Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-06-06Bitstream added on 2014-06-13T19:50:38Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_pgg_me_botfmvz.pdf: 5765072 bytes, checksum: aceb85a2bc65f9e47b05b3aeb424eb32 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A lesão do tendão do músculo flexor digital superficial é uma importante afecção que leva à claudicação em eqüinos atletas, com prevalência de 13 a 30% de acordo com a atividade eqüestre. Sua instalação pode comprometer a carreira do potro por serem lesões debilitantes, podendo inclusive haver recidivas. Os tratamentos propostos são diversos, mas efeitos como melhora da qualidade da matriz tendínea não foram confirmados por estudos controlados. Recentemente, os avanços médicos demonstram crescente interesse na utilização das célulastronco em terapia de doenças degenerativas, em cicatrizações lentas ou ineficazes. O objetivo deste estudo foi avaliar a qualidade da cicatrização tendínea de animais tratados com o implante autólogo de células da fração mononuclear proveniente de medula óssea, tendo como foco a caracterização das fibras colágenas tipo I e tipo III, via imunoistoquímica, presentes no tecido cicatricial tendíneo. Foi induzida lesão do tendão flexor digital superficial (TFDS) de ambos os membros anteriores de 6 eqüinos, seguida de implante autólogo em apenas um membro de cada animal. Os animais foram avaliados por parâmetros clínicos e ultra-sonográficos e após biópsia, realizada no 120o dia do experimento, sendo verificadas características histológicas e imunoistoquímicas. A terapia com implante autólogo das células da fração mononuclear acelerou o processo de cicatrização tendínea, melhorando a organização tecidual e com expressão significativa para colágeno tipo I. O procedimento foi seguro e não apresentou risco aos animais. / The superficial digital flexor tendonitis (SDFT) is an important cause of lameness in athletic horses, with incidence from 13 to 30 %, depending of the exercise modality. Its ocurrence can compromise yearlings animals carrers being debilitant, inclusive the possibility of reinjury. Many treatments have been proposed, but effects as a higher quality of the tendineous matrix haven´t been confirmed by controlled studies. Recently, medical interest has been directed to the stem cells therapy of degenerative diseases and cases of deficient and slow healing process. This study aims to evaluate the influence of autologous implant of the mononuclear cells from the bone marrow, focusing on the collagen fibers type I and type III characteristics, evaluated by immunohistochemic, present on the healing tendon. Induced collagen lesions were in both forelimbs SDFT from six horses, followed by autologous implant in one forelimb from each animal. The horses were evaluated by clinical and ultrasonographic exams during the hole period, and by histopathologic and immunohistochemistry patterns after biopsy on the 120th day. The therapy with autologous implant of the mononuclear fraction has accelerated healing process, improving the tissue organization, having a higher expression of collagen type with. The procedure was safe, not presenting any risk for the animals.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-16Bitstream added on 2014-06-13T19:50:42Z : No. of bitstreams: 1 rafael_la_me_botfmvz.pdf: 598677 bytes, checksum: 9244a6bf719ef84e48cb12aef3188a32 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os processos sépticos são complicações frequentes nas estruturas sinoviais e demais tecidos da porção distal dos membros de equinos. A perfusão regional intravenosa é uma opção terapêutica, que objetiva aumentar significativamente a concentração de antimicrobiano na porção distal ao posicionamento do torniquete. No entanto, alguns pontos ainda não estão totalmente esclarecidos e algumas complicações, como trombose venosa, podem ocorrer. Objetivou-se com este estudo avaliar o potencial trombogênico da perfusão regional de gentamicina, na dose de 2,2 mg/kg na veia cefálica de equinos. Utilizou-se 15 equinos hígidos, divididos em três grupos de cinco animais. Grupo 1, somente torniquete (GT), grupo 2, torniquete e 40 ml de solução fisiológica (GSF), grupo 3, torniquete e gentamicina na dose de 2,2 mg/kg e solução fisiológica até completar um volume de 40 ml (GSG). Um membro torácico de cada animal foi escolhido aleatoriamente para o tratamento e torniquete aplicado no terço médio proximal do rádio. Ultrassonografia Doppler foi realizada no membro testado imediatamente antes, 30 minutos, 2, 3, 4, 6, 12, 24, 48, 72 e 96 horas após o tratamento na veia cefálica e artéria mediana. A artéria mediana também foi avaliada aproximadamente 15 minutos após