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Phytophthora nicotianae: ação de meios de cultura e da qualidade da luz no crescimento e esporulação e aspectos fisiológicos e bioquímicos da interação com porta-enxertos cítricos / Phytophthora nicotianae: action of culture media and light quality on growth and sporulation and physiological and biochemical aspects of the interaction with citrus rootstocks

Santos, Paulo Cézar das Mercês 03 November 2015 (has links)
A citricultura brasileira apresenta números bastante significativos e expressivos, refletindo a grande importância social e econômica que essa atividade agrícola e industrial tem para a economia do país. O Brasil se destaca como o maior produtor de laranja do mundo. As plantas cítricas podem ser produzidas e multiplicadas de várias formas e a enxertia é a forma de propagação vegetativa mais utilizada comercialmente no Brasil. Dentre os porta-enxertos mais empregados, sobressaem-se o citrumeleiro Swingle e a tangerineira Sunki. Apesar das vantagens presentes nesses dois genótipos, a produção deles está sendo limitada por doenças causadas por fungos e estraminipilas. Em citros, as diversas espécies de Phytophthora são responsáveis pelas doenças gomose e podridões, principalmente de radicelas. P. nicotianae é a espécie que mais afeta as plantas cítricas no Brasil. Não obstante a grande importância de P. nicotianae para os porta-enxertos, alguns mecanismos de resistência ou susceptibilidade ainda requerem mais investigações cientificas. O presente trabalho visa a elucidação de alguns mecanismos de resistência dos citros a P. nicotianae, por meio de estudos fisiológicos e bioquímicos dos porta-enxertos, além da ação de meios de cultura e da qualidade da luz no estudo da fisiologia desse estraminipila. Para isso realizou-se a detecção de alguns equivalentes de compostos fenólicos através da técnica HPLC e o comportamento do genótipo resistente frente à possível inibição da síntese de compostos fenólicos através do tratamento das raízes do porta-enxerto Swingle com Pro-Ca; avaliou-se a atração de zoósporos de P. nicotianae por exsudatos radiculares provenientes dos dois porta-enxertos com o uso de uma armadilha adaptada; verificou-se o comportamento do zoósporo, a motilidade e a zoosporogênese frente à ação de vários compostos fenólicos e testou-se a ação de diferentes meios de culturas e da qualidade da luz no crescimento micelial e na esporulação de P. nicotianae. Os resultados revelaram que a tangerineira Sunki possui maiores quantidades de equivalentes em apigenina que o citrumeleiro Swingle nos dois períodos de avaliação, para o HPLC. O porta-enxerto resistente apresentou mais equivalentes de ácido clorogênico que o genótipo susceptível. Quanto ao Pro-Ca, os equivalentes de compostos fenólicos em raízes de plântulas do citrumeleiro Swingle não diferiram daquelas plantas tratadas com água. O Pro-Ca não inibiu e não desativou a síntese de compostos fenólicos. O uso do anticorpo contra a elicitina \"α-plurivorina\" teve resultados intermediários no consumo de água por plântulas de tangerineira Sunki e a atividade zoosporicida dos compostos fenólicos apresentou resultados variáveis no comportamento da motilidade de zoósporos. Os compostos fenólicos escopoletina e tricetinpentametoxi conseguiram paralisar a motilidade e proporcionaram as menores porcentagens de zoosporogênese. O meio de cultura AA permitiu a maior TCMD, seguido de CA e V8-CaCO3-Ágar. Os maiores valores de esporulação foram encontrados nesses dois últimos meios, respectivamente. Todas as faixas de luzes (e a ausência de luz) estudadas no presente trabalho podem ser avaliadas para o crescimento micelial, porém o tratamento claro foi aquele que mais induziu a esporulação de zoósporos de P. nicotianae. / The Brazilian citrus industry has very significant and expressive numbers, reflecting the great social and economic importance of this industrial and agricultural activity has for the economy. Brazil stands out as the world\'s largest orange producer. Citrus plants can be produced and multiplied in various ways and the bud is the form of vegetative propagation more commercially used in Brazil. Among the most commonly used rootstocks, stand up the Swingle citrumelo and Sunki mandarin. Despite the advantages these two genotypes present, their production is being limited by diseases caused by fungi and estraminipilas. In citrus, all species of Phytophthora are responsible for diseases gummosis and fibrous