Alzheimer’s Disease and other neurodegenerative diseases have been linked to dysfunction in proteostasis in the endoplasmic reticulum (ER). The ER provides an exclusive environment for protein synthesis and folding, which is vital to the cellular function. Under normal conditions, the synthesis and degradation of proteins remain in balance. During aging or during pathological states, disturbances of ER occur and consequently the failure of protein homeostasis. The cells rely on a system, the unfolded protein response (UPR), which regulates the homeostasis by three ER sensors: PERK, ATF6, and IRE-1. Perturbations of ER function result in UPR. In physiological condition, the cell may overcome the insult and regain homeostasis. However, prolonged or chronic UPR activates apoptotic pathways and may cause cell death. The sigma-1 receptor (Sig-1R) is a 25 kD polypeptide and a chaperone protein concentrated at the mitochondria-associated ER membrane domain (MAM). The Sig-1R plays significant roles governing calcium signalling, mitochondrial function, oxidative stress, protein chaperoning and ER stress. Results of this investigation demonstrate that immortalized mouse embryonic fibroblasts (MEFs) derived from Sig-1R-/—(KO) mice have higher baseline activation in all three branches of the UPR in the absence of ER stress compared to MEFs derived from Wild-type mice. Despite this increase in baseline activation, the PERK and ATF6 pathways have a significantly blunted response to acute stress. Rescue experiments by expressing the Sig-1R in KO MEFs did not recover the WT MEFs phenotype. Primary Sig-1R KO MEFs did not show baseline ER stress, but did show inhibited recovery following treatment with the acute ER stressor DTT. Overall, our data suggests that Sig-1R is important for the reestablishment of proteostasis following acute stress.

The aggregation of misfolded proteins in the endoplasmic reticulum (ER) is a pathological trait shared by many neurodegenerative disorders. This aggregation leads to the persistent activation of the unfolded protein response (UPR) and ultimately apoptosis due to ER stress. Cannabinoids, such as tetrahydrocannabinol (THC) and cannabidiol (CBD), have been reported to be neuroprotective in in vitro and in vivo models of neurodegeneration through their antioxidant and anti-inflammatory properties. However, little is known about the role of these cannabinoids in the context of ER stress. STHdhQ7/Q7 cells were treated with the ER stress inducer thapsigargin (TG) and cannabinoids in three different experimental paradigms to investigate the effect of 2.5 µM THC and 1 µM CBD monotreatment and cotreatment on ER stress-induced cell death. The mouse striatal neurons survived significantly more when THC or CBD was given before TG exposure. To further investigate this experimental paradigm, the gene and protein expression of UPR proteins was measured to determine the effect of cannabinoid pre-treatment on cell survival through ER stress modulation. A significant increase in the gene expression of the ER chaperone GRP78 and the ER-resident neurotrophic factor MANF in pre-treated samples suggest that with THC or CBD pre-treatment, the protein folding capacity of the cell is improved. Additionally, a decrease in the ER-mediated apoptotic markers such as BIM and caspase 12 with THC or CBD pre-treatment provides further evidence that cannabinoid pre-treatments are neuroprotective through ER stress modulation. These data suggest that prior cannabinoid monotherapy prepares the cell for future insults to the ER. Understanding the role of ER stress in the neuroprotective properties of THC and CBD provides insight into the therapeutic potential of cannabinoids and the role of ER dysfunction in various neurodegenerative disorders. / Thesis / Master of Health Sciences (MSc) / With the worldwide ageing population increasing, finding new treatments for illnesses that affect the elderly is crucial. Disorders such as Parkinson’s and Alzheimer’s disease mainly affect older individuals and are caused when brain cells stop working or when brain cells die. These disorders share some common causes. One is the inability to fold proteins properly. The cellular process that is responsible for protein folding and the changes that occur within that process are studied in this project. Also, the impact of the cannabinoids THC and CBD, a major component of cannabis, on the protein folding process is studied. This project found that using cannabinoids before the protein folding system is disrupted helps brain cells survive. This study is a step in understanding how THC and CBD are helpful in brain cell survival in patients suffering from diseases that damage brain cells.

