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Avaliação morfoquantitativa das expressões do IGF-I, Insulina e de seus receptores na polpa dentária e no epitélio juncional de ratos wistar na fase púbere, submetidos à subnutrição proteica pré e pós-natal e à renutrição pós-natal / Morfoquantitative evaluation of the expressions of IGF-I, Insulin and their receptors on dental pulp and junctional ephitelium of pubescent wistar rats subjected to protein undernutrition and postnatal refeeding

Gonçalves, Aline 10 February 2012 (has links)
Fatores nutricionais e metabólicos são capazes de comprometer o desenvolvimento pleno dos tecidos dentários, especialmente quando impingidos em períodos críticos. Estudos revelam que condições derivadas da subnutrição precoce e também tardia, interferem na atividade da insulina e do sistema IGF, demonstrando possível envolvimento com algumas patologias e apontando, em sua maioria, caráter permanente em alto grau, se não imediato, prospectivo e comprometedor da performance morfológica e funcional dos tecidos. Desta maneira, o presente estudo teve o propósito de avaliar os efeitos da subnutrição proteica pré e pós-natal e da renutrição pós-natal sobre o desenvolvimento da polpa dentária e do epitélio juncional do periodonto de ratos wistar, visando encontrar possível correspondência entre as alterações metabólicas e morfofuncionais decorrentes da subnutrição proteica, previamente relacionadas em estudos relativos à ação desses hormônios. Para tanto, formou-se grupos de animais heterogênicos (n=3) que, de acordo com a ração oferecida, normoproteica ou hipoproteica, e as respectivas idades, foram divididos nos seguintes grupos experimentais: nutridos (N) e subnutridos (S) com 60 dias de vida (fase na qual o período púbere termina) e renutridos (R), recuperados a partir de 22 até alcançarem 60 dias de vida. Após a eutanásia, os espécimes foram submetidos às técnicas de microscopia de luz (coradas com Azo-Carmim, Hematoxilina-Eosina e Picro-Sirius, esta última para a avaliação do componente colágeno) e imunohistoquímica para a identificação da expressão do IGF-I, insulina e respectivos receptores. A polpa dentária apresentou-se debilitada sob subnutrição o que foi verificado através da desorganização da camada odontoblástica e da estagnação dos componentes colágenos nos animais subnutridos. A renutrição não foi capaz de promover a recuperação de nenhum dos dois parâmetros. O estudo morfométrico permitiu verificar que a porcentagem média do número de expressões ao IGF-I foi maior nos animais do grupo N e que houve diferenças estatísticas significantes entre estes e os animais dos grupos S e R. Da mesma forma, a maior expressão de seus receptores (IGF-IR) foi encontrada nos animais do grupo N com indicação de diferença estatística apenas entre este e o grupo de animais subnutridos. A maior porcentagem média das expressões de insulina ocorreu nos animais nutridos (N), mas estatisticamente não foi detectada diferença significativa entre os grupos. Já em relação ao receptor de insulina (IR), foram constatadas diferenças estatísticas significativas entre o grupo N em relação aos grupos S e R. No epitélio juncional, a subnutrição determinou modificações no padrão das células e camadas epiteliais nos animais subnutridos, além de uma maior quantidade de colágeno do tipo III no tecido conjuntivo que o sustenta, caracterizando um atraso no desenvolvimento desses tecidos. A renutrição não foi capaz de recuperar satisfatoriamente os seus componentes estruturais. Sobre as expressões imunohistoquímicas a todos os anticorpos utilizados (para IGF-I, IGF-IR, I e IR), a análise estatística demonstrou não haver diferenças significativas entre os valores encontrados nos diferentes grupos N, S e R no epitélio juncional. / Nutritional and metabolic factors can cause serious injury of the development of dental tissue, especially when occurred in critical periods. Several studies reveal that conditions derived from early and later under nutrition interfere in insulin and IGF system activities; in these studies has been demonstrated the possible involvement of some pathologies most of them pointing to permanent in high degree (if not immediate) prospective and \"possible dangerous\" morphological and functional performance of tissues. Thus, the present study aimed to evaluate the effects of the pre and post-natal protein under nutrition, and, post-natal refeeding on the development of the dental pulp and periodontal junctional ephitelium of wistar rats, in order to find possible correlation between the metabolic and morph-functional changes arising from protein under nutrition, previously associated with studies related to the effects of these hormones. For this purpose, heterogenic animal groups were formed (n=3) divided in accordance of their diets (protein or hypo protein) and their ages into the following experimental groups: nourished (N) under nourished (S) aged 60 days (final of pubescent l periods) and renourish (R), recovered from the 22nd to 60th day old. After euthanasia, the specimens were analyzed by light microscopy (stained with Azo-carmine, Hematoxylin-Eosin and Picro Sirius, the later for collagen component analysis) and immunohistochemistry examination for