Orientador: Hiroshi Aoyama / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T20:20:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Miranda_MarcioAndre_M.pdf: 8835038 bytes, checksum: edacc540a33bba6dedd9caa95ae4f01c (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Enzimas importantes em muitos sistemas celulares são inibidas ou ativadas por flavonóides. No entanto, não existe nenhum dado literário referente ao efeito dos flavonóides sobre as fosfoproteínas tiro sina fosfatase (PTP). Este trabalho propõe o estudo dos flavonóides sobre a atividade da fosfoproteína tirosina fosfatase de baixa massa molecular relativa (LMrPTP) de rim bovino relacionando a sua estrutura com o seu efeito sobre a atividade enzimática. A atividade enzimática foi determinada em pR 5,0 utilizando pnitrofenilfosfato (p-NPP), flavina mononuc1eotídio (FMN) e tirosina fosfato (Tyr-P) como substratos, a 37°C, por 20 minutos. Quercetina mostrou ser um ativador da enzima na concentração de 400 JlM, da ordem de 260,20 e 10% para p-NPP, FMN e Tyr-P respectivamente. Já a murina mostrou ser um excelente inibidor competitivo da atividade enzimática, com constantes de inibição da ordem de 58, 56,5 e 55 JlM/ L para p-NPP, FMN e Tyr-P respectivamente. Diferentemente do efeito ativador da quercetina, o efeito inibidor da murina foi dependente do pR. Estudos de estabilidade térmica na ausência e presença de agentes protetores ou redutores indicam que os flavonóides interagem com o sítio ativo mas não afetam as cisteínas. A interação entre a enzima e os flavonóides envolve fortemente um componente eletrostático, uma vez que na presença de NaCI houve a perda do efeito ativador da quercetina e a ativação por murina em concentrações superiores a 125mM. Para as mesmas condições, outros flavonóides foram testados, mas não apresentaram efeito significativos na atividade da LMrPTP, como a rotina e o kaempferol. Estes resultados sugerem a importância da posição dos grupos -aR dos flavonóides (nas posições 3' e 4' para a quercetina, 2' e 4' para a murina) para os distintos efeitos dos flavonóides. A ausência do grupo -aR na posição 3' (para o kaempferol) e a presença de um glicosídio (rotinose) no grupo -aR na posição 3 (para a rotina) promovem a supressão do efeito ativador do flavonóide sobre a atividade da enzima / Abstract: Important enzymes in many cellular systems may be inhibited or activated by flavonoids. However, there are no references conceming to the effect of flavonoids on phosphoprotein tyrosine phosphatases. This work aims to study the relationship between flavonoids structure and their effects on the bovine kidney low molecular weight phosphoprotein tyrosine phosphatase (LMrPTP). Enzyme activity was determined at pH 5.0 with p-nitrophenylphosphate (p-NPP), flavin mononucleotide (FMN), and tyrosine phosphate (Tyr-P) as substrate, at 37°C, for 20 mino Quercetin was found to be an activator, at 400 JlM, for p-NPP, FMN, and Tyr-P in the following order: 2.6-, 0.2-, and O.l-fold. Morin was a strong competitive inhibitor, which inhibition constant values were determined to be 58, 56.5, and 55 JlM for p-NPP, FMN, and Tyr-P, respectively. Ln contrast to the enzyme activation by quercetin, the inhibition by morin was pHdependent. Preincubation and ionic strength did not significantly alter the effect of the flavonoids on the enzyme activity. At the same conditions, other related flavonoids, such as rutin and kaempferol had no effect on the LMrPTP. Our results suggest the importance of the -OH groups positions (3' and 4' for quercetin, and 2' and 4' for morin) for the distinct flavonoids effects. The absence of the 3' -OH (kaempferol) and the presence of rutinose at the 3-0H (rutin) suppress the effect of quercetin / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientadores: Lauro Tatsuo Kubota, Graciliano de Oliveira Neto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-27T02:16:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Perez_ElizabethFatima_M.pdf: 2894738 bytes, checksum: 98b5fd219f3709ddaeec26064cfc6078 (MD5) Previous issue date: 2000 / Mestrado

