Resumo: Estudaram-se os efeitos anestésicos do extrato aquoso das folhas da Ottonia martiana, sobre a superfície ocular de cães hígidos, adultos, oftalmologicamente sadios, da raça Beagle. Compuseram-se três grupos de tratamento (n=15): grupo controle (GC), grupo proximetacaína (GP) e grupo Ottonia (GO), tratados respectivamente com solução fisiológica, colírio de cloridrato de proximetacaína a 0,5% e extrato aquoso de O. martiana na concentração de 18 mg/mL. Antes dos tratamentos, foram realizados o teste lacrimal de Schirmer a, a pressão ocular (POa) e a estesiometria corneal (Ea). Os tratamentos foram realizados no tempo 0 (T0) e decorridos 3 minutos (T3). Avaliaram-se a sensibilidade axial da córnea por estesiometria, após 5 e 10 minutos de T0, e a produção lacrimal e a pressão ocular, decorridos 10 minutos de T0. Realizaram-se a biomicroscopia com lâmpada em fenda, aos 10 e 20 minutos de T0, e o teste do tingimento pela fluoresceína, aos 20 minutos de T0. Os resultados foram comparados empregando-se o teste t de Student e de análise de variância Kruskal-Wallis, com nível de significância P ≤ 0,05. Relativamente à estesiometria, houve diminuição da sensibilidade corneal nos grupos GP e GO. Relativamente ao teste de Schirmer, observou-se diminuição no GP. Observou-se alteração clínica somente no GP, onde 13 animais apresentaram hiperemia conjuntival. Concluiu-se que a utilização do extrato aquoso de O. martiana como anestésico local no exame oftálmico em cães é factível e que a sua utilização não diminui a produção lacrimal nem causa alterações clínicas na superfície ocular de cães / Abstract: The anesthetics effects of aqueous extract of Ottonia martiana leaves on dog's ocular surface were studied. Forty five healthy, adult, ophthalmologically healthy Beagles were used and divided into three groups (n=15): control group (CG), proxymetacaine group (PG), and Ottonia group (OG). They were treated with 0,9% sodium chloride solution, 0,5% proxymetacaine hydrochloride and aqueous extract of O. martiana (18 mg/mL), respectively. The Schirmer tear test 1 (Schirmer 1), intraocular pressure (PO-1), and corneal esthesiometry (E0) was performed before the treatments. The animals received 1 drop of the respective treatment at time 0 (T0) and 3 minutes later (T3). Corneal sensibility was evaluated by esthesiometry, 5 and 10 minutes after T0. Lacrimal production and intraocular pressure were measured 10 minutes after T0. Slit lamp microscopy was performed 10 and 20 minutes after T0. Fluorescein staining was performed 20 minutes after T0. Student t-test and Kruskal-Wallis analysis of variance were used to compare the results. A P value of 0.05 or less was considered statistically significant. Esthesiometry revealed decrease in cornea sensibility on PG and OG groups. An significant decrease of lacrimal production was observed for PG. No significant clinical alteration was observed in OG. Mild conjunctival hyperemia was noticed in 13 animals of PG. It was concluded that the use of aqueous extract of O. martiana as a local anesthetic for ophthalmic examination in dogs is viable and that its use neither reduces the tear production nor causes clinical alterations on ocular surface of dogs / Orientador: José Luiz Laus / Coorientadora: Maria Alice Corrêa / Coorientador: Newton Nunes / Banca: Alexandre Lima de Andrade / Banca: Aline Adriana Bolzan / Mestre

Orientador: Karin Werther / Banca: Fabiano Montiani-Ferreira / Banca: Rosimeri de Oliveira Vasconcelos / Resumo: O bulbo do olho é uma parte do organismo pouco estudada e que carece de mais valores fisiológicos nas diversas espécies de animais. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi avaliar os cortes histológicos dos olhos de Falco tinnunculus (peneireiro-de-dorso-malhado), por meio da morfometria da córnea, retina, coróide e esclera. As aves eram adultas e de vida livre. Os resultados obtidos foram comparados entre machos e fêmeas e entre os olhos direito e esquerdo. Após enucleação dos olhos, os mesmos foram fixados em solução tamponada de formaldeído por 48 horas e posteriormente, descalcificados. Os olhos direitos foram cortados verticalmente (dorsoventral), e os esquerdos horizontalmente (temporonasal). Após inclusão em parafina, foram confeccionados cortes de 5m de espessura e corados pelas técnicas rotineiras de hematoxilina e eosina. Para a análise dos cortes, foram definidos e medidos, seis pontos (1 a 6) na retina, coróide e esclera, e três pontos referentes na córnea (A, B e C). Com um software de análise de imagens, avaliou-se a espessura em micrômetros da córnea total, e suas camadas (epitelial, "camada média", endotelial), além da retina, coróide e esclera nos seus respectivos pontos pré-determinados. Na córnea as maiores espessuras foram na periferia (ponto A e C) e as menores na área central (ponto B). As comparações entre as médias foram