Resumo: Vários trabalhos na literatura têm discutido a importância dos polimorfismos enzimáticos em relação ao estado de ser adaptado dos organismos. Nesse trabalho foram estudadas algumas propriedades bioquímicas das aloenzimas EST-5S e EST-5F de Drosophila mulleri, que poderiam estar relacionadas às diferenças em valores adaptativos em indivíduos que apresentam essas variantes enzimáticas. Os resultados sugerem que a aloenzima EST-5S apresenta maior resistência à desnaturação térmica e a agentes caotrópicos, bem como maior atividade em altas concentrações salinas. Os resultados do experimento de produtividade a 29º C mostram que os indivíduos homozigotos para o alelo Est-5S deixam mais descendentes que os indivíduos homozigotos para o alelo Est-5F. Quanto as caractetísticas cinéticas, essas aloenzimas não diferem de forma significante. Os valores de Vmax e Km obtidos para as enzimas não purificadas foram, respectivamente, para a EST-5S: 32,54 µM/min e 1,43 mM, e para a EST-5F: 33,34 µM/min e 1,54 mM. A purificação das aloenzimas foi obtida pela separação em SDS-PAGE seguida da remoção dos géis, eluição em agitador magnético para a difusão das enzimas e posterior concentração desse material em membrana filtrante de 50 kDa (Millipore). O concentrado foi então analisado quanto à atividade esterásica e quanto à pureza (SDS-PAGE). Ambas as aleloenzimas apresentaram uma massa molecular entre 66 e 68 kDa para a subunidade, em SDS-PAGE. Os resultados do presente estudo não são concordantes com a hipótese de neutralidade para a manutenção dos polimorfismos, tanto em populações naturais como de laboratório, indicando a atuação da seleção natural sobre as aleloenzimas estudadas. / Abstract: Several works in literature have discussed the importance of the enzymatic polymorphisms in respect to the state of being adapted of the organisms. In this work, some biochemical properties of Drosophila mulleri of the allozymes EST-5S and EST-5F, which could be related to the differences in fitness values in individuals that present those enzymatic variants, were studied. The results suggest that the EST-5S allozyme presents larger resistance on the thermic denaturation and the chaotropics agents, as well as higher activity in elevated salt concentrations. The results of the productivity experiment at 29°C show that the homozygous individuals to the Est-5S allele let more offspring than the homozygous individuals to the Est -5F allele. Regarding the kinetic characteristics, those allozymes do not differ in a significant way. The Km and Vmax values obtained for crude extracts allozymes were, respectively, to the EST-5S: 32,54 µM/min and 1,43 mM, and to the EST-5F: 33,34 µM/min and 1,54 mM. The purification of the allozymes was obtained by the separation on SDS-PAGE followed by their removal from gels, elution in magnetic shaker for the diffusion of the enzymes and concentration of this material in filtrant membranes of 50 kDa (Millipore). The concentrated materials were then analyzed regarding to their enzymatic activity and to the purity (SDS PAGE). Both allozymes presented subunit molecular weights around 66 and 68 kDa on SDS PAGE. The results of the present study do not agree to neutrality hypothesis for polymorphisms maintenance, in natural and laboratory populations, indicating a natural selection action of the on the studied allozymes. / Orientador: Carlos Roberto Ceron / Coorientador: Gustavo Orlando Bonilla Rodriguez / Banca: Hamilton Cabral / Banca: Fátima Pereira de Souza / Mestre

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Curso de Pós-Graduação em Genética / Made available in DSpace on 2012-10-15T21:36:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2013-07-16T16:57:15Z : No. of bitstreams: 1 264420.pdf: 3236585 bytes, checksum: 94c74bb4a6881dc90f76f88805e7341c (MD5)

Orientador: Lilian Madi Ravazzi / Coorientador: Denise de Cerqueira Rossa Feres / Banca: Efraim Rodrigues / Banca: Hermione Elly Melara de Campos Bicudo / Resumo: Moscas do gênero Drosophila são adequadas para o estudo de flutuações populacionais por serem altamente sensíveis a pequenas modificações do ambiente e isto reflete no tamanho das populações naturais e também na diversidade de espécies ocupando um determinado habitat. Dados obtidos da literatura indicam que espécies deste gênero são candidatas potenciais para monitorar o nível de perturbação ambiental de uma determinada área. No presente trabalho foram estabelecidos três objetivos: (1) avaliar a eficiência de dois tipos de armadilhas, aberta e fechada, para a coleta de drosofilídeos; (2) comparar a fauna de drosofilídeos da borda e do interior do fragmento considerando as variações sazonais