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Molecular basis for Clostridium perfringens spore resistance to heat and other environmental stress factors /

Raju, Deepa. January 1900 (has links)
Thesis (Ph. D.)--Oregon State University, 2007. / Printout. Includes bibliographical references (leaves 101-109). Also available on the World Wide Web.
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Indicadores de qualidade, pesquisa de marcadores de virulência e multirresistência aos antimicrobianos em estirpes de Staphylococcus spp. em leite de origem bovina produzido no sistema orgânico

Siqueira, Amanda Keller [UNESP] 27 May 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-05-27Bitstream added on 2014-06-13T18:46:42Z : No. of bitstreams: 1 siqueira_ak_dr_botfmvz.pdf: 2732300 bytes, checksum: ef925129d37522aac4be31a9933f5412 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O presente estudo investigou a qualidade microbiológica do leite de duas pequenas propriedades orgânicas (I e II) do estado de São Paulo, bem como a presença de marcadores de virulência de Staphylococcus spp. e isolados bacterianos multirresistentes aos antimicrobianos. Foram analisados os principais constituintes do leite, contagem bacteriana total, nível de celularidade, além da presença de resíduos de antimicrobianos, com base nas Normativas 051 e 064 do MAPA. O efeito das estações do ano sobre os parâmetros pesquisados também foi considerado. Foram realizadas 12 colheitas em cada uma das duas propriedades, das quais 12 mensais dos latões e quatro trimestrais de todos os animais. No total foram colhidas amostras de leite de 178 animais (259 tetos). Destes, 125/259 (48,27%) tetos acusaram mastite subclínica no CMT, 2/259 (0,77%) tetos mastite clínica e 132/259 (50,96%) foram negativos. A mediana da CCS das duas propriedades variou entre 311,67 x 1000 céls/mL e 447,83 x 1000 céls/mL e a CBT variou entre 25,4 x 1000 UFC/mL e 141,63 x 1000 UFC/mL, sem influência das estações do ano. Os principais constituintes do leite mantiveram-se dentro dos parâmetros estabelecidos. Das 86 amostras de leite da propriedade I, seis (6,97%) foram positivas para a presença de resíduos de antimicrobianos, enquanto das 173 amostras da propriedade II, 16 (9,24%) foram positivas. Staphylococcus spp. e Corynebacterium bovis foram os micro-organismos mais freqüentes, isolados em 58/259 (22,39%) e 50/259 (19,30%), respectivamente, de amostras de leite dos animais. Das 58 linhagens de Staphylococcus spp., 48 (82,76%) foram classificadas como coagulase positivas (ECPs) e 10 (17,24%) como coagulase negativas (ECNs). Para os ECPs, S. intermedius foi mais frequente (46,56%), seguido por S. aureus (22,42%). Dentre os ECNs, S. warneri foi caracterizado em 13,80% das linhagens. A sensibilidade das... / The present study investigated the microbiological quality of milk from two small organic properties (I and II) from São Paulo State, as well as the presence of virulence markers of Staphylococcus spp. and multidrug-resistant isolates to antimicrobials. We analyzed the major milk components, total bacterial count, level of cellularity and the presence of antimicrobial residues, based on Normative 051 and 064 MAPA, Brazil. The effect of seasons on the studied parameters was also considered. Twenty harvests were conducted in each of the two properties, including 12 monthly and four quarterly samples of all animals. In total we collected milk samples from 178 animals (259 mammary glands). Of these, 125/259 (48.27%) mammary glands showed subclinical mastitis on CMT, 2/259 (0.77%) clinical mastitis and 132/259 (50.96%) had been negative. The median of SCC of the two properties varied between 311.67 x 1000 cells/mL and 447.83 x 1000 cells/mL and TBC showed between 25.4 x 1000 CFU/mL and 141.63 x 1000 CFU/mL, without influence of the seasons. The contents of the main milk components remained with the established standards. Of the 86 samples of milk from the property I, six (6.97%) were positive for the presence of antimicrobial residues, while from 173 samples of property II, 16 (9.24%) were positive. Staphylococcus spp. and Corynebacterium bovis were the most frequent microorganisms isolated in 58/259 (22.39%) and 50/259 (19.30%), respectively, in the milk samples of animals. Of the 58 strains of Staphylococcus spp., 48 (82.76%) were classified as coagulase positive (CPS) and 10 (17.24%) as coagulase negative (CNS). For the CPS, S. intermedius was more frequent (46.56%), followed by S. aureus (22.42%). Among the CNS, S. warneri was characterized in 13.80% of the strains. The sensitivity of Staphylococcus spp. strains was > 88% for ceftiofur, oxacillin and trimethoprim/sulfamethoxazole ... (Complete abstract click electronic access below)
