Orientador : Prof. Dr. Waldemiro Gremski / Co-orientador : Prof. Dr. Carlos Ricardo Soccol / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Tecnologia, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Defesa: Curitiba, 20/12/2006 / Inclui referências : f. 87-95 / Área de concentração: Saúde animal e humana / Resumo: No infarto do miocárdio e na doença de Chagas existem alguns mecanismos fisiopatológicos em comum: perda de cardiomiócitos devido à isquemia, à redução da contratilidade e à disfunção cardíaca. A terapia celular vem propondo o tratamento para a falência cardíaca usando vários tipos celulares. Objetivos: Desenvolver e avaliar o método de co-cultivo de mioblastos esqueléticos e célulastronco mesenquimais para a terapia celular no infarto do miocárdio (IM) e na doença de Chagas (DC). Materiais e métodos: IM- 39 ratos completaram o estudo após um mês, 17 ratos receberam a terapia com o produto celular do co-cultivo e 22 ratos, receberam apenas meio na cicatriz. Na DC- 15 ratos completaram o estudo após um mês, 07 ratos receberam o produto celular de co-cultivos autólogos e 08 receberam apenas o meio. Todos os animais realizaram ecocardiograma antes e após um mês de terapia. Os parâmetros analisados foram: fração de ejeção ventricular esquerda (FEVE); volume sistólico e diastólico finais. A análise estatística pela ANOVA. O cocultivo de mioblastos esqueléticos e células-tronco mesenquimais mantido por um período de 14 dias (DMEN, 15% SFB, 1% Antibiótico, IGF-I e dexametasona). Análises histológicas, de rotinas, foram realizadas. Resultados: Entre as provas funcionais verificou-se no grupo IM FEVE, nos animais, que receberam células do co-cultivo de 23,52 8,67 a 31,45 8, 87 (p=0,006) e no grupo 26,68 6,92 a 22,32 6, 94 (p=0,004) e no grupo DC FEVE, nos animais que receberam células do cocultivo de 31,10 5,78 a 53,37 5, 84 (p<0,001) e no grupo controle, 36,21 3,70 a 38,19 7,03 (p= 0,426). O exame histológico revelou, nos modelos de miocardiopatia estudados, miogênese e angiogênese naqueles animais, que receberam o produto celular de co-cultivo. Conclusão: Estes resultados validam o produto celular do co-cultivo de mioblastos esqueléticos e de células-tronco mesenquimais para o tratamento dessas duas doenças. DESCRITORES: Células musculares esqueléticas, células-tronco, regeneração, miocárdio. / Abstract: In myocardial infarction and Chagas's disease some physiopathological aspects are common: cardiomyocyte loss due to ischemia leads to a reduction of contractility and heart function. Cell therapy has been proposed for the treatment of heart failure through transplant of various cells types. Objective: To develop and to evaluate the method of co-culture of skeletal muscle (SM) and mesenchymal stem cells (MSC) for cell therapy of heart failure in Myocardial Chagas's disease (MCD) and myocardial post-infarction (MI). Materials and methods: MI- 39 rats completed the study at one month. 17 rats received co-cultured cell therapy and 22 rats, only medium in the scar. MCD- 15 rats completed the study at one month. 7 rats received autogenous coculture cell therapy and 8 animals received only medium. All animals underwent ecocardiographic analysis at baseline and one month. The measures of Left Ventricular Ejection Fraction (LVEF), Left Ventricular End Systolic and Dyastolic Volume were registered and analyzed by ANOVA. The co-culture method of SM and MSC cells was performed at 14 days (medium culture: DMEN, with 15% FCS and 1% Antibiotic, IGF-I and dexamethasone). Standard stain analysis was done in the cells and tissue. Functional Results: MI- LVEF in the animals that had received the cocultured cells: 23,52 8,67 to 31,45 8, 87 p=0,006 versus control group: 26,68 6, 92 to 22,32 6, 94 p=0,004 and MCD- LVEF in animals that received the co-cultured cells: 31,10 5,78 to 53,37 5, 84 p<0,001 versus control group: 36,21 3,70 to 38,19 7,03 p= 0,426. Histopathogical Results: In both experimental model diseases, the analysis of the animals receiving co-cultured cells demonstrated a presence of myogenesis and angiogenesis. Conclusion: The results validate the product of the SM and MSC co-culture process for treatment in these diseases. KEY WORDS: Skeletal muscle cells, stem cell, regeneration, myocardium.

