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Comparação do efeito de TiF4 e NaF, nas formas de verniz e solução, sobre a desmineralização e remineralização do esmalte dentário bovino in situ / Comparison between the effect of TiF4 and NaF varnishes and solutions on bovine enamel demineralization and remineralization in situ

Comar, Livia Picchi 24 May 2011 (has links)
Este estudo teve como objetivo avaliar do efeito da aplicação tópica de um verniz e solução experimental de TiF4, comparando-os ao verniz e solução de NaF, sobre o processo de des-remineralização do esmalte dentário in situ. Para tal, 132 blocos de esmalte bovino (4x4mm) foram selecionados pela microdureza de superfície, sendo que em metade deles foi produzida lesão de cárie artificial em solução desmineralizante (pH 5,0, 6 dias). Na seqüência, foi determinada a microdureza de superfície pós-lesão. A outra metade dos blocos permaneceu hígida. Onze voluntários participaram de 3 fases cruzadas (14 dias cada, washout de 7 dias), boca-dividida e cegas, nas quais utilizaram aparelhos palatinos com 4 amostras de esmalte por fase (2 hígidas e 2 desmineralizadas), sendo que cada tipo de amostra recebeu um tipo de tratamento (verniz ou solução). Em todas as amostras permitiu-se o acúmulo de placa dentária. Em uma fase (Fase A), foram aplicados agentes a base de NaF a 5,42% (2,45% F- e pH 5,0), em outra fase (Fase B), foram utilizados agentes a base de TiF4 a 4% (2,45% F- e pH 1,0), e na última fase (Fase C) foram utilizados agentes placebos (verniz sem flúor pH 5,0 e sem tratamento). Os tratamentos foram realizados in vitro (verniz-6 h e solução-1 minuto). Durante o período in situ, os voluntários aplicaram solução de sacarose a 20%, 8x5min ao dia, sobre os blocos hígidos, para provocar a desmineralização. Já para os blocos desmineralizados nenhum procedimento foi realizado, para permitir a remineralização. A microdureza de superfície final foi realizada, para o cálculo da porcentagem de variação de microdureza de superfície, assim como a microdureza longitudinal e microradiografia transversal, para o cálculo das perdas de microdureza e volume mineral integradas, respectivamente. Os dados foram submetidos à ANOVA-RM/ Tukey-Kramer, teste t pareado e ANOVA a dois critérios/Bonferroni (p<0,05). Houve uma redução significativa da desmineralização superficial e um aumento significativo da remineralização superficial do esmalte in situ pelos tratamentos com verniz e solução de TiF4, em comparação aos controles. Pôde-se constatar ainda que os tratamentos com o verniz de NaF, verniz de TiF4 e solução de TiF4 foram efetivos na redução da desmineralização subsuperficial in situ. No entanto, observou-se que o protocolo experimental não permitiu uma adequada remineralização de subsuperfície in situ. Com base nos resultados, pode-se concluir que o verniz e a solução de TiF4 parecem ser promissores na prevenção da desmineralização, porém em relação à remineralização mais estudos in situ são necessários. / The aim of this study was to evaluate the effect of the experimental TiF4 varnish and solution, comparing with NaF solution and varnish, on dental enamel de-remineralization in situ. For that, 132 bovine enamel samples (4x4 mm) were selected using surface microhardness, and half of them were submitted to artificial caries lesion formation using a demineralizing solution (pH 5.0, 6 days). The surface microhardness after the demineralization was measured. The other half of the samples remained sound. Eleven volunteers took part in this cross-over, split-mouth and double-blind study performed in 3 phases of each 14 days (washout of 7 days). Four enamel samples were worn in palatal appliances (2 sound and 2 demineralized), being each type of sample submitted to one treatment (varnish or solution). The dental plaque accumulation was allowed on all samples. In phase A, 5.42% NaF varnish/solution was applied (2.45% F-, pH 5.0); in phase B, 4% TiF4 varnish/solution was used (2.45% F-, pH 1.0) and at the last phase (phase C) the placebo treatments were performed (placebo varnish pH 5.0 and no-treatment). The treatments were performed in vitro (varnish-6h and solution-1min). During the in situ phase, the volunteers dripped a solution containing 20% weight/volume (w/v) sucrose on the sound samples for 5 min, 8 times a day, to provoke demineralization. While on the demineralized samples nothing was done, in order to allow remineralization. The final surface microhardness was analyzed for the calculation of the % of surface microhardness change, as well as the cross-sectional hardness and the transversal microradiography, for the calculation of the integrated loss of microhardness and mineral volume, respectively. The data were submitted to RM-ANOVA/ Tukey-Kramer, t test and 2-way ANOVA/ Bonferroni (p<0.05). There was a significant reduction of the surface enamel demineralization and increase of surface remineralization by the treatments with TiF4 varnish and solution compared to control in situ. The treatments with NaF varnish, TiF4 varnish and solution were able to reduce the subsurface demineralization in situ. However, the experimental protocol did not allow the subsurface remineralization in situ. Based on the results, it can be concluded that the TiF4 varnish and solution seem to be promising products for preventing demineralization, but for the remineralization more studies need to be conducted.
