Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-12-15Bitstream added on 2014-06-13T19:30:12Z : No. of bitstreams: 1 alvarez_lec_me_botfmvz.pdf: 249428 bytes, checksum: f35a467064df28dab9bd15b0a59c7dc4 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Foi realizado estudo ultra-sonográfico de setenta e quatro articulações do joelho de eqüinos da raça Quarto de Milha, com o objetivo de avaliar e mensurar ligamentos, tendões e meniscos. O exame foi feito mediante abordagem sistemática, na qual foram obtidas as medidas de largura, espessura, perímetro e área dos ligamentos colaterais, patelares, meniscos e tendão de origem dos músculos extensor digital longo e fibular terceiro, bem como do recesso medial. Todos os ligamentos apresentaram ecogenicidade uniforme de grau 0. O padrão das fibras foi regular e homogêneo e as margens foram bem definidas. O menisco medial foi observado triangular, com leve concavidade da margem proximal e reto na margem distal. O menisco lateral apresentou-se triangular ou trapezóide e ambas as superfícies (proximal e distal) foram retas. A analise de variância mostrou diferenças significativas entre os valores das medias dos machos e fêmeas na origem dos ligamentos patelares medial e lateral, e tendão dos músculos extensor digital longo e fibular terceiro. Estas estruturas foram maiores em fêmeas que em machos. Na comparação entre membros esquerdos e direitos, foram achadas diferenças significativas na inserção do ligamento patelar intermédio, tendão dos músculos extensor digital longo e fibular terceiro e recesso medial. Os resultados do teste de Pearson mostraram correlação media e alta entre as variáveis de largura, espessura, perímetro e área dos ligamentos, meniscos, e tendão. Porém, não foi observada correlação entre peso com o resto das variáveis. A abordagem ultra-sonográfica sistemática permitiu visualização e mensuração dos tecidos moles do joelho avaliados neste estudo. / Seventy four stifle joints of American Quarter Horses were ultrasonographically imaged in order to evaluate and measure ligaments, tendons and menisci. Ultrasonographic examination was achieved using a systematic approach. Measures of width, thickness, perimeter and area of the femorotibial collateral and patellar ligaments, menisci, tendon of origin of the long digital extensor and peroneus tertius muscles, and medial recess were obtained. The ligaments and tendon had uniform grade-0 echogenicity. Fiber pattern was regular and homogeneous, and margins were well defined. Medial meniscus was triangular shaped, slightly concave at the proximal surface and flat at the distal surface. Lateral meniscus was triangular to trapezoidal and the proximal and distal surfaces were flat. Analysis of variance showed significant differences between mean values of males and females for the origin of the medial and lateral patellar ligaments, as well as tendon of origin of the long digital extensor and peroneus tertius muscles. These structures tended to be larger in females than in males. When comparison was made between left and right hindlimb, significant differences were found for the insertion of the intermediate patellar ligament, tendon of origin of the long digital extensor and peroneus tertius muscles and medial recess. Pearson’s correlation coefficients regarding width, thickness, perimeter and area of the ligaments, menisci, and tendon showed moderate to high correlation between variables. However, correlation between weight and other variables was not observed. Ultrasonography through systematic approach allowed imaging and measurement of the soft tissues of the stifle evaluated herein.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-28Bitstream added on 2014-06-13T19:09:57Z : No. of bitstreams: 1 canello_va_me_jabo.pdf: 467302 bytes, checksum: dd80810c8be22a5e0ad8934c12d77552 (MD5) / Diferentes estudos foram realizados buscando relacionar a ocorrência de distúrbios gastrointestinais e a manifestação da laminite. Neste contexto, destacou-se a participação de processos inflamatórios e sua relação com a expressão de metaloproteinases (MMP), que sabidamente promovem a degradação da membrana basal no tecido laminar do casco. O presente estudo objetivou avaliar a expressão das MMP-2 e MMP-9 no tecido laminar, bem como sua integridade celular por avaliação histológica, em equinos submetidos à obstrução intraluminal do cólon menor. Oito equinos adultos hígidos foram avaliados. Realizou-se laparotomia e obteve-se obstrução do cólon menor