Traditional Chinese medicine (TCM) plays an important role in the Chinese healthcare system for over five thousand years. It includes the use of herbal medicine, acupuncture, Tui Na (推拿), and diet therapy. TCM helps to maintain a balance of Yin-Yang (阴阳), Five Phases (五行), Meridians (经络) and Qi (气) inside the body. In practise, pregnant women take tocolytic drugs to tonify the blood and qi to provide a continuous supply of nutrients for baby. Traditional Chinese herbal medicines usually prescribed as a complex formula to produce synergistic or agonistic effect to maintain a well balance of the above components in human bodies. Moreover, TCM usually cannot produce immediate effect on patients, therefore, the efficacy of individual component remains largely unknown. This study aims to investigate whether Chinese tocolytic drug components could modulate fertility by affecting the in vitro spheroid (blastocyte surrogate) attachment process by using trophoblastic (JEG-3) and endometrial epithelial (Ishikawa) cells to mimic the embryo-endometrial implantation process. Nine Chinese herbal medicinal compounds (Atractylenolide I(白术内酯), Atractylenolide II(白术内酯II), Atractylenolide III(白术内酯III), Paeoniflorin(芍药苷), Albiflorin(芍药内酯苷), Nuzhenide(女贞子甙), Ecliptasaponin A(旱莲甙A), Wedelolactone(蟛蜞菊内酯) and Columbianadin(二氢欧山芹醇当归酸酯)) which are commonly found in traditional Chinese tocolytic drug formula were selected to study (1) the toxicity of the drugs on trophoblastic (JEG-3) and endometrial epithelial (Ishikawa) cells growth, (2) the effect of three tocolytic drugs (Atractylenolide I, Atractylenolide II and Atractylenolide III) on spheroid attachment, and (3) their effect of the expression of Wingless (Wnt) signaling molecules (Active-β-Catenin, Axin-2, β-catenin, E-cadherin, GSK-3β, and Mucin-1). It was found that the nine compounds, Atractylenolide I, Atractylenolide II, Atractylenolide III, Paeoniflorin, Albiflorin, Nuzhenide, Ecliptasaponin A, Wedelolactone and Columbianadin did not affect cell viability at 25μM, 25μM, 5μM, 0.2μM, 125μM, 125μM, 125μM, 5μM and 25μM, respectively, by cell proliferation assay. However, at these concentrations, the spheroid attachment was not significantly increased by Atractylenolide I, Atractylenolide II and Atractylenolide III. Interestingly, the protein expression of GSK-3β and Active-β-catenin were up-regulated by the three compounds in both cells and JEG-3 cells respectively. The expressions of Axin-2 and E-cadherin were up-regulated by Atractylenolide III in Ishikawa cells and Atractylenolide II in JEG-3 cells. Atractylenolide I and Atractylenolide III increase the Ishikawa cells expression of Active-β-catenin and β-catenin respectively and together suppress the JEG-3 cells Mucin-1 and β-catenin expression. In conclusion, the nine tocolytic compounds have different effect on cell proliferation. Atractylenolide I, Atractylenolide II and Atractylenolide III did not enhance the attachment rate of JEG-3 spheroid onto Ishikawa monolayer. However, they affected Wnt-signaling molecules expression, suggesting that they may modulate endometrial receptivity. Further experiments are needed to study their combined effect on co-culture and expression of Wnt-signaling molecules. / published_or_final_version / Obstetrics and Gynaecology / Master / Master of Medical Sciences

published_or_final_version / Medical Sciences / Master / Master of Medical Sciences

published_or_final_version / Obstetrics and Gynaecology / Master / Master of Philosophy

