Submitted by Helena Bejio (helena.bejio@unioeste.br) on 2017-12-18T23:58:30Z No. of bitstreams: 2 tese completo Paulo Ricardo Lima.pdf: 1392705 bytes, checksum: f905fc1f7a4970417ea82128e56bcd01 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-18T23:58:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 tese completo Paulo Ricardo Lima.pdf: 1392705 bytes, checksum: f905fc1f7a4970417ea82128e56bcd01 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-06-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of the present study was to evaluate the rustification of hybrids of Eucalyptus urophylla versus Eucalyptus grandis (clone 1528) with application of jasmonic acid (JA) and kaolin flexions stem and their subsequent field development. The experiment was conducted at the State University of Western Paraná, in the municipality of Marechal Cândido Rondon, PR. Three experiments were carried out to evaluate the responses of eucalyptus plants to the exogenous application of JA and flexions stem. In the first, a completely randomized experimental design with seven treatments (control, 2.0, 4.0, 6.0 and 8.0 μmol L-1 of JA, 20 and 40 stem flexions daily), with five replications of twenty seedlings, in the protected environment. After 4 weeks of application of the treatments were determined the increment in height, stem diameter, number of leaves, dry masses of roots and aerial part and relative index of chlorophyll (SPAD). At 90 days after planting (field), the increases in height and in the stem diameter and the height/diameter ratio of the seedlings were evaluated. In the second experiment in protected environment, using a completely randomized design with five replications of 20 seedlings, with the following treatments: T1: control, T2: 8.0 μmol L-1 of JA and T3: 40 stem flexions. They were measured the net assimilation rate of CO2 (A), stomatal conductance (gs), internal CO2 concentration (Ci), leaf transpiration rate (E), water use efficiency (WUE), intrinsic efficiency of use of Water (iWUE) and carboxylation efficiency (Fc). The third experiment in protected environment was a completely randomized design with seven treatments (T1: control: T2: 2.0 μmol L-1 of JA; T3: 4.0 μmol L-1 of JA; T4: 6.0 μmol L-1 of JA; T5: 8.0 μmol L-1 of JA; T6: 20 stem flexions; and T7: 40 stem flexions) with five replicates of twenty seedlings. After applied of the treatments were evaluated, the increment in height, diameter stem and lignin content of root and stem and flexural stiffness of the stem. The rustified seedlings were transplanted to the field and at 90 and 150 days the height and stem diameter increments were evaluated. The treatments with application of JA and control showed a greater increase in height and number of leaves during the rustification phase and obtained a greater increase in height and in the diameter of stem after field planting. The dose of JA applied in the seedlings was insufficient to alter the photosynthetic responses to the control. Mechanical stimuli promoted an increase in the maximum photosynthetic capacity and maximum assimilation of CO2, but reduction in the efficiency of water use, that is, lower photosynthetic efficiency when compared to other treatments. For flexural rigidity, seedlings submitted to mechanical stimuli presented greater curvature resistance. Applications of JA above 6.0 μmol L-1 and mechanical stimuli obtained an increase in the lignin content in the stem in eucalyptus seedlings. Minor doses of JA and imposition of 20 push-ups resulted in seedlings with increase in diameter stem increment. The track analysis showed that the increase in the lignin content promotes more rigid stems and these have a greater direct effect inversely proportional to the average increase in height and the diameter of the stem at the level of the ground. Therefore, the application of stem flexures and jasmonic acid were able to alter the lignin concentration in the stem, providing greater flexural stiffness in eucalyptus seedlings, but this smaller flexural stiffness was not reflected in higher seedling quality under the studied conditions. / O objetivo do presente estudo foi avaliar a rustificação de mudas de híbrido de Eucalyptus urophylla vs Eucalyptus grandis clone 1528 com aplicação de ácido jasmônico (JA) e flexões caulinares e seu posterior desenvolvimento a campo. O experimento foi