utilizando-se balão de vinil inserido no lúmem intestinal. O balão foi inflado à pressão de 80 mmHg e a obstrução foi mantida por 4 horas, simulando a presença de um enterólito. Foram realizadas biópsias pelo acesso transmural-dorsal para obtenção de tecido laminar podal em três momentos (T): antes da obstrução (T0), imediatamente após desobstrução (T4) e após 72 horas da desobstrução (T72). As amostras foram submetidas à análise zimográfica e histológica. Segundo a zimografia, não observou-se alterações nos valores de MMP-2 e MMP-9 em T4 e T72. Entretanto, observou-se o surgimento de lesões no tecido laminar analisado microscopicamente (T4 e T72). Concluiu-se que as alterações inflamatórias decorrentes da obstrução do cólon menor levaram ao surgimento de lesões no tecido laminar podal. Porém, a inflamação promovida não foi suficiente para ocasionar alteração na expressão das MMP-2 e MMP-9 no tecido avaliado / A number of studies have been conducted in order to relate gastrointestinal disorders and laminitis occurrence in horses. In this issue, special attention has been given to the role of inflammatory process and its relation with metalloproteinase (MMP) expression, which may lead to basement membrane degradation in the hoof laminar tissue. The purpose of the present study was to investigate MMP-2 and MMP-9 expression in the laminar tissue, as well as its cellular integrity assessed histologically, in horses subjected to intraluminal obstruction of the small colon. Eight healthy horses were evaluated. A laparotomy was performed and the small colon obstruction was achieved by the use of a vinyl ball inserted into the intestinal lumen. The ball was insufflated at 80 mmHg and the obstruction was sustained for 4 hours, mimicking an enterolithiasis. Through a dorsal-transmural access, podal laminar tissue samples were biopsied at three time-points: before obstruction (T0), immediately after desobstruction (T4) and after 72 hours from desobstruction. Samples were subjected to zymographic and histological analysis. The zymography did not reveal changes in MMP-2 and MMP-9 values at T4 and T72. However, microscopic evaluation showed laminar tissue lesions (T4 and T72). In conclusion, the inflammatory changes followed by the small colon obstruction led to podal laminar tissue damage. However, the inflammation was not sufficient to induce changes in MMP-2 and MMP-9 expression in the evaluated tissue

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-08-09Bitstream added on 2014-06-13T18:20:00Z : No. of bitstreams: 1 freitas_npp_me_botfmvz.pdf: 787656 bytes, checksum: 5f94a47897a0f664877ab4d198e94813 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A utilização de células-tronco adultas autólogas surgiu como uma alternativa terapêutica no tratamento de equinos, com resultados bastante promissores. Adicionalmente, a terapia com células alogênicas viabiliza a manutenção de um banco de células, proporcionando assim seu uso imediato. O objetivo deste trabalho foi avaliar, morfologicamente, a resposta inflamatória e detectar as células-tronco mesenquimais (CTMs) marcadas, autólogas e alogênicas, após a inoculação no músculo gluteus medius de equinos. Para tal, foram utilizados 15 equinos, divididos igualmente em três grupos de cinco animais, sendo o grupo 1 (controle), grupo 2 (células autólogas), grupo 3 (células alogênicas). Os animais foram submetidos à punção de medula óssea e após o cultivo, essas células foram caracterizadas fenotipicamente por citometria de fluxo e submetidas à diferenciação osteogênica, adipogênica e condrogênica, para caracterização da linhagem mesenquimal. Em seguida, as células autólogas e alogênicas foram marcadas com o nanocristal Qtracker 655® e inoculadas no músculo gluteus medius dos grupos 2 e 3, respectivamente. No grupo 1 foi inoculado PBS (solução salina tamponada com fosfato). Em cada grupo foi realizada uma biópsia 30 dias antes e outra 24h após o transplante das células e à inoculação do PBS. A análise dos resultados das biópsias demonstrou, por meio de colorações como Hematoxilina-Eosina, Gomori Modificado e NADH-tr, que a morfologia e o metabolismo das fibras foram mantidos tanto no grupo controle como nos grupos tratados. Além disso, foi possível detectar as CTMs marcadas no tecido muscular por meio de imunofluorescência. Portanto, concluiu-se que as CTMs autólogas e alogênicas transplantadas foram detectadas no tecido muscular de equinos e morfologicamente, não provocaram reação inflamatória 24h após