Bibliography: leaves 183-228 / x, 228 leaves, [8] leaves of plates : ill. (1 col.) ; 30 cm. / Title page, contents and abstract only. The complete thesis in print form is available from the University Library. / Thesis (Ph.D.)--University of Adelaide, Dept. of Microbiology and Immunology, 1989

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karolinska institutet, 2006. / Härtill 4 uppsatser.

Thesis (Ph. D.)--University of Texas at El Paso, 2009. / Title from title screen. Vita. CD-ROM. Includes bibliographical references. Also available online.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-03-23Bitstream added on 2014-06-13T20:00:43Z : No. of bitstreams: 1 tashima_nt_dr_arafcf.pdf: 1639832 bytes, checksum: 4ebbfa8c2c4802ba76fbdfe822f9a1f3 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O estudo epidemiológico da giardíase empregando técnicas moleculares, como o RAPD (Randomly Amplified Polimorphic DNA), fornece subsídio para identificação dos fatores de transmissão da G. lamblia. Este trabalho teve como objetivo estudar a epidemiologia da G. lamblia em uma creche infantil de Presidente Bernardes, SP, Brasil, no ano de 2006, por meio de um inquérito epidemiológico e tipagem molecular das cepas isoladas empregando a técnica de RAPD. A análise dos perfis genéticos obtidos foi realizada com auxílio de um dendrograma de similaridade obtido pelo programa Gel Compar II versão 2.0 para Windows (Applied MATHS). Foram realizados exames parasitológicos de fezes de 101 crianças freqüentadoras da creche infantil. A partir desses exames, 15 amostras que apresentavam cistos de G. lamblia foram purificadas para posterior extração do DNA. Os pais e irmãos das 15 crianças parasitadas, assim como os cães de estimação e também dos funcionários da creche tiveram suas fezes coletadas para posterior exame parasitológico. Das mesmas extraíram-se DNA das amostras que apresentavam cistos de G. lamblia. Entre as 31 amostras positivas para G. lamblia obtida entre as crianças e seus respectivos pais e irmãos, concluiu-se que a transmissão do parasita ocorreu entre as crianças provavelmente no convívio da creche, mas não no convívio familiar. / Epidemiological studies on giardiasis by using molecular techniques such as RAPD (Randomly Amplified Polymorphic DNA) give information on factors related to the transmission of G. lamblia. The aim of this work was to assess the G. lamblia epidemiology in a day care center in Presidente Bernardes, SP, Brazil, in 2006, by means of an epidemiological inquiry and molecular typing of the isolated strains by using the RAPD technique. The genetic profiles were analyzed by means of a dendrogram of similarity obtained with the software Gel Compar II v. 2.0 for Windows (Applied MATHS). Parasitological examinations were made on feces samples taken from 101 children attended in the day care center. After examinations, 15 samples that presented G. lamblia cysts were purified for further DNA extraction. The respective relatives and brothers of the 15 children, in addition to their pets and the day care center s workers had their feces collected for further parasitological examination. Samples in which G. lamblia cysts were found were also submitted to DNA extraction. Among the 31 samples positive for G. lamblia obtained from the children and their respective parents and brothers, it was concluded that the transmission of the parasite occurred between children probably during the cohabitation in the day care center, but not inside the family.

