Avaliou-se a patogenicidade de diversas espécies de fungos entomopatogênicos a ninfas de 2º a 4º ínstares do psilídeo Diaphorina citri. Assim foram feitos bioensaios com Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Lecanicillium muscarum, L. longisporum, Paecilomyces fumosoroseus, P. farinosus, Syngliocladium sp. na concentração de 5x107 conídios/mL para cada patógeno, com exceção de Hirsutella thompsonii que foi aplicado na concentração de 2,8x107 conídios/mL. Utilizou-se mudas de murta, Murraya paniculata, infestadas com ninfas do inseto que foram pulverizadas com as suspensões conidiais. Os fungos B. bassiana, M. anisopliae, H. thompsonii, L. muscarum e P. fumosorosus foram patogênicos para as ninfas do psilídeo. O isolado mais promissor foi o Esalq-PL63, de B. bassiana, que causou mortalidade de aproximadamente 72% das ninfas, sete dias após a inoculação. Esse fungo também afetou o processo de metamorfose das ninfas. A concentração letal média (CL50) foi calculada em 2,3 x 107 conídios/mL. O ciclo de infecção de B. bassiana sobre as ninfas do psilídeo foi estudado pulverizando-se a suspensão de 3x108 conídios/mL do fungo e, em seguida, observado em microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura, nos intervalos de tempo de 0, 24, 48, 72 e 168 horas após a inoculação. Constatou-se que o referido patógeno não conseguiu completar o desenvolvimento no corpo do hospedeiro, uma vez que a fase de conidiogênese é inibida, provavelmente, pela presença no interior do inseto de bactérias antagônicas ao seu desenvolvimento. O isolado Esalq-PL63 é um promissor agente de controle microbiano de ninfas de D. citri por afetar sua fisiologia e causar em altos índices de mortalidade. / It was evalueted the patogenicity of several species of entomopathogenic fungi against 2nd to 4th instar of Diaphorina citri. For the bioassays with Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Lecanicillium muscarum, L. longisporum, Paecilomyces fumosoroseus, P. farinosus, Syngliocladium sp. a concentration of 5x107 conidia.mL-1 was used. For the Hirsutella thompsonii strain the concentration used was 2.8x107 conidia.mL-1. Seedlings of orange jasmine, Murraya paniculata, infested with nymphs of the insect were sprayed with the conidia suspensions. The fungi B. bassiana, M. anisopliae, H. thompsonii, L. longisporum and P. fumosoroseus were pathogenic to nymphs. The strain of B. bassiana (Esalq-PL63) was the most pathogenic causing 72% mortality after seven days of inoculation. This fungus also affected the process of nymph molting. The letal concentration (LC50) calculated was 2.3x107 conidia.mL-1. To prove mortality the pathogen was reisolated in media culture (AN, MC and BDA) and besides, observed under microscope examination. The infection cycle of B. bassiana in nymphs was studied after inoculation of 3x108 conidia.mL-1. This process were evaluated with the use of a light microscope and an electron scan microscope, after 0, 24, 48, 72 and 168 hours of conidia sprayed. This strain did not complete the development in the host because the conidiogenesis was inhibited, probably because it was found antagonistic bacteria into the host. However, this isolate is a potencial microbial control agent of nymphs of D. citri, affecting its physiology and causing high mortality.

A cultura dos citros é considerada de muita importância para a economia brasileira. Atualmente, o inseto Diaphorina citri tem sido considerado como o principal problema dessa cultura, por ser vetor da bactéria Candidatus Liberibacter asiaticus (?-Proteobacteria) causadora da doença conhecida como Greening. Além de D. citri, a cultura dos citros apresenta inúmeras espécies de insetos e ácaros pragas que reduzem a qualidade e a produção dos frutos e requerem medidas de controle. O controle das espécies pragas tem sido realizado quase exclusivamente por aplicações frequentes de pesticidas químicos. Recentemente, isolados dos fungos entomopatogênicos Isaria fumosorosea e Beauveria bassiana foram selecionados para o controle de D. citri. Nesse estudo investigou-se a patogenicidade destes isolados associados a adjuvantes no controle de ninfas e adultos dos insetos Diaphorina citri, Toxoptera citricida, Aleurocanthus woglumi, Praelongorthezia praelonga e adultos dos ácaros Brevipalpus phoenicis e Panonychus citri em condições de laboratório. Notou-se que os fungos estudados foram patogênicos para quase todas as espécies de pragas, com a execção do fungo B. bassiana para ninfas e adultos de P. praelonga. As maiores mortalidade provocadas pelos fungos entomopatogênicos foram obtidas para ninfas e adultos de D. citri (>86% e 55,7%, respectivamente) e T. citricida (>90% e 90,8%, respectivamente), onde também foi encontrado o maior nível de esporulação por indivíduo. Essas duas espécies pragas foram selecionadas para os ensaios de transmissão horizontal, onde foi avaliada a transferência de conídios dos fungos entomopatogênicos entre indivíduos esporulados e não infectados. Nos experimentos de laboratório foi observado que I. fumosorosea e B. basssiana apresentaram transmissão horizontal entre cadáveres e adultos não infectados de D. citri (intra-específica) e adultos de T. citricida para D. citri (inter-específica). Os mesmos resultados foram obtidos nos experimentos em semi-campo com adultos de D. citri. Podemos concluir que os fungos entomopatogênicos I. fumosorosea e B. bassiana apresentam potencial como agentes de controle de D. citri, T. citricida, A. woglumi, B. phoenicis, P. citri. A transmissão horizontal dos fungos apartir de T. citricida e D. citri infectados para adultos sadios de D. citri pode contribuir para o controle desta praga em campo. / The citrus crops are considered of great importance to the Brazilian economy. Currently, the insect Diaphorina citri is considered as the major pest of this crop, as a vector of the bacterium Candidatus Liberibacter asiaticus (? - Proteobacteria) causing the disease known as Greening. Besides D. citri, the orange crop has numerous species of insect and mites pests that reduce the quality and yield of fruits and require control. The control of pest species is carried out almost exclusively by frequent applications of chemical pesticides. Recently, isolates of the entomopathogenic fungi Isaria fumosorosea and Beauveria bassiana were selected for the control of D. citri. This study investigated the pathogenicity of the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana and Isaria fumosorosea associated adjuvants on nymphs and adults of the insects Diaphorina citri, Toxoptera citricida, Aleurocanthus woglumi, Praelongorthezia praelonga and adult mites and B. phoenicis, Panonychus citri in laboratory conditions. The fungi studied were pathogenic to almost all pests species, with exception of the fungus B. bassiana against nymphs and adults of P. praelonga. The highest mortality caused by the entomopathogenic fungi were obtained for nymphs and adults of D. citri (> 86% and 55.7%, respectively) and T. citricida (> 90% and 90.8%, respectively), where we also found the highest level of sporulation per individual. These two pest species were selected to test horizontal transmission, which evaluated the transmission of disease between sporulated and healthy individuals. In the laboratory experiments, we observed that I. fumosorosea and B. basssiana showed horizontal transmission between cadavers and healthy adults of D. citri (intraspecific) and adults of T. citricida to D. citri (interspecific). Similar results were obtained in experiments in semi-field conditions with adults of D. citri. The results show that the potential of the entomopathogenic fungi I. fumosorosea and B. bassiana to control D. citri, T. citricida, A. woglumi, B. phoenicis, P. citri. Horizontal transmission of the disease from infected T. citricida and D. citri to health adults of D. citri may improve the control of D. citri in fields.

