Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Brazil is one of the largest producers and consumers of rice (Oryza sativa) in the world, and the largest portion of its production comes from floodplain ecosystems, and Rio Grande do Sul (RS), the largest national producer. Rice production is dependent on nitrogen fertilizers, which have high costs and high capacity to pollute the environment. An alternative to reducing the application of nitrogen (N) is inoculated Diazotrophic able to promote biological fixation of nitrogen (BNF) and or, in rice plant growth. The aim of this study was to select and evaluate the efficiency of diazotrophic bacteria isolated from different rice varieties, and the potential contribution of BNF these isolates in the culture in question, under flooding conditions. Three studies were performed. In the first, we performed the isolation of diazotrophic bacteria present in 20 varieties of rice grown in RS. In the second, the isolates were tested for their ability to fix atmospheric nitrogen, produce and release acid-indole-3-acetic acid (IAA) and promote growth ten rice cultivars under conditions gnotobiotics. In the third study, an experiment was conducted in a greenhouse with four isolates that showed improved plant growth and the three cultivars responded more inoculation in vitro test. In tests with inoculation was used strain BR11417 (ZAE94 - Herbaspirillum seropedicae) as a reference. 35 isolates were obtained from roots and shoots of rice cultivars tested, and all showed the ability to fix atmospheric nitrogen and produce and release IAA in vitro. In the experiment under conditions gnotobiotics cultivars IRGA 409, Puita Inta-CL and Pampa cultivars proved more responsive to inoculation and isolates 12, 13, 29 were those who had higher plant growth promotion. In the greenhouse, the IRGA 409 was the one that responded to inoculation and isolated 12, who provided the greatest benefits in relation to plant tillering and dry matter production in rice cultivars studied. / O Brasil é um dos maiores produtores e consumidores de arroz (Oryza sativa) do mundo, e a maior parcela de sua produção é proveniente dos ecossistemas de várzeas, sendo o Rio Grande do Sul (RS) o maior produtor nacional. A produção de arroz é dependente de fertilizantes nitrogenados, os quais apresentam custos elevados e alta capacidade de poluir o meio ambiente. Uma alternativa para a redução na aplicação de nitrogênio (N) é a inoculação de bactérias diazotróficas capazes de promover a fixação biológica de N (FBN) e, ou, o crescimento vegetal em arroz. O objetivo deste trabalho foi selecionar e avaliar a eficiência de bactérias diazotróficas endofíticas isoladas de diferentes variedades de arroz, e o potencial de contribuição da FBN destes isolados na cultura em questão, sob condição de inundação. Foram realizados três estudos. No primeiro, foi realizado o isolamento de bactérias diazotróficas presentes em 20 variedades de arroz irrigado cultivadas no RS. No segundo, os isolados obtidos foram testados quanto à capacidade de fixar nitrogênio atmosférico, produzir e liberar ácido-3-indol-acético (AIA) e promover o crescimento de dez cultivares de arroz irrigado sob condições gnotobióticas. No terceiro estudo, foi realizado um experimento de casa de vegetação com os quatro isolados que proporcionaram melhor crescimento vegetal e as três cultivares que mais responderam a inoculação no teste in vitro. Nos testes com inoculação foi utilizada a estirpe BR11417 (ZAE94 Herbaspirillum seropedicae) como referência. Foram obtidos 35 isolados da raiz e da parte aérea das cultivares de arroz irrigado testadas, e todos apresentaram capacidade de fixar nitrogênio atmosférico e produzir e liberar AIA in vitro. Em experimento sob condições gnotobióticas as cultivares IRGA 409, Puitá Inta-CL e Pampa demonstraram ser as cultivares mais responsivas a inoculação, e os isolados 12, 13, 29 foram aqueles que apresentaram maior promoção de crescimento vegetal. Em casa de vegetação, a cultivar IRGA 409 foi a que mais respondeu a inoculação e o isolado 12, aquele que proporcionou os maiores benefícios em relação ao perfilhamento de plantas e produção de matéria seca nas cultivares de arroz irrigado estudadas.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-05-11T13:12:11Z No. of bitstreams: 1 Michelle Justino Gomes Alves.pdf: 967458 bytes, checksum: 88faae5728406e1ab6519120b47f1804 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-11T13:12:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Michelle Justino Gomes Alves.pdf: 967458 bytes, checksum: 88faae5728406e1ab6519120b47f1804 (MD5) Previous issue date: 2016-07-26 / Using the inoculation has been an alternative to reduce the impacts to the environment by the use of polluting agricultural inputs, as well as reduce expenses, since these inputs are considered expensive. Cowpea (Vigna unguiculata (L.) Walp.), Is a legume that has ability to form nodules with nitrogen fixing bacteria and N2 fixation. What is very important in the study on symbiosis between these two bodies in order to produce potential inoculants effective and competitive with native bacteria. In this context, the objective of this study was to evaluate the effect of different inoculants in yield of cowpea crop, produced from isolated nodules formed under different land uses in the city of Serra Talhada, semiarid region of Pernambuco. Two experiments were conducted, one pot in full sun and others in the field, with completely randomized design. The experiment vessel was mounted in a factorial 4 x 3, four different land use systems (caatinga area preserved, fallow area, agroforestry, and area of cowpea monoculture). It used three cowpea cultivars (Sempre verde, Paulistinha and Canapu Roxo), used by local farmers, with 5 repetitions. Soil samples were collected at various points in different areas in the city of Serra Talhada, which were placed in pots with 9kg capacity, being filled with 7 kg of soil was used as bait plant for 35 days. The nodules from vessels in this experiment were ground and mixed starch gum for the production of homemade inoculant or nodules extract to be used in the field experiment. The field experiment was formed by four inoculants resulting from isolated from experimental nodules pot, treatment with nitrogen fertilization 50 kg N as urea, a treatment with inoculant with the BR 3267 strain and without inoculation control and without nitrogen fertilization, with 4 repetitions. The cultivar used in this experiment was the Paulistinha. The plants were collected and evaluated at 35 days and at the end of the crop cycle. The data were submitted to the F test and means were compared by Tukey test at 5% probability. There have been isolated effects between cultivars and different areas with different land use, as well as interaction to the characteristics number of leaves per plant, dry weight of roots, number of nodules and nodular efficiency. The cowpea cultivars showed positive responses to biological nitrogen fixation, easily nodulated in the areas of savanna preserved and agroforestry. Homemade inoculants provided increases in cowpea yields when compared to other treatments. Homemade inoculants generally provided good nodulation, dry matter production and accumulation of N in the shoot, as well as grain production, when compared to the control, the inoculant and the nitrogen treatment, meaning good responses from BNF. However, the symbiotic relationships are highly dependent on soil and climatic conditions, especially in places of research areas. This study shows the importance of knowledge of the interactions between plants and microorganisms native to each region, can the same be a germplasm source to be used in the production of inoculants. / O uso da inoculação com bactérias tem sido uma alternativa para reduzir os impactos causados ao ambiente pela utilização de insumos agrícolas poluentes, como também, reduzir gastos, uma vez que esses insumos são considerados onerosos. O feijão-caupi (Vigna unguiculata (L.) Walp.), é uma leguminosa que possui capacidade de formar nódulos com bactérias diazotróficas e fixar N2. O que representa grande importância no estudo sobre simbiose entre esses dois organismos, com a finalidade de produzir inoculantes potenciais com bactérias nativas, eficazes e competitivas. Neste contexto, o objetivo do trabalho foi avaliar o efeito de diferentes inoculantes caseiros no rendimento da cultura do feijão-caupi, produzidos a partir de isolados dos nódulos formados em raízes de feijão-caupi cultivado em diferentes usos de terra, no município de Serra Talhada, região semiárida do Estado de Pernambuco. Foram realizados dois experimentos, um em vaso a pleno sol e outro em campo, com o delineamento inteiramente casualisado. O experimento em vaso foi montado em esquema fatorial 4 x 3, com quatro diferentes sistemas de uso da terra (área de caatinga preservada, área de pousio, sistema agroflorestal, e área de monocultivo de feijão-caupi), e três cultivares de feijão-caupi (Sempre verde, Paulistinha e Canapu Roxo), usadas pelos agricultores locais, com 5 repetições. As amostras de solos foram coletadas em vários pontos, nas diferentes áreas, no município de Serra Talhada, as quais foram colocadas em vasos com capacidade de 9 kg, sendo preenchidos com 7 kg de solo, e cultivadas as plantas iscas, por 35 dias. Os nódulos provenientes desse experimento em vasos foram triturados e misturados à goma de amido para a produção do inoculante caseiro ou de extrato de nódulos, a ser usado no experimento em campo. O experimento em campo foi formado por quatro inoculantes, sendo resultantes dos isolados dos nódulos do experimento em vaso, um tratamento com adubação nitrogenada com 50 kg de N na forma de ureia, um tratamento com inoculante comercial com a estirpe BR 3267 e um controle sem inoculação e sem adubação nitrogenada, com 4 repetições. A cultivar utilizada, nesse experimento, foi a Paulistinha. As plantas foram coletadas e avaliadas aos 35 dias e no final do ciclo da cultura. Os dados foram submetidos ao teste F e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. No experimento com vasos ocorreram efeitos isolados entre as cultivares e as áreas com diferentes usos da terra, como também, interação para as características número de folhas por planta, massa seca de raízes, número de nódulos e eficiência nodular. As cultivares de feijão-caupi apresentaram respostas positivas a fixação biológica do nitrogênio, sendo facilmente noduladas nas áreas de caatinga preservada e agrofloresta. Observou-se no experimento de campo que os tratamentos com inoculantes caseiros proporcionaram aumento nos rendimentos de feijão-caupi, quando comparado aos demais tratamentos. Os inoculantes caseiros, de modo geral, proporcionaram boa nodulação, produção de massa seca e acumulo de N na parte aérea, além de produção de grãos, quando comparadas ao controle, ao inoculante comercial e ao tratamento nitrogenado, significando boas respostas da FBN. Contudo, as relações de simbiose são bastante dependentes das condições edafoclimáticas, principalmente nos locais das regiões de pesquisa. Este estudo mostra a importância do conhecimento das interações entre planta e micro-organismos nativos de cada região, podendo os mesmos serem uma fonte de germoplasma a ser empregada na produção de inoculantes comerciais.