o transplante / The use of autologous adult stem cells appeared as therapeutic alternative in treatment of horses with promising results. Allogeneic cell therapy enables maintenance a bank of cells, thereby providing immediate use. The aim of this study was to evaluate the inflammatory response and tracker autologous and allogeneic, mesenchymal stem cell (MSCs) after gluteus medius muscle horse injection. In this research, we used fifteen horses that were divided equally into three groups of five animals each, with Group 1 (control), Group 2 (autologous cells) and Group 3 (allogeneic cells). The animals undergo bone marrow aspiration for culture and isolation of mesenchymal cells. These cells, after culture were phenotypically characterized by flow cytometry and differentiation for characterization of the mesenchymal lineage. Upon such identification, autologous and allogeneic cells were marked with Qtracker 655® and inoculated in the gluteus medius muscle of groups 2 and 3, respectively. In group 1 was inoculated an equal volume of PBS (phosphate buffered saline). In each group a biopsy was done thirty days before and 24h after inoculation of the cells and PBS. Biopsies results showed through stains such as hematoxylin-eosin, modified Gomori and NADH-tr, that the tissue integrity and fiber metabolism was maintained in both, control and treated groups. Additionally, was possible to detect MSCs tracked in muscle tissue through immunofluorescence. Therefore, we conclude that autologous and allogeneic BM-MSCs could be detected in muscle tissue and through morphology analysis, caused no inflammatory reaction, 24 hours after transplantation

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-10Bitstream added on 2014-06-13T18:51:22Z : No. of bitstreams: 1 masseno_apb_me_botfmvz.pdf: 725155 bytes, checksum: 45ef73d33fd9fcb5fbee140412fde1ad (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A biópsia uterina é uma ferramenta valiosa utilizada na avaliação da fertilidade da égua. 0 objetivo deste trabalho foi estudar a relação entre a presença de miofibroblastos, a expressão da MMP-2 e a intensidade do processo fibrótico nas endometrites crônicas das éguas. Foram utilizadas 60 biópsias uterinas de éguas provenientes da rotina do Hospital Veterinário da FMVZ - UNESP, Campus de Botucatu. Biópsias endometriais classificadas histologicamente de acordo com Kenney e Doig (1986) e segundo as definições de Ricketts e Alonso (1991) para endometrite cronica infiltrativa e endometrose. A avaliação dos graus de fibrose endometrial foi feita par meio dos métodos histoquímicos Tricrômico de Masson e Picrosirius Red. A expressão da MMP-2 assim como a expressão de actina de músculo liso α dos miofibroblastos foi avaliada utilizando-se tecnica imunoistoquímica. A quantidade de colágeno na fibrose endometrial foi maior nas regiões periglandulares, perivasculares e no estrato esponjoso, predominando o colágeno do tipo I. Tanto no endométrio hígido como nas endometrites crônicas foi observada imuno-reatividade para as enzimas estudadas. A α-SMA e a MMP-2 estão envolvidas nos processos fibróticos endometriais das éguas uma vez que estas enzimas aumentam em expressão e intensidade de reação conforme o grau de endometrite. / Uterine biopsy is a valuable tool for evaluation of mare's fertility. The aim of this work was to study the relation between the presence of myofibroblasts, the expression of MMP-2 and the intensity of fibrotic process in chronic endometritis in mares. Sixty mare's uterine biopsies from the Veterinary Hospital routine of FMVZ-UNESP, Campus of Botucatu, were used. Biopsies of chronic endometrites were classified according to Kenney and Doig (1986) and definitions Ricketts & Alonso (1991) for chronic infiltrative endometrites and endometrosis. Evaluations of endometrial fibrotic levels were done by histochemical methods. Masson and Picrosirius Red Tricromio. The expression of MMP-2 as the expression of myofibroblasts straight α- smooth muscle actin was evaluated using immunohistochemical techniques. The collagen concentration in fibrotic endometrium was higher at periglandular, perivascular and stratum spongiosum regions with collagen type I predominance. Imnunoreactivity of α-SMA and MMP-2 was detected in healthy endometrium as in severe chronic endometritis. The a- SMA and MMP-2 showed variation in expression and reaction was more intense in the normal and chronic affected endometrium and may plays a hole in the endometrial fibrotic process.

