Acetylsalicylic acid (ASA), aspirin, is a renowned NSAID that its role in the process of bone metabolism has recently come to light. However, the influence of ASA on the odontogenesis of human dental pulp cells (HDPCs) remains elusive. In search of materials that would synergize the healing potential of the dental pulp, this study aimed to investigate the role of ASA on the odontogenesis of HDPCs in vitro and the influence of ASA on TGF-ß1 liberation from dentin. HDPCs were cultured in a culture medium with different concentrations of ASA: 25, 50, 75, 100, 200 μg/mL and 0 μg/mL as a control. The mitochondria activity of HDPCs was assessed using an MTT assay. Crystal violet staining and triton were used to evaluate cell proliferation rates. ALP activity was measured with the fluorometric assay. Expressions of DSP and RUNX2 were determined with ELISA. DSP and RUNX2 mRNA levels were measured with RT‐qPCR. Alizarin red staining was conducted to evaluate the mineralized nodule formation. Dentin slices were submerged in PBS (negative control), 17% EDTA (positive control), and ASA before collecting the solution for TGF-ß1quantification by ELISA. The data were analyzed by t tests and ANOVA followed by the Tukey post hoc tests. P values < 0.05 were considered statistically significant. The results showed that 25-50 μg/mL ASA promoted mitochondria activity of HDPCs at 72h (P<0.05) and yielded significantly higher proliferation rates of HDPCs than the control at 14d and 21d (P<0.001). All concentrations of ASA promoted odontogenic differentiation of HDPCs by enhancing the mineralization and the levels of DSP, RUNX2, and their mRNA expression in a dose-dependent manner (P<0.05). Also, ASA yielded significantly higher TGF-ß1 liberation after conditioning dentin for 5min (P<0.001) and 10min (P<0.05). In conclusion, the data suggest that ASA promotes the odontogenic potential of HDPCs and TGF-ß1 liberation from dentin in vitro and might be incorporated into the novel pulp capping materials for dental tissue regeneration.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-09-05Bitstream added on 2014-06-13T19:01:54Z : No. of bitstreams: 1 crisci_fs_dr_arafo.pdf: 2406575 bytes, checksum: 7ed8c4c8f95948faa1e0430e502e380a (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O presente estudo avaliou o efeito do laser de baixa intensidade diodo semicondutor de arseneto de gálio e alumínio em exposições pulpares induzidas e nos tecidos apicais e periapicais após tratamento endodôntico em dentes de macacos. Nas exposições pulpares, foi avaliado efeito do laser infra-vermelho associado ao hidróxido de cálcio, variando o tempo de aplicação, onde utilizou-se quatro macacos, totalizando 24 dentes, distribuídos em quatro grupos experimentais: Grupo I: Laser 2,5 segundos (dentes incisivos), Grupo II: Laser 40 segundos (dentes incisivos), Grupo III: Laser 40 segundos (dentes prémolares) e Grupo IV: Controle sem Laser (dentes pré-molares), por um período de 55 dias. Quanto ao efeito do laser sobre a agressividade tecidual do cimento endodôntico óxido de zinco e eugenol (OZE), após tratamento endodôntico nos tecidos apicais e periapicais, foi comparando o laser vermelho com o infravermelho, utilizando quatro macacos, totalizando 24 dentes, distribuídos em três grupos experimentais: Grupo I (Laser Vermelho), Grupo II (laser Infra-Vermelho) e Grupo III (Controle: Sem Laser), por um período de 22 dias. Decorrido os períodos experimentais de cada estudo, os animais foram mortos, os dentes ou peças removidas e preparadas para análise histológica. De acordo com a proposta e as condições específicas deste trabalho, os resultados nos permitem concluir que nas exposições pulpares, a irradiação com laser infra-vermelho (40 segundos) diminuiu a reação inflamatória e induziu a organização tecidual, bem como na formação da barreira mineralizada, apresentando diferenças estatísticas significantes entre os grupos (p<0,05), tendo como melhor resultado a irradiação com laser infra-vermelho (40 segundos), já nos tecidos apicais e periapicais a irradiação... / The present study