de sephadex LH-20 e cromatografia contracorrente, propiciando o isolamento dos compostos de 3-10, após purificação em CLAE preparativa. Os compostos 4, 6, 9 e 10 tiveram suas estruturas elucidadas e pertencem à classe dos ácidos galoilquínicos, identificados como ácido 6,4-dimetóxi-3,4-di-O-galoilquínico; ácido 6-metóxi-3,4,5-tri-O-galoilquínico; ácido 4,4-dimetoxi-3,4,5-tri-O-galoilquínico; e ácido 4-metóxil-3-O-galoilquínico, respectivamente. Os estudos de extração levaram à obtenção de três extratos com maior rendimento, sendo o processo de extração simples utilizando-se etanol:água 7:3 (45 mL) com 3 g de droga vegetal, o qual foi de escolha para produção do extrato avaliado no estudo de secagem por spray drying. Os resultados do estudo de secagem não revelaram diferenças significativas entre os experimentos avaliados e as partículas dos extratos secos obtidos não apresentaram boas características de fluxo para compressão direta. A granulação por via úmida do extrato seco contendo 73% de extrato, 25% dos adjuvantes Maltodextrina:Aerosil (1:1) e 2% de polivinil pirolidona, produziu partículas com características e propriedades de fluxo excelentes para a compressão. A compressão dos granulados sem adição de outros excipientes proporcionou comprimidos com dureza elevada e longos tempos de desintegração. No entanto, comprimidos produzidos por mistura prévia com granulado de amido+lactose, apresentaram melhores características físicas, sendo os valores de dureza e friabilidade aceitáveis e tempos de desintegração menores e próximos aos valores recomendados. / Copaifera langsdorffii belongs to Leguminosae Juss. family, sub-family Caesalpinioideae Kunth. In Brazil, Copaifera species are widely spread in Amazonas, Pará and Ceará states and are worldwide known by the oil-resin that can be extracted from its trunk. This oleoresin and its volatile fractions have been studied by many research groups. However, few studies are related to the chemical and biological composition of other plant parts, such as leaves. We have been investigating the antilitiasic activity of the hydroalcoholic extract from C. langsdorffii, and it have risen the in both the phytochemical investigation of the aerial parts and the production of tablets with the obtained extract. Thus, the aim of this study was to evaluate the leaf extract chemical profile, to isolate and identify the secondary metabolites to be used as chromatographic standards, using different chromatographic methods, for the analysis of plant materials, its extracts and products, as well as, to carry out studies of extraction, drying and preformulation to produce tablets containing a suitable dose of the extract for using in future clinical trials. Chemical profile of the extract and its fractions obtained after partition with solvents with increasing polarity revealed that the extract is majorly composed by polar compounds. The ethyl acetate fraction was submitted to classical column chromatography and high speed countercurrent chromatography (HSCCC) techniques, resulting in isolation of compounds 1 (quercetin-3-O--L-rhaminopiranoside) and 2 (kaempferol-3-O--L-rhaminopiranoside, after preparative HPLC purification. The aqueous fraction was submitted to column chromatography techniques using gel filtration (sephadex LH-20) and HSCCC yielding compounds 3 to10, after preparative HPLC purification. Compounds 4, 6, 9 and 10 were identified as galloylquinic acid derivatives 6\',4\'\'-dimethoxy-3,4-di-O-galloylquinic acid; 6\'\'\'-methoxy-3,4,5-tri-O-galloilquinic acid; 4\',4\'\'\'-dimethoxy-3,4,5-tri-O-galloylquinic acid; and 4- methoxy-3-O- galloylquinic acid, respectively. Studies of extraction process furnished three extracts with higher yielding, using a simple extraction process with ethanol: water 7:3 (45 mL) with 3g of plant biomass, which was chosen to obtain the extract for drying studies. Drying results showed no significant differences between the undertaken experiments, and the dried extracts particles did not have good flow properties for direct compression. Wet granulation of dried extract containing 73% of plant extract, 25% of excipients Maltodextrin: Aerosil (1:1) and 2% of polyvinyl pyrrolidone produced particles with excellent flow properties for compression. Granulate compression without adding other excipients furnished tablets with high hardness and long disintegration times. However, granulates prior mixed with amide-lactose produced tablets with better physical properties, such as hardness and friability with acceptable values and adequate disintegration times.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2018-10-01T20:16:20Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Aleane Francisca COrdeiro Barbosa - 2015.pdf: 1373807 bytes, checksum: 852f86f6142c6ac9c85c8ba972d4cfb5 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-10-02T11:41:50Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Aleane Francisca COrdeiro Barbosa - 2015.pdf: 1373807 bytes, checksum: 852f86f6142c6ac9c85c8ba972d4cfb5 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-02T11:41:50Z (GMT). 