Neste trabalho, realizou-se o estudo do Crambe Abyssinica, uma planta originária do Mediterrâneo, mas já adaptada às condições brasileiras, e tendo uma semente rica em óleo, o qual, devido ao alto teor de ácido erúcico, não pode ser destinado ao consumo humano, sugerindo seu uso como fonte de biomassa. O óleo da semente de crambe foi extraído a partir das sementes de crambe, comparando métodos convencionais (prensagem e soxhlet) com um método alternativo (Extração com fluido supercrítico), obtendo-se rendimentos semelhantes. Uma tentativa de obter biodiesel metílico a partir do óleo de crambe foi realizada, alcançando uma razoável conversão em ésteres somente através da transesterificação supercrítica. As tortas residuais das extrações do óleo de crambe foram submetidas à pirólise rápida, produzindo bio-óleo e resíduos sólidos. Os bio-óleos foram analisados cromatograficamente, mostrando a presença de resíduos de óleo vegetal e um série de compostos (hidrocarbonetos, compostos oxigenados e nitrogenados) com predominância de fenóis, hidrocarbonetos aromáticos e olefínicos e aminas. A grande quantidade de alquil fenóis, guaiacóis, piridinas e anilinas é interessante para a indústria química e farmacêutica. / In this work, it was carried out the study of Crambe abyssinica, a plant originated in the Mediterranean but already adapted to the Brazilian conditions, and having a seed rich in vegetable oils, which can not be intended for human consumption due to its high content of erucic acid, suggesting its use as biomass source. The oil was extracted from the seed of crambe, comparing the conventional methods (pressing and soxhlet) with an alternative method (Supercritical Fluid Extraction), showing similar yields. An attempt to obtain methylic biodiesel from the crambe oil was also performed, achieving a reasonable conversion of esters only by supercritical transesterification. Residual oil cakes of these extractions were subjected to fast pyrolysis, producing bio-oil and char. Bio-oils were analyzed chromatographically, showing the presence of residues of vegetable oil and a series of compounds (hydrocarbons, oxygenated and nitrogenated compounds) with a predominance of phenols, olefinic and aromatic hydrocarbons and amines. The large amount of alkyl phenols, guaiacols, pyridines and anilines is interesting for chemical and pharmaceutical industry. An attempt to obtain methylic biodiesel from the crambe oil was also performed, achieving a reasonable conversion of esters only by supercritical transesterification.

SANTOS, E. A. Policetídeos citotóxicos da esponja marinha Plakortis angulospiculatus. 2016. 115 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-10-26T17:33:17Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_easantos.pdf: 6351038 bytes, checksum: d89c4ed6498cffbc1b919c4e8c3fb9a7 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-10-26T17:33:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_easantos.pdf: 6351038 bytes, checksum: d89c4ed6498cffbc1b919c4e8c3fb9a7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-26T17:33:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_easantos.pdf: 6351038 bytes, checksum: d89c4ed6498cffbc1b919c4e8c3fb9a7 (MD5) Previous issue date: 2016-07-19 / As part of a bioprospecting study to identify compounds from marine organisms with anticancer potencial compounds from the brazilian coast, we investigated the cytotoxicity of an ethanolic extract derived from the marine sponge Plakortis angulospiculatus, widely known as a source of cyclic endoperoxides with various pharmacological activities, including cytotoxic. The bioguided fractionation of the extract led to the isolation of 4 polyketides with a dihydrofuran ring (3, 4, 5, 6), 5- (1) and 6- membered cyclic endoperoxides (2, 7-10), including three new plakortides, 7,8-dihydroplakortide E (1), 2 and 10, and known compounds such as spongosoritin A (5), plakortide P (9). To compare the cytotoxicity of both groups in human tumor cells of colon (HCT-116), prostate (PC-3M) and non-tumor (MRC-5) by the MTT assay, we observed different activity profiles, as compounds that contained a dihydrofuran ring were generally less activeand displayed a time-dependent activity. Six membered cyclic plakortides, on the other hand, exhibited greater cytotoxicity and time-independent effect. The modes underlying the cytotoxic actions of 2, 3, 5, 7, and 9 were further investigated using HCT-116 cells. Flow cytometry studies demonstrated cell density reduction accompanied by a reduction in membrane integrity at higher concentrations, with the exception of 2. Further inspection through cell cycle analyses indicated that 3 and 5 induced blockage at G0/G1. To the contrary, 2, 7 and 9 delivered a G2/M arrest and presence of mitotic figures, however this effect was independent of microtubule polymerization, as demonstrated by confocal microscopy. The evaluation of plakortides 2 and 9 on breast cancer cell line (MCF-7) revealed no changes on cell cycle, but increased DNA fragmentation, indicating cell death by apoptosis. Using the trypan blue assay, we verified a synergistic effect between plakortide P (9) and cyclosporin A, a calcineurin inhibitor, which induced a decrease of over 80% in viability of HCT-116 cells when compared to cells treated only with plakortide P (9) or cyclosporin A, which suggests the involvement of calcium-dependent pathways in the effect presented by plakortide P. / Como parte do estudo de bioprospecção para a identificação de compostos com potencial anticâncer de organismos da costa brasileira, investigamos a citotoxicidade do extrato etanólico da esponja marinha Plakortis angulospiculatus, reconhecida como fonte de endoperóxidos cíclicos com várias atividades farmacológicas, inclusive citotóxica. O fracionamento bioguiado do extrato levou ao isolamento de 4 policetídeos com anel dihidrofurano (3, 4, 5, 6), endoperóxidos cíclicos de 5 (1) e 6 membros (2, 7, 9, 10), incluindo 3 plakortídeos inéditos, 7,8-dihidroplakortídeo E (1), 2 e 10, além dos conhecidos, espongosoritina A (5), plakortídeo P (9) e derivados. Ao compararmos a citotoxicidade dos dois grupos de compostos em células tumorais humanas de cólon (HCT-116) e próstata (PC-3M), e não tumoral (MRC-5) pelo ensaio do MTT, observamos perfis diferentes de atividade, onde compostos com anel dihidrofurano foram, em geral, menos ativos, e exibiram citotoxicidade tempo-dependente, enquanto os plakortídeos com anéis de 6 membros exibiram maior citotoxicidade e efeito independente do tempo de incubação. Os mecanismos de ação citotóxicas dos compostos 2, 3, 5, 7 e 9 foram investigados usando células HCT-116. Estudos com citometria de fluxo indicaram redução da densidade celular acompanhado de redução de células com membrana íntegra nas maiores concentrações testadas, com exceção do composto 2. Análises do ciclo celular indicaram que 3 e 5 induziram bloqueio de G0/G1, enquanto 2, 7 e 9 causaram bloqueio na fase G2/M, com presença de figuras mitóticas e efeito independente da polimerização de microtúbulos, demonstrada por microscopia confocal. A avaliação de 2 e 9 em linhagem tumoral de mama (MCF-7) não revelou mudanças no ciclo celular, porém, aumentou a fragmentação de DNA, um indicativo de morte celular por apoptose. Através do teste de azul de tripan, verificamos um sinergismo entre plakortídeo P (9) e ciclosporina A, um inibidor da enzima calcineurina, demonstrado pela diminuição de mais de 80% da viabilidade das células HCT-116, quando comparado às células tratadas somente com plakortídeo P (9) ou com ciclosporina A, indicando um possível envolvimento de vias de sinalização dependentes de cálcio no efeito exercido pelo plakortídeo P.