Orientador: Marco Antonio Alvarenga / Coorientador: João Pessoa Araújo Junior / Banca: Frederico Ozanam Papa / Banca: Fabiana Ferreira de Souza / Banca: Rubens Paes de Arruda / Banca: Eduardo Malschitzky / Resumo: A expressão das interleucinas no útero e das catelicidinas no plasma seminal podem ser responsáveis pela magnitude e persistência da resposta inflamatória uterina. Os objetivos desse estudo foram verificar a presença das catelicidinas no plasma seminal e caracterizar a resposta imune uterina pela expressão de interleucinas inflamatórias. O plasma seminal foi obtido por coleta de sêmen de 15 garanhões e submetido ao SDSPAGE e DOT-blotting. As éguas foram submetidas a um ciclo estral sem desafio uterino (T1), com infusão de plasma seminal (T2) e inseminação artificial (T3). Exame ultrassonográfico, citologia exfoliativa uterina e colheita de células para a expressão do RNAm das interleucinas por qPCR foram realizados durante 3 ciclos consecutivos aleatoriamente, 24 (M1), 48 (M2) e 72 horas (M3) após a indução da ovulação. A expressão do RNAm no endométrio das éguas resistentes e susceptíveis foi verificada para as interleucinas IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10 e TNF-α. A concentração total de proteínas no plasma seminal dos garanhões variou de 6,3 a 25,6 mg/mL. O SDS-PAGE revelou a existência de 3 bandas protéicas dentro do intervalo de peso molecular previamente citado na literatura para as catelicidinas equinas. Os garanhões avaliados mostraram quantidades de eCATH1 < 339,6ng, eCATH2 < 141,3ng e eCATH3 < 283,4ng. No momento M2 não foi possível diferenciar as éguas resistentes das susceptíveis pela citologia ou ultrassonografia independente da infusão com plasma seminal, inseminação artificial ou da ovulação, mas quando há presença de espermatozoides no útero a resposta inflamatória é mais intensa. Durante o momento M3, as éguas susceptíveis apresentaram maior volume de fluido uterino acumulado em todos os tratamentos com menor capacidade de limpeza uterina. Foi verificada maior expressão do RNAm das interleucinas pró-inflamatórias nas éguas susceptíveis e a expressão do RNAm da interleucina-10 é... / Abstract: In the equine species, uterine interleukin expression and seminal plasma cathelicidins can modulate the magnitude and persistence of the post-breeding inflammatory reaction. The objectives were to verify the presence of cathelicidins in the stallion seminal plasma and characterize the uterine immune response by pro and anti-inflammatory interleukins. Seminal plasma was obtained by semen collection of 15 stallions and submitted to SDS-PAGE and DOT-blotting tests. Three experiments were designed to study interleukin expression during baseline (T1), after seminal plasma infusion (T2) and artificial insemination (T3). Endometrial cytology and cell collection as well as ultrassonographic evaluations were performed to access interleukin mRNA through qPCR during three randomly assigned consecutive estrous cycles, 24 (M1), 48 (M2) and 72 hours (M3) after an ovulation was induced. Endometrial mRNA expression in mares resistant and susceptible to persistent post-breeding endometritis was identified for the following pro-inflammatory cytokines: IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10 e TNF-α. Total seminal plasma protein concentrations ranged from 6.3 to 25.6 mg/mL. SDS-PAGE analysis identified the existence of three proteic bands with molecular weight similar to what was previously reported for equine cathelicidins. Evaluated stallions showed values < 339.6 ng for eCATH1, < 141.3 ng for eCATH2 and < 283.4 for eCATH3. At M2, resistant and susceptible mares could not be separated through cytology or ultrassonography, even though the presence of sperm strongly stimulates uterine inflammatory reaction. At M3, susceptible mares showed higher uterine fluid accumulation and lower uterine clearance. Pró-inflammatory mRNA expression was higher in susceptible mares and interleukin-10 mRNA expression was similar between resistant and susceptible mares / Doutor