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-07-03T13:34:53Z No. of bitstreams: 1 Karina Rodrigues de Miranda.pdf: 498368 bytes, checksum: 05f2d42a5cae5406364248aa964e60ec (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-03T13:34:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Karina Rodrigues de Miranda.pdf: 498368 bytes, checksum: 05f2d42a5cae5406364248aa964e60ec (MD5) Previous issue date: 2014-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Biological nitrogen fixation (BNF) in forage grasses can contribute significant amounts of nitrogen accumulated by the plant. The objective of this study was to evaluate five Pennisetum purpureum Schum. about the potential of BNF and endophytic association of diazotrophs in the root and stem, at two different times, as well as the dry matter yield and plant height of these genotypes due to nitrogen levels. The experiment was established in 2009 at the Experimental Station belonging to Itambé Agronomic Institute of Pernambuco (IPA), adopting the split plot design in randomized blocks with three replications. The main plot was formed by N fertilization levels of 0, 30, 60 and 90 kg ha-1 N per cut, and the subplot with genotypes Mineirão Elephant B, IRI 381, Taiwan A- 146 and ‘Pioneiro’. The effect of nitrogen fertilization on production aspects and plant height, and in plots with zero fertilizer level, BNF has been reported in four cycles of review. The occurrence of endophytic bacteria associated with the roots and stems of genotypes Elephant B, Venezuela and ‘Pioneiro’, were evaluated in dry and rainy seasons. Genotypes Taiwan A-146, Elephant B and IRI 381 were the most promising in the BNF, with contributions of up to 57.2 , 58.0 and 61.9 % of the total N accumulated in shoots. The presence of diazotrophs associated with roots of ‘Pioneiro’ was higher in the dry season. The cultivar Venezuela had the highest density of endophytes in the stem. There was no effect of nitrogen fertilization for the production of MS, with genotypes Taiwan A- 146, Elephant B and IRI 381 the most productive, with 870, 1208 and 899 g m-2 per cut DM. For height effect of nitrogen fertilization on the Pioneer and legume genotypes showed linear and quadratic effects, respectively was observed. The elephant grass genotypes studied are potentially fixers N. The occurrence of endophytic bacteria associated with elephant grass genotypes is influenced by tissue colonization and season, being necessary that these isolates were genetically characterized and evaluated for their potential to FBN. / A fixação biológica de nitrogênio (FBN) em gramíneas forrageiras pode contribuir com quantidades significativas do nitrogênio acumulado pela planta. Objetivou-se com esse trabalho avaliar cinco genótipos de Pennisetum purpureum Schum. quanto ao potencial de FBN e de associação endofítica de bactérias diazotróficas na raiz e colmo, em duas épocas distintas, bem como a produção de matéria seca e altura da planta desses genótipos em função de níveis de nitrogênio. O experimento foi implantado em 2009, na Estação Experimental de Itambé pertencente ao Instituto Agronômico de Pernambuco (IPA), adotando-se o delineamento de parcela subdividida em blocos ao acaso, com três repetições. A parcela principal foi formada pelos níveis de adubação de 0, 30, 60 e 90 kg ha-1 de N corte-1, e a subparcela pelos genótipos Mineirão, Elefante B, IRI 381, Taiwan A-146 e Pioneiro. Foi avaliado o efeito dos níveis de adubação nitrogenada sobre aspectos produtivos e de altura da planta e, nas parcelas com nível zero de adubação, a FBN em quatro ciclos de avaliação. A ocorrência de bactérias endofíticas associadas às raizes e colmos dos genótipos Elefante B, Venezuela e Pioneiro, foram avaliadas nas épocas seca e chuvosa. Os genótipos Taiwan A-146, Elefante B e IRI 381 foram os mais promissores na FBN, com contribuições de até 57,2, 58,0 e 61,9% do N total acumulado pela parte aérea. A presença de bactérias diazotróficas associada às raízes do Pioneiro foi maior no período mais seco do ano. O cultivar Venezuela apresentou as maiores densidades de endofíticos no colmo. Não houve efeito da adubação nitrogenada para a produção de MS, sendo os genótipos Taiwan A-146, Elefante B e IRI 381 os mais produtivos, com 870, 1208 e 899 g m-2 corte-1 de MS. Para altura foi observada efeito da adubação nitrogenada, em que os genótipos, Pioneiro e Mineirão, apresentaram efeito linear e quadrático, respectivamente. Os genótipos de capim-elefante estudados são potencialmente fixadores de N. A ocorrência de bactérias endofíticas associadas aos genótipos de capim elefante é influenciada pelo tecido de colonização e estação do ano, sendo necessário que estes isolados sejam caracterizados geneticamente e avaliados quanto ao seu potencial de FBN.