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Activity of phenolic synthesis pathway enzymes during the development of peduncles clones cashew (Anacardium occidentale L.) / Atividade de enzimas da via de sÃntese dos fenÃlicos durante o desenvolvimento de pedÃnculos de clones de cajueiro (Anacardium occidentale L.)

Aline Gonzaga Cunha 25 February 2015 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / The dwarf cashew apple (Anacardium occidentale L.) is a tropical plant, originated in Brazil, which is fruit species with high potential for fresh consumption and for industrial processing. With the discovery of bioactive compounds in the cashew apple are necessary studies of the activity of enzymes of the synthesis of phenolic compounds, such as phenylalanine ammonia lyase (PAL), UDP-glucose: trans-cinnamate β-D-glycosyltransferase (UGT), flavonol synthase (FLS) and leucoanthocyanidin reductase (LAR). Soon, this study aimed to determine the activity of these enzymes in CCP 76 and BRS 189 dwarf cashew clones in three different stages of maturation, and to establish the phenolic profile in these stages. Reaction products were identified and quantified by LC-DAD. PAL activity decreases with maturation for dwarf cashew clones. UGT enzyme in the CCP 76 clone stage 4 showed the highest enzyme specific activity than in other stages of development for that clone. Whereas BRS 189 clone, the highest activity was in the mature cashew apple. Quercetin synthesis was evidenced in stage 4 for the two clones analyzed. The enzymes involved in the metabolism phenolic behave differently, showing the complexity of this biosynthetic pathway that varies between clones and during the development of cashew apple. Further studies, with mass spectrometer linked HPLC, will elucidate the profile of the compounds present in cashews apple lyophilized for chemical characterization of these in different stages of maturation. Therefore, the understanding of the enzymatic metabolism between the clones and during cashew apple development represent a real potential for the development of new products with functional properties and promotion of human health. / O cajueiro (Anacardium occidentale L.) Ã uma planta tropical, originÃria do Brasil, que se destaca como espÃcie frutÃfera com elevada potencialidade para o consumo in natura e para o processamento industrial. Com a descoberta de compostos bioativos presentes nos pedÃnculos, se fazem necessÃrios estudos da atividade de enzimas da sÃntese dos compostos fenÃlicos, tais como a fenilalanina amÃnia liase (PAL), UDP-glicose: trans-cinamato β-D- glicosiltransferase (UGT), flavonol sintase (FLS) e leucoantocianidina redutase (LAR). Logo, esse estudo objetivou determinar a atividade dessas enzimas, em pseudofrutos de cajueiro-anÃo-precoce dos clones CCP 76 e BRS 189 em trÃs diferentes estÃdios de maturaÃÃo, alÃm de estabelecer o perfil de fenÃlicos nestes referidos estÃdios. Os produtos resultantes das reaÃÃes enzimÃticas foram identificados e quantificados por LC-DAD. A atividade da PAL decresce com o amadurecimento dos pseudofrutos. A enzima UGT no estÃdio 4 do clone CCP 76 apresentou a maior atividade enzimÃtica especÃfica que nos outros estÃdios de desenvolvimento para o referido clone. Enquanto no clone BRS 189, a maior atividade deteve-se no caju maduro. A maior sÃntese de quercetina no caju foi evidenciada no estÃdio 4 para os dois clones estudados. As enzimas envolvidas no metabolismo de fenÃlicos se comportam diferentemente, demonstrando a complexidade dessa rota biossintÃtica que varia entre os clones e durante o desenvolvimento dos pedÃnculos de cajueiro. Estudos posteriores, com CLAE acoplada a espectrÃmetro de massa, irÃo elucidar melhor o perfil dos compostos presentes em cajus liofilizados para caraterizaÃÃo quÃmica destes em diferentes estÃdios de maturaÃÃo. Portanto, o entendimento do metabolismo enzimÃtico entre os clones e durante o desenvolvimento do pedÃnculo representam um potencial real para o desenvolvimento de novos produtos com propriedades funcionais e promoÃÃo da saÃde humana.
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Desenvolvimento e validaÃÃo de metodologia cromatogrÃfica para determinaÃÃo de bisfenol A em simulantes de alimentos de ensaios de migraÃÃo / Development and validation of chromatographic method for the determination of bisphenol A in food simulants of migration tests.

