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Estrutura e dinâmica genética das populações de Echinococcus vogeli e Echinococcus oligarthrus (Cestoda: Taeniidae)

Santos, Guilherme Brzoskowski dos January 2012 (has links)
A taxonomia dos cestóides do gênero Echinococcus está submetida a constante revisão. Dez espécies são atualmente aceitas para Echinococcus, duas delas são o Echinococcus oligarthrus, agente causador da equinococose unicística, e o Echinococcus vogeli, agente causador da equinococose policística e que parece ser a espécie mais patogênica do gênero. Existem haplótipos que ainda não foram determinados como espécies e permanecem dentro da categoria de variantes genéticas. Atualmente, os estudos genéticos em Echinococcus concentram-se na análise do DNA mitocondrial, um genoma que não recombina, de rápida evolução, e de herança materna na maioria dos animais. Além disso, esses estudos têm se concentrado em E. granulosus e E. multilocularis, usando uma ou poucas amostras de Echinococcus neotropical. Este estudo teve como objetivo analisar, utilizando sequências nucleares, a composição genética das duas espécies neotropicais, visando colaborar para a compreensão dos processos evolutivos do gênero Echinococcus e, consequentemente, contribuir para o correto manuseio do parasito nas regiões afetadas. No total, foram utilizados 45 isolados para extração de DNA e subsequentes análises, 38 E. vogeli, 4 E. oligarthrus, 1 E. granulosus, 1 E. ortleppi e 1 E. multilocularis. As espécies foram determinadas a partir da amplificação e análise da sequência parcial (366 pb) do gene mitocondrial da citocromo-oxidase (cox1). Para os 45 isolados, 6 diferentes alvos nucleares (P-29, EG10, AG4, Ir, Er e TGF) foram amplificados por PCR e os diferentes genótipos foram selecionados através da técnica de SSCP. Os loci mais polimórficos encontrados em E. vogeli foram Ag4 e E10, ambos com 2 alelos, e nos loci Ir, Er, P-29 e Tgf, com um alelo. E. oligarthrus tem alelos exclusivos para cinco dos seis loci nucleares analisados; contudo, o alelo T2, do locus Tgf, também está presente em seis isolados de E. vogeli. O fluxo gênico entre as metapopulações de E. vogeli das duas áreas geográficas parece ser restrito. Além disso, o fluxo gênico entre a população de E. oligarthrus e as demais populações é restrito. A AMOVA revelou que o nível mais significante de variabilidade genética ocorre dentro das metapopulações, o segundo nível mais significativo foi encontrado entre as metapopulações dentro das suprapopulações do Acre e Pará. Os isolados amostrados no estado do Acre parecem formar um “cluster” distinto. Além disso, foi possível verificar que os isolados de E. vogeli amostrados no estado do Pará também tendem a constituir um “cluster” único, mas de forma menos uniforme. Os 11 haplótipos mitocondriais de E. vogeli constituem um grupo monofilético e distinto de E. oligarthrus e das demais espécies do gênero. / Cestodes of the genus Echinococcus are subjected to a constant taxonomic revision. Ten species are currently accepted for the genus Echinococcus, two of them are Echinococcus oligarthrus, the agent of unicystic echinococcosis and Echinococcus vogeli, the agent of polycystic echinococcosis, which seems to be one of the most pathogenic species of Echinococcus. There are haplotypes that have not been determined as species and remain within the genetic variants category. Currently, the genetic studies on Echinococcus have focused on the analysis of mitochondrial DNA, a non-recombining, fast evolving and maternally inherited genome in most animals. Besides, these studies have been concentrated in the E. granulosus and E. multilocularis, using one or few samples from neotropical Echinococcus. This study aimed to analyze, using nuclear sequences, the genetic composition of the two neotropical species, which may support the understanding of evolutionary processes on the genus Echinococcus and, consequently, will contribute to the correct handling of the parasite in the affected regions. A total of 45 isolates were used for DNA extraction and further analyses, 38 E. vogeli, 4 E. oligarthrus, 1 E. granulosus, 1 E. ortleppi and 1 E. multilocularis. The species were determined by amplification and sequence analysis of a partial sequence (366 bp) of the mitochondrial cytochrome oxydase 1 gene (cox1). For the 45 isolates, 6 different nuclear targets (P-29, Eg10, Ag4, Ir, Er and Tgf) were amplified by PCR and the genotypes were screened by SSCP technique. In E. vogeli, the most polymorphic loci found were Ag4 and E10, both with 2 alleles, and the Ir, Er, P-29 and Tgf loci with 1 allele. E. oligarthrus has exclusive alleles for five of the six analyzed nuclear loci. However, the allele T2, from Tgf locus, is also present in six E. vogeli isolates. The gene flow between the metapopulations of E. vogeli seems to be restricted. In addition, the gene flow between the E. oligarthrus population and the other populations of E. vogeli is restricted. The AMOVA revealed that the most significant level of genetic variability occurs within metapopulations, and the second most significant level of variability was found among metapopulations within suprapopulations of Acre and Pará. Isolates sampled in Acre seems to form a distinct cluster. Furthermore, it was possible to verify that the E. vogeli isolates sampled in Pará also are likely to form a single "cluster", but less uniform. The 11 mitochondrial haplotypes of E. vogeli constitute a monophyletic group and distinct from E. oligarthrus and other Echinococcus species.