identification of IGF-I expression, Insulin and respective receptors. The dental pulp turned out to be impaired in the context of undernutrition. This phenomenom was seen through disorganization of the odontoblastic layer and the stagnation of collagen components in undernourished animals. The refeeding procedure was unable to promote the recovery from any of the two parameters. With the immunohistochemistry on the dental pulp, it was found that the number of IGF-I expression was higher in group N and that there were significant differences involving these animals and those from groups S and R. Similarly, the highest expression of their receptors (IGF-IR) was found in group N, demonstrating statistical difference between this one and the group of undernourished animals. The highest average percentage of the expressions of insulin occurred in nourished animals (N), but no statistically significant difference was detected among the groups. In regard to the insulin receptor (IR), statistically significant differences were found when the group N was compared to groups S and R. In the junctional ephitelium, the undernutrition determined changes in the pattern of epithelial cells in undernourished animals and the prevalence of type III collagen fibers in the connective tissue that supports it, featuring a delay in the development of these tissues. The refeeding was not able to satisfactorily recover their structural components. About immunohistochemical expressions of all antibodies used for IGF-I, IGF-IR, I e IR in the junctional ephitelium, the statistical analysis showed no significant differences among the values found in the groups N, S and R.
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Avaliação morfoquantitativa das expressões do IGF-I, Insulina e de seus receptores na polpa dentária e no epitélio juncional de ratos wistar na fase púbere, submetidos à subnutrição proteica pré e pós-natal e à renutrição pós-natal / Morfoquantitative evaluation of the expressions of IGF-I, Insulin and their receptors on dental pulp and junctional ephitelium of pubescent wistar rats subjected to protein undernutrition and postnatal refeeding

Aline Gonçalves 10 February 2012 (has links)
Fatores nutricionais e metabólicos são capazes de comprometer o desenvolvimento pleno dos tecidos dentários, especialmente quando impingidos em períodos críticos. Estudos revelam que condições derivadas da subnutrição precoce e também tardia, interferem na atividade da insulina e do sistema IGF, demonstrando possível envolvimento com algumas patologias e apontando, em sua maioria, caráter permanente em alto grau, se não imediato, prospectivo e comprometedor da performance morfológica e funcional dos tecidos. Desta maneira, o presente estudo teve o propósito de avaliar os efeitos da subnutrição proteica pré e pós-natal e da renutrição pós-natal sobre o desenvolvimento da polpa dentária e do epitélio juncional do periodonto de ratos wistar, visando encontrar possível correspondência entre as alterações metabólicas e morfofuncionais decorrentes da subnutrição proteica, previamente relacionadas em estudos relativos à ação desses hormônios. Para tanto, formou-se grupos de animais heterogênicos (n=3) que, de acordo com a ração oferecida, normoproteica ou hipoproteica, e as respectivas idades, foram divididos nos seguintes grupos experimentais: nutridos (N) e subnutridos (S) com 60 dias de vida (fase na qual o período púbere termina) e renutridos (R), recuperados a partir de 22 até alcançarem 60 dias de vida. Após a eutanásia, os espécimes foram submetidos às técnicas de microscopia de luz (coradas com Azo-Carmim, Hematoxilina-Eosina e Picro-Sirius, esta última para a avaliação do componente colágeno) e imunohistoquímica para a identificação da expressão do IGF-I, insulina e respectivos receptores. A polpa dentária apresentou-se debilitada sob subnutrição o que foi verificado através da desorganização da camada odontoblástica e da estagnação dos componentes colágenos nos animais subnutridos. A renutrição não foi capaz de promover a recuperação de nenhum dos dois parâmetros. O estudo morfométrico permitiu verificar que a porcentagem média do número de expressões ao IGF-I foi maior nos animais do grupo N e que houve diferenças estatísticas significantes entre estes e os animais dos grupos S e R. Da mesma forma, a maior expressão de seus receptores (IGF-IR) foi encontrada nos animais do grupo N com indicação de diferença estatística apenas entre este e o grupo de animais subnutridos. A maior porcentagem média das expressões de insulina ocorreu nos animais nutridos (N), mas estatisticamente não foi detectada diferença significativa entre os grupos. Já em relação ao receptor de insulina (IR), foram constatadas diferenças estatísticas significativas entre o grupo N em relação aos grupos S e R. No epitélio juncional, a subnutrição determinou modificações no padrão das células e camadas epiteliais nos animais subnutridos, além de uma maior quantidade de colágeno do tipo III no tecido conjuntivo que o sustenta, caracterizando um atraso no desenvolvimento desses tecidos. A renutrição não foi capaz de recuperar satisfatoriamente os seus componentes estruturais. Sobre as expressões imunohistoquímicas a todos os anticorpos utilizados (para