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Influência dos óleos do tucumã (Astrocaryum vulgare) e da pupunha (Bactris gasipae) na composição do biofilme dental e dinâmica do processo de cárie em esmalte: um estudo in situ / Influence of tucumã (Astrocaryum vulgare) and peach palm (Bactris gasipae) oils on dental biofilm composition and dynamics of enamel caries: an in situ study

Emmi, Danielle Tupinambá 05 November 2013 (has links)
A cárie dental ainda afeta grande número de pessoas no mundo todo. Sua ocorrência depende da formação, sobre a superfície dentária, de um biofilme microbiano. As interações entre microrganismos do biofilme e os componentes da dieta, podem interferir de diferentes formas nessa patologia, pois alguns componentes alimentares atuam favorecendo o aparecimento de lesões, tal como os carboidratos, enquanto outros, atuam inibindo, como ácidos graxos, polifenóis, caseína e lectina. O tucumã (Astrocaryum vulgare) e a pupunha (Bactries gasipae) são frutos oleaginosos nativos da Região Amazônica, que apresentam alto teor lipídico e de carotenos. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a influência dos óleos extraídos da polpa destes frutos na composição do biofilme dental e dinâmica do processo de desmineralização em esmalte. Os óleos foram extraídos sem adição de solventes, caracterizados e misturados a uma solução de 20% de sacarose, para serem testados por meio de um modelo de estudo in situ. Oito voluntários utilizaram dispositivos palatinos contendo 4 blocos de esmalte dental, durante 3 fases de 14 dias cada (n=96). As soluções controle (sacarose 20%) e as soluções com óleos testadas, foram aplicadas sobre os blocos de esmalte 8 vezes ao dia, de 2 em 2 horas. A cada 7 dias, foram coletados 2 blocos de esmalte e o biofilme formado sobre esses blocos. A análise do biofilme compreendeu avaliação da quantidade de unidades formadoras de colônia (UFC) de Streptococcus mutans, Streptococcus totais e Lactobacillus casei; dosagem de carboidratos totais e dosagem da capacidade antioxidante equivalente ao Trolox (TEAC). A perda mineral dos blocos de esmalte foi avaliada por meio da microdureza superficial Knoop e Tomografia por Coerência Óptica (OCT). Utilizou-se o programa BioEstat 5.0 para a análise estatística, com nível de significância de ?=0,05. A análise do biofilme mostrou que o grupo tucumã (GT)-14dias e grupo pupunha (GP)-7dias apresentaram a menor quantidade de UFC do total de microrganismos, diferindo estatisticamente dos grupos sacarose (GS)-7 e 14dias, GT-7dias e GP-14dias (p<0,05). O grupo GT-7 e 14 dias mostraram dosagens de TEAC semelhantes estatisticamente ao grupo GS-7 e 14dias. O grupo GP apresentou os menores valores de TEAC e de carboidratos totais. Não houve diferença estatística intragrupos nos diferentes tempos experimentais, relacionados ao TEAC e carboidratos totais. A análise da perda de dureza superficial (PDS), coeficiente de atenuação óptica e área sob a curva do sinal de OCT mostraram que o grupo GP-7dias apresentou a menor perda mineral superficial e subsuperficial. A variável TEAC revelou correlação positiva moderada com carboidratos, Streptococcus mutans, Streptococcus totais e PDS sugerindo que o ambiente redox possa ter influenciado e mediando as reações no biofilme. Concluiu-se que os óleos testados reduziram a agregação bacteriana e a perda mineral, sendo que o óleo de tucumã apresentou efeito tardio, enquanto que o óleo da pupunha mostrou resultado mais imediato. O óleo da pupunha por ter apresentado ação nos processos iniciais de formação do biofilme pode ser considerado mais efetivo na prevenção à cárie dental. / Dental caries still affects many people worldwide. Its occurrence depends on the formation of a biofilm on the tooth surface. The interaction between biofilm microorganisms and the components of the diet can interfere in different ways in this pathology, as some food components act favoring the appearance of lesions, such as carbohydrates, while others, act by inhibiting it, such as fatty acids, polyphenols, casein and lectin. Tucumã (Astrocaryum vulgare) and peach palm (Bactries gasipae) are oleaginous fruits native from the Amazonia, which have a high lipid content and carotenes. The objective of this study was to evaluate the influence of the oils extracted from the pulp of these fruits on dental biofilm composition and dynamics of enamel demineralization. The oils were extracted without addition of solvents, characterized and mixed with a 20% sucrose solution, to be tested under an in situ study model. Eight volunteers wore palatal appliances containing 4 dental enamel blocks during 3 phases of 14 days each (n = 96). The control (20% sucrose) and experimental solutions (addition of the oils) were applied on the enamel blocks 8 times per day, every 2 hours. Every 7 days 2 enamel blocks were removed and biofilm formed on their surfaces were collected. The analysis comprised the assessment of biofilm forming units (CFU) of Streptococcus mutans, Streptococcus total and Lactobacillus casei, and the dosage of both the total carbohydrates and the Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC). The mineral loss of enamel blocks was evaluated by Knoop microhardness and Optical Coherence Tomography (OCT). The BioEstat 5.0 was used for statistical analysis with a significance level of ? = 5%. The biofilm analysis showed the least amount of CFU of total microorganisms on group tucumã (GT)-14days and group pupunha (GP)-7days, differing from groups of sucrose (GS)-7 and 14days, GT-7days and GP-14days (p<0,05). The GT-7 and 14days showed statistically similar doses of TEAC compared to groups GS-7 and 14days. The GP group showed the lowest values of TEAC and total carbohydrates. With respect to TEAC and total carbohydrates, there was no statistical difference among groups in different experimental times. The analysis of surface hardness (SMH) loss, optical attenuation coefficient and area under the curve of the OCT signal showed that group GP-7days had the lowest surface and subsurface mineral loss. The TEAC variable showed moderate positive correlation with carbohydrates, Streptococcus mutans, Streptococcus total and SMH, suggesting that the environment is influencing and mediating redox reactions in the biofilm. It was concluded that all the oils reduced bacterial aggregation and mineral loss, and that the tucumã oil presented a late effect, while the peach palm oil showed a most immediate result. As the peach palm oil was shown to act during the initial processes of biofilm formation it can be considered more effective in preventing dental caries.
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Avaliação da interação do TiF4 com a hidroxiapatita e esmalte bem como o efeito sobre a des-remineralização do esmalte dentário com lesão de cárie artificial in situ / Interaction of TiF4 varnish with enamel and hydroxyapatite and its effect on the de-remineralization of pre-demineralized enamel in situ

Comar, Lívia Picchi 02 April 2015 (has links)
Este estudo teve como o objetivo avaliar in vitro o efeito do tratamento com vernizes de tetrafluoreto de titânio (TiF4) e fluoreto de sódio (NaF) (ambos com 0,95%, 1,95% e 2,45% F) sobre 1) a quantidade de F- liberada em água deionizada e saliva artificial, por período de 12h; 2) os tipos de compostos formados pela interação com a hidroxiapatita (neste caso, com soluções ao invés dos vernizes); 3) a porcentagem de elementos presentes na superfície do esmalte bovino e humano, hígidos (H) e desmineralizados (DES); 4) a quantidade de CaF2 sobre a superfície do esmalte bovino e humano, H e DES. Adicionalmente, 5) o efeito dos vernizes de TiF4 e NaF sobre a remineralização do esmalte bovino, em diferentes condições in situ, foi avaliado. Para etapa 1, a liberação de F- foi quantificada por eletrodo de íon específico. Na etapa 2, pó de HAP produzido por precipitação foi tratado com soluções fluoretadas. Os compostos formados foram avaliados por espectroscopia de infravermelho e difração de raios-X. Nas etapas 3 e 4, as superfícies tratadas com os vernizes foram analisadas por MEV- EDAX e por biópsias básicas, respectivamente. Vinte voluntários (n final=17) participaram do ensaio in situ com 3 fases cruzadas, os quais utilizaram aparelhos palatinos contendo amostras de esmalte bovino desmineralizadas tratadas com vernizes de TiF4, NaF ou placebo. As amostras foram submetidas a diferentes condições de des-remineralização (presença ou não de tela plástica; variação da frequência de aplicação de sacarose 20%) e à exposição ao dentifrício fluoretado. O volume mineral e profundidade da lesão foram avaliados por microradiografia transversal (TMR). 1) Os vernizes de TiF4 (1,95 e 2,45% F) liberaram mais fluoreto comparados aos vernizes de NaF tanto em água como em saliva artificial, sendo a diferença significativa nas primeiras 6h de contato (p<0,0001). 2) O TiF4 causou alteração na estrutura da HAP e induziu à formação de novos compostos como TiO2 e Ti (HPO4)2. 