Orientador : Hiroshi Aoyama / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-13T23:38:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Brandao_MariaElviraGama_M.pdf: 2783756 bytes, checksum: 91db48d95c1136163926ee194130b5a7 (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: A pirofosfatase inorgânica foi purificada do gérmen de milho cerca de 174 vezes, com rendimento de 2,6% utilizando-se centrifugações diferenciais, saturação fracionada com sulfato de amônio e cromatografias em DEAE-sephadex. Com a enzima parcialmente purificada foram determinadas as condições ótimas de reação de hidrólise do Ppi: 2 mM Ppi, 5 mM Mg2+, pH=8,3. O valor da Km aparente obtido para o Ppi foi de 59uM. A enzima é bastante específica para o Ppi e Mg2+. Observou-se que outros cátions não servem como cofatores, sendo que Ca2+ é um forte inibidor. Cátions polivalentes como as poliaminas também não substituem o Mg2+ na reação. Com relação aos cátions monovalentes. Observou-se uma inibição de 40% em presença de 100 mM de Li+. A reação catalisada pela pirofosfatase inorgânica de gérmen de milho não foi significativamente afetada por reagentes sulfidrílicos como o NEM e o DTNB. Ppi ou Mg2+, isoladamente, não protege a enzima de inativação térmica à 55 ºC. Dois valores diferentes de energia de ativação, 10165 cal/mol e 16715 cal/mol foram obtidos utilizando-se equação de Arrhenius...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The inorganic pyrophosphatase was purified from maize germ about 174-fold with a 2.6% recovery, using differential centrifugations, ammonium sulfate precipitation and chromatographies on DEAE-cellulose and DEAE-sephadez. With the enzyme partially purified it was determined the optima conditions of the Ppi hydrolysis reaction: 2 mM Ppi, 5 mM Mg2+, pH 8.3. The apparent Km value obtained for Ppi was 59 uM. The enzyme was hiphly specific in relation to Ppi ad to Mg2+. It has been observed that other divalent cations did not serve as cofactors, and Ca2+ was a strong inhibitor. Mg2+ could not be substituted for polivalent cations like polyamines. Among the monovalent cations tested a 40% inhibition was observed in the presence of 100 mM Li+. The reaction catalyzed by maize germ inorganic pyrophosphatase was not significantly affected by sulfydrylic reagents like NEM and DTNB. The enzyme was not protected against thermal inactivation, at 55 ºC, in the presence of Ppi or Mg2+. Two different activation energy values, 10165 cal/mol and 16715 cal/mol were obtained using the Arrhenius plot....Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Francisco Maugeri Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-14T12:18:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cabral_FernandoAntonio_M.pdf: 3988858 bytes, checksum: 17f24767787b12cd7a3c9153fb8082cb (MD5) Previous issue date: 1989 / Resumo: Neste trabalho foi dado ênfase especial aos aspectos cinéticos envolvidos na hidrólise da sacarose pela enzima invertase, nas formas livre e imobilizada em gel de alginato de cálcio. Os parâmetros cinéticos foram determinados levando em conta as taxas iniciais de reação, de forma a evitar os fenômenos de inibição causados pelo produto glicose e frutose). Para tanto estudaram-se os efeitos do pH e temperatura na atividade enzimatica, assim como a estabilidade termicada. Os parâmetros cinéticos para a enzima livre foram determinados a 40 e 50 ºC, baseando-se em três suposições sobre o "efeito físico" na cinética de transformação do substrato: duas relacionadas com a concentração de água livre e outra baseada na difusividade molecular da sacarose. Para a enzima imobilizada os parâmetros intrínsecos foram determinados a 40°C em reator de mistura operado continuamente, com relações geométricas padrão. O coeficiente de difusão efetivo da sacarose, necessário para a determinação dos parâmetros cinéticos da enzima imobilizada, foi determinado por dois métodos: o primeiro utilizando-se o modelo de placa semi-infinita em contato com uma fase líquida de concentração constante de sacarose, no estado não estacionário e, o segundo, utilizando-se esferas do gel inicial mente isentas de sacarose e imersas em um volume finito de solução de sacarose de concentração conhecida em estado não estacionário. Na caracterização da invertase, obteve-se respectivamente para a enzima livre e imobilizada pH ótimo de 4,5 e 4,0; e temperaturas de máxima atividade ao redor de 60ºC para a enzima nas formas livre e imobilizada. Quanto à estabilidade térmica, a enzima mostrou-se muito estável abaixo de 40 °C. Entretanto a enzima imobilizada, mostrou-se menos estável que a forma livre. Para as formas livre e imobilizada, respactivamente, as energias de ativação obtidas para a reação de inversão foram de 7853 cal /mol e 10358 cal /mol. enquanto que as energias de ativação da degradação térmica obtidas foram de 141171 cal/mol e 116883 cal/mol. O melhor ajuste do modelo cinético, para taxas iniciais de reação, foi obtido quando se considerou o modelo cinético de inibição pelo substrato, corrigido por um fator relacionado com a difusividade de massa. Os valores das constantes de Michaelis -Menten (Km) e de inibição (Ki) foram respectivamente 0,0506 mol/l e 0,309 mol/l a 40°C e 0,0587 mol/l e 0,377 mol/l a 50ºC. O modelo clássico do Michaelis-Menten foi o que melhor se ajustou