Orientador: Salomon Soriano Ordinola Rojas / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T00:59:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Miguel_GabrielAntonioStanisci_M.pdf: 2975905 bytes, checksum: c45b885c0ebe455da2be8fded7817e46 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Introdução: O transplante (TX) cardíaco é uma alternativa para os indivíduos com doença cardíaca terminal. Na evolução pós-TX, a ocorrência de episódios de rejeição é um evento frequente, sendo responsável pelo aumento da morbimortalidade. Uma alternativa relevante seria o emprego de um exame não invasivo que tivesse uma boa acurácia na detecção das alterações da função sisto-diastólica do coração transplantado, pois a biópsia endomiocárdica (BEM) não é um procedimento isento de complicações. Objetivo: Comparar a função ventricular esquerda entre os pacientes transplantados com rejeição cardíaca e os pacientes transplantados sem rejeição; utilizando como referência o grupo controle e correlaciona-la com rejeição cardíaca imunológica. Métodos: Foram realizados ecocardiogramas transtorácicos no período de janeiro de 2006 a janeiro de 2008, para a avaliação prospectiva de 47 pacientes; sendo 17 pacientes (36,2 %) pertencentes ao grupo controle (grupo GC), 18 (38,3%) pertencentes ao grupo de pacientes transplantados sem rejeição (TX0) e 12 (25,5%) pertencentes ao grupo de pacientes transplantados com rejeição (TX1). Comparou-se a função sisto-diastólica entre os três grupos (GC, TX0, TX1). Para o estudo da homogeneidade entre proporções foi utilizado o teste exato de Fisher. Para a análise da hipótese de igualdade entre os grupos em relação às medianas, utilizou-se o teste não-paramétrico de Kruskal-Wallis seguido do teste de comparações múltiplas. O nível de significância utilizado para os testes foi de 5%. Resultados: Os grupos não diferiram em relação à idade [34,0 (29,5 - 44,0) X 46,0 (33,5 - 51,5) X 39,0 (32,5 - 54,5) p = 0,354], ao peso [70,0 (57,5 - 85,0) X 66,5 (57,5 - 88,0) X 61,0 (57,5 - 73,5) p = 0,661], altura [1,65 (1,59 - 1,73) X 1,66 (1,64 - 1,70) X 1,69 (1,64 - 1,72) p = 0,821] e superfície corpórea [1,84 (1,58 - 1,98) X 1,75 (1,62 - 2,03) X 1,69 (1,63 - 1,88) p = 0,758]. O grupo GC quando comparado com o grupo TX0, apresentou alteração da função sisto-diastólica do ventrículo esquerdo, expressa através do aumento do Índice de Performance Miocádica (IPM), sendo esta mais significativa nos pacientes do grupo TX1 [0,38 (0,29 - 0,44) X 0,47 (0,43 - 0,56) X 0,58 (0,52 - 0,74) p <0,001]. Conclusão: Foi evidenciado que o Índice de Performance Miocárdica encontra-se aumentado nos pacientes transplantados, em relação ao grupo controle e não houve diferença significativa entre os dois grupos de pacientes transplantados; portanto, o ecocardiograma mostrou-se como exame de boa acurácia na detecção das alterações da função sisto-diastólica do coração transplantado e não foi confiável como método substituto da biópsia endomiocárdica para o diagnóstico seguro de rejeição cardíaca. / Abstract: Introduction: The transplant (TX) cardiac is an alternative for the individuals with terminal cardiac illness. In the evolution after TX, the occurrence of rejection episodes is a frequent event, being responsible for the increase of morbi-mortality. An excellent alternative would be the job of a not invasive examination that had a good acurácia in the detention of the alterations of the diastolic function of the transplantated heart, therefore the endomyocardial biopsy (BEM) is not an exempt procedure of complications. Objective: Compare the left ventricular function between patients transplated with rejection and cardiac transplant patients without rejection, using as reference the control group and correlated it with immunological rejection rate. Methods: Transthoracic echocardiograms in