3) Os vernizes de TiF4 induziram à formação de uma camada de revestimento sobre a superfície do esmalte com microfissuras em sua extensão, rica em Ti e F. 4) Adicionalmente, o TiF4 (1,95 e 2,45% F) produziu maior deposição de fluoreto álcali-solúvel que o NaF, especialmente sobre o esmalte bovino em comparação ao humano. Maior deposição de fluoreto foi vista também para o esmalte DES em comparação ao H (p<0,0001). 5) O verniz de TiF4 (2,45% F) aumentou significativamente a remineralização de lesões artificiais de cárie em relação ao NaF, independente da severidade do desafio cariogênico in situ. Já o efeito remineralizante do NaF foi dependente da condição cariogênica (p<0,0001). Portanto, o verniz de TiF4 é promissor na remineralização de lesões iniciais de cárie dentária, sendo este efeito relacionado à formação de uma camada superficial protetora rica em compostos à base de Ti e à maior deposição de fluoreto no esmalte. / This study aimed to evaluate the in vitro effect of titanium tetrafluoride (TiF4) and sodium fluoride (NaF) varnishes (both with 0.95%, 1.95%, 2.45% F) treatment on the 1) F- release in deionized water and artificial saliva for 12h period; 2) types of compounds formed by the interaction with hydroxyapatite (in this case, solutions were tested instead of varnishes); 3) percentage of the elements on bovine and human, sound (S) and demineralized (DE), enamel surface; 4) F- uptake (CaF2 deposition) on human and bovine, S and DE, enamel surface. Additionally, 5) the effect of TiF4 and NaF varnishes on bovine enamel remineralization, in different in situ conditions, was assessed. In study 1, the F- release was measured by ion specific electrode. In study 2, HAP powder, produced by precipitation, was treated with fluoride solutions. The compounds formed were evaluated by infrared spectroscopy and X-ray diffraction. In studies 3 and 4, the surfaces treated with the varnishes were analyzed by SEM-EDAX and basic biopsies, respectively. Twenty volunteers (final n=17) participated of the in situ study with 3 crossover phases, in which they wore palatal appliances containing bovine demineralized enamel samples treated with TiF4, NaF or placebo varnishes. The samples were subjected to different de-remineralization conditions (presence or absence of plastic mesh and variation in frequency of application of 20% sucrose) and exposure to fluoride dentifrice. Themineral content and lesion depth were evaluated by transverse microradiography (TMR). 1) The TiF4 varnishes (1.95 and 2.45% F) released more F- compared to NaF varnishes in both water and artificial saliva, and significant difference was found in the first 6h (p<0.0001). 2) The TiF4 caused change in the HAP structure and induced the formation of new compounds such as TiO2 and Ti (HPO4)2. 3) The TiF4 varnishes induced the formation of a coating layer rich in Ti and F, with microcracks in its extension, on the enamel surface. Additionally, TiF4 (1.95 and 2.45% F) provided higher deposition of alkali-soluble Fluoride than NaF, especially on bovine enamel compared to human enamel. 4) Higher fluoride diposition was also seen on DE compared to S enamel (p<0.0001). 5) The TiF4 varnish (2.45% F) significantly increased the remineralization of artificial carious lesions compared to NaF, regardless of the severity of cariogenic challenge in situ. On the other hand, the remineralizing effect of NaF was dependent on the cariogenic condition (p<0.0001). Therefore, the TiF4 varnish is promising agent in the remineralization of incipient dental caries lesions, whose effect is related to the formation of a protective surface layer rich in Ti compounds and to the increase in fluoride deposition on the tooth enamel.
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Comparação do efeito de TiF4 e NaF, nas formas de verniz e solução, sobre a desmineralização e remineralização do esmalte dentário bovino in situ / Comparison between the effect of TiF4 and NaF varnishes and solutions on bovine enamel demineralization and remineralization in situ

Livia Picchi Comar 24 May 2011 (has links)
Este estudo teve como objetivo avaliar do efeito da aplicação tópica de um verniz e solução experimental de TiF4, comparando-os ao verniz e solução de NaF, sobre o processo de des-remineralização do esmalte dentário in situ. Para tal, 132 blocos de esmalte bovino (4x4mm) foram selecionados pela microdureza de superfície, sendo que em metade deles foi produzida lesão de cárie artificial em solução desmineralizante (pH 5,0, 6 dias). Na seqüência, foi determinada a microdureza de superfície pós-lesão. A outra metade dos blocos permaneceu hígida. Onze voluntários participaram de 3 fases cruzadas (14 dias cada, washout de 7 dias), boca-dividida e cegas, nas quais utilizaram aparelhos palatinos com 4 amostras de esmalte por fase (2 hígidas e 2 desmineralizadas), sendo que cada tipo de amostra recebeu um tipo de tratamento (verniz ou solução). Em todas as amostras permitiu-se o acúmulo de placa dentária. Em uma fase (Fase A), foram aplicados agentes a base de NaF a 5,42% (2,45% F- e pH 5,0), em outra fase (Fase B), foram utilizados agentes a base de TiF4 a 4% (2,45% F- e pH 1,0), e na última fase (Fase C) foram utilizados agentes placebos (verniz sem flúor pH 5,0 e sem tratamento). Os tratamentos foram realizados in vitro (verniz-6 h e solução-1 minuto). Durante o período in situ, os voluntários aplicaram solução de sacarose a 20%, 8x5min ao dia, sobre os blocos hígidos, para provocar a desmineralização. Já para os blocos desmineralizados nenhum procedimento foi realizado, para permitir a remineralização. A microdureza de superfície final foi realizada, para o cálculo da porcentagem de variação de microdureza de superfície, assim como a microdureza longitudinal e microradiografia transversal, para o cálculo das perdas de microdureza e volume mineral integradas, respectivamente. Os dados foram submetidos à ANOVA-RM/ Tukey-Kramer, teste t pareado e ANOVA a dois critérios/Bonferroni (p<0,05). Houve uma redução significativa da desmineralização superficial e um aumento significativo da remineralização superficial do esmalte in situ pelos tratamentos com verniz e solução de TiF4, em comparação aos controles. Pôde-se constatar ainda que os tratamentos com o verniz de NaF, verniz de TiF4 e solução de TiF4 foram efetivos na redução da desmineralização subsuperficial in situ. No entanto, observou-se que o protocolo experimental não permitiu uma adequada remineralização de subsuperfície in situ. Com base nos resultados, pode-se concluir que o verniz e a solução de TiF4 parecem ser promissores na prevenção da desmineralização, porém em relação à remineralização mais estudos in situ são necessários. / The aim of this study was to evaluate the effect of the experimental TiF4 varnish and solution, comparing with NaF solution and varnish, on dental enamel de-remineralization in situ. For that, 132 bovine enamel samples (4x4 mm) were selected using surface microhardness, and half of them were submitted to artificial caries lesion formation using a demineralizing solution (pH 5.0, 6 days). The surface microhardness after the demineralization was measured. The other half of the samples remained sound. Eleven volunteers took part in this cross-over, split-mouth and double-blind study performed in 3 phases of each 14 days (washout of 7 days). Four enamel samples were worn in palatal appliances (2 sound and 2 demineralized), being each type of sample submitted to one treatment (varnish or solution). The dental plaque accumulation was allowed on all samples. In phase A, 5.42% NaF varnish/solution was applied (2.45% F-, pH 5.0); in phase B, 4% TiF4 varnish/solution was used (2.45% F-, pH 1.0) and at the last phase (phase C) the placebo treatments were performed (placebo varnish pH 5.0 and no-treatment). The treatments were performed in vitro (varnish-6h and solution-1min). During the in situ phase, the volunteers dripped a solution containing 20% weight/volume (w/v) sucrose on the sound samples for 5 min, 8 times a day, to provoke demineralization. While on the demineralized samples nothing was done, in order to allow remineralization. The final surface microhardness was analyzed for the calculation of the % of surface microhardness change, as well as the cross-sectional hardness and the transversal microradiography, for the calculation of the integrated loss of microhardness and mineral volume, respectively. The data were submitted to RM-ANOVA/ Tukey-Kramer, t test and 2-way ANOVA/ Bonferroni (p<0.05). There was a significant reduction of the surface enamel demineralization and increase of surface remineralization by the treatments with TiF4 varnish and solution compared to control in situ. The treatments with NaF varnish, TiF4 varnish and solution were able to reduce the subsurface demineralization in situ. However, the experimental protocol did not allow the subsurface remineralization in situ. Based on the results, it can be concluded that the TiF4 varnish and solution seem to be promising products for preventing demineralization, but for the remineralization more studies need to be conducted.