Orientador: Ana Liz Garcia Alves / Banca: Anna Paula Balesdent Barreira / Banca: Elenice Deffune / Resumo: A lesão do tendão do músculo flexor digital superficial é uma importante causa de claudicação em eqüinos atletas. Embora existam diversos tratamentos descritos, poucos são eficazes na melhora significativa da qualidade da matriz extracelular. Com isso, há um grande potencial de desenvolvimento de recidivas, e em alguns casos até causar o término precoce da carreira atlética do animal. Recentemente, diversos experimentos vêm focando no potencial terapêutico das células-tronco mesenquimais em casos de lesões de difícil cicatrização. O objetivo deste estudo foi avaliar a qualidade da cicatrização tendínea de animais tratados com o implante autólogo das células-tronco mesenquimais cultivadas derivadas do tecido adiposo, tendo como foco a caracterização das fibras colágenas tipo I e tipo III, via imunoistoquímica, presentes no tecido cicatricial tendíneo. Foi induzida lesão do tendão flexor digital superficial (TFDS) de ambos os membros anteriores de 8 eqüinos, seguida de implante autólogo em apenas um membro de cada animal. Os animais foram avaliados por parâmetros clínicos e ultrassonográficos e após biópsia, realizada em dois diferentes momentos 60º dia e no 150o dia do experimento, sendo verificadas características histológicas e imunoistoquímicas. A terapia com implante autólogo das células-tronco mesenquimais acelerou o processo de cicatrização tendínea, melhorou a organização cicatricial, e fazendo uma comparação entre o grupo tratado e o grupo controle houve maior expressão do colágeno tipo I. O procedimento demonstrou ser seguro e viável / Abstract: The injury of the tendon of superficial digital flexor muscle is a major cause of lameness in equine athletes. Although there are various treatments described, few are effective in significant improvement of the quality of the extracellular matrix. Therefore, there is great potential for development of reincidence, and in some cases even cause the early termination of the athletic career of the animal. Recently, several experiments are focusing on therapeutic potential of mesenchymal stem cells in cases of difficult healing. The aim of this study was to evaluate the quality of tendon healing from animals treated with the implantation of autologous mesenchymal stem cells derived from adipose tissue cultured, focusing the characterization of collagen fibers type I and type III, by immunohistochemistry, in the tendinous scar tissue. There was induced injury of the superficial digital flexor tendon (TFDS) in both previous members, 8 horses, followed by autologous implantation in only one member from each animal. The animals were evaluated by clinical parameters and ultrasound and after biopsy, performed at two different times in 60 days and the 150th day of the experiment. Histological and immunohistochemical analyzes were done. The therapy with implantation of autologous mesenchymal stem cells accelerate the process of tendon healing, improved matrix organization with higher expression of collagen type I in the treated group compared with the control group. The procedure has proved safe and feasible / Mestre

Orientador: Luiz Carlos Marques / Banca: Janio Morais Santurio / Banca: Thais Helena Constantino Patelli / Banca: Sandra de Moraes Gimenes Bosco / Banca: Fabianao Antonio Cadioli / Resumo: Pythium insidiosum causa doença de pele e ocasionalmente de outros tecidos de mamíferos e aves que vivem em estreito contato com águas contaminadas. Pelas características bioclimáticas e ambientais da região do Pantanal, estima-se que seja uma das áreas com maior prevalência do mundo. Não obstante, certifica-se na literatura compilada poucos estudo enfatizando aspectos epidemiológicos nessa região, sendo esse o principal objetivo dessa pesquisa. As normais climatológicas foram obtidas de duas estações metereológicas de Instituição