das espécies; (3) avaliar o gradiente de ação dos efeitos de borda na distribuição de drosofilídeos e estabelecer a extensão da borda para essa comunidade. O estudo foi realizado na Estação Ecológica de Paulo de Faria, um dos últimos fragmentos de floresta estacional semidecidual do Estado. Para cada objetivo foi estabelecida uma metodologia de coleta. Para a comparação entre os tipos de armadilhas foram utilizadas 20 armadilhas abertas e 20 fechadas em cada coleta. A comunidade de drosofilídeos, bem como a sazonalidade das espécies da borda e do interior do fragmento foram amostradas por coletas nessas duas áreas, utilizando armadilhas fechadas. Para avaliar a extensão e o gradiente de ação dos efeitos de borda foram utilizadas armadilhas fechadas em um transecto, o qual foi estabelecido a partir da borda em direção ao interior do fragmento. Em todas as metodologias foi utilizada nas armadilhas isca de banana nanica macerada com fermento biológico (Saccharomyces cerevisiae) e foram realizadas coletas Resumo 3 mensais, durante 12 meses. A identificação dos drosofilídeos...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-29Bitstream added on 2014-06-13T19:12:51Z : No. of bitstreams: 1 thomazine_vb_me_sjrp.pdf: 300929 bytes, checksum: 8a345195b89148d41da69659555f43dd (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Vários trabalhos na literatura têm discutido a importância dos polimorfismos enzimáticos em relação ao estado de ser adaptado dos organismos. Nesse trabalho foram estudadas algumas propriedades bioquímicas das aloenzimas EST-5S e EST-5F de Drosophila mulleri, que poderiam estar relacionadas às diferenças em valores adaptativos em indivíduos que apresentam essas variantes enzimáticas. Os resultados sugerem que a aloenzima EST-5S apresenta maior resistência à desnaturação térmica e a agentes caotrópicos, bem como maior atividade em altas concentrações salinas. Os resultados do experimento de produtividade a 29º C mostram que os indivíduos homozigotos para o alelo Est-5S deixam mais descendentes que os indivíduos homozigotos para o alelo Est-5F. Quanto as caractetísticas cinéticas, essas aloenzimas não diferem de forma significante. Os valores de Vmax e Km obtidos para as enzimas não purificadas foram, respectivamente, para a EST-5S: 32,54 µM/min e 1,43 mM, e para a EST-5F: 33,34 µM/min e 1,54 mM. A purificação das aloenzimas foi obtida pela separação em SDS-PAGE seguida da remoção dos géis, eluição em agitador magnético para a difusão das enzimas e posterior concentração desse material em membrana filtrante de 50 kDa (Millipore). O concentrado foi então analisado quanto à atividade esterásica e quanto à pureza (SDS-PAGE). Ambas as aleloenzimas apresentaram uma massa molecular entre 66 e 68 kDa para a subunidade, em SDS-PAGE. Os resultados do presente estudo não são concordantes com a hipótese de neutralidade para a manutenção dos polimorfismos, tanto em populações naturais como de laboratório, indicando a atuação da seleção natural sobre as aleloenzimas estudadas. / Several works in literature have discussed the importance of the enzymatic polymorphisms in respect to the state of being adapted of the organisms. In this work, some biochemical properties of Drosophila mulleri of the allozymes EST-5S and EST-5F, which could be related to the differences in fitness values in individuals that present those enzymatic variants, were studied. The results suggest that the EST-5S allozyme presents larger resistance on the thermic denaturation and the chaotropics agents, as well as higher activity in elevated salt concentrations. The results of the productivity experiment at 29°C show that the homozygous individuals to the Est-5S allele let more offspring than the homozygous individuals to the Est -5F allele. Regarding the kinetic characteristics, those allozymes do not differ in a significant way. The Km and Vmax values obtained for crude extracts allozymes were, respectively, to the EST-5S: 32,54 µM/min and 1,43 mM, and to the EST-5F: 33,34 µM/min and 1,54 mM. The purification of the allozymes was obtained by the separation on SDS-PAGE followed by their removal from gels, elution in magnetic shaker for the diffusion of the enzymes and concentration of this material in filtrant membranes of 50 kDa (Millipore). The concentrated materials were then analyzed regarding to their enzymatic activity and to the purity (SDS PAGE). Both allozymes presented subunit molecular weights around 66 and 68 kDa on SDS PAGE. The results of the present study do not agree to neutrality hypothesis for polymorphisms maintenance, in natural and laboratory populations, indicating a natural selection action of the on the studied allozymes.