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-07-13T12:46:58Z No. of bitstreams: 1 Patricia Carla Batista de Andrade.pdf: 2555637 bytes, checksum: c2201632f1465d0fffc6c49040788de9 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-13T12:46:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Patricia Carla Batista de Andrade.pdf: 2555637 bytes, checksum: c2201632f1465d0fffc6c49040788de9 (MD5) Previous issue date: 2017-02-22 / Nitrogen fertilization in sugarcane in the first crop cycle has been widely used to maintain adequate productivity. This fertilization impacts the environment and costs the production costs of the crop. Thus, it is necessary to find alternatives to minimize this problem, such as biological fixation, which can be associated with organic residues of the sugarcane agribusiness, such filter cake and/or vinasse, can supply nitrogen (N) by potentiating the residue on the bacteria, without deleterious effect on them. These residues are important sources of phosphorus and potassium, but relatively poor in N. Other, they need to be decomposed, a process of mineralization of organic matter by microorganisms. Therefore, diazotrophic bacteria can exert this role of accelerating the decomposition, aiding the nutrition of the sugarcane. The objective of this study was to evaluate the effect of the inoculation of diazotrophic bacteria combined with the application of filter cake (TF) in the second cycle of sugarcane cultivation in different varieties and to study the decomposition of agroindustrial residues inoculated with these bacteria in Solos of contrasting textures. An experiment was conducted with two sugarcane varieties (RB867515 and RB92579) inoculated with two bacterial genera (Pantoea sp. and Stenotrophomonas sp.) isolated as well as the mixture of these two genera, and three controls (without and with nitrogen and residual control of inoculation in the cane plant). Four evaluations were made at 180, 240, 300 and 360 days after regrowth (DAR), where were evaluated the nitrogenase activity (AN), the contribution of biological N fixation (FBN) by the natural abundance method of 15N. Chlorophyll a and b in the diagnostic leaf, vegetative growth (diameter, height and number of leaves). At 240 DAR was determined the nutritional status and at 360 DAR was measured the agricultural and industrial productivity. Other experiment was carried in a greenhouse with eight treatments: compost, filter cake (TF), (TF + vinasse), (compound + vinasse), inoculated and not inoculated with a mixture of the Pantoea sp. and Stenotrophomonas sp. In the soils, sandy and clayey with four replicates. The residues were packed in litter bags and evaluated at 0, 20, 40, 60, 80 and 100 days after the start of the study. The decomposition constant (k) of the remaining mass, the N, C and C/N ratio of the residues were evaluated. AN was influenced by inoculation and addition of TF. FBN contributed 25% of the sugarcane N, not influenced by TF, but inhibited by mineral N. The application of TF potentiated the absorption of N, independent of the variety. It favored photosynthetic pigmentation only in variety RB92579. The productivity of the fertilized plants did not differ from those inoculated, regardless of the TF. A k decreased with time and TF decomposition was enhanced when combined with vinasse and/or inoculated. The N mineralization rate at the beginning of the waste decomposition was higher than that of the C, mainly in the vinasse and inoculated treatments, increasing the C/N ratio, which only decreased in the second half of the decomposition period. / A adubação nitrogenada em cana-de-açúcar no primeiro ciclo de cultivo tem sido muito utilizada para manter adequada a produtividade. Essa fertilização impacta o ambiente e onera os custos de produção da cultura. Assim, é necessário encontrar alternativas para minimizar essa problemática, como a fixação biológica, que se associada a resíduos orgânicos da própria agroindústria canavieira, como a torta de filtro e/ou vinhaça, pode fornecer nitrogênio (N) pela potencialização do resíduo sobre as bactérias sem causar efeito deletério nestas. Estes resíduos são importantes fontes de fósforo e potássio, mas relativamente pobres em N. Por outro lado, precisam ser decompostos, processo de mineralização da matéria orgânica realizado por micro-organismos. Portanto, bactérias diazotróficas podem exercer esse papel de acelerar a decomposição, auxiliando a nutrição da cana-de-açúcar. Assim, o objetivo foi avaliar o efeito da inoculação de bactérias diazotróficas combinadas com aplicação de torta de filtro (TF) no segundo ciclo de cultivo da cana-de-açúcar em diferentes variedades e estudar a decomposição de resíduos da agroindústria inoculados com essas bactérias em solos de texturas contrastantes. Foi conduzido um experimento com duas variedades de cana-de-açúcar (RB867515 e RB92579) inoculadas com dois gêneros bacterianos (Pantoea sp. e Stenotrophomonas sp.) isoladas bem como a mistura destes dois gêneros, e três testemunhas (sem e com nitrogênio e testemunha residual de inoculação na cana planta). Foram realizadas quatro avaliações aos 180, 240, 300 e 360 dias após a rebrota (DAR), onde foi avaliada a atividade da nitrogenase (AN), a contribuição da fixação biológica de N (FBN) pelo método da abundância natural do 15N, os teores de clorofila a e b, e N na folha diagnóstica, o crescimento vegetativo (diâmetro, altura e número de folhas). Aos 240 DAR foi determinado o estado nutricional e aos 360 DAR foi mensurada a produtividade agrícola e industrial. Outro ensaio foi montado em casa-de-vegetação com oito tratamentos: composto, torta de filtro (TF), (TF + vinhaça), (composto + vinhaça), inoculado e não inoculado com uma mistura das estirpes Pantoea sp. e Stenotrophomonas sp. nos solos, arenoso e argiloso com quatro repetições. Os resíduos foram acondicionados em litter bags e avaliados aos 0, 20, 40, 60, 80 e 100 dias após o início do ensaio. Foram avaliados a constante de decomposição (k) da massa remanescente, os teores de N, C e relação C/N dos resíduos. A AN foi influenciada pela inoculação e adição de TF. A FBN contribuiu com 25% do N da cana-de-açúcar, não sendo influenciada pela TF, porém inibida pelo N mineral. A aplicação de TF potencializou a absorção de N, independente da variedade. Favoreceu a pigmentação fotossintética apenas na variedade RB92579. As produtividades das plantas adubadas não se diferenciaram das inoculadas, independente da TF. A k diminuiu com o tempo e a decomposição da TF foi intensificada quando combinada com vinhaça e/ou inoculados. A taxa de mineralização do N no início da decomposição dos resíduos foi maior do que a do C, principalmente nos tratamentos com vinhaça e inoculados, incrementando a relação C/N, que só se reduziu na segunda metade do período de decomposição.