Orientador: Osmir Batista de Oliveira Junior / Banca:Rosane de Fatima Zanirato Lizarelli / Banca: Sergio Luiz de Souza Salvador / Banca: Rita de Cassia Loiola Cordeiro / Banca: Marcelo Ferrarezi de Andrade / Resumo: O uso indiscriminado dos antibióticos e seu mecanismo de ação levaram ao desenvolvimento de cepas bacterianas altamente resistentes e de maior virulência. Estas cepas causam doenças muito mais agressivas e de difícil tratamento, constituindo-se um dos principais desafios enfrentados por profissionais da área da saúde. Como a terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDA) baseia seu mecanismo de ação em reações oxidativas não especificas, esta passou a ser uma alternativa interessante para o tratamento de todas as doenças de origem microbiana, uma vez que, nem bactérias, nem vírus ou fungos tem capacidade de desenvolver resistência a TFDA. Considerando que a carie dental é uma doença de origem bacteriana especifica e que a eficácia da TFDA depende do tipo e dose de energia luminosa utilizada, do fotossensibilizador e da taxa de oxigênio nos tecidos a serem tratados, decidimos investigar a viabilidade da TFDA para prevenção e tratamento da cárie dental. Para tal, foram realizados 3 estudos: 1) Revisão critica da literatura sobre fotossensibilizadores utilizados para controle antimicrobianos de Streptococcus mutans. 2) Avaliação do efeito antibacteriano de três fotossensibilizadores (curcumina, hipericina e hematoporfirina) sobre Streptococcus mutans em suspensões planctônicas e 3) Avaliação do efeito antibacteriano de três fotossensibilizadores (curcumina, hipericina e photogem®) Esteban Florez FL. Terapia Fotodinâmica em microrganismos cariogênicos - Estudo in vitro. [Tese de doutorado]. Araraquara: sobre biofilme maduro formado a partir de cepa de Streptococcus mutans. Dos fotossensibilizadores utilizados a hipericina foi a que apresentou maior efeito antimicrobiano sobre suspensão planctônica. Foi comprovado que a eficácia da TFDA esta diretamente relacionada com o tipo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The indiscriminate use of antibiotics and its mechanisms of action led to the development of highly resistant bacterial strains and more virulent ones. This strains can cause diseases much more aggressive and difficult to treat, and in that way they consist in one of the major challenges to the health care professionals. As the antimicrobial photodynamic therapy (APDT) it is based on non-specific oxidative reaction, this is now considered as an interesting alternative to treat all diseases from bacterial origins, once that, neither bacterias, neither viruses nor fungi can develop acquired resistance from the therapy. Taking into consideration that dental caries is a specific bacterial disease and that the APDT's efficiency is directed related to factors as, wavelength, energy dose, photosensitizer used, and with the oxygen present in the target tissue, we have decided to investigate the APDT to prevent and treat dental decay. To accomplish that, it was realized three studies: 1) Critical Literature revision about photosensitizers used to control S.mutans. 2) Evaluation of the antimicrobial effect of three different photosensitizers (Curcumin, Hypericin and Hematoporfirin) over Streptococcus mutans in planktonic cultures and 3) Evaluation of the antimicrobial effect of three photosensitizers (Curcumin, Hypericin and Hematoporfirin) over mature biofilms obtained from Streptococcus mutans strains. From the photosensitizers used Hypericin was the one that showed the most antibacterial observed effect on the planktonic cultures. It was demonstrated by our data that the APDT efficacy is directly related to the time of irradiation of the samples, with the kind of photosensitizer used, its concentration and with the energy dose delivered. None of the proposed protocols were able to show any significant effect over the microorganisms when in biofilm... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Ana Claúdia Pavarina / Banca: Eunice Teresinha Giampaolo / Banca: Ana Paula Dias Ribeiro / Resumo: A necessidade de superar o desafio criado pelos biofilmes resistentes aos tratamentos antimicrobianos convencionais tem levado à busca por tratamentos alternativos, como terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT). Este estudo avaliou in vitro a eficácia da aPDT na inativação de biofilmes de Staphylococcus aureus suscetíveis e resistentes à meticilina (MRSA e MSSA), mediado pelos fotossensibilizadores (PSs) Curcumina (Cur) e Photodithazine® (PDZ). Biofilmes foram formados e tratados com diferentes concentrações de Cur (0, 20, 40 e 80 μM) e PDZ (0, 50 e 75 mg/L), e iluminados ou não por fonte de luz LED (Cur 455 ± 3 nm/ 5,28 J/cm2; PDZ 660 ± 3 nm/ 5,28 J/cm2 ou 50 J/cm²). Os grupos Controle Positivo (CP) não receberam nenhum PS e também não foram iluminados. A viabilidade dos micro-organismos após a aPDT foi avaliado pelo número de colônias viáveis, pelo ensaio de XTT e pela utilização do kit LIVE/DEAD® na Microscopia Confocal de Varredura à Laser (MCVL). Os resultados foram