Orientador: Luiz Candido de Souza Dias / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-19T20:06:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Melo_ClaudiaMourade_M.pdf: 4215507 bytes, checksum: 03d8e10ec999d72105b24e3d535f4c04 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: O Estado de São Paulo apresenta esquistossomose mansônica autóctone em várias regiões, entra elas a de Campinas. O presente trabalho foi elaborado com o objetivo de determinar características biológicas de Schistosoma mansoni recém-isolado do baiITO Jardim São Domingos, município de Campinas, SP. O isolamento foi feito em 1993, a partir de miracÍdios eclodidos de ovos das fezes de três pacientes autóctones e não tratados para esquistossomose. O estudo foi desenvolvido em modelo experimental camundongo swiss - Biomphalaria tenagophila simpátrica. Avaliou-se a suscetibilidade de 180 moluscos B. tenagophila expostos a I e 10 miracídios. Em 80 camundongos infectados pela cauda com 70 cercárias e sacrificados na décima semana, avaliou-se: suscetibilidade do S. mansoni ao oxamniquine (100 mg/Kg, dose única, via oral) e ao praziquantel ( 100 mg/Kg, 5 dias, via oral ); capacidade de penetração de cercárias e recuperação de vermes; peso corporal, do figado e do baço; mortalidade; diâmetro dos granulomas hepáticos e morfometria de vermes adultos e ovos. A mortalidade dos caramujos até os 77 dias de infecção foi 58,30/0 ( I miracídio ) e de 93,30/0 ( 10 miracídios ), indicando que a infecção foi significante na morte dos animais. Os índices de infecção foram baixos: 8,30/0 na infecção com 10 miracídios e 3,3_ó, com 1 miracÍdio. Estes dados indicam que a linhagem campineira CAMP-H não está bem adaptada ao seu hospedeiro intermediário. A quimioterapia experimental revelou que o praziquantel (95,4%) foi ligeiramente mais eficaz que o oxamniquine ( 94,4% ), sendo que a percentagem de vermes sobreviventes foi de 11,9% para a primeira droga e 17% para a segunda. Essas percentagens foram diferentes estatisticamente e consideradas altas, sendo necessários novos estudos para determinar o período de oviposição de vermes sobreviventes de c.amundongos tratados. Nos camWldongos infectados verificou-se altos índices de penetração de cercárias (98,1 % ) e de recuperação de vermes ( 53,3% ); alteração no crescimento ponderal dos animais infectados com diminuição de peso quando comparados com aqueles do grupo controle; no período entre a administração das duas drogas esquistossomicidas e sacrificio dos camWldongos, houve ganho de peso corporal dos animais tratados; hepatomegalia ( 3 :I: 0,56g) e esplenomegalia ( 0,82 :I: 0,23g) com aumentos de 72,8% e 100%, respectivamente, quando comparados com essas vísceras dos animais do grupo controle; reações granulomatosas hepáticas medindo 296,08 :1:81,27 J.lm2. O tamanho dos vermes machos foi de 6,15 :I: 1,47mm e das fêmeas de 5,02 :I: 1,22mm. Os ovos apresentaram largura média de 56,37 :I: 8,09J.lm e comprimento de 133,69 :I: 19,98J.lID. A linhagem de S. mansoni de Campinas, SP apresentou características distintas das linhagens paulistas SJ ( Vale do Paraiba ), ltariri ( Vale do Ribeira), Ourinhos ( Vale do Paranapanema); e da mineira BH ( Belo Horizonte) / Abstract: The São Paulo State ( Brazil ) shows autochtonous schistosomiasis mansom in several regions, including the region of Campinas. This suggests a possible development of this disease during the last three years. The present work was elaborate having in view to determine biological characteristics of Schistosoma mansoni recently isolated trom the Ward São Domingos, municipality of Campinas, SP. The isolation was camed out in 1993, originating of hatched miracidia trom eggs of feces of three