Made available in DSpace on 2015-11-18T13:18:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 andres_quesne_ioc_mest_2014.pdf: 2284982 bytes, checksum: 60f23c8536661b9357f727cee49ed7ee (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-04-14 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Giardia intestinalis (G. intestinalis) é o parasita gastrointestinal mais comum que coloniza o trato intestinal humano onde permanece extracelular e aderido às células intestinais. O parasita tem uma distribuição mundial, causando um número estimado de 2.8x108 casos por ano e recentemente a doença foi incluída como parte da Iniciativa das Doenças Negligenciadas da Organização Mundial de Saúde. As manifestações clínicas da giardíase são variáveis, e vão desde a ausência de sintomas até diarreias agudas ou crônicas. Adicionalmente, estudos recentes indicam que distúrbios gastrintestinais funcionais, tais como a síndrome do intestino irritável, e o déficit de crescimento em crianças podem ser associados com a infecção por G. intestinalis. Apesar da alta prevalência e das consequências desta doença, os mecanismos fisiopatológicos subjacentes na giardíase ainda permanecem incompreendidos. Os trofozoítos causam a doença sem penetrar no epitélio intestinal, nem entrar na corrente sanguínea e sem secretar nenhuma toxina conhecida. Nos últimos anos, tem sido descrito que as vesículas extracelulares podem participar na interação parasita-célula hospedeira. As vesículas extracelulares podem ser: microvesículas (MVs) e derivadas da membrana plasmática; exosomos, pequenas vesículas originadas a partir de membranas de endossomos; e corpos apoptóticos contendo material do núcleo celular. As MVs têm sido mostradas como importantes fatores na interação parasita-célula hospedeira No presente trabalho, foi utilizada uma combinação de metodologias, incluindo citometria de fluxo, microscopia de fluorescência, proliferação celular, análises de proteoma e ensaios de aderência celular para investigar o papel das microvesículas liberadas por trofozoítos de G. intestinalis nas propriedades patogênicas deste parasita. Demonstramos que G. intestinalis produz e secreta microvesículas com exposição superficial de fosfatidilserina. Além disso, o processo de liberação de MVs é dependente do tempo e da concentração de cálcio, envolve microdomínios de membrana e as microvesículas contêm RNA de baixo peso molecular. Observamos também que os microdomínios de membrana estão envolvidos na adesão do parasita à células Caco-2. Nossa análise proteômica preliminar sugere presença de componentes do citoesqueleto, alfa giardinas, enzimas metabólicas e proteínas variáveis de xi superfície (VSP) nas MVs isoladas de G. intestinalis. Foi demonstrado também que as MVs de G. intestinalis interagem com as células do hospedeiro aumentando a proliferação destas e incrementado também o número de trofozóitos aderidas à estas células. O presente estudo é o primeiro a sugerir um papel potencial para as microvesículas de G. intestinalis na colonização do hospedeiro. Uma melhor compreensão do papel das MVs liberadas pelo parasita na interação com a célula hospedeira poderá fornecer novas perspectivas sobre patogênese e possivelmente novas ferramentas para o diagnóstico e a terapia da doença / Giardia intestinalis ( G. intestinalis ) is the most common gastrointestinal parasite that colonizes the human intestinal tract where it remains extracellular and adheres to intestinal cells . The parasite has a global distribution causing an estimated 2.8x10 8 cases per year and the illness was recently included in the World Health Organization Neglected Disease Initiative . Clinical manifestations of giardiasis are quite variable, and range from the absence of symptoms to acute or chronic diarrhea. Aditionally, r ecent studies indicate that functional gastrointestinal disorders , such as irritable bowel syndrome , and failure of children to thrive can be associated with G. intestinalis infection . Even though the high prevalence and consequences of this disease , pathophysiological mechanisms underlying symptomatic giardiasis remain incompletely understood . Trophozoites cause disease without penetrating the intestinal epithelium , entering the bloodstream or secreting toxin s . In recent years it has been described that extracellular ves icles could participate in parasite - host cell interaction. The extracellular vesicles ma y be: microvesicles (MVs) and derived f rom the plasma membrane; exosome s, small vesicles originated from endosomal limiting membrane ; and apoptotic bodies containing nuclear material. MVs have been shown to be important factors in the parasite - host cell in teraction. Here, we used a combination of methodologies including flow cytometry, fl u orescence microscopy, cell proliferation, proteomics analysis and cell adherence assays to investigate the role of released microvesicles from G. intestinalis trophozoites on the pathogenic properties of this parasite . We have found that G. intestinalis produces and secretes microvesicles with superficial exposition of phosphatidilserine. Additionally , the shedding process was calcium and time - dependent , involve s membrane microdomains and the microvesicles contain low - molecular weight RNA . We also observed that membrane microdomains are involved in parasite attachment to Caco - 2 cells. Our preliminary proteomic analysi s suggested the presence of cytoskeleton components, alpha giardins, metabolic enzymes and variant - specific surface protein ( VSP ) in the isolated MVs from G. intestinalis. We demonstrate that G. intestinalis microvesicles interact with host cells xiii increasing their prolifer ation and augment ing the number of trophozoites adhered t o these cells . The present study is the first to suggest a potential role for G. intestinalis microvesicles in host cell colonization. A better understanding of the role of the released microvesicles by the parasite on the host - cell interaction will provide insights into pathogenesis and possibly new tools for diagnosis and therapy