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Estrutura e dinâmica genética das populações de Echinococcus vogeli e Echinococcus oligarthrus (Cestoda: Taeniidae)

Santos, Guilherme Brzoskowski dos January 2012 (has links)
A taxonomia dos cestóides do gênero Echinococcus está submetida a constante revisão. Dez espécies são atualmente aceitas para Echinococcus, duas delas são o Echinococcus oligarthrus, agente causador da equinococose unicística, e o Echinococcus vogeli, agente causador da equinococose policística e que parece ser a espécie mais patogênica do gênero. Existem haplótipos que ainda não foram determinados como espécies e permanecem dentro da categoria de variantes genéticas. Atualmente, os estudos genéticos em Echinococcus concentram-se na análise do DNA mitocondrial, um genoma que não recombina, de rápida evolução, e de herança materna na maioria dos animais. Além disso, esses estudos têm se concentrado em E. granulosus e E. multilocularis, usando uma ou poucas amostras de Echinococcus neotropical. Este estudo teve como objetivo analisar, utilizando sequências nucleares, a composição genética das duas espécies neotropicais, visando colaborar para a compreensão dos processos evolutivos do gênero Echinococcus e, consequentemente, contribuir para o correto manuseio do parasito nas regiões afetadas. No total, foram utilizados 45 isolados para extração de DNA e subsequentes análises, 38 E. vogeli, 4 E. oligarthrus, 1 E. granulosus, 1 E. ortleppi e 1 E. multilocularis. As espécies foram determinadas a partir da amplificação e análise da sequência parcial (366 pb) do gene mitocondrial da citocromo-oxidase (cox1). Para os 45 isolados, 6 diferentes alvos nucleares (P-29, EG10, AG4, Ir, Er e TGF) foram amplificados por PCR e os diferentes genótipos foram selecionados através da técnica de SSCP. Os loci mais polimórficos encontrados em E. vogeli foram Ag4 e E10, ambos com 2 alelos, e nos loci Ir, Er, P-29 e Tgf, com um alelo. E. oligarthrus tem alelos exclusivos para cinco dos seis loci nucleares analisados; contudo, o alelo T2, do locus Tgf, também está presente em seis isolados de E. vogeli. O fluxo gênico entre as metapopulações de E. vogeli das duas áreas geográficas parece ser restrito. Além disso, o fluxo gênico entre a população de E. oligarthrus e as demais populações é restrito. A AMOVA revelou que o nível mais significante de variabilidade genética ocorre dentro das metapopulações, o segundo nível mais significativo foi encontrado entre as metapopulações dentro das suprapopulações do Acre e Pará. Os isolados amostrados no estado do Acre parecem formar um “cluster” distinto. Além disso, foi possível verificar que os isolados de E. vogeli amostrados no estado do Pará também tendem a constituir um “cluster” único, mas de forma menos uniforme. Os 11 haplótipos mitocondriais de E. vogeli constituem um grupo monofilético e distinto de E. oligarthrus e das demais espécies do gênero. / Cestodes of the genus Echinococcus are subjected to a constant taxonomic revision. Ten species are currently accepted for the genus Echinococcus, two of them are Echinococcus oligarthrus, the agent of unicystic echinococcosis and Echinococcus vogeli, the agent of polycystic echinococcosis, which seems to be one of the most pathogenic species of Echinococcus. There are haplotypes that have not been determined as species and remain within the genetic variants category. Currently, the genetic studies on Echinococcus have focused on the analysis of mitochondrial DNA, a non-recombining, fast evolving and maternally inherited genome in most animals. Besides, these studies have been concentrated in the E. granulosus and E. multilocularis, using one or few samples from neotropical Echinococcus. This study aimed to analyze, using nuclear sequences, the genetic composition of the two neotropical species, which may support the understanding of evolutionary processes on the genus Echinococcus and, consequently, will contribute to the correct handling of the parasite in the affected regions. A total of 45 isolates were used for DNA extraction and further analyses, 38 E. vogeli, 4 E. oligarthrus, 1 E. granulosus, 1 E. ortleppi and 1 E. multilocularis. The species were determined by amplification and sequence analysis of a partial sequence (366 bp) of the mitochondrial cytochrome oxydase 1 gene (cox1). For the 45 isolates, 6 different nuclear targets (P-29, Eg10, Ag4, Ir, Er and Tgf) were amplified by PCR and the genotypes were screened by SSCP technique. In E. vogeli, the most polymorphic loci found were Ag4 and E10, both with 2 alleles, and the Ir, Er, P-29 and Tgf loci with 1 allele. E. oligarthrus has exclusive alleles for five of the six analyzed nuclear loci. However, the allele T2, from Tgf locus, is also present in six E. vogeli isolates. The gene flow between the metapopulations of E. vogeli seems to be restricted. In addition, the gene flow between the E. oligarthrus population and the other populations of E. vogeli is restricted. The AMOVA revealed that the most significant level of genetic variability occurs within metapopulations, and the second most significant level of variability was found among metapopulations within suprapopulations of Acre and Pará. Isolates sampled in Acre seems to form a distinct cluster. Furthermore, it was possible to verify that the E. vogeli isolates sampled in Pará also are likely to form a single "cluster", but less uniform. The 11 mitochondrial haplotypes of E. vogeli constitute a monophyletic group and distinct from E. oligarthrus and other Echinococcus species.