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:24:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-11-30. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:48:28Z : No. of bitstreams: 1 000844079_20160101.pdf: 136179 bytes, checksum: 1e61d0998f079941ec16178bc5548dae (MD5) Bitstreams deleted on 2016-01-04T10:26:40Z: 000844079_20160101.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-01-04T10:28:30Z : No. of bitstreams: 1 000844079.pdf: 888836 bytes, checksum: 840d70a149eefb71a25812e84789977c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A perda de habitats é a principal ameaça à biodiversidade. Compreender essa transformação é importante para evitar perdas e para gerenciar o uso da biodiversidade remanescente. As moscas do gênero Drosophila são consideradas bioindicadoras. Traços morfométricos em drosofilídeos têm sido relacionados com o valor adaptativo desses organismos. Esse trabalho avaliou a assembléia de drosofilideos em fragmentos florestais com diferentes áreas, utilizando a abundância de espécies bioindicadoras, parâmetros ecológicos dessas populações e análise de três traços morfométricos (comprimento da asa, largura e comprimento do tórax). Foram amostrados dez fragmentos de floresta estacional, em áreas de borda, de interior e por meio de um transecto borda-interior. Os traços morfométricos de Zaprionus indianus e de Drosophila simulans foram analisados em quatro áreas de estudo. No total foram coletados 33.578 drosofilídeos, distribuídos em 17 espécies, mais os grupos cardini e repleta e o subgrupo saltans. As espécies de drosofilídeos invasores, como Z. indianus, e D. simulans apresentaram maior relação com fragmentos menores, enquanto que a espécie nativa D. willistoni ocorreu com maior abundância nas áreas de maior extensão. Foi estimado o valor de 60 metros para a borda. Em relação às medidas morfométricas, ambientes mais estáveis, como os fragmentos maiores, teriam melhores condições para o desenvolvimento das moscas em comparação com áreas impactadas, como os fragmentos menores, onde ocorre menor disponibilidade de recurso e maior competição. O presente estudo corroborou esses dados para D. simulans, entretanto, para Z. indianus o fator mais importante para a variação não foi a área do fragmento, é provável que paras esta espécie outros fatores, como o tipo de vegetação, sejam mais determinantes para o desenvolvimento corporal / Loss of habitat is the main threat to biodiversity. This transformation is important to avoid losses and to manage the use of the remaining biodiversity. The genus Drosophila flies are considered bioindicators. Morphometric traits in drosophilids have been linked with the adaptive value of such bodies. This study evaluated the drosophilid assembly in forest fragments with different areas, using plenty of bio-indicator species, ecological parameters of these populations and analysis of three morphometric traits (wing length, width and length of the chest). Ten fragments of seasonal forest were sampled in border areas, indoor and through an inside edge-transect. The morphometric traits Zaprionus indianus and Drosophila simulans have been analyzed in four areas of study. In total 33.578 drosophilids were collected, distributed in 17 species, plus the Cardini and full groups and the saltans subgroup. Species drosophilids invaders such as Z. indianus, and D. simulans showed higher with smaller fragments, while native species D. willistoni occurred with greater abundance in the areas of greater extent. It has been estimated the value of 60 meters to the edge. Regarding morphometric measures, more stable environments, such as larger fragments, would have better conditions for the development of flies compared to impacted areas, such as smaller fragments, which occurs less resource availability and increased competition. This study corroborated this data to D. simulans, however, to Z. indianus the most important factor in the change was not the area of the fragment, it is likely that this species paras other factors such as the type of vegetation, are more decisive for body development