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo deste trabalho foi avaliar a fixação biológica de nitrogênio (FBN) em cinco cultivares de feijão-caupi - BR-17 Gurguéia, BRS Guariba, BRS Mazagão, UFRR Grão Verde e Pretinho Precoce 1. Em 2007, conduziu-se um experimento em casa de vegetação e outro em campo, utilizando um esquema fatorial com cinco cultivares de feijão-caupi, três fontes de nitrogênio (adubação com uréia na dose de 50 kg ha-1 de N, inoculação com as estirpes de Bradyrhizobium BR 3262 e BR 3267) e um controle absoluto. Aos 35 dias, após a emergência das plantas, avaliou-se o número e a massa seca de nódulos, massa da matéria seca e N-total da parte aérea, eficiência nodular em casa de vegetação e o rendimento de grãos na colheita em campo. Em casa de vegetação, observou-se alta nodulação e eficiência nodular para ambas as estirpes em todas as cultivares, destacando-se BR 17 Gurguéia e Pretinho Precoce 1, com a maior e menor nodulação, respectivamente. No campo, a nodulação e o N-total foram menores para todas as cultivares, comparativamente à casa de vegetação, indicando interferência de fatores locais na FBN. Um aumento no rendimento de grãos ocorreu em todas as cultivares, em decorrência da inoculação, especialmente com a estirpe BR 3262, que mostrou capacidade para substituir a adubação nitrogenada. Os resultados também mostraram que as cultivares de feijão-caupi avaliadas respondem a inoculação com as estirpes avaliadas, indicando ser uma alternativa eficiente para o aumento da produtividade desta cultura, gerando um impacto econômico e ambiental positivo / The work aimed to evaluate the biological nitrogen fixation (BNF) in five cowpea cultivars - BR-17 Gurguéia, BRS Guariba, BRS Mazagão, UFRR Grão Verde and Pretinho Precoce 1. In 2007, one green house and one filed experiment were performed using a factorial design with five cowpea cultivars and three nitrogen sources (urea fertilization in the level of 50 kg ha-1 of N, inoculation with BR 3262 and BR 3267 Bradyrhizobium) and a complete control. Thirty-five days after plants emergency, were evaluated the nodules number and dry weight, plants dry weigh matter and total-N, nodular efficiency in the green house and the grains yield in field experiment on the harvest. In the green house, high nodulation and nodular efficiency were observed for both strains in all cultivars, with prominence to BR 17 Gurguéia and Pretinho Precoce 1, with the largest and smallest nodulation, respectively. The nodulation and total-N for all cultivars were smaller in the field, comparatively with the green house experiment, indicating the interference of local factors in the BNF. A grains yield increase was observed for all cultivars, in consequence of the inoculation, especially with the BR 3262 strain, that showed capacity to substitute the nitrogen fertilization. The results showed that cowpea cultivars recommended to Roraima have a good response to the inoculation with the strains evaluated showing that they are an efficient alternative to increase the yield of this crop, generating a positive economical and environmental impact to agriculture in Roraima

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Entre as leguminosas forrageiras potencialmente importantes para as condições edafoclimaticas do Brasil, o gênero Stylosanthes destaca-se como alternativa para a melhoria da fertilidade do solo em pastagens consorciadas com gramíneas, tanto pela sua adaptação ao sistema quanto pela capacidade de estabelecer simbiose com bactérias fixadoras de nitrogênio. O objetivo deste trabalho foi isolar, caracterizar e avaliar a eficiência na fixação biológica de nitrogênio por bactérias isoladas de nódulos de estilosantes (Stylosanthes ssp.). Foram realizadas coletas de plantas de Stylosanthes ssp. em dois municípios de Roraima (Boa Vista e Bonfim), sendo exsicatas das plantas enviadas para identificação botânica no Museu Integrado de Roraima. As raízes das plantas foram lavadas com água e ao todo 564 nódulos foram coletados e isolados em meio de cultura YMA. Adicionalmente, também foram utilizados no estudo 34 isolados que haviam sido obtidos previamente de Stylosanthes sp. Após a purificação, os isolados foram morfologicamente caracterizados em meio YMA, considerando-se o tempo de crescimento, alteração do pH no meio de cultura, forma e aspecto das colônias e muco. Realizou-se então um agrupamento dos isolados utilizando-se o coeficiente de Jaccard. Em seguida, conduziu-se um experimento pelo período de 20 dias para a autenticação de 89 isolados de rizóbio em experimento de casa de vegetação inoculando-se plantas de feijão-caupi. Os isolados foram selecionados por representarem os grupos morfológicos das bactérias e, também, as espécies de Stylosanthes de onde haviam sido obtidos. Quarenta e quatro isolados que nodularam o feijão-caupi foram posteriormente utilizados para o estudo da eficiência simbiótica em Stylosanthes capitata cv. lavradeiro. Este experimento foi conduzido em casa de vegetação utilizando-se a