Neste trabalho, foi desenvolvido um sistema laser utilizando como meio ativo um cristal de YLF cortado em ângulo de Brewster e dopado com 15mol% de érbio substituindo o ítrio, emitindo na região dos 3 m e bombeado por diodo laser com pico de emissão em 975 nm. Com este sistema foi obtido 1,80(18) W operando em regime quasecontínuo. O oscilador foi otimizado para aplicações médicas operando com potência máxima em 250 s de tempo de pulso. O peculiar comportamento temporal do laser foi estudado neste trabalho pela primeira vez, assim como a otimização da potência máxima em função da duração do pulso. Há diferenças nos mecanismos intrínsicos do laser quando este é operado em regime contínuo ou pulsado, especialmente no efeito da transferência de energia por conversão ascendente W22, cujo valor ainda é muito divergente na literatura. O valor estimado neste trabalho para este parâmetro de transferência de energia é 2,0x10-16 cm3/s. / In this work we present the development of a laser system based on an Er:YLF Brewster cut crystal with 15mol% erbium at the yttrium site, emitting at 3 m and pumped by a laser diode emitting at 975 nm. Using this system we obtained 1,80(18) W peak power when operating in the quasi-continuous regime. The cavity is optimized for medical applications and to operate at maximum power when pumped with 250 s pulse duration. The unique temporal behavior of this laser was subject of this study for the first time, as the optimization of the maximum output power as a function of the pulse duration. There are differences in the intrinsic mechanism of the laser when it is operated in pulsed or cw condition, especially with respect to the effect of the W22 energy transfer upconverssion parameter which value in the literature is very divergent. The estimated value of this process was also obtained in this work and is 2,0x10-16 cm3/s.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a microinfiltração de restaurações classe V em preparos de cavidades obtidos com diferentes potências do laser Er;Cr:YSGG e as cavidades preparadas convencionalmente (ponta diamantada em alta rotação). Sessenta amostras de dentina foram divididas em seis grupos (n = 10). O primeiro grupo serviu como um controle padronizado com preparo de ponta diamantada (G1), os demais grupos foram irradiados com laser de Er;Cr:YSGG com diferentes parâmetros: G2- 2,0W; G3- 2,25W; G4- 2,5W; G5- 2,75W; G6- 3,0W. Este laser emite comprimento de onda de 2,78m e tem largura de pulso de 140m e taxa de repetição fixa de 20Hz. A energia do laser foi entregue através de um sistema de fibra óptica para um terminal de ponta de safira de 6mm de comprimento e 600m de diâmetro, utilizando modo não contato. O sistema adesivo autocondicionante (Clearfil SE Bond- Kuraray, Japan) e a resina composta microhíbrida (Z-250, 3M/ESPE, St.Paul, USA) foram utilizados para compor os corpos de prova. Após as restaurações, os espécimes foram submetidos a teste de microinfiltração com solução de azul de metileno a 2% em pH 7,0, durante 4 horas, a 37°C. Os resultados mostraram não haver di ferença estatística (p=0,203) entre os grupos experimentais em que os preparos das cavidades foram realizados com ponta diamantada ou com diferentes parâmetros de energia do laser de Er;Cr:YSGG. A partir do presente estudo, pode-se concluir que a microinfiltração foi semelhante em todos os grupos experimentais independente do método de preparo cavitário de classe V usado - laser Er;Cr:YSGG ou ponta diamantada. / The aim of this work was to evaluate dye penetration of Class V restorations in cavity preparations obtained with different power setting of an Er;Cr:YSGG laser or with diamond bur and high-speed handpiece. Sixty samples of dentin were divided into six groups (n=10). The first group served as a control with standardized diamond bur cut (G1); the other groups were irradiated with an Er;Cr:YSGG laser with different power parameters: G2- 2.0W; G3- 2.25W; G4- 2.5W; G5- 2.75W; G6- 3.0W. This laser emitting at a wavelength of 2.78m and had pulse duration of 140m and fixed pulse repetition rate of 20Hz. Laser energy was delivered through a fiberoptic system to a sapphire tip terminal 6mm long and 600m in diameter, using non-contact mode. Self-etching adhesive system (Clearfil SE Bond- Kuraray, Japan) and microhybrid composite resin (Z-250, 3M/ESPE, St. Paul, USA) were used to compose the samples. After restoration, specimens were submitted to a microleakage test with 2% methylene blue solution at pH 7.0, for 4 h at 37°C. Results showed no statistical difference (p=0.203) between experimental groups in which cavity preparations were performed by diamond bur or different power settings of Er;Cr:YSGG laser. From the present study, it can be concluded that microleakage were similar to all experimental groups irrespective of the Class V cavity preparation method used - Er;Cr:YSGG laser system or diamond bur.