evaluated the effect of the laser of low intensity diode semiconductor of gallium aluminum arsenide in exposed pulp induced in apical and periapical tissues after endodontic treatment in teeth of monkeys. In the exposed pulp, the effect of the laser infra-red associated to the hydroxide of calcium was evaluated varying the time of application, being used 04 monkeys, totaling 24 teeth, distributed in four experimental groups: Group I: Laser 2,5 seconds (incisive teeth), Group II: Laser 40 seconds (incisive teeth), Group III: Laser 40 seconds (premolar teeth) and Group IV: Control without Laser (premolar teeth), for a period of 55 days. As for the effect of the laser on the tissue aggressiveness of the endodontic zinco oxide and eugenol (OZE) sealer, after endodontic treatment o in the apical and Periapical tissues, the red laser was compared with the laser infra-red, using 04 monkeys, totaling 24 teeth, distributed in 03 experimental groups: Group I (Red Laser), Group II (Infra-red laser) and Group III (it Controls: Without Laser), for a period of 22 days. After the experimental periods of each study, the animals were killed, the teeth or pieces were removed and prepared for histological analysis. In agreement with the proposal and the specific conditions of this study work, the results allow to conclude us that in exposed pulp infra-red laser irradiation (40 seconds.) reduced the inflammatory reaction and induced the tissue organization, as well as the mineralized barrier formation and in apical and periapical tissues infra-red laser irradiation stimulated the cells of the periodontal tissue inducing periapical repair.

Resumo: O presente estudo avaliou a reação histológica do efeito do laser de baixa intensidade diodo semicondutor de arseneto de gálio e alumínio (GaA1As, com comprimento de onda de 785 nm, infravermelho, com potência de emissão de 50 mW, densidade de energia de 3 J/cm2, em emissão contínua, por meio de ponta especial de fibra óptica, por um período de 2 segundos) em exposições pulpares induzidas em dentes de ratos. Foram utilizados 60 ratos, dos quais cada animal ofereceu dois dentes (totalizando 120), que foram distribuídos em 5 grupos experimentais: grupo I (controle), exposição capeada com hidróxido de cálcio; grupo II, laser imediato + hidróxido de cálcio; grupo III, laser imediato + hidróxido de cálcio + laser após 24 horas; grupo IV, laser imediato + hidróxido de cálcio + laser após 24 e 48 horas; e grupo V, somente a aplicação do laser. Decorridos os períodos experimentais de sete e 30 dias, os animais foram mortos, as peças removidas e preparadas para análise histológica. De acordo com a proposta e as condições específicas deste trabalho, os resultados nos permitem concluir que as associações laser imediato + hidróxido de cálcio e laser imediato + hidróxido de cálcio + laser 24 horas, foram os grupos que apresentaram os melhores resultados tanto aos sete dias (efeito antiinflamatório), quanto aos trinta dias (efeito no reparo tecidual). / Abstract: The present study evaluated the histological reaction of the low poweer laser effect, diode laser semiconductor of gallium aluminum arsenide (GaA1As, with wavelenght of 785 nm, infra-red, potency of emission of 50 mW, energy density of 3 J/cm2, with continuous emission, through special tip of optic fiber, for a period of two seconds) in exposed pulp induced in teeth of mice. Sixty mice were used, of which each animal offered two teeth (totaling 120), that were distributed in 5 experimental groups: group I(control group) exposed capping with calcium hydroxide; group II, immediate laser + calcium hydroxide; group III, immediate laser + calcium hydroxide + laser after 24 hours; group IV, immediate laser + calcium hydroxide + laser after 24 and 48 hours; and group V, only laser application. After the experimental periods of seven and thirty days, the animals were killed, the pieces were removed and prepared for histological analysis. In agreement with the proposal and the specific conditions of this study, the results allow us conclude that the associations of immediate laser + calcium hydroxide and immediate laser + calcium hydroxide + laser after 24 hours, were the groups that presented the best results in the periods of seven days (anti-inflammatory effect), and thirty days (effect in the tissue repair). / Orientador: Fábio Luiz Camargo Villela Berbert / Coorientador: Lizeti Toledo de Oliveira Ramalho / Banca: Renato de Toledo Leonardo / Banca: Jesus Djalma Pécora / Mestre