estirpe BR BR 446 (recomendada para o Stylosanthes) como controle positivo, além de um tratamento nitrogenado (180,75mg / N por semana) e um controle sem inoculação e sem nitrogênio mineral. O plantio foi realizado em potes contendo uma mistura de areia e solo (1:1) autoclavados e semanalmente aplicou-se solução nutritiva e água quando necessário. A coleta foi realizada aos 65 dias após a emergência das plantas e foram avaliados número e massa de nódulos secos, matéria seca da parte aérea e nitrogênio acumulado na parte aérea. Dos 564 nódulos foram obtidos 258 isolados que somados aos demais 34 isolados (anteriormente obtidos) totalizaram 292. Os isolados apresentaram grande diversidade morfológica e foram agrupados em 87 grupos com 70% de similaridade. A maioria dos isolados 46% apresentou característica de crescimento rápido em meio de cultura YMA e apenas 0,7% com crescimento lento. A autenticação indicou que apenas 44 das 89 bactérias testadas formaram nódulos em feijão-caupi, sendo na sua maioria bactérias de crescimento rápido. Isto indica que possa haver especificidade de nodulação entre os isolados de rizóbio e as espécies de estilosantes e diverge da literatura que indica que estilosantes preferencialmente nodula com bactérias de crescimento lento. O experimento de eficiência simbiótica indicou que cerca de 50% dos isolados proporcionaram número de nódulos em Stylosanthes capitata igual à estirpe recomendada e proporcionaram produção de matéria seca da parte aérea com tendência superior ao tratamento nitrogenado e a estirpe recomendada. As estirpes St4A29, StG57, St1A8, StF29 e St6E2-3 apresentaram melhor desempenho e possuem potencial para futuras pesquisas de recomendação de estirpes. / Among potentially important forage legumes for edaphoclimatic conditions in Brazil, the genus Stylosanthes appears as alternative for improving the soil fertility in consortium with grasses, both by the adaptation to the system as well as the ability to establish symbiosis with nitrogen-fixing bacteria. The aim of this study was isolate, characterize and assess the biological nitrogen fixation efficiency of the bacterial isolated from nodules of Stylosanthes ssp. Samplings of Stylosanthes ssp. plants were taken from two municipalities of Roraima State (Boa Vista and Bonfim), and plants exsiccates were sent for botanical identification at Integrated Museum of Roraima. The plants roots were washed with water and a total of 564 nodules were collected and isolated on YMA medium. Additionally, 34 isolates previously obtained from Stylosanthes sp. were also included in the study. After purification, the isolates were morphologically characterized, considering the time to growth, culture medium pH reaction, shape and aspect of the colonies and mucus. A clustering analysis was further performed with the Jaccard index. An authentication experiment was carried on during 20 days in glasshouse with 89 isolates inoculated in cowpea. The isolates were selected based on morphological groups and also Stylosanthes species that they had been isolated. Forty-four isolates that nodulated cowpea were after used for symbiotic efficiency evaluation in Stylosanthes capitata (cv. Lavradeiro). This experiment was performed in glasshouse where it was used the strain BR 446 (indicated for Stylosanthes inoculation) as positive control, besides a treatment with nitrogen (180,75mg / N per week) and a control without inoculation or nitrogen. The sowing was done in pots containing a mixture of sand and soil (1:1) autoclaved. Harvest was done 65 days after plant germination and were evaluated the nodules number and dry mass, plant dry matter and nitrogen accumulation in the dry matter. From 564 nodules, 258 isolated were purified and, with the additional 34 isolates (previously obtained), 292 isolates were consider for the study. The isolates showed high morphological diversity and were clustered in 87 groups, with threshold 70%. Most of the isolates 46% presented fast growing on YMA medium and only 0,7% were slow-growing. The authentication revealed that 44 of the 89 bacteria tested were able to form nodules in cowpea, and most of this isolates were fast-growing. This result indicated that could exist nodulation specificity between rhizobium isolates and Stylosanthes species, and diverge of the previous observations that had indicated Stylosanthes as mainly nodulated by slow-growing bacteria. Symbiotic efficiency experiment indicated that about 50% of the isolates were able to form nodules in Stylosanthes capitata similar to recommend strain and trend to higher contribution for biomass production was observed in comparison with nitrogen treatment and recommended strain as well. The strains St4A29, StG57, St1A8, StF29 and St6E2-3 have shown best performance and have potential for future researches to strains recommendation.