autochthonous patients and non-treated to schistosomiasis. The study was developed using as experimental model swiss mice-sympatric Biomphalaria tenagophila. The suscetibility of 180 snails B. tenagophila exposed to 1 and 0 miracidia was evaluated. Eighty mice were infected with 70 cercariae by immersion of the tail in water. Afier 10 weeks, they were killed and evaluated folIowing this analysis: suscetibility of S. mansoni to oxamniquine ( 100 mg/Kg, single dose, oral route ) and to praziquantel ( 100 mg/Kg, 5 days, oral route ); ability of cercariae penetration and worm recovery; body weights, of tiver and spleen; mortality rate ; diameter of hepatic granuloma and morphometry of adults woms and eggs. The mortality rates until 77 days of infection was 58,3% ( 1 miracidium ) and 93,3% ( 10 miracidia ), indicating that the infection was significant to the death of the animals. The rate of infection were low: 8,3<1ó to 10 miracidia and 3,30/0 to 1 miracidium. This date indicates that the strain CAMP-H is not well-adapted to its intermediate host The experimental chemotherapy revealed tha1 praziquantel (95,4%) was lightly more effective than oxamniquine (94,4%), while the percentage of surviving worms was of 11,9% to the first drug and of 17% to the second one. This percentages were statistically different and it was considered high. This finding suggest that new studies wiIl be necessary to determine the oviposition of surviving worms of treated mice. We also verified high rate of cercariae penetration ( 98,1% ) and of recovery worms ( 53,3% ) in the infected mice; aIteration of the ponderal growth from infected animaIs succeding ina decrease of the weight when compared to the controI group; in the period between the administration of the two antischistosomal drugs and the killing of the animaIs, we noticed body weight gain of treated animals; hepatomegaly (3 :i: 0,56g ) and spIenomegaly ( 0,82 :i: 0,23g ) showing a weight gain of 72,8<}ó and 1000/0, respectiveIy, when compared to these viscera of the controI group; granulomatous reactions hepatic measuring 296,08 :i: 81,27 J.1.m2, The measurements of worms was of 6,15 :i: 1,47mm for male and 5,02 :i: 1,22mm for female; and the eggs showed 56,37 :i: 8,09J.1.m of width and 133,69 :i: 19,98J.1.m of Iength. The S. mansoni strain 'of Campinas ( SP ) showed different characteristics from other strains of São Paulo State as SJ ( Paraíba Valley ), Itariri ( Ribeira Valley ), Ourinhos (Paranapanema Valley) and ofBH strain (Belo Horizonte, Minas Gerais State) / Mestrado / Parasitologia / Mestre em Ciências Biológicas

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A esquistossomose ainda à um problema de saÃde pÃblica no Brasil, amplamente disseminada nas regiÃes sudeste e nordeste. O diagnÃstico laboratorial dessa doenÃa à realizado principalmente atravÃs de mÃtodos diretos que detectam os ovos nas fezes, atravÃs da microscopia e por mÃtodos indiretos, que se baseiam na determinaÃÃo e identificaÃÃo de antÃgenos, anticorpos e fragmentos especÃficos de DNA que estÃo associados à infecÃÃo por Schistosoma mansoni. Nesse estudo, objetivamos avaliar a reaÃÃo em cadeia da polimerase (PCR) para diagnÃstico da esquistossomose mansoni, em indivÃduos da localidade de Planalto do Cajueiro, uma Ãrea de baixa endemicidade, em Maranguape- CearÃ. Realizamos o mÃtodo de ELISA, para detecÃÃo de anticorpos IgG contra antÃgenos de verme adulto de S. mansoni, e a coproscopia, pelos mÃtodos de Kato-Katz e de Lutz, para detecÃÃo de ovos de S. mansoni e de outros parasitos. Diante dos resultados obtidos nesses mÃtodos, selecionamos 56 amostras de fezes, dentre as 125 analisadas, que compuseram os seguintes grupos: Grupo I - ELISA reativo/Outros