posicionamento do torniquete. A termografia foi realizada em ambos os membros em todos os momentos. Os dados foram avaliados por análise de variância com medidas repetidas, teste de Tukey de comparações múltiplas de médias para comparar os grupos e ajustado para Dunnett para comparar os momentos em relação ao momento M0. Significância foi aceito p <0,05. Todos os grupos apresentaram escore trombótico zero, não houve diferença significativa entre os grupos quanto à temperatura do membro e diâmetro médio da veia. A perfusão regional intravenosa com... / Septic processes are common in synovial structures and tissues of the distal limbs in horses. Regional intravenous perfusion is a therapeutic option that aims to significantly increase the antibiotic concentration in the limb, distal to the tourniquet. Nevertheless, some critical points remains unclear, and complication such as thrombosis may occur along this procedure. The purpose of this work was to assess the thrombogenic potential of regional intravenous perfusion after administration of gentamicin in the cephalic vein. Fifteen healthy horses were assigned to three groups of 5 animals. Group 1, tourniquet group (TG), group 2, tourniquet and 40 mL of physiologic saline solution (SPG) and group 3, tourniquet and 2.2 mg/kg gentamicin completed to 40 mL by addition of physiologic saline solution (ASG). One forelimb of each animal was randomly chosen for treatment and tourniquet applied at the proximal end of the radius. Doppler ultrasonography was performed in the treated limb immediately before and 30 minutes, 2, 3, 4, 6, 12, 24, 48, 72 and 96 hours after treatment in the cephalic vein and artery median. The median artery was also evaluated approximately 15 minutes after placement of the tourniquet. Thermography was performed in both limbs at all the moments. Data were assessed by analysis of variance with repeated measures, Tukey's multiple mean comparison test to compare the groups and Dunnett's multiple mean comparison test to compare the moments regarding M0. Significance was accepted at p <0.05. Thrombotic score was zero for the three groups; no difference was found between groups regarding temperature and mean vein diameter of the treated limb. Regional intravenous perfusion using a single dose... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003Bitstream added on 2014-06-13T18:19:53Z : No. of bitstreams: 1 pyles_md_me_botfmvz.pdf: 868563 bytes, checksum: 6173de1d0ac27b19d79195ae7f0c95da (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Neste estudo foi avaliada a eficácia dos implantes bioabsorvíveis de ácido lático na fixação interna de fraturas induzidas no osso sesamóide proximal lateral esquerdo de eqüinos. Foram realizadas cirurgias de osteossíntese do sesamóide proximal lateral de quatro animais do grupo GI, os quais receberam implantes bioabsorvíveis e de quatro animais do grupo GII, os quais receberam implantes metálicos. Os animais selecionados foram submetidos a exames clínicos e radiográficos, antes de serem anestesiados e submetidos à cirurgia. Durante o ato cirúrgico dos animais de ambos os grupos foi realizada a osteotomia do sesamóide proximal lateral do membro anterior esquerdo, exame radiográfico, fixação dos fragmentos com parafuso bioabsorvível (animais do grupo GI) ou metálico (animais do grupo GII), e após a cirurgia, novo exame radiográfico, ferrageamento e imobilização com gesso sintético (D0). Após a recuperação anestésica, cada animal foi deslocado para uma baia individual, na qual permaneceu confinado até o D30, quando foi realizada a remoção do gesso, novo ferrageamento e novo exame radiográfico. Os quatro animais de cada grupo foram submetidos à acompanhamento radiográfico, realizado nos dias D30, D60, D90 e D120. No exame radiográfico no D30 de todos os animais do grupo GII observou-se preenchimento do foco de fratura de aspecto radiopaco, porém com densidade reduzida. Nos animais do grupo GI, tal preenchimento a análise clínica e radiográfica apresentou qualidade superior quando comparado com o grupo GII. Após a remoção do gesso, cada animal permaneceu confinado em baia por mais trinta dias (até o D60), com uso de bandagem no local e então foram soltos em piquetes, onde permaneceram até o final do experimento. No D120, os animais do grupo GII apresentaram ao exame radiográfico, a reparação do foco... . / This study evaluated the efficacy of bioabsorbable lactic acid screw in internal fixation of induced fractures in the left lateral proximal sesamoid bone. Lateral proximal sesamoid bone osteossintesis was performed in four animals from group GI, wich received bioabsorbable screws; and in four animals from group GII, wich received metallic screws. Clinical