feitas pelo teste de Tukey (p<0,05). Nas fêmeas a retina foi mais espessa que nos machos. O dados descritos no trabalho complementam os conhecimentos básicos da histomorfologia do olho de Falco tinnunculus necessários para avaliação de cortes histopatológicos / Abstract: The bulb of the eye is not a well-studied part of the body and needs more physiological values for various animal species. In this manner, the objective of the study was to evaluate the histological eye Falco tinnunculus (commom kestrel), through measurements of the cornea, retina, choroid and sclera. The birds were adults from wild life. The results were compared between males and females and between the right and left eyes. After enucleation of the eyes, they were fixed in buffered formaldehyde for 48 hours and subsequently decalcified. The right eyes were cut vertically (dorsoventral), and left horizontally (temporonasal). After paraffin embedding, sections were prepared from 5m thick and stained using routine hematoxylin and eosin. For the analysis of the cuts, six points (1-6) in the retina, choroid and sclera, and three points on the cornea (A, B and C) have been defined and measured. With an image analyzing software, the corneal thickness and its layers (epithelium, "middle layer", endothelial), were evaluated in total microns, as well as the retina, choroid and sclera in their respective pre-determined points. Corneal thickness was greater in the periphery (A and C) and lower in the central area (B). Comparisons between means were made using the Tukey test (p <0.05). In females retina was thicker than the males. The data described in the paper complement the basic knowledge of histomorphology eye Falco tinnunculus for the assessment of histopathology / Mestre

Resumo: O endotélio corneal é essencial para a manutenção da transparência da córnea, é necessário um número mínimo de células endoteliais para a manutenção desta transparência. As alterações morfológicas e morfométricas do endotélio da córnea de gatos decorrentes do avanço da idade não estão ainda compreendidas e elucidadas. Objetivou-se estudar os parâmetros morfológicos e morfométricos do endotélio da córnea de gatos de diferentes idades, utilizando-se a microscopia especular. Avaliaram-se a densidade celular, a área celular média, o pleomorfismo e o polimegatismo. Empregaram-se 18 animais da espécie felina (Felis catus - LINNAEUS, 1758), machos ou fêmeas, subdivididos em três grupos com 6 animais cada, designados por: G1 (animais com idade entre 1 a 3 meses); G2 (animais com idade entre 5 a 12 meses) e G3 (animais com idades entre 24 a 40 meses). A microscopia especular de contato revelou que com o avanço da idade a densidade celular endotelial diminuiu, a área celular média e o pleomorfismo aumentaram e o polimegatismo apresentou valores constantes nos 3 grupos estudados. / Abstract: The corneal endothelium is essential to maintain the corneal transparency. Morphological and morphometric changes in the feline corneal endothelium as a function of age are little known. The purpose of this study was investigating the effect of age on endothelial morphology and morphometry in cats. The corneal endothelium was studied throught contact specular microscopy. The exam presented data as cell density, average cell area, polymegathism and pleomorphism. A total of 16 cats were evaluated in this study. The subjects were divided in three groups with six cats (Felis catus - LINNAEUS, 1758): G1 (cats with 1 to 3 months old); G2 (cats with 5 to 12 months old); G3 (cats with 24 to 40 months old). The specular microscopy revealed decrease of cell density with age. The cell area increase and pleomorphism increase as function of age. The polymegathism showed constants values on the three groups. / Orientador: José Luiz Laus / Coorientador: João Antonio Tadeu Pigatto / Banca: Marcia Rita Fernandes Machado / Banca: Aline Adriana Bolzan / Mestre

Orientador: José Luiz Laus / Banca: Aline Adriana Bolzan / Banca: Cristiane dos Santos Honsho / Banca: Alexandre Lima de Andrade / Banca: Paola Castro Moraes / Resumo: Estudaram-se os efeitos da morfina 1% sobre a reparação corneal, avaliando-se a expressão das metaloproteinases-1, -2, -9, do colágeno tipo IV e da interleucina 10 (IL-10), em coelhos submetidos à ceratectomia lamelar. Dois experimentos foram concebidos, empregando-se 56 animais. No primeiro, 6 coelhos foram tratados com 50μl de morfina 1% (GM), a cada 4 horas, totalizando 4 aplicações diárias. Outros 6 coelhos receberam solução fisiológica (GC) nas mesmas condições adotadas para o GM. Após as ceratectomias, as córneas foram avaliadas até sua epitelização. No segundo, 40 animais foram empregados e as córneas colhidas decorridos 1, 3, 6, 9 e 12 dias das ceratectomias para histologia, imunoistoquímica (MMP-1, MMP-9 e colágeno tipo IV), zimografia (MMP-2 e MMP-9) e ELISA (IL-10). Mais 4 coelhos saudáveis foram utilizados para como controle negativo.O tempo médio de reetitelização não diferiu entre os grupos. Após a ceratectomia, observou-se elevação significativa quanto ao limiar de sensibilidade corneal da 6ª até 96a hora da avaliação. Não se observaram alterações histológicas e quanto ao índice de imunomarcação da MMP-1, -9 e do colágeno do tipo IV entre os grupos estudados . À zimografia, níveis mais elevados de MMP-2 e de MMP-9 foram observados no GM, ao 6º e ao 9º dias após as ceratectomias. Observou-se decréssimo das formas latente e ativa da MMP-9 ao 12º dia. Observou-se, ao 1º dia de avaliação, redução nos níveis de IL-10, comparativamente às córneas saudáveis, mas sem significância estatística entre os grupos, em qualquer dos períodos estudados. O uso local de morfina 1% promoveu analgesia corneal de 4 dias em coelhos submetidos à ceratectomia lamelar e não retardou a epitelização. Elevação do quantitativo da metaloproteinase-1, -2 e -9, em córneas tratadas com morfina 1%, não contraindica seu uso... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study aimed evaluate the effects of continual topical administration of 1% morphine on corneal analgesia in rabbits subjected to lamellar keratectomy until completion of the corneal wound healing and to assess the expression of matrix metalloproteinases (MMPs)-1, -2 and -9, type IV collagen and interleukin-10 (IL-10) during the treatment. Fifty-six animals were used. In the first experiment, 12 rabbits were divided into two groups, one (n=6) received 50 μl of topical 1% morphine (MG) every 4 hours while the other group (n=6) received 0.9% NaCl instead (CG). After keratectomies, corneas were evaluated until healing. In the second experiment, 40 animals were divided, 4 rabbits of each group were euthanized 1, 3, 6, 9, and 12 days after keratectomy and corneal samples were processed for histology, immunohistochemistry (MMP- 1, -9 and IV collagen), zymography (MMP-2 and -9) and ELISA (IL-10). Other 4 healthy rabbits were used as negative control. In healthy corneas, CTT did not differ significantly before and after morphine instillation. Mean corneal reepithelization rate did not differ between groups. Following keratectomy, CTT increased from the 6h to 96h time points. Scores of leukocyte infiltration, MMP-1, MMP-9 and type IV collagen expression did not differ between groups at any time point. Zymography indicated that levels of the active forms of MMP-2 and MMP-9 increased on days 6 and 9 in the MG. The levels of both latent and active forms of MMP-9, as well as of the latent form of MMP-2 decreased to values close to those of healthy corneas on day 12. IL-10 levels measured on days 1 to 6 were reduced as compared to those of healthy corneal tissue and returned to levels close to those of healthy corneas. Topical application of 1% morphine promoted corneal analgesia for up to 4 days and did not delay corneal reepithelization... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: José Luiz Laus / Banca: Paola Castro Moraes / Banca: Cristiane dos Santos Honsho / Resumo: Estudou-se os efeitos do cetorolaco de trometamina 0,5%, sem conservante, sobre a inflamação ocular, avaliando-se a reparação epitelial e a sensibilidade corneal, em coelhos submetidos à ulceração corneal química com hidróxido de sódio (NaOH) 1 mol/L. Constituíram-se dois grupos (n=12). O primeiro grupo recebeu 30 μl de cetorolaco de tometamina 0,5%, sem conservante (OT), a cada seis horas, em uma das córneas ulceradas e 30 μl de solução salina fisiológica 0.9% (OC) na córnea adelfa, totalizando 4 aplicações diárias, por um período de 24 horas. O limiar de sensibilidade corneal foi avaliado por estesiometria antes e posteriormente a lesão ser realizada, a intervalos regulares de quatro horas. Avaliou-se ainda o edema corneal, a hiperemia conjuntival, o blefarospasmo e o diâmetro das úlceras, empregando-se, biomicroscópio com lâmpada em fenda, teste do tingimento pela fluoresceína, imagem digitalizada para posterior avaliação em programa Image J, até a reepitelização completa. Decorridas 24 horas da abrasão nos animais do primeiro grupo (n=6) e 55 horas nos animais do segundo grupo (n=6), estes foram submetidos à eutanásia. Ambas as córneas (OT e OC) foram avaliadas histologicamente e à microscopia eletrônica de varredura. Utilizou-se Análise de Variância para Medidas Repetidas, considerando significativos os valores de p ≤ 0,05. Conclui-se que mesmo sem a adição de conservantes e a despeito do bom efeito analgésico, o cetorolaco de trometamina a 0,5%, sem conservante, retarda a reparação cicatricial do epitélio corneal em coelhos submetidos a abrasões com hidróxido de sódio 1 mol/L. / Abstract: Studied the effects of ketorolac tromethamine 0.5% without preservatives on ocular inflammation, evaluating the sensitivity and corneal epithelial repair in rabbits subjected to chemical corneal ulceration with sodium hydroxide (NaOH) 1 mol / L. Constituted two groups (n = 12). The first group received 30 μl of tometamine ketorolac 0.5%, without preservative (OT) every six hours in one of ulcerated corneas and 30 μl of saline solution 0.9% (OC) in the other cornea a total of four applications daily for a period of 24 hours. The threshold of corneal sensitivity was assessed by esthesiometry before and after the injury to be held at regular intervals of four hours. It was also evaluated corneal edema, conjunctival hyperemia, blepharospasm and the diameter of the ulcers, using, biomicroscopy with slit lamp, the fluorescein dye test, the scanned image for further evaluation in program Image J, until complete reepithelialization. After 24 hours of abrasion in the animals of first group (n = 6) and 55 hours in animals of the second group (n = 6), they were euthanized. Both corneas (OT and OC) were evaluated histologically and scanning electron microscopy. We used ANOVA for repeated measures, considering significant p values ≤ 0.05. We conclude that even without the added preservatives and despite the good analgesic effect of ketorolac tromethamine 0.5%, without preservative, slowing the repair of corneal epithelium wound healing in rabbits subjected to abrasion with sodium hydroxide 1 mol/L. / Mestre

Orientador: Alexandre Lima de Andrade / Banca: Adriana Morales / Banca: Renée Laufer Amorim / Resumo: As células-tronco (stem cells) têm um papel fundamental nos processos reparativos e regenerativos da córnea. A exata localização destas é bem conhecida no olho do homem, bem como as suas funções. Entretanto, as mesmas ainda não foram descritas em medicina veterinária, sequer a sua localização em olhos de animais de companhia, tratando-se assim, de assunto que merece novas e originais investigações. Anticorpos monoclonais que reagem superficialmente com as citoqueratinas são empregados para determinar este tipo celular presente nos tecidos, no entanto, existem outros marcadores capazes de reagir antigenicamente com núcleos celulares. Entre eles, o PCNA (antígeno nuclear de proliferação celular) e o Ki-67 (antígeno de proliferação Ki-67) são capazes de marcar células em proliferação. Uma vez que isso nunca fora descrito anteriormente, e considerando-se a necessidade e importância científica em se determinar a localização de células em proliferação na superfície ocular de cães, o presente estudo teve por objetivos: 1) determinar a expressão de células em proliferação pela marcação imunoistoquímica com anticorpos monoclonais anti-PCNA e anti-MIB-1 (anticorpo monoclonal anti-Ki-67), bem como, sua localização na superfície ocular; 2) comparar se há diferença estatística significante na marcação dessas células em diferentes idades. Para tanto, foram utilizados 24 cães jovens e adultos, sadios, dos quais o bulbo ocular esquerdo foi removido, fixado e corado pela H.E. (hematoxilina e eosina), além da imunoistoquímica empregando-se os anticorpos monoclonais anti-PCNA e anti-MIB-1. Concluiu-se que a presença de células em proliferação imunomarcadas pelo PCNA e pelo MIB-1 foi observada em diferentes tecidos da superfície ocular de cães, sendo os tecidos mais marcados: o limbo e o epitélio da córnea...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The stem-cells has a fundamental paper in process of cornea’s tissue repair and regeneration. In man, the well-know localization and functions had been descriebed a long time ago, however the same ones had not yet been descriebed in veterinary medicine, at least your localization in eyes of company animals, what deserve new and original inquiries. Monoclonais antibodies that react superficially with the cytokeratins are used to determine this cell type presence in ocular surface. However, exist another markers capable to react with cell nucleoli, for example, PCNA and MIB-1 are capable to mark proliferation cells. Considering the necessity and scientific importance to determining the localization of proliferation cells on dog’s ocular surface, a time that, never was descriebed previously, the present study had for objectives: 1) determineted the expression of proliferation cells immunohistochemically by PCNA and MIB-1 and its localization in ocular surface; 2) compare if has statistically significant difference in immunoexpression of proliferation cells in different ages. In the study was used 24 healthy dogs, young and adults, witch had the left eyes removed, fixed in buffered formalin and stained with H.E. (hematoxilin and eosin) and with monoclonal antibodies anti-PCNA and anti-MIB-1. The presence of immunostained cells was most observed in corneal ephithelium and limbo. Probably the immunostained cells are stem-cells in dog’s ocular surface, however for such evidence it is necessary ...(Complete abstract click electronic address below) / Mestre