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Análise da progressão e da reversão de lesões artificiais de cárie através de espectroscopia Raman e tomografia de coerência óptica

Oliveira, Rosa Virginia Dutra de 12 December 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2015-05-14T12:55:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2686751 bytes, checksum: 92f21a6df30beda97d32d8d8aaf864cf (MD5) Previous issue date: 2011-12-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / There are several protocols for the development of artificial carious lesions, and pH-cycling models, involving the exposure of substrates to the combination of demineralization and remineralization, are the most used. Usually, the methodologies analysis of the lesions obtained based on surface changes, and no information is obtained for deeper layers. The aim of this study was to analyze the progression and the reversal of artificial carious lesions in human enamel. Fifty third molars were used to obtain one hundred enamel blocks. Treatment consisted of a demineralizer pH cycling for different periods of time: G1 (1 day), G2 (3 days), G3 (5 days), G4 (7 days), G5 (9 days) and G6 (11 days). The remineralizing treatment used pH cycling for 7 days and neutral 2% fluoride gel applications, on alternate days. The samples were analyzed before and after treatments using Raman Spectroscopy (RS) for the analysis of the content of calcium phosphate and Optical Coherence Tomography (OCT) for the analysis of morphological characteristics. After the demineralization treatment it was observed greater loss of calcium phosphate for G1 compared to the other groups. The results showed that G1 and G2 presented an unchanged surface after demineralization treatment; in G3 and G4 it was observed surface irregularities, indicating initial erosion of the enamel surface, which progressed, resulting in exposure of the underlying dentin (G6). Beneath of the surface there was a progressive demineralization, according to increasing periods of time, and the cervical region showed greater demineralization than the occlusal region. In respect to the loss and gain of calcium phosphate, it was observed mineral loss for G1 and G2 after the remineralization treatment, while G3, G4, G5 and G6 showed gain of calcium phosphate. The morphological analysis after remineralization showed that there were reversals of the process only for G5. Longer storage periods showed a gradual demineralization effect on the surface and subsurface of the enamel. The cervical region of the specimens was more sensitive to demineralization than did the occlusal region. Shorter periods of storage showed no response to remineralization treatment. / Existem vários protocolos para o desenvolvimento de lesões artificiais de cárie, no entanto, modelos de ciclagem de pH, envolvendo a exposição de substratos dentários à combinação de desmineralização e remineralização são os mais utilizados, por mimetizar melhor a dinâmica de perda e ganho de minerais. As metodologias empregadas para analisar as lesões obtidas costumam basear-se em análise da superfície, não fornecendo informações sobre alterações ocorridas nas camadas mais profundas. O objetivo do presente estudo foi analisar características de progressão e reversão de lesões artificiais de cárie em esmalte humano. Para tanto, utilizou-se 50 terceiros molares inclusos, dos quais se obteve cem blocos de esmalte. O tratamento desmineralizador consistiu em ciclagem de pH por diferentes períodos de tempo: G1(1 dia), G2(3 dias), G3(5 dias), G4(7 dias), G5(9 dias) e G6(11dias). E o tratamento remineralizador em aplicações de flúor gel neutro a 2%, em dias alternados, concomitante a ciclagem de pH, durante 7 dias. As amostras foram analisadas antes e após os tratamentos, utilizando Espectroscopia Raman (ER) para análise de conteúdo de fosfato de cálcio e Tomografia de Coerência Óptica (TCO) para análise das características morfológicas. Após tratamento desmineralizador observou-se perda de fosfato de cálcio menor em G1 do que nos demais grupos. Os resultados mostraram que em G1 e G2 a superfície apresentou-se inalterada após tratamento desmineralizador; em G3 e G4 observaram-se irregularidades, denotando erosão inicial da superfície do esmalte, as quais progrediram, resultando em exposição da dentina subjacente em G6. Abaixo da superfície houve progressão da desmineralização, de acordo com os períodos crescentes de tempo, sendo que a região cervical apresentou maior desmineralização do que a oclusal. Quantificando perda e ganho de fosfato de cálcio, observou-se para G1 e G2 perda mineral após o tratamento remineralizador, enquanto G3, G4, G5 e G6 apresentaram ganho. Com relação à análise morfológica após remineralização, observou-se reversão do processo apenas para G5. Períodos maiores de armazenamento apresentaram efeito gradativo na desmineralização da superfície e da subsuperfície do esmalte. A região cervical apresentou-se mais sensível à desmineralização e exposição dentinária do que a oclusal. Períodos menores de armazenamento não apresentaram resposta ao tratamento remineralizador.