parasitos (+) ; Grupo II- ELISA reativo/Outros parasitos (-); Grupo III- ELISA nÃo reativo/ Outros parasitos (+) ; Grupo IV-ELISA nÃo reativo/Outros parasitos (-); Grupo V- ELISA Reativo/Coproscopia para S. mansoni (+). Os parÃmetros da PCR seguiram o protocolo de Pontes et al., 2002. Do Grupo I, 02 das 10 amostras foram positivas na PCR; do Grupo II, 04 das 10 amostras foram positivas na PCR e no Grupo III, 01 das 07 amostras foi positiva no PCR. Dentre as 10 amostras do Grupo IV, 01 amostra foi positiva no PCR e no Grupo V, 13 das 19 amostras foram positivas no PCR. Dos 39 indivÃduos que apresentavam reatividade pelo ELISA, o exame parasitolÃgico, realizado pela tÃcnica de rotina, mÃtodo de Kato-Katz, foi positivo em 06 amostras e a PCR em 19 amostras. Ao comparar os resultados obtidos no Grupo V, com o mÃtodo de Kato-Katz, observa-se que este detectou 06 indivÃduos, enquanto PCR detectou 13. Ao compararmos PCR ao mÃtodo do Gradiente SalÃnico, observa-se que o Gradiente SalÃnico detectou 09 indivÃduos, enquanto PCR detectou 11. Ao compararmos PCR ao HelmintexÂ, verificamos que o Helmintex detectou 10, enquanto PCR detectou 08 amostras. Diante disso, concluÃmos que a PCR à mais uma ferramenta importante para melhorar a sensibilidade na detecÃÃo do parasito nas fezes, sendo indispensÃvel à associaÃÃo dos vÃrios mÃtodos disponÃveis, com intuito de alcanÃar o diagnÃstico real da doenÃa. / Schistosomiasis is still a public health problem in Brazil. The infection is widespread in southeast and northeast. The laboratorial diagnosis of schistosome infection has been based on direct coproscopic examination and by indirect methods for detection of antigen, antibodies and specific DNA fragments that are associated with Schistosoma mansoni infection. The aim of the present study was to evaluate polymerase chain reaction (PCR) designed for detection of Schistosoma mansoni DNA in individuals from a low endemic area in Cearà state. The study was conducted in the Planalto do Cajueiro, Maranguape, CearÃ, Brazil. In the laboratory performed the ELISA for detection of IgG antibodies against adult worms antigen of S. mansoni, and stool examinations (Kato-Katz, Lutz, Saline gradient and Helmintex methods), considering the results obtained, for distribution of 56 stool samples selected among the 125 examined, in the following groups: Group I - ELISA reactive / Others parasites (+ ), Group II- ELISA reactive / Others parasites (-), Group III- ELISA non reactive / Others parasites (+), Group IV- ELISA non reactive / Others parasites (-), Group V- ELISA reactive / Coproscopic examination S. mansoni (+).The PCR was carried out according to a protocol described by Pontes et al.(2002) . Group I, 02 of 10 samples were positive in PCR; Group II, 04 of 10 samples were positive by PCR and in Group III, 01 of 07 samples were positive in PCR. Among the 10 samples of Group IV, 01 was positive in PCR and Group V, 13 of 19 samples were positive in PCR. Among the 39 individuals who showed reactivity by ELISA, 06 samples were positive in coproscopic examination and PCR was reactive in 19 samples. Comparing the results in Group V, with the Kato-Katz, this method detected 06 individuals, while PCR detected 13 individuals were positive. By comparing the PCR of Saline gradient, it is observed that the Saline gradient detected 09 individuals, while PCR detected 11. When comparing PCR to HelmintexÂ, we found that the Helmintex detected 10, while PCR detected 08 samples. We conclude that PCR is an important tool to improve the sensitivity in detecting S. mansoni infection in low endemic areas. We emphasize that is very important associate the exams in order to achieve the real diagnosis of the disease.