and radiographic examination had been accomplished in each horse before they were anesthetized and underwent to surgery. In both groups, osteotomy was made in the lateral proximal sesamoid bone of the left forelimb, it was radiographed, fragments were fixed with bioabsorbable (animals from GI) or metallic screws (animals from GII); and after surgery, radiography was repeated, continued by shoeing and synthetic cast immobilization (D0). Following recovery from anesthesia, the animals were placed in individual stalls and remained confined until D30, moment in wich cast was removed and new radiographies and shoeing were performed. All four horses from each group were submitted to radiographic follow-up on days D30, D60, D90 and D120. On D30-radiographic examination of all the animals from GII there was a radiopacity at the fracture site, but showing reduced density. In the animals from group I, clinical and radiographic examination of such radiopacity appeared to be of better quality when compared to group GII. After cast removal, each animal remained stall confined for another 30 days (until D60), using bandages over the surgery site, and then they were set free in paddocks until the end of the study. On D120, radiographic examination of the animals from GII revealed almost complete fracture healing, and clinical examination showed reduction of metacarpophalangeal joint flexion and a grade I lameness. Radiographic examination of all four animals from group GI revealed almost complete fracture healing, sclerosis... (Complete abstract, click electronic address below). / FAPESP: 00/12544-5

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T19:07:17Z : No. of bitstreams: 1 watanabe_mj_me_botfmvz.pdf: 2661495 bytes, checksum: 7b0e5c91647eadaf5d5f0723b30a86c7 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Por meio do presente estudo objetivou-se avaliar as respostas metabólicas de eqüinos durante o exercício de várias intensidades em esteira de alta velocidade. Onze eqüinos adultos da raça Árabe foram submetidos a um período de condicionamento, seguindo o teste de exercício progressivo com a esteira com inclinação de +6%, o qual consistiu da velocidade inicial de 1,8 m/s por 5 minutos, a 4,0 m/s por 3 minutos, a 6,0 m/s por 2 minutos e fases a 8,0 m/s, 9,0 m/s, 10,0 m/s e 11,0 m/s por 1 minuto cada, de modo que a manta da esteira foi parada quando os cavalos não conseguiram acompanhar a velocidade da mesma. No intervalo dos 15 segundos finais de cada mudança de velocidade e aos 1, 3 e 5 minutos após o término do exercício, definidos como os momentos do experimento, foram colhidas amostras de sangue arterial para exames hemogasométricos e, venoso para hematimétricos e bioquímicos. Durante o teste de exercício progressivo, foram observados diminuição do pH, da pressão parcial de O2 e da pressão parcial de CO2, acentuada elevação da freqüência cardíaca para os momentos iniciais do teste com tendência a manutenção dos valores para altas velocidades, aumento exponencial das concentrações de lactato sanguíneo à partir da velocidade de exercício de 8,0m/s e aumento do volume globular de comportamento semelhante ao da freqüência cardíaca com relação ao aumento da carga de trabalho. O teste padrão de exercício progressivo mostrou-se eficaz na indução de respostas metabólicas e fisiológicas para várias intensidades de exercício de cavalos da raça Árabe durante o trabalho físico em esteira de alta velocidade. / This current study evaluated the equine metabolic response during different levels of exercise on a high-speed treadmill. Eleven Arabian horses underwent a conditioning period, followed by a standard incremental exercise test performed on a high-speed treadmill with a slope of 6%, and initial speed of 1,8 m/s during 5 minutes, then 4,0 m/s during 3 minutes, 6,0 m/s during 2 minutes and 8,0 m/s, 9,0 m/s, 10,0 m/s and 11,0 m/s during one minute for each of these velocities. The end of the exercise test was defined as the point at which the horse was no longer able to keep pace with treadmill. Arterial blood samples were obtained to evaluate the acid-base and gases values, and venous blood samples for haematology and serum biochemistry, at the time of 15 last seconds at the end of every speed change and at 1, 3 and 5 minutes after the end on the exercise, defined as experiment moments. The incremental exercise test was efficient to induce physiological and metabolic changes, during different levels of exercise in Arabian horses performing a physical exercise on a high-speed treadmill. During this exercise test it was noticed a decrease in pH, partial pressure of oxygen (PaO2), and partial pressure of carbon dioxide (PaCO2). It was also noticed a marked increase in heart rate during the first moments of the test, and a tendency on keeping theses high values for the high speeds. An exponential increase in blood lactate was noticed after the speed of 8,0 m/s was reached, and also an increase in the packed cell volume, which followed the heart rate increase pattern, when the degree of exercise was increased.