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Avaliação da interação do TiF4 com a hidroxiapatita e esmalte bem como o efeito sobre a des-remineralização do esmalte dentário com lesão de cárie artificial in situ / Interaction of TiF4 varnish with enamel and hydroxyapatite and its effect on the de-remineralization of pre-demineralized enamel in situ

Lívia Picchi Comar 02 April 2015 (has links)
Este estudo teve como o objetivo avaliar in vitro o efeito do tratamento com vernizes de tetrafluoreto de titânio (TiF4) e fluoreto de sódio (NaF) (ambos com 0,95%, 1,95% e 2,45% F) sobre 1) a quantidade de F- liberada em água deionizada e saliva artificial, por período de 12h; 2) os tipos de compostos formados pela interação com a hidroxiapatita (neste caso, com soluções ao invés dos vernizes); 3) a porcentagem de elementos presentes na superfície do esmalte bovino e humano, hígidos (H) e desmineralizados (DES); 4) a quantidade de CaF2 sobre a superfície do esmalte bovino e humano, H e DES. Adicionalmente, 5) o efeito dos vernizes de TiF4 e NaF sobre a remineralização do esmalte bovino, em diferentes condições in situ, foi avaliado. Para etapa 1, a liberação de F- foi quantificada por eletrodo de íon específico. Na etapa 2, pó de HAP produzido por precipitação foi tratado com soluções fluoretadas. Os compostos formados foram avaliados por espectroscopia de infravermelho e difração de raios-X. Nas etapas 3 e 4, as superfícies tratadas com os vernizes foram analisadas por MEV- EDAX e por biópsias básicas, respectivamente. Vinte voluntários (n final=17) participaram do ensaio in situ com 3 fases cruzadas, os quais utilizaram aparelhos palatinos contendo amostras de esmalte bovino desmineralizadas tratadas com vernizes de TiF4, NaF ou placebo. As amostras foram submetidas a diferentes condições de des-remineralização (presença ou não de tela plástica; variação da frequência de aplicação de sacarose 20%) e à exposição ao dentifrício fluoretado. O volume mineral e profundidade da lesão foram avaliados por microradiografia transversal (TMR). 1) Os vernizes de TiF4 (1,95 e 2,45% F) liberaram mais fluoreto comparados aos vernizes de NaF tanto em água como em saliva artificial, sendo a diferença significativa nas primeiras 6h de contato (p<0,0001). 2) O TiF4 causou alteração na estrutura da HAP e induziu à formação de novos compostos como TiO2 e Ti (HPO4)2. 3) Os vernizes de TiF4 induziram à formação de uma camada de revestimento sobre a superfície do esmalte com microfissuras em sua extensão, rica em Ti e F. 4) Adicionalmente, o TiF4 (1,95 e 2,45% F) produziu maior deposição de fluoreto álcali-solúvel que o NaF, especialmente sobre o esmalte bovino em comparação ao humano. Maior deposição de fluoreto foi vista também para o esmalte DES em comparação ao H (p<0,0001). 5) O verniz de TiF4 (2,45% F) aumentou significativamente a remineralização de lesões artificiais de cárie em relação ao NaF, independente da severidade do desafio cariogênico in situ. Já o efeito remineralizante do NaF foi dependente da condição cariogênica (p<0,0001). Portanto, o verniz de TiF4 é promissor na remineralização de lesões iniciais de cárie dentária, sendo este efeito relacionado à formação de uma camada superficial protetora rica em compostos à base de Ti e à maior deposição de fluoreto no esmalte. / This study aimed to evaluate the in vitro effect of titanium tetrafluoride (TiF4) and sodium fluoride (NaF) varnishes (both with 0.95%, 1.95%, 2.45% F) treatment on the 1) F- release in deionized water and artificial saliva for 12h period; 2) types of compounds formed by the interaction with hydroxyapatite (in this case, solutions were tested instead of varnishes); 3) percentage of the elements on bovine and human, sound (S) and demineralized (DE), enamel surface; 4) F- uptake (CaF2 deposition) on human and bovine, S and DE, enamel surface. Additionally, 5) the effect of TiF4 and NaF varnishes on bovine enamel remineralization, in different in situ conditions, was assessed. In study 1, the F- release was measured by ion specific electrode. In study 2, HAP powder, produced by precipitation, was treated with fluoride solutions. The compounds formed were evaluated by infrared spectroscopy and X-ray diffraction. In studies 3 and 4, the surfaces treated with the varnishes were analyzed by SEM-EDAX and basic biopsies, respectively. Twenty volunteers (final n=17) participated of the in situ study with 3 crossover phases, in which they wore palatal appliances containing bovine demineralized enamel samples treated with TiF4, NaF or placebo varnishes. The samples were subjected to different de-remineralization conditions (presence or absence of plastic mesh and variation in frequency of application of 20% sucrose) and exposure to fluoride dentifrice. Themineral content and lesion depth were evaluated by transverse microradiography (TMR). 1) The TiF4 varnishes (1.95 and 2.45% F) released more F- compared to NaF varnishes in both water and artificial saliva, and significant difference was found in the first 6h (p<0.0001). 2) The TiF4 caused change in the HAP structure and induced the formation of new compounds such as TiO2 and Ti (HPO4)2. 3) The TiF4 varnishes induced the formation of a coating layer rich in Ti and F, with microcracks in its extension, on the enamel surface. Additionally, TiF4 (1.95 and 2.45% F) provided higher deposition of alkali-soluble Fluoride than NaF, especially on bovine enamel compared to human enamel. 4) Higher fluoride diposition was also seen on DE compared to S enamel (p<0.0001). 5) The TiF4 varnish (2.45% F) significantly increased the remineralization of artificial carious lesions compared to NaF, regardless of the severity of cariogenic challenge in situ. On the other hand, the remineralizing effect of NaF was dependent on the cariogenic condition (p<0.0001). Therefore, the TiF4 varnish is promising agent in the remineralization of incipient dental caries lesions, whose effect is related to the formation of a protective surface layer rich in Ti compounds and to the increase in fluoride deposition on the tooth enamel.