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Estrutura e dinâmica genética das populações de Echinococcus vogeli e Echinococcus oligarthrus (Cestoda: Taeniidae)

Santos, Guilherme Brzoskowski dos January 2012 (has links)
A taxonomia dos cestóides do gênero Echinococcus está submetida a constante revisão. Dez espécies são atualmente aceitas para Echinococcus, duas delas são o Echinococcus oligarthrus, agente causador da equinococose unicística, e o Echinococcus vogeli, agente causador da equinococose policística e que parece ser a espécie mais patogênica do gênero. Existem haplótipos que ainda não foram determinados como espécies e permanecem dentro da categoria de variantes genéticas. Atualmente, os estudos genéticos em Echinococcus concentram-se na análise do DNA mitocondrial, um genoma que não recombina, de rápida evolução, e de herança materna na maioria dos animais. Além disso, esses estudos têm se concentrado em E. granulosus e E. multilocularis, usando uma ou poucas amostras de Echinococcus neotropical. Este estudo teve como objetivo analisar, utilizando sequências nucleares, a composição genética das duas espécies neotropicais, visando colaborar para a compreensão dos processos evolutivos do gênero Echinococcus e, consequentemente, contribuir para o correto manuseio do parasito nas regiões afetadas. No total, foram utilizados 45 isolados para extração de DNA e subsequentes análises, 38 E. vogeli, 4 E. oligarthrus, 1 E. granulosus, 1 E. ortleppi e 1 E. multilocularis. As espécies foram determinadas a partir da amplificação e análise da sequência parcial (366 pb) do gene mitocondrial da citocromo-oxidase (cox1). Para os 45 isolados, 6 diferentes alvos nucleares (P-29, EG10, AG4, Ir, Er e TGF) foram amplificados por PCR e os diferentes genótipos foram selecionados através da técnica de SSCP. Os loci mais polimórficos encontrados em E. vogeli foram Ag4 e E10, ambos com 2 alelos, e nos loci Ir, Er, P-29 e Tgf, com um alelo. E. oligarthrus tem alelos exclusivos para cinco dos seis loci nucleares analisados; contudo, o alelo T2, do locus Tgf, também está presente em seis isolados de E. vogeli. O fluxo gênico entre as metapopulações de E. vogeli das duas áreas geográficas parece ser restrito. Além disso, o fluxo gênico entre a população de E. oligarthrus e as demais populações é restrito. A AMOVA revelou que o nível mais significante de variabilidade genética ocorre dentro das metapopulações, o segundo nível mais significativo foi encontrado entre as metapopulações dentro das suprapopulações do Acre e Pará. Os isolados amostrados no estado do Acre parecem formar um “cluster” distinto. Além disso, foi possível verificar que os isolados de E. vogeli amostrados no estado do Pará também tendem a constituir um “cluster” único, mas de forma menos uniforme. Os 11 haplótipos mitocondriais de E. vogeli constituem um grupo monofilético e distinto de E. oligarthrus e das demais espécies do gênero. / Cestodes of the genus Echinococcus are subjected to a constant taxonomic revision. Ten species are currently accepted for the genus Echinococcus, two of them are Echinococcus oligarthrus, the agent of unicystic echinococcosis and Echinococcus vogeli, the agent of polycystic echinococcosis, which seems to be one of the most pathogenic species of Echinococcus. There are haplotypes that have not been determined as species and remain within the genetic variants category. Currently, the genetic studies on Echinococcus have focused on the analysis of mitochondrial DNA, a non-recombining, fast evolving and maternally inherited genome in most animals. Besides, these studies have been concentrated in the E. granulosus and E. multilocularis, using one or few samples from neotropical Echinococcus. This study aimed to analyze, using nuclear sequences, the genetic composition of the two neotropical species, which may support the understanding of evolutionary processes on the genus Echinococcus and, consequently, will contribute to the correct handling of the parasite in the affected regions. A total of 45 isolates were used for DNA extraction and further analyses, 38 E. vogeli, 4 E. oligarthrus, 1 E. granulosus, 1 E. ortleppi and 1 E. multilocularis. The species were determined by amplification and sequence analysis of a partial sequence (366 bp) of the mitochondrial cytochrome oxydase 1 gene (cox1). For the 45 isolates, 6 different nuclear targets (P-29, Eg10, Ag4, Ir, Er and Tgf) were amplified by PCR and the genotypes were screened by SSCP technique. In E. vogeli, the most polymorphic loci found were Ag4 and E10, both with 2 alleles, and the Ir, Er, P-29 and Tgf loci with 1 allele. E. oligarthrus has exclusive alleles for five of the six analyzed nuclear loci. However, the allele T2, from Tgf locus, is also present in six E. vogeli isolates. The gene flow between the metapopulations of E. vogeli seems to be restricted. In addition, the gene flow between the E. oligarthrus population and the other populations of E. vogeli is restricted. The AMOVA revealed that the most significant level of genetic variability occurs within metapopulations, and the second most significant level of variability was found among metapopulations within suprapopulations of Acre and Pará. Isolates sampled in Acre seems to form a distinct cluster. Furthermore, it was possible to verify that the E. vogeli isolates sampled in Pará also are likely to form a single "cluster", but less uniform. The 11 mitochondrial haplotypes of E. vogeli constitute a monophyletic group and distinct from E. oligarthrus and other Echinococcus species.