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Enterotoxina citotoxica termo estavel produzida por Aeromonas caviae isoladas de surto de diarreia aguda em crianças na cidade de São Bento do Una - PE / Eterotoxin cytotoxic thermo stables produced by Aeromanas caviae isolated from diarrheic stools in children on the city of São Bento do Una - PE

Lopes, Ana Carolina Amaral 06 August 2009 (has links)
Orientador: Tomomasa Yano / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias / Made available in DSpace on 2018-08-13T16:19:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lopes_AnaCarolinaAmaral_M.pdf: 3074203 bytes, checksum: 0f5613fc1b5f356261b1158697b4d8c1 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Neste estudo foram analisadas 20 amostras de Aeromonas caviae, isoladas no Estado de Pernambuco, de fezes diarréicas, quanto à produção de fatores de virulência. Os isolados bacterianos apresentaram atividade hemolítica quando crescidos em placas de ágar sangue, porém quando analisados os sobrenadantes de cultura destas bactérias, a presença de hemolisinas não foi detectada. Foram observadas entre as amostras as presenças de enterotoxinas em camundongos recém-nascidos e de citotoxinas em células Vero, HeLa e CaCo-2. Essas atividades biológicas foram mantidas após aquecimento à 100ºC por 30 minutos, mostrando ser termo-estável. Ensaios de viabilidade celular conduzidos com células Vero demonstraram, no ensaio com vermelho neutro, uma redução de 50% após 6 horas de exposição dos sobrenadantes de cultura. Nos ensaios com MTT e LDH, as reduções na viabilidade apresentaram-se após 4 e 2 horas respectivamente. O desarranjo do citoesqueleto foi verificado em ensaios onde a faloidina conjugada com fluoresceína (FITC) foi empregada, revelando que os sobrenadantes de cultura provocaram contração e desordenamento dos filamentos de actina. Através de PCR foi verificado que as amostras de A. caviae não apresentaram amplificação para o gene Aer, responsável pela codificação da aerolisina, uma toxina termo-lábil de Aeromonas, o que demonstra que a toxina termoestável e a aerolisina são fatores de virulência diferentes. / Abstract: In this study we worked with 20 Aeromonas caviae samples isolated in the state of Pernambuco and associated to diarrheic stools. The samples were analysed for the production of virulence factors, as the bacterial isolates showed haemolytic activity when grown on blood agar plates, but when analyzed the culture supernatants, the presence of haemolysin wasn't detected. The presence of enterotoxins were observed among the samples by suckling mouse test and cytotoxins on Vero cells, HeLa and CaCo-2. The biological activities were kept after the heat treatment at 100ºC for 30 minutes, showing it to be thermo stable. Cell viability tests conducted with neutral red dye on Vero cells demonstrated a 50% reduction on cell viability after 6 hours of toxin exposure, what was confirmed by the MTT and LDH assays, where the cell viability reduction was presented after 4 and 2 hours respectively. The cytoskeleton disorders provoked by the enterotoxin were observed in trials where the fluorescein conjugated phalloidine (FITC) was used, showing that the culture supernatants caused contraction and lack of actin filaments. Tests to "aerolysin" gene detection were performed with the samples, but the amplification of this gene has not been verified. According to these results and by the fact that aerolysin is a thermo labile toxin, it shows that aerolysin and the thermo stable toxin produced by A. caviae are different. / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica
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Efeito da incubação de enterotoxinas estafilococicas e do lipopolissacaride na agregação e na adesão de plaquetas humanas / Incubation effects of staphylococcal enterotoxins and lipopolysaccharide in human platelets aggregation and adhesion

Morganti, Rafael Prada 24 July 2008 (has links)
Orientador: Edson Antunes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T20:19:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Morganti_RafaelPrada_D.pdf: 740260 bytes, checksum: c6b0779cd2f8af7471aefb0da921a0a6 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A sepsis é a segunda causa de morte em pacientes internados em unidades de tratamento intensivo não coronariano. Pacientes com sepsis apresentam anormalidades plaquetárias como trombocitopenia, prolongamento do tempo de coagulação, coagulação intravascular disseminada, trombose microvascular maciça e sangramentos. Entretanto, os mecanismos envolvidos nestas alterações plaquetárias ainda são mal compreendidos. O objetivo deste trabalho foi investigar as ações do lipopolissacarídeo (LPS) de E. coli, e de enterotoxinas de Staphylococcus aureus (SEA e SEB), na adesão e na agregação de plaquetas humanas, bem como os mecanismos envolvidos nesses fenômenos. As plaquetas foram expostas ao LPS, SEA ou SEB em diferentes concentrações e tempos de incubação para avaliação in vitro da adesão ou agregação. Além disso, realizou-se experimentos para verificar o papel do óxido nítrico (NO) e de espécies reativas de oxigênio nas ações induzidas pelo LPS, SEA e SEB, assim como a sinalização intracelular (mobilização de Ca+2) e ativação do receptor do fibrinogênio glicoproteína IIb/IIIa (GPIIb/IIIa). A incubação de plaquetas com LPS, SEA e SEB por períodos 5 a 120 min inibiu a adesão espontânea das plaquetas ao fibrinogênio, sendo esta inibição dependente da concentração e do tempo de incubação. A adesão de plaquetas ativadas com trombina também foi inibida após incubação com LPS, SEA ou SEB por 5 a 120 min. Porém, a inibição em plaquetas ativadas foi menor quando comparada à inibição da adesão espontânea. Esta inibição ocorreu de forma independente de aumentos intraplaquetários de GMPc e AMPc. Com o objetivo de se entender o mecanismo de ação envolvido na inibição da adesão plaquetária pelo LPS, SEA e SEB as plaquetas foram pré-tratadas com os seguintes agentes farmacológicos: superóxido dismutase (seqüestrador de ânion superóxido), polietilino glicol superóxido dismutase (seqüestrador de ânion superóxido intracelular), polietileno glicol catalase (degrada peróxido de hidrogênio), puromicina e ciclohexamida (inibidores de síntese protéica). Em conjunto, nossos dados mostraram que o efeito inibitório do LPS não envolve aumento de anion superóxido (O2 -) e de peróxido de hidrogênio (H2O2), nem a formação de proteínas neo-sintetizadas, e alterações na ativação da GPIIb/IIIa. Por outro lado, o LPS reduziu significativamente o influxo externo de cálcio, sem afetar a mobilização intracelular deste cátion. Em relação às enterotoxinas estafilocócicas, a síntese de neo-proteínas e aumento de O2 - não tem papel direto sobre a inibição plaquetária, embora um aumento nas concentrações de H2O2 intracelulares esteja ligado a esta resposta. Em conclusão, a exposição ao LPS inibiu a adesão a agregação plaquetária, dosee tempo-dependente, inibindo a influxo de cálcio; da mesma forma, a incubação com SEA ou SEB inibiu a adesão de plaquetas ao fibrinogênio, por um mecanismo que envolveria a formação de H2O2 / Abstract: Sepsis is the second major cause of death in intensive care unit. Septic patients show abnormalities in platelet like thrombocytopenia, prolongation in coagulation time, disseminated intravascular coagulation, deep venous thrombosis and bleedings. However, the mechanisms involved in these platelet alterations are not totally clear. The objective of this work was investigate the actions of lipopolysaccharide (LPS) from E. coli and enterotoxins from Staphylococcus aureus (SEA and SEB), in human platelet