Gilberto Ferreira Linhares Junior 25 May 2012 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento e metodologia cromatogrÃfica para a determinaÃÃo de bisfenol A em quatro diferentes simulantes de alimentos utilizando cromatografia lÃquida de alta eficiÃncia e detector de arranjo de diodo (PDA) para suporte em enasios de migraÃÃo. Os simulantes utilizados foram A (Ãgua purificada), B (soluÃÃo aquosade Ãcido acÃtico a 3%), C (soluÃÃo aquosa de etanol a 10%) e D (soluÃÃo aquosa de etanol a 95%). A avaliaÃÃo preliminar das condiÃÃes de anÃlise foi conduzida com a finalidade de estabelecer aquelas que conferem os melhores resultados, os quais foram o sistema de fase mÃvel acetonitrila-Ãgua na proporÃÃo volumÃtrica 70:30, temperatura de 40ÂC do forno da coluna e comprimento de onda em 201 nm. O tempo de retenÃÃo do bisfenol A encontrado foi de 3,25 minutos. Para os simulantes, o mÃtodo de tratamento consistiu da evaporaÃÃo de 1 ml de amostra amostra a 60ÂC com duraÃÃo de 1 hora e 45 minutos (A e C), 2 horas (B) e 1 hora (D). Em sequÃncia, o mÃtodo foi avaliado com relaÃÃo aos parÃmetros de validaÃÃo analÃtica, incluindo linearidade, limite de detecÃÃo e de quantificaÃÃo, repetibilidade, precisÃo intermediÃria entre analistas diferentes e entre dias diferentes, recuperaÃÃo,seletividade e robustez. O mÃtodo desenvolvido para o simulante A apresentou coeficiente de determinaÃÃo (rÂ) 0,9988 ou superior no intervalo testado (50 a 2000 ppb); limite de detecÃÃo e de quantificaÃÃo , respectivamente, 14,7 ppb e 48,9 ppb; coeficiente de variaÃÃo para repetibilidade de 2,07%, para a precisÃo inter-dias de 1,05% e para a precisÃo inter-analistas de 1,76%; recuperaÃÃo de 97,9% (CV= 1,3%) (50 ppb), 99,2% (CV= 0,7%) (1000 ppb) e 103,6% (CV= 0,4%). Os resultados obtidos para o simulante B incluem coeficiente de determinaÃÃo (rÂ) 0,9972 ou superior; limite de detecÃÃo e de quantificaÃÃo, respectivamente, 7,8 ppb e 26,0 ppb; coeficientes de variaÃÃo para repetibilidade de 3,74%, precisÃo inter-dias de 0,14% e precisÃo inter-analistas de 0,2%; recuperaÃÃo de 94,8% (CV= 4,8%) (50 ppb), 99,8% (CV= 0,2%) (1000 ppb) e 92,3% (CV= 1,2%) (2000 ppb). Para o simulante C os resultados incluem coeficiente de determinaÃÃo (rÂ) 0,9988 ou superior; limite de detecÃÃo e de quantificaÃÃo, respectivamente, 4,8 ppb e 16,1 ppb; coeficiente de variaÃÃo para repetibilidade de 2,84%, precisÃo inter-dias de 1,37%e precisÃo inter-analistas de 0,14%; recuperaÃÃo de104,6% (CV= 2,5%) (50 ppb), 99,8% (CV= 1,3%) (1000 ppb) e 102,5% (CV= 2,9%) (2000 ppb). Os resultados para o simulante D foram r 0,9984 ou superior; limite de detecÃÃo e de quantificaÃÃo,respectivamente, 13,7 ppb e 45,6 ppb; coeficiente de variaÃÃo para repetibilidade de 2,0%, precisÃo inter-dias de 1,9% e precisÃo inter-analistas de1,2%; recuperÃÃo de 92,6% (CV= 1,76%) (50 ppb), 99,9% (CV= 0,9%) (1000 ppb) e 104,8% (CV= 2,7%) (2000 ppb). NÃo foram observados interferentes importantes para o mÃtodo testado, mostrando-se robusto. / This study aimed to develop and chromatographic method for the determination of bisphenol A in four different food simulants using high performance liquid chromatography and diode array detector (PDA) to support in enasios migration. The simulating used were A (purified water), B (solution aquosade 3% acetic acid), C (aqueous 10% ethanol) and D (aqueous 95% ethanol). Preliminary assessment of the analytical conditions was conducted in order to establish those that confer the best results, which were the system of mobile phase acetonitrile-water in the ratio 70:30 by volume, 40  C oven and length of the column wavelength of 201 nm. The retention time of the bisphenol A was found to be 3.25 minutes. For simulating the method of treatment consists of evaporation of sample 1 ml of sample at 60  C with duration of 1 hour and 45 minutes (A and C), 2 hours (B) and 1 hour (D). In sequence, the method was evaluated with respect to the parameters of analytical validation, including linearity, limit of detection and quantification, repeatability, intermediate precision between different analysts and between different days, recovery, selectivity and robustness. The method for simulating the coefficient for determining (r Â) or greater than 0.9988 in the range tested (50 to 2000 ppb); detection limit and quantitation, respectively, 