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Técnicas de micropropagação e criopreservação para abacaxizeiro

Moraes, Ailton Melo de 18 June 2007 (has links)
Submitted by Katiane Souza (katyane.souza@gmail.com) on 2016-04-21T00:51:23Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2203586 bytes, checksum: 632c234a3beaf879d47073782b8ec380 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-21T00:51:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2203586 bytes, checksum: 632c234a3beaf879d47073782b8ec380 (MD5) Previous issue date: 2007-06-18 / Brazil is one of the three main pineapple producers in the world, being the state of Paraíba, especially, considered as the first of them. The area cultivated has slightly increased due to the small offer of good quality seedlings. This work aimed to develop a cv. EMEPA 1 micropropagation protocol especially selected to be cultivated in the state of Paraíba. The cv. EMEPA 1 axillary gems used were disinfested and inoculated in half MS solid with 5,8 pH. There was incubation in a growth room with temperature of 25 ± 5oC and photoperiod of 16 hours/light at a luminous intensity of 30 pmol.m-2.s-1, except for the etiolation phase, held at B.O.D, with no light and temperature of 28 ± 1oC. The cv. EMEPA 1 micropropagation protocol was developed according to the existing literature, comprising the following phases: treatment and isolation of explants (TI); establishing of explants (EE); etiolation (ES); regeneration (RE); multiplication (MU); extent; rooting ®; acclimatization (AC). A completely randomized design (CRD) was used in all the phases as follows: TI – CRD with 4 x 4 factorial array (4 concentrations of sodium hypochlorite x 4 exposition times to sodium hypochlorite), with 10 repetitions containing 1 explant per bottle; EE – DIC with 6 treatments comprised of 10 repetitions containing 1 explant per bottle; ES – CRD with 4 treatments, comprised of 10 repetitions containing 1 defoliated plantule per test tube; RE – DIC with 4 treatments, comprised of 10 repetitions containing 1 etiolated sprout per Petri’s plaque; MU – CRD with 8 treatments, comprised of 10 repetitions containing 1 explant per bottle; AL – CRD with 4 treatments comprised of 10 repetitions containing 1 plantule per bottle; and AC – CRD with 11 treatments, comprised of 4 repetitions containing 5 plants each. It was concluded that the concentration of 2% of sodium hypochlorite for 10 minutes causes gems disinfestation and the establishment can be carried out by means of tillage without any growth regulators. The etiolation can be achieved in MS with 1,86 mg.L-1 of ANA and regeneration in MS with 1,8mg.L-1 of ANA + 2,0 mg.L-1 of BAP. For the multiplication, the type of tillage indicated is MS supplemented with 2,0 mg.L-1 of BAP + 0,5 mg.L-1 of ANA.; in extent, the type of crop MS without any dilution causes the highest growth of plantules, whereas the addition of ANA prompts increase in number and decrease of plantules root size and the organic compound favors increase and development of pineapple plantules produced in vitro during the acclimatizing phase. / Mundialmente o Brasil se encontra entre os três maiores produtores de abacaxi e o Estado da Paraíba é reconhecido com primeiro produtor. A área cultivada tem aumentado pouco devido à pequena oferta de mudas de boa qualidade. Este trabalho teve por objetivo desenvolver um protocolo de micropropagação para a cv. EMEPA 1 selecionada especialmente para o Estado da Paraíba. Utilizaram-se gemas axilares da cv. EMEPA 1, que foram desinfestadas e inoculadas em meio MS sólido, com pH de 5,8. A incubação foi em sala de crescimento com temperatura de 25 ± 5 ºC e fotoperíodo de 16 horas luz, a uma intensidade luminosa de 30 `mol.m- 2.s-1, exceto na fase de estiolamento, que foi em B.O.D. na ausência de luz com temperatura de 28 ± 1 ºC. O protocolo de micropropagação para a cv. EMEPA 1 foi desenvolvido de acordo com a literatura existente e contempla as fases: tratamento e isolamento dos explantes (TI); estabelecimento de explantes (EE); estiolamento (ES); regeneração (RE); multiplicação (MU); alongamento (AL); enraizamento (EN) e aclimatação (AC). Em todas as fases se empregou o delineamento inteiramente casualizado (DIC), conforme a seguir: TI – DIC com arranjo fatorial 4 x 4 (4 concentrações de hipoclorito de sódio x 4 tempos de exposição ao hipoclorito de sódio), com 10 repetições contendo 1 explante por frasco; EE – DIC com 6 tratamentos, composto de 10 repetições contendo 1 explante por frasco; ES – DIC com 4 tratamentos, composto de 10 repetições contendo 1 plântula desfolhada por tubo de ensaio; RE – DIC com 4 tratamentos, composto de 10 repetições contendo 1 broto estiolado por placa de Petri; MU – DIC com 8 tratamentos, composto de 10 repetições contendo 1 explante por frasco; AL – DIC com 4 tratamentos, composto de 10 repetições contendo 1 plântula por frasco; EN – DIC com 4 tratamentos, composto de 10 repetições contendo 1 plântula por frasco e AC – DIC com 11 tratamentos, composto de 4 repetições contendo 5 plantas cada. Concluiu-se que a concentração de 2% de hipoclorito de sódio por 10 minutos, promove a desinfestação das gemas e o estabelecimento pode ser em meio de cultivo sem reguladores de crescimento, o estiolamento pode ser realizado em meio MS com 1,86 mg.L-1 de ANA e a regeneração em meio MS com 1,8 mg.L-1 de ANA + 2,0 mg.L-1 de BAP. Para a multiplicação o meio de cultivo indicado é o MS suplementado com 2,0 mg.L-1 de BAP + 0,5 mg.L-1 de ANA; no alongamento o meio de cultura MS sem diluição proporciona o maior crescimento das plântulas, enquanto a adição do ANA promove o aumento no número e a diminuição do tamanho das raízes das plântulas e o composto orgânico favorece o crescimento e o desenvolvimento de plântulas de abacaxizeiro, produzidas in vitro, na fase de aclimatação.
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Caracteriza??o fenot?pica de plantas transg?nicas de tomateiro expressando a prote?na reprimida por auxina (SIARP)

Estevam, Renata Kaline Souza 27 May 2016 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-01-27T13:32:41Z No. of bitstreams: 1 RenataKalineSouzaEstevam_TESE.pdf: 2591439 bytes, checksum: 8a5092689ed7b6122d0702466b33f854 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-01-31T13:43:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RenataKalineSouzaEstevam_TESE.pdf: 2591439 bytes, checksum: 8a5092689ed7b6122d0702466b33f854 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-31T13:43:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RenataKalineSouzaEstevam_TESE.pdf: 2591439 bytes, checksum: 8a5092689ed7b6122d0702466b33f854 (MD5) Previous issue date: 2016-05-27 / A flora??o ? um processo vital durante o ciclo de vida das plantas e ? marcado pela convers?o do meristema apical vegetativo em reprodutivo devido a intera??es de fatores internos e externos ? planta. Apesar de amplo conhecimento ter sido gerado nessa ?rea, ainda se conhece muito pouco sobre o processo de flora??o e frutifica??o em tomateiro. Pesquisas anteriores realizadas pelo nosso grupo identificaram o cDNA hom?logo a Prote?na Reprimida por Auxina (ARP) em bibliotecas subtrativas reprodutivas de tomateiro. Existem poucos dados sobre a prote?na ARP na literatura, h? relatos de que o gene ARP est? relacionado com a matura??o do fruto em morango, dorm?ncia da gema lateral em ervilha e matura??o do p?len em tabaco, mas a fun??o da prote?na ARP ainda n?o est? clara. Portanto, o intuito deste trabalho foi compreender o papel da prote?na ARP no desenvolvimento vegetativo e nos processos de flora??o e frutifica??o por meio da perda e/ou do ganho de fun??o deste cDNA em plantas transg?nicas de tomateiro contendo o cassete de superexpress?o em orienta??o senso e antissenso para este cDNA. Dessa forma, foram observadas algumas altera??es fenot?picas e estruturais nas plantas transg?nicas (35S::SlARP antissenso e senso), como flora??o e frutifica??o precoce verificada nas plantas 35S::SlARP antissenso nas gera??es T1 a T4, em rela??o ?s controles (transformada com o plasm?deo vazio e n?o transformada). Na an?lise histol?gica, notaram-se ?vulos maduros nas flores das plantas 35S::SlARP antissenso (gera??es T2 a T4), enquanto que as flores das controles n?o apresentaram ?vulos maduros no mesmo per?odo de tempo. Outra modifica??o observada foi o n?mero superior de gemas laterais desenvolvidas nas plantas 35S::SlARP antissenso nas gera??es T3 e T4 quando comparado ?s plantas 35S::SlARP senso e ?s plantas controles (transformada com o plasm?deo vazio e n?o transformada) . Essas produziram ramos com folhas, flores e frutos. Assim como altera??es estruturais nos pec?olos das plantas 35S::SlARP antissenso, incluindo uma aparente quantidade maior de elementos de vaso (xilema e floema) do que os pec?olos as plantas 35S::SlARP senso e mutantes relacionados ? sinaliza??o da auxina (dgt e entire) e plantas controles. Portanto, estes dados sugerem que a prote?na ARP possa estar envolvida na flora??o, frutifica??o e na dorm?ncia das gemas axilares em tomateiro. / Flowering is a vital process during the plant life cycle and it is characterized by the conversion from the vegetative apical meristem into reproductive meristem due to internal and external factors. Despite the considerable knowledge has been produced in this field, not much is known about the flowering and fruiting process in tomato. Furthermore, previous research from our group has identified a cDNA with homology to AUXIN REPRESSED PROTEIN (ARP) in reproductive subtractive libraries from tomato. In the literature, there are few reports where the ARP gene has been associated to fruit ripening in strawberry, dormancy in pea and pollen maturation in tobacco plants, but it is not clear the ARP protein function yet. Therefore, the aim of this work was to understand the role of ARP protein in vegetative development, flowering and fruit set processes through the loss and/or gain of function using this cDNA in transgenic tomato plants with the overexpression cassette constructs in sense and antisense cDNA orientation. Thus, it was observed some phenotypic and structural modifications in transgenic plants (35S::SlARP antisense and sense) such as early flowering and fruiting that was observed in 35S::SlARP antisense plants from the T1 to T4 progeny when compared to controls plants (with the empty vector and wild type plant). In the histological analysis, it was observed mature ovule in 35S::SlARP antisense flowers (progeny T2 to T4), while for the controls plant it wasn?t observed a mature ovule at the same period of time. The other modification observed was a higher number of lateral buds developed in 35S::SlARP antisense plants (progeny T3 and T4) when compared to 35S::SlARP sense and controls plants. These plants produced branches with leaves, flowers and fruits. Besides, it has been observed some structural changes in the petioles from 35S::SlARP antisense plants, including a high number of vessel elements (xylem and phloem) when compared to 35S::SlARP sense, and to dgt and entire mutants (related to auxin signaling) and controls plants (with empty vector and wild type plant). Therefore, these data suggest that ARP protein may be involved in flowering, fruit set and dormancy of axillary buds in tomato.

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