Thesis (Ph. D.)--University of Wisconsin, 1967. / Typescript. Vita. eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.

Thesis (M.S.)--University of Wisconsin--Madison, 1968. / eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.

MONTEIRO, Ana Maria de Oliveira. Alterações renais causadas pela lectina de sementes de Vatairea macrocarpa. 2004. 91 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2004. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-11-01T16:15:14Z No. of bitstreams: 1 2004_dis_amomonteiro.pdf: 5604174 bytes, checksum: 16b20ad4312b132a4ce865775d7beb4b (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2012-11-06T13:54:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2004_dis_amomonteiro.pdf: 5604174 bytes, checksum: 16b20ad4312b132a4ce865775d7beb4b (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-06T13:54:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2004_dis_amomonteiro.pdf: 5604174 bytes, checksum: 16b20ad4312b132a4ce865775d7beb4b (MD5) Previous issue date: 2004 / Lectins are glycoproteins that interact reversibly and specifically with carbohydrates. The Vatairea macrocapa lectin (VML) is a galactose-binding lectin present in the family leguminosae and in the tribe Dalbergieae. ln the present study, we investigated the effect of Vatairea macrocarpa lectin (VML) in the isolated rat kidneys, as well as histological changes. Isolated kidneys from Wistar rats, weighing 240 to 280g, were perfused with Krebs-Henseleit solution containing 6% of bovine serum albumin. The parameters studied included perfusion pressure (PP), renal vascular resistance (RVR), glomerular filtration rate (GPR), urinary flow (UF), percent of sodium tubular transport (%TNa+), percent of potassium tubular transport (%TK+) and percent of chloride tubular transport (%TCl-). The latairea macrocarpa lectin (10 µg/mL) increased the PP, RVR, UF and GPR. On the other hand, VML did not change the %TNa+, %TK+ and % TCl-. The lectin plus galactose complex (Gal-VML) signihcantly blocked the increase in the PP, RVR, UF and RFG. ln the control group showed a small amount of a proteinaceous material in the urinary space, although no alteration in the renal tubules was detected. The administrated of galactose alone did not modify the functional kidney parameters. The kidneys perfused with /ML showed moderate deposit of proteinaceous material in the tubules and urinary space. ln the kidneys pretreated with Gal-VML had only small amount of a proteinaceous material in the urinary space. But no abnormalities were seen in renal tubules. These results suggest that lectin from Vatairea macrocarpa seeds presents important effect on renal system reported carbohydrate-binding site, taken into account that showed the reversion of renal effects using the inhibitor specific. The current experiments are first demonstration of biological action of VML in the isolated kidney. / Lectinas são glicoporteínas que interagem de forma reversível e especificamente com carboidratos. A lectina Vatairea macrocarpa (VML) é uma lectina ligadora de galactose pertencente à família de leguminosas da tribo Dalbergiae. No presente estudo, nós investigamos os efeitos da lectina Vatairea macrocarpa (VML) no modelo de rim isolado de rato, bem como as alterações histológicas. O rim isolado a partir de ratos Wistar, pesando entre 240 e 280g foram perfundidos com solução de Krebs-Henseleit contendo 6% de albumina bovina sérica. Os parâmetros estudados incluem: pressão de perfusão (PP), resistência vascular renal (RVR), ritmo de filtração glomerular (RFG), fluxo urinário (FU), percentual de transporte tubular de sódio (%TNa), percentual de transporte tubular de potássio (%TK), e percentual de transporte tubular de cloro (%TCl). A lectina Vatairea macrocarpa (10 µg/ml) aumentou a pressão de perfusão, a resistência vascular renal, o fluxo urinário e o ritmo de filtração glomerular. Por outro lado, a Vatairea macrocarpa (VML) não alterou o percentual de transporte dos íons sódio, potássio e cloro. O complexo Galactose-Lectina (Gal-VML) quando utilizado não causou qualquer alteração nos parâmetros avaliados, ou seja, bloqueou significativamente o aumento dos parâmetros PP, RVR, UF e RFG, observados pela ação da lectina Vatareia macrocarpa (VML). No grupo controle a histologia apresentou um pequeno aumento de material proteináceo nos espaços urinários, no entanto, não foram detectadas alterações a nível de túbulos renais. A administração de galactose sozinha não modificou os parâmetros funcionais renais. Os rins pré-tratados com Gal-VML teve apenas um pequeno acúmulo de material proteináceo nos espaços urinários, mas nenhuma anormalidade foi nos túbulos renais. Estes resultados sugerem que a lectina obtida a partir de semestres de Vatairea macrocarpa apresenta importante efeito sobre o sistema renal relacionado com o sítio carboidrato-ligante, tendo em vista observamos reversão dos efeitos renais quando se utilizou o inibidor específico. O presente trabalho é a primeira demonstração de atividade biológica da VML em rim isolado de rato.