Dentre 45 isolados de Hyphomycetes testados, oito de Beauveria bassiana e quatro de Metarhizium anisopliae causaram em Tetranychus urticae, mortalidades superiores a 80 e 90%, respectivamente, cinco dias após a inoculação na concentração de 5x10 7 conídios/mL. Hirsutella sp. atingiu 73% de mortalidade na concentração de 1,7x10 7 conídios/mL. Entre 80 a 100% dos cadáveres de ácaros colonizados pelos isolados de B. bassiana e M. anisopliae apresentavam, internamente, cristais de cálcio. Conídio aéreo, blastósporo e célula de levedura de cinco isolados B. bassiana foram patogênicos a esta praga. Diferenças significativas (P ³ 0,05) para CL50 e coeficiente angular entre os isolados e entre as estruturas infectivas foram observadas. Os valores da CL50 variaram de 4,95x10 6 a 8,21x10 7 estruturas infectivas/mL. Não houve diferença significativa entre as estruturas infectivas para os dois parâmetros avaliados, contudo, houve diferenças significativas para a CL50 entre as estruturas infectivas em um mesmo isolado de B. bassiana. Três formulações de fungicidas, 24 de inseticidas e/ou acaricidas foram compatíveis com B. bassiana, sendo formulados com as seguintes moléculas: propamocarb hidrocloreto, enxofre, abamectin, acefato, acetamiprid, betacyflutrin, bifentrina, ciromazina, deltametrina, diafentiuron, diflubenzuron, dimetoato, fenpropatrina, fenpyroximate, fenvalerate, imidacloprid, metamidofós, propargite, tebufenozide e triclorfon. Houve grande variação na toxicidade dos produtos dentro de cada grupo químico e produtos formulados com a mesma molécula química. B. bassiana foi eficiente no controle de T. urticae em crisântemo (Dendranthema grandiflora) cultivado em estufa, quando pulverizado na concentração de 2x10 8 conídios/mL. O controle microbiano foi superior ao proporcionado pelo controle químico utilizado na propriedade agrícola. Efetuando-se quatro pulverizações do fungo em um período de 14 dias, a densidade reduziu de 1,8 para 0,1 ácaro/folha. Na cultura do morango (Fragaria spp.) a eficiência de B. bassiana foi inferior ao crisântemo, com densidade média de ácaros ao longo de 21 dias de avaliação para as concentrações 1x10 8 e 5x10 7 conídios/mL de 13 ácaros/folíolo, contra 43 ácaros/folíolo nas parcelas não tratadas. As variedades de morango Campinas e Princesa Isabel foram as que apresentaram as menores densidades do ácaro, contudo, não houve evidência de que estas variedades interferiram na eficiência de controle da praga por B. bassiana. Assim, M. anisopliae, B. bassiana e Hirsutella sp. foram os fungos mais promissores para serem formulados como micoacaricidas para o controle de T. urticae. / Among 45 isolates of hyphomycetes tested against Tetranychus urticae, 8 Beauveria bassiana and 4 Metarhizium anisopliae isolates caused mortality > 80 and 90%, respectively, 5 days after inoculation with 5x10 7 conidia/mL. Hirsutella sp. caused 73% mortality at a concentration of 1.7x10 7 conidia/mL. Eighty to 100% of cadavers infected by B. bassiana or M. anisopliae isolates had calcium crystals inside their bodies. Conidia, blastospores and yeastlike cells of five B. bassiana isolates were pathogenic against this pest. Significant differences (P ³ 0.05) were observed among the LC50's and slopes of dose-mortality lines for the different isolates and infective structures. LC50 values ranged from 4.95x10 6 to 8.21x10 7 cells/mL. There were no significant differences among the infective structures in the two tested variables. However, there were significant differences among the LC50's with different infective structures within the same B. bassiana isolate. Three fungicide formulations and 24 insecticides and/or mitecides were compatible with B. bassiana including those with the following active ingredients: propamocarb hydrochloride, sulphur, abamectin, acephate,acetamiprid, betacyfluthrin, bifenthrin, cyromazine, deltamethrin, diafentiuron, diflubenzuron, dimethoate, fenpropathrin, fenpyroximate, fenvalerate, imidacloprid, methamidophos, propargite, tebufenozide and trichlorfon. There was large variability in the toxicity of products withing a chemical group and products containing the same active ingredient. B. bassiana was an efficient T. urticae mite control in chrysanthemum (Dendranthema grandiflora), when applied at a concentration of 2x10 8 conidia/mL. Microbial control was better than that provided by chemical pesticides normally used in the greenhouses. With four fungal sprays within 14 days, the mite density was reduced from 1.8 to 0.1 mite/leaf. In strawberry (Fragaria sp.), T. urticae control was lower than in chrysanthemum, with mean density of mites for 21 days after application of 1x10 8 or 5x10 7 conidia/mL at 13 mites/leaflet, compared to 43 mites/leaflet in control plots. The strawberry varieties 'Campinas' and 'Princesa Isabel' had the lowest mite densities, however, these varieties did not affect the efficacy of mite control by B. bassiana. Thus, M. anisopliae, B. bassiana and Hirsutella sp. were the most promissing fungi to be formulated as mycomiticides for T. urticae control.