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The experiment lasted three periods of 28 days. At the end of each period, the performance and the external and internal egg quality were evaluated as the search for the presence of Escherichia coli in eggs; and at the end of the total period, the search for Escherichia coli in ovarian follicles and oviduct. Data were subjected to analysis of variance and means, when necessary, were compared by Tukey test (5%). For the Escherichia coli searching in eggs, follicles and oviduct, it was applied descriptive analysis (absolute and relative frequency). The inclusion of 40 mg / kg diet of barbatimão extract lead to worse feed conversion than the control treatment and decreased egg production compared to antibiotic treatment. The addition of 30 mg / kg diet of copaiba oleo resin did not influence the hens performance. The use of barbatimão extract lead to production of heavier eggs, and worse shell thickness and internal quality (UH) when compared to antibiotic treatment. Egg weight, the albumen percentage and the yolk index in the treatment with copaiba oleo resin were better than those of antibiotic treatment. However, the inclusion of copaiba oleo resin resulted in a lower yolk percentage when compared to antibiotic treatment. There was a lower frequency of isolation of Escherichia coli in intra-vaginal swabs samples from treatment with copaiba. The inclusion of barbatimão or copaiba provided lower frequency of isolation of E. coli in ovarian follicles in relation to antibiotic treatment. There was a lower frequency of isolation of E. coli in the oviduct with the addition of barbatimão extract when compared to antibiotic treatment. The treatment with copaiba oleo resin showed higher frequency of isolation of E. coli in the oviduct than the other treatments. The use of copaiba oleo resin or barbatimão extract resulted in lower frequency of isolation of Escherichia coli in the shell, albumen and yolk samples, in relation to antibiotic treatment. The inclusion of copaiba oleo resin may be an alternative to antibiotics in laying hens commercial diets. / A realização do presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da suplementação de óleoresina de copaíba ou extrato de Barbatimão na ração de poedeiras comerciais desafiadas com Escherichia coli. Foram utilizadas 200 poedeiras comerciais da linhagem Isa Brow (64 a 76 semanas de idade) sendo todas as aves inoculadas via intravaginal (0,5 mL de solução salina esterilizada a 0,85% contendo 8,8 x 109UFC/mL de Escherichia coli), alojadas em gaiolas e distribuídas em delineamento em blocos ao acaso (sendo o peso das aves blocado), com quatro tratamentos e cinco repetições de 10 aves. Os tratamentos foram: aves desafiadas recebendo: A – ração basal sem aditivos; B – ração basal + 30 mg/kg de antibiótico (halquinol); C – ração basal + 30 mg/kg de óleo-resina de copaíba; D – ração basal + 40 mg/kg de barbatimão. O experimento teve duração de três períodos de 28 dias. Ao final de cada período foi avaliado desempenho, qualidade externa e interna de ovos e pesquisa de Escherichia coli em ovos, e ao final do último período foi realizado pesquisa de Escherichia coli em folículos ovarianos e oviduto, e biometria de ovário e oviduto. Os dados de desempenho, qualidade externa e interna de ovos e biometria, foram submetidos a análise de variância e as médias, quando necessário, comparadas pelo teste de Tukey (5%). Para a pesquisa de Escherichia coli em ovos, folículos e oviduto foi aplicada análise descritiva (frequência absoluta e relativa). A inclusão de 40 mg/kg de ração, do extrato de barbatimão proporcionou pior conversão alimentar em relação ao tratamento controle e prejudicou a produção de ovos em relação ao tratamento com antibiótico. A adição de 30 mg/kg de ração, do óleo-resina de copaíba não influenciou no desempenho produtivo. A utilização do extrato de barbatimão proporcionou ovos mais pesados e pior espessura de casca e qualidade interna (UH) em relação ao tratamento com antibiótico. O peso do ovo, a porcentagem de albúmen e o índice de gema do tratamento com óleo-resina de copaíba se apresentaram melhores que o tratamento com antibiótico. No entanto a inclusão do óleo-resina de copaíba resultou em porcentagem de gema inferior em relação ao tratamento com antibiótico. Houve menor frequência de isolamento de Escherichia coli em amostras de suabes intravaginal do tratamento com copaíba. A inclusão do barbatimão ou da copaíba proporcionou menor frequência de isolamento de E. coli nos folículos ovarianos em relação ao tratamento com antibiótico. Houve menor frequência de isolamento de E. coli no oviduto com a adição do extrato de barbatimão em relação ao tratamento com antibiótico. Já o tratamento com óleoresina de copaíba apresentou maior frequência de isolamento de E. coli no oviduto que os demais tratamentos. A utilização do óleo-resina de copaíba ou extrato de barbatimão resultou em menor frequência de isolamento de Escherichia coli nas amostras de casca, albúmen e gema que o tratamento com antibiótico. Rações contendo óleo-resina de copaíba ou barbatimão promoveram peso de ovário semelhante ao tratamento com antibiótico. O peso do oviduto do tratamento com copaíba foi superior ao tratamento com antibiótico. A inclusão de óleo-resina de copaíba ou extrato de -barbatimão pode ser alternativa ao uso de antibióticos melhoradores de desempenho em dietas de poedeiras comercias.