the period of January of 2006 had been carried through the January of 2008, for the prospective evaluation of 47 patients; being 17 patients (36,2 %) pertaining to the group it has controlled (group GC), 18 (38,3%) pertaining to the group of patients transplantated without rejection (TX0) and 12 (25,5%) pertaining ones to the group of patients transplantated with rejection (TX1). It was compared sisto-diastolic function between the three groups (GC, TX0, TX1). To study the homogeneity of proportions was used Fisher's exact test. For the analysis the hypothesis of equality between the groups in relation to the medians, we used the nonparametric Kruskal-Wallis test followed by multiple comparisons. The significance level used for the tests was 5%. Results: The groups did not differ in age [34.0 (29.5 to 44.0) X 46.0 (33.5 - 51.5) X 39.0 (32.5 - 54.5) p = 0.354 ], weight [70.0 (57.5 to 85.0) X 66.5 (57.5 to 88.0) X 61.0 (57.5 to 73.5) p = 0.661], height [ 1.65 (1.59 to 1.73) X 1.66 (1.64 - 1.70) X 1.69 (1.64 - 1.72) p = 0.821] and body surface area [1.84 ( 1.58 to 1.98) X 1.75 (1.62 - 2.03) X 1.69 (1.63 to 1.88) p = 0.758]. The GC group compared with the group TX0, had an alteration of the systolic-diastolic function of left ventricle, expressed by increasing the Miocardic Performance Index (IPM), which is more significant for patients in group TX1 [0.38 (0, 29 to 0.44) X 0.47 (0.43 to 0.56) X 0.58 (0.52 to 0.74) p <0.001]. Conclusion: It was shown that the myocardial performance index is increased in transplant patients in the control group and no significant difference between the two groups of transplant patients, so the echocardiogram showed to be taking good accuracy in the detection of systolic-diastolic function of the transplanted heart and was not a reliable method of biopsy substitute for the confident diagnosis of cardiac rejection. / Mestrado / Cirurgia / Mestre em Cirurgia

Orientador: Salomón Soriano Ordinola Rojas / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-24T03:31:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Miguel_GabrielAntonioStanisci_D.pdf: 3265608 bytes, checksum: 8e5fab35107186e1c25936f84d45682f (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Introdução: O transplante (TC) cardíaco é uma alternativa para os indivíduos com doença cardíaca terminal. Na evolução pós-TC, a ocorrência de episódios de rejeição é um evento frequente, sendo responsável pelo aumento da morbi-mortalidade. Uma alternativa relevante seria o emprego de um exame não invasivo que tivesse uma boa acurácia na detecção das alterações da função sisto-diastólica do coração transplantado, pois a biópsia endomiocárdica (BEM) não é um procedimento isento de complicações. Objetivo: Analisar o Índice de Performance Miocárdica como ferramenta para o diagnóstico de rejeição cardíaca e demonstrar sua possibilidade de triagem na seleção de pacientes para BEM. Método: Foram realizados ecocardiogramas transtorácicos no período de janeiro de 2006 a janeiro de 2008, para a avaliação prospectiva de 58 pacientes; sendo 17 pacientes (29,3 %) pertencentes ao grupo controle (grupo GC), 22 (37,9%) pertencentes ao grupo de pacientes transplantados sem rejeição (TX0) e 19 (32,9%) pertencentes ao grupo de pacientes transplantados com rejeição (TX1). Comparou-se a função sisto-diastólica entre os três grupos (GC, TX0, TX1). O teste de Qui-quadrado foi utilizado para verificar se as proporções de gênero e raça eram homogêneas. Para a comparação entre os três grupos, foi utilizado a ANOVA, em caso de normalidade (verificada por meio do teste de Kolmogorov-Smirnov) e homocedasticidade (verificada por meio do teste de Levene) entre as variáveis; caso contrário, optou-se por utilizar o teste não-paramétrico de Kruskal-Wallis. O nível de significância utilizado para os testes foi de 5%. Resultados: Os grupos não diferiram em relação à idade [38,47 (±11,17) X 41,18 (±13,83) X 45,95 (±12,87) p = 0,212], ao peso [71,95 (±15,90) X 68,68 (±13,14) X 66,09 (±11,91) p = 0,442], altura [1,66 (±0,11) X 1,67 (±0,05) X 1,68 (±0,06) p = 0,894] e superfície corpórea [1,82 (±0,25) X 1,78 (±0,18) X 1,75 (±0,17) p = 0,603]. O grupo GC quando comparado com o grupo TX0, apresentou alteração da função sisto-diastólica do ventrículo esquerdo, expressa através do aumento do IPM, sendo esta mais intensa nos pacientes do grupo TX1 [0,38 (0,29 - 0,39) X 0,47 (0,42 - 0,49) X 0,60 (0,52 - 0,71) p <0,001]. Conclusão: Foi evidenciado que o ÍPM encontra-se bastante aumentado nos pacientes transplantados com rejeição em relação aos pacientes transplantados sem rejeição e também em relação ao controle; portanto, este índice mostrou-se como informação não invasiva e de boa acurácia na detecção das alterações da função sisto-diastólica do coração transplantado, podendo auxiliar na triagem de pacientes transplantados, clinicamente descompensados e que anteriormente seriam submetidos à biópsia de rotina / Abstract: Introduction: The transplant (TC) cardiac is an alternative for the individuals with terminal cardiac illness. In the evolution after TC, the occurrence of rejection episodes is a frequent event, being responsible for the increase of morbi-mortality. An excellent alternative would be the job of a not invasive examination that had a good acurácia in the detention of the alterations of the diastolic function of the transplantated heart, therefore the endomyocardial biopsy (EMB) is not an exempt procedure of complications. Objective: Analyze the Myocardial Performance Index (MPI) as a tool for the diagnosis of cardiac rejection and demonstrate their ability to triage in the selection of patients for EMB. Methods: Transthoracic echocardiograms in the period of January of 2006 had been carried through the January of 2008, for the prospective evaluation of 58 patients; being 17 patients (29,3%) pertaining to the group it has controlled (group GC), 22 (37,9%) pertaining to the group of patients transplantated without rejection (TX0) and 19 (32,9%) pertaining ones to the group of patients transplantated with rejection (TX1). It was compared sisto-diastolic function between the three groups (GC, TX0, TX1). The Qui-quadrado test was used to verify that the proportions of gender and race were homogeneous. For comparison between groups, ANOVA was used, in case of normality (verified by the Kolmogorov-Smirnov test) and homoscedasticity (verified by Levene's test) between the variables; otherwise opted to using the nonparametric Kruskal-Wallis test. The significance level used for the tests was 5% Results: The groups did not differ in age [38,47 (±11,17) X 41,18 (±13,83) X 45,95 (±12,87) p = 0,212], weight [71,95 (±15,90) X 68,68 (±13,14) X 66,09 (±11,91) p = 0,442], height [1,66 (±0,11) X 1,67 (±0,05) X 1,68 (±0,06) p = 0,894] and body surface area [1,82 (±0,25) X 1,78 (±0,18) X 1,75 (±0,17) p = 0,603]. The GC group compared with the group TX0, had an alteration of the systolic-diastolic function of left ventricle, expressed by increasing the Miocardic Performance Index (IPM), which is more significant for patients in group TX1 [0,38 (0,29 - 0,39) X 0,47 (0,42 - 0,49) X 0,60 (0,52 - 0,71) p <0,001]. Conclusion: It was shown that the PMI is greatly increased in patients with transplant rejection compared to patients transplanted without rejection and also in relation to the control, so this index proved to be as non-invasive and accurate method for the detection of changes in systolic and diastolic function of the transplanted heart to assist in screening transplant patients clinically decompensated and who previously underwent biopsy would be routine / Doutorado / Fisiopatologia Cirúrgica / Doutor em Ciências