Submitted by Edineia Teixeira (edineia.teixeira@unioeste.br) on 2018-04-20T13:11:28Z No. of bitstreams: 2 Giovani _Hartmann2018.pdf: 1083042 bytes, checksum: 4c6c31040314a6b8b1914db7eec998ac (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-20T13:11:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Giovani _Hartmann2018.pdf: 1083042 bytes, checksum: 4c6c31040314a6b8b1914db7eec998ac (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-01-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This study analyzed sericin as a potential biomaterial in contact with dentin pulp, histologically comparing its response to direct pulp capping with calcium hydroxide. These are the first morphological and functional data derived from application of this protein directly on pulp exposure. 20 maxillary first molars from Wistar male mice were used, with 60 days of age, between 200 and 300 grams, which were divided in 4 groups (n=5): G1 and G3, controls, capped with calcium hydroxide in 7 and 30 days, respectively; G2 and G4, capped with sericin in 7 and 30 days, respectively. Circular cavities were prepared for pulp exposure, where capping materials were applied, being posteriorly restored with glass ionomer cement. At the end of the groups period, animals were euthanized and molars were histologically processed for analysis in light microscopy to evaluate presence of necrosis in pulp tissue, inflammatory cells infiltration and tertiary dentin formation. After 7 days, there was less necrosis and inflammatory cells infiltration in G1 when compared to G2 (p=0.007 and p=0.008, respectively). After 30 days, a sample of G3 induced tertiary dentin formation and G4 showed decrease in inflammation (p=0.041) compared to G2. Among the determined experiment conditions, it was concluded that sericin did not present to be viable to treatment as it did not induce tertiary dentin formation, although, its contact with pulp tissue has shown improve in inflammatory response during the treatment and new cells proliferation. / Este estudo analisou a sericina como potencial biomaterial em contato com a polpa dental comparando histologicamente sua resposta ao capeamento pulpar direto com hidróxido de cálcio. Estes são os primeiros dados morfológicos e funcionais procedentes da aplicação desta proteína diretamente sobre a exposição da polpa. Foram utilizados 20 primeiros molares superiores de ratos Wistar machos, com 60 dias de idade entre 200 e 300 gramas, os quais foram divididos em 4 grupos (n=5): G1 e G3, controles, capeados com hidróxido de cálcio em 7 e 30 dias, respectivamente; G2 e G4, capeados com sericina em 7 e 30 dias, respectivamente. Cavidades circulares foram preparadas para exposição pulpar, onde foram aplicados os materiais capeadores, sendo posteriormente restauradas com cimento de ionômero de vidro. Transcorridos os tempos dos grupos, os animais foram eutanasiados e os molares foram processados histologicamente para análise em microscopia de luz para avaliar presença de necrose no tecido pulpar, infiltração de células inflamatórias e formação de dentina terciária. Aos 7 dias, a necrose e a infiltração de células inflamatórias foram menores em G1 quando comparado ao G2 (p=0,007 e p=0,008, respectivamente). Aos 30 dias, uma amostra do G3 induziu formação de dentina terciária e G4 apresentou diminuição de inflamação (p=0,041) em relação ao G2. Dentro das determinadas condições experimentais, concluiu-se que a sericina não se mostrou viável ao tratamento por não induzir formação de dentina terciária, entretanto, seu contato com o tecido pulpar demonstrou melhora na resposta inflamatória ao longo do tratamento e proliferação de novas células.

