La détermination de l'âge et du sexe à partir de restes osseux est une problématique essentielle en anthropologie biologique et en anthropologie médico-légale. Les moyens existants sont anciens et font l'objet de nombreuses critiques méthodologiques. Nous avons donc étudié 3 séries : notre série (inédite) de 782 fœtus, les ossements de la collection Fazekas et Kosa, ainsi que les restes fœtaux de la fouille archéologique de la Chapelle St Jean (Hautes-Alpes). Au moyen de différentes méthodes et tests méthodologiques que nous avons préalablement validés, nous avons d'une part démontré les grandes difficultés de la détermination du sexe fœtal, et nous avons d'autres part amélioré et fiabilisé les estimations de l'âge à partir d'une méthodologie originale utilisant la mesure radiographique des os longs. Ces résultats sont comparés aux moyens de détermination de l'âge classiquement utilisés par les anthropologues et nous permettent de confirmer la grande fiabilité de la méthode que nous avons établie.

L'administration d'une diète enrichie à 0,2% en cholestérol (DEC) cause une hypercholestérolémie maternelle et foetale, et entraîne une diminution de 15,5% du poids des rejetons à la naissance chez les lapines. Cependant, les mécanismes qui engendrent la diminution du poids des rejetons sont encore inconnus Le glucose joue un rôle primordial dans le développement foetal. Une diminution de l'apport en glucose et une hypoglycémie foetale sont les mécanismes pathophysiologiques d'une restriction de la croissance intrauterine (RCIU). Le glucose traverse le placenta en utilisant des transporteurs spécifiques, soit les SGLT (dépendant du Na+) et les GLUTs (transport facilité). Cependant, la régulation des GLUTs nécessite leur translocation du pool intracellulaire vers la membrane plasmatique et ce phénomène peut grandement être influencé par l'environnement lipidique de la membrane. L'objectif de cette étude est donc d'étudier l'impact d'une DEC durant la gestation chez la lapine sur le métabolisme du glucose, l'expression génétique et protéique des SGLT et GLUTs et le routage des GLUTs dans le placenta. Pour effectuer cette étude, deux groupes de lapines gestantes et leurs rejetons ont été utilisés: un groupe de femelles a été nourri avec une diète standard pour lapin et l'autre avec une DEC. Les niveaux sériques de glucose et d'insuline ont été évalués. La quantification relative de GLUTs (ARNm) dans le placenta a été fait par «reverse transcriptase polymerase chain reaction» (RT-PCR) en temps réel. La quantification des niveaux d'expression protéique de SGLTI et de GLUTs placentaires a été réalisée par immunobuvardage de type Western. Nos résultats démontrent que la concentration du glucose chez les rejetons hypercholestérolémiques est inférieure à celle de leur mère, ainsi qu'à celle des rejetons contrôles. Une diminution du niveau d'insuline maternelle à la fin de la gestation a également été observée dans les deux groupes des lapines. Cependant, aucune différence dans l'insulinémie foetale n'a été retrouvée. L'expression des GLUT1, GLUT3 et GLUT4 (ARNm) placentaires n'a pas été modifiée par la DEC. En ce qui a trait à l'expression protéique des GLUTs, la DEC ne semble pas influencer leur niveau dans des extraits de protéines totales placentaires. Cependant l'expression de la SGLT1, elle, est fortement diminuée (4 fois). Par contre, le fractionnement cellulaire a permis de démontrer une diminution de l'expression de GLUT1 dans la membrane plasmique des placentas de lapines hypercholestérolémiques, avec une augmentation concomitante de l'expression de GLUT1 dans la fraction cytosolique. Cependant, aucune différence dans l'expression protéique de GLUT4 dans ces 2 fractions n'a été constatée dans le placenta de deux groupes de lapines. En conclusion, l'hypercholestérolémie maternelle: 1) entraîne une hypoglycémie foetale, 2) n'influence pas le niveau de l'insuline maternelle et foetale, 3) n'a pas d'effet sur l'expression génétique de GLUT1, GLUT3 et GLUT4 placentaires, 4) diminue l'expression de SGLTI placentaire dans l'extrait de protéines totales, et 5) influence uniquement le routage des GLUT1 vers la membrane plasmique. L'hypoglycémie foetale pourrait, donc, être engendrée par la diminution de la mobilisation de GLUT1 placentaire dans la membrane plasmatique. Le faible poids à la naissance des rejetons hypercholestérolémiques pourrait s'expliquer par l'hypoglycémie foetale. ______________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : Hypercholestérolémie, RClU, Transporteur du glucose, Placenta, Lapin.

