CUNHA, Aline Gonzaga. Atividade de enzimas da via de síntese dos fenólicos durante o desenvolvimento de pedúnculos de clones de cajueiro (Anacardium occidentale L.). 2015. 60 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-08-24T14:29:59Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_agcunha.pdf: 1915595 bytes, checksum: ddc88d25dd660aa93b503d82263a5624 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2016-08-26T18:37:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_agcunha.pdf: 1915595 bytes, checksum: ddc88d25dd660aa93b503d82263a5624 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-26T18:37:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_agcunha.pdf: 1915595 bytes, checksum: ddc88d25dd660aa93b503d82263a5624 (MD5) Previous issue date: 2015 / The dwarf cashew apple (Anacardium occidentale L.) is a tropical plant, originated in Brazil, which is fruit species with high potential for fresh consumption and for industrial processing. With the discovery of bioactive compounds in the cashew apple are necessary studies of the activity of enzymes of the synthesis of phenolic compounds, such as phenylalanine ammonia lyase (PAL), UDP-glucose: trans-cinnamate β-D-glycosyltransferase (UGT), flavonol synthase (FLS) and leucoanthocyanidin reductase (LAR). Soon, this study aimed to determine the activity of these enzymes in CCP 76 and BRS 189 dwarf cashew clones in three different stages of maturation, and to establish the phenolic profile in these stages. Reaction products were identified and quantified by LC-DAD. PAL activity decreases with maturation for dwarf cashew clones. UGT enzyme in the CCP 76 clone stage 4 showed the highest enzyme specific activity than in other stages of development for that clone. Whereas BRS 189 clone, the highest activity was in the mature cashew apple. Quercetin synthesis was evidenced in stage 4 for the two clones analyzed. The enzymes involved in the metabolism phenolic behave differently, showing the complexity of this biosynthetic pathway that varies between clones and during the development of cashew apple. Further studies, with mass spectrometer linked HPLC, will elucidate the profile of the compounds present in cashews apple lyophilized for chemical characterization of these in different stages of maturation. Therefore, the understanding of the enzymatic metabolism between the clones and during cashew apple development represent a real potential for the development of new products with functional properties and promotion of human health. / O cajueiro (Anacardium occidentale L.) é uma planta tropical, originária do Brasil, que se destaca como espécie frutífera com elevada potencialidade para o consumo in natura e para o processamento industrial. Com a descoberta de compostos bioativos presentes nos pedúnculos, se fazem necessários estudos da atividade de enzimas da síntese dos compostos fenólicos, tais como a fenilalanina amônia liase (PAL), UDP-glicose: trans-cinamato β-D- glicosiltransferase (UGT), flavonol sintase (FLS) e leucoantocianidina redutase (LAR). Logo, esse estudo objetivou determinar a atividade dessas enzimas, em pseudofrutos de cajueiro-anão-precoce dos clones CCP 76 e BRS 189 em três diferentes estádios de maturação, além de estabelecer o perfil de fenólicos nestes referidos estádios. Os produtos resultantes das reações enzimáticas foram identificados e quantificados por LC-DAD. A atividade da PAL decresce com o amadurecimento dos pseudofrutos. A enzima UGT no estádio 4 do clone CCP 76 apresentou a maior atividade enzimática específica que nos outros estádios de desenvolvimento para o referido clone. Enquanto no clone BRS 189, a maior atividade deteve-se no caju maduro. A maior síntese de quercetina no caju foi evidenciada no estádio 4 para os dois clones estudados. As enzimas envolvidas no metabolismo de fenólicos se comportam diferentemente, demonstrando a complexidade dessa rota biossintética que varia entre os clones e durante o desenvolvimento dos pedúnculos de cajueiro. Estudos posteriores, com CLAE acoplada a espectrômetro de massa, irão elucidar melhor o perfil dos compostos presentes em cajus liofilizados para caraterização química destes em diferentes estádios de maturação. Portanto, o entendimento do metabolismo enzimático entre os clones e durante o desenvolvimento do pedúnculo representam um potencial real para o desenvolvimento de novos produtos com propriedades funcionais e promoção da saúde humana.