Tirtos Vilniaus universiteto Onkologijos institute gydytos pacientės, kurioms 1996 spalio mėnesį - 1998 kovo mėnesį buvo taikyta pooperacinė spindulinė terapija gama-neutronų šaltiniu gimdos kūno vėžio gydymui. Tyrimo tikslas: įvertinti gimdos kūno vėžio pooperacinio spindulinio gydymo gama-neutronų šaltiniu efektyvumą. Tyrimo uždaviniai: 1) Įvertinti vienerių, dvejų, trejų ir penkerių metų išgyvenamumą pacienčių grupėje. 2) Įvertinti vienerių, dvejų, trejų ir penkerių metų išgyvenamumą pacienčių amžiaus grupėje. 3) Įvertinti vienerių, dvejų, trejų ir penkerių metų išgyvenamumą pagal naviko charakteristikas: stadiją, morfologinį naviko tipą, naviko diferenciacijos laipsnį. 4) Įvertinti vienerių, dvejų, trejų ir penkerių metų išgyvenamumą pagal spindulinio gydymo charakteristikas: suminę židininę dozę, gydymo trukmę, laiką nuo diagnozės iki gydymo pradžios. Medžiaga ir metodai: naudotasi VU onkologijos institute esančiomis ambulatorinių kortelių ir vėžio registro duomenimis - iš viso 64 ligonių ligos istorijos: 52 pacientėms buvo taikyta pooperacinė ertmini gama-neutonų terapija + distancinė gamaterapija, 12 ertminė gama-neutronų terapija. Duomenų analizė atlikta naudojantis SPSS 11.0 versijos statistiniu duomenų analizės paketu. Skirtumui tarp grupių įvertinti taikytas Chi-kvadrato metodas. Visoms hipotezėms tikrinti taikytas reikšmingumo lygmuo 0,05. Išgyvenamumo analizė atlikta naudojant Kaplan - Meier ir išgyvenimo lentelių (life table) metodą. Rezultatai: Ertminės... [toliau žr. visą tekstą] / Women were treated with postoperative radiotherapy by using the gamma-neutrons’ source for treatment of endometrial cancer within the period from October 1, 1996 till March 1, 1998 at the Institute of Oncology of Vilnius University were surveyed in this study. Objective: to estimate the efficiency of endometrial cancer postoperative radiotherapy treatment by using the gamma-neutron source. Goals :1) to estimate one, two, three and five - year survival in a group of patients; 2) to estimate one, two, three and five - year survival according to the patients’ age; 3) to estimate one, two, three and five - year survival according to the tumor characteristics: morphologic tumor type, tumor differentiation degree; 4) to estimate one, two, three and five - year survival according to the radiotherapy characteristics: radiotherapy type, radiotherapy duration. Materials and Methods: The used materials consist of the case records collected at the Institute of Oncology of Vilnius University as well as of the data of the Cancer Register - overall 64 patients’ case records: 52 patients have had combined postoperative radiotherapy and 12 have had vaginal brachytherapy. The data were analyzed by the SPSS statistical package (Version 11.0 for Windows). The statistical assessment and analysis were performed with the qui-square (&#967;2), Kruscal-Wallis H test with values of p < 0,05 being defined as significant. The survival analysis was performed by using the Kaplan - Meier and life tables’... [to full text]