pública, que abrange a sub-região do estudo, complementados por dados dispostos em outras fontes. Obteve-se validação de 76 casos em equideos e sete bovinos, através do ELISA-teste, PCR, histopatologia e isolamento do agente. A doença apresentou dinâmica sazonal, com picos de incidência emergindo após os maiores índices pluviométricos. Evidenciaram-se também, um número expressivo de enfermidades confundíveis, coinfecções e reinfecções, demonstrando frágil imunidade do hospedeiro equino ao patógeno. Cabe ressaltar ainda, que ferramentas de diagnóstico são pouco utilizadas a campo. Resposta significativa relativa à imunoterapia (Pitium Vac®) no grupo de equideos tratados e aumento do intervalo de reinfecções, indica que o fármaco poderá ser aperfeiçoado, de modo a agregar características profiláticas, além das terapêuticas / Abstract: The disease caused by Pythium insidiosum affects the skin and occasionally other tissues of mammals and birds which live in close contact with contaminated water. Due to its bio-climatic and environmental characteristics, the Pantanal region is estimated to be one of the areas with higher prevalence of pythiosis in the world. However, few studies have focused on epidemiological aspects this region, the main objective of this work. Climatological normals were obtained from two meteorological stations of a public institution which covers the subregion studied. Data from other sources were also used to complement the study. Seventy six cases of pythiosis in equidae and seven in cattle were confirmed by ELISA-test, PCR, histopathology and isolation of Pythium insidiosum. The disease showed seasonal dynamics with peaks of incidence emerging after the wettest pluviometric gradients. Similar diseases, co infections and reinfections were also realized, suggesting a suppression of equine immune system to Pythium insidiosum. It is worth mention that diagnosis tests tools available are not widely adopted in the field. Significant response on immunotherapy (Pitium Vac®) in equine treated group and increased of the intervals the reinfection, indicating that the drug could be improved by adding prophylactic and therapeutical properties / Doutor

Orientador: Ana Liz Garcia Alves / Coorientador: Fernanda da Cruz Landim e Alvarenga / Banca: Anna Paula Balesdent Barreira / Banca: Brunna Patricia Almeida da Fonseca / Banca: Rogério Martins Amorim / Banca: Carlos Alberto Hussni / Resumo: Lesões tendíneas, especialmente do tendão flexor digital superficial dos membros torácicos, são importantes enfermidades que acometem a espécie equina, e apresentam alto índice de recidivas e afastamento da atividade atlética. Os avanços médicos e pesquisas relacionadas têm mostrado crescente interesse na utilização da terapia celular em tratamentos dessas lesões que apresentam uma cicatrização lenta ou ineficaz. Existem dúvidas quanto à persistência e comportamento das células tronco mesenquimais (CTM) implantadas no local da lesão e de sua migração a outros locais inflamados. Sendo assim, este estudo teve como objetivo identificar CTM marcadas com nanocristais antes e após o implante em lesões experimentais do tendão flexor digital superficial (TFDS) de eqüinos, observando a possibilidade de migração das CTM para outro foco de lesão realizado no membro contralateral do animal. Para isso, foram utilizados cinco equinos, submetidos à indução de lesões no TFDS em ambos os membros torácicos e, após sete dias, foram implantadas as CTM autólogas marcadas com nanocristais Qtracker 655 em um dos membros do animal. Sete dias após o implante, foram realizadas biópsias dos tendões, congelados em nitrogênio, sendo posteriormente realizados cortes histológicos para visualização em microscópio de fluorescência. Paralelamente, células marcadas com nanocristal foram mantidas em cultivo por 24 horas e, após este período, avaliou-se a sua viabilidade. Nas lesões que receberam células marcadas, foram visualizados sinais fluorescentes nas amostras, enquanto