adhesion and aggregation, likewise the mechanism involved in these phenomenon. The platelets were exposed to LPS, SEA or SEB in different concentrations and times of incubation in vitro evaluations of adhesion and aggregation. Moreover, experiments to elucidate the participation of nitric oxide (NO) and reactive oxygen species in the actions of LPS, SEA and SEB, likewise the intracellular sinalization (calcium mobilization) and activation of fibrinogen receptor glycoprotein IIb/IIIa (GPIIb/IIIa) were carry out. The platelets incubation with LPS, SEA and SEB for 5 to 120 min, inhibited the spontaneous adhesion to fibrinogen and this inhibition was dependent of concentration and time of incubation. The thrombin activated adhesion of platelets was concentration and time dependently also inhibited after incubation with LPS, SEA and SEB for 5 to 120 min. However, the activated platelets inhibition was lower when compared to spontaneous adhesion inhibition. This inhibition was not dependent of intracellular levels increase of cGMP and cAMP. To understand the mechanism of action involved in the platelet adhesion inhibition by LPS, SEA and SEB, the platelets were previously treated with pharmacological agents like: superoxide dismutase (superoxide anion scavenger), superoxide dismutase-polyethylene glycol (superoxide anion intracellular scavenger), catalase-polyethylene glycol (Hydrogen peroxide intracellular scavenger), puromycin and cyclohexamide (protein synthesis inhibitors). Our data suggests that the inhibitory effect of LPS neither involve superoxide anion (O2 -) and hydrogen peroxide (H2O2) increase, nor the formation of neo-proteins, and alterations on activation of glycoprotein IIb/IIIa. In contrast, LPS significantly reduce the external calcium influx, without effecting calcium internal mobilization. With regard to staphylococcal enterotoxin, the protein synthesis and rise in O2 - do not play a role in the platelet inhibition; however the increase of H2O2 intracellular concentration was involved in this response. In conclusion, platelet aggregation and adhesion was inhibited after addition of LPS, concentration and time-dependently, inhibiting calcium influx; similary, incubation with SEA or SEB inhibited platelets adhesion to fibrinogen, by a mechanism involving H2O2 formation / Doutorado / Doutor em Farmacologia
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Cholera toxin and heat-labile enterotoxin : structural studies of assembly and design of active A-subunit constructs /

Hovey, Bianca T. January 2000 (has links)
Thesis (Ph. D.)--University of Washington, 2000. / Vita. Includes bibliographical references (leaves 175-193).
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Comparison of Escherichia coli virulence factors with colony morphology on various media

Abu-Isba, Mustafa A. January 1979 (has links)
Call number: LD2668 .T4 1979 A278 / Master of Science
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Molecular typing of virulence genes in enterotoxigenic Bacillus cereus

Gracias, Kiev S. January 2007 (has links)
Bacillus cereus causes emesis and/or diarrhea following ingestion of contaminated food due to the production of emetic toxins and enterotoxins. SYBR Green I is used as an intercalating dye and its florescence increases as a result of DNA amplification during real-time PCR. A second-derivative plot is obtained at the end of the PCR run, where amplicons are differentiated based on their DNA melting temperature (Tm). DNA was extracted from Tryptic Soy Broth (TSB) and 2.5% Nonfat Dry Milk (NFDM)-grown B. cereus at cell densities of 10',106,105,104,0,102, and 101 cfu/ml. In order to detect the multiple virulence determinants in pathogenic B. cereus, specific primers were used to target three enterotoxigenic genes (hblC, nheA, and hblA), followed by melt-curve analysis to confirm identity. Conditions used for this experiment allowed for the reproducible distinction of melt curves (characteristic Tm) for each amplicon (hblC = 74.5°C in TSB and 75°C in NFDM; nheA = 78°C; and hblA = 85.5°C in TSB and 84°C in NFDM) with an assay sensitivity of 106 CFU/ml in TSB and 