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The effect of the castor oil at 100% (v/v) on conidia germination, vegetative growth and sporulation of B. bassiana after 24 h and seven, 15, 60, 90, 120 days of storage at 4°C and 26°C was evaluated in two experiments at laboratory. The effect of castor oil (Rícino®) at 1%, 2%, 3%, 4%, 5% and 6% (v/v) and neutral detergent at 2% (v/v) (emulsifier for the oil) on immature stages of T. pretiosum (egg, larva, pre-pupae and pupae) of parasitoid was also tested at laboratory. the chlorpyrifos insecticide 0.5 L a.i./ha and distilled water In the first stage of the study several experiments were conducted at screenhouse to determine the sublethal dose of commercial castor oil Azevedo® and Rícino® at 0.25%, 0.5%, 1.0%, 1.5 %, 2.0%, 3.0%, 4.0%, 5.0% and 6.0% (v/v) on mortality of different instars of B. tabaci. The castor oil was emulsified with Silwet® L-77 (0.01%, v/v), Zupp® neutral detergent (1%, 2%, 3% and 4%, v/v) and Solub'oil® (0.005%, 0.015%, 0.045%, 0.09%, 0.20% and 0.27%, v/v). The insecticide thiamethoxam 250 WG, was included as the chemical standard tested at label rate recommended by the manufacturer of 0.17 g a.i./L. Distilled water was used as the untreated control. In the second stage, B. bassiana CG1229 at 1×106 and 1x107 conidia/mL was tested alone or in combination with castor oil at 1% (v/v) emulsified in Silwet® L-77 0.01% (v/v) or Solub'oil® at 0.05% and 0.1% (v/v) on second instar nymphs of B. tabaci at screenhouse. Mortality of first instar to the fourth nymphs increased with an increase in concentration of castor oil and emulsifiers. Nymphs of the first and second instar were more susceptible to castor oil and 0.01% Silwet (v/v) than the third and fourth instars.The neutral detergent at 1%, 2%, 3% and 4% (v/v) killed 28.6%, 52.7%, 64.4% and 69.3% of second instar nymphs, respectively. When neutral detergent at 2% (v/v) was combined with castor oil 1% (v/v), killed 88.03% and 79.34% nymphs of first-second and third-fourth instar, respectively. The Solub'oil at 0.005%, 0.015%, 0.045%, 0.09% and 0.27% (v/v) killed 34.9%, 26.1%, 30.9%, 38.1% and 70.1% of second instar nymphs, respectively. When the Solub'oil at 0.2% (v/v) was combined with castor oil Azevedo at 1% (v/v), mortality of second instar nymphs was 84.71%. Reductions in the vegetative growth of B. bassiana by castor oil and Solub'oil were observed after 120 days of storage at 26°C when compared to pure conidia of the fungus. Conidia viability and conidiogenesis of B. bassiana was not affected by Castor oil at 26 ° C in all dates. Mortality of B. tabaci nymphs was significantly lower when castor oil + Silwet® L-77 was combined with B. bassiana (16.93%) compared to the fungus alone (57.94%). It was observed that Silwet® L- 77 at 0.01% did not emulsify efficiently the castor oil, not allowing conidia to germinate (9.82%). The combination of conidia of B. bassiana + castor oil + solub'oil and B. bassiana + Solub'oil significantly increased mortality of nymphs of B. tabaci (91.66% and 85.46%, respectively) compared to B. bassiana, castor oil or Solub'oil tested alone (75.57%, 59.12% and 53.92%, respectively). The Solub'oil at 0.5% or 1.0% did not affect the germination of conidia of B. bassiana (96.5%). Egg-larval stage of development of T. pretiosum was the least affected by different concentrations of castor oil + neutral detergent at 2% (v/v), with 81.9% of adult emergence of than the stages of pre-pupae and pupae, with 24.88% and 18.30% of emergency, respectively. Castor oil at 1% and 2% (v/v) was selective and innocuous to the egg-larval stage. All oil concentrations were considered mildly or moderately harmful to prepupae and pupae stages of T.pretiosum and caused significant reductions in adults emergency of parasitoid. The neutral detergent at 2% (v/v) did not affect immature stages of T. pretiosum, with emergency of adults ≤ 95.8% and it was classified as harmless to this parasitoid. Castor oil and emulsifiers have the potential to control B. tabaci biotype B. Castor oil when combined with conidia of B. bassiana + Solub'oil or only with Solub'oil increases mortality of nymphs of B. tabaci. Castor oil is selective to all T. pretiosum stages of development at concentrations ≤ 2%. / Os óleos vegetais e o fungo Beauveria bassiana tem sido testados sobre Bemisia tabaci, resultando em controles medianos de ninfas em nível de campo. Vários estudos tem demonstrado que a eficiência de B. bassiana no controle de ninfas de B. tabaci pode ser aumentada pela combinação com outros agentes de controle. Desta forma, este trabalho foi conduzido para avaliar: o efeito da combinação de B. bassiana com doses subletais do óleo de mamona na mortalidade de ninfas de B. tabaci; a compatibilidade do óleo de mamona com