Cavalcanti, BN. Resposta de fibroblastos de polpa humanos frente a substâncias liberadas por capeadores pulpares diretos [Tese de Doutorado]. São Paulo: Faculdade de Odontologia da USP; 2003. RESUMO O objetivo do presente estudo foi o de avaliar os efeitos citotóxicos de substâncias liberadas durante a aplicação de materiais utilizados em capeamento pulpar direto, sobre fibroblastos de polpa dentária humana. Utilizou-se para o experimento meios condicionados pelas substâncias a serem testadas, divididas nos grupos a seguir: grupo I: controle (meio de cultivo sem condicionamento); grupo II: cimento de hidróxido de cálcio; grupo III: adesivo dentinário; grupo IV: ácido ortofosfórico a 37%. O condicionamento foi realizado, colocando-se meio de cultivo fresco sobre os materiais de modo que a presa (grupo II), polimerização (grupo III) ou o contato direto (grupo IV) liberassem substâncias para esse meio de cultivo. Esse meio era colocado sobre as células durante todo o experimento, excetuando-se o grupo IV, onde o contato foi feito por um período de 15 segundos, conforme recomendações clínicas. Posteriormente foram realizadas contagens em hemocitômetro pelo método de exclusão por azul de Trypan, que cora somente as células mortas. As contagens foram realizadas em períodos de 0, 6, 12 e 24 horas para o experimento de viabilidade celular (curto prazo), onde se avaliou o percentual de células vivas sobre o total de células, e em períodos de 1, 3, 5 e 7 dias para o experimento de sobrevivência celular, no qual se avaliou o número absoluto de células vivas. Observou-se que as substâncias liberadas pelo adesivo dentinário são citotóxicas em qualquer período, diminuindo consideravelmente a viabilidade celular e afetando suas curvas de crescimento. Aquelas liberadas pelo ácido ortofosfórico a 37% provocam diminuição da viabilidade somente nos primeiros momentos do contato com as células, enquanto as substâncias liberadas durante a presa do hidróxido de cálcio não são citotóxicas em nenhum momento. / The purpose of the present study was to evaluate the cytotoxic effects of substances leached during the use of direct pulp capping materials, on human pulp fibroblasts. There were used cell culture mediums conditioned by the test materials, as follows: group I: control (fresh medium without conditioning); group II: calcium hydroxide cement; group III: bonding system; group IV: 37% orthophosphoric acid. The medium conditioning was made, pouring the fresh conditioning medium on the materials, in order that its setting (group II), polymerization (group III) or the direct contact (group IV) would be able to leach substances to this culture medium. These conditioned mediums were put on the cells for the entire experiment, excepting the group IV, in which the mediums were put in contact with the cells for 15 seconds, following clinical recommendations. Cell counting was performed in hemocytometer, using the Trypan blue exclusion method, which mark only the dead cells. These counting was made at experimental times of 0, 6, 12 and 24 hours for the cell viability assay (short term), where it is evaluated the percentage of live cells on the total number of cells, and at experimental times of 1, 3, 5 and 7 days for the survival assay, in which is evaluated the absolute number of live cells. It was observed that the substances leached by the bonding system are cytotoxic at all experimental times, decreasing significantly the cell viability and affecting its growing rate. Those leached by the 37% orthophosphoric acid decreased the cell viability only at the first contact with the cells, and the substances leached during the setting of the calcium hydroxide cement are not cytotoxic.

O capeamento pulpar direto busca preservar a vitalidade pulpar. Este trabalho apresenta a resposta tecidual de polpas humanas ao capeamento pulpar direto com o Agregado de Trióxido Mineral (MTA) comparado com o hidróxido de cálcio. Foram utilizados 20 pré-molares de dez pacientes com extração indicada para tratamento ortodôntico. Todos os dentes apresentavam vitalidade pulpar e neles foram feitos capeamentos pulpares diretos com MTA ou com o hidróxido de cálcio. Os dentes foram extraídos num período de 14 dias ou 45 dias, estabelecendo os seguintes grupos experimentais: Ca(OH) 14 dias; Ca(OH) 45 dias; MTA 14 dias e MTA 45 dias. Estes dentes foram analisados microscopicamente por dois examinadores treinados. Os dados obtidos foram tabulados, utilizando-se o teste Kappa para observar o grau de concordância entre os examinadores. Para avaliação comparativa entre as respostas citotóxicas dos materiais testados foi aplicado o teste não paramétrico Kruskal-Wallis e o teste de Dunn para comparações individuais e identificação da significância dos achados. Na análise dos resultados não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos nos períodos experimentais de 14 e 45 dias, e nem na resposta inflamatória pulpar frente ao hidróxido de cálcio quando comparado ao MTA. Quanto à espessura e à organização da barreira dentinária reparatória com o hidróxido de cálcio, quando comparado com o MTA também não apresenta diferença estatisticamente significante. Conclui-se que o MTA satisfaz os requisitos de um material capeador pulpar em dentes de humanos, apresentando propriedades físicas e biológicas que o indicam para este tratamento. / The direct dental pulp capping aims to preserve the pulp vitality. This work shows the tissue response from human pulps to that procedure with the Mineral Trioxide Agregate (MTA) compared to calcium hydroxide - Ca(OH)2. Twenty premolars from 10 patients with extraction indicated to orthodontic treatment were used. All teeth showed pulp vitality and were treated with direct dental pulp capping with MTA or with calcium hydroxide. The teeth have been extracted within 14 or 45 days, stablishing the following experimental groups: Ca(OH)2 14 days; Ca(OH)2 45 days; MTA 14 days; and MTA 45 days. These teeth were analyzed under microscopy by two observers trained. The data obtained were put in table using the Kappa test to note the agreement degree between the observers. For the comparative assessment between the citotoxic response from material tested has been applied the non-paired Kruskal-Wallis test, and the Dunns test for individual comparisons and identifying the significance of findings. In the analysis of results there had no statistically significant difference between the groups in experimental periods of 14 days and 45 days, not even in the pulp inflammatory response to calcium hydroxide when compared to MTA. The thickness and arrangement of the healing dentin barrier faced with calcium hydroxide, when compared to MTA, also showed no statistically significant difference. It may be concluded that the MTA fulfils the requirements of pulp capping material in human teeth showing biological and physical properties that indicate it for this treatment.