estes eram ausentes nas lesões dos membros contralaterais. As CTM marcadas e injetadas no tecido tendíneo mantiveram sua fluorescência sete dias após o implante in vivo, não sendo observado migração para o membro contralateral. As células mantiveram sua viabilidade após 24 horas de incubação com o marcador Qtracker / Abstract: Tendon lesions, especially of the superficial digital flexor tendon (SDFT) on forelimb, are important injuries in equine, because have high reinjury incidence and can cause retirement of athletic activities. Medical researches have shown growing interest on using stem cell therapy in the treatment of lesion with slow or ineffective repair. There are doubts regarding the persistency of the mesenchymal stem cells (MSC) implanted on the lesion site and of its migration to other injury sites. This study aims to identify marked MSC with nanoparticles quantum dots (QD) before and after the implant in equine induced tendinitis and to verify if there is a migration to another injury site on the contralateral. Five equines have a SDFT tendinitis induced on both forelimb and, after seven days, have seeded autologous MSC, marked with quantum dots Qtracker 655 in one of the limbs. Seven days after the implant, biopsies of the tendons were conducted, in which histological cuts were made for visualization in fluorescence microscope. The viability of the cells marked with nanoparticles and kept in cultivation was evaluated after 24 hours of incubation. Fluorescent signs were visualized on samples of the lesions that received marked cells, while they were absent on the lesions of the contralaterals. The marked MSCs kept their fluorescent emission, making it possible to identify them after seven days of in vivo implant, not occurring migration to the opposite limb. The cells maintained their viability in cultivation after 24 hours of incubation with the Qtracker marker / Doutor

Orientador: Alexandre Secorun Borges / Banca: Roberto Calderon Golçalves / Banca: Júlio Naylor Lisboa / Resumo: A infecção por Rhodococcus equi apresenta distribuição mundial e causa pneumonia supurativa ocasionando grandes perdas econômicas decorrentes dos custos de medicação, diminuição do desenvolvimento e mortalidade. O objetivo principal deste trabalho é verificar a importância da produção de anticorpos após vacinação de éguas prenhes, e posterior transferência passiva colostral para o neonato, na profilaxia da enfermidade. Para isto foram utilizadas éguas, e seus respectivos neonatos, de uma propriedade onde já haviam sido registrados, em anos anteriores, vários casos de infecção por R. equi. O experimento foi dividido em três fases. Na primeira fase, pretendeu-se verificar a produção de anticorpos contra R. equi em éguas vacinadas e a transferência destes para os neonatos através do colostro, utilizando 78 éguas e seus neonatos. As éguas receberam uma dose de vacina contra R. equi, 45 e 15 dias antes do parto previsto e tiveram amostras de sangue colhidas para serem analisadas por imunodifusão para detecção de anticorpos contra R. equi nos seguintes momentos: antes da primeira dose de vacina; antes da segunda dose; e 10 dias após a segunda dose. Os potros nascidos destas éguas também tiveram uma amostra de sangue colhida aos 2 dias de vida com o mesmo propósito. A segunda fase objetivou o isolamento de R. equi em "swabs" transretais e em lavados traqueais, e verificar se a presença de anticorpos contra R. equi nos potros, adquiridos pelo colostro ou pela administração de plasma hiperimune, interfere na instalação de sinais clínicos da enfermidade. Para esta fase foram usadas 45 éguas e seus respectivos neonatos divididos em três grupos da seguinte maneira: Grupo I, formado por 24 éguas vacinadas contra R. equi, 45 e 15 dias antes do parto previsto e seus potros recém-nascidos. / Abstract: The infection by R. equi is worldwide spread and causes suppurative pneumonia with great economic losses due to medication costs and development delay and mortality. The