O objetivo do presente estudo foi avaliar, ex vivo, a influência da irradiação do laser Er,Cr:YSGG na resistência de união do material obturador à base de resina epóxica à dentina radicular, por meio do teste de push-out, e na interface dentina/material obturador, por meio de microscopia confocal a laser. Avaliou-se, ainda, a variação de temperatura externa da dentina radicular durante irradiação. Para tanto, 96 caninos foram instrumentados com sistema rotatório K3 até #45/.02 e irrigados com 2 mL de água destilada e deionizada entre os instrumentos utilizados. Os espécimes foram distribuídos em 3 grupos (n=32) em função do protocolo de irrigação final (10 mL): água destilada e deionizada, NaOCl 1% e EDTAC 17%. Em seguida, foram redistribuídos em 4 subgrupos (n=8), de acordo com a irradiação do laser: não irradiado, 2 W/20 Hz, 3 W/20 Hz e 4 W/20 Hz. Durante a irradiação, foram aferidos os valores máximo e mínimo de temperatura na parede radicular externa nos terços cervical, médio e apical e no ápice radicular. Após irradiação, os espécimes foram obturados com cimento AH Plus e guta-percha pela técnica de condensação lateral. Decorridos três vezes o tempo de endurecimento o tempo de do cimento, as raízes foram seccionadas transversalmente em slices de 1 mm de espessura. Dois slices de cada terço foram submetidos ao push-out em máquina universal de ensaios e o tipo de falha foi analisado em lupa estereoscópica e classificado em: adesiva ao material obturador, adesiva à dentina, mista, coesiva no material obturador e coesiva na dentina. O slice restante foi submetido à análise em microscopia confocal a laser, onde avaliou-se a porcentagem de perímetro da secção transversal do canal radicular com tags de cimento e a profundidade dos tags na interface dentina/material obturador de forma quali-quantitativa. Os dados de resistência de união (Mpa) e porcentagem de perímetro com tags foram analisados por meio do teste ANOVA; enquanto os dados da variação de temperatura (ºC) e profundidade dos tags (&mu;m) por meio do teste de Kruskal-Wallis, ambos seguidos de teste de Tukey. A irradiação do laser Er,Cr:YSGG aumentou a resistência de união do cimento obturador à dentina, independente da irrigação final, sendo que os maiores valores foram obtidos para as potência de 3 W (4,02±1,32) e 4 W (4,18±0,98) e os menores valores para o grupo não irradiado (2,64±0,58) (p<0,05). A potência de 2 W (3,28±0,91) apresentou valores intermediários. A irrigação final com EDTAC 17% resultou em maiores valores de resistência de união (4,01±1,02) quando comparado à água destilada (3,11±1,09) e ao NaOCl 1% (3,47±1,18) (p<0,05). Em relação aos terços radiculares, o terço cervical (4,01±1,21) apresentou valor de resistência de união estatisticamente maior que o terço apical (3,04±0,89), enquanto o terço médio apresentou valores intermediários (3,54±1,15) (p<0,05). Em todos os grupos foi observado maior percentual de falhas adesivas e mistas. Nos grupos irradiados com 3 W [21,1 (14,1-27,7)] e 4 W [17,8 (11,9-23,7)] foi observado maior profundidade de tags do material obturador quando comparado ao grupo não irradiado [12,9 (9,0-20,0)]; a potência de 2 W promoveu valores intermediários [15,6 (11,7-23,3)] de profundidade de tags. Os maiores percentuais de perímetro com tags foram observados para os grupos irradiados, não havendo diferença estatística entre eles (p>0,05). O aumento da temperatura foi proporcional ao aumento da potência do laser, não excedendo 3 ºC. Concluiu-se que o laser Er,Cr:YSGG promoveu aumento da resistência de união do cimento à base de resina epóxica à dentina radicular, com maior formação de tags em todas as potências estudadas, principalmente quando associado à irrigação final com EDTAC 17%; o aumento da temperatura durante a irradiação