IGF-I, IGF-IR, I e IR), a análise estatística demonstrou não haver diferenças significativas entre os valores encontrados nos diferentes grupos N, S e R no epitélio juncional. / Nutritional and metabolic factors can cause serious injury of the development of dental tissue, especially when occurred in critical periods. Several studies reveal that conditions derived from early and later under nutrition interfere in insulin and IGF system activities; in these studies has been demonstrated the possible involvement of some pathologies most of them pointing to permanent in high degree (if not immediate) prospective and \"possible dangerous\" morphological and functional performance of tissues. Thus, the present study aimed to evaluate the effects of the pre and post-natal protein under nutrition, and, post-natal refeeding on the development of the dental pulp and periodontal junctional ephitelium of wistar rats, in order to find possible correlation between the metabolic and morph-functional changes arising from protein under nutrition, previously associated with studies related to the effects of these hormones. For this purpose, heterogenic animal groups were formed (n=3) divided in accordance of their diets (protein or hypo protein) and their ages into the following experimental groups: nourished (N) under nourished (S) aged 60 days (final of pubescent l periods) and renourish (R), recovered from the 22nd to 60th day old. After euthanasia, the specimens were analyzed by light microscopy (stained with Azo-carmine, Hematoxylin-Eosin and Picro Sirius, the later for collagen component analysis) and immunohistochemistry examination for identification of IGF-I expression, Insulin and respective receptors. The dental pulp turned out to be impaired in the context of undernutrition. This phenomenom was seen through disorganization of the odontoblastic layer and the stagnation of collagen components in undernourished animals. The refeeding procedure was unable to promote the recovery from any of the two parameters. With the immunohistochemistry on the dental pulp, it was found that the number of IGF-I expression was higher in group N and that there were significant differences involving these animals and those from groups S and R. Similarly, the highest expression of their receptors (IGF-IR) was found in group N, demonstrating statistical difference between this one and the group of undernourished animals. The highest average percentage of the expressions of insulin occurred in nourished animals (N), but no statistically significant difference was detected among the groups. In regard to the insulin receptor (IR), statistically significant differences were found when the group N was compared to groups S and R. In the junctional ephitelium, the undernutrition determined changes in the pattern of epithelial cells in undernourished animals and the prevalence of type III collagen fibers in the connective tissue that supports it, featuring a delay in the development of these tissues. The refeeding was not able to satisfactorily recover their structural components. About immunohistochemical expressions of all antibodies used for IGF-I, IGF-IR, I e IR in the junctional ephitelium, the statistical analysis showed no significant differences among the values found in the groups N, S and R.
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Alterações no periodonto de proteção e ligamento periodontal em molares de ratos ubmetidos ao etanol durante a lactação: estudo Histopatológico e Histométrico

Curi, Viviane 29 November 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2016-01-26T12:51:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 vivianecuri_tese.pdf: 3356542 bytes, checksum: 3e315d421d5b2c78bdb72380eb601099 (MD5) Previous issue date: 2010-11-29 / Alcoholism is a public health problem worldwide, involving thousands of men and women, bringing serious consequences as a disease in all organs of the human body, especially the stomach, liver, heart and brain. The consumption of alcoholic beverages for infants and mothers have attracted the attention of researchers in recent decades, with significant. Objective: This study aimed to evaluate the effects of ethanol in the junctional epithelium, adamantine epithelium, epithelium of attached gingiva and periodontal ligament of the upper first molar of the rat, during lactation. Materials and Methods: To this end, we used mice with a day of postnatal life, whose mothers received 20% ethanol in drinking water and rats whose mothers do not received ethanol during the entire lactation. After 21 days, the chicks were sacrificed with anesthetic overdose (Hypnol 3%). The heads were separated and fixed in a solution of "alfac" (alcohol 80% -85 ml, 10 ml of formalin and acetic acid 5-ml), embedded in paraffin and frontal serial sections were stained with hematoxylin and eosin. The cuts were focused light microscope (100x) fitted with a camera lucida. The nuclei of cells from tissue fragments were designed on paper with increased end of 1000x. and 50 nuclei of each structure were outlined with black pencil for later measurement of larger (D) and smaller (d)diameters. Once determined the diameters were estimated karyometric following parameters: geometric mean