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Influência dos óleos do tucumã (Astrocaryum vulgare) e da pupunha (Bactris gasipae) na composição do biofilme dental e dinâmica do processo de cárie em esmalte: um estudo in situ / Influence of tucumã (Astrocaryum vulgare) and peach palm (Bactris gasipae) oils on dental biofilm composition and dynamics of enamel caries: an in situ study

Danielle Tupinambá Emmi 05 November 2013 (has links)
A cárie dental ainda afeta grande número de pessoas no mundo todo. Sua ocorrência depende da formação, sobre a superfície dentária, de um biofilme microbiano. As interações entre microrganismos do biofilme e os componentes da dieta, podem interferir de diferentes formas nessa patologia, pois alguns componentes alimentares atuam favorecendo o aparecimento de lesões, tal como os carboidratos, enquanto outros, atuam inibindo, como ácidos graxos, polifenóis, caseína e lectina. O tucumã (Astrocaryum vulgare) e a pupunha (Bactries gasipae) são frutos oleaginosos nativos da Região Amazônica, que apresentam alto teor lipídico e de carotenos. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a influência dos óleos extraídos da polpa destes frutos na composição do biofilme dental e dinâmica do processo de desmineralização em esmalte. Os óleos foram extraídos sem adição de solventes, caracterizados e misturados a uma solução de 20% de sacarose, para serem testados por meio de um modelo de estudo in situ. Oito voluntários utilizaram dispositivos palatinos contendo 4 blocos de esmalte dental, durante 3 fases de 14 dias cada (n=96). As soluções controle (sacarose 20%) e as soluções com óleos testadas, foram aplicadas sobre os blocos de esmalte 8 vezes ao dia, de 2 em 2 horas. A cada 7 dias, foram coletados 2 blocos de esmalte e o biofilme formado sobre esses blocos. A análise do biofilme compreendeu avaliação da quantidade de unidades formadoras de colônia (UFC) de Streptococcus mutans, Streptococcus totais e Lactobacillus casei; dosagem de carboidratos totais e dosagem da capacidade antioxidante equivalente ao Trolox (TEAC). A perda mineral dos blocos de esmalte foi avaliada por meio da microdureza superficial Knoop e Tomografia por Coerência Óptica (OCT). Utilizou-se o programa BioEstat 5.0 para a análise estatística, com nível de significância de ?=0,05. A análise do biofilme mostrou que o grupo tucumã (GT)-14dias e grupo pupunha (GP)-7dias apresentaram a menor quantidade de UFC do total de microrganismos, diferindo estatisticamente dos grupos sacarose (GS)-7 e 14dias, GT-7dias e GP-14dias (p<0,05). O grupo GT-7 e 14 dias mostraram dosagens de TEAC semelhantes estatisticamente ao grupo GS-7 e 14dias. O grupo GP apresentou os menores valores de TEAC e de carboidratos totais. Não houve diferença estatística intragrupos nos diferentes tempos experimentais, relacionados ao TEAC e carboidratos totais. A análise da perda de dureza superficial (PDS), coeficiente de atenuação óptica e área sob a curva do sinal de OCT mostraram que o grupo GP-7dias apresentou a menor perda mineral superficial e subsuperficial. A variável TEAC revelou correlação positiva moderada com carboidratos, Streptococcus mutans, Streptococcus totais e PDS sugerindo que o ambiente redox possa ter influenciado e mediando as reações no biofilme. Concluiu-se que os óleos testados reduziram a agregação bacteriana e a perda mineral, sendo que o óleo de tucumã apresentou efeito tardio, enquanto que o óleo da pupunha mostrou resultado mais imediato. O óleo da pupunha por ter apresentado ação nos processos iniciais de formação do biofilme pode ser considerado mais efetivo na prevenção à cárie dental. / Dental caries still affects many people worldwide. Its occurrence depends on the formation of a biofilm on the tooth surface. The interaction between biofilm microorganisms and the components of the diet can interfere in different ways in this pathology, as some food components act favoring the appearance of lesions, such as carbohydrates, while others, act by inhibiting it, such as fatty acids, polyphenols, casein and lectin. Tucumã (Astrocaryum vulgare) and peach palm (Bactries gasipae) are oleaginous fruits native from the Amazonia, which have a high lipid content and carotenes. The objective of this study was to evaluate the influence of the oils extracted from the pulp of these fruits on dental biofilm composition and dynamics of enamel demineralization. The oils were extracted without addition of solvents, characterized and mixed with a 20% sucrose solution, to be tested under an in situ study model. Eight volunteers wore palatal appliances containing 4 dental enamel blocks during 3 phases of 14 days each (n = 96). The control (20% sucrose) and experimental solutions (addition of the oils) were applied on the enamel blocks 8 times per day, every 2 hours. Every 7 days 2 enamel blocks were removed and biofilm formed on their surfaces were collected. The analysis comprised the assessment of biofilm forming units (CFU) of Streptococcus mutans, Streptococcus total and Lactobacillus casei, and the dosage of both the total carbohydrates and the Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC). The mineral loss of enamel blocks was evaluated by Knoop microhardness and Optical Coherence Tomography (OCT). The BioEstat 5.0 was used for statistical analysis with a significance level of ? = 5%. The biofilm analysis showed the least amount of CFU of total microorganisms on group tucumã (GT)-14days and group pupunha (GP)-7days, differing from groups of sucrose (GS)-7 and 14days, GT-7days and GP-14days (p<0,05). The GT-7 and 14days showed statistically similar doses of TEAC compared to groups GS-7 and 14days. The GP group showed the lowest values of TEAC and total carbohydrates. With respect to TEAC and total carbohydrates, there was no statistical difference among groups in different experimental times. The analysis of surface hardness (SMH) loss, optical attenuation coefficient and area under the curve of the OCT signal showed that group GP-7days had the lowest surface and subsurface mineral loss. The TEAC variable showed moderate positive correlation with carbohydrates, Streptococcus mutans, Streptococcus total and SMH, suggesting that the environment is influencing and mediating redox reactions in the biofilm. It was concluded that all the oils reduced bacterial aggregation and mineral loss, and that the tucumã oil presented a late effect, while the peach palm oil showed a most immediate result. As the peach palm oil was shown to act during the initial processes of biofilm formation it can be considered more effective in preventing dental caries.
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Radioterapia ativa e inibidores de proteases inativam MMPs, na junção amelodentinária de dentes permanentes / Radiotherapy activates and protease inhibitors inactivate MMPs in dentinoenamel junction of permanent teeth

Bonilla, Claudia María Carpio 29 April 2016 (has links)
O tratamento radioterápico para pacientes com neoplasias de cabeça e pescoço pode trazer consequências secundárias graves como alterações da estrutura dental, com conseguinte prejuízo da função oral, a qual influencia negativamente a qualidade de vida. Recentemente trabalhos de pesquisa tem demonstrado que a radiação induz a expressão e ativação das metaloproteinases da matriz (MMPs), consideradas as principais enzimas responsáveis pela remodelação da matriz orgânica, incluindo os componentes e estruturas da junção amelodentinária (JAD). Questiona-se então se as alterações dentais observadas em pacientes pós-radioterapia poderiam ser causadas também pela ativação das MMPs que se encontram na JAD. O presente estudo apresentou três avaliações: a ativação e expressão das MMPs, a implementação de inibidores de proteases como método de inibição das MMPs e a ativação das MMPs devido a um desafio ácido. Para as medições foram utilizados 178 fragmentos dentais de molares, divididos aleatoriamente em 2 grupos (decíduos e permanentes) / 4 subgrupos experimentais (irradiados e não-irradiados). Os fragmentos foram expostos à radiacao com Co-60, com fracao de dose de 2 Gy, 5 dias consecutivos, ate atingirem a dose total de 60 Gy, com um total de 30 ciclos, durante 6 semanas. Com o objetivo de determinar a expressão e atividade das MMPs, foram realizados os ensaios de imunofluorescência e zimografia in situ, nos fragmentos dentais de 0,6mm, analisando os tecidos duros do esmalte, dentina e JAD. Para avaliar se produtos odontológicos inativam as MMPs, os dentes foram imersos em 0,5ml de digluconato de clorexidina a 0,12%, fluoreto de sódio a 0,05%, polifenol epigalocatequina 3-galato 400&mu;M e água destilada (grupo controle), por 1 hora. Assim também com objetivo de avaliar se em um ambiente ácido, as MMPs apresentariam maior atividade, os dentes foram colocados em contato com 20&mu;l de solucao desmineralizadora com pH de 4,8, por um minuto, e posteriormente lavados com 20&mu;l de água deionizada, por um minuto. De maneira geral pudemos observar que a irradiação ativa as MMPs na JAD e estes efeitos foram mais evidentes