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A castanheira-do-Brasil (Bertholletia excelsa H.B.K.), Lecythidaceae, é uma espécie nativa de potencial interesse para sistemas agroflorestais (SAFs) na Amazônia. Uma das dificuldades da propagação da castanheira é seu processo germinativo desuniforme, que constitui um problema no estabelecimento de mudas para cultivos. Pouco se sabe sobre os micro-organismos benéficos associados às raízes de castanheira-do-Brasil, sendo que o uso de micro-organismos promotores do crescimento vegetal pode ser uma biotecnologia positiva para a produção de mudas de qualidade. O objetivo desse trabalho foi caracterizar fenotípica e genotipicamente bactérias isoladas de raízes de castanheira-do-Brasil cultivadas e nativas e avaliar a presença de características para promoção do crescimento vegetal. Foram isoladas 303 bactérias de raízes de castanheiras em Roraima, sendo 81 oriundas da área de monocultivo de castanheira, 154 de SAF e 68 de área de floresta nativa. As bactérias foram isoladas utilizando meios semissólidos NFB, LGI, JMV e DYGS. A caracterização fenotípica dos isolados foi avaliada através das análises de proteína totais por SDS-PAGE, solubilização de fosfato de cálcio em meio sólido, solubilização de fosfato de alumínio em meio liquido e produção de ácido indol acético. Baseado nos perfis de proteínas (SDS-PAGE) foi estimado o índice de diversidade de Shannon e análise de rarefação. A caracterização genotípica foi realizada através da avaliação da presença ou ausencia do gene nifH e pelo sequenciamento parcial do 16S rRNA. Das 303 bactérias foram obtidas o perfil proteico de 290. Através da análise dos perfis proteicos foram gerados quatro dendrogramas referentes a cada meio de isolamento, JMV, LGI, DYGS e NFB. A partir desses dendrogramas, foi realizada uma seleção de bactérias a partir de grupos formados a 80% de similaridade em cada meio de isolamento, sendo selecionadas 100 bactérias. Na avaliação da diversidade em cada ambiente, os índices de diversidade foram similares para as três localidades de onde foram isoladas as bactérias. Das 100 bactérias avaliadas quanto a capacidade de solubilização de fosfato de cálcio em meio sólido, observou-se que 69% apresentaram esta característica e 90% apresentaram capacidade de solubilizar fosfato de alumínio em meio liquido. Setenta bactérias sintetizaram acido indol acético, onde 44 sintetizaram em meio sem triptofano, 61 em meio com triptofano e 35 apresentaram nos dois meios. Das 100 bactérias submetidas à amplificação da região do gene nifH apenas 18 apresentaram bandas específica de amplificação correspondente do gene nifH, sendo oito isoladas em meio semisseletivo para Azospirilum sp. (NFB e LGI), e 10 isoladas de meio não seletivo (DYGS). Entre as bactérias avaliadas, 24 se destacaram para futuros testes de inoculação na produção de mudas, por apresentarem no mínimo duas ou mais caracaterísticas de promoção do crescimento vegetal. Através da análise do gene 16S rRNA, as sequências de nucleotídeos obtidas resultaram na distribuição das bactérias em 18 gêneros distintos. Foram detectadas sequências de gêneros pertencentes às classes α-Proteobacteria, β-Proteobacteria, γ-Proteobacteria, Bacilli e Actinobacteria. Estes resultados indicam uma elevada diversidade de gêneros de bactérias endofíticas promotoras do crescimento presentes em raízes de castanheira-do-Brasil. Trata-se do primeiro trabalho de caracterização de bactérias endofíticas promotoras de crescimento em raízes de castanheira-do-Brasil.

Enterobactérias são comumente encontradas em simbiose com plantas, promovendo o crescimento vegetal, através da redução do nitrogênio atmosférico a amônia. Entretanto, são os principais patógenos na medicina humana e veterinária. O objetivo deste estudo foi buscar marcadores genéticos e fisiológicos que caracterizem espécies de enterobactérias isoladas de cana-de-açúcar (n=24) e de origem clínica (n=15). Foram submetidas a testes moleculares e fisiológicos como: capacidade de reduzir N2; perfil de susceptibilidade a antibióticos; atividade hemolítica; produção de substâncias promotoras de crescimento e liberação de enzimas extracelulares. Atividades metabólicas e fisiológicas altamente conservadas, sustentadas pelo ponto vista genético, permitem a distribuição destas espécies em diferentes ecossistemas, e, em condições favoráveis, esta adaptação pode contribuir para o estabelecimento de processos patogênicos ou simbióticos em plantas. Então, enterobacterias ambientais podem se tornar patogênicas, enquanto isolados clínicos podem se adaptar a condições ambientais. / Enterobacteria are commonly found in symbiosis with plants, promoting their growth by reducing atmospheric nitrogen to ammonia. However, they are also major pathogens in human and veterinary medicine. The aim of this study was to characterize physiological and genetic markers that distinguish enterobacteria species isolated from sugarcane (n= 24) and clinical sources (n= 15). The samples were characterized regarding their molecular and physiological assays as: ability to reduce N2, antibiotic susceptibility profile; screen for hemolytic activity; production of plant-growth promoting compounds and release of extracellular enzymes. Finally, highly conserved physiological and metabolic activities are supported on genetic backgrounds that allow a wide distribution along different ecosystems and, in favorable conditions, this adaptation could contribute to the establishment of a pathogenic process or symbiosis in plants. So, environmental enterobacteria isolates can become pathogenic, whereas clinical strains can adapt to environmental conditions.