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / The dwarf cashew apple (Anacardium occidentale L.) is a tropical plant, originated in Brazil, which is fruit species with high potential for fresh consumption and for industrial processing. With the discovery of bioactive compounds in the cashew apple are necessary studies of the activity of enzymes of the synthesis of phenolic compounds, such as phenylalanine ammonia lyase (PAL), UDP-glucose: trans-cinnamate β-D-glycosyltransferase (UGT), flavonol synthase (FLS) and leucoanthocyanidin reductase (LAR). Soon, this study aimed to determine the activity of these enzymes in CCP 76 and BRS 189 dwarf cashew clones in three different stages of maturation, and to establish the phenolic profile in these stages. Reaction products were identified and quantified by LC-DAD. PAL activity decreases with maturation for dwarf cashew clones. UGT enzyme in the CCP 76 clone stage 4 showed the highest enzyme specific activity than in other stages of development for that clone. Whereas BRS 189 clone, the highest activity was in the mature cashew apple. Quercetin synthesis was evidenced in stage 4 for the two clones analyzed. The enzymes involved in the metabolism phenolic behave differently, showing the complexity of this biosynthetic pathway that varies between clones and during the development of cashew apple. Further studies, with mass spectrometer linked HPLC, will elucidate the profile of the compounds present in cashews apple lyophilized for chemical characterization of these in different stages of maturation. Therefore, the understanding of the enzymatic metabolism between the clones and during cashew apple development represent a real potential for the development of new products with functional properties and promotion of human health. / O cajueiro (Anacardium occidentale L.) Ã uma planta tropical, originÃria do Brasil, que se destaca como espÃcie frutÃfera com elevada potencialidade para o consumo in natura e para o processamento industrial. Com a descoberta de compostos bioativos presentes nos pedÃnculos, se fazem necessÃrios estudos da atividade de enzimas da sÃntese dos compostos fenÃlicos, tais como a fenilalanina amÃnia liase (PAL), UDP-glicose: trans-cinamato β-D- glicosiltransferase (UGT), flavonol sintase (FLS) e leucoantocianidina redutase (LAR). Logo, esse estudo objetivou determinar a atividade dessas enzimas, em pseudofrutos de cajueiro-anÃo-precoce dos clones CCP 76 e BRS 189 em trÃs diferentes estÃdios de maturaÃÃo, alÃm de estabelecer o perfil de fenÃlicos nestes referidos estÃdios. Os produtos resultantes das reaÃÃes enzimÃticas foram identificados e quantificados por LC-DAD. A atividade da PAL decresce com o amadurecimento dos pseudofrutos. A enzima UGT no estÃdio 4 do clone CCP 76 apresentou a maior atividade enzimÃtica especÃfica que nos outros estÃdios de desenvolvimento para o referido clone. Enquanto no clone BRS 189, a maior atividade deteve-se no caju maduro. A maior sÃntese de quercetina no caju foi evidenciada no estÃdio 4 para os dois clones estudados. As enzimas envolvidas no metabolismo de fenÃlicos se comportam diferentemente, demonstrando a complexidade dessa rota biossintÃtica que varia entre os clones e durante o desenvolvimento dos pedÃnculos de cajueiro. Estudos posteriores, com CLAE acoplada a espectrÃmetro de massa, irÃo elucidar melhor o perfil dos compostos presentes em cajus liofilizados para caraterizaÃÃo quÃmica destes em diferentes estÃdios de maturaÃÃo. Portanto, o entendimento do metabolismo enzimÃtico entre os clones e durante o desenvolvimento do pedÃnculo representam um potencial real para o desenvolvimento de novos produtos com propriedades funcionais e promoÃÃo da saÃde humana.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Sapota-do-Solimões (Quararibea cordata) is a fruit found in the Amazon region of Brazil consumed only by the local population. The production of vegetable pulp is a viable operation in harvest period and able to serve the consumer at any time of year, even in distant places of origin. It is a fruit still little known worldwide and presents a high agroindustrial potential. Thus, the present work aims to analyze the parts of sapota-do-Solimões (peel, pulp and seeds), the stability of elaborated pulps and the bioactive and volatile compounds of the pulp in different ripening stages. The samples were collected from the city of Tefé-AM in three distinct ripening stages: unripe (U), ripe and collected from the tree (R); and ripe and collected from the ground, i.e. when the fruit fell naturally to the ground from the tree (RG), and transported to Santa Maria-RS. In the first study, the fruits R were used and the biometric parameters, the chemical composition and the mineral content were characterized. In the second, fruits R were pulped and submitted to the treatments: freezing, pasteurization + freezing, refrigeration and pasteurization + refrigeration, physicochemical and microbiological characteristics and bioactive compounds were analyzed in seven different storage times during 180 days. The third study, one comprised pulp analysis (U, R and RG) of biometric parameters, of quality, bioactive compounds, chemical composition, fatty acids and volatile profile. The percentages of peel, pulp and seeds were, respectively, 53.2%, 39.6% and 7.2%. The chemical composition in 100 g of sapota-do-Solimões was 85.01% moisture; 0.79% ash; 0.67% protein; 0.10% lipids, 4.10% dietary fiber; 9.34% carbohydrate and 40.94 calories. Magnesium was the most important mineral in the pulp. In the elaborated