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003Bitstream added on 2014-06-13T20:30:41Z : No. of bitstreams: 1 lettry_v_me_botfmvz.pdf: 899832 bytes, checksum: f6c7900ba412d1d6ef74ce07e70b52d4 (MD5) / As afecções articulares são de grande importância e de relevante incidência para o eqüino atleta, sendo a osteoartrite a causa mais comum de afastamento deste de sua atividade esportiva. Após a degeneração da cartilagem ocorre o reparo com formação de fibrocartilagem, tecido de qualidade inferior a cartilagem original. Dessa forma, a promoção do reparo articular mediante implante de condrócitos promoveria potencialmente uma reparação benéfica e adequada. Os benefícios do implante de condrócitos isolados (isentos da matriz cartilagínea adjacente) incluem a transferência de células metabolicamente ativas que preencherão lacunas existentes na superfície articular através de mitose e produção de adequada matriz extracelular. O implante de condrócitos previamente sedimentados em matriz tridimensional possibilita que tais células mantenham suas características diferenciadas e de síntese. O objetivo do presente trabalho foi padronizar o cultivo e multiplicação de condrócitos em laboratório, avaliando seu potencial condrogênico, bem como o comportamento destas células quando sedimentadas em hidrogel, utilizado como substrato para sua dediferenciação e viabilizar o futuro implante em lesões de cartilagem articular eqüina. O experimento apresentou as seguintes etapas: colheita de cartilagem da articulação femoropatelar eqüina (pós mortem), processamento laboratorial (isolamento dos condrócitos, cultivo das células obtidas em estufa e sedimentação dos condrócitos finais em hidrogel), implante subcutâneo em camundongos e avaliação do tecido neoformado. Foram utilizados 40 camundongos atímicos divididos em 2 grupos: 20 animais implantados com condrócitos isoladamente (grupo A) e 20 animais com estas células sedimentadas em hidrogel (grupo B). A avaliação histológica foi realizada aos 45 e 60 dias após o implante. Nos animais do grupo A não... . / Joint injury and joint disease are the most important and common causes of wastage in horses that perform athletic events. Articular cartilage shows a limited intrisic repair capacity and once it was lesioned the resultant tissue becomes fibrocartilaginous that differs from native hialine cartilage in composition, structural organization and is unable to withstand the demands of the mechanical environment. The transplantation of chondrocytes directly to a cartilage defect is one strategy that would promise for stimulating the functional repair of articular cartilage defects. Cell transplatation can be used alone or in conjuntion with scaffolds. The potential benefits of isolated chondrocytes transplantation include transference of metabolically active cells capable of resurfacing by mitoses process and extracelular matrix local production. Cells transplanted within a carrier, surrounding system (three-dimensional) conserve their differentiation and syntesis features. This study objective was to standardize chondrocytes in vitro culture and expantion, evaluate their chondrogenic capacity and interaction with the three-dimensional carrier system (hydrogel) with the future purpose of performing implants in equine articular cartilage lesions in order to create a favorable environment for resurfacing. Equine articular cartilage was harvested at necropsy from femoral condyles and patela of different donors within 24 h post mortem. Chondrocytes were isolated by matrix digestion, cultured and seeded in hidrogel scaffolds. Chondrocytes were injected subcutaneously in 20 athimic mice (group A) and hidrogel seeded chondrocytes were implanted in other 20 (group B) to evaluate in vivo chondrogenesis. Mice were euthanized after 40 and 60 days and the implantation site was excised and fixed for histologic examination. The specimens from group A did not show cartilage formation. Some specimens from... (Complete abstract, click electronic address below).