Zielsetzung der vorgestellten Arbeit war die Etablierung und Validierung einer Zellkultur isolierter equiner endometrialer Epithel- und Stromazellen für morphologische und funk-tionelle Untersuchungen an den einzelnen Zelltypen und ihrer Interaktionen. Ein solches In-vitro-System könnte insbesondere für Studien zur der Pathogenese der Endometrose zum Einsatz kommen. Zu diesem Zweck wurden Endometriumbioptate und Uteri von gynäkologisch unauffälli-gen Stuten entnommen. Die Isolierung der Zellen erfolgte nach mechanischer Zerklei-nerung des Gewebes mittels enzymatischer Verdauung durch Kollagenase. Für die Se-paration und Aufreinigung der Epithel- und Stromazellen kam, nach unbefriedigenden Ergebnissen bezüglich Zellausbeute und –reinheit bei Verwendung der Verfahren allein, eine Kombination aus Filtration, diskontinuierlicher Dichtegradientenzentrifugation und Differenzialadhärenz zum Einsatz. So konnten Kreuzkontaminationen der beiden Zell-fraktionen von ≤ 2 % erreicht werden. Die Kultivierung der so gewonnenen Zellen er-folgte bei 37 °C, in Raumluft mit 5 % CO2 in wasserdampfgesättigter Atmosphäre in RPMI 1640 als Medium mit 10 % fötalem Kälberserum. Der Proliferationsvergleich auf unterschiedlichen Oberflächenbeschichtungen (Kunst-stoff, Kollagen, Matrigel®) zeigte einen Wachstumsvorteil der Epithelzellen auf dem ECM-Substrat Matrigel®. Im Gegensatz zu den stromalen Zellen, deren Wachstum auf dieser gegenüber den anderen Beschichtungen verlangsamt war. Die Stromazellen konnten über 1 Jahr bis zur Passage 19 in Kultur gehalten werden bevor deutliche De-generationserscheinungen auftraten. Bei den epithelialen Zellen war die Subkultivierung nach Trypsinierung nicht erfolgreich. Eine morphologische und funktionelle Charakterisierung der kultivierten Zellen fand mit-tels Lichtmikroskopie mit verschiedenen Färbungen, Immunhistologie sowie Transmissions- und Rasterelektronenmikroskopie statt. Für diesen Zweck erfolgte die Kultivierung der Zellen auf chamber slides und in Matrigel®-beschichteten Membraneinsätzen als Mono- und Kokultur. Die Epithelzellen stellten sich auf unbeschichteten Kunststoffoberflächen als flache, po-lygonale Zellen dar. Bei Bereitstellung von Matrigel® bildeten sie Organoide aus polari-sierten Zellverbänden mit Mikrovilli und Protrusionen an der Oberfläche aus. Als Zellver-bindungen traten Interdigitationen, tight junctions und Desmosomen auf. Im Zytoplas-ma waren neben rauem endoplasmatischen Retikulum, Golgi-Apparat und Mitochond-rien auch Sekretvakuolen zu finden. Immunhistologisch reagierten die Epithelien auch in vitro Zytokeratin-positiv. Dieses Charakteristikum diente als Unterscheidungsmerkmal von den Stromazellen, da nach einer Woche Kulturzeit auch der Vimentinnachweis bei den epithelialen Zellen positiv ausfiel. Progesteron- und Östrogenrezeptoren waren mit-tels Immunhistologie bei beiden kultivierten Zelltypen nicht nachweisbar. Die spindeligen bis sternförmigen Stromazellen wiesen keine Oberflächenmodifikationen auf. Intrazytoplasmatisch waren Mitochondrien, raues endoplasmatische Retikulum und ein Golgi-Apparat nachweisbar. Die stromalen Zellen waren immunhistologisch durch einen Vimentinnachweis gekennzeichnet. Zusätzlich konnte nach wenigen Tagen in der Kultur -Aktin und teils auch Desmin nachgewiesen werden. Diese Differenzierung zu Myofibroblasten trat unter hypoxischen Kulturbedingungen (1 % O2) verstärkt auf. Die morphologische und immunhistologische Charakterisierung zeigte, dass die Diffe-renzierung sowohl der epithelialen als auch der stromalen Zellen unter den eingesetzten Kulturbedingungen der von Endometrose betroffenen Zellen oder den Zellen in inakti-ven Endometrien während des Winteranöstrus in situ ähnelt. Die etablierte Zellkultur equiner endometrialer Epithel- und Stromazellen aus Biopsiema-terial bildet die Grundlage für morphologische und funktionelle Untersuchungen an den einzelnen Zelltypen und ihrer Interaktionen zur Erforschung der Pathogenese der En-dometrose. Aus praktischer und ethischer (tierschutzrechtlicher) Sicht bietet sie eine hervorragende Möglichkeit experimenteller Untersuchungen an endometrialen Zellen der Stute.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. inst., 2003. / Härtill 5 uppsatser.

Diss. (sammanfattning) Uppsala : Univ., 2004. / Härtill 4 uppsatser.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. inst., 2002. / Härtill 5 uppsatser.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. inst., 2006. / Härtill 5 uppsatser.

Thesis (M. Sc.)--University of Canterbury, 2008. / Typescript (photocopy). "June 2008." Includes bibliographical references (leaves 65-72). Also available via the World Wide Web.