o B. bassiana e com o Trichogramma pretiosum, parasitoide de ovos de lagartas mais utilizado no mundo. Na primeira etapa dos estudos, foram instalados em casa telada vários experimentos para determinar a dose subletal do óleo comercial de mamona Azevedo® e o Óleo de Rícino® a 0,25%, 0,5%, 1,0%, 1,5%, 2,0%, 3,0%, 4,0%, 5,0% e 6,0% (v/v) na mortalidade de diferentes ínstares de B. tabaci. Como emulsionantes para o óleo de mamona foram testados o Silwet® L-77 (0,01%, v/v), o detergente neutro Zupp® (1%, 2%, 3% e 4%, v/v) e o Solub’oil® (0,005%, 0,015%, 0,045%, 0,09%, 0,20% e 0,27%, v/v). Como padrão de comparação com inseticida químico foi utilizado o thiamethoxam (Actara® 250 WG) a 0,17 g i.a./L. Na testemunha foi utilizada água destilada. Na segunda etapa dos estudos, em condições de em casa telada, o B. bassiana CG1229 a 1x106 e 1x107 (conídios/mL) foi testado sozinho ou em combinação com o óleo de mamona a 1% (v/v) emulsionado em Silwet® L-77 a 0,01% (v/v) ou em Solub’oil® a 0,05% e 0,1% (v/v) na mortalidade de ninfas de segundo ínstar da B. tabaci. Em laboratório, foram realizados dois experimentos que testaram a compatibilidade do óleo de mamona a 100% (v/v) na germinação, crescimento vegetativo e esporulação de B. bassiana as 24 h e 7, 15, 60, 90, 120 dias de armazenamento a 4º C e 26º C. No estudo de compatibilidade com T. pretiosum, foi avaliado o efeito do Óleo de Rícino® a 1%, 2%, 3%, 4%, 5% e 6% (v/v), do detergente neutro a 2% (v/v) (emulsificante para o óleo), do inseticida clorpirifós a 0,5 L i.a./ha e da água destilada sobre estágios imaturos (ovo-larva, pré-pupa e pupa) do parasitoide. A mortalidade de ninfas de primeiro ao quarto ínstares aumentou significativamente com o aumento da concentração do óleo de mamona e dos emulsionantes. Ninfas de primeiro e segundo ínstares foram mais suscetíveis ao óleo de mamona e ao Silwet a 0,01% (v/v) do que as de terceiro e quarto ínstares, com mortalidades de 71,32% e 55,01%, em comparação a 26,38% e 48,15%, respectivamente. O detergente neutro a 1%, 2%, 3% e 4% (v/v) causaram mortalidades de ninfas de segundo íntar de 28,6%, 52,7%, 64,4% e 69,3%, respectivamente. Quando este produto a 2% v/v foi aplicado com o óleo de mamona a 1% (v/v), causaram mortalidade de 88,03% e 79,34% em ninfas de primeiro-segundo e terceiro-quarto ínstares, respectivamente. O Solub’oil a 0,005%, 0,015%, 0,045%, 0,09% e 0,27% (v/v) causou mortalidade de ninfas do segundo íntar de 34,94%, 26,14%, 30,91%, 38,14% e 70,15%, respectivamente. Quando o Solub’oil a 0,2% (v/v) foi combinado com o óleo de mamona a 1% (v/v), causaram mortalidade de ninfas do segundo ínstar de 84,71%. Reduções significativas do crescimento vegetativo de B. bassiana foram observadas aos 07 e 120 dias de armazenamento a 4ºC e 26°C, respectivamente, pela presença do óleo de mamona e Solub’oil em relação a conídios puros do fungo. O óleo de mamona não afetou a viabilidade dos conídios de B. bassiana e nem a conidiogênese na temperatura de 26°C em todas as datas avaliadas. A mortalidade de ninfas de B. tabaci foi significativamente menor na combinação óleo de mamona + B. bassiana + Silwet® L-77 (16,93%) em relação ao fungo sozinho (57,94%), pois o Silwet® L-77 a 0,01% não emulsificou eficientemente o óleo de mamona, não permitindo a germinação dos conídios (9,82%). A combinação de conídios de B. bassiana + óleo de manona + Solub’oil e B. bassiana + Solub’oil aumentou significativamente a mortalidade de ninfas de B. tabaci (91,66% e 85,46%, respectivamente), em relação ao B. bassiana, óleo de mamona ou Solub’oil testados sozinhos (75,57%, 59,12% e 53,92%, respectivamente). O Solub'oil a 0,5% ou 1,0% não interferiu na germinação dos conídios de B. bassiana (96,5%). O estágio de desenvolvimento de ovo-larva de T. pretiosum foi o menos afetado pelas diferentes concentrações do óleo de mamona + detergente neutro a 2% (v/v), com 81,94% de emergência de adultos, do que os estágios de pré-pupa e pupa, com 24,88% e 18,30% de emergência, respectivamente. O óleo de mamona a 1% e 2% (v/v) foi seletivo e inócuo a fase de ovo-larva. Todas as concentrações do óleo foram consideradas levemente ou moderadamente nocivas aos estágios de pré-pupa e pupa de T. pretiosum e causaram significativas reduções na emergência de adultos do parasitoide. O detergente neutro a 2% (v/v) não afetou as fases imaturas de T. pretiosum, com percentagens de emergência de adultos ≤ 95,77% e foi classificado como inócuo a este parasitoide. O óleo de mamona e emulsionantes apresentam potencial no controle de B. tabaci biótipo B. O óleo de mamona quando combinado com conídios de B. bassiana + Solub’oil ou somente com Solub’oil aumenta a mortalidade de ninfas de B. tabaci. O óleo de mamona é seletivo a todas as fases de desenvolvimento do T. pretiosum em concentrações ≤ 2%.