conduzido na Universidade Estadual do Oeste do Paraná, no município de Marechal Cândido Rondon, PR. Foram realizados três experimentos para avaliar as respostas das plantas de eucalipto a aplicação exógena de JA e flexões caulinares. O primeiro foi desenvolvido em delineamento experimental inteiramente ao acaso com sete tratamentos (testemunha; 2,0; 4,0; 6,0 e 8,0 μmol L-1 de JA; 20 e 40 flexões caulinares diárias), com cinco repetições de vinte mudas, em ambiente protegido não climatizado. Após quatro semanas de aplicação dos tratamentos, foram determinados os incrementos na altura, diâmetro do coleto, número de folhas, massas secas de raízes e da parte aérea e índice relativo de clorofila (SPAD). Aos 90 dias após o plantio (campo) foram avaliados os incrementos na altura e no diâmetro do coleto e a relação altura/diâmetro das mudas. No segundo experimento em ambiente protegido, utilizando delineamento inteiramente ao acaso com cinco repetições de vinte mudas, com os seguintes tratamentos: T1: testemunha, T2: 8,0 μmol L-1 de JA e T3: 40 flexões caulinares. Foram mensuradas a taxa de assimilação líquida de CO2 (A), condutância estomática (gs), concentração interna de CO2 (Ci), taxa de transpiração da folha (E), eficiência do uso de água (WUE), eficiência intrínseca do uso de água (iWUE) e eficiência de carboxilação (Fc). O terceiro experimento em ambiente protegido foi utilizado delineamento inteiramente ao acaso com sete tratamentos (T1: testemunha; T2: 2,0 μmol L-1 de JA; T3: 4,0 μmol L-1 de JA; T4: 6,0 μmol L-1 de JA; T5: 8,0 μmol L-1 de JA; T6: 20 flexões; T7: 40 flexões) e cinco repetições de vinte mudas. Após a aplicação dos tratamentos foram avaliados o incremento na altura, diâmetro do coleto, teor de lignina do caule e raiz e rigidez flexural. As mudas rustificadas foram transplantadas a campo e aos 90 e 150 dias foram avaliados os incrementos na altura e diâmetro do caule. Os tratamentos com aplicação de JA e testemunha apresentaram maior incremento na altura e número de folhas durante a fase de rustificação e obtiveram maior incremento em altura e no diâmetro do coleto a campo. A dose de JA aplicada nas mudas foi insuficiente para alterar as respostas fotossintéticas em relação à testemunha. Estímulos mecânicos promoveram incremento da capacidade fotossintética máxima e máxima assimilação de CO2, mas externaram redução na eficiência do uso da água, ou seja, menor eficiência fotossintética quando comparado aos demais tratamentos. Para rigidez flexural, mudas submetidas a estímulos mecânicos apresentaram maior resistência de curvatura. Aplicações de JA acima de 6,0 μmol L-1 e estímulos mecânicos obtiveram incremento no teor de lignina no caule em mudas de eucalipto. Doses menores de JA e imposição de 20 flexões resultaram em mudas com aumento no incremento no diâmetro caule. A análise de trilha demonstrou que houve aumento na rigidez do caule acompanhado com o aumento no teor de lignina e que estes possuem um maior efeito direto inversamente proporcional com o incremento médio em altura e com o diâmetro do caule ao nível do solo. Portanto, a aplicação de flexões caulinares e ácido jasmônico foram capazes de alterar a concentração de lignina no caule, proporcionando maior rigidez flexural em mudas de eucalipto. Porém, essa menor flexura caulinar não se refletiu em maior qualidade da muda nas condições estudadas.

Orientador: Rodrigo Egydio Barreto / Resumo: A criação de algumas espécies de peixes tem como obstáculo a baixa motivação alimentar, sendo necessário investigar elementos que estimulem a alimentação. Dentre os procedimentos utilizados na tentativa de aumentar a motivação alimentar está o emprego de estimulantes alimentares. O pampo Trachinotus carolinus (Actinopterygii; Carangidae) possui características favoráveis à aqüicultura, tais como resistência ao stress e doenças, se adapta bem a sistemas intensivos e tolera ampla gama de salinidade e oxigênio dissolvido, porém apresenta baixo crescimento e eficiência alimentar. Nesse sentido, o objetivo deste estudo foi avaliar se o uso de estimulantes visuais e químicos de presas vivas (artêmia e tatuí) estimula a motivação alimentar do pampo e se o uso dessas pistas aumenta a ingestão de ração e ganho de peso, permitindo maior crescimento. Estímulos visuais e químicos, agindo conjuntamente, aumentam a motivação alimentar e a ingestão de ração em juvenis de pampo. Peixes submetidos a estimulantes de artêmia e tatuí ingeriram mais alimento, ganharam mais peso e obtiveram maior taxa de crescimento específico quando comparados aos controles (ração e água). Portanto, estímulos visuais e químicos de artêmia e tatuí podem ser eficientemente utilizados como estimulantes alimentares, promovendo maior crescimento em juvenis de pampo. / Doutor