Orientador: Hernane da Silva Barud / Resumo: Os cimentos de silicato de cálcio têm se desenvolvido rapidamente durante as últimas décadas; com a aparição de novos cimentos para uso em odontologia restauradora. Estes cimentos apresentam diferentes composições químicas e por tanto provavelmente diferente radiopacidade. A incorporação de nanopartículas de vidro bioativo poderia melhorar a bioatividade dos cimentos de silicato de cálcio. O objetivo foi avaliar a composição química e radiopacidade dos cimentos a base de silicato de cálcio Biodentine (BD) e TheraCal LC e a contribuição do acréscimo de nanopartículas de vidro bioativo (nVB) no BD. Método: Foram realizados testes de radiopacidade de acordo com norma ISO 9917 e caracterização com microscopia eletrônica de varredura e análise elementar (MEV/EDX) dos novos cimentos de silicato de cálcio BD e TheraCal LC. Posteriormente, nVB foram sintetizadas com técnica sol-gel, e foram preparados nanocompósitos do BD com 1 e 2% em peso de nVB (1%nVB/BD e 2%nVB/BD). A bioatividade dos nanocompósitos foi avaliada in vitro e caracterizado com MEV/EDX, análise de espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier e difração de raios-X (DRX). Também os nanocompósitos foram aplicados em discos de dentina e a interface caracterizada com MEV-EDX. Resultados: BD apresentou zircônio como elemento radiopacificante e maiores valores de radiopacidade do que o TheraCal LC, que apresentou bário, estrôncio e zircônio como radiopacificadores. A incorporação de nVBs em BD melhorou a bioa... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

O capeamento pulpar direto busca preservar a vitalidade pulpar. Este trabalho apresenta a resposta tecidual de polpas humanas ao capeamento pulpar direto com o Agregado de Trióxido Mineral (MTA) comparado com o hidróxido de cálcio. Foram utilizados 20 pré-molares de dez pacientes com extração indicada para tratamento ortodôntico. Todos os dentes apresentavam vitalidade pulpar e neles foram feitos capeamentos pulpares diretos com MTA ou com o hidróxido de cálcio. Os dentes foram extraídos num período de 14 dias ou 45 dias, estabelecendo os seguintes grupos experimentais: Ca(OH) 14 dias; Ca(OH) 45 dias; MTA 14 dias e MTA 45 dias. Estes dentes foram analisados microscopicamente por dois examinadores treinados. Os dados obtidos foram tabulados, utilizando-se o teste Kappa para observar o grau de concordância entre os examinadores. Para avaliação comparativa entre as respostas citotóxicas dos materiais testados foi aplicado o teste não paramétrico Kruskal-Wallis e o teste de Dunn para comparações individuais e identificação da significância dos achados. Na análise dos resultados não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos nos períodos experimentais de 14 e 45 dias, e nem na resposta inflamatória pulpar frente ao hidróxido de cálcio quando comparado ao MTA. Quanto à espessura e à organização da barreira dentinária reparatória com o hidróxido de cálcio, quando comparado com o MTA também não apresenta diferença estatisticamente significante. Conclui-se que o MTA satisfaz os requisitos de um material capeador pulpar em dentes de humanos, apresentando propriedades físicas e biológicas que o indicam para este tratamento. / The direct dental pulp capping aims to preserve the pulp vitality. This work shows the tissue response from human pulps to that procedure with the Mineral Trioxide Agregate (MTA) compared to calcium hydroxide - Ca(OH)2. Twenty premolars from 10 patients with extraction indicated to orthodontic treatment were used. All teeth showed pulp vitality and were treated with direct dental pulp capping with MTA or with calcium hydroxide. The teeth have been extracted within 14 or 45 days, stablishing the following experimental groups: Ca(OH)2 14 days; Ca(OH)2 45 days; MTA 14 days; and MTA 45 days. These teeth were analyzed under microscopy by two observers trained. The data obtained were put in table using the Kappa test to note the agreement degree between the observers. For the comparative assessment between the citotoxic response from material tested has been applied the non-paired Kruskal-Wallis test, and the Dunns test for individual comparisons and identifying the significance of findings. In the analysis of results there had no statistically significant difference between the groups in experimental periods of 14 days and 45 days, not even in the pulp inflammatory response to calcium hydroxide when compared to MTA. The thickness and arrangement of the healing dentin barrier faced with calcium hydroxide, when compared to MTA, also showed no statistically significant difference. It may be concluded that the MTA fulfils the requirements of pulp capping material in human teeth showing biological and physical properties that indicate it for this treatment.