pulps, the treatments affected the physical-chemical parameters during the storage. Ascorbic acid remained stable during freezing and total carotenoid levels were maintained in pasteurization + freezing. Total phenols remained stable for up to 150 days and antioxidant activity decreased during storage for all treatments. The pasteurization + freezing treatment, as well as the freezing treatment, maintained pulp quality for 180 days of storage. With the ripening of the sapota-do-Solimões, there was an increase in water activity (0.977-0.996), pH (6.53-7.04), soluble solids (8.53-12.65%), total sugars (4.26-7.98%), reducing sugars (0.99-3.14%), non-reducing sugars (3.11-4.60%), total carotenoids (0.67-1.24 μg/g of pulp). The lipids increased with respect to ripening stage U (0.16%) and RG (0.30%). Eleven fatty acids were detected in the pulps. A total of 86 volatile compounds were identified, of which 57 were found in U fruits, 54 in R fruits and 68 in RG fruits. Methyl and ethyl benzoate esters were found in the RG fruits. There was an increase in terpene compounds; from 0.4% for U fruit to 5.6% for RG fruit. The data showed that the composition of the fruit was influenced by the ripening stage of the pulp. / A sapota-do-Solimões (Quararibea cordata) é uma fruta encontrada na região Amazônica do Brasil consumida apenas pela população local. A produção de polpa vegetal é uma operação viável em período de safra e capaz de atender o consumidor em qualquer época do ano, mesmo em locais distantes de sua origem. É uma fruta ainda pouco conhecida mundialmente e apresenta um elevado potencial agroindustrial. Assim, o presente trabalho teve por objetivo caracterizar as partes (casca, polpa e sementes) da sapota-do-Solimões, a estabilidade de polpas elaboradas e os compostos bioativos e voláteis da polpa em diferentes estádios de maturação. As amostras foram coletadas na cidade de Tefé-AM em três estádios de maturação distintos: verde (V), maduro coletado da árvore (M) e maduro coletado do chão (MC), quando se desprende naturalmente da planta, e transportados para Santa Maria-RS. No primeiro estudo foram utilizados os frutos M e caracterizados os parâmetros biométricos, a composição química e o conteúdo mineral. No segundo, os frutos M foram despolpados e submetidos aos tratamentos: congelamento, pasteurização + congelamento, refrigeração e pasteurização + refrigeração. As características físico-químicas e microbiológicas e os compostos bioativos foram analisados em sete diferentes tempos de armazenamento durante 180 dias. O terceiro estudo compreendeu as análises da polpa (V, M e MC) de parâmetros biométricos, de qualidade, compostos bioativos, composição química, perfil de ácidos graxos e de voláteis. As porcentagens de casca, polpa e sementes foram, respectivamente, de 53,2%, 39,6% e 7,2%. A composição química em 100 g de polpa de sapota-do-Solimões foi de 85,01% de umidade; 0,79% de cinzas; 0,67% de proteína; 0,10% de lípidos, 4,10% de fibra alimentar; 9,34% de carboidratos e 40,94 Kcal. O magnésio foi o mineral de maior relevância na polpa. Nas polpas elaboradas, os tratamentos afetaram os parâmetros físico-químicos durante o armazenamento. O ácido ascórbico permaneceu estável durante o congelamento e os níveis de carotenóides totais foram mantidos na pasteurização+congelamento. Os fenóis totais permaneceram estáveis até 150 dias e a atividade antioxidante diminuiu durante o armazenamento para todos os tratamentos. Os tratamentos de pasteurização+congelamento, bem como o tratamento de congelamento, mantiveram a qualidade da polpa durante 180 dias de armazenamento. Com o amadurecimento da sapota-do-Solimões houve um aumento na atividade de água (0,977-0,996), pH (6,53-7,04), sólidos solúveis (8,53-12,65%), açúcares totais (4,26-7,98%), açúcares redutores (0,99-3,14%), açúcares não redutores (3,11-4,60%), carotenoides totais (0,67-1,24 μg/g de polpa). Os lipídios aumentaram em relação ao estádio de maturação V (0,16%) e MC (0,30%). Onze ácidos graxos foram detectados nas polpas. Foram identificados 86 compostos voláteis, sendo 57 componentes nos frutos V, 54 nos frutos M e 68 nos frutos MC. Os ésteres benzoato de metila e etila foram encontrados nos frutos MC. Houve um aumento de compostos terpênicos, 0,4% do V para 5,6% do MC. Os dados mostraram que a composição dos frutos foi influenciada pelo estádio de maturação das polpas.