O estudo dos efeitos de neurotransmissores e neuromoduladores em circuitos nervosos tradicionalmente consiste em observar o comportamento de um sistema, ou parte dele, quando exposto a concentrações constantes da droga, ignorando flutuações ou padrões temporais de liberação. Neste trabalho implementamos um protocolo dinâmico e dependente da atividade do próprio sistema nervoso, que permitiu estudar experimentalmente a influência da dinâmica de liberação nos efeitos que glutamato (Glu, 1 mM) e serotonina (5-HT, 10 mM) produzem no padrão emergente de um centro gerador de padrões (CPG). Os experimentos foram realizados no sistema nervoso estomatogástrico de Callinectes sapidus e Callinectes danae (CPG pilórico) durante sua operação normal in vitro, que pode ser caracterizada por sua frequência de burst, número de spikes/burst dos neurônios, duty cycle dos neurônios, etc. A partir da atividade de um dos neurônios do CPG, medida extracelularmente, um algoritmo baseado no protocolo dynamic clamp (interação em tempo real entre tecido nervoso vivo e simulação computacional) identifica em tempo real um padrão de atividade pré-escolhido e dispara um injetor de picolitros semelhante a um picospritzer®, aspergindo uma pequena quantidade de solução com a droga nas vizinhanças dos neurônios e sinapses que compõe o CPG, de onde é retirada por perfusão contínua de solução fisiológica. Assim, podemos comparar o comportamento emergente do CPG quando este é estimulado de maneira síncrona com sua atividade ou de maneira assíncrona, mas de forma que a mesma quantidade média de droga seja aspergida nos dois casos. Nossos resultados demonstram que um mesmo estímulo apresentado de duas maneiras diferentes, para um mesmo circuito nervoso, pode produzir respostas diferentes na mesma célula. O protocolo se mostrou mais eficiente em mostrar diferenças quando a atividade da droga ocorre em uma escala de tempo menor que aquela do comportamento do CPG. Novos estudos devem ser realizados com outros neutrotransmissores e moduladores tanto de ação ionotrópica quanto metabotrópica, para se adequar o protocolo aos diferentes tipos de substâncias. / Studying the effect of neurotransmitters and neuromodulators usually consists in observing the behavior of a system, or part of it, when exposed to stationary concentrations of the drugs that completely lack any time dependency. Here we describe a protocol that we developed to study the changes of the emerging rhythmic pattern of a Central Pattern Generator (CPG) due to the effects of the aplications dynamics of tiny puffs of glutamate (Glu, 1mM) or serotonin (5-HT, 10 mM) to the neurons and their neuropil. We experimented on the stomatogastric nervous system of Callinectes sapidus and Callinectes danae (pyloric CPG) during normal operation in vitro, that was characterized using bursting frequency, neurons number of spikes/burst, their duty cycle, etc. From the extracelular activity of one of the CPG neurons, a dynamic clamp based protocol (real time interaction between living nervous tissue and computer simulation) detected in real time a given pattern of activity present in a burst and triggered a picospritzer to puff a small amount of solution with the drug in the neighborhood of the neurons and synapses of the CPG, from where it was washed through constant perfusion of normal saline. Such arrangement allowed us to address what are the differences on the emerging CPG behavior when the stimuli was activity synchronous or asynchronous, but with the same mean amount of drug delivered in both cases. In general, our results showed that the same stimulus presented in different ways to the same nervous circuit may generate different responses even in a cell level. Finally, the protocol proved to be more efficient when the drug activity time scale is smaller than the time scale of the CPG bursting behavior. In the future we should work with other neuromodulators and neurotransmiters to improve the protocol.