Cavalcanti, BN. Resposta de fibroblastos de polpa humanos frente a substâncias liberadas por capeadores pulpares diretos [Tese de Doutorado]. São Paulo: Faculdade de Odontologia da USP; 2003. RESUMO O objetivo do presente estudo foi o de avaliar os efeitos citotóxicos de substâncias liberadas durante a aplicação de materiais utilizados em capeamento pulpar direto, sobre fibroblastos de polpa dentária humana. Utilizou-se para o experimento meios condicionados pelas substâncias a serem testadas, divididas nos grupos a seguir: grupo I: controle (meio de cultivo sem condicionamento); grupo II: cimento de hidróxido de cálcio; grupo III: adesivo dentinário; grupo IV: ácido ortofosfórico a 37%. O condicionamento foi realizado, colocando-se meio de cultivo fresco sobre os materiais de modo que a presa (grupo II), polimerização (grupo III) ou o contato direto (grupo IV) liberassem substâncias para esse meio de cultivo. Esse meio era colocado sobre as células durante todo o experimento, excetuando-se o grupo IV, onde o contato foi feito por um período de 15 segundos, conforme recomendações clínicas. Posteriormente foram realizadas contagens em hemocitômetro pelo método de exclusão por azul de Trypan, que cora somente as células mortas. As contagens foram realizadas em períodos de 0, 6, 12 e 24 horas para o experimento de viabilidade celular (curto prazo), onde se avaliou o percentual de células vivas sobre o total de células, e em períodos de 1, 3, 5 e 7 dias para o experimento de sobrevivência celular, no qual se avaliou o número absoluto de células vivas. Observou-se que as substâncias liberadas pelo adesivo dentinário são citotóxicas em qualquer período, diminuindo consideravelmente a viabilidade celular e afetando suas curvas de crescimento. Aquelas liberadas pelo ácido ortofosfórico a 37% provocam diminuição da viabilidade somente nos primeiros momentos do contato com as células, enquanto as substâncias liberadas durante a presa do hidróxido de cálcio não são citotóxicas em nenhum momento. / The purpose of the present study was to evaluate the cytotoxic effects of substances leached during the use of direct pulp capping materials, on human pulp fibroblasts. There were used cell culture mediums conditioned by the test materials, as follows: group I: control (fresh medium without conditioning); group II: calcium hydroxide cement; group III: bonding system; group IV: 37% orthophosphoric acid. The medium conditioning was made, pouring the fresh conditioning medium on the materials, in order that its setting (group II), polymerization (group III) or the direct contact (group IV) would be able to leach substances to this culture medium. These conditioned mediums were put on the cells for the entire experiment, excepting the group IV, in which the mediums were put in contact with the cells for 15 seconds, following clinical recommendations. Cell counting was performed in hemocytometer, using the Trypan blue exclusion method, which mark only the dead cells. These counting was made at experimental times of 0, 6, 12 and 24 hours for the cell viability assay (short term), where it is evaluated the percentage of live cells on the total number of cells, and at experimental times of 1, 3, 5 and 7 days for the survival assay, in which is evaluated the absolute number of live cells. It was observed that the substances leached by the bonding system are cytotoxic at all experimental times, decreasing significantly the cell viability and affecting its growing rate. Those leached by the 37% orthophosphoric acid decreased the cell viability only at the first contact with the cells, and the substances leached during the setting of the calcium hydroxide cement are not cytotoxic.