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-03-22Bitstream added on 2014-06-13T19:07:21Z : No. of bitstreams: 1 penariol_l_me_sjrp.pdf: 455441 bytes, checksum: 406d5620a487db7fd793153e89e7eb28 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Moscas do gênero Drosophila são adequadas para o estudo de flutuações populacionais por serem altamente sensíveis a pequenas modificações do ambiente e isto reflete no tamanho das populações naturais e também na diversidade de espécies ocupando um determinado habitat. Dados obtidos da literatura indicam que espécies deste gênero são candidatas potenciais para monitorar o nível de perturbação ambiental de uma determinada área. No presente trabalho foram estabelecidos três objetivos: (1) avaliar a eficiência de dois tipos de armadilhas, aberta e fechada, para a coleta de drosofilídeos; (2) comparar a fauna de drosofilídeos da borda e do interior do fragmento considerando as variações sazonais das espécies; (3) avaliar o gradiente de ação dos efeitos de borda na distribuição de drosofilídeos e estabelecer a extensão da borda para essa comunidade. O estudo foi realizado na Estação Ecológica de Paulo de Faria, um dos últimos fragmentos de floresta estacional semidecidual do Estado. Para cada objetivo foi estabelecida uma metodologia de coleta. Para a comparação entre os tipos de armadilhas foram utilizadas 20 armadilhas abertas e 20 fechadas em cada coleta. A comunidade de drosofilídeos, bem como a sazonalidade das espécies da borda e do interior do fragmento foram amostradas por coletas nessas duas áreas, utilizando armadilhas fechadas. Para avaliar a extensão e o gradiente de ação dos efeitos de borda foram utilizadas armadilhas fechadas em um transecto, o qual foi estabelecido a partir da borda em direção ao interior do fragmento. Em todas as metodologias foi utilizada nas armadilhas isca de banana nanica macerada com fermento biológico (Saccharomyces cerevisiae) e foram realizadas coletas Resumo 3 mensais, durante 12 meses. A identificação dos drosofilídeos...

Orientador: Hermione Elly Melara de Campos Bicudo / Banca: Lílian Castiglioni / Banca: Marcelo Ferreira Lourenço / Banca: Eduardo Alves de Almeida / Banca: Lilian Madi Ravazzi / Resumo: Os padrões de esterases de 19 linhagens de 10 espécies do grupo saltans foram analisados usando eletroforese em gel de poliacrilamida e α e β-naftil acetatos como substratos. Cinqüenta e uma bandas esterásicas foram detectadas e classificadas como 31 α-esterases, 18 β-esterases e duas α/β-esterases. Com base nos padrões de inibição usando Malathion e sulfato de eserina, 34 bandas foram classificadas como carboxilesterases, 14 como acetilesterases e três como colinesterases. Dez loci gênicos foram tentativamente estabelecidos com base nos dados de posição da banda no gel, preferência ao substrato e padrões de inibição. Vinte bandas foram espécie-específicas, as restantes foram compartilhadas por espécie de um mesmo ou diferentes subgrupos. Sete bandas α-esterásicas foram observadas exclusivamente em machos. Bandas com diferentes freqüências ou grau de expressão entre os sexos também foram detectadas. Nos géis preparados para análise da expressão dos genes nas partes do corpo (cabeça, tórax e abdome), o grau de expressão das β- esterases foi alto no tórax, enquanto as α-esterases expressaram-se predominantemente no abdome e tórax. Uma visão global dos dados, atualmente disponíveis, quanto às esterases das espécies do grupo saltans é apresentada neste trabalho. As hipóteses filogenéticas geradas à partir dos dados deste estudo foram comparadas com filogenias anteriores baseadas na morfologia, bioquímica e características moleculares. / Abstract: The esterase patterns of 19 strains from 10 species in the saltans group were analyzed using polyacrylamide gel electrophoresis and α- and β-naphthyl acetates as substrates. Fifty-one esterase bands were detected and classified as 31 α-esterases, 18 β-esterases and two α/β- esterases. On the basis of the inhibition patterns using Malathion and eserine sulfate, 34 bands were classified as carboxylesterases, 14 as acethylesterases and three as cholinesterases. Ten gene loci were tentatively established on the basis of data on band position in the gel, substrate preference and inhibition pattern. Twenty bands were species-specific, the remaining being shared by species from the same or different subgroups. Seven α-esterase bands were observed exclusively in males. Bands with a different frequency or degree of expression between sexes were also detected. In the gels prepared for analysis of gene expression in the body parts (head, thorax and abdomen), the degree of expression of the β- esterases was higher in the thorax, while the α-esterases were expressed predominantly in the abdomen and thorax. A global view of the data available at present on the esterases of species from the saltans group is presented. Phylogenetic hypotheses generated from data in this study are compared with prior phylogenies based on morphological, biochemical and molecular characteristics. / Doutor

