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Detección de Escherichia coli O157:H7 en canales bovinas de camales de Lima

Astuvilca Cupe, Carmen Rosa January 2015 (has links)
Las E. coli productoras de tipo shiga (STEC) son patógenas en el hombre y pueden provocarle colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico. Dentro de este grupo, el serotipo E. coli O157:H7 es el que más se ha reportado como problema de salud pública. Las infecciones por este agente generalmente se producen por consumir alimento contaminado, siendo la carne de bovino el principal vehículo de este patógeno, en el Perú se ha reportado que es causante de diarreas y hospitalizaciones en niños. El objetivo del estudio es identificar la presencia de E. coli O157:H7 productora de toxinas shiga en canales de bovinos faenados en Lima. Para ello se recolectaron 180 muestras de 2 mataderos de Lima en 2 momentos del oreo; momento lavado (final del lavado e inicio de oreo) y momento oreo ( 2-3 h. en la playa de oreo). Se emplearon 2 metodologías, una técnica estándar para E. coli que requiere de medios tripticasa de soya (37°C por 24 h) y agar Mac conkey (37°C por 24 h) y una técnica microbiológica específica para la detección de E. coli no fermentadoras de sorbitol (característica de la E. coli O157:H7) usando los medios específicos EC con novobiocina (37°C por 24 h) y agar Mac conkey sorbitol (37°C por 24 h). Las colonias compatibles con E. coli se confirmaron con pruebas bioquímicas, luego se guardó a 2 °C una cepa de cada placa positiva para posteriormente y en conjunto realizar un PCR múltiple con la finalidad de identificar los factores de virulencia Stx1, Stx2, eaeA, rfbO157, hlyA y fliCH7. No se detectó E. coli O157:H7. Se encontró 29.4% (53/180) E. coli positivos, 5.6% (10/180) STEC, 1.1% (2/180) E. coli O157 y 0.5% (1/180) STEC O157. No se encontró diferencia significativa (p>0.05) entre la presencia de agentes (E. coli y STEC) y el momento de muestreo; ni con algunas de las técnicas microbiológicas. Los resultados obtenidos muestran la presencia de E. coli en las canales bovina desde su procesamiento primario, en los mataderos evaluados. Palabras claves: cepas, diarrogénicas, PCR, oreo, enfermedades transmitidas por alimentos / --- Shiga toxin producing E. coli (STEC) are pathogenic in humans and it can cause them hemorrhagic colitis and hemolytic uremic syndrome. Within this group, E. coli serotype O157: H7 is the most widely reported as a public health problem. Infections by this agent are generally produced by consuming contaminated food, being beef the main vehicle for this pathogen. In Peru it has been reported to be causing diarrhea and hospitalizations in children. The aim of the study is to identify the presence of E. coli O157: H7 shiga toxinproducing in cattle carcasses of slaughtered in Lima. For this purpose, 180 samples were collected of 2 slaughterhouses in Lima in 2 times of oreo; washing time (end of washing and beginning of oreo) and oreo time (2-3 h. in oreo). 2 methodologies were used, a standard technique for E. coli, which requires trypticase soy media (37°C for 24 h) and Mac Conkey agar (37°C for 24 h) and a specific microbiological technique for detecting E . coli non fermenting sorbitol (characteristic of E. coli O157: H7) using EC medium with specific novobiocina (37°C for 24 h) and Mac Conkey sorbitol agar (37°C for 24 h). Compatible colonies with E. coli were confirmed by biochemical tests, then stored at 2 °C one isolate from each positive plate, later and together make a multiple PCR for the purpose of identify virulence factors Stx1, Stx2, eaeA, rfbO157, hlyA and fliCH7. E. coli O157: H7 wasn´t detected. It was detected 29.4% (53/180) positive E. coli, 5.6% (10/180) STEC, 1.1% (2/180) E. coli O157 and 0.5% (1/ 180) STEC O157. No significant difference (p>0.05) was found between the presence of agents (E. coli y STEC) and the sampling time neither with some microbiological techniques. The results show the presence of E. coli in cattle from its primary processing, in slaughterhouses evaluated. Keywords : strains, diarrheagenic, oreo, foodborne diseases
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Verificación de un método basado en bacteriófagos para detección de Salmonella spp. en muestras del ámbito alimentario