avaliados por análises de variância de dois fatores de efeitos fixos (ANOVA) e complementados por comparações múltiplas de médias pelo teste de Tukey. Para ambas as cepas, todas as concentrações de Cur e PDZ testadas reduziram significativamente a atividade metabólica e o UFC/mL para ambos micro-organismos quando comparado com os grupos CN (p0,05). Os resultados foram otimizados para a Cur quando utilizou-se a maior concentração (80 μM), para a PDZ, a maior redução nos micro-organismos foi observada quando associou-se a maior concentração de PDZ (75 mg/L) com a maior dose de luz (50 J/cm²). Os biofilmes submetidos a aPDT demostraram pela MCVL um maior número de células coradas em vermelho, indicando que a aPDT foi eficaz para promover danos ou morte às células bacterianas. Assim, a aPDT pode ser considerada promissora para atuar de forma sinérgica no tratamento de infecções bacterianas / Abstract: The need to overcome the challenge created by biofilms regarding conventional antimicrobial approaches has lead to search of alternative treatments such as Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT). This in vitro study evaluated the efficacy of aPDT using the photosensitizer (PS) Curcumin (Cur) and Photodithazine® (PDZ) in the inactivation of biofilms of methicillin susceptible and resistant S. aureus (MSSA and MRSA). Biofilms were treated with different Cur (0, 20, 40 or 80 μM of Cur) and PDZ concentrations (0, 50 or 75 mg/L) and illuminated or not with LED source (Cur 455 ± 3 nm/ 5.28 J/cm2; PDZ 660 ± 3 nm/ 5.28 J/cm2 or 50 J/cm²). Positive control samples were not exposed to PS or light. The microorganisms viability after aPDT were evaluated by counting the number of colonies, the XTT assay and LIVE/DEAD® staining using confocal laser scanning microscopy (CLSM). The results were evaluated by analysis of variance, two-factor fixed effects (ANOVA) and complemented by multiple comparisons by Tukey test. For both strains, all the tested Cur and PDZ concentrations reduced significantly both biofilm metabolic activity and CFU/mL compared to the negative control (p0.05). Moreover, the results were optimized for Cur when the higher concentration was used (80 μM); For PDZ, the best results were obtained when it was associated a higher concentration of PDZ (75 mg/L) with the higher dose of light (50 J/cm²). Biofilms submitted to aPDT showed a large number of red-stained colonies, indicating that this therapy was efficient in disrupting the bacterial membrane. It can be concluded that PS was efficient in reducing viable colonies of both S. aureus strains by damaging cell membrane and causing cell death. Thus, the aPDT is can be considered promising to act synergistically in the treatment of bacterial infections / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-15Bitstream added on 2014-06-13T19:58:17Z : No. of bitstreams: 1 pinto_gcs_me_arafo.pdf: 899028 bytes, checksum: 57f6b9a787b99be24637541e57cbfc9c (MD5) / A necessidade de superar o desafio criado pelos biofilmes resistentes aos tratamentos antimicrobianos convencionais tem levado à busca por tratamentos alternativos, como terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT). Este estudo avaliou in vitro a eficácia da aPDT na inativação de biofilmes de Staphylococcus aureus suscetíveis e resistentes à meticilina (MRSA e MSSA), mediado pelos fotossensibilizadores (PSs) Curcumina (Cur) e Photodithazine® (PDZ). Biofilmes foram formados e tratados com diferentes concentrações de Cur (0, 20, 40 e 80 μM) e PDZ (0, 50 e 75 mg/L), e iluminados ou não por fonte de luz LED (Cur 455 ± 3 nm/ 5,28 J/cm2; PDZ 660 ± 3 nm/ 5,28 J/cm2 ou 50 J/cm²). Os grupos Controle Positivo (CP) não receberam nenhum PS e também não foram iluminados. A viabilidade dos micro-organismos após a aPDT foi avaliado pelo número de colônias viáveis, pelo ensaio de XTT e pela utilização do kit LIVE/DEAD® na Microscopia Confocal de Varredura à Laser (MCVL). Os resultados foram avaliados por análises de variância de dois fatores de efeitos fixos (ANOVA) e complementados por comparações múltiplas de médias pelo teste de Tukey. Para ambas as cepas, todas as concentrações de Cur e PDZ testadas reduziram significativamente a atividade metabólica e o UFC/mL para ambos micro-organismos quando comparado com os grupos CN (p0,05). Os resultados foram otimizados para a Cur quando utilizou-se a maior concentração (80 μM), para a PDZ, a maior redução nos micro-organismos foi observada quando associou-se a maior concentração de PDZ (75 mg/L) com a maior dose de luz (50 J/cm²). Os biofilmes submetidos a aPDT demostraram pela MCVL um maior número de células coradas em vermelho, indicando que a aPDT foi eficaz para promover danos ou morte às células bacterianas. Assim, a aPDT pode ser considerada promissora para atuar de forma sinérgica no tratamento de infecções bacterianas / The need to overcome the challenge created by biofilms regarding conventional antimicrobial approaches has lead to search of alternative treatments such as Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT). This in vitro study evaluated the