Orientador: Leandro Borges Lemos / Resumo: A utilização de manejos sustentáveis para maximizar a produtividade das culturas sem aumentar os custos de produção é um dos grandes desafios da agricultura atual. Assim, objetivou-se avaliar o efeito de manejos de fornecimento de nitrogênio, associando formas de inoculação com Rhizobium tropici, co-inoculação com Azospirillum brasilense e adubação mineral de cobertura, no desempenho agronômico de cultivares de feijão comum do grupo comercial carioca de ciclo precoce. O experimento foi instalado em delineamento em blocos casualizados (DBC), no esquema fatorial 2x12 (2 cultivares e 12 manejos de fornecimento de N), com quatro repetições. Para os manejos de fornecimento de N foram associados adubação mineral de cobertura com N (45 e 90 kg ha-1 de N), inoculação de sementes com Rhizobium tropici e coinoculação via semente e foliar com Azospirillum brasilense. Foram avaliados o número de trifólios por planta, área foliar, índice de clorofila, teor de nitrogênio foliar e nos grãos, massa seca de plantas, número de vagens por planta, número de grãos por planta e produtividade, número de nódulos por planta, massa seca de nódulos por planta, massa seca de raízes e eficiência de nodulação. Os dados foram submetidos à análise de variância (teste F) e, quando necessário, as médias foram agrupadas pelo teste de Scott-Knott a 5% de probabilidade. Com exceção da massa seca de plantas, todas as variáveis analisadas apresentaram máxima resposta no tratamento com inoculação de sementes com Rh... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The use of sustainable managements techniques to maximize crop productivity without increasing production costs is one of the great challenges of modern agriculture. The objective of this study was to assess the effect of different nitrogen management by testing the inoculation with Rhizobium tropici, co-inoculation with Azospirillum brasilense, and topdressing N fertilization on the agronomic performance of common bean cultivars of early cycle. The experiment was carried out in a randomized block design (RBD), in a 2x12 factorial scheme (2 cultivars and 12 N supply management), with four replications. For N supply management, it was used topdressing N fertilization (45 and 90 kg ha-1 N), seed inoculation with Rhizobium tropici, and seed and leaf co-inoculation with Azospirillum brasilense. It was evaluated: the number of trifolium per plant, leaf area, chlorophyll index, leaf and grain nitrogen content, dry mass of plants, number of pods per plant, number of grains per plant and yield, number of nodules per plant, dry matter of nodules per plant, dry matter of root, and nodulation efficiency. Data were subjected to analysis of variance (F test) and, when necessary, means were grouped by Scott-Knott test at 5% probability. Except for the dry mass of plants, all variables analyzed showed maximum response in the treatment with seed inoculation with Rhizobium tropici, foliar application of Azospirillum brasilense, and topdressing fertilization with 90 kg ha-1 of N. In general, t... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Marcelo Carvalho Minhoto Teixeira Filho / Resumo: A utilização de bactérias promotoras de crescimento de plantas (BPCPs) pode promover aumento na eficiência da fixação biológica de nitrogênio (FBN), com benefícios no desenvolvimento e produtividade de grãos de soja. Diante o exposto, objetivou-se avaliar os efeitos da coinoculação entre rizóbios e seis BPCPs (Azospirillum brasilense, Bacillus amyloliquefacens, B. licheniformis, B. pumilus, B. subtilis e Pseudomonas fluorescens), inoculadas via semente ou em jato dirigido na base da planta no estádio V3, sobre a nodulação, nutrição, acúmulo de nutrientes e produtividade de grãos de soja no Cerrado. Os experimentos foram conduzidos em sistema plantio direto na Fazenda Experimenal da Faculdade Unesp, Campus de Ilha Solteira, localizada no município de Selvíria – MS, Brasil. num Latossolo Vermelho Distrófico de textura argilosa, em cultivo irrigado. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso com quatro repetições, dispostos em esquema fatorial 6x2+3, sendo coinoculação de rizóbios com seis BPCPs (Azospirillum brasilense, Bacillus amyloliquefacens, B. licheniformis, B. pumilus, B. subtilis e Pseudomonas fluorescens), inoculadas na semente ou em jato dirigido na base da planta no estádio V3 da soja; além da testemunha sem inoculação e N, inoculação de sementes apenas com rizóbios (Bradyrhizobium japonicum), e tratamento com adubação nitrogenada (ureia). A coinoculação da soja com as bactérias promotoras de crescimentos via semente ou em estádio V3 proporciona maior número ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The use of plant growth promoting communities may increase the biological nitrogen efficiency, with benefits in the development and productivity of soybean grains. Given the above, the objective of this study was to evaluate the effects of co-inoculation between rhizobia and six species of growth promoting bacteria (Azospirillum brasilense, Bacillus amyloliquefacens, B. licheniformis, B. pumilus, B. subtilis e Pseudomonas fluorescens), inoculated via seeds or directed jet at the base of the plant in V3 stage, on nodulation, nutrition, nutrient accumulation and yield of soybean grains at Cerrado. The experiments were conducted under no-tillage system at the Experimenal Farm belonging to Unesp-Ilha Solteira, located in Selvíria-MS, Brazil, in irrigated cultivation. The experimental design adopted was randomized blocks, with four replicates, arranged in 6x2+4 factorial outline, being co-inoculation of rhizobia with six species of growth promoting bacteria (Azospirillum brasilense, Bacillus amyloliquefacens, B. licheniformis, B. pumilus, B. subtilis e Pseudomonas fluorescens) inoculated in the seed or directed jet at the base of the plant in V3 stage in soybean, beyond the control without inoculation and nitrogen, seed inoculation only with rihzobia (Bradyrhizobium japonicum), and treatment with nitrogen fertilization (urea). The co-inoculation of soybean with growth promoting bacteria via seed or in the V3 stage provides greater numbers of nodules per plant relative to conventio... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre