Made available in DSpace on 2014-12-17T15:36:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 NelsonAML.pdf: 877661 bytes, checksum: 9f0e44b26c1eea9bd528ee3676051107 (MD5) Previous issue date: 2008-04-17 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / In the behavioral paradigm of discriminative avoidance task, both short and long-term memories have been extensively investigated with behavioral and pharmacological approaches. The aim of the present study was to evaluate, using the abovementioned model, the hippocampal expression of zif-268 - a calcium-dependent immediate early gene involved with synaptic plasticity process - throughout several steps of memory formation, such as acquisition, evocation and extiction. The behavioral apparatus consisted of a modified elevaated plus-maze, with their enclosed arms disposed in "L". A pre-exposure to the maze was made with the animal using all arms enclosed, for 30 minutes, followed by training and test, during 10 minutes each. The between sections interval was 24h. During training, aversive stimuli (bright light and loud noise) were actived whenever the animals entered one of the enclosed armas (aversive arm). Memory acquisiton, retention and extinction were evaluated by the percentage of the total time spent exploring the aversive arm. The parameters evaluated (time spent in the arms and total distance traveled) were estimated with an animal tracking software (Anymaze, Stoelting, USA). Learning during training was estimated by the decrease of the time spent exploring the aversive arm. One hour after the beginning of each section, animals were anaesthetized with sodium-thiopental (i.p.) and perfused with 0.9% heparinized saline solution followed by 4% paraformaldehyde. Brains were cryoprotected with 20% sucrose, separeted in three blocks and frozen. The middle block, containing the hippocampus, was sectioned at 20 micro meters in the coronal plane and the resutant sections were submitted to zif-268 immunohistochemistry. Our results show an increased expression of zif-268 in the dentate gyrus (DG) during the evocation and extinction stages. There is a distinct participation of the DG during the memory evocation, but not during its acquisition. Inaddition, all hippocampal regions (CA1, CA3 and DG) presented an increased zif-268 expression during the process of extinction. / No paradigma comportamental da esquiva discriminativa, as mem?rias de curto e de longo prazo t?m sido extensivamente estudadas tanto comportamental quanto farmacologicamente. O objetivo do presente estudo foi avaliar, usando o modelo supracitado, a express?o hipocampal de zif-268 - gene imediato dependente de c?lcio implicado em processos de plasticidade sin?ptica - ao longo das diversas etapas da forma??o da mem?ria, como aquisi??o, evoca??o e extin??o. O aparato comportamental consistiu de um labirinto em crum elevado modificado, com seus bra?os fechados dispostos em "L". Uma pr?-exposi??o ao labirinto foi feita com os animais usando os quatro bra?os fechados, com dura??o de 30 minutos, seguida de um treino e de um teste, cada qual com dura??o de 10 minutos. O intervalo entre as sess?es foi de 24 horas. Durante o treino, um est?mulo aversivo (luz e ru?do intensos) era acionado sempre que os animais entravam em um dos bra?os fechados (bra?o aversivo). A aquisi??o, reten??o e extin??o da mem?ria foram avaliados pelo percentual de tempo total gasto explorando o bra?o aversivo. Os par?metros avaliados (tempo nos bra?os e dist?ncia percorrida) foram registrados por um software de rastreamento de animais (Anymaze, Stoelting, USA). O aprendizado durante o treino foi estimado pelo decr?scimo do tempo gasto explorando o bra?o aversivo. Uma hora ap?s o in?cio de cada sess?o, os animais foram anestesiados com uma overdose de tiopental s?dico (i.p.) e perfundidos com solu??o salina heparinizada 0.9% seguida de paraformalde?do a 4%. Os enc?falos foram crioprotegidos com solu??o de sacorose a 20%, separados em tr?s blocos e congelados. O bloco do meio, contendo o hipocampo, foi seccionado a 20 micro metros no plano coronal e as sec??es resultantes foram ent?o submetidas ? imunohistoqu?mica para zif-268. Nossos resultados evidenciam um aumento da express?o de zif-268 no giro denteado (GD) durante asetapas de evoca??o e extins?o. H? uma participa??o distinta no GD durante a evoca??o e extin??o da mem?ria, mas n?o durante a aquisi??o. Al?m disso, todas as ?reas hipocampais (CA1, CA3 e GD) apresentam uma eleva??o da express?o de zif-268 durante o processo de extin??o

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:36:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CristianoSS.pdf: 703357 bytes, checksum: 61a9f2f7ebf9d69474aa37bec7180627 (MD5) Previous issue date: 2008-04-23 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Immediate-early genes (IEGs) expression has been widely used as a valuable tool to investigate brain areas activated by specific stimuli. Studies of natural vocalizations, specially in songbirds, have largely benefited from this tool. Here we used IEGs expression to investigate brain areas activated by the hearing of conspecific common marmoset (Callithrix jacchus) vocalizations and/or utterance of antiphonal vocalizations. Nine adult male common marmosets were housed in sound-attenuating cages. Six animals were stimulated with playbacks of freely recorded natural long distance vocalizations (phee calls and twitters; 45 min. total duration). Three of them vocalized in response (O/V group) and three did not (O/n group). The control group (C) was composed by the remaining animals, which neither heard the playbacks nor spontaneously vocalized. After one hour of the stimulation onset (or no stimulation, in the case of the C group), animals were perfused with 0,9% phosphate-saline buffer and 4% paraformaldehyde. The tissue was coronally sectioned at 20 micro meter in a cryostat and submitted to immunohistochemistry for the IEGs egr-1 and c-fos. Marked immunoreactivity was observed in the auditory cortex of O/V and O/n subjects and in the anterior cingulate cortex, the dorsomedial prefrontal cortex and the ventrolateral prefrontal cortex of O/V subjects. In this study, brain areas activated by vocalizations of common marmosets were investigated using IEGs expression for the first time. Our results with the egr-1 gene indicate that potential plastic phenomena occur in areas related to hearing and uttering conspecific vocalizations. / A express?o de genes imediatos tem sido largamente utilizada na investiga??o de ?reas cerebrais ativadas por est?mulos espec?ficos. Estudos de comunica??o vocal, especialmente em aves canoras, t?m se beneficiado enormemente dessa ferramente. Neste trabalho, utilizamos a express?o de genes imediatos para identificar as ?reas corticiais ativadas pela audi??o e express?o de vocaliza??es co-espec?ficas de sag?is comuns (Callithrix jacchus). Nove sag?is comuns machos adultos foram mantidos em caixas de atenua??o ac?stica. Seis animais foram expostos a playbacks de vocaliza??es co-espec?ficas naturais (phee calls e twitters; total de 45 minutos). Tr?s deles vocalizaram em resposta, compondo o grupo que "ouviu e vocalizou" (O/V), e tr?s permaneceram em sil?ncio (grupo O/n). O grupo controle (C) foi composto pelos tr?s animais restantes, que n?o foram expostos ao est?mulo e nem vocalizaram espontaneamente. Depois de uma hora do in?cio do est?mulo, (ou nenhum est?mulo, no caso do grupo C), os animais foram perfundidos com solu??o salina 0,9%, seguida de paraformalde?do 4%. Os c?rebros foram removidos e cortados coronalmente a 20 micro metros com o aux?lio de um criostato e submetidos a imunohistoqu?mica para os genes imediatos egr-1 and c-fos. Maior imunorreatividade foi observada no c?rtex auditivo prim?rio dos animais dos grupos O/V e O/n e no c?rtex cingulado anterior, c?rtex pr?-frontal dorso-medial e c?rtex pr?-frontal ventro-lateral dos animais do grupo O/V. Este trabalho foi o primeiro a utilizar a express?o de genes imediatos no estudo das ?reas corticais envolvidas na comunica??o de sag?is comuns. Nossos resultados, especialmente em rela??o ao gene egr-1, indicam que eventos potencialmente pl?sticos ocorrem nas ?reas relacionadas ? audi??o e emiss?o de vocaliza??es co-espec?ficas.Express?o de genes imediatos induzidos por vocaliza??es em sag?is-comuns (Callithrix jacchus)