O estudo dos efeitos de neurotransmissores e neuromoduladores em circuitos nervosos tradicionalmente consiste em observar o comportamento de um sistema, ou parte dele, quando exposto a concentrações constantes da droga, ignorando flutuações ou padrões temporais de liberação. Neste trabalho implementamos um protocolo dinâmico e dependente da atividade do próprio sistema nervoso, que permitiu estudar experimentalmente a influência da dinâmica de liberação nos efeitos que glutamato (Glu, 1 mM) e serotonina (5-HT, 10 mM) produzem no padrão emergente de um centro gerador de padrões (CPG). Os experimentos foram realizados no sistema nervoso estomatogástrico de Callinectes sapidus e Callinectes danae (CPG pilórico) durante sua operação normal in vitro, que pode ser caracterizada por sua frequência de burst, número de spikes/burst dos neurônios, duty cycle dos neurônios, etc. A partir da atividade de um dos neurônios do CPG, medida extracelularmente, um algoritmo baseado no protocolo dynamic clamp (interação em tempo real entre tecido nervoso vivo e simulação computacional) identifica em tempo real um padrão de atividade pré-escolhido e dispara um injetor de picolitros semelhante a um picospritzer®, aspergindo uma pequena quantidade de solução com a droga nas vizinhanças dos neurônios e sinapses que compõe o CPG, de onde é retirada por perfusão contínua de solução fisiológica. Assim, podemos comparar o comportamento emergente do CPG quando este é estimulado de maneira síncrona com sua atividade ou de maneira assíncrona, mas de forma que a mesma quantidade média de droga seja aspergida nos dois casos. Nossos resultados demonstram que um mesmo estímulo apresentado de duas maneiras diferentes, para um mesmo circuito nervoso, pode produzir respostas diferentes na mesma célula. O protocolo se mostrou mais eficiente em mostrar diferenças quando a atividade da droga ocorre em uma escala de tempo menor que aquela do comportamento do CPG. Novos estudos devem ser realizados com outros neutrotransmissores e moduladores tanto de ação ionotrópica quanto metabotrópica, para se adequar o protocolo aos diferentes tipos de substâncias. / Studying the effect of neurotransmitters and neuromodulators usually consists in observing the behavior of a system, or part of it, when exposed to stationary concentrations of the drugs that completely lack any time dependency. Here we describe a protocol that we developed to study the changes of the emerging rhythmic pattern of a Central Pattern Generator (CPG) due to the effects of the aplications dynamics of tiny puffs of glutamate (Glu, 1mM) or serotonin (5-HT, 10 mM) to the neurons and their neuropil. We experimented on the stomatogastric nervous system of Callinectes sapidus and Callinectes danae (pyloric CPG) during normal operation in vitro, that was characterized using bursting frequency, neurons number of spikes/burst, their duty cycle, etc. From the extracelular activity of one of the CPG neurons, a dynamic clamp based protocol (real time interaction between living nervous tissue and computer simulation) detected in real time a given pattern of activity present in a burst and triggered a picospritzer to puff a small amount of solution with the drug in the neighborhood of the neurons and synapses of the CPG, from where it was washed through constant perfusion of normal saline. Such arrangement allowed us to address what are the differences on the emerging CPG behavior when the stimuli was activity synchronous or asynchronous, but with the same mean amount of drug delivered in both cases. In general, our results showed that the same stimulus presented in different ways to the same nervous circuit may generate different responses even in a cell level. Finally, the protocol proved to be more efficient when the drug activity time scale is smaller than the time scale of the CPG bursting behavior. In the future we should work with other neuromodulators and neurotransmiters to improve the protocol.

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:40:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Michelle Cristina Ajala.pdf: 1688545 bytes, checksum: a051a1a3a4033f0e90396ddde46ee6e1 (MD5) Previous issue date: 2015-06-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The last phase of seedling production, the hardening is a technique used in nurseries which aims to expose the seedlings to more severe conditions than those submitted in the growth phase, in order to prepare them for the field. Based on the above, the aim of the present study was to evaluate the effect of the application of ethylene and bending stem in two native forest species (at different times) Cordia trichotoma and Guazuma ulmifolia. The treatments consisted in the application of stem pushups 0, 10, 20 and 40 daily crunches and sprays (0 to 4) with ethylene in a factorial design in two native species. Thus, this study was subdivided into three parts. In the first part were evaluated morphological parameters of the seedlings and their survival. The variables were height of the aerial part of the plant, stem diameter, number of leaves, SPAD index and dry mass of seedlings. In the second part, we evaluated the concentration of