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005Bitstream added on 2014-06-13T18:48:27Z : No. of bitstreams: 1 silva_cfgkt_me_botfmvz.pdf: 393270 bytes, checksum: ad1edf8ad22007509a4b44b36c50f172 (MD5) / Fundação para o Desenvolvimento da UNESP (FUNDUNESP) / A cólica, também denominada desconforto abdominal agudo, consiste em uma síndrome que acomete o trato gastrintestinal de eqüinos, provocando a diminuição do trânsito intestinal e aumento da produção de endotoxinas com o conseqüente aumento da permeabilidade do epitélio intestinal. Se esse processo não for controlado pode levar a lesões vasculares generalizadas, gerando a sintomatologia observada na cólica podendo evoluir para a morte por choque endotoxêmico. Com o objetivo de avaliar as possíveis alterações fisiopatológicas em eqüinos acometidos de cólica, utilizando os exames hematológicos, bioquímicos e do líquido peritoneal, foram colhidas amostras de sangue, soro e liquido peritoneal de nove eqüinos que apresentavam sintomas de abdômen agudo, como depressão, dor, alterações de comportamento (rolar no chão e olhar para o flanco) aumento do tempo de perfusão capilar e diminuição da motilidade intestinal, devido a distúrbios gastrintestinais (cólica), e de nove eqüinos saudáveis (grupo controle) comprovado por exames clínicos e confirmado pelos exames laboratoriais. Os valores médios observados nos eqüinos com cólica foram maiores que nos eqüinos do grupo controle no eritrograma, leucometria, uréia e creatinina (no soro e no líquido peritoneal). O exame do líquido peritoneal demonstrou aspecto turvo e cor avermelhada. Conclui-se que eqüinos acometidos com cólica apresentaram hemoconcentração, reação inflamatória e azotemia. O líquido peritoneal de eqüinos com desconforto abdominal agudo apresenta características de transudato modificado. E a elevação da concentração das enzimas séricas ALT, AST, CK, no sangue e no líquido peritoneal pode ser utilizada na abordagem clínica dos eqüinos com cólica. / Colic also known as acute abdominal pain, is a syndrome that affect the gastrointestinal tract of equines, leading to a decrease in the intestinal flow and increase in the productions of endotoxins with consequent increase in the intestinal epithelium permeability. If not controlled, this process could lead to generalized vascular lesions, and generating the colic symptoms, leading to death by endotoxemic chock. The goal of this work was to evaluate the possible alterations in equine colic, using the hematological, biochemistry and peritoneal fluid exams, were collect samples from nine horses that present symptoms of acute abdomen such as depression, pain, behavioral abnormalities (rolling and look to the side), increased capillary perfusion time and decreasing in the intestinal movements, due to gastrointestinal disturbances (colic), and nine healthy equines (control group), demonstrated by clinical and laboratory exams. The average values observed in the horses with colic were bigger than the equines from the control group in the eritrogram, leucogram, urea and creatinin (in the serum and plasma). The peritoneal fluid was turbid and reddish. In conclusion the equines with colic presented hemoconcentration, inflammatory reaction and azotemia. The peritoneal fluid of equines with acute abdominal presented the typical characteristics of modified transudate. And the elevation of serum and peritoneal fluid enzyme concentrations, such as ALT, AST and CK could be used in the clinical approach to equine colic.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-03Bitstream added on 2014-06-13T20:38:40Z : No. of bitstreams: 1 dores_cb_me_botfmvz.pdf: 3161670 bytes, checksum: a11ca3c4c2058df1d9e382287df9e6b5 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A característica inerente às células-tronco embrionárias de se manterem estáveis durante longos períodos de cultivo possibilita que um grande número de células indiferenciadas sejam utilizadas em procedimentos terapêuticos ou realização de pesquisas. Aproximadamente 97 doenças genéticas equinas têm alta homologia com defeitos genéticos de humanos. O estudo de CTE de animais ungulados é útil no estudo de biofarmacos, engenharia genética e elucidação da embriogênese. Trabalhos sobre o isolamento, cultivo e caracterização do perfil genético de CTE equinas são escassos na literatura. No presente estudo, três diferentes métodos do isolamento da MCI foram testados em blastocistos equinos, avaliando o potencial de derivação de linhagens e a expressão do gene Oct-4: 1) separação mecânica (n=26), 2) imunocirurgia (n=6), 3) aspiração por micromanipulação (n=4). Todas as MCI foram cultivadas nas mesmas condições: monocamada de fibroblastos inativadas, meio DMEM/F12 suplementado com LIF, soro fetal bovino, aminoácidos não essenciais, sódio piruvato, l-glutamina e 2-mercaptoetanol. A eficácia do isolamento da MCI e o estabelecimento de linhagens foram avaliados quanto à adesão, aspectos morfológicos dos agregados celulares e velocidade de crescimento. As linhagens estabelecidas foram