nos dentes permanentes que nos decíduos. Com relação à expressão das diferentes MMPs, foi observada uma maior expressão das MMPs-9 e -20 para dentes decíduos, e para dentes permanentes as MMPs-2, -9 e -20 apresentaram expressão semelhante. Tendo em vista que a irradiação foi capaz de ativar as MMPs expressas na JAD de dentes permanentes, e em busca de soluções capazes de inibi-las, observamos que o Digluconato de Clorexidina, o Fluoreto de Sódio e o Polifenol Epigalocatequina 3-galato inibiram a atividade das MMPs na JAD em dentes permanentes. Por último ao investigar o efeito de um desafio ácido, na atividade das MMPs, observamos que a desmineralização não aumentou a atividade das MMPs em dentes não irradiados, porém aumentou a atividade das MMPs em dentes irradiados. Comparando dentes irradiados submetidos ou não à desmineralização, observou-se que a desmineralização incrementou a atividade das MMPs, já induzida pela irradiação. / Radiotherapy for patients with head and neck cancer can have serious secondary consequences such as changes in tooth structure, with consequent loss of oral function which negatively influences an individual\'s quality of life. Recently research work has shown that radiation induces the expression and activation of matrix metalloproteinases (MMPs) which are considered the major enzymes responsible for the remodeling of the organic matrix, including the components and structures of the dentinoenamel junction (DEJ). It is questionable if the dental changes observed in post-radiotherapy patients could also be caused by the activation of MMPs that are in the DEJ. The present study has three assessments: the activation and expression of MMPs, the implementation of protease inhibitors such as method of inactivating MMPs and the activation of MMPs due to an acid challenge. The measurements that were used were 178 molar dental fragments randomly divided into 2 groups (deciduous and permanent) / 4 experimental subgroups (irradiated and non-irradiated). The samples were exposed to radiation using Co-60 at a cumulative dose of 2 Gy fraction, 5 consecutive days, until they reached a total dose of 60 Gy, with a total of 30 cycles for 6 weeks. In order to determine the expression and activity of MMPs immunofluorescence assays were performed and in situ zymography, the dental fragments of 0.6mm, analyzing the DEJ in three areas of the tooth (cervical, cuspal and groove of pit). To assess whether MMPs inactivate dental products, the teeth were immersed in 0.5 ml of chlorhexidine digluconate at 0.12%, sodium fluoride 0.05%, polyphenol epigallocatechin-3 gallate 400&mu;M and distilled water (control group) for 1 hour. To evaluate effects in an acidic environment, MMPs have higher activity, the teeth were put in contact with 20&mu;l of demineralizing solution with pH 4.8, for a minute, and then washed with 20&mu;l of deionized water, one minute. In general we observed that the radiation active MMPs in DEJ and these effects were more evident in the permanent teeth than in the primary teeth. Regarding the expression of different MMPs, showed the greatest expression of MMP-9 and -20 for deciduous teeth, and permanent teeth MMPs-2, -9 and -20 showed similar expression. Given that the irradiation was able to activate MMPs expressed in the DEJ permanent teeth, and looking for solutions that inactive them, we observed that the digluconate Chlorhexidine, the Sodium Fluoride and Polyphenol Epigallocatechin-3-gallate inhibited activity of MMPs in the DEJ in permanent teeth. Finally, to investigate the effect of an acid challenge, in the activity of MMPs, we observed that the demineralization did not increase the activity of MMPs in non-irradiated teeth but increased the activity of MMPs in irradiated teeth. Comparing irradiated whether subjected to demineralization teeth or not, it was found that demineralization increased activity of MMPs, induced by the radiation.
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Efeitos de regimes de sobreclareamento associados a produtos clareadores caseiros sobre o conteúdo mineral e a rugosidade do esmalte dentário humano / Overbleaching effects on mineral content and roughness of human enamel

Marianna Sorozini Ferreira de Miranda 09 December 2013 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O clareamento dental se tornou um dos tratamentos estéticos mais realizados nos consultórios odontológicos, devido à simplicidade técnica e popularização através da mídia. Consiste na utilização de géis à base de peróxido de carbamida, peróxido de hidrogénio e, em uma menor escala, de perborato de sódio, com intuito de oxidar moléculas responsáveis pela pigmentação da estrutura dentária. Apesar da grande quantidade de estudos sobre o tema, não se sabe os efeitos do uso excessivo desses agentes sobre a estrutura dentária. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos sobre a rugosidade superficial e conteúdo mineral do esmalte dental humano submetido a regimes de sobreclareamento associados ao uso de géis clareadores caseiros: peróxido de carbamida 10% (Opalescence PF Regular 10%, Ultradent do Brasil Produtos Odontológicos Ltda., Indaiatuba, São Paulo), peróxido de hidrogênio 9,5% (DayWhite 9,5%, Discus, LLC Culver City, EUA), bem como tiras clareadoras (Oral-B WhiteStrips, Anderson Packaging, Rockford, Estados Unidos). Quatro fragmentos de esmalte obtidos a partir de cinco dentes foram submetidos a um diferente tratamento: Grupo I - armazenamento em saliva artificial por oito semanas; Grupo 2 oito semanas de tratamento com gel de peróxido de carbamida 10% por 6 horas diárias; Grupo 3 oito semanas de tratamento com gel de peróxido de hidrogênio 9,5% com duas aplicações diárias de 30 minutos; Grupo 4 oito semanas de tratamento com tiras clareadoras duas aplicações diárias de 30 minutos. A alteração no conteúdo mineral foi avaliada semanalmente em seis pontos de cada fragmento devidamente identificados através de um sistema de coordenadas (X, Y e Z) utilizando-se a técnica de fluorescência de raios X (Artax 200). Alterações na rugosidade superficial das amostras também foram avaliadas através de um rugosímetro 3D (FormTalysurf 60, Taylor Leicester, Reino Unido). Apenas o grupo 3 apresentou diferenças estatísticas significativas com relação aos níveis de rugosidade (p<0,05), porém não consideradas como clinicamente significativos. Para os demais tratamentos e intervalos propostos, não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas (p>0,05). Desse modo, não houve alterações compatíveis com um processo de desmineralização ou aumento real da rugosidade da superfície. Nas condições desse estudo in vitro os géis clareadores caseiros foram considerados seguros. São necessários novos estudos in situ e in vitro que analisem os efeitos de regimes de sobreclareamento quando em condições de somatório de desafios intra-orais. / Tooth bleaching has become one of the most performed cosmetic treatments in dental offices because of the technical simplicity and popularization through media. It is based in the use of gels containing carbamide peroxide, hydrogen peroxide, and sodium perborate to oxidize molecules responsible for pigmentation of the tooth structure. Despite the large amount of studies of the topic, the effects of overuse of these agents on tooth structure are not established. The aim of this study was to evaluate the effects on the surface roughness and mineral content of the enamel submitted to overbleaching protocols associated with the use of home bleaching gels: 10 % carbamide peroxide (Opalescence PF 10 % Regular, Ultradent Dental Products of Brazil Ltd., Indaiatuba, São Paulo), hydrogen peroxide 9.5% (DayWhite 9.5%, Discus, LLC Culver City, EUA), as well as bleaching strips (Oral- B Whitestrips, Anderson Packaging, Rockford, USA). Four enamel fragments obtained from five teeth were subjected to different treatments: Group I - storage in artificial saliva for eight weeks; Group 2 eight-week exposure to 10% carbamide peroxide gel for 6 hours daily; Group 3 eight-week exposure to 9,5% hydrogen peroxide gel - two 30-minute application, Group 4 eight-week exposure to bleaching strips - twice daily for 30 minutes. The change in mineral content was assessed weekly with the analysis of six points in each fragment properly identified by a coordinate system (X, Y and Z) using the technique of X-ray fluorescence (Artax 200). Changes in surface roughness of the samples were also evaluated using a 3D perfilometer (FormTalysurf 60, Taylor Leicester, UK). Only group 3 showed statistically significant differences for roughness (p <0.05), but this is not considered as clinically important. For other proposed treatments and intervals, there were no statistically significant differences for any of the treatments tested in any of the proposed ranges (p > 0,05). There was no sign of demineralization process. Under these in vitro conditions, home bleaching gels were considered safe. Further in situ and in vivo studies are necessary to examine the effects of overbleaching protocols with all other intra-oral challenges.