Cádiz Núñez, Leandro Antonio January 2014 (has links)
Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Salmonella corresponde a una de las principales causas de enfermedades gastroentéricas, principalmente por la ingestión de alimentos de origen animal contaminados. Para detectar la presencia de Salmonella en alimentos existe el método tradicional y métodos alternativos. El método tradicional es bastante extenso y laborioso, retrasando la obtención de resultados. Los métodos alternativos permiten obtener resultados más rápidamente, aun cuando, deben ser validados y verificados frente a un método tradicional. Este estudio tiene por finalidad verificar al interior de la Unidad de Bacteriología Pecuaria del Servicio Agrícola y Ganadero (SAG) un nuevo método alternativo denominado VIDAS® UP SALMONELLA para la detección de Salmonella spp. en dos matrices del ámbito alimentario, como lo son esponja sobre carcasa de bovino y enjuague de carcasa de pollo. Para ello se analizaron, en forma simultánea, 52 muestras de cada matriz por el método alternativo y por el método tradicional, de tal manera de obtener valores de sensibilidad relativa, especificidad relativa y exactitud relativa del método alternativo, y la concordancia entre ambos métodos mediante el índice Kappa. Para la matriz esponja sobre carcasa de bovino se obtuvo una sensibilidad relativa de 100%, especificidad relativa de 100% y exactitud relativa de 100%. Mientras que en la matriz enjuague de carcasa de pollo los valores fueron de 80,7%, 100% y 90,4% respectivamente. La concordancia alcanzada fue de 1,0 y 0,81 para esponja sobre carcasa de bovino y enjuague de carcasa de pollo respectivamente. Los resultados permiten concluir que este nuevo método alternativo obtiene criterios muy buenos en comparación con su contraparte tradicional, entregándole a la Unidad de Bacteriología Pecuaria una nueva herramienta de análisis
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Implementación de un protocolo de contaminación con Salmonella enterica serovar Enteritidis en carne de pescado fresca congelada y ahumada

Donoso Férez, Constanza Paulina. January 2012 (has links)
Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / Las Enfermedades Transmitidas por Alimentos son un problema mundial en aumento. Uno de los agentes causales es Salmonella enterica serovar Enteritidis (SE), serotipo predominante en Chile y asociado a alimentos de origen animal, entre ellos, carne de pescado. Una forma reciente de controlar la presencia de SE en los alimentos, ya en uso internacional, es el biocontrol mediante bacteriófagos. Para poder realizar a futuro estudios ajustados al escenario nacional que permitan evaluar su efecto directamente en alimentos, es primordial contar previamente con protocolos de contaminación experimental de las muestras. Por esto, el presente estudio analizó protocolos de contaminación experimental con SE, en carne de salmón congelada fresca y ahumada, mantenida 10 días a temperatura de refrigeración y ambiente. Las variables analizadas fueron: presentación de los alimentos (molido y laminado) y técnica de contaminación (goteo con y sin homogeneización). En cada protocolo se determinó la menor dosis bacteriana (entre 102 a 106 UFC/mL) que lograra ≥ 80% de muestras contaminadas. Además, se evaluó la eficiencia de Piruvato de Sodio en la recuperación de SE en estas carnes contaminadas y refrigeradas. Las menores dosis que lograron ≥ 80% de muestras contaminadas fueron de 102 UFC/mL para todos los protocolos independiente de la temperatura, excepto salmón fresco molido sin homogeneizar refrigerado, cuya dosis fue 103 UFC/mL. Los cuatro protocolos comparados por cada matriz no presentaron diferencias estadísticas (p>0,05) en la bacteriología cualitativa (detección) y cuantitativa (recuentos). La adición de Piruvato de Sodio no generó diferencias estadísticamente significativas (p>0,05) en la recuperación de SE / Proyecto Fondecyt N° 1110038
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Contaminación experimental con Salmonella Enteritidis en carnes crudas de pollo, pavo, cerdo y bovino