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:42:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_Miriane Lucas Azevedo.pdf: 711423 bytes, checksum: 1434a3d0c7af1c168d1730ce49dc9d17 (MD5) Previous issue date: 2010-02-28 / Blackberry (Rubus fruticosus) is considered a fruit rich in the phytochemical compounds, mainly phenolic acids and anthocyanins, which have a high potential for antioxidant and are also present L-ascorbic acid, carotenoids and tocopherols. Based on the concentration changes that these compounds undergo during the fruit ripening stages, this work aims to study the changes in the phytochemical profile of blackberry cv. Tupy, grown in temperate climates, in Pelotas, and effects on antioxidant and antimicrobial activity. Were determined five stages of ripening from green to mature through the external color of the fruit, and to confirm the differences between them, each stage was measured physical-chemical, determining total acidity (TA), total soluble solids (SS),ripening index (SS/TA) and instrumental analysis of color (hue angle). With regard to the phytochemical profile were analyzed phenolic compounds, L-ascorbic acid, carotenoids and tocopherols. It can be stated that according to the results of the different ripening stages did not affect significantly (p≤0.05) the total phenolic compounds, catechin and L-ascorbic acid. For the individual phenolic compounds during the fruit development, the derivatives of benzoic acid increased, the same behavior occurs with epicatechin, that among these is composed of higher concentration, the levels of cinnamic acid derivatives showed a different behavior, there fall of these levels. Anthocyanins increased during the fruit ripening, detaching the cyanidin-3-glucoside. The carotenoids and tocopherols decreased during ripening. One can conclude that it is possible to mount a phytochemical profile of blackberry cv. Tupy, grown in temperate climates, to differentiate their ripening stages, but it is necessary to carry out several determinations, since it is not possible to say which assessment contributed most to the differentiation of stages along the ripening. Another observation concerns the antioxidant activity increased during ripening, in vitro and in vivo, but noted that it is not possible to determine which compound has a higher antioxidant capacity in isolation, but found that there was a synergism between the phytochemical compounds present in fruit, which vary over the course of its development. Likewise, we can not say if there was an increase in antimicrobial activity over the course of ripening, and even if there was a specific secondary compound responsible for this antimicrobial activity, but that it exists, since the bacterium Salmonella enteritidis showed sensitivity to the extracts but with different answers. / Amora-preta (Rubus fruticosus) é considerada um fruto rico em compostos fitoquímicos, principalmente ácidos fenólicos e antocianinas, que possuem um elevado potencial antioxidante e também estão presentes ácido L-ascórbico, carotenóides e tocoferóis. Com base nas mudanças de concentração que esses compostos sofrem ao longo dos estádios de amadurecimento do fruto, este trabalho tem por objetivo estudar as alterações no perfil fitoquímico da amora-preta cv. Tupy, cultivada em clima temperado, na região de Pelotas, e os efeitos na capacidade antioxidante e antimicrobiana. Foram determinados cinco pontos de maturação do verde ao mais maduro, através da coloração externa do fruto, e para confirmar as diferenças entre estes, cada estádio foi avaliado físico-químicamente, determinandose acidez total titulável (AT), sólidos solúveis totais (SS), índice de maturação (SS/AT) e análise instrumental da cor (ângulo hue). Com relação ao perfil fitoquímico foram analisados os compostos fenólicos, ácido L-ascórbico, carotenóides e tocoferóis. Pode-se afirmar que de acordo com os resultados os diferentes estádios de maturação não afetaram significativamente (p≤0,05) os compostos fenólicos totais, a catequina e o ácido L-ascórbico. Para os compostos fenólicos individuais ao longo do desenvolvimento dos frutos, os derivados do ácido benzóico aumentaram, o mesmo comportamento ocorre com a epicatequina, que dentre todos é o composto de maior concentração, os teores dos derivados do ácido cinâmico apresentaram um comportamento diferenciado, houve queda destes teores. As antocianinas aumentaram ao longo da maturação do fruto, destacando a cianidina-3-glicosídeo. Os carotenóides e os tocoferóis decresceram no decorrer da maturação. Pode-se concluir que é possível montar um perfil fitoquímico da amora-preta cv. Tupy, cultivada em clima temperado, para diferenciar seus estádios de maturação, porém é necessária a realização de diversas determinações, uma vez que não é possível afirmar qual avaliação contribuiu em maior parte para a diferenciação dos estádios ao longo da maturação. Outra observação, diz respeito à atividade antioxidante que aumentou ao longo da maturação, tanto in vitro quanto in vivo, contudo foi observado que não é possível determinar qual composto tem maior capacidade antioxidante isoladamente, mas sim foi verificado que há um sinergismo entre os compostos fitoquímicos presentes no fruto, que variam ao decorrer do seu desenvolvimento. Da mesma maneira, não podemos afirmar se houve um aumento na atividade antimicrobiana ao decorrer da maturação, e nem se houve um composto secundário específico responsável por esta atividade antimicrobiana, mas sim que esta existe, uma vez que a bactéria Salmonella Enteritidis mostrou sensibilidade aos extratos, porém com diferentes respostas.