não foi considerado elevado a ponto de prejudicar os tecidos adjacentes. / The aim of this study was to evaluate ex vivo the influence of Er,Cr:YSGG laser irradiation on the bond strength of an epoxy resin-based root canal sealer to root dentin, using the push-out test, and on the dentin/filling material interface, using confocal laser microscopy. The temperature variation on the outer root dentin during irradiation was also evaluated. For this purposes, 96 canines were instrumented with K3 rotary system up to the #45/.02 instrument, irrigating with 2 mL of distilled and deionized water at each change of instrument. The specimens were randomly assigned to 3 groups (n=32), according the final irrigation protocol (10 mL): distilled and deionized water, 1% NaOCl and 17% EDTAC. They were next reassigned into 4 subgroups (n=8), according to the laser irradiation parameters: non-irradiated, 2 W/20 Hz, 3 W/20 Hz and 4 W/20 Hz. During irradiation, the maximum and minimum temperatures were measured on the outer root dentin wall in the cervical, middle and apical thirds as well in the root apex. Following irradiation, the canals were filled with lateral condensation of AH Plus sealer and gutta-percha cones. After a period three times longer than the sealers setting time, the roots were sectioned transversally to obtain 1-mm-thick slices. Two slices from each third were subjected to a push-out test in a universal testing machine and the failure mode was analyzed with stereoscopic lens and classified as: adhesive to the filling material, adhesive to dentin, mixed, cohesive in the filling material and cohesive in dentin. The remaining slice was analyzed by confocal laser microscopy to evaluate the percentage of the perimeter of the root canal cross-section with sealer tags. The depth of tags at the dentin/filling material interface was evaluated in a quali-quantitative manner. Bond strength (MPa) data and the percentage of perimeter with tags were analyzed by ANOVA, while temperature variation (ºC) and tag depth (&mu;m) were analyzed by Kruskal-Wallis test, both followed by Tukeys test. The Er,Cr:YSGG laser irradiation increased sealer bond strength to dentin, regardless of the final irrigation protocol. The highest values were obtained for 3 W (4.02±1.32) and 4 W (4.18±0.98) powers and the lowest for the non-irradiated group (2.64±0.58) (p<0.05). The use of 2 W power (3.28±0.91) resulted in intermediate values. Final irrigation with 17% EDTAC provided higher bond strength (4.01±1.02) compared with distilled water (3.11±1.09) and 1% (NaOCl 3.47±1.18) (p<0.05). Regarding the root thirds, the cervical third (4.01±1.21) presented significantly higher bond strength than the apical third (3.04±0.89), while the middle third presented intermediate values (3.54±1.15) (p<0.05). In all groups, there was a greater percentage of adhesive and mixed failures. In the groups irradiated with 3 W [21.1 (14.1-27.7)] and 4 W [17.8 (11.9-23.7)], it was observed a greater depth of filling material tags compared with the non-irradiated group [12.9 (9.0-20.0)]; 2 W power produced intermediate tag depth values [15.6 (11.7-23.3)]. The greatest percentage of canal perimeter with sealer tags was observed in the irradiated groups, with no statistically significant difference among them (p>0.05). The temperature rise was proportional to the increase of laser power, not surpassing 3 °C. It was therefore concluded that Er,Cr:YSGG laser irradiation increased the bond strength of an epoxy resin-based sealer to root dentin, with greater formation of sealer tags when for all tested powers, especially if combined with final irrigation with 17% EDTAC; temperature rise during irradiation was not considered high enough to cause harmful effects to the adjacent tissues.