Espina Suárez, Karen Alejandra January 2012 (has links)
Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / Las Enfermedades Transmitidas por Alimentos representan un problema de salud pública creciente, siendo Salmonella spp. el patógeno más frecuentemente aislado en los brotes. En Chile, la mayor prevalencia la registra Salmonella Enteritidis (SE), aislado principalmente desde productos de origen animal como carnes de diferentes especies. En este trabajo se implementaron protocolos de contaminación experimental con SE en alimentos cárneos crudos de riesgo, como un paso previo para la investigación del uso de bacteriófagos líticos en la disminución de la carga bacteriana en estos alimentos. Se implementaron cuatro diferentes protocolos de contaminación experimental con SE en productos cárnicos crudos considerados como riesgosos: pollo, pavo, cerdo y bovino. Se determinó la menor dosis de inóculo bacteriano (102 hasta 106 UFC/mL), forma de aplicación del inóculo (goteo con/sin homogeneización) y forma de presentación de las carnes (molido y laminado) con las cuales se logró porcentajes ≥ 80% de contaminación de las muestras, mantenidas por 10 días a temperatura ambiente y de refrigeración. Además, se estudió la eficiencia del Piruvato de Sodio adicionado a los medios de cultivo en los recuentos de SE en las muestras contaminadas y almacenadas a temperatura de refrigeración. En la mayoría de los protocolos analizados se obtuvo elevados porcentajes de muestras contaminadas con bajas dosis de SE (102 UFC/mL y 103 UFC/mL) tanto a temperatura ambiente como en refrigeración, obteniendo recuentos similares entre protocolos. La adición de Piruvato de Sodio no produjo recuentos significativamente mayores (p > 0,05) que aquellos obtenidos sin la adición del suplemento / Proyecto FONDECYT 1110038
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Diversidad de fenotipos asociados a virulencia entre cepas de Salmonella enterica serovar Enteritidis aisladas desde distintos hospederos en Chile

Gornall Concha, Vanessa Paola January 2012 (has links)
Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / En Chile y el mundo, el aumento de la prevalencia de Salmonella enterica serotipo Enteritidis en enfermedades transmitidas por alimentos (ETAs), ha generado gran preocupación sanitaria y económica. La principal fuente de infección para el ser humano es el consumo de productos avícolas, aunque también se ha sugerido el rol de aves silvestres en la transmisión directa del agente, hacia personas y aves comerciales. El objetivo de este trabajo, fue determinar la diversidad fenotípica ligada a virulencia de cepas de S. Enteritidis, aislada desde aves comerciales, aves acuáticas y seres humanos en Chile y observar su asociación a estos hospederos. Los fenotipos de virulencia testeados in vitro fueron la supervivencia en acidez (pH3), en estrés oxidativo (H2O2/NaNO2) y hambruna. Bajo acidez, se observó diferencias significativas (p≤ 0,05) entre cepas a los 30min de ensayo. En estrés oxidativo (H2O2/NaNO2), se determinó diferencias (p≤ 0,05) entre cepas a los 30min y 3h respectivamente. Finalmente, bajo hambruna se observó diferencias (p≤ 0,05) entre cepas y entre hospederos en todos los días de medición (días 10, 20, 30 y 40). En conclusión, existe diversidad fenotípica ligada a virulencia entre cepas de S. Enteritidis y en el caso de hambruna, se evidenció que la diversidad también se asocia al hospedero de origen, lo que sugiere procesos de adaptación de la bacteria a condiciones específicas frente a la falta de nutrientes en cada uno de ellos o en el ambiente en que viven / Proyecto FONDECYT DE INICIACIÓN 11110398
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Salmonella Enteritidis: bacteriófagos en carne de salmón ahumado y fresco congelado como herramienta de biocontrol