efficacy of aPDT using the photosensitizer (PS) Curcumin (Cur) and Photodithazine® (PDZ) in the inactivation of biofilms of methicillin susceptible and resistant S. aureus (MSSA and MRSA). Biofilms were treated with different Cur (0, 20, 40 or 80 μM of Cur) and PDZ concentrations (0, 50 or 75 mg/L) and illuminated or not with LED source (Cur 455 ± 3 nm/ 5.28 J/cm2; PDZ 660 ± 3 nm/ 5.28 J/cm2 or 50 J/cm²). Positive control samples were not exposed to PS or light. The microorganisms viability after aPDT were evaluated by counting the number of colonies, the XTT assay and LIVE/DEAD® staining using confocal laser scanning microscopy (CLSM). The results were evaluated by analysis of variance, two-factor fixed effects (ANOVA) and complemented by multiple comparisons by Tukey test. For both strains, all the tested Cur and PDZ concentrations reduced significantly both biofilm metabolic activity and CFU/mL compared to the negative control (p0.05). Moreover, the results were optimized for Cur when the higher concentration was used (80 μM); For PDZ, the best results were obtained when it was associated a higher concentration of PDZ (75 mg/L) with the higher dose of light (50 J/cm²). Biofilms submitted to aPDT showed a large number of red-stained colonies, indicating that this therapy was efficient in disrupting the bacterial membrane. It can be concluded that PS was efficient in reducing viable colonies of both S. aureus strains by damaging cell membrane and causing cell death. Thus, the aPDT is can be considered promising to act synergistically in the treatment of bacterial infections

Orientador: Edilson Ervolino / Coorientador: Juliano Milanezi de Almeida / Banca: Elias Naim Kassis / Banca: Rogerio Leone Buchaim / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT), como monoterapia ou como coadjuvante à raspagem e alisamento radicular (RAR) no tratamento da periodontite experimental (PE) em ratos tratados com dose oncológica de zoledronato. Cento e vinte ratos foram aleatoriamente distribuídos em quatro grupos experimentais, cada um composto por 30 ratos. Durante 8 semanas, foi administrado 100 µg/Kg de zoledronato com intervalo de três dias entre as injeções. No 14º dia do início do protocolo medicamentoso, foi instalada uma ligadura nos primeiros molares inferiores para indução de PE. Após 14 dias a ligadura foi removida e foram realizados os seguintes tratamentos: exclusivamente uma sessão de RAR (grupo PE-RAR), exclusivamente três sessões de aPDT (grupo PE-aPDT) e uma sessão de RAR associada à três sessões de aPDT (grupo PE-RAR-aPDT). As sessões de aPDT foram realizadas aos 0, 2 e 4 dias pós tratamento local. No grupo PE-NTL não foi realizado nenhum tratamento local. Após 7, 14 e 28 dias pós tratamento periodontal local foram realizadas as eutanásias. Foi realizada análise microtomografica (micro-CT), análise histopatológica, histométrica da porcentagem tecido ósseo (PTO) e porcentagem de tecido ósseo não vital (PTONV) e imunoistoquímica para fator de crescimento transformador beta (TGFβ) nos tecidos periodontais. Os dados obtidos foram submetidos à análise quantitativa e estatística com nível de significancia de 5%. Não houve diferença estatisti... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of the present study was to evaluate the antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) as a monotherapy or adjunct to scaling and root planning (SRP) for the treatment of experimental periodontitis (EP) in rats treated with oncological dosage of zoledr onate. A hundred and twenty rats were randomly divided in four experimental groups, each one of them composed by 30 rats. During a period of 8 weeks, 100 μg/Kg of zoledronate was administered every three days. After 14 days of the beginning of the drug pro tocol, a ligature was installed in the lower first molars for EP induction. After 14 days, ligature was removed and the following treatments were performed: a single session of SRP, exclusively (group EP - SRP), three sessions of aPDT, exclusively (group EP - aPDT), and one session of SRP associated to the three sessions of aPDT (group EP - SRP - aPDT). aPDT sessions were performed at days 0, 2, and 4 after the local treatment. In the fourth group, no local treatment was made (EP - NLT). After 7, 114, and 28 days aft er the local periodontal treatment, the animals were euthanized. Microcomputed tomography (micro - CT) analysis, histopathologic analysis, percentage of bone tissue (PBT), percentage of non - vital bone (PNVB), and immunohistochemistry for transforming growth factor beta ( TGFβ ) in the periodontal tissues were performed. Obtained data underwent quantitative analysis and statistics considering 5% level of significance. No statistical difference was detected i... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