10' CFU/ml in NFDM. B. cereus, nheA expression was examined in cells grown in TSB using transcript-specific, real-time nucleic acid sequence-based amplification (NASBA) with SYBR Green II. NASBA was applied to ascertain relative levels of nheA expression, when cells were subjected to subinhibitory levels of chloramphenicol as a stressor. B. cereus demonstrated consistently high levels of nheA expression at 15 hours when grown in TSB containing subinhibitory concentration (SIC) chloramphenicol (15.625 mg/ml). Relative levels of nheA expression differed in stressed B. cereus cells grown during the 30 hours incubation. / Department of Biology
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Indicadores de qualidade, pesquisa de marcadores de virulência e multirresistência aos antimicrobianos em estirpes de Staphylococcus spp. em leite de origem bovina produzido no sistema orgânico /

Siqueira, Amanda Keller. January 2011 (has links)
Resumo: O presente estudo investigou a qualidade microbiológica do leite de duas pequenas propriedades orgânicas (I e II) do estado de São Paulo, bem como a presença de marcadores de virulência de Staphylococcus spp. e isolados bacterianos multirresistentes aos antimicrobianos. Foram analisados os principais constituintes do leite, contagem bacteriana total, nível de celularidade, além da presença de resíduos de antimicrobianos, com base nas Normativas 051 e 064 do MAPA. O efeito das estações do ano sobre os parâmetros pesquisados também foi considerado. Foram realizadas 12 colheitas em cada uma das duas propriedades, das quais 12 mensais dos latões e quatro trimestrais de todos os animais. No total foram colhidas amostras de leite de 178 animais (259 tetos). Destes, 125/259 (48,27%) tetos acusaram mastite subclínica no CMT, 2/259 (0,77%) tetos mastite clínica e 132/259 (50,96%) foram negativos. A mediana da CCS das duas propriedades variou entre 311,67 x 1000 céls/mL e 447,83 x 1000 céls/mL e a CBT variou entre 25,4 x 1000 UFC/mL e 141,63 x 1000 UFC/mL, sem influência das estações do ano. Os principais constituintes do leite mantiveram-se dentro dos parâmetros estabelecidos. Das 86 amostras de leite da propriedade I, seis (6,97%) foram positivas para a presença de resíduos de antimicrobianos, enquanto das 173 amostras da propriedade II, 16 (9,24%) foram positivas. Staphylococcus spp. e Corynebacterium bovis foram os micro-organismos mais freqüentes, isolados em 58/259 (22,39%) e 50/259 (19,30%), respectivamente, de amostras de leite dos animais. Das 58 linhagens de Staphylococcus spp., 48 (82,76%) foram classificadas como coagulase positivas (ECPs) e 10 (17,24%) como coagulase negativas (ECNs). Para os ECPs, S. intermedius foi mais frequente (46,56%), seguido por S. aureus (22,42%). Dentre os ECNs, S. warneri foi caracterizado em 13,80% das linhagens. A sensibilidade das ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present study investigated the microbiological quality of milk from two small organic properties (I and II) from São Paulo State, as well as the presence of virulence markers of Staphylococcus spp. and multidrug-resistant isolates to antimicrobials. We analyzed the major milk components, total bacterial count, level of cellularity and the presence of antimicrobial residues, based on Normative 051 and 064 MAPA, Brazil. The effect of seasons on the studied parameters was also considered. Twenty harvests were conducted in each of the two properties, including 12 monthly and four quarterly samples of all animals. In total we collected milk samples from 178 animals (259 mammary glands). Of these, 125/259 (48.27%) mammary glands showed subclinical mastitis on CMT, 2/259 (0.77%) clinical mastitis and 132/259 (50.96%) had been negative. The median of SCC of the two properties varied between 311.67 x 1000 cells/mL and 447.83 x 1000 cells/mL and TBC showed between 25.4 x 1000 CFU/mL and 141.63 x 1000 CFU/mL, without influence of the seasons. The contents of the main milk components remained with the established standards. Of the 86 samples of milk from the property I, six (6.97%) were positive for the presence of antimicrobial residues, while