Em função da categoria dos estressores, vias neurais específicas são envolvidas e respostas distintas podem ser induzidas. A literatura tem reportado que o estrógeno (E 2 ) através de seus receptores de tipos (ER) e (ER) influencia a atividade do eixo hipotálamo hipófise adrenal (HPA). Além disso, há evidências de que o E2 exerça efeitos protetores em situação de choque hemorrágico. O objetivo deste trabalho foi verificar a participação dos receptores ER e ER na atividade do eixo HPA durante estresse hemorrágico. Foram utilizadas ratas Wistar ovariectomizadas que receberam injeções s.c. de DMSO (veículo), PPT (agonista ER) ou DPN (agonista ER), durante 3 dias. No segundo dia, as ratas foram canuladas para coleta seriada de sangue na manhã seguinte. Os animais receberam (controle) ou não (hemorrágicos) reposição imediata com salina. Os hormônios corticosterona (CORT), ocitocina (OT) e vasopressina (AVP) foram dosados por radioimunoensaio. Ao final do experimento, os ratos foram perfundidos e os cérebros processados para imuno-histoquímica de FOS, tirosina hidroxilase (TH) e hormônio liberador de corticotrofina (CRH). Nos animais tratados com veículo, a hemorragia gradual moderada aumentou a secreção de CORT, OT e AVP, a expressão de neurônios TH ativados na região A1C1 e de FOS no mpPVN. O PPT reduziu a secreção de CORT, na situação controle atuando no LC e mpPVN; e também após hemorragia atuando no LC, NTS, A1C1 e mpPVN. O DPN reduziu a secreção de CORT apenas após estresse hemorrágico atuando no LC, A1C1 e mpPVN. O PPT bloqueou o aumento da secreção de OT e aumentou a secreção de AVP, após hemorragia. O DPN, por sua vez, reduziu a concentração plasmática de OT e aumentou a concentração plasmática de AVP, independentemente da hemorragia. Em conclusão: o estrógeno pode exercer uma ação inibitória sobre a secreção basal de CORT somente através da ação do ER sobre o LC e mpPVN; a secreção de CORT aumenta em resposta à hemorragia gradual moderada e o estrógeno pode exercer um controle inibitório nessa resposta através de ER atuando sobre LC, NTS, A1C1 e mpPVN, bem como através de ER atuando sobre LC, A1C1 e mpPVN. / Depending on the stressors category, specific neural pathways are involved and different responses can be selected. It has been reported in the literature that estrogen (E2 ) can affect hypothalamus pituitary adrenal (HPA) axis activity through its receptors type (ER) and (ER). Moreover, there is evidence that E 2 has protecting properties after hemorrhagic shock. The aim of this work was to assess the participation of ER and ER on HPA axis activity during hemorrhagic stress. It was used ovariectomized Wistar rats that received s.c. injections of: DMSO (vehicle), PPT (ER agonist) or DPN (ER agonist), during 3 days. In the second day the rats were catheterized for serial blood collect in the next morning. Animals received (control) or not (hemorrhagic) immediate reposition with same volume of isotonic saline. The hormones corticosterone (CORT), oxytocin (OT) and vasopressin (AVP) were measured by radioimmunoassay. At the end of the experiment, animals were perfused and their brains were processed for immuno-histochemistry for FOS, tyrosine hydroxylase (TH) and corticotropin releasing hormone (CRH). In vehicle treated animals, the gradual hemorrhage enhanced CORT, OT and AVP secretion, TH activated neurons expression in A1C1 and FOS expression in mpPVN. PPT decreased plasma CORT in control situation acting on LC and mpPVN, and also after hemorrhage acting on LC, NTS, A1C1 and mpPVN. DPN reduced plasma CORT only after hemorrhagic stress acting on LC, A1C1 and mpPVN. PPT blocked the increase of OT secretion and increased AVP secretion, after hemorrhage. The agonist DPN reduced OT and increased AVP levels, despite hemorrhage. In conclusion: E2 can exert an inhibitory effect on CORT basal secretion only through ER action on LC and mpPVN; CORT secretion increases after gradual moderate hemorrhage and E2 inhibit this secretion through ER action on LC, NTS, A1C1 and mpPVN, as well through ER action on LC, A1C1 and mpPVN.