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:37:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana_Paula_Mamprim.PDF: 1025073 bytes, checksum: a4585bdee440fbcff474cdb4a0e84089 (MD5) Previous issue date: 2011-08-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objective of this study was to evaluate the compatibility of aqueous and alcoholic plant extracts, alternative products and basidiocarps of the fungus Pycnoporus sanguineus on Metarhizium anisopliae. These plants and the basidiocarps were collected and transferred to drying oven at 40°C for 7 days and then ground into a fine powder. The extracts and basidiocarps were used in 10% concentration and the alternative products in 3 concentrations, being established on product labels (CR), half (0,5CR) and twice (2CR). All treatments were sprayed on the already inoculated fungus in PDA culture medium. Viability was evaluated by direct counting of viable and unviable conidia after incubation for 16 h at 26 ± 1 º C, 12h photoperiod. For Colony Forming Unit (CFU), it was counted the number of colonies after 5 days of incubation. To vegetative growth and production of conidia, the fungus was inoculated in three points on the culture medium surface of each petri dish, staying for 7 days for subsequent colonies measurement and counting conidia. For the viability was found that all aqueous extracts, except the chinaberry differed from the control. For the CFU, only cinnamon and laurel extracts and P.sanguineus not differed from the control. In diameter, lemon grass, rue, chinaberry, cinnamon, citronella and rosemary extracts differed from the control. For conidiogeneous, lemon grass, rue, cinnamon and rosemary extracts and P. sanguineus also had significance in relation to control. All the alcoholic extracts, for viability, differed from the control. However, for CFU these same extracts showed no significance. For the diameter, it was a significant difference to the alcoholic extracts of rue, castor, neem and chinaberry. For the conidia production there were significant difference between alcoholic extracts of rue, castor, chinaberry, cinnamon, neem, rosemary and laurel. For the alternative products, in the viability parameter, all products showed significant difference in relation to control, except Forth (0,5 CR and CR) and Agro-Mos® in CR. For CFU, there was significant difference at all concentrations tested. For the diameter, only 0,5CR Pironim® differed at the control. For the conidia production, Plant Clean® (0.5 CR and CR), Pironim® (CR), Bordeaux Mixture (0.5 CR and CR) and Sulfur Mixture (CR and 2CR) showed significant differences compared to control. Despite of the biological parameters present percentage change (reduction or stimulation), there was compatibility for aqueous and alcoholic extracts. In relation to alternative products, only Sulfur Mixture was incompatible for the fungus M. anisopliae. / O objetivo deste trabalho foi avaliar a compatibilidade dos extratos vegetais aquosos e alcoólicos e de produtos alternativos, além de extratos de basidiocarpos de Pycnoporus sanguineus sobre o fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae. As plantas e os basidiocarpos foram coletados e transferidos para estufa de secagem em 40 ºC por 7 dias, sendo em seguida, moídos até se obter um pó fino. Os extratos e o basidiocarpos foram utilizados na concentração 10%, e os produtos alternativos em três concentrações, sendo a estabelecida nos rótulos dos produtos (CR), a metade (0,5CR) e o dobro da mesma (2CR). Em todos os tratamentos foram feitas pulverizações sobre o fungo já repicado no meio de cultura BDA. Avaliou-se viabilidade, por meio da contagem direta dos conídios viáveis e inviáveis após incubação por 16 h em 26±1ºC, fotofase 12h. Para Unidade Formadora de Colônias (UFC) contou-se o número de colônias após 5 dias de incubação. Em relação ao crescimento vegetativo e a produção de conídios, o fungo foi repicado em 3 pontos na superfície do meio de cultura de cada placa de Petri, permanecendo em incubação por 7 dias, para posterior medição das colônias e contagem de conídios. Verificou-se que todos os extratos aquosos, exceto o de cinamomo, diferiram da testemunha para viabilidade. Para o UFC, somente os extratos de canela, louro e P.sanguineus, não diferiram da testemunha. No diâmetro, os extratos de capim cidreira, arruda, cinamomo, canela, citronela, alecrim diferiram da testemunha. Assim como na conidiogênese onde os extratos capim cidreira, arruda, canela, alecrim e P sanguineus também apresentaram significância em relação à testemunha. Para os extratos alcoólicos observou-se que na viabilidade, todos diferiram da testemunha. Enquanto que na UFC esses mesmos extratos não apresentaram significância. Para o diâmetro ocorreu uma diferença significativa para os extratos alcoólicos de arruda, mamona, cinamomo e nim. Já para a produção de conídios verificou-se diferença significativa dos extratos alcoólicos arruda, mamona, cinamomo, canela, nim, alecrim e louro. Para os produtos fitossanitários alternativos, no parâmetro viabilidade, todos os produtos apresentaram diferença significativa em relação a testemunha, exceto Forth (0,5 CR e na CR) e Agro-mos® na CR. Na UFC, foi verificada diferença significativa em todas as concentrações testadas. Para o diâmetro apenas o Pironim® na 0,5CR diferiu da testemunha. Já para a produção de conídios o produto Planta Clean® (0,5 CR e na CR), Pironim® (CR), Calda Bordalesa (0,5 CR e na CR) e Calda Sulfocálcica (CR e no 2CR) apresentaram diferenças significativas dos tratamentos em relação à testemunha. Apesar dos parâmetros biológicos apresentarem variação percentual (estímulo ou redução) verificou-se a compatibilidade para os extratos aquosos e alcoólicos. Em relação aos produtos alternativos somente a Calda Sulfocálcica se mostrou incompatível para o fungo M. anisopliae.

Os objetivos deste trabalho foram selecionar gramíneas forrageiras com potencial de resistência a Mahanarva fimbriolata, bem como determinar tipos de resistência presentes, por meio da avaliação do efeito sobre a biologia do inseto e de testes de tolerância. Nas gramíneas mais promissoras foi também aplicado o fungo Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorokin para avaliar um possível efeito associado deste com a resistência vegetal. Os ensaios foram realizados sem chance de escolha, com insetos provenientes de criação estoque. No ensaio de biologia, realizado em laboratório com 12 genótipos, os seguintes parâmetros foram avaliados: mortalidade e duração da fase ninfal; peso e longevidade dos adultos; período de pré-oviposição e número de ovos/fêmea; e viabilidade e a duração do período embrionário. No ensaio de tolerância realizado com três gramíneas, em casa de vegetação, foram utilizadas duas densidades de cigarrinhas (dois e quatro casais), avaliando-se o dano causado (com base em escala de notas) aos 3º e 7º dias após a infestação e o crescimento e rebrote das gramíneas