root rot, especially. P. nicotianae is the kind that affects citrus plants in Brazil. Regardless of the great importance of P. nicotianae for rootstocks, some mechanisms of resistance or susceptibility still require further scientific investigation. This study aims to elucidate some mechanisms of resistance of citrus to P. nicotianae, through physiological and biochemical studies of rootstocks, beyond of action culture media and quality of light in the physiological study of this estraminipila. To this was carried out to detect certain equivalent of phenolic compounds by HPLC and genotype resistant behavior against the possible inhibition of the synthesis of phenolic compounds by treatment of the roots of Swingle rootstock with Pro-Ca; evaluated the zoospores attraction P. nicotianae by exudates from the two rootstocks using an adapted trap; it was the zoospore behavior, motility and zoosporogenesis to the action of various phenolic compounds and tested the action of different culture media and quality of light on mycelial growth and sporulation of P. nicotianae. The results for HPLC revealed that Sunki mandarin has larger amounts of apigenin equivalents Swingle citrumelo in that the two periods. The sturdy rootstock had more chlorogenic acid equivalents of the susceptible genotype. As for the Pro-Ca equivalent of phenolic compounds in Swingle seedling roots not differ from those plants treated with water. The Pro-Ca not inhibited and not disabled the synthesis of phenolic compounds. The use of the antibody against elicitin \"α-plurivorin\" had intermediate results in water consumption by Sunki mandarin seedlings and zoosporicide activity of phenolic compounds showed variable results in the behavior of zoospore motility. The scopoletin and tricetinpentametoxi phenolic compounds managed to paralyze the motility and provided the smallest percentages of zoosporogenesis. The culture medium AA allowed greater DMGR, followed by CA and V8-CaCO3-Agar. The highest sporulation values were found in the last two media, respectively. All lights tracks (and the absence of light) studied in this work can be evaluated for mycelial growth, but the treatment light was that more induced sporulation of zoospores of P. nicotianae.
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Phytophthora nicotianae: ação de meios de cultura e da qualidade da luz no crescimento e esporulação e aspectos fisiológicos e bioquímicos da interação com porta-enxertos cítricos / Phytophthora nicotianae: action of culture media and light quality on growth and sporulation and physiological and biochemical aspects of the interaction with citrus rootstocks

Paulo Cézar das Mercês Santos 03 November 2015 (has links)
A citricultura brasileira apresenta números bastante significativos e expressivos, refletindo a grande importância social e econômica que essa atividade agrícola e industrial tem para a economia do país. O Brasil se destaca como o maior produtor de laranja do mundo. As plantas cítricas podem ser produzidas e multiplicadas de várias formas e a enxertia é a forma de propagação vegetativa mais utilizada comercialmente no Brasil. Dentre os porta-enxertos mais empregados, sobressaem-se o citrumeleiro Swingle e a tangerineira Sunki. Apesar das vantagens presentes nesses dois genótipos, a produção deles está sendo limitada por doenças causadas por fungos e estraminipilas. Em citros, as diversas espécies de Phytophthora são responsáveis pelas doenças gomose e podridões, principalmente de radicelas. P. nicotianae é a espécie que mais afeta as plantas cítricas no Brasil. Não obstante a grande importância de P. nicotianae para os porta-enxertos, alguns mecanismos de resistência ou susceptibilidade ainda requerem mais investigações cientificas. O presente trabalho visa a elucidação de alguns mecanismos de resistência dos citros a P. nicotianae, por meio de estudos fisiológicos e bioquímicos dos porta-enxertos, além da ação de meios de cultura e da qualidade da luz no estudo da fisiologia desse estraminipila. Para isso realizou-se a detecção de alguns equivalentes de compostos fenólicos através da técnica HPLC e o comportamento do genótipo resistente frente à possível inibição da síntese de compostos fenólicos através do tratamento das raízes do porta-enxerto Swingle com Pro-Ca; avaliou-se a atração de zoósporos de P. nicotianae por exsudatos radiculares provenientes dos dois porta-enxertos com o uso de uma armadilha adaptada; verificou-se o comportamento do