Increasing demand for chiral technology in industry has led to the rapid development of catalysts for enantioselective processes. In this respect biocatalysts are of particular interest due to their excellent regio- and stereo- selectivity and their ability to work under mild conditions. The development of catalysts for the selective oxidation of alcohols to aldehydes and ketones represents a major challenge in organic synthesis. Previous work showed that a variant of the enzyme galactose oxidase (GOase) was capable of oxidising a wide range of chiral secondary alcohols with high enantioselectivity. The aim of this work is to develop new applications for this variant. Two new stereoselective processes have been developed employing this variant: 1. Enzymatic desymmetrisation of proatropisomeric diaryl ethers and biaryls. Atropisomers are stereoisomers resulting from restricted rotation about an axis, where the rotational barrier is high enough for isolation of the conformers. Desymmetrisation by GOase has allowed the production of atropisomers with enantiomeric excess (ee) up to 99% in good yields. An alternative approach based upon asymmetric reduction of the corresponding dialdehyde using ketoreductases (KREDs) has also been explored. 2. Deracemisation of racemic secondary alcohols by a combination of enzyme and transition metal catalysts. Deracemisation is a method for the production of enantiopure compounds starting from racemic substrates. Combination of the enzyme GOase and a transition metal catalyst has allowed the production of a single enantiomer of a number of secondary alcohols from the corresponding racemic mixture (ee > 99%, yield > 98%). Primary amides are widely applied in the polymer industry. They are produced in large quantities each year. An efficient solvent-free process (yield > 90%) for the production of erucamide has been developed employing immobilised Candida antarctica Lipase B (CALB, Novozym® 435 ) under mild conditions (solid ammonia source, 90 °C).

Orientador: Young Kun Park / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-15T02:54:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pastore_GlauciaMaria_M.pdf: 2198397 bytes, checksum: de83c06bdf70a89eb255cf5f255e2f5e (MD5) Previous issue date: 1981 / Um mil e sessenta e sete linhagens de fungos foram isoladas do solo e.testadas quanto à capacidade de produzir ß-galactosidase. Foi encontrada uma linhagem, classificada como Scopulariopsis sp, que produz alta atividade de ß ¿galactosidase. Estudou-se a produção e a purificação de ß -galactosidase de Scopulariopsis sp e determinou-se as características da enzima purificada. A enzima foi produzida por fermentação semi-sólida, usando-se farelo de trigo para cultura do microorganismo. A enzima bruta suficientemente hidrolisa lactose em soro de leite. A enzima bruta foi purificada fracionamento, com sulfato de amônia e cromatografia em coluna por de DEAE-celulose e CM-celulose. A enzima purificada foi caracterizada verificando-se sua homogeneidade eletroforeticamente e seu peso molecular estimado ser 95 000, através do método de eletroforese em gel SDS poliacrilamida. O pH ótimo para atividade enzimática foi entre 3,6 a 5,0, usando-se ONPG (Orto-Nitrofenil ß -D-Galactoperanosideo) como substrato e com lactose como substrato o pH ótimo foi 4,5. A temperatura ótima para atividade enzimática foi 65 °C para ONPG e 55 °C para lactose. A atividade enzimática não sofre efeito pela adição de íons metálicos como CaC12, MgC12, KCl e outros reagentes como MnS04, NiS04, CuS04, porém foi verificado que AgN03 tem algum efeito inibitório sobre a atividade enzimática. Galactose inibe a ação da enzima, enquanto glicose não inibe. Dietilditiocarbamato de sódio (10mM). p-hidroximercuribenzoato (10 mM). mercaptoetanol (10 mM). não inibem a atividade enzimática Por isto, grupos sulfidrilas da molécula da enzima não estão envolvidos na atividade catalítica. A ß -galactosidase de, Scopulariopsis sp hidrolisou quase completamente (95 %) a lactose contida em soro ácido de leite (pH 4,5), após 50 horas de incubação a 55 °C, quando a atividade enzimática era 250 unidades por 100ml de soro de leite / Abstract: One thousand and sixty seven strain of fungi were isolated from soil and examined for their capacity for production of ß-galactosidase. It was found that one strain wich is classified a Scopulariopsissp has produced the highest activity of ß-galactosidase. Production and purification of ß-galactosidase from Scopulariopsis sp were attempted and characterization of the purified enzyme was performed. The enzyme was produced by semisolid fermentation using wheat bran culture of the microrganismo The crude enzyme suffici ently hydrolyzeq lactose in acid whey. The crude enzyme was purified by fractionation with ammonium sulfate, a DEAE-cellulose and CM-cellulose column graphies. The purified enzyme was characterized and found that chromato¬ was electrophoretically homogeneous and its molecular weight was estimated to be 95 000 by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The optimum pH of the enzyme activity was between 3,6 and 5,0 when ONPG was used as substrate, and with lactose as substrate the optimum pH was 4,5. The optimum temperature was 65 °C to ONPG and 55 °C to Lactose. The activity did not suffer any effect by the addition of metals ions as CaC12, MgCI2, KCI and others reagents such as MnS04, NiS04, CuS04 but AgN03 has some innhibitery effect on the enzyme activity. Galactose inhibits enzyme activity where as glucose did not. Sodium diethildithio carbomate (10 mM), p-hydroxymercuribenzoate (10 mM), mercaptoethanol (10 mM) did not inhibit enzyme activity. Thus sulfydryl groups molecule are not involved in the catalytic activity. The ß-galactosidase from Scopulariopsis sp, hidrolyzed quite completely (95 %) the lactose content present in acid whey (pH 4,5) after 50 hr of incubation at 55 °C, when the enzyme activity was 250 units per100 ml of acid whey / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador : Marcos Silveira Buckeridge / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T00:13:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tine_MarcoAurelioSilva_D.pdf: 6966865 bytes, checksum: 723d615dcb3941845715746ddb1542c8 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Sementes de algumas espécies apresentam espessamentos de parede celular devido à deposição de um determinado polissacarídeo que* constitui uma reserva de carbono e energia para a plântula após a germinação. Um destes polissacarídeos é o xiloglucano (XG). Este polissacarídeo apresenta uma cadeia principal de glucose _-(1,4) ligada com ramificações regulares com xilose a-(1,6) ligada. Algumas das xiloses apresentam ainda ramificações com galactose _-(1 ,2) ligada. Na parede primária algumas das galactoses possuem ainda ramificações de fucose a-(1,2) ligadas. Dentre as sementes que possuem esta reserva estão Tamarindus indica, Tropaeolum majus, Copaifera langsdorffii e Hymenaea courbaril. Uma dos principais métodos de análise de xiloglucano é a digestão do polissacarídeo com celulase e a análise dos oligossacarídeos resultantes. Nas espécies estudadas os oligossacarídeos liberados possuem quatro glucoses na cadeia principal, mas em H courbaril, foi descrita uma série de oligossacarídeos com cinco glucoses na cadeia principal, além da série habitual de quatro glucoses. Três novos oligossacarídeos constituintes do xiloglucano de reserva de H courbaril foram isolados e caracterizados neste trabalho. Os oligossacarídeos possuem apenas uma galactose cada e diferem entre si pela posição desta galactose. Como a presença de oligossacarídeos com cinco glucoses só foi descrita até hoje nesta espécie, a interação entre a xilosil e a glucosiltransferase no Complexo de Golgi durante a biossíntese da parede de reserva de H courbaril pode vir a ser uma importante ferramenta para entender o processo de biossíntese do polissacarídeo. A presença desta nova série de oligossacarídeos provavelmente inverte a posição das ramificações de xiloglucano. Esta inversão da cadeia poderia alterar a simetria da molécula, o que poderia ter implicações na interação com outros polissacarídeos e enzimas do seu próprio metabolismo. Um estudo da interação da celulase com este polissacarídeo mostrou que a velocidade de degradação do xiloglucano de H courbaril é maior que a degradação do xiloglucano de C. langsdorffii. O padrão de ramificação do polímero com galactose também interfere no padrão de ataque da celulase sobre o polímero, sendo que a redução das ramificações aumenta a suscetibilidade do polissacarídeo à enzima. A presença de uma exo-hidrolase (_-galactosidase) durante a hidrólise pela celulase altera o estado final de equilíbrio mesmo não participando diretamente na reação da celulase, o que indica uma complexa interação entre as enzimas do metabolismo de xiloglucano que poderia ocorrer através do próprio polímero na forma de alterações nas cadeias laterais. Os processos de degradação e biossíntese do xiloglucano, portanto, parecem estar finamente sincronizados e o veículo para a integração entre os dois processos poderia ser o próprio políssacarídeo, uma vez que o padrão de ramificação do xiloglucano é capaz de codificar informação suficiente para modular a ação das enzimas sobre o xiloglucano. A localização sub-celular do resíduo de fucose na parede de reserva mostrou que o polissacarídeo de reserva é depositado em uma camada entre duas camadas estruturais. A parede de reserva, portanto, possui pelo menos duas populações distintas de xiloglucano que diferem entre si pela posição, estrutura e função: o xiloglucano de reserva é mais solúvel, pobre em fucose e depositado em uma camada intermediária da parede; o xiloglucano estrutural é menos solúvel, fucosilado e depositado em volta da camada de reserva. A presença da camada estrutural externa deve ser um importante elemento estrutural do tecido durante a mobilização do xiloglucano de reserva e a diferença na composição dos polissacarídeos permite que o xiloglucano de reserva seja desmontado pelas exo-hidrolases sem afetar o xiloglucano estrutural. As diferenças na