Se determina la prevalencia de Giardia spp. en ratas urbanas “Rattus rattus” y “Rattus norvegicus” capturadas en un zoológico de Lima Metropolitana, además , se evaluó la asociación del parasito con las variables especie, sexo y edad de estos roedores. Se atraparon 127 roedores (Rattus spp.), usando trampas especiales (tipo“Tomahawk”). Se siguió un estricto control de bioseguridad para la manipulación y recolección de muestras de estos animales, sirviendo de referencia los protocolos proporcionados por el “Centro de Enfermedades Infecciosas y Prevención de Atlanta (CDC)”. Los datos que se tomaron en cuenta para este estudio fueron especie, sexo y edad de los roedores, y las muestras recolectadas provinieron del recto. La conservación se hizo utilizando formol al 10% y posteriormente fueron procesadas en el Laboratorio de Parasitología de la FMV-UNMSM. La técnica empleada para determinar la presencia de Giardia spp. fue la de Ritchie modificado, siendo muestra positiva aquella en que se hallara la presencia de quiste o trofozoito de Giardia spp. Como resultado se halló una prevalencia de Giardia spp. de 5.5 ± 0.04% (7/127); y se hayo una prevalencia del 2.1% del genero Rattus rattus (1/48) y 7.6% en Rattus norvergicus (6/79). Mediante la prueba de Chi cuadrado se encontró que No existe asociación con una significancia de “(p > 0,05)” entre la presencia de Giardia spp. y las variables especie, sexo y edad, por lo que la prevalencia de Giardia spp. en ratas urbanas en el presente estudio, es baja. Sin embargo, es de consideración tomar en cuenta la posibilidad de transmisión de enfermedades parasitarias de este animal a una población vulnerable como son niños y ancianos, trabajadores y animales del zoológico. / Tesis