ao 14º dia após a desinfestação. Para verificar a associação de plantas resistentes com o fungo M. anisopliae, foram utilizadas, em casa de vegetação, quatro gramíneas como substrato alimentar das cigarrinhas. Em cada genótipo foi feita uma aplicação do fungo sobre ninfas de 3º ínstar, mantendo-se, em cada gramínea, ninfas não tratadas como testemunha, sendo avaliada a mortalidade ninfal até o 15º dia. Concluiu-se que: a) a mortalidade das ninfas de M. fimbriolata criadas em Panicum maximum cv. Paredão é quase total, podendo tal material ser caracterizado como resistente ao inseto por antibiose; b) Andropogon gayanus, Panicum maximum cv. Aruana e Panicum maximum cv. Aries apresentam, em maior grau, resistência a M. fimbriolata dos tipos antibiose e/ou antixenose alimentar, já que afetam o desenvolvimento, a fase adulta e/ou a reprodução do inseto; c) a análise de agrupamento, feita com base nos dados do efeito dos 12 genótipos sobre a biologia de M. fimbriolata, possibilita a divisão dos mesmos em três grupos: um composto por P. maximum cv. Aries, Setaria sphacelata cv. Kazungula, Brachiaria humidicola, A. gayanus e P. maximum cv. Aruana, que inclui os materiais resistentes ao inseto; um formado por Brachiaria decumbens cv. Basilisk, Brachiaria dictyoneura, Brachiaria brizantha cv. MG 4 e Brachiaria ruziziensis com materiais moderadamente resistentes e um grupo com materiais suscetíveis formado por Brachiaria brizantha MG 5 e Brachiaria brizantha ecótipo BB185; d) P. maximum cv. Paredão e B. brizantha cv. Marandu apresentam resistência por tolerância, já que, sob um mesmo nível de infestação, são menos danificados e apresentam recuperação mais rápida, após a desinfestação, quando comparados com B. brizantha ecótipo BB185; e) a aplicação do fungo M. anisopliae causou aumento na mortalidade das ninfas de cigarrinha, sendo o referido aumento dependente do genótipo em que o inseto foi criado. / The goals of this work were to screen grasses with potential of resistance to Mahanarva fimbriolata and to identify the types of such resistance by assessing biological parameters of the insect and performing tolerance bioassays. The effects of a possible interaction between the most promising grasses and the fungus Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorokin on the spittlebug was also evaluated. Nochoice bioassays were performed using insects from a stock culture. The insect\'s biology was studied in laboratory on 12 genotypes of grasses and the following parameters were assessed: mortality and duration of the immature (nymph) stage, weight and adult longevity, pre-oviposition period and number of eggs/female, and viability and duration of the embryonic period. The tolerance bioassay was performed with three genotypes of grasses in a greenhouse. We used two densities of spittlebugs (two and four couples), assessing the damage (based on a rating scale) at days 3 and 7 after insects were released; and also the growth and resprout of grasses on day 14 after the insects were eliminated. To evaluate the interaction of resistant plants with the fungus M. anisopliae they were used four genotypes of grasses as food substrate for the spittlebugs in greenhouse. For each genotype was made one fungus spraying on third instar nymphs, using another group of nonsprayed nymphs as control. The nymphal mortality was assessed until day 15 after spraying. It was concluded that: a) mortality of M. fimbriolata nymphs reared on Panicum maximum cv. Paredão is roughly complete and such material can be characterized as resistant by antibiosis; b) Andropogon gayanus, Panicum maximum cv. Aruana and Panicum maximum cv. Aries showed, in a higher degree, antibiosis and/or feeding antixenosis to M. fimbriolata, once development, adult stage and/or reproduction of the spittlebugs were affected; c) the cluster analysis based on the biological data of M. fimbriolata reared on 12 genotypes showed three distinct groups: one composed by P. maximum cv. Aries, Setaria sphacelata cv. Kazungula, Brachiaria humidicola, A. gayanus and P. maximum cv. Aruana, which includes the genotypes resistant to the spittlebug; another formed by Brachiaria decumbens cv. Basilisk, Brachiaria dictyoneura, Brachiaria brizanthacv. MG 4 and Brachiaria ruziziensi, with genotypes considered moderately resistant; and a third group with susceptible genotypes composed by Brachiaria brizantha MG 5 and Brachiaria brizantha ecotype BB185; d) P. maximum cv. Paredão and B. brizantha cv. Marandu showed resistance by tolerance once, under the same level of infestation, they are less damaged and recover faster after disinfestation when compared with B. brizantha ecotypo BB185; e) the application of the fungus M. anisopliae increased the immature mortality, nevertheless such increase depended on the genotype on which the insects were reared.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-05-25Bitstream added on 2014-06-13T19:06:00Z : No. of bitstreams: 1 gassen_mh_dr_botfca.pdf: 1151986 bytes, checksum: d10ca5877ac7bff31ebce19ef7356faf (MD5) / A cana-de-açúcar colhida sem queima é uma realidade em todo o Estado de São Paulo e os ataques da cigarrinha-da-raiz da cana estão cada vez mais freqüentes e intensos. O controle biológico desta praga com o fungo Metarhizium anisopliae também vem se desenvolvendo e adquirindo relevada importância. Com isso, este trabalho foi conduzido com os seguintes objetivos: avaliar a produção de conídios de diferentes isolados para o controle da cigarrinha-das-raízes, a partir de dois tipos de arroz; avaliar a eficiência dos isolados selecionados como mais produtivos em populações naturais de Mahanarva fimbriolata, na cultura da cana-de-açúcar colhida mecanicamente e; verificar o manejo da população de M. fimbriolata em áreas de cana-de-açúcar colhidas sem queima da palha, observando a influência da umidade sobre sua ocorrência. Foram avaliados 14 isolados, os quais foram produzidos em arroz tipo 1 e arroz parboilizado, em sacos de polipropileno, incubados em sala climatizada para desenvolvimento do fungo. Avaliou-se a concentração e viabilidade de cada isolado para os dois tipos de arroz. Os isolados que apresentaram maior produtividade foram aplicados em campo para avaliar a patogenicidade dos mesmos à cigarrinha-das-raízes, sendo eles: ESALQ 1037, IBCB 425, IBCB 353, IBCB 410, F 99 e IBCB 333. Foram pulverizados 2 kg/ha de arroz+fungo, contendo 1,0 x 1012 conídios/ha, além do tratamento com o inseticida tiametoxam 250 WG e a testemunha, sem aplicação. As avaliações foram realizadas aos 15, 30, 60, 90 e 120 dias após a aplicação (DAA), observando-se o número de ninfas e adultos de M. fimbriolata vivos, mortos, parasitados ou não, em cada parcela. A partir dos resultados, foi possível observar que os isolados IBCB 410 e F 99 causaram, respectivamente, mortalidades de 66,67 e 33,33% para ninfas, aos 15 DAA. Após 30 DAA, os isolados IBCB 425, IBCB 353 e IBCB 333... / The sugar cane is harvested without burning a