composição das duas populações de xiloglucano, portanto, refletem diferenças fisiológicas fundamentais e o padrão de ramificação parece ser um elemento importante para manter as diferenças entre os xiloglucanos de forma a permitir que a parede funcione como reserva de polissacarídeos / Abstract: Seeds of some species have cell wall thickenings of a single polysaccharide that is considered as a reserve of carbon and energy to the plantlet afier germination. One of these polysaccharides is xyloglucan (XG). This polymer has a main chain of glucose _(1,4) linked with regular branches of a-(1 ,6) xylose. Some of the xyloses have side chains of _-(1 ,2)-linked galactoses. In the primary cell wall, some of these galactoses are further branched with a(I,2)-linked fucose. Among the seeds that accumulate this reserve are: Tamarindus indica, Tropaeolum maju_, Copaifera langsdorffii e Hymenaea courbaril. One of the main methods of analysis ofxyloglucan is the digestion with fungal cellulase and analysis ofthe oligosaccharide produced. In all the species studied so far, the oligosaccharides produced have four glucoses in the main chain but in H courbaril, a series of oligosaccharides with five glucoses in the main chain was reported besides the usual series with four glucoses. Three new oligosaccharides from the storage xyloglucan of H courbaril were isolated and characterised in this work. Since the presence of this new series of oligosaccharides have only been described in this species, the interaction between the xylosyl and the glucosyl-transferase in the Golgi Complex during the biosynthesis of the storage wall of H courbaril may become an important toei to understand the biosynthesis processo The presence ofthis new series probably inverts the position of the xyloglucan side-chains and this inversion might alter the simetry of the molecule and this would have implications in the interaction with other polysaccharides and the enzymes. The study of the interaction of Trichoderma cellulase with this polymer showed that the speed ofthe degradation ofthe xyloglucan of H courbaril is higher than the degradation ofthe xyloglucan from C. langsdorffii. The branching pattem with galactose also interferes in the attachment ofthe cellulase to the polymer: the removal of the side chains also modulates the interaction between the enzyme and the substrate. The presence of an exo-hydrolase W-galactosidase) during the hydrolysis by cellulase alters the final equilibrium reached by the reaction even without direct participation in the cellulase reaction, what suggests a complex interaction between the enzymes of xyloglucan metabolism that may occur through the polysaccharide itself as changes in its side-chains. The biosynthetic and disassembling processes, therefore, seem to be fine tuned and the form to the integration ofthese two processes could be the xyloglucan, since its branching pattem is capable to code enough information to modulate the action of the enzymes upon the polysaccharide. The sub-celular localisation of the fucosyl residue in the storage wall showed that the storage polysaccharide is deposited in a layer between two structurallayers. The storage wall, therefore, has at least two distinct populations ofxyloglucan that differ from each other in position, structure and function: the storage xyloglucan is more soluble, poor in fucose and deposited in an intermediate layer in the wall; the structural xyloglucan is less soluble, fucosylated and deposited around the storage layer. The presence of an outer structurallayer is probably an important element in the structure of the tis sue during the mobilisation of the storage xyloglucan and the difference in composition between the polymers allows the disassembling by the exo-xydrolases with little or no effect on the structural xyloglucan. The differences in the composition of the two populations of xyloglucan, therefore, reflect fundamental physiological differences and the branching pattem seems to be an important element for maintenance of storage xyloglucan function / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Note:

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Streptococcus thermophilus {St) est une bactérie utilisée pour la transformation du lait en yogourts et en fromages. Le lactose constitue sa principale source d'énergie. Cette espèce bactérienne est incapable de croître sur galactose et rejette, au cours d'une croissance sur milieu lactose, la partie galactose du lactose malgré le fait qu'elle possède les gènes codant pour les en2ymes du métabolisme du galactose. Ce travail visait à éclairer le rôle de GalM, une mutarotase, dans le phénomène du rejet de galactose par St. Le gène galM de Streptococcus salivarius a été introduit dans quatre souches de St. L'expression du gène galM chez les transformants a été confirmée par des expériences de type Western et Northern. Les résultats indiquent qu'une augmentation de GalM chez les souches Gal+ cause un rejet moins important de galactose.

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