Bravo Tordecilla, Luis Jonathan January 2013 (has links)
Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Las enfermedades transmitidas por los alimentos, son un importante problema de salud pública a nivel mundial, donde los agentes biológicos juegan un rol trascendental en su transmisión. Frente a esto, en los últimos años se han utilizado diversas tecnologías de naturaleza biológica, como los bacteriófagos, para controlar en forma efectiva Salmonella sp. en los alimentos. El objetivo de este estudio fue establecer la capacidad biocontroladora de una mezcla de fagos líticos nativos en la reducción de los recuentos de Salmonella Enteritidis (SE), en dos matrices alimentarias consideradas de riesgo como son salmón fresco congelado y salmón ahumado. Para llevar a cabo el objetivo se trabajó con dos grupos de 25 muestras cada uno: el grupo experimental se contaminó con SE y recibió la mezcla de fagos (MOI 104), mientras que el grupo control sólo se contaminó con la cepa desafío. La dosis de contaminación varió según la temperatura de incubación de las muestras. Una vez contaminado y aplicada la mezcla de fagos, las muestras se incubaron por 10 días a temperatura ambiente y a temperatura de refrigeración para luego realizarles recuento bacteriano. Al final del periodo del estudio se observó que la aplicación de la mezcla de fagos redujo (p < 0,0001), los recuentos de SE en ambas matrices alimentarias independiente de la temperatura de incubación, obteniéndose mayores reducciones en aquellas muestras mantenidas a temperatura ambiente (3,19 unidades logarítmicas de SE/g para salmón fresco congelado y 1,96 unidades logarítmicas de SE/g para salmón ahumado). Los resultados obtenidos en este estudio sugieren que la mezcla de fagos nativos es efectiva en la reducción de SE en carne de salmón ahumado y fresco congelado a temperatura ambiente y de refrigeración durante 10 días / Financiamiento: Proyecto Fondecyt 1110038
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Determinación de genes asociados a virulencia en cepas de Campylobacter jejuni y Campylobacter coli aisladas desde pollos broilers, alimentos derivados de aves y de pacientes humanos

Cáceres Refusta, Pablo Andrés January 2013 (has links)
Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Campylobacter es un patógeno entérico, Gram negativo altamente diseminada en el medio ambiente provocando en el humano la campylobacteriosis, que es una de las enfermedades gastrointestinales más frecuente a nivel mundial. Las especies involucradas son C. jejuni y C. coli. Se considera el consumo de carne de ave la principal fuente de contagio. Para determinar su prevalencia en cepas aisladas desde carne de ave (n=40), heces de ave (n=40) y deposiciones pacientes humanos infectados (n=20), se escogieron once genes que determinan mecanismos de virulencia cómo flaA, cadF, racR y dnaJ relacionados con adherencia y colonización, virB11, ciaB y pldA relacionados con la invasión celular y los genes cdtA, cdtB y cdtC relacionados con la expresión de citotóxinas y el gen wlaN relacionado con el síndrome de Guillian Barré (GBS). Tanto flaA como cadF obtuvieron la mayor prevalencia en C. jejuni con 79,7%, mientras la menor la obtuvo virb11 con 7,6%. La determinación de su distribución en distintas fuentes permitirá conocer la situación del país y contribuir a la creación de métodos de prevención de esta enfermedad / Financiamiento: Proyecto Fondecyt 11110200 y Proyecto FIV 2011
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Inoculación experimental con Salmonella enterica serotipo enteritidis en distintos tipos de cecinas

López Morales, Gabriel Roberto January 2012 (has links)
Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / En el mundo, uno de los patógenos más frecuentemente aislado desde brotes causados por Enfermedades Transmitidas por los Alimentos es Salmonella spp. En Chile, el serotipo que posee la mayor prevalencia es Salmonella Enteritidis (S.E), aislado principalmente desde productos de origen animal como la carne de ave y otros productos cárnicos como las cecinas. Considerando que las medidas para controlar S.E en alimentos son de vital importancia, en este estudio se implementaron cuatro protocolos de inoculación experimental en cecinas, con el fin de disponer previamente de una herramienta fundamental que permita a futuro analizar nuevas tecnologías tendientes a disminuir este patógeno en los alimentos. Así, en este estudio se presentan los resultados de la inoculación experimental con S.E mediante cuatro protocolos en distintos tipos de cecinas, determinando tanto la dosis mínima (102 – 106 UFC/mL) y la mejor técnica de aplicación del inóculo (con homogeneización/sin homogeneización), como la forma de presentación de las matrices (laminado/molido) para lograr porcentajes de positividad a S.E ≥ 80%, tanto a temperatura ambiente como en refrigeración. Adicionalmente se estudia la eficiencia de la adición de Piruvato de Sodio en los medios de cultivo para la recuperación de S.E en cecinas contaminadas y almacenadas a temperatura de refrigeración. En las cecinas contaminadas se obtuvieron porcentajes de positividad ≥ 80% con la mayoría de los protocolos analizados y con bajas dosis de S.E (102 – 103 UFC/mL). La adición de Piruvato de Sodio no entregó diferencias estadísticamente significativas (p > 0,05) al compararlo con medios de cultivo sin suplemento / Proyecto FONDECYT 1110038
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Eficacia del uso de una mezcla de bacteriófagos en la reducción de Salmonella Enteritidis en carne fresca de bovino