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Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-04-12T14:55:01Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE ANA LUCIA.pdf: 1458077 bytes, checksum: cbbeca0fd53136913a74cf4a72f10bf8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-12T14:55:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE ANA LUCIA.pdf: 1458077 bytes, checksum: cbbeca0fd53136913a74cf4a72f10bf8 (MD5) Previous issue date: 2015-07-22 / CNPq / A resposta imune contra Giardia lamblia e as alergias, em área endêmica para infecções por helmintos e este protozoário. tem sido estudada. IgE e isotipos IgG anti-Ascaris lumbricoides (Asc) podem modular a atopia e a alergia. Neste estudo, avalia-se a presença de anticorpos IgE ,IgG1, IgG4 anti Asc e a produção de citocinas Th1 (IL-2/IFN-γ/TNF-α), Th2 (IL-4/IL-10), Th17 (IL-17/IL-6) em crianças infectadas por G.lamblia, sem infecção concomitante por helmintos, bem como a frequência de asma e/ou rinite. Para isso, um estudo caso-controle aninhado em um estudo transversal utilizando questionário padrão para a alergia de vias aéreas, análises coproparasitológicas. Realizou-se testes imunoenzimáticos para detecção de anticorpos anti-Asc e cultura de células de sangue para mensuração dos níveis de citocinas em sobrenadante e intracelular. A amostra foi composta por 211 crianças: 53 infectadas / asma/rinite (GA); 39 não infectadas/asma/rinite (A); 62 infectadas / não / asma / rinite (G); 57 não asma/rinite/não infectadas (NA+NG), com idades entre 2-10 anos. Infecção por G.lamblia foi acompanhado pelo aumento dos níveis de IgG1, mas não IgE ou IgG4.anti Asc. A produção de IL-6 foi semelhante entre os grupos, mas a produção de IL-2, IL-4 e IFN- foi maior em crianças infectadas. TNF-α foi produzido em níveis mais elevados em crianças alérgicas, enquanto que a IL-10 esteve em níveis elevados em crianças infectadas/asma/rinite. Em crianças infectadas com IgG1 anti-Asc positivo houve maior produção do TNF-α e IL-10 e menor frequência de alergia quando comparou com IgG1 anti-Asc negativo (OR = 0,392; IC = ,168-,914; p = 0,02). Para análise do coteúdo de citocinas intracelular, foi observada menor frequência de células CD4+/IFN-+ e CD4+/IL-17+ no grupo GA, quando comparado com o grupo NG+NA. Não houve diferença na frequência de células CD4+/IL-4+ entre os grupos. A frequência de células CD4+/IL-17+ foi inferior em crianças somente infectadas (G). Em conjunto, um perfil Th1/Th2 foi estimulado nos pacientes infectados, com IgG1 anti-Asc circulante e houve maior produção de IL-10 e TNF-α com frequência de alergia vias aéreas mais baixa. Além disso, estes achados apontam um perfil predominante de Th2 (IL-4 acompanhada de menor nível de IFN-) com baixo potencial inflamatório (menos IL-17) em crianças infectadas por G. lamblia com asma e/ou rinite. Estes resultados destacam a importância de uma melhor avaliação dos subtipos de IgG em A. lumbricoides e G. lamblia em áreas endêmicas, especialmente no que diz respeito à estratégia de prevenção ou dessensibilização para reações alérgicas. / Immunity to Giardia lamblia and allergies in endemic area for helminths/protozoa infections had been studied. Anti-Ascaris lumbirocides (Asc) IgE and IgG isotypes can modulate the atopic and allergy. In this study, we evaluate the presence of anti-Asc IgE, IgG4, IgG1 antibodies and Th1 (IL-2/IFN-γ/TNF-α), Th2 (IL-4/IL-10), Th17 (IL-17/IL-6) cytokine production in G. lamblia-infected children, without concomitant helminths infection, as well as asthma and/or rhinitis frequency. For this, a case-control nested in a cross-sectional study was conducted using standard questionnaire for airway allergy, parasitological analyses, immunoassay tests for anti-Asc antibodies and blood cell culture for cytokines measurement in supernatant and intracellular. The sample comprised 211 children (53 allergic/infected (GA); 39 allergic/uninfected (A); 62 non-allergic/infected (G); 57 non-allergic/non-infected (NA+NG) aged 2-10 years. Protozoan infection was accompanied by increased of anti-Asc IgG1 levels, but not IgE or IgG4. There were similar IL-6 production, but IL-2, IL-4 and IFN- were higher in infected children. TNF-α was produced in higher levels for allergic children, whereas the IL-10 was high levels in allergic/infected children. For positive anti-Asc IgG1 and allergic/infected children, higher TNF-α and IL-10 production and lower allergy frequency was observed when compared to negative anti-Asc IgG1 (OR=0.392; IC=0.168-0.914; p=0.02). For intracellur cytokine content, was observed lower frequency of IFN-+CD4+ and IL-17+CD4+ cells in the GA group when compared to the NG+NA group. There was no difference in IL-4+CD4+ cells frequency among the groups. The IL-17+CD4+ cells frequency was lower in infected children only (G). Take together, the a Th1/Th2 profile was stimulated in the infected patients, which with circulating anti-Asc IgG1 the production of IL-10 and TNF-α was strengthened and there was lower frequency airway allergy. Besides of this, the finding point out a predominant Th2 profile (IL-4 accompanied of less IFN-) with low inflammatory potential (less IL-17) in G. lamblia infected children with asthma and/or rhinitis. These findings highlight the importance of improved evaluation of IgG subtypes in A. lumbricoides and G. lamblia endemic areas, especially with regard to the prevention strategy or desensitization for allergic reactions.

Call number: LD2668 .T4 1985 S78 / Master of Science

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