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Soro-reatividade para hidatidose policística e análise sócio-epidemiológica em Sena Madureira, Acre - Brasil / Serum reactivity to polycystic hidatid disease and sócio-epidemiological analyses in Sena Madureira, Acre Brazil

Thaís Martins Pereira 21 February 2014 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Hidatidose policística é uma zoonose negligenciada causada pela larva do cestóide, Echinococcus vogeli, em habitantes de florestas úmidas da região neotropical. Caçar e alimentar cães com vísceras da caça são hábitos relatados nos indivíduos suspeitos ou com esta parasitose comprovada. O diagnóstico é baseado em dados clínicos, resultado de análise de imagens e detecção de anticorpos pelo teste de Immunoblot o que tem sido descrito para pacientes com a forma crônica da doença. Apenas nesta fase, os pacientes procuram por assistência médica. Este trabalho tem como objetivo avaliar a reatividade sorológica para hidatidose policística, caracterizar os aspectos epidemiológicos e avaliar a presença de enteroparasitoses nos indivíduos moradores de duas regiões de floresta em Sena Madureira (Acre). Os indivíduos concordaram em participar após apreciação do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. Por meio de questionário foram obtidas informações sobre identificação, endereço, sexo, idade e hábitos de caça. Foram coletadas amostras de sangue em 125 habitantes da unidade de conservação (Floresta Estadual do Antimary) e outra unidade de não conservação ambiental em Sena Madureira, onde foram obtidas 207 amostras de sangue. Os soros foram processados pelo teste de Immunoblot para a pesquisa de IgG, nas diluições 1:100 e 1:10, no Serviço de Referência Nacional em Hidatidose-IOC-Fiocruz. Na Unidade de conservação, 39,2% dos indivíduos apresentaram sorologia positiva e 17,4% na outra área. Demonstrou-se que existe diferença significativa entre as áreas, embora a correlação seja baixa. A maioria dos indivíduos reativos em ambas as áreas apresentou as bandas de 40kDA e 28kDa. Nas duas áreas de estudo não houve diferença significativa na reatividade em relação a faixa etária. O hábito de caçar entre os reativos foi de 100% dos indivíduos praticantes da caça na Unidade de conservação e na Unidade de não conservação foi de 88,9% dos indivíduos. A presença de um a três cães foi predominante nas duas áreas. A prática da caça e a presença de cães não teve associação significativa com a reatividade sorológica em ambas as áreas. A ocupação dos indivíduos reativos nas duas regiões foi predominantemente agricultores e estudantes. Em relação ao exame parasitológico não foi encontrado nenhum parasito nos indivíduos reativos que pudesse ter reação cruzada no teste imunológico. Conclui-se que existe diferença de reatividade entre as áreas, sendo que a Unidade de conservação tem maior número de indivíduos reativos. Não foi verificada associação entre a reatividade, o gênero, a faixa etária, prática de caça e presença de cães. Os indivíduos reativos também possuíam enteroparasitoses, porém estas não estão relacionadas com a possível reação cruzada no teste de Immunoblot. A presença das bandas de 40kDa e 28kDa no teste de Immunoblot podem ser uma característica do perfil sorológico de indivíduos de área endêmica que já entraram em contato com o parasito. / Polycystic hydatid disease is a neglected zoonosis caused by the larval of cestode, Echinococcus vogeli, in inhabitants of the neotropical rainforests. Hunting and feeding dogs with bushmeat are common habits among suspected or confirmed individuals with polycystic hydatidosis The diagnosis is based on clinical findings (especially abdominal mass), results of image analysis and detection of antybodies by Immunoblot test, which has been described for patients with the chronic form of the disease. Only at this stage, the patients seeking medical care. This study aims to evaluate the reactivity for polycystic hydatid disease, evaluate the presence of intestinal parasites and characterize the epidemiological factors in individuals living in two regions of forest in Sena Madureira (Acre). The participants in this study agreed to participate after consideration of the Term of Consent. A questionnaire identifying information like address, gender, age and hunting habits were obtained. Blood samples were collected from 125 inhabitants of the protected area (Floresta Estadual do Antimary) and another unit no environmental conservation in Sena Madureira, where 207 blood samples were obtained. Sera were processed by the Immunoblot test for the detection of IgG in 1:100 and 1:10, in the Laboratório de Referência Nacional em Hidatidose - IOC - Fiocruz. In Unit conservation, 39.2% of subjects were positive and 17,4% in another area. It has been demonstrated that there is significant difference between areas, although the correlation is low. The most reactive individuals in both areas showed bands of 40kDa and 28kDa. In both regions showed no significant difference in the reactive and age. The habit of hunting among the reactive was 100% of individuals practicing hunting in the conservation unit and the unit no maintenance was 88.9% of subjects. The presences of one to three dogs were predominant in both areas. The practice of hunting and the presence of dogs had no significant association with serologic reactivity in both areas. The occupation of reactive individuals in both regions was predominantly farmers and students. Regarding the parasitological examination we found no parasite in reactive individuals who might have immune cross-reaction test for hydatid disease. Its concluded that there is difference in reactivity between the areas, and the conservation unit has highest number of reactive individuals. There was no association between reactivity, gender, age, hunting and the presence of dogs. Reactive individuals also had intestinal parasites, but these are not related to possible cross-reaction in the Immunoblot test. The presence of 40kDa and 28kDa bands in the Immunoblot test can be seen in the serological profile of individuals from endemic areas that have already come into contact with the parasite.