ROLIM, Juliana Paiva Marques Lima. Estudos dos efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana na viabilidade e na expressão gênica de S. Mutans em biofilmes e lesões de cárie dentinária. 2012. 110 f. Tese (Doutorado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-05-14T13:37:21Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_jpmlrolim.pdf: 8451056 bytes, checksum: e3ba83eea7d611c88411b6278a8ff02b (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-05-16T13:41:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_jpmlrolim.pdf: 8451056 bytes, checksum: e3ba83eea7d611c88411b6278a8ff02b (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-16T13:41:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_jpmlrolim.pdf: 8451056 bytes, checksum: e3ba83eea7d611c88411b6278a8ff02b (MD5) Previous issue date: 2012 / The application of Antimicrobial Photodynamic Therapy (PACT) in dentistry emerged as an effective treatment in reducing microbial populations present in oral biofilms and dental caries lesions. In this context, the objectives of this work are: a) to compare the antimicrobial effect of photodynamic therapy using different photosensitizers and evaluate the production of singlet oxygen for each of them (chapter 1), b) to determine the penetration degree of toluidine blue ortho dye (TBO) in in vitro and in situ demineralized dentin using confocal Raman microspectroscopy (chapter 2), c) to evaluate the antimicrobial effect of photodynamic therapy and its ability to alter the expression of genes gtfB, gtfC, gbpB and luxS in Streptococcus mutans oral biofilms formed in vitro (Chapter 3), d) to investigate the performance of PACT by the association of toluidine blue ortho and a light emitting diode using a clinical trial (chapter 4). As methodological approaches, in vitro, in situ and clinical studies were performed. The results showed that the TBO was the only photosensitizer, which significantly reduced the counts of S. mutans (p < 0.05). However, the singlet oxygen generation was not directly related to the bactericidal activity of PACT (Chapter 1). The TBO penetration profiles in sound and demineralized dentin in vitro and in situ were similar, besides different degrees of demineralization (chapter 2). While PACT has been effective in killing S. mutans biofilms formed in vitro, the change in virulence genes was observed only for luxS, a oxidative stress related gene (chapter 3). Finally, the results of clinical trial demonstrated that dentin caries lesions showed a decrease in the cariogenic microflora when treated with PACT (Chapter 4). In summary, antimicrobial photodynamic therapy is effective to kill S. mutans both as planktonic culture as well as biofilm, the photosensitizer used is able to penetrate into demineralized dentin in vitro and in situ, PACT can alter the expression of biofilm formation associated genes, and significantly reduce the in vivo microflora. However safe clinical protocols should be established for clinical use may be indicated. / A aplicação da Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana - TFA na Odontologia surge como um tratamento eficaz na redução das populações microbianas presentes nos biofilmes orais e nas lesões de cárie dental. Nesse contexto, os objetivos desse trabalho são: a)comparar o potencial antimicrobiano da TFA utilizando diferentes fotossensibilizadores e determinar a capacidade de produção de oxigênio singlete para cada um deles (capítulo 1); b) determinar o grau de penetração do corante azul de orto toluidina em dentina desmineralizada in vitro e in situ utilizando a microscopia confocal Raman (capítulo 2); c) avaliar o potencial antimicrobiano da TFA e sua habilidade de alterar a expressão dos genes gtfB, gtfC, gbpB e luxSem biofilmes orais de Streptococcus mutans formados in vitro (capítulo 3); d) investigar, através de um ensaio clínico, a performance da TFA utilizando a associação do azul de orto toluidina e um diodo emissor de luz (capítulo 4). Como abordagens metodológicas foram realizados estudos in vitro, in situ e um ensaio clínico. Como resultados, observou-se que o azul de orto toluidina foi o único fotossensibilizador que reduziu significantemente as contagens de S. mutans (p<0,05). Contudo, a geração de oxigênio singlete não teve relação direta com a atividade bactericida da TFA (capítulo 1). Há difusão do azul de orto toluidina em dentina sadia e desmineralizada in vitro e in situ, embora o grau de desmineralização não tenha alterado o nível de penetração do fotossensibilizador (capítulo 2). Embora a TFA tenha sido efetiva na morte de biofilmes de S. mutans formados in vitro, a alteração nos genes de virulência foi somente observada para luxS, um gene relacionado ao estresse oxidativo (capítulo 3). Finalmente, os resultados do ensaio clínico demostraram que lesões de cárie dentinária profundas apresentam diminuição na microbiota cariogênica quando tratadas com a TFA (capítulo 4). Em resumo, a terapia antimicrobiana fotodinâmica é efetiva em cultura planctônica e biofilmes de S. mutans, o fototossensibilizador utilizado é capaz de penetrar em dentina desmineralizada in vitro e in situ, a TFA altera a expressão de gene relacionado à formação de biofilme e reduz significativamente a microbiota in vivo. Contudo protocolos clínicos seguros devem ser estabelecidos para que sua utilização clínica possa ser indicada.

LIMA, Ramille Araújo. Estudos da ação da terapia fotodinâmica antimicrobiana em biofilmes de Streptococcus mutans : efeito na célula e na matriz de polissacarídeos. 2014. 65 f. Tese (Doutorado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-09-22T11:06:34Z No. of bitstreams: 1 2014_tese_ralima.pdf: 1968944 bytes, checksum: a8bac61d142de1c9afac524840c6daf4 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-09-22T11:06:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_tese_ralima.pdf: 1968944 bytes, checksum: a8bac61d142de1c9afac524840c6daf4 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-22T11:06:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_tese_ralima.pdf: 1968944 bytes, checksum: a8bac61d142de1c9afac524840c6daf4 (MD5) Previous issue date: 2014 / A terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDA) surge como um tratamento alternativo ao uso de antimicrobianos tradicionais diante da emergência de cepas resistentes a estes agentes. Este estudo está dividido em três capítulos, cujos objetivos foram: Capítulo 1) Comparar o efeito antimicrobiano da TFDA realizada com o fotossensibilizador azul de orto-toluidina (TBO) e duas diferentes fontes de luz vermelha {Laserbeam® (LB) ou LumaCare® (LC)} em biofilmes maduros de Streptococcus mutans; Capítulo 2) Quantificar as espécies reativas de oxigênio (ERO) encontradas a nível intracelular em biofilmes de S. mutans como resultado da TFDA realizada com TBO e a fonte de luz vermelha LC; e Capítulo 3) Avaliar os efeitos da TFDA realizada com TBO e a fonte de luz vermelha LC na viabilidade microbiana, na matriz de polissacarídeos extracelulares (PEC) e na topografia de biofilmes de S. mutans maduros e em formação. Biofilmes foram crescidos em discos de hidroxiapatita imersos em caldo de peptona caseína soja e extrato de levedura com 1% de sacarose por cinco dias. No capítulo 1, biofilmes maduros foram submetidos à TFDA utilizando o fotossensibilizador TBO (100 g/mL) e duas fontes de luz diferentes: LB (56,6 J/cm2) e LC (56,6 J/cm2; 158,5 J/cm2; 317,0 J/cm2; 475,6 J/cm2). No capítulo 2, os biofilmes foram expostos a terapia usando o LC nas densidades de energia 211.37 J/cm2 e 422.74 J/cm, e a produção de ERO como consequência da terapia foi determinada utilizando o marcador dihidrorodamina 123. No capítulo 3, as mesmas densidades de energia do capítulo 2 (211.37 J/cm2 e 422.74 J/cm2) foram testadas em biofilmes maduros e em formação. Verificamos que não existe diferença na redução da viabilidade bacteriana quando LB e LC são utilizados na mesma dose de energia, porém LC é superior nas exposições 317,0 J/cm2 e 475,6 J/cm2 (capítulo 1). A TFDA gerou 3x mais ERO que o grupo controle negativo. A TFDA nas densidades de energia 211.37 J/cm2 e 422.74 J/cm2 obteve reduções da viabilidade bacteriana de 2 a 5 logs, respectivamente, em biofilmes maduros, e de 6 a 6,5 logs em biofilmes em formação. A TFDA aplicada sobre biofilmes em formação, além de promover redução da viabilidade bacteriana, também reduziu a formação de PEC e o número de conglomerados bacterianos, além de promover a perda de estruturas de conexão dos PEC. (capítulo 3). Conclui-se que TFDA, nos parâmetros utilizados, apresenta-se como uma promissora abordagem terapêutica na inibição da formação de biofilmes de S. mutans e na inativação de biofilmes já estabelecidos.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:47:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Objetivo: Estudar comparativamente as drogas fotossensíveis ftalocianina cloroalumínio tetrassulfonada e ftalocianina cloroalumínio incorporada a lipossomos. Método: A cinética de ambas as drogas foi realizada por meio de espectroscopia de fluorescência ao longo de 48 horas de acompanhamento em tumores colorretais induzidos quimicamente em ratos Wistar. Após esta etapa, animais com o mesmo tipo tumoral induzido, foram tratados com terapia fotodinâmica, associando-se a irradiação com um laser diodo em 660nm e cada um dos elementos fotossensíveis. A análise das amostras foi feita por histomorfometria e imunoistoquímica. Resultados: A cinética mostrou o melhor período de irradiação para cada uma das drogas, sendo este em ambas as drogas entre 22 e 26 horas. Apenas nos grupos da ftalocianina cloroalumínio tetrassulfonada houve necrose decorrente da terapia, sendo observada em maior proporção no grupo 72 horas. A imunoistoquímica realizada com o marcador de proliferação celular Ki67 comprovou os achados da histomorfometria. A ftalocianina cloroalumínio incorporada a lipossomos mostrou-se