diameter ratio D / d, perimeter, area, volume, relationship between volume and area, eccentricity, shape coefficient and contour índex. This work also was done using a grid printed on paper. The images were drawn on the grid. In order to assess the volumes and cell cytoplasm, the nucleus / xxiv cytoplasm ratio, the numerical cell density, relation to the external surface / basal layer, the thickness of epithelial layers and the density of the surface was sometimes used the count of the points and sometimes the number of intersections and applied to stereological equations appropriate for each of these variables. All data collected were submitted to non-parametric statistics (Wilcoxon-Mann-Whitney). Results: Histologically, the superior maxillar molar tooth of the rat treated with ethanol was not erupted or partially eruído; the junctional epithelium was reduced and the adamant epithelium was in full function and consists of high palisade cells. The epithelium of attached gingiva was more slender and composed of smaller cells. In the Periodontal ligament was possible to observe bigger and disorganizedfibers. The nuclei of the epithelia studies have shown decreased values after Karyometry, for larger and smaller medium diameters, volume, area, perimeter, and the relation V / A. Stereologically could be observed in the junctional epithelium, adamantine and the attached gingiva, less voluminous cell with scarce cytoplasm leading to a greater number of cells per mm3 of tissue. The disorganized periodontal ligament showed larger fibers with smaller number per mm3. Conclusion: In this study, ethanol resulted in a framework of epithelial hypotrophy, indicating a direct action on the junctional and adamantineepithelium, epithelium of attached gingiva and periodontal ligament. / O alcoolismo é um problema de saúde pública mundial, envolvendo milhares de homens e mulheres, trazendo conseqüências graves como doença em todos os órgãos do corpo do humano, em especial o estômago, o fígado, o coração e o cérebro. O consumo de bebidas alcoólicas por lactantes e lactentes vem despertando a atenção dos pesquisadores, nas últimas décadas, com achados significantes. Objetivo: Este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos do etanol no epitélio juncional, epitélio adamantino, epitélio da gengiva inserida e ligamento periodontal do primeiro molar superior do rato, durante a lactação. Materiais e Métodos: Para tal, foram utilizados ratos com um dia de vida pós-natal, cujas mães receberam etanol a 20% na água do bebedouro e ratos cujas mães não receberam o etanol, durante toda a lactação. Ao final de 21 dias, os filhotes foram sacrificados com sobredosagem anestésica (Hypnol a 3%). As cabeças foram separadas e fixadas em solução de alfac (álcool 80%-85 ml, formalina-10 ml e ácido acético-5 ml), incluídas em parafina e os cortes frontais seriados foram corados com hematoxilina e eosina. Os cortes foram focalizados ao microscópio de luz (100x) munido de uma câmara clara. Os núcleos das células dos tecidos estudados foram projetados sobre papel com aumento final de 1000x. e 50 núcleos de cada estrutura foram contornados com lápis preto para posterior medição dos diâmetros maior (D) e menor (d). Uma vez determinados os diâmetros, foram estimados os seguintes parâmetros cariométricos: diâmetro geométrico médio, relação entre D/d, perímetro, área, volume, relação entre volume e área, xxi excentricidade, coeficiente de forma e índice de contorno. Neste trabalho também, foi utilizada uma grade impressa sobre papel. As imagens obtidas foram desenhadas sobre a grade. Com a finalidade de se avaliar os volumes citoplasmáticos e celular, a relação núcleo/citoplasma, a densidade numérica celular, a relação superfície externa/ camada basal, a espessura das camadas epiteliais e a densidade da superfície, foi utilizada ora a contagem de pontos ora o número de intersecções e aplicadas às equações estereológicas apropriadas para cada uma dessas variáveis. Todos os dados colhidos foram submetidos à estatística não-paramétrica (teste de Wilcoxon-Mann-Whitney). Resultados: Histologicamente, o dente molar do maxilar superior do rato tratado com etanol não estava erupcionado ou então, parcialmente erupcionado; o epitélio juncional estava reduzido e o epitélio adamantino presente estava em plena função e constituído de células altas em paliçada. O epitélio da gengiva inserida era mais delgado e constituído de células menores. No ligamento periodontal foi possível observar fibras desorganizadas e maiores. Os núcleos dos epitélios estudados mostraram valores diminuídos, após cariometria, para os diâmetros maior, menor e médio; volume, área, perímetro e relação V/A. Estereologicamente foi possível observar, nos epitélios juncional, adamantino e da gengiva inserida, células menos volumosas com citoplasma mais escasso levando a um maior número de células por mm3 de tecido. O ligamento periodontal desorganizado mostrou fibras mais volumosas e com menor número por mm3. Conclusões: Neste estudo, o etanol ocasionou um quadro de hipotrofia epitelial, indicando uma xxii ação direta nos epitélios juncional e adamantino, epitélio de gengiva inserida bem como no ligamento periodontal.

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