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Soro-reatividade para hidatidose policística e análise sócio-epidemiológica em Sena Madureira, Acre - Brasil / Serum reactivity to polycystic hidatid disease and sócio-epidemiological analyses in Sena Madureira, Acre Brazil

Thaís Martins Pereira 21 February 2014 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Hidatidose policística é uma zoonose negligenciada causada pela larva do cestóide, Echinococcus vogeli, em habitantes de florestas úmidas da região neotropical. Caçar e alimentar cães com vísceras da caça são hábitos relatados nos indivíduos suspeitos ou com esta parasitose comprovada. O diagnóstico é baseado em dados clínicos, resultado de análise de imagens e detecção de anticorpos pelo teste de Immunoblot o que tem sido descrito para pacientes com a forma crônica da doença. Apenas nesta fase, os pacientes procuram por assistência médica. Este trabalho tem como objetivo avaliar a reatividade sorológica para hidatidose policística, caracterizar os aspectos epidemiológicos e avaliar a presença de enteroparasitoses nos indivíduos moradores de duas regiões de floresta em Sena Madureira (Acre). Os indivíduos concordaram em participar após apreciação do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. Por meio de questionário foram obtidas informações sobre identificação, endereço, sexo, idade e hábitos de caça. Foram coletadas amostras de sangue em 125 habitantes da unidade de conservação (Floresta Estadual do Antimary) e outra unidade de não conservação ambiental em Sena Madureira, onde foram obtidas 207 amostras de sangue. Os soros foram processados pelo teste de Immunoblot para a pesquisa de IgG, nas diluições 1:100 e 1:10, no Serviço de Referência Nacional em Hidatidose-IOC-Fiocruz. Na Unidade de conservação, 39,2% dos indivíduos apresentaram sorologia positiva e 17,4% na outra área. Demonstrou-se que existe diferença significativa entre as áreas, embora a correlação seja baixa. A maioria dos indivíduos reativos em ambas as áreas apresentou as bandas de 40kDA e 28kDa. Nas duas áreas de estudo não houve diferença significativa na reatividade em relação a faixa etária. O hábito de caçar entre os reativos foi de 100% dos indivíduos praticantes da caça na Unidade de conservação e na Unidade de não conservação foi de 88,9% dos indivíduos. A presença de um a três cães foi predominante nas duas áreas. A prática da caça e a presença de cães não teve associação significativa com a reatividade sorológica em ambas as áreas. A ocupação dos indivíduos reativos nas duas regiões foi predominantemente agricultores e estudantes. Em relação ao exame parasitológico não foi encontrado nenhum parasito nos indivíduos reativos que pudesse ter reação cruzada no teste imunológico. Conclui-se que existe diferença de reatividade entre as áreas, sendo que a Unidade de conservação tem maior número de indivíduos reativos. Não foi verificada associação entre a reatividade, o gênero, a faixa etária, prática de caça e presença de cães. Os indivíduos reativos também possuíam enteroparasitoses, porém estas não estão relacionadas com a possível reação cruzada no teste de Immunoblot. A presença das bandas de 40kDa e 28kDa no teste de Immunoblot podem ser uma característica do perfil sorológico de indivíduos de área endêmica que já entraram em contato com o parasito. / Polycystic hydatid disease is a neglected zoonosis caused by the larval of cestode, Echinococcus vogeli, in inhabitants of the neotropical rainforests. Hunting and feeding dogs with bushmeat are common habits among suspected or confirmed individuals with polycystic hydatidosis The diagnosis is based on clinical findings (especially abdominal mass), results of image analysis and detection of antybodies by Immunoblot test, which has been described for patients with the chronic form of the disease. Only at this stage, the patients seeking medical care. This study aims to evaluate the reactivity for polycystic hydatid disease, evaluate the presence of intestinal parasites and characterize the epidemiological factors in individuals living in two regions of forest in Sena Madureira (Acre). The participants in this study agreed to participate after consideration of the Term of Consent. A questionnaire identifying information like address, gender, age and hunting habits were obtained. Blood samples were collected from 125 inhabitants of the protected area (Floresta Estadual do Antimary) and another unit no environmental conservation in Sena Madureira, where 207 blood samples were obtained. Sera were processed by the Immunoblot test for the detection of IgG in 1:100 and 1:10, in the Laboratório de Referência Nacional em Hidatidose - IOC - Fiocruz. In Unit conservation, 39.2% of subjects were positive and 17,4% in another area. It has been demonstrated that there is significant difference between areas, although the correlation is low. The most reactive individuals in both areas showed bands of 40kDa and 28kDa. In both regions showed no significant difference in the reactive and age. The habit of hunting among the reactive was 100% of individuals practicing hunting in the conservation unit and the unit no maintenance was 88.9% of subjects. The presences of one to three dogs were predominant in both areas. The practice of hunting and the presence of dogs had no significant association with serologic reactivity in both areas. The occupation of reactive individuals in both regions was predominantly farmers and students. Regarding the parasitological examination we found no parasite in reactive individuals who might have immune cross-reaction test for hydatid disease. Its concluded that there is difference in reactivity between the areas, and the conservation unit has highest number of reactive individuals. There was no association between reactivity, gender, age, hunting and the presence of dogs. Reactive individuals also had intestinal parasites, but these are not related to possible cross-reaction in the Immunoblot test. The presence of 40kDa and 28kDa bands in the Immunoblot test can be seen in the serological profile of individuals from endemic areas that have already come into contact with the parasite.