reality throughout the state of Sao Paulo and the attacks of the leafhopper-root cane are increasingly frequent and intense. Biological control this pest with the Metarhizium anisopliae also has been developing and acquiring increasing importance. Therefore, this work was conducted to evaluate the production of conidial selected for the control of root speatlebug in two types of rice, evaluate the efficiency of the isolates selected as the most productive in natural populations of M. fimbriolata, the culture of cane sugar harvested mechanically, monitor the population of M. fimbriolata in areas of sugarcane harvested without burning the straw, and the influence of temperature and humidity on its occurrence. We evaluated 14 isolates, which were produced in rice type 1 and parboiled rice in polypropylene bags, incubated in a room for fungal growth and were evaluated the concentration and viability of each isolate for both types of rice. The isolates that had higher yields were applied in the field to assess the pathogenicity of the same root speatlebug, namely: ESALQ 1037, IBCB 425, IBCB 353, IBCB 410, F 99 and IBCB 333. Were sprayed 2 kg / ha of rice + fungus, containing 1,0 x 1012 conidia / ha, in addition to treatment with the insecticide tiametoxam 250 WG and the control. Evaluations were performed at 15, 30, 60, 90 and 120 days after the application, noting the number of nymphs and adults of M. fimbriolata alive in each plot, and the number of nymphs and adults dead, infected and non-parasitized. From the results, it was observed that isolates IBCB 410 and F 99 caused mortality to nymphs of 66.67 and 33.33%, respectively, at 15 days after application. After 30 days of spraying, the isolates IBCB 425, IBCB 353 and IBCB 333 had efficiencies... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-02Bitstream added on 2014-06-13T19:37:25Z : No. of bitstreams: 1 silva_ear_me_botfca.pdf: 272666 bytes, checksum: 6d16798c5b5ef0ec6a50253109a805bb (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Com o objetivo de avaliar e comparar a eficiência dos fungos S. insectorum, M. anisopliae, B. bassiana e Paecilomyces spp. no controle de Leptopharsa heveae em diferentes concentrações de aplicação e condições climáticas, este trabalho foi constituído de seleção de isolados em laboratório, testes de produção e viabilidade de conídios em laboratório e análises de eficiência em condições de campo. Foram analisados vinte e sete isolados procedentes de diversos hospedeiros e regiões. A produção de conídios dos patógenos foi efetuada em placas de Petri contendo meio de cultura BDA. Insetos de terceiro instar da praga foram então inoculados através de pulverizações com suspensão de conídios na concentração de 1 x 109 conídios/mL. Avaliações de mortalidade foram efetuadas a cada dois dias e os valores de mortalidade confirmada contabilizados. Neste experimento ocorreu grande variação na patogenicidade entre os isolados testados, sendo que os mais patogênicos foram: 1189, E9, PL63, IBCB87 e 1225. Os dois isolados padrão, SJRC e 1200 não atingiram resultados satisfatórios neste experimento. Os cinco isolados mais patogênicos resultantes da seleção de isolados, mais os dois tidos como padrão, foram então submetidos aos testes de produção, onde foram avaliados quanto ao número de conídios viáveis produzidos. Para tanto, pré-matrizes em placas de Petri, contendo meio de cultura BDA, foram preparadas. A partir destas placas, matrizes contendo arroz como meio de cultura foram inoculadas com suspensão de conídios originária das pré-matrizes na concentração de 5 x 107 conídios/mL. Concluído o desenvolvimento dos patógenos nas matrizes, sacos de polipropileno contendo canjica de milho como meio de cultura foram inoculados com 40mL da suspensão obtida a partir as matrizes. Após um período de incubação de quinze dias... / With the objective to evaluate and compare the efficiency of the fungi S. insectorum, M. anisopliae, B. bassiana and Paecilomyces spp. in the biological control of Leptopharsa heveae, in different concentrations of application and climatic conditions, this research was consisted by an election of isolates in laboratory, tests of production and viability of conidia in laboratory, and analyses of efficiency in field conditions. Twenty-seven isolates from different hosts and regions had been evaluated and seven of them were elected. The pathogens production of conidia was made in Petri dishes with BDA as the culture media. Nymphs from the third instar of the pest were then inoculated through sprayings of the conidia suspension in the concentration of 1 x 109 conidia/mL. Evaluations of mortality had been done each two days and the values of confirmed mortality registered. In this experiment, a great variation of pathogenicity among the isolates was observed, but the most pathogenic were: 1189, E9, PL63, IBCB87 and 1225. The two standard isolates, SJRC and 1200 had not reached satisfactory results in this experiment. The five more pathogenic isolates resultants from the election, plus the two standards, had been submitted to production tests, where they were evaluated about the number of viable conidia produced. With this objective, pre-matrices in Petri dishes with BDA as culture media were prepared. From these cultures, matrices with rice as culture media were inoculated with the original suspension of conidia obtained from the pre-matrices in the concentration of 5 x 107 conidia/mL. After the development of the pathogens in the matrices, polypropylene bags with maize as culture media were inoculated with 40mL from the gotten suspension in the matrices. After an incubation period of fifteen days, the content of the bags was evaluated about the production of conidia and their viability... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002-04Bitstream added on 2014-06-13T19:16:46Z : No. of bitstreams: 1 takada_hm_me_botfca.pdf: 587174 bytes, checksum: 68fcfeed820ef9c331817e76b2f9fab3 (MD5) / Com o objetivo de avaliar a patogenicidade e a virulência de fungos entomopatogênicos ao gorgulho aquático do arroz irrigado, Oryzophagus oryzae, foram testados 24 isolados de Metarhizium anisopliae e 2 de Beauveria bassiana. Os bioensaios foram realizados em condições controladas (26+1°C e 12 horas de fotofase). Nos testes para determinar a concentração adequada, a espécie M. anisopliae, isolado E9, apresentou maior patogenicidade quando comparado aos isolados de B. bassiana. A mortalidade confirmada, provocada pelo M. anisopliae, teve início no 4º dia, aumentando em seguida até estabilizar-se no 8º dia. Para a seleção dos isolados de M. anisopliae, adultos dos insetos foram inoculados com 1 mL de suspensão fúngica a 5x108 conídios/mL (1,6x104 conídios/mm2). Todos os isolados foram patogênicos ao inseto, sendo que a mortalidade variou entre 9,3 e 85,3 %. Os isolados de M. anisopliae mais patogênicos foram CB-103, CB-104, CB-233, E9 e CB-10. No teste de produção, os isolados CB-104, CB-233 e CB-103 