La tritrichomonosis bovina (TB) es una enfermedad de transmisión sexual causada por el protozoo Tritrichomonas foetus que produce muerte embrionaria, piómetra y abortos esporádicos. El objetivo de esta tesis fue estudiar los mecanismos involucrados en la pérdida del conceptus en un modelo murino de TB. Se infectaron ratonas BALB/c con T. foetus, que fueron apareadas con machos sanos. Se utilizaron técnicas histológicas para estudiar los cambios endometriales en las ratonas infectadas y analizar el número y distribución de las células natural killer uterinas y de los mastocitos. Mediante lectinahistoquímica e inmunohistoquímica se analizaron los carbohidratos y la muerte y proliferación del epitelio uterino, respectivamente. Con real time RT-PCR se estudió la expresión de citoquinas, hemooxigenasa-1 (HO-1) e indolamina 2,3 dioxigenasa (IDO) y a las células T reguladoras (Treg) y T helper 17 (Th17), en el útero. En el grupo de ratonas infectadas, la muerte embrionaria se produjo en las fases temprana y media de la gestación, asociada a endometritis y cambios en el patrón de carbohidratos y en los índices de proliferación y muerte celular del epitelio uterino. El ARNm de TNF-α, IL-10 e IL-4 aumentó en el grupo infectado. La expresión de Foxp3, un gen relacionado con las células Treg, y RORγt, marcador de células Th17, fue mayor en el útero de las ratonas infectadas. Los niveles de ARNm de HO-1 disminuyeron en las ratonas que sufrieron pérdida embrionaria. Los cambios en el patrón de carbohidratos y en los índices de muerte y proliferación celular, así como las respuestas T de tipo 1 y 17 podrían estar involucradas en la muerte embrionaria producida durante la infección con T. foetus. Estas respuestas alterarían los mecanismos protectores de la preñez como HO-1. El aumento de las células Treg promovería la persistencia de la infección por su acción inmunosupresora. De esta manera, en el modelo de ratonas preñadas, se caracterizaron mecanismos inmunológicos relacionados con la muerte embrionaria temprana en la TB.

Thèse d'exercice : Médecine : Tours : 2005. / Bibliogr., 20 réf.

Mémoire de Sage-femme : Médecine : Nantes : 2007. / Bibliogr.

Mémoire numérisé par la Division de la gestion de documents et des archives de l'Université de Montréal

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In an attempt to determine mechanisms of certain aspects of ethanol- induced fetal damage, I have established a mouse model of the fetal alcohol syndrome based on the work of Chernoff (1977), using inbred C3H mice. Ethanol or its metabolite, acetaldehyde, was administered to female mice prior to and throughout gestation. Ethanol in doses of 6%, 10% and 20% ethanol derived calories and acetaldehyde 3. 9 mg and 11. 8 mg were administered daily in a nutritionally balanced liquid diet. An acute dose study was also undertaken, in which pregnant C3H mice were given. "binge" doses of 1ml of a 7. 35% solution of ethanol, twice daily through an orogastric tube, on days one and eight or four and twelve of gestation. The mice were sacrificed on day eighteen of gestation and the fetuses weighed and examined macroscopically. Some were sectioned using Wilson's method of free-hand razor blade sectioning (Barrow and Taylor, 1969), and the skeletons of the others were examined using a modified Dawson's method of skeletal preparation (Richmond and Bennett, 1938). A separate in vitro model based on the work of New (1967) was established, in which embryos of eight or nine days' gestation were explanted with visceral yolk sac intact from normal C3H mice. They were cultured for twenty-eight hours in rat serum containing various concentrations of ethanol or acetaldehyde (ethanol 1500, 3000 and 6000mg/l and acetaldehyde 7.4, 19. 7 and 39.4mg/l). During the last four hours of the culture period the embryos were labelled with one microcurie of tritiated thymidine (specific activity 5curies/mmol). At the end of the culture period the embryos were assessed morphologically, and then prepared for liquid-scintillation counting to determine DNA synthesis by measuring tritiated thymidine uptake. Small numbers of embryos from each group were used for autoradiographic studies in an attempt to quantitate the uptake of label in the various parts of the embryo. I found that ethanol given in chronic dosage in vivo was embryotoxic in all three doses studied. There was no evidence of ma tern al toxicity other than hyperactivity at the highest dose used and maternal jaundice in a small number of the 10% EDC and 20% EDC mice. Acetaldehyde given in chronic dosage in vivo produced no toxic effects on mothers or fetuses, other than a reduction in placental weights. Acute "binge" ethanol dosage of mothers on days one and eight or four and twelve of gestation did not appear to have any adverse effects on mothers or fetuses, apart from changes in placental weights. These findings should be viewed with caution, as the in vitro studies did not produce a corresponding result. In the latter study there was a marked time-related response, particularly for acetaldehyde. Ethanol given in vitro produced little evidence of toxicity except at dose levels which in the corresponding in vivo situation were extremely toxic to the mothers. Acetaldehyde, given in vitro in minute fractions of the harmless doses given to mothers in vivo, proved to be highly toxic to 8-day embryos and relatively non-toxic to 9-day embryos. This difference in sensitivity indicates that there must be some protective factor intervening between eight and ten days gestation - possibly the developing placenta may have a role here. From these findings I would suggest that acetaldehyde is a true teratogen, and the abnormalities produced in the chronic ethanol in vivo study were probably largely due to the action of acetaldehyde.

The aim of this work was to examine the effects of sampling method on accuracy of culture for Tritrichomonas foetus; and the effects of sampling method, time delay, and addition of a DNA preservative on the accuracy of a PCR test. Samples from two different sources were used for Experiment 1. Preputial scrapings were collected from one group of three infected and one uninfected bull 10 times. Secondly, samples were collected from 5 infected bulls by both sheath washing and scraping on 6 occasions, while 8 uninfected animals were sampled three or more times. Twenty nine out of 30 samples from the first sample set were found to be positive, and 83 % of samples collected by both methods for the second sample set tested positive. No samples from the control bulls were found to be positive. Scraping was found to offer significant practical advantages over washing. It may be subject to greater operator variability than sheath washing. The second experiment utilised the same samples as were used for the second data set under Experiment 1. Guanidinium thiocyanate (GuSCN) was added to half of each sample. Each sample was cultured, while all samples were subjected to DNA extraction within 6 and 30 hours and after 5 days of storage at 4 °C. PCR and agarose gel electrophoresis was performed. No samples from the control animals tested positive on PCR. The sensitivity of the PCR on samples from infected bulls ranged from 0,9 in samples extracted within 6 hours to 0,31 in samples extracted after 5 days. Sampling method had no effect with the exception of samples held for 5 days with GuSCN, where sheath washing was superior to scraping. The addition of GuSCN had no effect. Holding time reduced sensitivity at 5 days, but the effect was not significant at 30 hours. It is concluded that preputial scraping is equal in sensitivity to washing for culture of Tritrichomonas foetus. Preputial samples for PCR testing should be submitted as soon as possible after collection, and the addition of GuSCN has no effect. Samples collected by sheath washing may be superior to those collected by scraping for PCR testing. The requirement for a test with sufficient sensitivity to allow reliable identification of infected bulls based on one sample has not been met with the described method. / Dissertation (MMedVet (Gyn))--University of Pretoria, 2002. / Production Animal Studies / unrestricted

The aims of the research were to establish whether diphenylhydantoin and phenobarbitone are teratogenic in mice both in vivo and in an in vitro whole embryo culture system, to investigate possible mechanisms of teratogenicity and to examine whether the methods used in this study, may form a basis for developing systems of more extensive drug teratogenicity screening.