Thesis (Ph. D.)--Kent State University, 1988. / Includes bibliographical references (leaves 241-265).

O objetivo do presente estudo foi avaliar, ex vivo, a influência da irradiação do laser Er,Cr:YSGG na resistência de união do material obturador à base de resina epóxica à dentina radicular, por meio do teste de push-out, e na interface dentina/material obturador, por meio de microscopia confocal a laser. Avaliou-se, ainda, a variação de temperatura externa da dentina radicular durante irradiação. Para tanto, 96 caninos foram instrumentados com sistema rotatório K3 até #45/.02 e irrigados com 2 mL de água destilada e deionizada entre os instrumentos utilizados. Os espécimes foram distribuídos em 3 grupos (n=32) em função do protocolo de irrigação final (10 mL): água destilada e deionizada, NaOCl 1% e EDTAC 17%. Em seguida, foram redistribuídos em 4 subgrupos (n=8), de acordo com a irradiação do laser: não irradiado, 2 W/20 Hz, 3 W/20 Hz e 4 W/20 Hz. Durante a irradiação, foram aferidos os valores máximo e mínimo de temperatura na parede radicular externa nos terços cervical, médio e apical e no ápice radicular. Após irradiação, os espécimes foram obturados com cimento AH Plus e guta-percha pela técnica de condensação lateral. Decorridos três vezes o tempo de endurecimento o tempo de do cimento, as raízes foram seccionadas transversalmente em slices de 1 mm de espessura. Dois slices de cada terço foram submetidos ao push-out em máquina universal de ensaios e o tipo de falha foi analisado em lupa estereoscópica e classificado em: adesiva ao material obturador, adesiva à dentina, mista, coesiva no material obturador e coesiva na dentina. O slice restante foi submetido à análise em microscopia confocal a laser, onde avaliou-se a porcentagem de perímetro da secção transversal do canal radicular com tags de cimento e a profundidade dos tags na interface dentina/material obturador de forma quali-quantitativa. Os dados de resistência de união (Mpa) e porcentagem de perímetro com tags foram analisados por meio do teste ANOVA; enquanto os dados da variação de temperatura (ºC) e profundidade dos tags (&mu;m) por meio do teste de Kruskal-Wallis, ambos seguidos de teste de Tukey. A irradiação do laser Er,Cr:YSGG aumentou a resistência de união do cimento obturador à dentina, independente da irrigação final, sendo que os maiores valores foram obtidos para as potência de 3 W (4,02±1,32) e 4 W (4,18±0,98) e os menores valores para o grupo não irradiado (2,64±0,58) (p<0,05). A potência de 2 W (3,28±0,91) apresentou valores intermediários. A irrigação final com EDTAC 17% resultou em maiores valores de resistência de união (4,01±1,02) quando comparado à água destilada (3,11±1,09) e ao NaOCl 1% (3,47±1,18) (p<0,05). Em relação aos terços radiculares, o terço cervical (4,01±1,21) apresentou valor de resistência de união estatisticamente maior que o terço apical (3,04±0,89), enquanto o terço médio apresentou valores intermediários (3,54±1,15) (p<0,05). Em todos os grupos foi observado maior percentual de falhas adesivas e mistas. Nos grupos irradiados com 3 W [21,1 (14,1-27,7)] e 4 W [17,8 (11,9-23,7)] foi observado maior profundidade de tags do material obturador quando comparado ao grupo não irradiado [12,9 (9,0-20,0)]; a potência de 2 W promoveu valores intermediários [15,6 (11,7-23,3)] de profundidade de tags. Os maiores percentuais de perímetro com tags foram observados para os grupos irradiados, não havendo diferença estatística entre eles (p>0,05). O aumento da temperatura foi proporcional ao aumento da potência do laser, não excedendo 3 ºC. Concluiu-se que o laser Er,Cr:YSGG promoveu aumento da resistência de união do cimento à base de resina epóxica à dentina radicular, com maior formação de tags em todas as potências estudadas, principalmente quando associado à irrigação final com EDTAC 17%; o aumento da temperatura durante a irradiação não foi considerado elevado a ponto de prejudicar os tecidos adjacentes. / The aim of this study was to evaluate ex vivo the influence of Er,Cr:YSGG laser irradiation on the bond strength of an epoxy resin-based root canal sealer to root dentin, using the push-out test, and on the dentin/filling material