14.7 ppb and 48.9 ppb; coefficient variation in repeatability of 2.07% for the inter-day precision of 1.05% and the accuracy of inter-Analyst 1.76%, recovery of 97.9% (CV = 1.3%) (50 ppb ), 99.2% (CV = 0.7%) (1000 ppb) and 103.6% (CV = 0.4%). The results for the simulant B includes coefficient of determination (r Â) 0.9972 or higher; limit of detection and quantification, respectively, 7.8 ppb and 26.0 ppb; coefficients of variation for repeatability of 3.74%, inter day precision, accuracy and 0.14% cross-Analyst 0.2%, 94.8% recovery (CV = 4.8%) (50 ppb) and 99.8% (CV = 0.2% ) (1000 ppb) and 92.3% (CV = 1.2%) (2000 ppb). For the simulant C results include a coefficient of determination (r Â) 0.9988 or higher; limit of detection and quantification, respectively, 4.8 ppb and 16.1 ppb, coefficient of variation for repeatability of 2.84%, accuracy inter-day precision of 1.37% and inter-analysts of 0.14%; de104 recovery, 6% (CV = 2.5%) (50 ppb), 99.8% (CV = 1.3%) ( 1000 ppb) to 102.5% (CV = 2.9%) (2000 ppb). The results for simulating D was 0.9984 r  or more, detection limit and quantitation, respectively, 13.7 ppb and 45.6 ppb; coefficient of variation of 2.0% to repeatability, accuracy of an inter-day 9% and accurate inter-de1 analysts, 2%; recuperÃÃo 92.6% (CV = 1.76%) (50 ppb) and 99.9% (CV = 0.9%) (1000 ppb) and 104 8% (CV = 2.7%) (2000 ppb). There were no significant interferences to the method tested and proved to be robust.
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AvaliaÃÃo das potencialidades biotecnolÃgicas da semente de goiaba (Psidium guajava L.) / Evaluation of biotechnological potential of the guava seed (Psidium guajava L.)

Ana Maria Athayde UchÃa Thomaz 20 May 2014 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / FundaÃÃo de Amparo a Pesquisa do Estado do Piauà / Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / VÃrios estudos tÃm associado efeitos benÃficos à saÃde, ao consumo regular de frutos, vegetais, grÃos e à presenÃa de substÃncias antioxidantes nesses alimentos, assim, o presente trabalho objetivou avaliar as potencialidades biotecnolÃgicas da semente de goiaba (Psidium guajava L.), em pà atravÃs de tÃcnicas instrumentais cientificamente reconhecidas. Foram analisadas sementes de goiaba vermelha em pÃ, da variedade Paluma cedidas por uma indÃstria produtora de polpa congelada de frutos. Foram elaborados produtos de panificaÃÃo com substituiÃÃo de 5 e 10% da farinha de trigo pela semente de goiaba em pÃ, e avaliada a aceitabilidade e a intenÃÃo de compra. Foram realisadas anÃlise de composiÃÃo nutricional, compostos bioativos, qualidade microbiolÃgica e perfil de Ãcido graxo da semente de goiaba em pÃ. Extratos acetÃnico, etanÃlico e metanÃlico foram utilizados para quantificar os teores de fenÃlicos totais, flavanÃides totais, taninos totais, determinar a atividade antioxidante por diferentes mÃtodos in vitro (DPPH, sistema β- caroteno/Ãcido linoleico e Rancimat) e avaliar a toxicidade frente à Artemia salina sp. Identificou-se e a quantificou-se por cromatografia lÃquida de alta eficiÃncia (CLAE) os compostos fenÃlicos no extrato acetato de etila. Os resultados permitiram comprovar que a substituiÃÃo de 5% e 10% de farinha de trigo na massa do bolo doce e na pizza sabor portuguesa apresentaram melhor aceitabilidade e intenÃÃo de compra, comparado ao produto sem substituiÃÃo. A composiÃÃo quÃmica e nutricional da semente de goiaba em pà exibiu quantidades variÃveis de macro e micronutrientes, com alta concentraÃÃo de fibra dietÃtica (63,94 g/100g), proteÃna (11,19 g/100g), ferro (13,8 mg/100g), zinco (3,31 mg/100g) e reduzido teor calÃrico (182 kcal/100g). Apresentou quantidades significativas de compostos bioativos como Ãcido ascÃrbico (87,44 mg/100g), carotenoides totais (1,25 mg/100 g), licopeno (182  0.09 Âg/100g) e fibra dietÃtica insolÃvel (63,55 g/100g). O perfil lipÃdico mostrou uma predominÃncia de Ãcido graxo insaturado (87,06%), especialmente Ãcido linolÃico (w6) e Ãcido olÃico (w9). NÃo apresentou contaminaÃÃo microbiana e nem toxicidade frente a Artemia salina sp. O extrato acetÃnico apresentou maior concentraÃÃo de compostos fenÃlicos, flavonÃides e taninos totais 49,70Â0,48 mgEAG/g; 1,529Â0,04 mgEQ/g; 41,159Â2,64 mgEAT/g, respectivamente. O extrato acetÃnico tambÃm obteve o maior poder