à cinética de reação com enzima imobilizada, tanto em termos de constantes aparentes como efetivas. Hão foram observados os fenômenos de inibição pelo substrato e efeitos difussionais verificados no caso da enzima livre, até a concentração de substrato estudada (500 g/l). Os valores intrínsecos de Km para a enzi ma imobiliizada foi 0,031M e Vmax foi de 0% do V¬max observado para a enzima livre, nas mesmas concentrações enzimáticas. A difusividade efetiva da sacarose no gel foi de 0,5.10-5 cm2/s , correspondendo a 67% da di fusivi dade da sacarose em solução. / Abstract: In this work special emphasis was given to the study of the kinetics of sucrose hydrolysis by invertase. The enzyme was used in free as well immobilized in calcium alginate forms. The kinetic parameters ware determined considering the initial rates of reaction, in order to avoid the iinhibition phenomena caused by the products glucose and fructose. The pH and temperature effects on enzymatic activity, as well as the thermal stability of enzyme were studied. The parameters for the free enzyme were determined at 4-0°C and 60°C. Three assumptions related to the "physical effect" on the kinetic of substrate transformations were considered: Two of them were related to the concentration of free water and the other one was related to the molecular diffusivity of sucrose. The intrinsic parameters of the immobilized enzyme were determined at 40°C i n a continuous stirred tank reactor, with standard geometric relations. The effective diffusion coefficients of sucrose, needed for the determination of the kinetic parameters for the immobilized enzyme were determined by two methods: The first one, used the theory of semi infinite plate in contact with a liquid phase with constant concentration of sucrose, at unsteady state and, the second, used gel spheres, initially free of sucrose, that were immersed in a fini te volume of solution of known sucrose concentration, at unsteady state. The optimum conditions of enzymatic reaction were pH 4,0 ¿ 4,5 and 60ºC in both free and immobilized forms. In terms of thermal stability the enzyme was stable at temperature lower than 40 C. But, the immobilized enzyma was less stable than the free form. The activation energies obtained for inversion reaction were found to be 7853 and 10258 cal/mol. While the deactivation energies were 141171 and 116883 cal/mol for the free and immobilized forms, respectively. Better agreement for the kinetic model , for the initial rates of reaction, was obtained when the kinetic model of substrate inhibition was considered, corrected by a factor related to mass diffusivity, Values for Michaelis-Menten (Km) and the inhibition (Ki) constants were respect!vely, 0.0506 mol/l and 0. 309 mol/l at 40° C and 0.0557 mol/l and 0.377 mol/l at 50°C. On the other hand, the classic model of Michaelis-Menten fitted well the results for immobilisted enzyme, either in terms of apparent or effectives constants. The inhibition phenomena of substrate were not observed neither diffusional effects, as verified for free enzyme, up to a substrate concentration of BOO g/1. The intrinsic value of Km for immobilized enzyme was 0.031M and V was found to be 60% of the observed Vmax for the free enzyme, in the same enzymic concentration. The sucrose effective diffussivity in the gel was 0.5 .10-5 cm2 /s, corresponding to 67% of the sucrose diffusity in solution. / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos

Orientadores: Graciliano de Oliveira Neto, Oswaldo E. S. Godinho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-20T19:33:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nakatani_HelenaShizuko_D.pdf: 1635081 bytes, checksum: 239eec9f19dd0a5b0bcacaf3a27e0186 (MD5) Previous issue date: 1995 / Doutorado

Orientador: Ranulfo Monte Alegre / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-13T22:19:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Minim_LuisAntonio_M.pdf: 3252826 bytes, checksum: f54c1f4567db17a19c948455577e4b05 (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: Com o propósito de produzir L-asparaginase por Erwinia aroideae, foi estudado o crescimento e a formação de enzima em fermentação descontinua. lnicialmente foi estudado a influência de vários nutrientes sobre a produção de L-asparaginase e crescimento celular, fermentando em frascos erlenmeyers e em meio contendo extrato de levedura. A concentração ótima de lactose foi de 1% quando foi obtida uma atividade máxima de L-asparaginase de 0,102 UI/ml e uma massa celular de 1,95 g/l. Acima de 1% de lactose, houve inibição na produção da enzima e a massa celular permaneceu praticamente.e constante. A adição de asparagina ao meio aumentou a produção