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Hidatidose policística no norte do Brasil: abordagem parasitológica e histopatológica de pacas e casos humanos / Polycystic Echinococcosis in north of Brazil: parasitologyc histopathologic approach from human and pacas cases

Fernanda Barbosa de Almeida da Cunha 24 August 2012 (has links)
A hidatidose policística é uma zoonose causada pelo cestóide Echinococcus vogeli, amplamente distribuído no norte do Brasil. Os hospedeiros definitivos são Speothos venaticus (cachorro-vinagre) e Canis familiaris (cães domésticos), enquanto Agouti paca (paca) é hospedeiro intermediário. Tanto as pacas quanto o homem (hospedeiro acidental) desenvolvem a forma larvar (metacestóide), principalmente na superfície e no interior do fígado. Esta tese tem como objetivo geral estudar as características parasitológicas e histopatológicas de metacestóides de E. vogeli, originários de pacas e humanos da região norte do Brasil, visto o conhecimento insuficiente ou mesmo o seu desconhecimento. Os fígados e mesentérios foram obtidos de oito pacientes com hidatidose policística durante ato cirúrgico na Fundação Hospital Estadual do Acre. Pacas foram capturadas no Município de Bujari, Floresta Estadual do Antimary, Acre. Durante a necropsia das pacas, foram observadas lesões macroscópicas (massas esbranquiçadas ou amareladas, semelhantes a bolhas na superfície dos fígados). Para a análise parasitológica foram aplicadas as microscopias de luz, contraste interferencial de Normaski (DIC) e varredura laser confocal. A análise morfométrica foi realizada com o auxílio do Programa Image Pro Plus Media Cybernetics. Os órgãos de pacas e humanos foram submetidos à análise histopatológica. Os pequenos e grandes ganchos rostelares apresentaram polimorfismo morfológico, enquanto a organização dos protoescólices acompanhou o padrão descrito para Echinococcus sp. Todas as pacas apresentavam cistos hepáticos, porém em apenas duas encontramos líquido hidático, comprovados pela presença dos ganchos e protoescólices. A análise histopatológica dos tecidos hepáticos das pacas confirmou a hidatidose policística e evidenciou, pela presença de agrupamentos de ovos, a coinfecção com Calodium hepaticum. As características morfológicas dos ganchos rostelares dos casos humanos não diferiram do descrito para as pacas, entretanto, os ganchos dos helmintos provenientes do fígado foram maiores que os mesentéricos. Já em relação aos protoescólices, os mesentéricos foram maiores do que os hepáticos. Cistos mesentéricos e hepáticos apresentaram protoescólices em diferentes estágios de desenvolvimento, com coroas de ganchos, formadas por grandes e pequenos ganchos, e dois pares de ventosas, além dos corpúsculos calcários. Os cistos hepáticos apresentaram as três membranas características (adventícia, anista e germinativa), enquanto os cistos mesentéricos não apresentaram a membrana adventícia, sendo a anista aquela que mais se destacou neste órgão. No mesentério, as células mononucleares foram os principais constituintes do infiltrado leucocitário, cuja intensidade foi relacionada à capacidade proliferativa da membrana germinativa. Além de cistos hepáticos típicos de fase crônica, dependendo da resposta inflamatória, foram observados cistos na fase aguda e sub-aguda. Foi encontrado um caso de coinfecção com vírus (HIV, HCB e HCV) e outro com envolvimento da vesícula biliar. Em suma, confirma-se hidatidose policística em pacas no Acre e são apresentados novos casos de infecção humana no Acre e Amazonas. Pela primeira vez, é demonstrado polimorfismo, padrão diferente de desenvolvimento dos cistos de acordo com o órgão, coinfecção e envolvimento da vesícula biliar / Polycystic hydatidosis is a zoonotic disease caused by the cestode Echinococcus vogeli, largely distributed in northern Brazil. The definitive hosts are Speothos venaticus (bush dogs) and Canis familiaris (domestic dogs), while Agouti paca (paca) is the intermediate host. Both the pacas and man (accidental host) develop the larval form (metacestodes), mainly on the surface and inside the liver. This thesis aims to study histopathological and parasitological characteristics of metacestodes of E. vogeli, from pacas and humans of the north region of Brazil, seen the insufficient knowledge or lack of it. The mesentery and livers were recovered from eight patients with polycystic hydatidosis during surgery in the Acre State Hospital Foundation. Pacas were captured in the municipality of Bujari, Antimary State Forest, Acre. During the pacas necropsy, macroscopic lesions were observed (whitish or yellowish masses, similar to blisters on the surface of the liver). Identification analyses were applied to light microscopy, interferential contrast microscopy of Normaski (DIC) and confocal laser scanning microscopy. Morphometric analysis was performed by Image Pro Plus Media Cybernetics program. The pacas and human organs were subjected to histopathological analysis. The small and large rostellar hooks presented morphological polymorphism while protoscoleces organisation accompanied the pattern described in Echinococcus sp. All pacas presented liver cysts, however in only two found proven by the presence of hydatid fluid, hooks and protoscoleces. Histopathological analysis of pacas hepatic tissues confirmed polycystic hydatidosis and evidenced by the presence of eggs clusters the Calodium hepaticum coinfection. The morphological characteristics of human cases rostellar hooks did not differ from described to the pacas; however, the hooks were greater than the mesenteric ones. Already in relation to protoscoleces, the mesenteric ones were larger than the liver. Mesenteric and liver cysts presented protoscoleces at