caracterizadas pela expressão do gene Oct-4 e Nanog. Nenhuma das MCI isoladas do grupo 3 aderiram à placa, e todas morreram entre 48 e 72 horas de cultivo. No grupo 1, uma MCI apresentou crescimento satisfatório apenas durante o cultivo primário. Colônias foram estabelecidas no grupo 2 e, após a segunda passagem, as células foram avaliadas e congeladas. Utilizou-se a RT-PCR para a detecção da expressão dos genes Oct-4 e Nanog em amostras de CTE, anel coriônico e fibroblastos fetais equinos. Todas as amostras expressaram o gene Oct-4, mostrando que o gene é expresso... / The ability of Embryonic Stem cells to be maintained during extended culture periods would support the existence of large pools of undifferentiated stem cells for therapeutic and research applications. Approximately 97 equine genetic diseases have high homology to human genetic defects. ES cell lines from domestic ungulates would also be useful for disease resistance, for biopharming, and in genetic engineering. Studies of the isolation of equine embryonic stem cells and their genetic expression are quite limited. In the present study three different experimental approaches were used for ICM isolation from day 8 blastocysts and further ES cell line derivation and OCT-4 and Nanog expression: 1. Mechanical Process (26), 2. Immunosurgery (6) and 3. Aspiration of the ICM (4). All the ICM were maintained at the same conditions: under inactivated murine fibroblast feeder support in medium supplemented with Leukemia Inhibitor Factor, Fetal Calf Serum, Non essential amino acids, Sodium Pyruvate, L-Glutamine and 2-Mercaptoethanol changed every 24 hours. The colonies were evaluated by attachment, size and shape, type of cells and rate of growth. In addition, established ES cell colonies were characterized by OCT-4 expression. Only ICM outgrowths and colonies containing circular, small, and high ratio nucleo:cytoplasm cells were considered and passaged. None ICM from group 3 attached and all died after 48 to 72 hours after isolation. In group 1, one ICM had successful development but died after the first passage. Colonies were established from group 2. And after proliferation for 2 passages the cells were analyzed and frozen. RT-PCR was performed to evaluate the OCT-4 expression from ES cells, fetal fibroblast and day 32-34 chorionic girdle samples. All samples were positive for OCT-4 expression, showing that the OCT-4 is expressed in both ICM cells and the trophectoderm derived cells... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-01-04Bitstream added on 2014-06-13T20:59:35Z : No. of bitstreams: 1 blanco_idp_me_botfmvz.pdf: 957805 bytes, checksum: d8fe74b65ba19ca53f1ec69c651d4a0a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Em éguas, o aprimoramento e a aplicação de técnicas como a ICSI, TO e transferência nuclear é restrita devido à dificuldade de obtenção de oócitos in vivo, atribuída a particularidades dos folículos ovarianos da espécie. Em folículos pré-ovulatórios, a expansão do cumulus que ocorre com a progressão da maturação folicular e deposição de ácido hialurônico aumenta os índices de recuperação de oócitos por folículo, enquanto o tratamento superovulatório, embora não seja eficiente em aumentar os índices de recuperação por folículo, melhora os índices de recuperação por égua. Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da administração de hCG na expansão das células da granulosa e do cumulus e no índice de recuperação de oócitos a partir de folículos imaturos de éguas superovuladas. Para isso 10 éguas foram submetidas à OPU após três diferentes tratamentos hormonais (G1: EPE, G2: EPE/hCG e G3:controle). Cada égua foi submetida aos três tratamentos, tendo sido alternados um ciclo onde era permitido que houvesse ovulação, sem interferência, e um ciclo com OPU. No ciclo onde devia ocorrer aspiração, as éguas recebiam aplicações de prostaglandina no sétimo e oitavo dia após a ovulação. Para os grupos 1 e 2, iniciava-se o tratamento com EPE no D7. Quando a maioria dos folículos atingia entre 22 e 27 mm, somente o grupo 1 recebia hCG, a EPE era suspensa e efetuava-se OPU 24 horas depois para ambos os grupos. Para o grupo controle, após a aplicação de prostaglandina a OPU era efetuada 24 horas após o folículo dominante atingir 27-30 mm. Em todos os grupos foram aspirados folículos entre 10 e 35 mm. Não houve diferença entre os 3 grupos quanto aos índices de recuperação de oócitos por folículo, com médias de 15% a 16,7%. Entretanto, a hCG foi capaz de induzir uma expansão e luteinização precoce das células foliculares. / In mares, the use of artificial reproductive techniques (ART) such as intracitoplasmatic sperm injection (ICSI), oocyte transfer (OT), and cloning