Prieto Renere, Geraldine Beatriz January 2013 (has links)
Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / La Salmonelosis es una de las enfermedades transmitidas por alimentos más importantes a nivel mundial. Ocasiona un cuadro gastroentérico y en casos extremos puede ser mortal. En Chile, el serotipo más frecuente es Salmonella Enteritidis, el cual está asociado al consumo de ovo productos, platos preparados, vegetales y carnes, entre ellas la de bovino. El biocontrol de Salmonella spp. en alimentos mediante el uso de bacteriófagos, es una medida complementaria a los métodos de prevención y control utilizados actualmente. En la presente investigación se analizó la actividad lítica de una mezcla de cinco bacteriófagos nativos sobre S. Enteritidis, en carne fresca de bovino contaminada experimentalmente, luego de diez días de almacenamiento. Se utilizaron dosis de contaminación de 103 UFC/mL y de 105 UFC/mL para temperatura ambiente (18 °C) y de refrigeración (2 a 8 °C) respectivamente, aplicando la mezcla de fagos con una MOI de 104. Se logró contaminar la totalidad de las muestras en todos los grupos experimentales. La administración de la mezcla de bacteriófagos logró reducir significativamente (p≤ 0,0001) los recuentos bacterianos promedios en 3,65 log UFC/g (5,29 log UFC/g grupo control versus 1,64 log UFC/g grupo experimental) a temperatura ambiente, y en 3,54 log UFC/g (4,42 log UFC/g grupo control versus 0,88 log UFC/g grupo experimental) a temperatura de refrigeración. Las reducciones bacterianas obtenidas demuestran el efecto lítico de la mezcla de fagos aplicada, sobre S. Enteritidis, en carne fresca de bovino contaminada / Financiamiento: Proyecto Fondecyt No. 1110038
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Biocontrol mediante la aplicación de una mezcla de bacteriófagos en carne fresca de cerdo contaminada con Salmonella enterica serotipo Enteritidis

Aguirre Padilla, María José January 2013 (has links)
Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Las Enfermedades Transmitidas por los Alimentos son consideradas como un problema importante de salud pública, donde Salmonella spp juega un rol fundamental, siendo Salmonella Enteritidis (SE) el serotipo mayormente involucrado en los brotes del país y el más aislado desde productos de origen animal, como lo es la carne. El objetivo de este estudio fue determinar la capacidad biocontroladora de una mezcla de 5 bacteriófagos líticos sobre Salmonella Enteritidis en carne fresca de cerdo contaminada experimentalmente. Para esto se trabajó con 2 grupos de 25 muestras cada uno correspondiente a carne fresca de cerdo molida. Un grupo fue contaminado con 3,9 x 103 UFC/mL de SE y se le agregó una alícuota de bacteriófagos (107 UFP/mL), manteniéndose a temperatura ambiente por 10 días. El otro grupo se contaminó con 3,9 x 104 UFC/mL de SE y se le agregó una alícuota de bacteriófagos (108 UFP/mL), manteniéndose a temperatura de refrigeración por 10 días. Cada grupo experimental contó con un grupo control de 25 muestras que solo fueron contaminadas con SE. Luego de 10 días los resultados mostraron que el 100% de las muestras fueron contaminadas, es decir, tanto los grupos experimentales como sus respectivos controles, independiente de la temperatura de almacenamiento. Sin embargo, en el grupo experimental mantenido a temperatura ambiente, se observó una reducción de 2,56 unidades logarítmicas, valor significativo (p < 0,05), al compararlo con su grupo control. Por otro lado, en el grupo mantenido a temperatura de refrigeración, los recuentos no fueron estadísticamente significativos (p > 0,05) entre el grupo experimental y su respectivo control. Estos resultados indican que el uso de esta mezcla de fagos líticos, bajo ciertas condiciones de temperatura, podría ser una alternativa para el biocontrol en alimentos logrando reducciones en la contaminación de SE que, junto a otras medidas, podrían disminuir la incidencia de brotes de ETA en el país

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