from 173 samples of property II, 16 (9.24%) were positive. Staphylococcus spp. and Corynebacterium bovis were the most frequent microorganisms isolated in 58/259 (22.39%) and 50/259 (19.30%), respectively, in the milk samples of animals. Of the 58 strains of Staphylococcus spp., 48 (82.76%) were classified as coagulase positive (CPS) and 10 (17.24%) as coagulase negative (CNS). For the CPS, S. intermedius was more frequent (46.56%), followed by S. aureus (22.42%). Among the CNS, S. warneri was characterized in 13.80% of the strains. The sensitivity of Staphylococcus spp. strains was > 88% for ceftiofur, oxacillin and trimethoprim/sulfamethoxazole ... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Márcio Garcia Ribeiro / Coorientador: Domingos da Silva Leite / Banca: José Paes de Almeida Nogueira Pinto / Banca: Maria de Lourdes Ribeiro de Souza da Cunha / Banca: Evelise Oliveira Telles / Banca: Elizabeth Oliveira da Costa Freitas Guimarães / Doutor
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Detecção molecular de Staphylococcus aureus e de suas toxinas no leite de tanque de rebanhos bovinos, em condições de refrigeração e sob temperatura ambiente /

Faccioli, Patrícia Yoshida. January 2010 (has links)
Resumo: O leite é de extrema importância na alimentação humana. A exigência quanto à sua qualidade tem aumentado, inclusive com relação à transmissão de patógenos. Staphylococcus aureus é um dos principais agentes da mastite bovina e tem grande importância em saúde pública por produzir enterotoxinas. Os objetivos do trabalho foram avaliar o perfil dos produtores da região considerando-se a atual legislação e a qualidade do leite produzido com ênfase na presença de Staphylococcus enterotoxigênicos, utilizando a PCR na detecção de S. aureus e dos genes codificadores das enterotoxinas sea, seb, sec e sed diretamente do leite de tanque em comparação ao exame microbiológico tradicional, e realizando a detecção das respectivas enterotoxinas pelo método de aglutinação passiva reversa em látex (RPLA) diretamente do leite, comparando com os resultados genotípicos. Utilizaram-se 104 amostras de leite de tanque, estudadas a fresco e após incubação por 5 horas, uma alíquota a 7°C e outra a 25°C concomitantemente. A PCR foi altamente sensível, detectando S. aureus em 99% das amostras, mas com moderada concordância com o microbiológico nas amostras positivas. As amostras de Staphylococcus enterotoxigênicos apresentaram predomínio do gene sec (58,65%), seguido pelo gene sea (43,27%), seb (23,27%) e sed (1,28). Quanto às enterotoxinas, houve a sua detecção em 9% das amostras em quantidades que variaram de 1 a 5 ng/μL. Verifica-se a importância do estudo do potencial do leite como fonte de S. aureus enterotoxigênico e de suas enterotoxinas, fornecendo risco para a saúde pública caso o leite não seja refrigerado adequadamente / Abstract: Milk has extreme importance to human feed. The demand for quality milk has increased, including pathogens transmission. Staphylococcus aureus is one of the main agents of mastitis and has importance in public health for producing enterotoxins. The study aims were to evaluate the region producer's profile, considering the present legislation and the quality of milk produced with emphasis in enterotoxigenic Staphylococcus presence, using PCR in detection of S. aureus and enterotoxins encoding genes sea, seb, sec and sed directly from bulk tank milk in comparison with traditional microbiological test, and carring out the detection of respective enterotoxins by reverse passive latex agglutination method (RPLA) directly from milk comparing with genotypic results. A total of 104 samples of bulk tank milk were used, studied fresh and after 5-hour storage, one bracket at 7°C the another at 25°C concurrently. PCR was highly sensitive, detecting S. aureus in 99% of samples, but with moderate concordance with microbiological test in positive samples. The samples of enterotoxigenic Staphylococcus presented predomination of sec (58.65%), followed by sea (43.27%), seb (23.27%) and sed (1.28%) genes. As the enterotoxins, its detection occurred in 9% of samples in quantities that ranged from 1 to 5 ng/μL. The importance of the study of milk potential as enterotoxigenic S. aureus and enterotoxins source is verified, providing risk to public health if milk is not refrigerated properly / Orientador: Hélio Langoni / Coorientador: Maria de Lourdes Ribeiro de Souza da Cunha / Banca: Márcio Garcia Ribeiro / Banca: José Paes de Almeida Nogueira Pinto / Banca: Luiz Simões do Carmo / Banca: Elizabeth Oliveira da Costa Freitas Guimarães / Doutor