is limited by the low availability of oocytes obtained either in vitro or in vivo. The low recovery rate of oocytes from immature follicles seems to be linked with anatomical particularities of the follicular wall. In pre-ovulatory follicles (>35mm in diameter), final oocyte maturation is accompanied by the expansion of the cumulus, which releases the oocyte from the follicular wall resulting in increased recovery rates after follicular aspiration. The number of oocytes recovered in each OPU (Ovum Pick Up) section should be higher with superovulation. However, although the total number of oocytes recovered by each individual mare is increased, the recovery rate per follicle is still low. Treatment with hCG modifies the intra-follicular environment by inducing precocious expansion of the granulosa cells, leading to a higher recovery rate during OPU of pre-ovulatory follicles. Therefore, this study aimed to evaluate the effect of hCG treatment on the recovery rate of oocytes obtained from immature follicles in mares superovulated with Equine Pituitary Extract (EPE). Ten mares were rotated in three different treatments: G1 – superovulated with EPE; G2 – Superovulated with EPE and treated with hCG, and G3 – Control. For all treatments, when the biggest follicle reached 27 – 30 mm, all follicles bigger than 10 mm were aspirated. Each OPU cycle was alternated with a rest cycle when a spontaneous ovulation occurred. Although treatment with hCG increased the number of follicles presenting expanded granulosa and high intra-follicular progesterone concentration, no statistically significant differences were observed between groups regarding oocyte recovery.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005Bitstream added on 2014-06-13T18:58:56Z : No. of bitstreams: 1 rochafilho_an_me_botfmvz.pdf: 542814 bytes, checksum: 0888c83f7ead4d23bbd7aefbda870dd1 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente trabalho objetivou avaliar os efeitos de doses baixas de extrato de pituitária (EPE) ou FSH purificado eqüino (eFSH) no crescimento folicular, taxa de ovulação e de recuperação embrionária em éguas. O experimento foi conduzido de outubro a dezembro de 2004 com a utilização de 27 éguas doadoras e 28 receptoras de embriões da raça Mangalarga Marchador. Após uma colheita de embrião no dia 8 pós-ovulação, as éguas receberam uma injeção de luteolítico e foram alocadas em um de dois grupos experimentais: EPE (n=13) ou eFSH (n=14). Para todas as éguas estudaram-se dois intervalos entre uma colheita de embrião e a ovulação subseqüente, sendo o primeiro o ciclo controle (sem tratamento) e o segundo o ciclo tratado. Em ambos os ciclos ultra-sonografia transretal do útero e dos ovários foi realizada diariamente para acompanhar o desenvolvimento dos dois maiores folículos. Durante o estro as éguas foram inseminadas a cada 48 h com sêmen a fresco do mesmo garanhão e receberam hCG (2.500 UI/IV) mediante a detecção de pelo menos um folículo com 35 a 40 mm de diâmetro. Os tratamentos consistiram em administração de EPE (4 mg/IM/s.i.d.; Grupo EPE) ou eFSH (5 mg/IM/s.i.d.; Grupo eFSH) do dia 8 (dia 0 = ovulação) até o dia anterior à indução das ovulações com hCG. As colheitas de embrião foram realizadas no oitavo dia pós-ovulação e sempre seguidas da administração de luteolítico. O percentual de éguas com mais de uma ovulação foi comparado pelo teste de Fischer e o número médio de ovulações e embriões, bem como os diâmetros foliculares, pelo teste t pareado entre ciclos dentro do mesmo grupo ou pelo teste t não pareado entre grupos diferentes. Uma probabilidade de P<0,05 indica que a diferença foi significativa e uma probabilidade de P=0,05 a P<0,1 indica que a diferença se aproximou da significância estatística... / The present study aimed to evaluate the effects of low doses of equine pituitary extract (EPE) or purified equine FSH (eFSH) on follicular growth, ovulation rate and embryo recovery rate in mares. The experiment was conducted from October to December 2004 using 27 donors and 28 recipient mares belonging to the Mangalarga Marchador breed. After an embryo collection attempt on day 8 postovulation, all mares received an injection of luteolytic and were assigned to one of two experimental groups: EPE (n=13) or eFSH (n=14). For all mares two intervals between an embryo collection attempt and the subsequent ovulation were studied. The first served as a control cycle and the second as the treated cycle. In both cycles transrectal ultrasonography of the uterus and ovaries was performed daily to keep track of the two largest follicles. During estrus mares were inseminated every 48 h with fresh semen from a single stallion and received an injection of hCG (2,500 