de L-asparaginase, sendo que numa concentração de 0,4% a atividade de asparaginase foi de 0,17 UI/ml e a massa celular foi de 1,64 g/l. Acima de 0,4%, o aumento tanto da massa celular como da atividade enzimática foi pequeno; não houve inibição até uma concentração de 1,6% de asparagina.Usando soro de queijo diluído, como fonte de nutrientes, a produção tanto de massa celular como de enzima foi irrisória numa concentração de soro de 1% em termos de lactose. A concentração ótima do soro, onde se conseguiu uma atividade máxima de enzima de 0,11 UI/ml, foi de 3% em termos de lactose. Suplementando-se o soro de queijo, diluído (2,73% ou 2% em termos de lactose), com triptona (0,3%) e asparagina (0,5%) a produção de massa celular e de L-asparaginase aumentou bastante chegando-se a uma atividade de 0,542 UI/ml e uma massa celular de 4,52 g/l, maior portanto do que quando se usou extrato de levedura. Para a fermentação em escala piloto, em fermentador com capacidade útil de 16 litros, foi usado soro de queijo diluído (2,73% ou 2% em termos de lactose) suplementado com 0,3% de triptona e 0,5% de asparagina. A temperatura ótima para a produção da enzima L-asparaginase foi de 24,5°C, muito embora o crescimento celular tenha sido maior a 28°C. A produção de L-asparaginase alcançou o máximo de 2,02 UI/ml durante a fase de desaceleração de crescimento e a massa celular , no final da fermentação, foi de 5,88 g/l. O aumento da temperatura de 24,5 °C para 28°C resultou em39% de redução na produção da enzima. A energia de ativação para o crescimento celular foi de 8034cal/mol. O cont.role do pH, quando comparado com uma fermentação sem o cont.role, não deu resultados satisfatórios. O aumento da incorporação de oxigênio ao meio fermentativo, refletido pelo aumento do valor do Kv, favoreceu a produção da enzima bem como da massa celular / Abstract: Cell growth and enzyme formation were studied in batch fermentation for the purpose of obtaining L-asparaginase from Erwinia aroideae. Initially, the influence of some nutrients on the L-asparaginase production and cell growth, on synthetic medium in Erlenmeyrs flasks were investigated. The optimum lactose concentration was 1% when the enzyme and cell mass reached 0.102UI/ml and 1.45 g/l, respectively. Above this limit the production of enzyme was inhibited and the cell mass remained constant. The addition of asparagine into the medium enhanced L- asparaginase production. Cell mass and L-asparaginase activity reached 1.64 g/l and 0.17 UI/ml, respectively, with a 0.4% asparagine concentration. Above this limit, the increase in the cell mass and L-aspaginase activity was reduced. There was no inhibition up to 1.6% of asparagine concentration. Using diluted powdered cheese whey, as a nutrient suply, the production of cell mass and enzyme was insignificant when the whey lactose Concentration was 1%. The optimum whey lactose concentration was 3%, obtaining a maximum L-asparaginase activity of 0.11 UI/ml. Supplementing the diluted powdered cheese whey (2.73%) with 0.3% of triptone and 0.5% of asparagine, the production of cell mass and L-asparaginase had a great enhancement, achieving 0.542 UI/ml of L-asparaginase activity and 4.52 g/l of cell mass, greater than the production when yeast extract was used. Pilot plant fermentation experiments were made in a 16 liters fermenter; powdered cheese whey was used diluted (2.73%), complemented with 0.3% of triptone and 0.5% of asparagine, as a fermentative medium. Optimum temperatures for L-asparaginase and cell mass production were 24.5°C and 28°C, respectively. Maximum L-asparaginase Activity (2.02 UI/ml) was obtained at 24.5°C, 500 rpm of agitation and 7.5 l/min of aeration; the cell mass concentration was 5.88 g/l. When the temperature was increased from 24.5°C to 28°C the enzymatic activity decreased 39%. Activation energy of cell growth was 8034 cal/mol. The pH controlled process, compared with the process without control, did not give satisfactory results. Increase of oxigen incorporation into the medium enhanced the production of L-asparaginase and cell mass / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos

Orientador : Yong Kun Park / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-16T18:04:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jafelice_LuciaReginaSantos_M.pdf: 1786780 bytes, checksum: 2450c005203fb9734fd5847547c2d540 (MD5) Previous issue date: 1985 / Resumo: A linhagem de Mucor miehei NRRL 3420, que é produtora de renina microbiana, foi submetida a diferentes períodos de exposição à radiação ultravioleta para induzir mutações com o objetivo de se obter urna linhagem altamente produtora da enzima coagulante de leite. Após vários estudos, determinou-se que exposição à radiação durante 101 151 e 201 provocava taxa de mortalidade superior a 99,99% aumentando a probabilidade de se encontrar mutantes entre os sobreviventes. Novecentas colônias foram isoladas e estudadas quanto a produção enzimática comparando-se com a linhagem original não mutada. Foi obtida urna linhagem mutada que apresentou 122% a mais de produtividade enzimática. A enzima foi então produzida por fermentação semi-sólida em meio farelo de trigo: H2O (1:1), purificada e caracterizada corno protease ácida a termoestável e que necessita de íons Ca2+ para sua ação. A enzima bruta foi utilizada no processamento de queijo minas frescal resultando um produto de boa qualidade / Abstract: The strain Mucor miehei NRRL 3420, which is a microbial rennet producer, was exposed to ultraviolet radiation during different time periods to promote its mutation. The objective of this treatment was to obtain a lineage with a high rate of milk clotting enzyme production. After some experiments, 10' 15! and 20' of ultraviolet radiation exposure showed a mortality rate superior of 99,99%, indicating a great chance to find a mutant among the survivors. The enzymatic production was studied comparing 900 isolated colonies with their original lineage. Through such a procedure one mutated strain was obtained which showed an increase of 122% in enzyme production. The enzyme was produced by semi solid fermentation with wheat bran: water (1:1). It was purified and characterized as a thermostable acid protease, which reacted only in the presence of calcium ions. To test the efficiency of the crude enzyme extract, was used a "minas frescal" cheese-processing system. The product exhibited good quality / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador: Francisco Maugeri Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-17T05:47:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_MariaIsabel_M.pdf: 3965357 bytes, checksum: c3f88019d9a555d7ba0b8aa51d2eb272 (MD5) Previous issue date: 1989 / Resumo: Neste trabalho realizou-se o estudo de glicosilação de maltodextrina e pulularia, utilizando a enzima dextrana-sacarase de Leuconostoc mesenteroídes de NRLL B 512 F. Empregou-se, no acompanhamento das reações bioquímicas, a metodologia de radioatividade através de sacarose marcada com carbono 14, assim como cromatografia de permeação em gel. No estudo realizado com maltodextrina verificou-se que a enzima dextrana-sacarase é incapaz de transferir a glicose contida na molécula de sacarose para o polissacarídeo. No caso de puIulana, apesar de também não ter sido observado a glicosilação nas moléculas de peso molecular elevado (ao redor de 300.000 daltons), houve indícios de que a glicosilação ocorreu em moléculas de pululana de peso molecular abaixo de 10.000 daltons. Observou-se igualmente neste caso, a formação de dextrana de peso molecular abaixo de 10.000 daltons / Abstract: In this work a study of the addition of glucose molecules, in both polysaccharides, maltadextrin and pullulan was performed. The ensyme dextransucrase from Leuconostoc mesenteroides NRRL B512 F was utilized. The biochemical reactions were analysed by means of radioactivity techniques, using sucrose labed with C14 as well as gel permeation chromatography. It was observed that the enzyme dextransucrase was unable to transfer units of glucose from sucrose molecules to the polyssaccharides both maltoclextrin and pullulan. On the other hand, it was observed that smaller molecules of pullulan with less than 10.000 daltons, were possibly glucosilated. It was also noticed that dextran with less than 10.000 daltons was produced / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos

Orientadores: Francisco Maugeri Filho, Rubens Maciel Filho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-18T03:50:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_MariaIsabel_D.pdf: 3990444 bytes, checksum: 20b412447dd741ce34501deea5834cf8 (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: Neste trabalho é considerado um processo contínuo de purificação de enzimas baseado no princípio da cromatografia por afinidade constituído de um estágio de adsorção e outro de desorção interligados, ambos do tipo CSTR, com reciclo da resina. O processo foi modelado matematicamente através dos balanços de massa e equações cinéticas (modelo determinístico) obtendo-se um sistema de equações diferenciais ordinárias (E.D.O.), com resolução numérica por Runge-Kutta 4ª ordem para o estado transiente e resolução analítica para estudos no estado estacionário. Com o intuito de verificar a influência dos parâmetros operacionais e cinéticos no rendimento e produtividade do processo, foi realizado um