different stages of development, with rostellar pad formed by large and small hooks, and two pairs of suckers, in addition to the calcareous corpuscles. Liver cysts showed three characteristics layers (adventitia, laminated and germinative), while mesenteric cysts did not present the adventitia, being the laminated layer the most evidenced in this organ. In the mesentery, mononuclear cells were the principal constituents of leukocyte infiltrated, whose intensity was related to the proliferative capacity of germinative layer. In addition to typical liver cysts of the chronic phase, depending on the inflammatory response, have been observed cysts in acute and subacute phase. It was found a case of co-infection with virus (HIV, HCV and HCB) and another with gallbladder involvement. In short, it is confirmed polycystic hydatidosis in pacas from Acre and is presented new cases of human infection in Acre and Amazonas. For the first time, it was demonstrated polymorphism, different development pattern of cysts depending on the organ, co-infection and gallbladder involvement
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Hidatidose policística no norte do Brasil: abordagem parasitológica e histopatológica de pacas e casos humanos / Polycystic Echinococcosis in north of Brazil: parasitologyc histopathologic approach from human and pacas cases

Fernanda Barbosa de Almeida da Cunha 24 August 2012 (has links)
A hidatidose policística é uma zoonose causada pelo cestóide Echinococcus vogeli, amplamente distribuído no norte do Brasil. Os hospedeiros definitivos são Speothos venaticus (cachorro-vinagre) e Canis familiaris (cães domésticos), enquanto Agouti paca (paca) é hospedeiro intermediário. Tanto as pacas quanto o homem (hospedeiro acidental) desenvolvem a forma larvar (metacestóide), principalmente na superfície e no interior do fígado. Esta tese tem como objetivo geral estudar as características parasitológicas e histopatológicas de metacestóides de E. vogeli, originários de pacas e humanos da região norte do Brasil, visto o conhecimento insuficiente ou mesmo o seu desconhecimento. Os fígados e mesentérios foram obtidos de oito pacientes com hidatidose policística durante ato cirúrgico na Fundação Hospital Estadual do Acre. Pacas foram capturadas no Município de Bujari, Floresta Estadual do Antimary, Acre. Durante a necropsia das pacas, foram observadas lesões macroscópicas (massas esbranquiçadas ou amareladas, semelhantes a bolhas na superfície dos fígados). Para a análise parasitológica foram aplicadas as microscopias de luz, contraste interferencial de Normaski (DIC) e varredura laser confocal. A análise morfométrica foi realizada com o auxílio do Programa Image Pro Plus Media Cybernetics. Os órgãos de pacas e humanos foram submetidos à análise histopatológica. Os pequenos e grandes ganchos rostelares apresentaram polimorfismo morfológico, enquanto a organização dos protoescólices acompanhou o padrão descrito para Echinococcus sp. Todas as pacas apresentavam cistos hepáticos, porém em apenas duas encontramos líquido hidático, comprovados pela presença dos ganchos e protoescólices. A análise histopatológica dos tecidos hepáticos das pacas confirmou a hidatidose policística e evidenciou, pela presença de agrupamentos de ovos, a coinfecção com Calodium hepaticum. As características morfológicas dos ganchos rostelares dos casos humanos não diferiram do descrito para as pacas, entretanto, os ganchos dos helmintos provenientes do fígado foram maiores que os mesentéricos. Já em relação aos protoescólices, os mesentéricos foram maiores do que os hepáticos. Cistos mesentéricos e hepáticos apresentaram protoescólices em diferentes estágios de desenvolvimento, com coroas de ganchos, formadas por grandes e pequenos ganchos, e dois pares de ventosas, além dos corpúsculos calcários. Os cistos hepáticos apresentaram as três membranas características (adventícia, anista e germinativa), enquanto os cistos mesentéricos não apresentaram a membrana adventícia, sendo a anista aquela que mais se destacou neste órgão. No mesentério, as células mononucleares foram os principais constituintes do infiltrado leucocitário, cuja intensidade foi relacionada à capacidade proliferativa da membrana germinativa. Além de cistos hepáticos típicos de fase crônica, dependendo da resposta inflamatória, foram observados cistos na fase aguda e sub-aguda. Foi encontrado um caso de coinfecção com vírus (HIV, HCB e HCV) e outro com envolvimento da vesícula biliar. Em suma, confirma-se hidatidose policística em pacas no Acre e são apresentados novos casos de infecção humana no Acre e Amazonas. Pela primeira vez, é demonstrado polimorfismo, padrão diferente de desenvolvimento dos cistos de acordo com o órgão, coinfecção e envolvimento da vesícula biliar / Polycystic hydatidosis is a zoonotic disease caused by the cestode Echinococcus vogeli, largely distributed in northern Brazil. The definitive hosts are Speothos venaticus (bush dogs) and Canis familiaris (domestic dogs), while Agouti paca (paca) is the intermediate host. Both the pacas and man (accidental host) develop the larval form (metacestodes), mainly on the surface and inside the liver. This thesis aims to study histopathological and parasitological characteristics of metacestodes of E. vogeli, from pacas and humans of the north region of Brazil, seen the insufficient knowledge or lack of it. The mesentery and livers were recovered from eight patients with polycystic hydatidosis during surgery in the Acre State Hospital Foundation. Pacas were captured in the municipality of Bujari, Antimary State Forest, Acre. During the pacas necropsy, macroscopic lesions were observed (whitish or yellowish masses, similar to blisters on the surface