zoósporo, a motilidade e a zoosporogênese frente à ação de vários compostos fenólicos e testou-se a ação de diferentes meios de culturas e da qualidade da luz no crescimento micelial e na esporulação de P. nicotianae. Os resultados revelaram que a tangerineira Sunki possui maiores quantidades de equivalentes em apigenina que o citrumeleiro Swingle nos dois períodos de avaliação, para o HPLC. O porta-enxerto resistente apresentou mais equivalentes de ácido clorogênico que o genótipo susceptível. Quanto ao Pro-Ca, os equivalentes de compostos fenólicos em raízes de plântulas do citrumeleiro Swingle não diferiram daquelas plantas tratadas com água. O Pro-Ca não inibiu e não desativou a síntese de compostos fenólicos. O uso do anticorpo contra a elicitina \"α-plurivorina\" teve resultados intermediários no consumo de água por plântulas de tangerineira Sunki e a atividade zoosporicida dos compostos fenólicos apresentou resultados variáveis no comportamento da motilidade de zoósporos. Os compostos fenólicos escopoletina e tricetinpentametoxi conseguiram paralisar a motilidade e proporcionaram as menores porcentagens de zoosporogênese. O meio de cultura AA permitiu a maior TCMD, seguido de CA e V8-CaCO3-Ágar. Os maiores valores de esporulação foram encontrados nesses dois últimos meios, respectivamente. Todas as faixas de luzes (e a ausência de luz) estudadas no presente trabalho podem ser avaliadas para o crescimento micelial, porém o tratamento claro foi aquele que mais induziu a esporulação de zoósporos de P. nicotianae. / The Brazilian citrus industry has very significant and expressive numbers, reflecting the great social and economic importance of this industrial and agricultural activity has for the economy. Brazil stands out as the world\'s largest orange producer. Citrus plants can be produced and multiplied in various ways and the bud is the form of vegetative propagation more commercially used in Brazil. Among the most commonly used rootstocks, stand up the Swingle citrumelo and Sunki mandarin. Despite the advantages these two genotypes present, their production is being limited by diseases caused by fungi and estraminipilas. In citrus, all species of Phytophthora are responsible for diseases gummosis and fibrous root rot, especially. P. nicotianae is the kind that affects citrus plants in Brazil. Regardless of the great importance of P. nicotianae for rootstocks, some mechanisms of resistance or susceptibility still require further scientific investigation. This study aims to elucidate some mechanisms of resistance of citrus to P. nicotianae, through physiological and biochemical studies of rootstocks, beyond of action culture media and quality of light in the physiological study of this estraminipila. To this was carried out to detect certain equivalent of phenolic compounds by HPLC and genotype resistant behavior against the possible inhibition of the synthesis of phenolic compounds by treatment of the roots of Swingle rootstock with Pro-Ca; evaluated the zoospores attraction P. nicotianae by exudates from the two rootstocks using an adapted trap; it was the zoospore behavior, motility and zoosporogenesis to the action of various phenolic compounds and tested the action of different culture media and quality of light on mycelial growth and sporulation of P. nicotianae. The results for HPLC revealed that Sunki mandarin has larger amounts of apigenin equivalents Swingle citrumelo in that the two periods. The sturdy rootstock had more chlorogenic acid equivalents of the susceptible genotype. As for the Pro-Ca equivalent of phenolic compounds in Swingle seedling roots not differ from those plants treated with water. The Pro-Ca not inhibited and not disabled the synthesis of phenolic compounds. The use of the antibody against elicitin \"α-plurivorin\" had intermediate results in water consumption by Sunki mandarin seedlings and zoosporicide activity of phenolic compounds showed variable results in the behavior of zoospore motility. The scopoletin and tricetinpentametoxi phenolic compounds managed to paralyze the motility and provided the smallest percentages of zoosporogenesis. The culture medium AA allowed greater DMGR, followed by CA and V8-CaCO3-Agar. The highest sporulation values were found in the last two media, respectively. All lights tracks (and the absence of light) studied in this work can be evaluated for mycelial growth, but the treatment light was that more induced sporulation of zoospores of P. nicotianae.