soluble carbohydrates in leaves, cell damage through the loss of root electrolytes and the lignin content in stems of both species. In the third part evaluated the concentration of macronutrients N, P, K, Ca and Mg. The evaluated morphological parameters was found that the G.ulmifolia species decreased in the increase in height of more than 60% and 35% in diameter collect when subjected to bending stem compared to control seedlings. The most significant results occurred with 20 pushups shoot. C. trichotoma a significant decrease in the increase in height, and the application of these factors together decreased the survival of the species. In physiological parameters G. ulmifolia species showed a linear reduction in the lignin content and increased loss of electrolytes root (REL) when subjected to bending. The concentration of carbohydrates increased by 55% when combined with stem bending factors and spraying with ethylene. The species C. trichotoma there was a reduction in the concentration of lignin, REL and carbohydrates (with the application of stem crunches and spraying with ethylene). Concerning macronutrients, it was found to be reduced to N concentration (13.2%) and P (20%) in G. ulmifolia stems, while K increased with up to 23 ethylene flexing when applied. The concentration of Ca and Mg showed an increase with 26 pushups shoot. Since the application ethylene concentration decreased by 21.6% and 14% for calcium and magnesium G. ulmifolia respectively. The species C. trichotoma revealed a linear increase in the concentration of N in stems of seedlings mechanically stimulated and sprayed with ethylene. In roots, the increase was 45% flexed 10 times a day with ethylene seedlings application. The calcium content was reduced in the stems and roots when compared to control seedlings in both treatments stem and ethylene flexing C. trichotoma. The magnesium concentration was high in no spray seedlings with ethylene until stem 25 flexing while plants sprayed linearly reduced Mg concentration is increased as the stem flexing in said species / A última fase da produção de mudas, a rustificação, é uma técnica adotada em viveiros que visa expor as mudas a condições mais severas que aquelas submetidas na fase de crescimento, com o objetivo de prepará-las para o campo. Com base no exposto, objetivou-se no presente trabalho avaliar, o efeito da aplicação de etileno e flexão caulinar em duas espécies florestais nativas (em épocas distintas) Cordia trichotoma e Guazuma ulmifolia. Os tratamentos consistiram na aplicação de flexões caulinares de 0, 10, 20 e 40 flexões diárias e pulverizações (0 e 4) com etileno em esquema fatorial em duas espécies florestais nativas. Assim, subdividiu-se este trabalho em três partes. Na primeira parte, avaliaram-se parâmetros morfológicos das mudas e sua sobrevivência. As variáveis analisadas foram: altura da parte aérea do vegetal, diâmetro de colo, número de folhas, índice SPAD e massa seca das mudas. Na segunda parte, avaliou-se a concentração de carboidratos solúveis totais em folhas, o dano celular através da perda de eletrólitos radiculares e a concentração de lignina em caules de ambas as espécies. Na terceira parte, avaliou-se a concentração dos macronutrientes N, P, K, Ca e Mg. Nos parâmetros morfológicos avaliados constatou-se que a espécie G.ulmifolia apresentou redução no incremento em altura superior a 60 % e 35 % no diâmetro de coleto quando submetida à flexão caulinar comparado a mudas controle. Os resultados mais expressivos ocorreram com 20 flexões caulinares. Em C. trichotoma ocorreu uma diminuição significativa no incremento em altura, e a aplicação destes fatores em conjunto diminuiu a sobrevivência da espécie. Nos parâmetros fisiológicos a espécie G. ulmifolia apresentou uma redução linear na concentração de lignina e aumento na perda de eletrólitos radiculares (PER) quando submetida a flexões. A concentração de carboidratos aumentou em 55% quando associado a fatores flexão caulinar e pulverização com etileno. Na espécie C. trichotoma houve redução na concentração de lignina, PER e carboidratos (com a aplicação de flexões caulinares e pulverizações com etileno). Quanto aos macronutrientes, verificou-se que foi reduzida a concentração de N (13,2 %) e P (20 %) em caules de G. ulmifolia, enquanto o K aumentou com até 23 flexões quando aplicado o etileno. A concentração de Ca e Mg mostrou um acréscimo com 26 flexões caulinares. Já a aplicação de etileno diminuiu a concentração em 21,6 % e 14 % para cálcio e magnésio G. ulmifolia respectivamente. A espécie C. trichotoma revelou um aumento linear na concentração de N em caules em mudas estimuladas mecanicamente e pulverizadas com etileno. Em raízes, esse aumento foi de 45 % em mudas flexionadas 10 vezes ao dia com aplicação de etileno. O teor de cálcio foi reduzido em caules e raízes quando comparadas à mudas controle em ambos os tratamentos com flexões caulinares e etileno em C. trichotoma. A concentração de magnésio foi elevada em mudas sem pulverização com etileno em até 25 flexões caulinares, enquanto, mudas pulverizadas reduziram linearmente a concentração de Mg a medida que se elevaram as flexões caulinares na referida espécie