foram superiores ao padrão E9, apresentando-se promissores para a utilização no controle de Oryzophagus oryzae. / Strains of Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana were evaluated concerning their pathogenicity and virulence for control of the rice water weevil, Oryzophagus oryzae. Bioassay conditions were 26+1ºC and 12 h. light. M. anisopliae (E9 strain) was been more pathogenic than two Beauveria bassiana strains (CB-66 and CB-74). For Metarhizium anisopliae (E9 strain), the mean mortality started at 4th day, increasing soon after until stabilize at 8 th day. A screening of M. anisopliae isolates was done inoculating adults of the insect with 1 mL of spore suspension containing 5x108 conídia/mL (1.6x104 conídia/mm2). All isolates were pathogenic to the insect, causing mortality between 9.3 and 85.3%. The most pathogenic isolates were CB-103, CB-104, CB-233, E9 and CB-10. These 6 isolates were evaluated concerning their spore production on cooked rice. The isolates CB-104, CB-233 and CB-103 afforded the highests spores production, significantly higher compared to E9, showing potential to be used for Oryzophagus oryzae control.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-08-11T13:11:35Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2693728 bytes, checksum: 8cb30fc8b072b2c0a7df5fe9cea6a054 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-11T13:11:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2693728 bytes, checksum: 8cb30fc8b072b2c0a7df5fe9cea6a054 (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O gênero Metarhizium é amplamente conhecido por sua capacidade entomopatogênica. No entanto, recentemente também foi reconhecido como simbionte de planta, capaz de transferir nitrogênio de cadáveres de insetos para plantas, atuar como antagonista de fitopatógenos e promover o crescimento vegetal. Essas funções podem ser consideradas como serviços de ecossistema que podem ser fornecidos por esses fungos para plantas em sistemas de cultivos sustentáveis. Todavia, esses fungos são pouco considerados no contexto ecológico e dados sobre sua diversidade em solos agrícolas e na rizosfera são muito escassos, especialmente em ecossistemas tropicais. Além disso, nenhum método molecular para detectar e quantificar especificamente Metarhizium em associação com sistema radicular está disponível. Dessa forma, nesta tese nós focamos no estabelecimento de um método para detectar e quantificar Metarhizium em raízes de plantas e na investigação de sua diversidade em cultivos de café agroflorestal e pleno sol. Nós estabelecemos um método baseado na reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR) confiável e reprodutível para detectar e quantificar Metarhizium em raízes de plantas. Tal método foi verificado por meio de detecção via método dependente de cultivo e microscopia confocal. Considerando a diversidade de Metarhizium em solos agroflorestais e pleno sol, nós encontramos três espécies, sendo que M. robertsii foi a espécie mais frequente em ambos sistemas. Ao comparar a diversidade entre os sistemas agroflorestais e pleno sol, duas das três agroflorestas amostradas apresentaram maior diversidade de Metarhizium e a diversidade total, considerando as seis áreas, também foi maior nas agroflorestas. A população de M. robertsii foi dividida em três diferentes clados, porém nenhum padrão de distribuição ou recombinação foi observado em relação aos mesmos. Com a relação à diversidade de Metarhizium na rizosfera, M. robertsii também foi a espécie mais abundante, sendo encontrada em todos os grupos de plantas amostrados. Metarhizium pemphigi foi a mais frequente na rizosfera de plantas de café, indicando a possibilidade de sua especialização ecológica em relação às raízes de café. Nós fornecemos resultados importantes sobre a associação de Metarhizium no solo e em associação com plantas, incluindo: (i) um método de laboratório pra estudar associação Metarhizium-raiz, (ii) a diversidade de Metarhizium no solo em dois sistemas de cultivo e (iii) a diversidade de Metarhizium na rizosfera de plantas presentes em sistema de cultivo diversificado. / The Metarhizium genus is widely recognized for its entomopathogenic capacity, but more recently was recognized as a plant symbiont, being able to transfer nitrogen from insect cadavers to plants, act as plant pathogen antagonist and plant growth promoter. All those functions could be valuable as ecosystem services provided by these fungi to plants in sustainable agricultural schemes. However, these fungi are poorly considered in an ecological context and data about their diversity and abundance in agricultural soils and in association with plant rhizosphere are very sparse, especially in tropical ecosystems. Also, considering the ability to form mutualistic association with plants, no Metarhizium’s specific molecular method is available to detect and quantify association in plant root systems. Given this, in this thesis we focused in the establishment of a method to detect and quantify Metarhizium in plant roots and investigate its diversity in coffee based agroforestry and full sun systems. In doing so, we aimed to provide a better understanding of Metarhizium ́s association with plants, to get a better insight of how its inter- and intraspecific diversity is distributed in soils of coffee agroforestry and full sun soils and to understand how Metarhizium species are distributed in the rhizosphere of coffee plants and non-crop plants in a coffee agroforestry system. We established a reliable and reproducible real-time polymerase chain reaction (qPCR) method to quantify and detect Metarhizium in plant roots and also detect the association through cultivation methods and confocal microscopy. In the surveys from the diversity of Metarhizium in soils from agroforestry and full sun coffee systems, we found three Metarhizium species, M. robertsii being the most prevalent of these. Comparing the diversity between agroforestry and full-sun systems we found higher diversity in agroforestry systems in two of the three sampled fields, and overall diversity was also higher in agroforestry. The M. robertsii population exhibited presented three clades and no specific distribution pattern and recombination was observed in the clades. Regarding Metarhizium diversity in the rhizosphere, M. robertsii was also the most abundant species and was present in all groups of surveyed plants, M. pemphigi presented the highest levels in the coffee rhizosphere indicating a possible ecological specialization of this species to coffee roots. We provided important findings regarding the association of the insect pathogen Metarhizium when in association with plants, including: (i) a laboratory method to study the Metarhizium-plant association, (ii) the diversity of Metarhizium in soil and its comparison between agricultural systems and (iii) the Metarhizium diversity in the rhizosphere of crop and non-crop plants in a biodiverse agroecosystem.