major aim of this study is to evaluate the importance of antibodies production after pregnant mare vaccination, and subsequently transference of these antibodies to the newborn foal through the colostrum, and on the control of the disease. Mares and their respective foals, from a specific farm that had had previous cases of R. equi infection in early years, were used for this trial. The study was divided into three steps. On the first step the goal was to evaluate the production of antibodies against R. equi in vaccinated mares and the transference of these to the new-born foal through the colostrum. These mares received one dose of vaccine against R. equi, 45 and 15 days before delivery and had blood samples collected to be analyzed by AGID test for detection of specific antibodies against R. equi on the following sampling times; a) before the first vaccine dose, b) before the second dose, c) 10 days after the second dose. The new-born from these mares also had a blood sample collected when they were 2-day-old with the same purpose. The goal of the second step was to evaluate the recovery of R. equi in transretal swabs and in tracheobronchial aspirate and also if the presence of antibodies against R. equi in the foals, acquired either through the colostrum or through the hyperimune plasma (H.I.), interferes with the development of clinical signs of the disease. For this step 45 mares and their respective foals were divided in three groups as follow; a) Group I, 24 vaccinated mares against R. equi, 45 and 15 days before delivery, and their respective foals as well. / Mestre

Orientador: Carlos Alberto Hussni / Banca: Marcos Jun Watanabe / Banca: Cláudia Helena Pellizzon / Resumo: Foi realizada a avaliação morfológica e morfométrica da veia cefálica submetida à pinçamento de cinco equinos hígidos. Foram testadas as pinças hemostáticas: Diffenbach bulldog, De Bakey bulldog, Rochester reta e De Bakey com cremalheira. Após 15 minutos da aplicação das referidas pinças, foi realizada a flebectomia parcial e coletadas as amostras referentes a cada segmento do vaso pinçado e do segmento controle sem pinçamento. Das peças procedeu-se as preparações histológicas dos segmentos da veia nas colorações de Hematoxilina-Eosina e Tricrômio de Masson, os cortes histológicos foram avaliados por microscopia óptica. Foi realizada análise morfológica das veias, de forma qualitativa, utilizando para isto uma escala de avaliação de lesões vasculares após pinçamento; a avaliação morfométrica, quantificando em micrometros o achatamento produzido pelas pinças nas diferentes camadas vasculares. Em ambos os estudos, morfológico e morfométrico, as pinças com serrilhamento transversal e fechamento tipo cremalheira causaram as maiores alterações, observou se marcada vacuolização das células musculares e desarranjo na túnica media com perda marcada das células endoteliais da túnica intima do vaso estudado. / Abstract: Morphometric and morphologic evaluation of the cephalic vein of five healthy horses submitted to clamping was done. Hemostatic clamps tested were Dieffenbach bulldog, De Bakey bulldog, Rochester straight and De Bakey with ratchets. 15 minutes after mentioned clamps were applied partial phlebotomy was performed and histologic sections of the veins were prepared and stained with Hematoxylin-Eosin and Masson Trichrome, after the stained preparations were evaluated by light microscopy. A qualitative morphological analysis of the veins was performed using a rating scale of vascular lesions after clamping; the morphometric evaluation consisted in quantifying in micrometers the flattening produced by the hemostatic clamps in the different vascular beds. In both studies, morphologic and morphometric, hemostats with transverse serration and ratcheted mechanism caused major changes, pronounced vacuolization of the muscle cells, derangement of the medium tunic and marked loss of endothelial cells of the intima tunic was observed in the vessel studied. / Mestre