Orientador: Lilian Madi-Ravazzi / Banca: Rogério Pincela Mateus / Banca: Blanche Bitner-Mathe / Banca: Denise de Cerqueira Rossa-Feres / Banca: Hermione E. M. de C. Bicudo / Resumo: A perda de habitats é a principal ameaça à biodiversidade. Compreender essa transformação é importante para evitar perdas e para gerenciar o uso da biodiversidade remanescente. As moscas do gênero Drosophila são consideradas bioindicadoras. Traços morfométricos em drosofilídeos têm sido relacionados com o valor adaptativo desses organismos. Esse trabalho avaliou a assembléia de drosofilideos em fragmentos florestais com diferentes áreas, utilizando a abundância de espécies bioindicadoras, parâmetros ecológicos dessas populações e análise de três traços morfométricos (comprimento da asa, largura e comprimento do tórax). Foram amostrados dez fragmentos de floresta estacional, em áreas de borda, de interior e por meio de um transecto borda-interior. Os traços morfométricos de Zaprionus indianus e de Drosophila simulans foram analisados em quatro áreas de estudo. No total foram coletados 33.578 drosofilídeos, distribuídos em 17 espécies, mais os grupos cardini e repleta e o subgrupo saltans. As espécies de drosofilídeos invasores, como Z. indianus, e D. simulans apresentaram maior relação com fragmentos menores, enquanto que a espécie nativa D. willistoni ocorreu com maior abundância nas áreas de maior extensão. Foi estimado o valor de 60 metros para a borda. Em relação às medidas morfométricas, ambientes mais estáveis, como os fragmentos maiores, teriam melhores condições para o desenvolvimento das moscas em comparação com áreas impactadas, como os fragmentos menores, onde ocorre menor disponibilidade de recurso e maior competição. O presente estudo corroborou esses dados para D. simulans, entretanto, para Z. indianus o fator mais importante para a variação não foi a área do fragmento, é provável que paras esta espécie outros fatores, como o tipo de vegetação, sejam mais determinantes para o desenvolvimento corporal / Abstract: Loss of habitat is the main threat to biodiversity. This transformation is important to avoid losses and to manage the use of the remaining biodiversity. The genus Drosophila flies are considered bioindicators. Morphometric traits in drosophilids have been linked with the adaptive value of such bodies. This study evaluated the drosophilid assembly in forest fragments with different areas, using plenty of bio-indicator species, ecological parameters of these populations and analysis of three morphometric traits (wing length, width and length of the chest). Ten fragments of seasonal forest were sampled in border areas, indoor and through an inside edge-transect. The morphometric traits Zaprionus indianus and Drosophila simulans have been analyzed in four areas of study. In total 33.578 drosophilids were collected, distributed in 17 species, plus the Cardini and full groups and the saltans subgroup. Species drosophilids invaders such as Z. indianus, and D. simulans showed higher with smaller fragments, while native species D. willistoni occurred with greater abundance in the areas of greater extent. It has been estimated the value of 60 meters to the edge. Regarding morphometric measures, more stable environments, such as larger fragments, would have better conditions for the development of flies compared to impacted areas, such as smaller fragments, which occurs less resource availability and increased competition. This study corroborated this data to D. simulans, however, to Z. indianus the most important factor in the change was not the area of the fragment, it is likely that this species