estudo de análise paramétrica com cálculo do fator de sensibilidade dos parâmetros nas condições de estado estacionário. A dinâmica do processo foi estudada através de simulações no estado transiente, permitindo a escolha da vazão de alimentação no segundo estágio (F2), corno a melhor variável manipulável. O controle do processo foi considerado utilizando-se controladores clássicos do tipo "feedback" com leis de controle PI (proporcional-integral) e PID (proporcional-integral-derivativo). Ambos mostraram-se bastante eficientes mesmo com significantes atrasos na medida da variável que se deseja controlar. Posteriormente, urna estratégia de controle não convencional do tipo "feedback-feedforward" foi desenvolvida e analisada, permitindo urna operação mais robusta com relação aos atrasos na análise, sem prejuízo da performance do processo. Através da metodologia de planejamento experimental e análise da superfície de resposta foi investigada a otimização do sistema, sendo possível então estabelecer faixas de operação das variáveis do processo visando a maxirnização do rendimento e da produtividade dentro das limitações operacionais. / Abstract: The CARE (Continuous Adsorption Recycling Extraction) system, studied m this work, is a continuous enzyme purification process, which consists of two well mixed reactors with solid adsorbed recycle, containing one adsorbing stage (1st reactor) and one desorbing stage (2nd reactor). A mathematical model based on fundamental mass balances and adsorption kinetics has been developed (deterministic model). A set of ordinary deferential equations numerically integrated using the 4th order Runge-Kutta's method, was obtained. The parametric analysis and parameters sensitivity studies were performed considering steady state behavior. The appropriate manipulated variable, the flow rate at the 2nd stage, was determined from the dynamic responses of the system, so that the control structure could be defined. Firstly, classical PI (proportional-integral) and PID (proportional-integral derivative) feedback control strategies were studied. Both of them showed good performance even when considerable time-delays in the on line analysis of the control variable were considered. Later, the non-conventional feedback - feed forward control strategy was also studied and showed a very robust operation since higher time-delays were successfully managed, without affecting the performance of the system. The optimization of the process, based on the maximization oí both recovery yield and productivity, was carried out using the response surface analysis method, so that the optimal ranges for the different variables could be determined. / Doutorado / Doutor em Engenharia de Alimentos

Orientador: Carlos Eduardo Pinheiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-18T10:01:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rolla_AndreaMoreira_M.pdf: 1055736 bytes, checksum: 8fa4658f102a945e62091d38ac747feb (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: Este trabalho teve como objetivo estudar a influência in vivo e in vitro de elementos traços (Se, V, Ni, Mo, F e Co) na atividade enzimática da Ca++-ATPase do gérmen dental do rato. No estudo in vivo, os elementos foram injetados intraperitonialmente em ratos com 7 dias de idade, em doses variando de(0,32 9-. 0,.52mM) por rato, 3 vezes no período de 24 horas e uma hora após a última dose, os ratos foram sacrificados e retirados os germens de seus primeiros molares. A avaliação da Ca++-ATPase foi feita incubando-se os germens em meio neutro, à 370C, contendo ou não Levamisole como inibidor da fosfatase alcalina e ATP como substrato. No estudo in vitro, os germens dentais dos primeiros molares de ratos com 8 dias de idade foram pré-incuba dos em meio contendo os elementos traços na concentração durante 60 minutos, à 37°C. Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: This research was carried out to reail as objective to study the influence of trace elements (Se, V, Ni, Mo, F and Co) "in vivo" and "in vitro" on the activity of Ca ++ -ATPase from dental germ of rato In the "in vivo" studies the elements were injected intraperitoneally in seven day-old rats. The doses varied '", from 0,32 to 0,52mM per rat and were injected three times du¬ring a period of 24'hourS one hour after the last dose, the rats were sacrified and the germs of their first molars were taken out: Ca ++ -ATPase activity was evaluated by Incubating the germs in neutral media at 37oC, containing or not ATP as substrate and levamisole as an inhibitor of alkaline phosphatase.Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Fisiologia e Biofisica do Sistema Estomatognatico / Mestre em Ciências