IU/IV) upon detection of at least one follicle of 35 to 40 mm in diameter. The treatments consisted of administration of EPE (4 mg/IM/s.i.d.; Group EPE) or eFSH (5 mg/IM/s.i.d.; Group eFSH) from day 8 (day 0 = ovulation) until the day before the induction of ovulation with hCG. The embryo collections were performed on day 8 post-ovulation and were always followed by administration of luteolytic. The percentage of mares with more than one ovulation was compared by means of Fischer's test and the mean number of ovulations and embryos, as well as follicular diameters, by paired Student's t test between cycles within the same group and by unpaired Student's t test between different groups. A probability of P<0.05 indicates that the difference was significant and a probability...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-06-25Bitstream added on 2014-06-13T19:59:08Z : No. of bitstreams: 1 ferreira_hn_me_botfmvz.pdf: 1011320 bytes, checksum: 580bc2d954eb7255f8443446beff03ee (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O processo de congelação e descongelação de sêmen induz a diversos efeitos deletérios na célula espermática. Crioprotetores são adicionados aos meios de congelação para minimizar esses danos, entretanto altas concentrações dessas substâncias aumentam sua toxicidade e, conseqüentemente, diminui a fertilidade. É importante o equilíbrio entre habilidade crioprotetora e toxicidade desses componentes. As amidas têm se mostrado um crioprotetor de baixa toxicidade, especialmente para garanhões de má congelabilidade e para outras espécies de animais. O presente estudo objetivou determinar a viabilidade e o efeito contraceptivo dos crioprotetores glicerol (GL) e metilformamida (MF) para congelação de sêmen de garanhões. EXPERIMENTO I: Foi colhido o sêmen de 10 garanhões com uma vagina artificial, diluído (1:1) em meio à base de leite (Botu-sêmen®) e centrifugado (600xg/10min). Foram ressuspendidos os pellets com meio de congelação (INRA82) contendo três concentrações diferentes de GL (2, 3 e 4,5%) e MF (2, 3 e 4,5%) e um grupo controle (Contr.) sem adição de crioprotetor, na concentração de 100x106 espermatozóides/mL. O sêmen foi envasado em palhetas de 0,5mL, resfriado a 5°C/1hora e mantido em vapor de nitrogênio durante 15 minutos e daí imerso em nitrogênio líquido. As amostras foram avaliadas após o período de estabilização (5°C/1hora) bem como após a descongelação (46°C/20seg) pelo sistema computadorizado (HTMA-IVOS-10). Foram avaliados parâmetros de motilidade, e através de Microscopia de Fluorescência, foi avaliada a integridade de membranas (plasmática e acrossomal) e potencial da membrana mitocondrial. A análise estatística foi realizada por ANOVA e teste de Tukey com significância de 5%. No período pós-estabilização a única diferença observada foi no parâmetro de motilidade progressiva, onde o grupo MF2% (25,7%) foi superior... / The frozen thawing semen process induce several damages on sperm cells. The use of cryoprotectors is fundamental to protect the spermatozoa from frozen-thawing damage, however high concentrations of these compounds can decrease the fertility. It is very important to balance the ability to cryoprotect with cryoprotector toxicity. Amidas has been shown to have a low toxicity specially for bad freezer stallions and some other species. The present experiment aimed to determine the effect of exposition on glycerol (GLY) and methylformamida (MF) over viability and fertility of stallion semen. On experiment I one ejaculated from 10 stallions was collected and diluted (1:1) in skim milk extender (Botu-sêmen®) and centrifuged (600g/10min). The sperm pellets were resuspended with a frozen extender (INRA82) containing 3 different concentrations of GLY (2, 3 or 4,5%) and MF (2, 3 or 4,5%) and a control group. (Contr.) using a concentration of de 100x106 esperm/mL. Semen was packaged in 0,5mL straws, cooled at a 5°C/1hour, maintained over nitrogen and finally frozen. The motility parameters were evaluated after stabilization (5°C/1hour) and again after frozen thawing (46°C/20seg) by CASA (HTMA-IVOS-10). Membrane integrity (Plasmatic and Acrossomal) and mitochondrial potential of membrane were also evaluated using fluorescent probes. ANOVA and Tukey test were used for statistical evaluation. After the stabilization time the only parameter that was different was the progressive motility (PM) that was higher on MF2% group (25,7%) when compared with Control Group (13,5%). No differences (p>0.05) were observed on Total Motility (TM) when concentrations of the same cryoprotector were compared, however differences favorable to MF were detected when comparisons were...(Complete abstract, click electronic access below)