interface, using confocal laser microscopy. The temperature variation on the outer root dentin during irradiation was also evaluated. For this purposes, 96 canines were instrumented with K3 rotary system up to the #45/.02 instrument, irrigating with 2 mL of distilled and deionized water at each change of instrument. The specimens were randomly assigned to 3 groups (n=32), according the final irrigation protocol (10 mL): distilled and deionized water, 1% NaOCl and 17% EDTAC. They were next reassigned into 4 subgroups (n=8), according to the laser irradiation parameters: non-irradiated, 2 W/20 Hz, 3 W/20 Hz and 4 W/20 Hz. During irradiation, the maximum and minimum temperatures were measured on the outer root dentin wall in the cervical, middle and apical thirds as well in the root apex. Following irradiation, the canals were filled with lateral condensation of AH Plus sealer and gutta-percha cones. After a period three times longer than the sealers setting time, the roots were sectioned transversally to obtain 1-mm-thick slices. Two slices from each third were subjected to a push-out test in a universal testing machine and the failure mode was analyzed with stereoscopic lens and classified as: adhesive to the filling material, adhesive to dentin, mixed, cohesive in the filling material and cohesive in dentin. The remaining slice was analyzed by confocal laser microscopy to evaluate the percentage of the perimeter of the root canal cross-section with sealer tags. The depth of tags at the dentin/filling material interface was evaluated in a quali-quantitative manner. Bond strength (MPa) data and the percentage of perimeter with tags were analyzed by ANOVA, while temperature variation (ºC) and tag depth (&mu;m) were analyzed by Kruskal-Wallis test, both followed by Tukeys test. The Er,Cr:YSGG laser irradiation increased sealer bond strength to dentin, regardless of the final irrigation protocol. The highest values were obtained for 3 W (4.02±1.32) and 4 W (4.18±0.98) powers and the lowest for the non-irradiated group (2.64±0.58) (p<0.05). The use of 2 W power (3.28±0.91) resulted in intermediate values. Final irrigation with 17% EDTAC provided higher bond strength (4.01±1.02) compared with distilled water (3.11±1.09) and 1% (NaOCl 3.47±1.18) (p<0.05). Regarding the root thirds, the cervical third (4.01±1.21) presented significantly higher bond strength than the apical third (3.04±0.89), while the middle third presented intermediate values (3.54±1.15) (p<0.05). In all groups, there was a greater percentage of adhesive and mixed failures. In the groups irradiated with 3 W [21.1 (14.1-27.7)] and 4 W [17.8 (11.9-23.7)], it was observed a greater depth of filling material tags compared with the non-irradiated group [12.9 (9.0-20.0)]; 2 W power produced intermediate tag depth values [15.6 (11.7-23.3)]. The greatest percentage of canal perimeter with sealer tags was observed in the irradiated groups, with no statistically significant difference among them (p>0.05). The temperature rise was proportional to the increase of laser power, not surpassing 3 °C. It was therefore concluded that Er,Cr:YSGG laser irradiation increased the bond strength of an epoxy resin-based sealer to root dentin, with greater formation of sealer tags when for all tested powers, especially if combined with final irrigation with 17% EDTAC; temperature rise during irradiation was not considered high enough to cause harmful effects to the adjacent tissues.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a microinfiltração de restaurações classe V em preparos de cavidades obtidos com diferentes potências do laser Er;Cr:YSGG e as cavidades preparadas convencionalmente (ponta diamantada em alta rotação). Sessenta amostras de dentina foram divididas em seis grupos (n = 10). O primeiro grupo serviu como um controle padronizado com preparo de ponta diamantada (G1), os demais grupos foram irradiados com laser de Er;Cr:YSGG com diferentes parâmetros: G2- 2,0W; G3- 2,25W; G4- 2,5W; G5- 2,75W; G6- 3,0W. Este laser emite comprimento de onda de 2,78m e tem largura de pulso de 140m e taxa de repetição fixa de 20Hz. A energia do laser foi entregue através de um sistema de