paras other factors such as the type of vegetation, are more decisive for body development / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-04-26Bitstream added on 2014-06-13T20:03:27Z : No. of bitstreams: 1 bernardo_aa_dr_sjrp.pdf: 946735 bytes, checksum: 8ca5645baf7f63ca8f1850d734030e34 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os padrões de esterases de 19 linhagens de 10 espécies do grupo saltans foram analisados usando eletroforese em gel de poliacrilamida e α e β-naftil acetatos como substratos. Cinqüenta e uma bandas esterásicas foram detectadas e classificadas como 31 α-esterases, 18 β-esterases e duas α/β-esterases. Com base nos padrões de inibição usando Malathion e sulfato de eserina, 34 bandas foram classificadas como carboxilesterases, 14 como acetilesterases e três como colinesterases. Dez loci gênicos foram tentativamente estabelecidos com base nos dados de posição da banda no gel, preferência ao substrato e padrões de inibição. Vinte bandas foram espécie-específicas, as restantes foram compartilhadas por espécie de um mesmo ou diferentes subgrupos. Sete bandas α-esterásicas foram observadas exclusivamente em machos. Bandas com diferentes freqüências ou grau de expressão entre os sexos também foram detectadas. Nos géis preparados para análise da expressão dos genes nas partes do corpo (cabeça, tórax e abdome), o grau de expressão das β- esterases foi alto no tórax, enquanto as α-esterases expressaram-se predominantemente no abdome e tórax. Uma visão global dos dados, atualmente disponíveis, quanto às esterases das espécies do grupo saltans é apresentada neste trabalho. As hipóteses filogenéticas geradas à partir dos dados deste estudo foram comparadas com filogenias anteriores baseadas na morfologia, bioquímica e características moleculares. / The esterase patterns of 19 strains from 10 species in the saltans group were analyzed using polyacrylamide gel electrophoresis and α- and β-naphthyl acetates as substrates. Fifty-one esterase bands were detected and classified as 31 α-esterases, 18 β-esterases and two α/β- esterases. On the basis of the inhibition patterns using Malathion and eserine sulfate, 34 bands were classified as carboxylesterases, 14 as acethylesterases and three as cholinesterases. Ten gene loci were tentatively established on the basis of data on band position in the gel, substrate preference and inhibition pattern. Twenty bands were species-specific, the remaining being shared by species from the same or different subgroups. Seven α-esterase bands were observed exclusively in males. Bands with a different frequency or degree of expression between sexes were also detected. In the gels prepared for analysis of gene expression in the body parts (head, thorax and abdomen), the degree of expression of the β- esterases was higher in the thorax, while the α-esterases were expressed predominantly in the abdomen and thorax. A global view of the data available at present on the esterases of species from the saltans group is presented. Phylogenetic hypotheses generated from data in this study are compared with prior phylogenies based on morphological, biochemical and molecular characteristics.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:56:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1835.pdf: 1426469 bytes, checksum: f474e4a11463f269c448f21cb7cd2ed6 (MD5) Previous issue date: 2008-03-14 / Universidade Federal de Sao Carlos / The increment of the expression of complex correctly processed recombinant proteins, like the ones produced by animal cells, is essential for the development of an efficient large scale bioprocess. The manipulation of culture conditions plays a very important role in the controlled and optimized expression of these proteins in bioreactors. The response of mammalian and insect cells to temperature effect has been studied by several researchers as a potential strategy to enhance production of recombinant proteins. The present study evaluated the influence of the temperature in the culture of recombinant Drosophila melanogaster S2 cells in Sf-900 II medium supplemented with aminoacids with the aim of enhancing the production of the rabies virus glycoprotein (RVGP). The cultures were carried out in Schott flasks (in shaker) as well as in