of the liver). Identification analyses were applied to light microscopy, interferential contrast microscopy of Normaski (DIC) and confocal laser scanning microscopy. Morphometric analysis was performed by Image Pro Plus Media Cybernetics program. The pacas and human organs were subjected to histopathological analysis. The small and large rostellar hooks presented morphological polymorphism while protoscoleces organisation accompanied the pattern described in Echinococcus sp. All pacas presented liver cysts, however in only two found proven by the presence of hydatid fluid, hooks and protoscoleces. Histopathological analysis of pacas hepatic tissues confirmed polycystic hydatidosis and evidenced by the presence of eggs clusters the Calodium hepaticum coinfection. The morphological characteristics of human cases rostellar hooks did not differ from described to the pacas; however, the hooks were greater than the mesenteric ones. Already in relation to protoscoleces, the mesenteric ones were larger than the liver. Mesenteric and liver cysts presented protoscoleces at different stages of development, with rostellar pad formed by large and small hooks, and two pairs of suckers, in addition to the calcareous corpuscles. Liver cysts showed three characteristics layers (adventitia, laminated and germinative), while mesenteric cysts did not present the adventitia, being the laminated layer the most evidenced in this organ. In the mesentery, mononuclear cells were the principal constituents of leukocyte infiltrated, whose intensity was related to the proliferative capacity of germinative layer. In addition to typical liver cysts of the chronic phase, depending on the inflammatory response, have been observed cysts in acute and subacute phase. It was found a case of co-infection with virus (HIV, HCV and HCB) and another with gallbladder involvement. In short, it is confirmed polycystic hydatidosis in pacas from Acre and is presented new cases of human infection in Acre and Amazonas. For the first time, it was demonstrated polymorphism, different development pattern of cysts depending on the organ, co-infection and gallbladder involvement
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Equinococose neotropicial: um estudo anatomopatológico para auxílio em uma sistematização diagnóstica correlacionada a morfologia

ABREU JUNIOR, José Maria de Castro January 2012 (has links)
Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-09-27T15:09:32Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EquinococoseNeotropicialEstudo.pdf: 5301692 bytes, checksum: c12c84566fbf92aee7c2ba3e8e0c7c27 (MD5) / Approved for entry into archive by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2017-09-28T14:11:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EquinococoseNeotropicialEstudo.pdf: 5301692 bytes, checksum: c12c84566fbf92aee7c2ba3e8e0c7c27 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-28T14:11:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EquinococoseNeotropicialEstudo.pdf: 5301692 bytes, checksum: c12c84566fbf92aee7c2ba3e8e0c7c27 (MD5) Previous issue date: 2012 / Equinococose é uma doença parasitária causada por helmintos do gênero Echinococcus, que podem ser encontrados no intestino de diversos carnívoros silvestres e domésticos. O homem comporta-se como hospedeiro acidental adquirindo a infecção por via oral através da ingestão acidental de ovos de vermes adultos. Após deglutidos e com a liberação do embrião, este aloja-se comumente em órgãos como fígado e pulmão produzindo uma doença de evolução lenta e sintomatologia que assemelha-se a doenças neoplásicas. O Estado do Pará apesar da subnotificação apresenta uma casuística significativa desta rara enfermidade, associada na região ao Echinococcus vogeli. O estudo descreve seis novos casos, cinco localizados no fígado e um no pulmão utilizando microscopia de luz, caracterizando quanto ao tipo de infiltrado inflamatório e componentes celulares presentes. Observou-se fibrose, reação giganto celular, deposição de cálcio e a membrana laminar com seu aspecto cerebroide. Não foram vistos ganchos rostelares. A membrana laminar, não possibilita caracterizar a espécie, mas permite considerar como sendo um parasita do gênero Echinococcus . Ainda que a casuística seja pequena, não permitindo uma análise estatística notam-se achados que justificam uma doença de evolução crônica. Mais estudos como este, que ampliem a casuística são importantes já que a equinococose é uma doença neglicenciada. / Equinococcosis is a disease caused by cestodes of the Echinococcus genus, that can be found at the small intestin of animals like bush-dog and domestic dog. Men behave as an accidental host by the ingestion of eggs of the parasite. The larval forms mainly develop at the liver, and sometimes at the lung, causing a cronic diesease that can be easily mistaken by neoplasias. At the State of Pará, North Brazil, there is a great number of cases of this rare diesease, related to Echinococcus vogeli in the Amazon.This study describes six new cases, five in the the liver, and one at the lung, making description a about the kind of inflammatory cells. Fibrosis, giant-cells, calcification and the laminated layer with the typical cerebroid pattern. Rostellar hooklets did not were found. The laminated layer, is not enough to describe the species of Echinococcus, but allows to consider that the worm´s gender is Echinococcus. Even though the number of cases is too small for a statistical analysis, were observed cells that can justify why the disease has a cronic evolution. More works like this, adding more cases are important, because equinococcosis is a neglected diesese.

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