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Radioterapia ativa e inibidores de proteases inativam MMPs, na junção amelodentinária de dentes permanentes / Radiotherapy activates and protease inhibitors inactivate MMPs in dentinoenamel junction of permanent teeth

Claudia María Carpio Bonilla 29 April 2016 (has links)
O tratamento radioterápico para pacientes com neoplasias de cabeça e pescoço pode trazer consequências secundárias graves como alterações da estrutura dental, com conseguinte prejuízo da função oral, a qual influencia negativamente a qualidade de vida. Recentemente trabalhos de pesquisa tem demonstrado que a radiação induz a expressão e ativação das metaloproteinases da matriz (MMPs), consideradas as principais enzimas responsáveis pela remodelação da matriz orgânica, incluindo os componentes e estruturas da junção amelodentinária (JAD). Questiona-se então se as alterações dentais observadas em pacientes pós-radioterapia poderiam ser causadas também pela ativação das MMPs que se encontram na JAD. O presente estudo apresentou três avaliações: a ativação e expressão das MMPs, a implementação de inibidores de proteases como método de inibição das MMPs e a ativação das MMPs devido a um desafio ácido. Para as medições foram utilizados 178 fragmentos dentais de molares, divididos aleatoriamente em 2 grupos (decíduos e permanentes) / 4 subgrupos experimentais (irradiados e não-irradiados). Os fragmentos foram expostos à radiacao com Co-60, com fracao de dose de 2 Gy, 5 dias consecutivos, ate atingirem a dose total de 60 Gy, com um total de 30 ciclos, durante 6 semanas. Com o objetivo de determinar a expressão e atividade das MMPs, foram realizados os ensaios de imunofluorescência e zimografia in situ, nos fragmentos dentais de 0,6mm, analisando os tecidos duros do esmalte, dentina e JAD. Para avaliar se produtos odontológicos inativam as MMPs, os dentes foram imersos em 0,5ml de digluconato de clorexidina a 0,12%, fluoreto de sódio a 0,05%, polifenol epigalocatequina 3-galato 400&mu;M e água destilada (grupo controle), por 1 hora. Assim também com objetivo de avaliar se em um ambiente ácido, as MMPs apresentariam maior atividade, os dentes foram colocados em contato com 20&mu;l de solucao desmineralizadora com pH de 4,8, por um minuto, e posteriormente lavados com 20&mu;l de água deionizada, por um minuto. De maneira geral pudemos observar que a irradiação ativa as MMPs na JAD e estes efeitos foram mais evidentes nos dentes permanentes que nos decíduos. Com relação à expressão das diferentes MMPs, foi observada uma maior expressão das MMPs-9 e -20 para dentes decíduos, e para dentes permanentes as MMPs-2, -9 e -20 apresentaram expressão semelhante. Tendo em vista que a irradiação foi capaz de ativar as MMPs expressas na JAD de dentes permanentes, e em busca de soluções capazes de inibi-las, observamos que o Digluconato de Clorexidina, o Fluoreto de Sódio e o Polifenol Epigalocatequina 3-galato inibiram a atividade das MMPs na JAD em dentes permanentes. Por último ao investigar o efeito de um desafio ácido, na atividade das MMPs, observamos que a desmineralização não aumentou a atividade das MMPs em dentes não irradiados, porém aumentou a atividade das MMPs em dentes irradiados. Comparando dentes irradiados submetidos ou não à desmineralização, observou-se que a desmineralização incrementou a atividade das MMPs, já induzida pela irradiação. / Radiotherapy for patients with head and neck cancer can have serious secondary consequences such as changes in tooth structure, with consequent loss of oral function which negatively influences an individual\'s quality of life. Recently research work has shown that radiation induces the expression and activation of matrix metalloproteinases (MMPs) which are considered the major enzymes responsible for the remodeling of the organic matrix, including the components and structures of the dentinoenamel junction (DEJ). It is questionable if the dental changes observed in post-radiotherapy patients could also be caused by the activation of MMPs that are in the DEJ. The present study has three assessments: the activation and expression of MMPs, the implementation of protease inhibitors such as method of inactivating MMPs and the activation of MMPs due to an acid challenge. The measurements that were used were 178 molar dental fragments randomly divided into 2 groups (deciduous and permanent) / 4 experimental subgroups (irradiated and non-irradiated). The samples were exposed to radiation using Co-60 at a cumulative dose of 2 Gy fraction, 5 consecutive days, until they reached a total dose of 60 Gy, with a total of 30 cycles for 6 weeks. In order to determine the expression and activity of MMPs immunofluorescence assays were performed and in situ zymography, the dental fragments of 0.6mm, analyzing the DEJ in three areas of the tooth (cervical, cuspal and groove of pit). To assess whether MMPs inactivate dental products, the teeth were immersed in 0.5 ml of chlorhexidine digluconate at 0.12%, sodium fluoride 0.05%, polyphenol epigallocatechin-3 gallate 400&mu;M and distilled water (control group) for 1 hour. To evaluate effects in an acidic environment, MMPs have higher activity, the teeth were put in contact with 20&mu;l of demineralizing solution with pH 4.8, for a minute, and then washed with 20&mu;l of deionized water, one minute. In general we observed that the radiation active MMPs in DEJ and these effects were more evident in the permanent teeth than in the primary teeth. Regarding the expression of different MMPs, showed the greatest expression of MMP-9 and -20 for deciduous teeth, and permanent teeth MMPs-2, -9 and -20 showed similar expression. Given that the irradiation was able to activate MMPs expressed in the DEJ permanent teeth, and looking for solutions that inactive them, we observed that the digluconate Chlorhexidine, the Sodium Fluoride and Polyphenol Epigallocatechin-3-gallate inhibited activity of MMPs in the DEJ in permanent teeth. Finally, to investigate the effect of an acid challenge, in the activity of MMPs, we observed that the demineralization did not increase the activity of MMPs in non-irradiated teeth but increased the activity of MMPs in irradiated teeth. Comparing irradiated whether subjected to demineralization teeth or not, it was found that demineralization increased activity of MMPs, induced by the radiation.

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