antioxidante, no ensaio de DPPH, IC50 de 4,33Â0,08 Âg/mL. No sistema de autooxidaÃÃo do β-caroteno/Ãc. linolÃico, o extrato etanÃlico (IC50 0,193Â0,07Âg/mL) apresentou atividade antioxidante estatisticamente semelhante ao BHT. Quanto ao ensaio de Rancimat, os extratos etanÃlico (6,41Â0,07 h) e acetÃnico (6,35Â0,00 h), conseguiram preservar a estabilidade oxidativa do Ãleo de soja por um perÃodo de tempo maior e estatisticamente nÃo diferiu do Ãleo de soja adicionado de BHT (6,44Â0,01 h). Dos compostos fenÃlicos identificados o resveratrol e a cumarina foram os que apresentaram maior concentraÃÃo, 39,0Â0,02 e 48,79Â0,02 mg/100g, respectivamente. Assim, conclui-se que a semente de goiaba em pà podem ser consideradas uma fonte barata e rica em compostos antioxidantes. Sua utilizaÃÃo seria uma alternativa viÃvel para evitar o desperdÃcio e contribuir para minimizar o impacto ambiental, alÃm da possibilidade de serem incorporados nas indÃstrias de alimentos, farmacÃuticas e nutracÃuticas / Several studies have associated beneficial effects on health to the regular consumption of fruits, vegetables, grains due to the presence of antioxidants in these foods, and so the present study aimed to evaluate the potential of biotech guava seed (Psidium guajava L.), and the main metabolites responsible for its antioxidant activity. Powder from red guava seeds was analyzed, made from the Paluma variety donated by an industry producing frozen fruit pulp. Bakery products were prepared with the substitution of 5 and 10% of wheat flour by guava seed powder, and the acceptability and purchase intent were measured. Analyses of nutritional composition, bioactive compounds, microbiological quality and profile fatty acid of the guava seed powder were carried out. Acetonic, ethanol and methanol extracts were used to quantify the levels of total phenolics, total flavonoids, tannins, to determine the antioxidant activity in different in vitro methods (DPPH, β-carotene / linoleic acid system and Rancimat) and to evaluate the toxicity from Artemia salina sp. The phenolic compounds in ethyl acetate extract were identified and quantified by high performance liquid chromatography (HPLC). The results showed that replacing 5% and 10% of wheat flour in sweet cake and Portuguese flavor pizza dough showed better acceptability and purchase intention, compared to the product without replacements. The chemical and nutritional composition of guava seed powder exhibited varying amounts of macro and micronutrients, with a high concentration of dietary fiber (63.94 g/100 g), protein (11.19 g/100 g), iron (13.8 mg / 100 g), zinc (3.31 mg/100 g) and reduced calorie (182 kcal/100g). Significant amounts of bioactive compounds such as ascorbic acid (87.44 mg/100g), total carotenoids (1.25 mg/100 g), lycopene (182  0.09 μg/100g) and insoluble dietary fiber (63.55 g/100 g) were also found. The lipid profile showed a predominance of unsaturated fatty acid (87.06%), especially linoleic acid (w6) and oleic acid (w9). a microbialogic test showed negative contamination, and no toxicity was found using Artemia salina sp. The acetonic extract showed the highest concentration of phenolic compounds, flavonoids and tannins 49.70  0.48 mgEAG / g; 1.529  0.04 mgEQ / g; 41.159  2.64 mgEAT / g, respectively. The acetonic extract also showed the highest antioxidant powder, in the DPPH assay, IC50 of 4.33  0.08 mg / mL. In the autoxidation of β-caroteno/ linoleic acid system, the ethanol extract (IC50 0.193  0.07 mg / mL) showed antioxidant activity statistically similar to BHT. The Rancimat test, the ethanolic extracts (6.41  0.07 hr) and acetone (6.35  0.00 hr) were able to preserve the oxidative stability of soybean oil for a longer period of time and did not statistically differ from soybean oil added BHT (6.44  0.01 hr). Of the phenolic compounds identified, resveratrol and coumarin presented the highest concentrations, 39.0  0.02 and 48.79  0.02 mg/100g, respectively. Thus, it can be concluded that guava seed powder can be considered an abundant source of antioxidants. Its use would be a feasible alternative to avoid waste and contribute to minimizing the environmental impact, in addition to its incorporation in the food, pharmaceutical and nutraceutical industries.

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