fibra óptica para um terminal de ponta de safira de 6mm de comprimento e 600m de diâmetro, utilizando modo não contato. O sistema adesivo autocondicionante (Clearfil SE Bond- Kuraray, Japan) e a resina composta microhíbrida (Z-250, 3M/ESPE, St.Paul, USA) foram utilizados para compor os corpos de prova. Após as restaurações, os espécimes foram submetidos a teste de microinfiltração com solução de azul de metileno a 2% em pH 7,0, durante 4 horas, a 37°C. Os resultados mostraram não haver di ferença estatística (p=0,203) entre os grupos experimentais em que os preparos das cavidades foram realizados com ponta diamantada ou com diferentes parâmetros de energia do laser de Er;Cr:YSGG. A partir do presente estudo, pode-se concluir que a microinfiltração foi semelhante em todos os grupos experimentais independente do método de preparo cavitário de classe V usado - laser Er;Cr:YSGG ou ponta diamantada. / The aim of this work was to evaluate dye penetration of Class V restorations in cavity preparations obtained with different power setting of an Er;Cr:YSGG laser or with diamond bur and high-speed handpiece. Sixty samples of dentin were divided into six groups (n=10). The first group served as a control with standardized diamond bur cut (G1); the other groups were irradiated with an Er;Cr:YSGG laser with different power parameters: G2- 2.0W; G3- 2.25W; G4- 2.5W; G5- 2.75W; G6- 3.0W. This laser emitting at a wavelength of 2.78m and had pulse duration of 140m and fixed pulse repetition rate of 20Hz. Laser energy was delivered through a fiberoptic system to a sapphire tip terminal 6mm long and 600m in diameter, using non-contact mode. Self-etching adhesive system (Clearfil SE Bond- Kuraray, Japan) and microhybrid composite resin (Z-250, 3M/ESPE, St. Paul, USA) were used to compose the samples. After restoration, specimens were submitted to a microleakage test with 2% methylene blue solution at pH 7.0, for 4 h at 37°C. Results showed no statistical difference (p=0.203) between experimental groups in which cavity preparations were performed by diamond bur or different power settings of Er;Cr:YSGG laser. From the present study, it can be concluded that microleakage were similar to all experimental groups irrespective of the Class V cavity preparation method used - Er;Cr:YSGG laser system or diamond bur.

Neste trabalho, foi desenvolvido um sistema laser utilizando como meio ativo um cristal de YLF cortado em ângulo de Brewster e dopado com 15mol% de érbio substituindo o ítrio, emitindo na região dos 3 m e bombeado por diodo laser com pico de emissão em 975 nm. Com este sistema foi obtido 1,80(18) W operando em regime quasecontínuo. O oscilador foi otimizado para aplicações médicas operando com potência máxima em 250 s de tempo de pulso. O peculiar comportamento temporal do laser foi estudado neste trabalho pela primeira vez, assim como a otimização da potência máxima em função da duração do pulso. Há diferenças nos mecanismos intrínsicos do laser quando este é operado em regime contínuo ou pulsado, especialmente no efeito da transferência de energia por conversão ascendente W22, cujo valor ainda é muito divergente na literatura. O valor estimado neste trabalho para este parâmetro de transferência de energia é 2,0x10-16 cm3/s. / In this work we present the development of a laser system based on an Er:YLF Brewster cut crystal with 15mol% erbium at the yttrium site, emitting at 3 m and pumped by a laser diode emitting at 975 nm. Using this system we obtained 1,80(18) W peak power when operating in the quasi-continuous regime. The cavity is optimized for medical applications and to operate at maximum power when pumped with 250 s pulse duration. The unique temporal behavior of this laser was subject of this study for the first time, as the optimization of the maximum output power as a function of the pulse duration. There are differences in the intrinsic mechanism of the laser when it is operated in pulsed or cw condition, especially with respect to the effect of the W22 energy transfer upconverssion parameter which value in the literature is very divergent. The estimated value of this process was also obtained in this work and is 2,0x10-16 cm3/s.