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FIXAÇÃO BIOLÓGICA DE NITROGÊNIO E MICORRÍZAÇÃO EM GRAMÍNEAS DOS CAMPOS SULINOS / BIOLOGICAL NITROGEN FIXATION AND MYCORRHIZATION IN GRASSES OF THE SOUTHERN FIELDS

Marques, Anderson Cesar Ramos 10 February 2014 (has links)
Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária / The knowledge of the level of association that occurs between diazotrophic bacteria and fungi arbusculares mycorrhizae (AMF) in grassland ecosystems may be important for the understanding of the changes caused by the addition of fertilizers containing phosphorus (P) and nitrogen (N), in the production and botanical composition of natural pastures. The objective of this study was to evaluate. (a) the occurrence of three genera of diazotrophic bacterial in the root system under fertilization with N and P, and determine the contribution of N via BNF, and (b) evaluate the behavior of the association between AMF and native grasses. Four most abundant grasses in natural grasslands of the Southern Campos in Rio Grande do Sul , Axonopus affinis, Paspalum notatum, Andropogon lateralis and Aristida laevis were grown in pots of 5 kg, in a greenhouse, two studies being conducted (A e B ). In A, two treatments were applied: 50 mg kg-1 soil P and 100 mg kg-1 of soil N (NP) and a control, being evaluated, the number of diazotrophic bacteria of the genera Azotobacter, Azospirillum and Herbaspirillum, and the contribution of BNF was determined by the technique of natural 15N abundance. In B, the treatments consisted of applying 50 mg kg-1 soil P (P), application of 50 mg kg-1 soil P and 100 mg kg-1 of soil N (NP), and a control, in both treatments mycorrhizal colonization was determined. For A, A. laevis demonstrate to be more dependent on biological N fixation than the other species. The grass P. notatum compared with other species demonstrated to be more efficient to absorb available soil N. The dry matter accumulation in shoots of the native species was higher with the application of NP. In B the mycorrhizal colonization was similar between the control, P and NP to the roots of A. lateralis and A. laevis, thus presenting a greater dependence on the mycorrhizal association. Differently, in A. affinis and P. notatum, the mycorrhizal colonization was lower when subjected to fertilization with P and NP, thus presenting a lower dependence. It is concluded for A that fertilization with N and P reduces diazotrophic colonization, increasing the production of dry matter and N content of the tissue. A. laevis showed the highest contribution of biological nitrogen fixation, since P. notatum showed higher N accumulation in soil. In relation to B, A. laevis and A. lateralis have a higher dependence on the mycorrhizal than A. affinis and P. notatum. / O conhecimento do nível de associação que ocorre entre bactérias diazotróficas e fungos micorrízicos arbusculares (FMA) nos ecossistemas campestres, pode ser importante para a o entendimento das alterações provocadas pela adição de fertilizantes, contendo fósforo (P) e nitrogênio (N), na produção e na composição botânica das pastagens naturais. O objetivo do presente trabalho foi avaliar (a) a ocorrência de três gêneros de bactérias diazotróficas no sistema radicular sob fertilização com N e P, e determinar a contribuição de N via FBN, e (b) avaliar o comportamento da associação entre FMAs e gramíneas nativas. Foram utilizadas quatro gramíneas de maior abundância nas pastagens naturais dos Campos Sulinos no Rio Grande do Sul, Axonopus affinis, Paspalum notatum, Andropogon lateralis e Aristida laevis, cultivadas em casa de vegetação, sendo conduzidos dois estudos (A e B). Em A, foram aplicados dois tratamentos: 50 mg kg-1 de solo de P + 100 mg kg-1 de N solo (NP) e uma testemunha, sendo avaliados, o número de bactérias diazotróficas dos gêneros Azotobacter, Azospirillum e Herbaspirillum, e a contribuição da FBN através da técnica da abundância natural de 15N. Em B, os tratamentos consistiram na aplicação de 50 mg kg-1 de solo de P (P); aplicação de 50 mg kg-1 de solo de P + 100 mg kg-1 de N solo (NP), e uma testemunha, em ambos foi determinada a colonização micorrízica. A espécie A. laevis demonstrou ser mais dependente da fixação biológica de N que as demais espécies. A espécie P. notatum em comparação as demais espécies, demostrou ser mais hábil em absorver o N disponível no solo. A matéria seca acumulada da parte aérea das espécies nativas foi maior com a aplicação de NP. A colonização micorrízica foi semelhante entre a testemunha, P e NP para as raízes de A. lateralis e A. laevis, apresentando assim uma maior dependência da associação micorrízica. Diferentemente, nas espécies A. affinis e P. notatum, a colonização micorrízica foi menor quando submetidas a adubação com P e NP, apresentando assim uma menor dependência. Conclui-se assim, que a adubação com N e P reduz a colonização de bactérias diazotróficas, aumentando a produção de matéria seca e teor de N no tecido. A. laevis apresentou a maior contribuição da fixação biológica de nitrogênio, já P. notatum apresentou maior acúmulo de N do solo. As espécies A. laevis e A. lateralis apresentam maior dependência da micorrização que as espécies A. affinis e P. notatum.

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