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Detecção molecular de Staphylococcus aureus e de suas toxinas no leite de tanque de rebanhos bovinos, em condições de refrigeração e sob temperatura ambiente

Faccioli, Patrícia Yoshida [UNESP] 06 August 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-08-06Bitstream added on 2014-06-13T19:43:39Z : No. of bitstreams: 1 faccioli_py_dr_botfmvz.pdf: 1990690 bytes, checksum: 7e2419e37a55f0133432db74f5707b3e (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O leite é de extrema importância na alimentação humana. A exigência quanto à sua qualidade tem aumentado, inclusive com relação à transmissão de patógenos. Staphylococcus aureus é um dos principais agentes da mastite bovina e tem grande importância em saúde pública por produzir enterotoxinas. Os objetivos do trabalho foram avaliar o perfil dos produtores da região considerando-se a atual legislação e a qualidade do leite produzido com ênfase na presença de Staphylococcus enterotoxigênicos, utilizando a PCR na detecção de S. aureus e dos genes codificadores das enterotoxinas sea, seb, sec e sed diretamente do leite de tanque em comparação ao exame microbiológico tradicional, e realizando a detecção das respectivas enterotoxinas pelo método de aglutinação passiva reversa em látex (RPLA) diretamente do leite, comparando com os resultados genotípicos. Utilizaram-se 104 amostras de leite de tanque, estudadas a fresco e após incubação por 5 horas, uma alíquota a 7°C e outra a 25°C concomitantemente. A PCR foi altamente sensível, detectando S. aureus em 99% das amostras, mas com moderada concordância com o microbiológico nas amostras positivas. As amostras de Staphylococcus enterotoxigênicos apresentaram predomínio do gene sec (58,65%), seguido pelo gene sea (43,27%), seb (23,27%) e sed (1,28). Quanto às enterotoxinas, houve a sua detecção em 9% das amostras em quantidades que variaram de 1 a 5 ng/μL. Verifica-se a importância do estudo do potencial do leite como fonte de S. aureus enterotoxigênico e de suas enterotoxinas, fornecendo risco para a saúde pública caso o leite não seja refrigerado adequadamente / Milk has extreme importance to human feed. The demand for quality milk has increased, including pathogens transmission. Staphylococcus aureus is one of the main agents of mastitis and has importance in public health for producing enterotoxins. The study aims were to evaluate the region producer’s profile, considering the present legislation and the quality of milk produced with emphasis in enterotoxigenic Staphylococcus presence, using PCR in detection of S. aureus and enterotoxins encoding genes sea, seb, sec and sed directly from bulk tank milk in comparison with traditional microbiological test, and carring out the detection of respective enterotoxins by reverse passive latex agglutination method (RPLA) directly from milk comparing with genotypic results. A total of 104 samples of bulk tank milk were used, studied fresh and after 5-hour storage, one bracket at 7°C the another at 25°C concurrently. PCR was highly sensitive, detecting S. aureus in 99% of samples, but with moderate concordance with microbiological test in positive samples. The samples of enterotoxigenic Staphylococcus presented predomination of sec (58.65%), followed by sea (43.27%), seb (23.27%) and sed (1.28%) genes. As the enterotoxins, its detection occurred in 9% of samples in quantities that ranged from 1 to 5 ng/μL. The importance of the study of milk potential as enterotoxigenic S. aureus and enterotoxins source is verified, providing risk to public health if milk is not refrigerated properly

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