a bubble-free stirred tank bioreactor. Five temperatures were tested in Schott flasks cultures: 16, 20, 24, 28 and 34ºC. The results obtained in cultures at those temperatures in terms of maximum specific growth rate (µmax) and maximum RVGP concentration (CGPV max) were, respectively: 0.009, 0.020, 0.039, 0.036 and 0.022 h-1, and 0.075, 2.973, 0.480, 1.404 and 0.013 mg.mL-1. The best temperature for RVGP production (20oC) was chosen to be evaluated in the bioreactor operated in batch and feed-batch mode, keeping 28oC as control. The results of µmax and CGPV max in batch mode were: 0,061 h-1 and 0,149 mg.mL-1 at 28oC and 0,027 h-1 and 0.354 mg.mL-1 at 20oC. A batch experiment with stepwise temperature decrease from 20ºC to 16ºC presented a µmax ranging from 0.024 to 0.012 h-1 and a final CGPV max of 0.567 mg.mL-1. On the other hand, at 20ºC in feed-batch mode, µmax was 0.024 h-1 and CGPV max 1.155 mg.mL-1. The larger production of RVGP observed in Schott flasks can be a consequence of a more favorable condition for the expression of the protein at low values of dissolved oxygen concentrations that are seen in flasks but not in controlled bioreactor cultures at 50% DO. Overall, these results show an increase of recombinant protein expression at lower temperatures, especially when µmax is kept fairly low. The largest production of RVGP was obtained in the culture at 20°C in Schott flask when CGPV max was 2.973 mg.mL-1, while the production obtained at the control temperature of 28ºC was only of 1.404 mg.mL-1. Thus, the use of reduced culture temperatures, around 20°C, seems to be the best strategy for the optimization of RVGP production. / aumento da expressão de proteínas recombinantes complexas corretamente processadas como as produzidas por células animais é essencial para o desenvolvimento de um bioprocesso eficiente em larga escala. A manipulação das condições de cultivo desempenha um papel muito importante na expressão otimizada e controlada dessas proteínas em biorreatores. A resposta de células de mamíferos e de insetos quando submetidas ao efeito da temperatura vem sendo estudada por vários pesquisadores como estratégia potencial para o aumento de expressão de proteínas recombinantes. No presente trabalho propõe-se avaliar a influência da temperatura no cultivo celular com o propósito de intensificar a produção da glicoproteína do vírus da raiva (GPV) em cultivo de células de Drosophila melanogaster S2 recombinante em meio de cultura Sf900-II suplementado com aminoácidos, em frascos Schott (em shaker) e em biorreator de tanque agitado livre de bolhas. Para tal, foram avaliadas cinco temperaturas de cultivo em frasco Schott: 16, 20, 24, 28 e 34ºC. Os resultados obtidos de velocidade específica de crescimento máxima (µmax) nesses cultivos foram, respectivamente: 0,009, 0,020, 0,039, 0,036 e 0,022 h-1, e de concentração máxima de GPV (CGPV max): 0,075, 2,973, 0,480, 1,404 e 0,013 mg.mL-1. A melhor temperatura para produção de GPV (20oC) foi escolhida para ser testada em biorreator operado em batelada e batelada alimentada, mantendo 28oC como controle. Os resultados de µmax e CGPV max em batelada foram: 0,061 h-1 e 0,149 mg.mL-1 a 28oC e 0,027 h-1 e 0,354 mg.mL-1 a 20oC. Um experimento em batelada com temperatura decrescente em etapas de 20ºC a 16oC apresentou um µmax variando de 0,024 a 0,012 h-1 e uma CGPV max final de 0,567 mg.mL-1. Por outro lado, a 20ºC em batelada alimentada, µmax foi de 0,024 h-1 e CGPV max de 1,155 mg.mL-1. A maior produção de GPV observada em frascos Schott pode ser conseqüência de uma condição mais favorável para expressão da proteína em condições de baixa concentração de oxigênio dissolvido como as usuais em frascos Schott mas não em cultivos em biorreator com oxigênio dissolvido controlado a 50%. Em geral, estes resultados mostram uma maior expressão da proteína recombinante nas temperaturas mais baixas, especialmente quando µmax é mantido razoavelmente baixa. A maior produção de GPV foi obtida no cultivo realizado a 20ºC em frasco Schott quando CGPV max=2,973 mg.mL-1 em comparação a 1,404 mg.mL-1 obtida no cultivo controle a 28ºC. Assim, a utilização de temperaturas de cultivo mais baixas, próximas de 20ºC, pode ser considerada a melhor estratégia na otimização da produção de GPV.