instável no tecido in vivo, o que pode explicar a não ocorrência do seu efeito. Conclusões: A ftalocianina cloroalumínio tetrassulfonada mostrou-se mais eficiente neste modelo experimental, porém ainda houve a permanência considerável de tecido tumoral no sítio irradiado, o que sugere a terapia fotodinâmica como terapia coadjuvante a outras técnicas convencionais. / Purpose: To compare the photosensitizers chloroaluminum phthalocyanine tetrasulfonate and chloroaluminum phthalocyanine incorporated into liposomes. Methods: The kinetics of both drugs was carried out by fluorescence spectroscopy for 48 hours of monitoring in chemically induced colorectal tumors in Wistar rats. After that, animals with the same tumors induction protocol were treated by photodynamic therapy using in each group a different type of drugs associated with diode laser irradiation at 660nm. Results: The kinetics showed the best period of irradiation for each drug between 22 and 26 hours. Necrosis caused by the therapy has just occurred in chloroaluminum phthalocyanine tetrasulfonate group and the greater areas have occurred in the 72 hours group. The immunohistochemical performed with the cell proliferation marker Ki67 has comproved the findings of histomorphometry. The chloroaluminum phthalocyanine incorporated into liposomes have seemed to be unstable in vivo, which may explain the not occurrence of its purpose. Conclusions: The chloroaluminum phthalocyanine tetrasulfonate proved to be more efficient in this experimental model, even though there was a considerable permanence of tumoral tissue suggesting the photodynamic therapy as a adjuvant therapy to other conventional techniques. / FAPESP: 2005/02304-0 / BV UNIFESP: Teses e dissertações

LIMA, Juliana Paiva Marques. Estudo in situ do efeito antimicrobiano da terapia fotodinâmica em lesões de cárie dentinária. 2009. 53 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-14T12:44:29Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_jpmlima.pdf: 1340530 bytes, checksum: 957c40717dd836daf842ab8dee02ea30 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-01T12:57:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_jpmlima.pdf: 1340530 bytes, checksum: 957c40717dd836daf842ab8dee02ea30 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-01T12:57:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_jpmlima.pdf: 1340530 bytes, checksum: 957c40717dd836daf842ab8dee02ea30 (MD5) Previous issue date: 2009 / Photodynamic therapy is a concept of treatment, suggested by the literature as a potential therapy capable of inactivating microbial. Thus, this study assessed the efficacy of photodynamic therapy on injuries of dentine caries by a in situ design of single phase. During 14 days, 20 volunteers wore intra-oral palatal devices containing six human dental dentine slabs. The volunteers wore asked to drop a 40% sucrose solution onto the slabs ten times per day, in order to simulate a cariogenic challenge and to use fluoride dentifrice three times per day. At the end of the experimental period the slabs were randomly allocated into one of the following groups: without sensitizer and light (S-L-); with sensitizer and without light (S+L-); without sensitizer and irradiated with 47J/cm2 energy density (S-L+47); without sensitizer and irradiated with 94J/cm2 energy density (S-L+94); with sensitizer and irradiated with 47J/cm2 energy density (S+L+47); and with sensitizer and irradiated with 94J/cm2 energy density (S+L+94). The sensitizer of choice was the toluidine blue O at 100 g/mL concentration and radiation originated from a light-emitting diode (LED) with a 638,8 nm predominant wavelength. Before and after the treatments, dentine samples were collected and analyzed to figure out the total microorganisms, total streptococci, mutans streptococci and lactobacilli. The data of the counts were transformed into log10.The values of log reduction was achieved and the statistical differences identified by ANOVA One way and Tukey Kramer tests (p<0,05). In both analyses statistically significant difference between the microbial counts before and after treatment in groups (S-L+47), (S+L+94), (S+L+94) for all microorganisms tested are founded. It was concluded that PACT in the tested parameters was effective in promoting microbial death and that the exposure time of dentine to 10 minutes of light was also effective in microbial inactivation. / Terapia fotodinâmica é um conceito de tratamento, sugerido pela literatura como uma potencial terapia capaz de proporcionar inativação microbiana. Desta forma, este estudo avaliou a ação da terapia fotodinâmica sobre lesões de cárie dentinária, mediante um delineamento in situ de única fase. Durante 14 dias, 20 voluntários utilizaram dispositivos intra-orais palatinos, contendo, cada um, seis blocos de dentina humana. Todos os voluntários foram instruídos a gotejar sobre os blocos uma solução de sacarose a 40% dez vezes ao dia, simulando um desafio cariogênico e a utilizar dentifrício fluoretado três vezes ao dia. No final deste período clínico, os blocos foram randomicamente alocados em um dos seguintes grupos: sem fotossensibilizador e luz (F-L-); com fotossensibilizador e sem luz (F+L-); sem fotossensibilizador e com luz com densidade de energia de 47J/cm2(F-L+47); sem fotossensibilizador e com luz com densidade de energia de 94J/cm2 (F-L+94); com fotossensibilizador e irradiados com densidade de energia de 47J/cm2(F+L+47); com fotossensibilizador e irradiados com densidade de energia de 94J/cm2(F+L+94). O fotossensibilizador de escolha foi azul de orto-toluidina na concentração de 100 g/mL e a irradiação originada de um diodo emissor de luz (LED) com comprimento de onda predominante em 638,8nm. Amostras de dentina cariada de cada bloco foram coletadas antes e após os tratamentos e analisadas para contagem de microorganismos totais, estreptococos totais, estreptococos grupo mutans e lactobacilos. Os dados das contagens foram transformados em log10, os valores de log redução foram obtidos e as diferenças estatísticas identificadas através dos testes ANOVA One way e Tukey Kramer (p<0,05). Em ambas as análises, foram observadas diferenças estatisticamente significativas entre as contagens microbiológicas antes e depois dos tratamentos nos grupos (F-L+94), (F+L+47), (F+L+94) para todos os microrganismos testados. Concluiu-se que a terapia fotodinâmica foi efetiva na morte microbiana nos parâmetros testados e que o tempo de exposição da dentina à luz de 10 minutos, também, promoveu inativação microbiana.

Orientador: Rosemary Adriana Chiérici Marcantonio / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da aPDT (antimicrobial photodynamic therapy), com o fotossensibilizador Hipericina-glucamina (Hy-g), ativado por LED âmbar (34,10 J/cm2), no tratamento e progressão da doença periodontal (DP) induzida experimentalmente em ratos. Dois estudos distintos foram conduzidos. No Estudo 1, foi avaliada a fetividade da aPDT como tratamento adjuvante à raspagem e alisamento radicular. Em um período de 15 dias, 60 ratos permaneceram com ligadura ao redor do segundo molar superior para indução da DP. No dia seguinte a sua remoção, os animais foram distribuídos entre 4 grupos experimentais (n =5): IDP (Indução da Doença Periodontal); RAR (Raspagem e Alisamento Radicular); aPDT e RAR+aPDT. Em 7, 15 ou 30 dias após a aplicação dos tratamentos os animais foram eutanasiados. Análises: histológica, histométrica, microtomográfica e estereométrica. No Estudo 2, após 7 dias de indução da DP, 30 ratos foram divididos em 3 grupos experimentais (n=5): Hy-g; LED e aPDT. Os animais foram eutanasiados em 7 ou 15 dias após a aplicação dos tratamentos. Análises: microtomográfica, histométrica, e imuno-histoquimica para Fosfatase Ácida Tartarato Resistente. Os dados foram submetidos a análise estatística (α=0,05). Como resultados, observamos que no Estudo 1 o grupo IDP apresentou alterações morfológicas mais severas do que os demais grupos devido ao processo inflamatório propagado pela DP. No período de 7 dias após os tratamentos, a análise estereométrica m... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This research aims at evaluating the effect of aPDT (antimicrobial photodynamic therapy) using the Hypericin-glucamine (Hy-g) as photosensitizer, activated by LED amber (34.10 J/cm2), on the treatment of experimental induced periodontal disease (PD) in rats. Two different studies were conducted. In the Study 1, we assessed the effectiveness of aPDT as an adjunctive treatment to root scaling and straightening. The PD was induced in the second upper molar of 60 rats using ligature for 15 days. In the day after removing the ligature, the animals were divided randomly in 4 experimental groups (n=5): IPD (Induced Periodontal Disease); RAR (Root Scaling and Smoothing); aPDT; and RAR+aPDT. At 7, 15 or 30 days after applying the treatments, the animals were euthanized. Analyses: histological, histometric, microtomographic and stereometric. In the Study 2, after 7 days of inducting the PD, 30 rats were distributed into 3 experimental groups (n=5): Hy-g; LED e aPDT. The animals were euthanized after 7 or 15 days from the treatments. Analyses: microtomographic, histometric, and immunohistochemical for Resistant Tartarate Acid Phosphatase. All data was submitted to statistical analysis (α=0,05). The results from Study 1 indicated that the IPD group had more severe morphological changes than the other groups due to the inflammatory process disseminated by the PD. The stereometric analysis showed a significantly higher proportion of fibroblasts in the animals from the 7-days-after-treatmen... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-24Bitstream added on 2014-06-13T19:01:42Z : No. of bitstreams: 1 estebanflorez_fl_dr_arafo.pdf: 4910696 bytes, checksum: e884d7becfc9aea487606418b718612d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O uso indiscriminado dos antibióticos e seu mecanismo de ação levaram ao desenvolvimento de cepas bacterianas altamente resistentes e de maior virulência. Estas cepas causam doenças muito mais agressivas e de difícil tratamento, constituindo-se um dos principais desafios enfrentados por profissionais da área da saúde. Como a terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDA) baseia seu mecanismo de ação em reações oxidativas não especificas, esta passou a ser uma alternativa interessante para o tratamento de todas as doenças de origem microbiana, uma vez que, nem bactérias, nem vírus ou fungos tem capacidade de desenvolver resistência a TFDA. Considerando que a carie dental é uma doença de origem bacteriana especifica e que a eficácia da TFDA depende do tipo e dose de energia luminosa utilizada, do fotossensibilizador e da taxa de oxigênio nos tecidos a serem tratados, decidimos investigar a viabilidade da TFDA para prevenção e tratamento da cárie dental. Para tal, foram realizados 3 estudos: 1) Revisão critica da literatura sobre fotossensibilizadores utilizados para controle antimicrobianos de Streptococcus mutans. 2) Avaliação do efeito antibacteriano de três fotossensibilizadores (curcumina, hipericina e hematoporfirina) sobre Streptococcus mutans em suspensões planctônicas e 3) Avaliação do efeito antibacteriano de três fotossensibilizadores (curcumina, hipericina e photogem®) Esteban Florez FL. Terapia Fotodinâmica em microrganismos cariogênicos – Estudo in vitro. [Tese de doutorado]. Araraquara: sobre biofilme maduro formado a partir de cepa de Streptococcus mutans. Dos fotossensibilizadores utilizados a hipericina foi a que apresentou maior efeito antimicrobiano sobre suspensão planctônica. Foi comprovado que a eficácia da TFDA esta diretamente relacionada com o tipo... / The indiscriminate use of antibiotics and its mechanisms of action led to the development of highly resistant bacterial strains and more virulent ones. This strains can cause diseases much more aggressive and difficult to treat, and in that way they consist in one of the major challenges to the health care professionals. As the antimicrobial photodynamic therapy (APDT) it is based on non-specific oxidative reaction, this is now considered as an interesting alternative to treat all diseases from bacterial origins, once that, neither bacterias, neither viruses nor fungi can develop acquired resistance from the therapy. Taking into consideration that dental caries is a specific bacterial disease and that the APDT's efficiency is directed related to factors as, wavelength, energy dose, photosensitizer used, and with the oxygen present in the target tissue, we have decided to investigate the APDT to prevent and treat dental decay. To accomplish that, it was realized three studies: 1) Critical Literature revision about photosensitizers used to control S.mutans. 2) Evaluation of the antimicrobial effect of three different photosensitizers (Curcumin, Hypericin and Hematoporfirin) over Streptococcus mutans in planktonic cultures and 3) Evaluation of the antimicrobial effect of three photosensitizers (Curcumin, Hypericin and Hematoporfirin) over mature biofilms obtained from Streptococcus mutans strains. From the photosensitizers used Hypericin was the one that showed the most antibacterial observed effect on the planktonic cultures. It was demonstrated by our data that the APDT efficacy is directly related to the time of irradiation of the samples, with the kind of photosensitizer used, its concentration and with the energy dose delivered. None of the proposed protocols were able to show any significant effect over the microorganisms when in biofilm... (Complete abstract click electronic access below)