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Estudo da capacidade antioxidante total em tecidos e fluidos biologicos usando a voltametria de pulso diferencial / Total antioxidant capacity in tissues and body fluids: a differential pulse voltammetry study

Gandra, Paulo Guimarães, 1980- 07 May 2006 (has links)
Orientadores: Denise Vaz de Macedo, Armindo Antonio Alves / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-06T19:50:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gandra_PauloGuimaraes_M.pdf: 2519156 bytes, checksum: 95614e6d3c6f42975590f551e27382d2 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: O objetivo central deste trabalho foi analisar a variação da capacidade antioxidante total, conferida por antioxidantes de baixo peso molecular (ABPM) em fluidos biológicos e tecidos, através do uso da voltametria de pulso diferencial (VPO). O capítulo 1 corresponde a um artigo de revisão sobre as possíveis fontes de geração de espécies reativas de oxigênio no músculo esquelético durante o exercício físico. O capítulo 2 é um artigo de divulgação, cujo objetivo é fornecer subsídios para a análise da capacidade antioxidante total de amostras biológicas conferida por ABPM para acompanhar a modulação do sistema de defesa antioxidante em função do treinamento físico. Para tanto, são discutidos o uso da voltametria cíclica e a possibilidade do uso de outras técnicas voltamétricas, como a VPO. O artigo contido no capítulo 3 apresenta dados da concentração de ABPM no plasma e na saliva de atletas submetidos a um período de treinamento físico. Observou-se, nesse estudo, uma diminuição da capacidade antioxidante total do plasma após 6 semanas de treinamento (879.28 :t 197.92 j..Imol Trolox equiv. L-1 na segunda semana versus 787.82 :t 154.71 j..Imol Trolox equiv. L-1 na sétima semana). Essa diminuição foi associada a um aumento no desempenho em testes físicos específicos e à manutenção das concentrações de marcadores de lesão muscular e de processo inflamatório, sugerindo que uma diminuição na capacidade antioxidante plasmática faz parte do estágio inicial de adaptação ao treino. As capacidades antioxidante da saliva e do plasma apresentaram correlação entre si (r=O.5871, p<O.01) e com suas respectivas concentrações de urato. No artigo contido no capítulo 4 são mostrados os resultados da cinética de ABPM mensurados nas extrações lipofílica e hidrofílica e a atividade de antioxidantes enzimáticos em amostras de músculo esquelético e fígado de ratos, em diferentes momentos pós-exercício físico, precedidos por jejum de 24 h. As extrações hidrofílicas de músculo e fígado e a lipofílica do fígado apresentaram duas classes de ABPM, enquanto a extração lipofílica do músculo, somente uma. Observou-se uma diminuição significativa da capacidade antioxidante total conferida por ABPM hidrofílicos e lipofílicos em todos os momentos analisados (30 min, 1, 6 e 24 h). Apenas uma classe de ABPM hidrossolúveis foi restabelecida 24 h pós-exercício no músculo. No fígado, a primeira e segunda classes de ABPM lipofílicos mostraram-se elevadas em 57% e 42% respectivamente após o jejum. A atividade dos antioxidantes enzimáticos também se mostrou diminuída durante todo o período analisado, apresentando forte correlação com a capacidade antioxidante total conferida por ABPM. Esses dados sugerem que tanto os antioxidantes enzimáticos como os não enzimáticos são modulados pelas EROs produzidas durante e após o exercício. Os resultados desse estudo apresentaram pela primeira vez o uso da voltametria de pulso diferencial para determinação da capacidade antioxidante conferida por ABPM em fluidos biológicos, como plasma e saliva, e em tecidos como o fígado e músculo esquelético / Abstract: The objective of this study was to analyze the changes in total antioxidant capacity conferred by low molecular weight antioxidants (LMWA) in biological fluids and tissues by the use of differential pulse voltammetry (DPV). Chapter 1 is a review article about the possible fonts of reactive oxygen species generation in skeletal muscle during exerci se. Chapter 2 is a divulgation article that deals with antioxidant defense systems, LMWA detection methods, cyclic voltametry and DPV. The paper in chapter 3 presents the results about LMWA concentration in plasma and saliva of athletes submitted to physical training. It was observed a decrease in plasma total antioxidant capacity after 6 weeks of training (879.28 :t 197.92 !-Imol Trolox equiv. L-1 in second week versus 787.82:t 154.71 !-Imol Trolox equiv. L-1 in seventh week) associated to an enhanced physical performance in specific tests and maintained indices of muscle damage and inflammation. The data suggests that a small decrease in the plasma antioxidant capacity is part of a normal answer in the initial stages of a physical training programo It was also shown in this study a significant correlation between plasma and saliva antioxidant capacity (r=0.5871, p<0.01) and a significant correlation between this samples antioxidant capacity and their respective urate concentrations. In chapter 4 the kinetics of liver and skeletal muscle hydrophilic and lipophilic LMWA and enzymatic antioxidants from rats submitted to exhaustive exerci se preceded by 24h of fasting, are shown. Liver and muscle hydrophilic extractions and liver lipophilic extraction presented two classes of LMWA while muscle lipophilic extraction presented only one class. It was observed a significant decrease in the antioxidant capacity conferred by hydrophilic and lipophilic LMWA and enzymatic antioxidants in ali analyzed moments (30 min, 1, 6 e 24 h). Only one class of muscle hydrophilic LMWA showed to be reestablished 24h after exerci se. Liver lipophilic first and second classes of LMWA were increased in 57% and 42% respectively after fasting. Enzymatic antioxidants activities were also reduced during the whole analyzed period, presenting a strong correlation with the antioxidant capacity conferred by LMWA. These is the first report of the use of differential pulse voltammetry for total antioxidant capacity determination conferred by LMWA of biological fluids as plasma and saliva and tissues like liver and skeletal muscle / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

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