Neste trabalho, realizou-se o estudo do Crambe Abyssinica, uma planta originária do Mediterrâneo, mas já adaptada às condições brasileiras, e tendo uma semente rica em óleo, o qual, devido ao alto teor de ácido erúcico, não pode ser destinado ao consumo humano, sugerindo seu uso como fonte de biomassa. O óleo da semente de crambe foi extraído a partir das sementes de crambe, comparando métodos convencionais (prensagem e soxhlet) com um método alternativo (Extração com fluido supercrítico), obtendo-se rendimentos semelhantes. Uma tentativa de obter biodiesel metílico a partir do óleo de crambe foi realizada, alcançando uma razoável conversão em ésteres somente através da transesterificação supercrítica. As tortas residuais das extrações do óleo de crambe foram submetidas à pirólise rápida, produzindo bio-óleo e resíduos sólidos. Os bio-óleos foram analisados cromatograficamente, mostrando a presença de resíduos de óleo vegetal e um série de compostos (hidrocarbonetos, compostos oxigenados e nitrogenados) com predominância de fenóis, hidrocarbonetos aromáticos e olefínicos e aminas. A grande quantidade de alquil fenóis, guaiacóis, piridinas e anilinas é interessante para a indústria química e farmacêutica. / In this work, it was carried out the study of Crambe abyssinica, a plant originated in the Mediterranean but already adapted to the Brazilian conditions, and having a seed rich in vegetable oils, which can not be intended for human consumption due to its high content of erucic acid, suggesting its use as biomass source. The oil was extracted from the seed of crambe, comparing the conventional methods (pressing and soxhlet) with an alternative method (Supercritical Fluid Extraction), showing similar yields. An attempt to obtain methylic biodiesel from the crambe oil was also performed, achieving a reasonable conversion of esters only by supercritical transesterification. Residual oil cakes of these extractions were subjected to fast pyrolysis, producing bio-oil and char. Bio-oils were analyzed chromatographically, showing the presence of residues of vegetable oil and a series of compounds (hydrocarbons, oxygenated and nitrogenated compounds) with a predominance of phenols, olefinic and aromatic hydrocarbons and amines. The large amount of alkyl phenols, guaiacols, pyridines and anilines is interesting for chemical and pharmaceutical industry. An attempt to obtain methylic biodiesel from the crambe oil was also performed, achieving a reasonable conversion of esters only by supercritical transesterification.

Neste trabalho, realizou-se o estudo do Crambe Abyssinica, uma planta originária do Mediterrâneo, mas já adaptada às condições brasileiras, e tendo uma semente rica em óleo, o qual, devido ao alto teor de ácido erúcico, não pode ser destinado ao consumo humano, sugerindo seu uso como fonte de biomassa. O óleo da semente de crambe foi extraído a partir das sementes de crambe, comparando métodos convencionais (prensagem e soxhlet) com um método alternativo (Extração com fluido supercrítico), obtendo-se rendimentos semelhantes. Uma tentativa de obter biodiesel metílico a partir do óleo de crambe foi realizada, alcançando uma razoável conversão em ésteres somente através da transesterificação supercrítica. As tortas residuais das extrações do óleo de crambe foram submetidas à pirólise rápida, produzindo bio-óleo e resíduos sólidos. Os bio-óleos foram analisados cromatograficamente, mostrando a presença de resíduos de óleo vegetal e um série de compostos (hidrocarbonetos, compostos oxigenados e nitrogenados) com predominância de fenóis, hidrocarbonetos aromáticos e olefínicos e aminas. A grande quantidade de alquil fenóis, guaiacóis, piridinas e anilinas é interessante para a indústria química e farmacêutica. / In this work, it was carried out the study of Crambe abyssinica, a plant originated in the Mediterranean but already adapted to the Brazilian conditions, and having a seed rich in vegetable oils, which can not be intended for human consumption due to its high content of erucic acid, suggesting its use as biomass source. The oil was extracted from the seed of crambe, comparing the conventional methods (pressing and soxhlet) with an alternative method (Supercritical Fluid Extraction), showing similar yields. An attempt to obtain methylic biodiesel from the crambe oil was also performed, achieving a reasonable conversion of esters only by supercritical transesterification. Residual oil cakes of these extractions were subjected to fast pyrolysis, producing bio-oil and char. Bio-oils were analyzed chromatographically, showing the presence of residues of vegetable oil and a series of compounds (hydrocarbons, oxygenated and nitrogenated compounds) with a predominance of phenols, olefinic and aromatic hydrocarbons and amines. The large amount of alkyl phenols, guaiacols, pyridines and anilines is interesting for chemical and pharmaceutical industry. An attempt to obtain methylic biodiesel from the crambe oil was also performed, achieving a reasonable conversion of esters only by supercritical transesterification.

Orientador: Marco Antônio Martin Biaggioni / Banca: Osmar Delmanto Junior / Banca: Ivan Fernandes de Souza / Resumo: A prensagem mecânica é o método mais empregado para extração do óleo de diversos tipos de oleaginosas, constituindo-se em uma operação simples que não exige mão de obra qualificada e é facilmente adaptável a diversos tipos de grãos. Entretanto, as prensas contínuas de pequena capacidade, com grande potencial de utilização nas pequenas comunidades rurais, apresentam baixa eficiência de extração, deixando uma quantidade significativa de óleo na torta de crambe. A operação de retirada das cascas dos frutos de crambe, antes da prensagem, constitui-se em um fator importante que pode otimizar a extração mecânica do óleo de crambe, reduzindo o teor de óleo que se perde pela casca. Por outro lado, a possibilidade de danificação mecânica durante a compressão e atrito, comprometendo o potencial de armazenamento dos grãos, deve ser considerada. O objetivo deste trabalho foi avaliar o rendimento de óleo extraído mecanicamente do crambe, contendo diferentes percentagens de casca, bem como, o possível efeito imediato e latente do processo de descasque dos grãos submetidos a diferentes sistemas de armazenagem. Este trabalho foi desenvolvido em duas fases. Na primeira fase, foram realizados os testes de rendimento de extração do óleo pelo método mecânico de prensagem a frio, a partir do crambe submetido aos seguintes tratamentos de descasque: grãos com casca (testemunha), grãos sem casca, grãos com 10% de casca e grãos com 20% de casca. Para avaliar o efeito do descasque foi utilizado um de... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The mechanical pressing (expelling) is the most commonly used method for extracting oil from various types of oilseeds, constituting of a simple operation that requires no skilled labor and is easily adaptable to various types of grain. However, small expellers, with great potential for use in small rural communities, have low extraction efficiency, leaving a significant amount of oil in the crambe presscake. The operation of the crambe fruit hulling before the pressing is an important factor that can optimize the mechanical extraction of the crambe oil, reducing the oil contained that is lost by the hull. On the other hand, the possibility of mechanical damage during compression and friction, compromising the grain storage potential, should be considered. The objective of this work was to evaluate the yield of mechanically extracted oil from the crambe, containing different percentages of hull, as well as the possible immediate and latent effect of the hulling process of the grains submitted to different storage systems. This work was developed in two phases. In the first phase, the oil extraction yield tests were performed by the cold pressing method, having the crambe submitted to the following hulling treatments: whole grains (control), totally dehulled (Hulless), partially dehulled with 10% hull, and partially dehulled with 20% hull. To evaluate the dehulling effect, a completely randomized experimental design was used, with four treatments and four replications. The res... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Lireny Aparecida Guaraldo Gonçalves / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-22T11:28:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ambiel_HiriaCristinaIfanger_M.pdf: 1422027 bytes, checksum: 9c0f8cb70e90f3805ce08294a44ca9c2 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O spread é um creme de chocolate espalhável, composto basicamente de óleo, gordura vegetal, açúcar, cacau em pó e lecitina de soja. Atualmente o uso de spread de chocolate não se restringe apenas ao varejo, mas também têm sido largamente aplicado no mercado de panificação, que o utiliza para decoração de produtos de confeitaria, recheios, coberturas etc. Pelo alto teor de óleo, um dos problemas enfrentados pela indústria é a exsudação, que é agravada em temperaturas elevadas de armazenamento e transporte. Uma das formas de se evitar a exsudação de óleo é a utilização de hardfats, que são gorduras de alto ponto de fusão e que aceleram a velocidade de cristalização da gordura, ocluindo o óleo da formulação. No entanto, para uso específico em spreads, esta matéria-prima é importada, o que dificulta o seu fornecimento e o seu custo torna-se elevado. Assim, o desenvolvimento de uma opção de hardfat nacional para uso específico em spreads de chocolate, visando à redução da exsudação de óleo durante o armazenamento, é interessante sob o ponto de vista da indústria de alimentos. A partir da análise da composição de ácidos graxos da amostra de hardfat importada, optou-se pela utilização de óleo de algodão (OA) e óleo de crambe (Crambe abyssinica) totalmente hidrogenado (OCTH) para a composição da hardfat nacional. A produção da hardfat foi realizada através da interesterificação química, em escala laboratorial, de misturas destes óleos, nas proporções de 90:10, 80:20, 70:30, 60:40 e 50:50 OA:OCTH. O estudo dos perfis destas misturas foi feito pela comparação das amostras antes e após a reação de interesterificação com a hardfat importada. Análises de perfil de ácidos graxos, conteúdo de gordura sólida, isoterma de cristalização das gorduras puras e das misturas das gorduras presentes na formulação do spread foram realizadas para definição da fração de OA:OCTH que apresentasse o resultado próximo ao da hardfat importada. As frações 60:40 e 50:50 OA:OCTH apresentaram os melhores resultados, sendo então analisadas termicamente através da Calorimetria de Varredura Diferencial, Difração de Raio-X e Microscopia Sob Luz Polarizada, juntamente com a hardfat importada. Estas gorduras foram escolhidas e aplicadas na formulação de spread de chocolate com o objetivo de avaliar a exsudação de óleo durante o armazenamento em temperaturas altas. Verificouse que a fração 50:50 OA:OCTH apresentou resultados semelhantes ao da hardfat importada, indicado que esta hardfat poderá ser uma opção à indústria brasileira para minimizar a exsudação de óleo em spread de chocolate / Abstract: The spread is a spreadable chocolate cream, consisting essentially of oil, vegetable shortening, sugar, cocoa powder and soya lecithin. Currently the use of chocolate spread is not restricted to retail, but it has also been widely applied by the bakery market that uses this product in confectionery product as fillings, covertures etc. Because of the high amount of oil, one of the problems that the industry faces is the exudation, which is exacerbated at elevated temperatures during transport or storage. One way to avoid oil exudation is using hardfats which occludes the oil and accelerates the crystallization rate of the fat because of their high melting point. However, since this raw material is imported it makes supply more difficult and increases its price, thus developing a national hardfat for specific use in chocolate spreads aimed at reducing oil exudation during Storage is interesting from the point of view of food industry. After analyzing the fatty acid composition of imported hardfat (HF) we chose to use cottonseed oil (OA) and fully hydrogenated crambe oil (OCTH) (Crambe abyssinica) for the composition of the national hardfat. At laboratory scale, the production of hardfat was performed by chemical interesterification of mixtures of these oils in proportions of 90:10, 80:20, 70:30, 60:40 and 50:50 OA: OCTH. The study on the profiles of such mixtures was made by comparing the samples before and after interesterification reaction with the HF. In order to define the fraction of OA: OCTH which has similar results as the HF, some analysis were performed on fatty acid profiles, solid fat content, crystallization isotherm of pure fats and mixtures of fats presented in the formulation of the spread. The fractions 60:40 and 50:50 OA: OCTH showed the best results, being afterwards thermally analyzed by Differential Scanning Calorimetry, X-ray Diffraction and Polarized Light Microscopy. These fats have been selected and applied in the formulation of chocolate spread in order to evaluate the oil exudation during storage at high temperatures. It was found that the fraction 50:50 OA: OCTH showed similar results to the HF indicating that this may be an option for the Brazilian industry to minimize exudation of oil in chocolate spread during storage and transportation / Mestrado / Tecnologia de Alimentos / Mestra em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Célia Regina Lopes Zimback / Banca: Antônio de Pádua Sousa / Banca: Thomaz Figueiredo Lobo / Resumo: O uso de efluente de esgoto tratado e de lodo de esgoto compostado representam uma boa oportunidade para o setor agrícola de suprimento hídrico e nutricional às plantas, além da agricultura ser um destino adequado, seguro e benéfico desses resíduos quando corretamente manejados. Assim, objetivou-se com esse estudo avaliar o efeito da água residuária tratada e do lodo de esgoto compostado como substituto parcial, total e em doses superiores à adubação nitrogenada convencional, no solo e na cultura do crambe. O experimento foi conduzido em ambiente protegido em vasos de PVC com volume útil de 45,5 L, no Departamento de Solos e Recursos Ambientais, pertencente à Faculdade de Ciências Agronômicas da Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (FCA/UNESP), Botucatu/SP, no período de julho à outubro de 2015. Foi utilizado um delineamento inteiramente casualizado em arranjo de parcelas subdivididas; nas parcelas foram empregados dois tipos de água para irrigação, água potável e efluente de esgoto tratado, e nas subparcelas sete níveis de adubação nitrogenada, totalizando quatorze tratamentos com dez repetições. Os tratamentos dentro de cada parcela são representados por: T0 - sem adubação nitrogenada; T1 - 100% de adubação nitrogenada mineral; T2 - 50% de adubação nitrogenada mineral + 50% adubação nitrogenada proveniente do lodo de esgoto compostado; e T3, T4, T5 e T6 correspondem à 100%, 150%, 200% e 250% da adubação nitrogenada proveniente do lodo de esgoto compostado, respectivamente. Os dados relativos às variáveis estudadas foram analisados estatisticamente por meio do software SISVAR e submetidos à análise de variância à 5% de probabilidade, sendo as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de significância. Optou-se por refazer a análise estatística dos tratamentos que receberam somente lodo de esgoto compostado, adotando-se ... / Abstract: The usage of treated sewage effluent and composted sewage sludge represents a good opportunity for the agricultural sector of water supply and plant nutrition, besides being an adequate, safe and beneficial end for the agricultural for these residues when correctly handled. Thus, this study was aimed to evaluate the treated sewage effluent and the composted sewage sludge as a partial substitute, total and in doses superior to the conventional nitrogen fertilization, on the soil and on the crambe culture. The experiment was conducted in a protected environment of PVC vases with useful volume of 45,5L, at the Department of Soils and Environmental Resources of Agricultural Sciences Faculty, belonging to Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (FCA/UNESP), Botucatu/SP, between July and October of 2015. The experimental design was completely randomized in a split plot arrangement; using the plots two types of irrigation water, potable water and treated sewage effluent and the subplots seven levels of nitrogen fertilization, adding up fourteen treatments with ten repetitions. The treatments within each parcel are represented by: T0 - no nitrogen fertilization; T1 - 100% mineral nitrogen fertilization; T2 - 50% mineral nitrogen fertilizer; + 50% composted sewage sludge; and T3, T4, T5, T6 corresponding to 100%, 150%, 200% and 250% of nitrogen fertilizer from the composted sewage sludge, respectively. The data concerning the variables were analyzed statistically through the SISVAR software and were submitted to a variance analysis to 5% of probability, being those averages compared using the Tukey test to 5% of significance. It was opted to redo the statistical analysis of the treatments that only had received the composted sewage sludge, adopting the regression analysis. The use of treated sewage effluent provided increment of components development and production. The conventional ... / Mestre

Made available in DSpace on 2016-08-29T15:36:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_5137_Elias Terra Werner.pdf: 13839375 bytes, checksum: b03a590088721f6fc2feb1ba810f9f39 (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 / Crambe (Crambe abyssinica) pertence à família Brassicaceae, originário da Etiópia e principalmente destinado à produção de forragem (30 a 32% de proteína bruta). Atualmente, tem sido bastante cultivado visando à extração de óleo vegetal. Com os atuais incentivos à busca de fontes de energias renováveis, o cultivo de crambe vem ganhando papel de destaque na produção de biodiesel por suas diversas vantagens, como: (a) rápido ciclo de vida (colhida em torno de 90 dias); (b) alta produção de biomassa; (c) alta produtividade de sementes (1000 e 1500 kg ha-1); (d) menor custo de produção em relação a outras fontes oleaginosas, como, canola, girassol e soja; (e) um percentual de óleo total na semente entre 32 e 38%, superando, por exemplo, a soja; (f) potencial de fitorremediação, eficiente na descontaminação de arsênio, cromo e outros metais pesados; e (g) elevado percentual de ácido erúcico (50 a 60%) sendo útil na indústria de plástico e lubrificante. Devido aos poucos trabalhos realizados com crambe, abre-se um vasto campo de investigações científicas que tenham como objetivo desenvolver as potencialidades dessa cultura e, consequentemente, melhorar os aspectos agronômicos e tecnológicos para seu emprego na indústria de biodiesel. Nesse contexto, as técnicas de cultivo in vitro foram importantes tanto para a propagação massal, quanto como ferramenta para uma possível aplicação de outras técnicas biotecnológicas, contribuindo para uma produção homogênea, fiel e em larga escala. Portanto, este trabalho teve como objetivo geral avaliar as condições mais favoráveis à germinação, estabelecimento in vitro e micropropagação de Crambe abyssinica Hochst., além de verificar possíveis alterações genéticas e anatômicas, possibilitando a regeneração e produção de plântulas viáveis. Para a germinação e estabecimento in vitro de crambe, as condições mais favoráveis foram em meio B5 ou WPM, na presença ou ausência de pericarpo e na presença de luz. Na micropropagação dessa espécie, uma frequência satisfatória de regeneração de brotos foi obtida a partir de segmentos apicais utilizados como explante em meio contendo 5 μM de BAP (6-benzilaminopurina), e o alongamento foi satisfatório com 1 μM de GA3 (ácido giberélico). Os marcadores moleculares ISSR (Inter-Simples Sequence Repeats) utilizados para a análise da estabilidade genética indicaram que o segmento apical de crambe é um explante confiável para a micropropagação de plantas geneticamente verdadeiras (true-to-tipe), ou seja, mantém a estabilidade genética. As diversas fontes de citocininas e concentrações utilizadas neste trabalho não promoveram mudanças, no sentido de alterar a organização e/ou a espessura em relação ao controle, e as alterações observadas na estrutura e espessura das folhas dos tratamentos de aclimatização prejudicaram o processo de estabelecimento da plântula ex vitro. Contudo, existe a necessidade de um enraizamento e aclimatização eficiente para completa propagação in vitro de crambe. Portanto, este protocolo de regeneração de plantas in vitro de crambe pode ser útil no processo de criação e desenvolvimento de novas cultivares em um tempo mais curto e no melhoramento genético usando explantes apicais. Palavras-chaves: crambe, biodiesel, in vitro, reguladores de crescimento

Crambe crambe (Schmidt, 1862), espèce largement retrouvée en Méditerranée, est la source de nombreuxalcaloïdes guanidiniques (crambescines et crambescidines). Les voies de biosynthèse de ces métabolitessecondaires n’ont pas encore été démontrées. Il a cependant été proposé que les crambescidines seraientproduites à partir de polycétides, suggérant ainsi la possible implication de micro-organismes dans leurbiosynthèse. Cependant les quelques études portant sur la présence ou non de bactéries associées à cette épongesont contradictoires. Durant cette thèse, nous avons caractérisé la communauté bactérienne associée à C. crambepar l’utilisation de techniques à la fois moléculaires et microscopiques, mettant en évidence l’associationspécifique entre une bêtaprotéobactérie et cette éponge méditerranéenne. La présence d’un micro-organismespécifique au sein du mésohyle de l’éponge pose alors la question du rôle de ce dernier au sein de son hôte etplus particulièrement sa possible implication dans la synthèse des alcaloïdes guanidiniques. L’étude de ladiversité microbienne cultivable par la mise en place d’une procédure d’acclimatation et la conception de diversmilieux de cultures, a permis l’isolement de micro-organismes minoritairement associés à C. crambe, mais n’acependant pas conduit à l’isolement de la bêtaprotéobactérie spécifique. La comparaison des empreinteschimiques (CLHP/DAD/ELSD – CLHP/ESIMS) des extraits de l’éponge et des bactéries cultivées, a révélé queces micro-organismes minoritaires n’étaient pas à eux seuls producteurs de ces métabolites bioactifs. La bactériemajoritaire, principale candidate dans la synthèse des métabolites n’étant pas cultivable, nous avons développédeux études complémentaires afin d’apporter des éléments de réflexion quant à sa possible implication. Laculture ex situ de colonies C. crambe accompagnée d’un stress pH ainsi que l’étude de la distribution spatiale insitu des composés par imagerie par spectrométrie de masse se révèlent prometteuses bien qu’elles n’aient pas, àce jour permis d’identifier le possible rôle de la bêtaprotéobactérie dans la biosynthèse de ces métabolites. / Crambe crambe (Schmidt, 1862), is a marine sponge widely distributed in the Mediterranean Sea and known toproduce bioactive guanidine alkaloids (crambescins and crambescidins). While the biosynthetic pathways ofthese metabolites remains unknown, bio-mimetic chemical synthesis of crambescidins suggested a possiblecontribution of microorganisms in their biosynthesis. Contrastingly, it had been reported via electron microscopythat bacteria were absent in the tissues of this sponge. Thus to shed light onto these contrasting results I studiedthe microbial community associated with C. crambe using alternative approaches. Using molecular andmicroscopic techniques, we demonstrated that a single bacterial species affiliated to the Betaproteobacteria ispresent in abundances commonly found in low microbial abundance sponges, and dominates the bacterialcommunity associated with C. crambe. This finding suggests a possible implication of bacteria the biosynthesisof C. crambe’s guanidine alkaloids. The use of acclimatization procedure and diverse cultivation approachesallowed the isolation of associated microorganisms which were rare or absent among the community describedvia tag pyrosequencing but not isolation of the dominant betaproteobacterium. CLHP/DAD/ELSD andCLHP/ESIMS fingerprints of extracts from C. crambe and from the isolated bacteria showed no evidence of theimplication of these cultured micro-organismes in the synthesis of C. crambe’s metabolites. Finally in order toevaluate the potential role of the uncultivated betaproteobacterial symbiont in the biosynthesis of guanidiniumalkaloids, preliminary experiments using two alternative approaches were attempted. In the first I subjectedsponges to a pH stress and evaluated changes in secondary metabolite profiles, while collecting samples formicrobial community analysis. In the second I tried different mass spectrometry imaging techniques to localizeguanidinium alkaloids in C. crambe tissues. While these experiments did not allow to resolve the question of apossible implication of the dominant betaproteobacterium in the biosynthesis of the pentacyclic guanidinealkaloids, I was able to gather interesting results that will guide future studies towards resolving this question.