Les soins pulpaires en denture lactéale sont les soins fréquemment réalisés en odontologie pédiatrique et la réaction pulpaire ainsi que les mécanismes de réparation tissulaire lors d’un traumatisme ne sont pas très bien connus ou investigués. En se référant à la littérature dentaire, on constate que les recherches sont souvent focalisées sur la denture définitive.<p>Objectifs<p>1) Etudier l’influence du traitement avec divers matériaux sur la formation dentinaire, la structure tissulaire et le degré d’inflammation.<p>2) Acquérir des connaissances sur l’interaction à l’interface matériau/tissu.<p>3) Etudier le rôle de la voie de signalisation Notch (1 et 2) dans le processus de remaniement et réparation du tissu pulpaire en cas de traumatisme.<p>Matériels et méthodes<p>Deux types de soins pulpaires, la pulpotomie et le coiffage direct, sont réalisés sur les dents lactéales porcines et les résultats sont étudiés après 3 périodes :7 jours, 21-28 jours et 90 jours.<p>La pulpotomie :8 matériaux, 10 dents par matériau, 2 matériaux par cochon et par période pour un total de 240 dents.<p>Le coiffage direct :10 matériaux, 10 dents par matériau, 2 matériaux par cochon et par période pour un total de 300 dents.<p>Par la suite, différentes techniques ont été utilisées :<p>1. La microscopie optique :étude des coupes histologiques après coloration.<p>2. La microscopie électronique à transmission :observer les caractéristiques morphologiques du tissu pulpaire et analyser les structures cellulaires en détail. L’objectif principal de cette recherche était centré sur les biomatériaux pour la période de 21-28 jours afin d’examiner l’interaction entre le biomatériau et le complexe dentino-pulpaire après leur placement.<p>12<p>3. La voie de signalisation Notch (1 et 2): investiguer l’intervention éventuelle de cette voie dans le processus de régénération tissulaire par différenciation des cellules pour les deux périodes de 7 et 21-28 jours pour tous les matériaux utilisés.<p>Résultats<p>A. Microscopie optique :<p>1. La pulpotomie :les biomatériaux provoquent moins d’infiltrat de cellules inflammatoires au niveau du tissu pulpaire et favorisent la déposition dentinaire.<p>2. Le coiffage direct :on obtient les mêmes résultats que dans le cadre de la pulpotomie.<p>B. Microscopie électronique en transmission :<p>1. L’induction du tissu calcifié ou la formation de néo-dentine s’est seulement produite au niveau du site de l’exposition après le placement des biomatériaux dans les 2 types du traitement (pulpotomie & coiffage direct). En revanche aucune formation du tissu calcifié n’a été observée dans le parenchyme pulpaire à distance du site de l’exposition.<p>2. Cet examen montre que les cellules en contact des biomatériaux ou même à proximité de ces derniers présentent un réticulum endoplasmique élargi parallèle à la longueur de la cellule. Des mitochondries, plusieurs appareils de Golgi et des éléments denses sont observés dans le cytoplasme cellulaire.<p>3. Cet examen a également montré que le MTA et le WPC, considérés par la littérature dentaire comme non-résorbables, sont phagocytés par les cellules histiocytaires.<p>C. Voie de signalisation de Notch :<p>Nos recherches n’ont pas montré de marquage concluant pour aucun de matériaux sauf dans le cadre de coiffage direct pour les dents traitées au MTA et Ca(OH)2 pour la période de 7 jours. Par contre, aucun marquage n’est observé après 21-28 jours. / Doctorat en Sciences dentaires / info:eu-repo/semantics/nonPublished