Orientador: João Luis Zocoler / Coorientador: José Renato Zanini / Banca: Marco Antonio Martin Biaggioni / Banca: Alexandre Barcellos Dalri / Banca: Luiz Fabiano Palaretti / Banca: Rodrigo Domingues Barbosa / Resumo: Devido ausência de trabalhos conclusivos sobre a demanda hídrica do crambe, existe a necessidade de investigar o comportamento da cultura frente à variação do armazenamento de água no solo, já que a cultura é cultivada tipicamente em épocas de pouca ocorrência de chuva. Diante disto, este trabalho teve por objetivo mensurar a evapotranspiração do crambe em diferentes níveis de irrigação, sob condições de ambiente protegido, a fim de avaliar sua capacidade de tolerância ao estresse hídrico. O experimento foi conduzido em dois ciclos, sendo o primeiro no período de 31/08/2015 a 12/12/2015 (média de 99 dias) e o segundo de 02/05/2016 a 21/08/2016 (média de 108 dias), desenvolvido no Departamento de Engenharia Rural, pertencente à Faculdade de Ciências Agronômicas (FCA/UNESP) em Botucatu, SP. Utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado com quatro repetições e seis níveis de irrigação (excesso 50%, excesso 25%, "CC" vaso, déficit 25%, déficit 50% e déficit 65%), cada unidade experimental foi composta por um vaso com duas plantas. Inseriu-se também um tratamento em "CC" vaso, porém, com a cobertura do solo vedada para isolar o efeito da evaporação, avaliando assim a fração da transpiração na evapotranspiração da cultura. O manejo da irrigação foi realizado através de pesagens diárias mantendo-se a umidade do solo de acordo com cada tratamento aplicado. Foram avaliadas variáveis fenométricas, produtivas, teor de óleo e eficiência fotossintética, sendo os dados submetidos à a... / Abstract: Due to the absence of conclusive studies about the water demand of crambe, there is a need to investigate the behavior of the crop in relation to the variation of soilless water flow, which is typically cultivated in times of low rainfall. crop is cultivated typically in times of low rainfall. The objective of this work was to measure evapotranspiration of crambe at different irrigation levels under greenhouse conditions to evaluate the capacity to tolerate water stress. The experiment was conducted in two cycles, the first in the period from August 31 to December 12, 2015 (99 days cyclo) and the second from May 02 to August 21, 2016 (108 days cyclo), developed in Department of Rural Engineering, belonging to the College of Agronomic Sciences (FCA / UNESP) at Botucatu, SP. A completely randomized design with four replications and six irrigation levels (50% excess, 25% excess, "CC" vase, 25% deficit, 50% deficit and 65% deficit), each experimental unit composed by one vase with two plants. A treatment in "CC" vase was also inserted, however, with soil cover sealed to isolate the effect of evaporation, thus assessing the fraction of transpiration in evapotranspiration of the crop. Irrigation management was carried out by daily weighing, maintaining the soil moisture according to each treatment applied. The phenotypic, productive, oil content and photosynthetic efficiency variables were evaluated. Data were submitted to analysis of variance at 5% of probability and to the Tukey ... / Doutor